一、A NOVEL METAL CHELATE AFFINITY ADSORBENT FOR PROTEIN UPTAKE(論文文獻綜述)
侯恒磊[1](2021)在《基于大孔聚合物金屬螯合層析介質(zhì)的制備與評價研究》文中指出本課題通過一種簡便的氧化還原接枝法開發(fā)了一種高鎳含量的聚合物層析介質(zhì)。以大孔聚丙烯酸酯類微球為基質(zhì),亞氨基二乙酸改性的甲基丙烯酸縮水甘油酯作為功能單體(GMA-IDA),通過Ce4+引發(fā)其在微球表面及孔道內(nèi)部進行接枝共聚。以單體接枝量為性能指標,分別對Ce4+接枝共聚反應(yīng)體系的影響因素進行系統(tǒng)考察,發(fā)現(xiàn)隨著GMA-IDA濃度(0.075-0.4 mol/L)、Ce4+濃度(0.0075-0.025 mol/L)、H+濃度(0.2-0.4 mol/L)、反應(yīng)溫度(30-60℃)的增加,單體接枝量均呈現(xiàn)先增長后減小的趨勢。當GMA-IDA濃度超過0.32 mol/L時,接枝聚合反應(yīng)體系中均聚反應(yīng)增加,使得微球表面單體接枝量減少;當Ce4+濃度超過0.32 mol/L時,過多的Ce4+會造成終止反應(yīng)速率增加,使得微球表面單體接枝量減少;當H+濃度超過0.3 mol/L時,會抑制Ce4+引發(fā)自由基活性位點的產(chǎn)生;當反應(yīng)溫度超過45℃后,使得自由基終止反應(yīng)速率大于引發(fā)速率,不利于單體在微球表面的接枝共聚。當反應(yīng)時間超過4.5 h后,單體基本消耗完畢,單體接枝量基本保持不變。最終確定最佳制備條件為2 g聚丙烯酸酯類微球,改性單體GMA-IDA濃度0.32 mol/L,Ce4+濃度0.0225 mol/L,H+濃度0.3 mol/L,反應(yīng)溫度45℃,反應(yīng)時間5 h?;诖酥苽浞椒ㄋ面囼蠈游鼋橘|(zhì)的螯合配基量可達0.20 mmol/m L,鎳含量可達180μmol/m L。采用紅外光譜和電子掃描顯微鏡對微球官能團和表面形貌進行表征。以牛血紅蛋白作為模型蛋白,測得PGMA-IDA-Ni(接枝GMA-IDA單體且螯合Ni2+的大孔聚丙烯酸酯類微球)介質(zhì)的靜態(tài)載量122.5 mg/m L。對PGMA-IDA-Ni介質(zhì)進行色譜性能表征,流速為1 m L/min時,對牛血紅蛋白(1 mg/m L)的動態(tài)載量(10%流穿)為17 mg/m L,性能優(yōu)于商品IDA型聚合物層析介質(zhì)(12 mg/m L)。同時考察了螯合不同金屬離子(Cu2+、Zn2+、Co2+)PGMA-IDA微球的蛋白載量,結(jié)果表明螯合銅離子的介質(zhì)蛋白載量最高,靜態(tài)載量為174.4 mg/m L,動態(tài)載量為24.5 mg/ml。以金屬螯合層析介質(zhì)常用流動相磷酸緩沖液洗脫PGMA-IDA-Ni介質(zhì),洗脫100個柱體積后,其鎳含量僅下降2.3%。經(jīng)十次循環(huán)再生測試,介質(zhì)鎳含量基本保持不變,表明此介質(zhì)可以反復(fù)多次使用。此外,對四齒配基乙二胺二乙酸和五齒配基亞氨基琥珀酸進行甲基丙烯酸縮水甘油酯改性,在大孔聚丙烯酸酯類微球表面采用Ce4+引發(fā)接枝四齒、五齒類改性單體,通過紅外光譜和掃描電子顯微鏡對接枝四齒和五齒改性單體微球進行化學官能團、表面形貌表征,對Ce4+接枝多齒改性單體進行了初步探索。選用不同GMA-IDA單體接枝量的PGMA-IDA-Ni介質(zhì)對大腸桿菌表達的六聚組氨酸標簽重組麥芽糖結(jié)合蛋白和六聚組氨酸標簽SL11蛋白進行純化,結(jié)果表明無論從蛋白回收率還是純化樣品的純度均優(yōu)于同類商品介質(zhì)。
佟育奎[2](2021)在《配位親和固相萃取吸附劑的制備及對生物活性成分的分析》文中指出樣品前處理技術(shù)是在測定復(fù)雜樣品過程中的一個關(guān)鍵技術(shù),即在分析、檢測前對目標化合物進行預(yù)處理,使目標化合物從復(fù)雜樣品中分離,減少復(fù)雜基質(zhì)對目標化合物的影響。固相萃取技術(shù)因其具有較高的回收率和富集倍數(shù)、有機溶劑消耗量少、操作便捷等優(yōu)點,已經(jīng)成為最常用的樣品前處理方法之一。不同類型的化合物根據(jù)其自身結(jié)構(gòu)不同可以有針對性的選擇不同類型的固相萃取吸附劑,在目標物質(zhì)與吸附劑之間通過一些特定的相互作用(例如:氫鍵作用、正負電荷吸引、化學鍵合等)將二者結(jié)合,使得目標物質(zhì)從原有的基質(zhì)中脫離出來;再選擇合適的解吸溶液,將目標物質(zhì)從吸附劑上解吸出來。配位親和作用是一種基于結(jié)構(gòu)互補的共價作用,通過目標物質(zhì)與固相萃取吸附劑上的親和配體之間的相互作用,可將目標物質(zhì)準確、快速的分離。本論文將基于配位親和作用,制備一系列識別性能好、穩(wěn)定性高、吸附時間短的固相萃取吸附劑,并用于復(fù)雜樣品中生物活性成分的檢測,以實現(xiàn)簡便、快捷、高效的分析復(fù)雜樣品的目的。具體的研究內(nèi)容包括以下三部分:1.制備了一種L-賴氨酸親和的中空固相萃取吸附劑。該吸附劑具有穩(wěn)定的中空結(jié)構(gòu),由于引入了聚多巴胺涂層,使得吸附劑具有良好的親水性和生物相容性。將制備的吸附劑與固相萃取-高效液相色譜法結(jié)合,用于分析動物肝臟中膽紅素的含量。通過透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、激光粒度分析儀測定吸附劑的形貌和粒徑大小,通過傅里葉變換紅外光譜儀、差熱重分析儀、X射線光電子能譜對吸附劑的特征結(jié)構(gòu)、熱穩(wěn)定性和元素含量進行了分析,同時對固相萃取的條件和吸附劑的選擇性進行了優(yōu)化和探討。在最佳的實驗條件下,吸附劑的最大吸附量為12.00 mg g-1,吸附時間為27 min,該方法對膽紅素的檢出限為0.067 g m L-1,相對標準偏差為7.3%。實驗結(jié)果表明該方法可以從復(fù)雜基質(zhì)中選擇性的提取膽紅素。2.制備了一種沒食子酸親和分子印跡固相萃取吸附劑。由于沒食子酸的多羥基結(jié)構(gòu),可以大大增加吸附劑對順式二羥基類物質(zhì)的結(jié)合機會。分子印跡的引入可以較好的避免非特異性結(jié)合,提高吸附材料的選擇性。為了證明吸附劑的成功合成,對吸附劑進行了多種表征(例如:掃描電子顯微鏡、透射電子顯微鏡、激光粒度分析儀、傅里葉變換紅外光譜儀、比表面積分析儀、X射線光電子能譜等)。同時對吸附劑的合成過程、吸附實驗條件進行了優(yōu)化,并對吸附劑的選擇性進行了討論。本實驗結(jié)合固相萃取-高效液相色譜法對4種中藥材中木犀草素的含量進行測定,結(jié)果表明吸附劑的最大吸附容量為1.24 mg g-1,平衡吸附時間為30 min,該方法對木犀草素的檢出限為0.02 mg L-1,相對標準偏差小于1.63%。在實際樣品中可以準確快速的分離和吸附木犀草素,加標回收率在93.9–114.2%之間,該方法可以準確的用于復(fù)雜基質(zhì)中木犀草素的測定。3.制備一種大孔金屬氧化物基-硼酸雙親和分子印跡吸附劑。將3-氨基苯硼酸同時作為硼親和功能單體和印跡聚合單體,在過硫酸銨的氧化聚合下引入硼酸親和識別位點并形成印跡聚合層。雙重位點的引入使得吸附劑的制備過程更為便捷,改善了傳統(tǒng)的分子印跡吸附劑繁瑣的制備過程,同時對糖蛋白的親和能力相比傳統(tǒng)吸附劑也得到極大的增強。對吸附劑進行了系統(tǒng)的表征,通過掃描電子顯微鏡和透射電子顯微鏡對吸附劑進行了形貌分析,利用傅里葉變換紅外光譜儀、比表面積分析儀、差熱重分析儀、X射線單晶衍射儀、X射線光電子能譜等對吸附劑的結(jié)構(gòu)、比表面積、熱穩(wěn)定性、晶格結(jié)構(gòu)、元素含量等進行了相應(yīng)的分析。隨后對吸附劑的合成過程、吸附實驗條件、洗脫實驗條件進行了優(yōu)化和考察,并對材料的選擇性進行了討論。本實驗結(jié)合固相萃取-紫外可見分光光度法對雞蛋白中的卵清蛋白進行了測定,結(jié)果表明,相比于單一位點的分子印跡吸附劑,雙親和分子印跡吸附劑具有更高的吸附容量、更快的吸附速率和更好的選擇識別能力,在45 min內(nèi)對卵清蛋白的吸附達到平衡,材料的飽和吸附量為110.4 mg g-1。通過凝膠電泳對吸附劑吸附、洗脫后的蛋白進行定性分析,結(jié)果表明,該方法可以應(yīng)用于復(fù)雜樣品中卵清蛋白的選擇性分離。
李嘉元[3](2020)在《新型磁性親和納米復(fù)合物的制備及其在蛋白質(zhì)/多肽分離分析中的應(yīng)用》文中認為在生物體液或組織中,許多低豐度內(nèi)源性的蛋白/多肽是具有高度特異性和臨床靈敏性的生物標志物,這些生物分子對多種疾病的診斷及其病理的闡釋可能提供有價值的信息。而由于這些蛋白/肽段在生物體內(nèi)豐度低,基質(zhì)干擾大,難以直接通過質(zhì)譜檢測其水平。磁性納米材料因具有大比表面積、豐富的活性親和位點以及獨特的磁學特性,在低豐度蛋白/多肽的分離富集方面已經(jīng)引起了廣泛的關(guān)注,成為目前蛋白質(zhì)組學分離、富集和鑒定方面的研究熱點之一。本論文針對低豐度的多肽/磷酸化肽在質(zhì)譜分析中所面臨的化學計量低、離子化效率低及信號易受高豐度蛋白/多肽抑制等難點問題,開展了一系列的研究工作。通過設(shè)計和發(fā)展多種新型的磁性親和納米材料,選擇性地富集低豐度肽/磷酸化肽,建立了簡單、快速和高效的磁分離萃取過程,并以生物質(zhì)譜分析手段,將磁性親和納米探針應(yīng)用于實際生物樣品中低豐度蛋白/多肽的分離分析,取得了良好的效果。(1)簡述了生物質(zhì)譜技術(shù),著重介紹生物質(zhì)譜儀器的組成以及基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)的發(fā)展歷程、工作原理和基質(zhì)的選擇,以及蛋白質(zhì)組學/多肽組學的研究,并梳理了基于生物質(zhì)譜的低豐度肽/磷酸化肽的分離富集策略,歸納了近年來新型磁性親和納米探針在低豐度肽/磷酸化肽分離富集技術(shù)及方法中的應(yīng)用,最后,簡要地介紹了本論文的研究思路及其選題意義。(2)低豐度肽段對機生命體的生理狀態(tài)有著重要的指示作用,可作為臨床診斷的重要分析對象。我們首次將雙金屬有機骨架(MOF)為前驅(qū)體合成的磁性碳材料并應(yīng)用到低豐度肽分離分析的預(yù)處理技術(shù)中。以Co/Ni雙金屬為中心離子,2-甲基咪唑(2-MIM)為有機配體,優(yōu)化了反應(yīng)條件,在水溶液中溫和地反應(yīng)生成了具有兩種規(guī)則形貌的金屬有機骨架Co/Ni-ZIF前驅(qū)體,并通過高溫碳化,得到了磁性納米孔碳基材料Co/Ni-MCN,通過SEM、TEM、XRD、EDS和SQUID等技術(shù)來進行各種表征,成功應(yīng)用于低豐度肽的分離富集研究。(3)通過簡單的溶劑熱法將雙金屬Hf/Ti-MOF修飾到磁性Fe3O4表面,接著進一步后修飾將胍基鍵合到MOF親和位點上,開發(fā)了一種新型親水性的胍基功能化的磁性雙金屬骨架親和探針Fe3O4@Hf/Ti-MOF-Gua,用于高選擇性和高效地捕獲磷酸化肽。MOF層有含有豐富的的Hf4+/Ti4+金屬親和位點,可與磷酸化肽中磷酸根基團進行親和作用,而豐富的親水性胍基官能團進一步促進親水性磷酸化肽的吸附,進而建立了利用了Fe3O4@Hf/Ti-MOF-Gua高選擇性富集人唾液磷酸化肽的新方法。(4)提出了從生物樣品中分離富集單/全磷酸化肽的新策略,通過簡便的溶劑熱法制備兩種磁性鎳基氧化鐵納米復(fù)合物親和探針,用于磷酸化肽的富集研究。討論了鎳源的劑量和反應(yīng)時間對MNFOs的形貌和組成的影響,以及對生物樣品中磷酸化肽選擇性的影響。令人感興趣的是,MNFO-S可以高效地富集全磷酸化肽(包括單/多磷酸化肽),而MNFO-L則可高選擇性捕獲單磷酸化肽。將HL7702細胞在暴露于大氣細顆粒物PM2.1后,用這兩種親和探針分離和富集其裂解液中的磷酸化肽,發(fā)現(xiàn)經(jīng)PM2.1刺激后,細胞中磷酸化蛋白的表達顯著上調(diào)。(5)提出了在水溶液中用有機分子輔助法制備磁性Fe3O4納米粒子的新方法,并提出了在2-MIM水溶液中Fe3O4納米晶體的可能生長機制。然后,通過超聲輔助方法將Fe3O4納米顆粒負載到氧化石墨烯(GO)片上,由于GO片上的羥基和羧基,Fe3O4/GO探針表現(xiàn)出優(yōu)異的富集低豐度肽的性能,而Fe3O4納米顆粒對磷酸化肽具有特異性親和能力。通過將制得的Fe3O4/GO納米復(fù)合物用作多功能的親和探針,用于低豐度肽和磷酸化肽的順序分離富集,顯示出有機分子輔助法制備磁性Fe3O4納米粒子的優(yōu)越性。
梁毅勛[4](2020)在《高密度金屬親和功能化磁性石墨烯選擇性分離純化富組氨酸蛋白質(zhì)》文中指出開發(fā)高效、高選擇性和高容量的蛋白質(zhì)分離純化方法始終是蛋白質(zhì)組學研究的重要內(nèi)容之一。本論文針對石墨烯材料在蛋白質(zhì)分離富集過程中選擇性差、吸附容量低的問題,從磁性石墨烯出發(fā),設(shè)計合成了兩種具有高密度金屬親和配體的功能化石墨烯復(fù)合材料,建立了復(fù)雜生物樣品體系中富組氨酸蛋白質(zhì)高選擇性和高容量分離純化的新方法。第一章簡要綜述了常見的蛋白質(zhì)分離方法,金屬親和色譜在蛋白質(zhì)分離純化中的原理和應(yīng)用,石墨烯的性質(zhì)、合成、表面功能化及其在樣品前處理領(lǐng)域的應(yīng)用進展。第二章以聚賴氨酸(PLL)為高密度配體修飾劑,通過共價方式修飾在磁性石墨烯(MG)表面,再利用戊二醛交聯(lián)策略將天冬氨酸(Asp)鍵合在復(fù)合材料表面,進一步螯合銅離子,制備了高密度金屬親和-聚賴氨酸功能化的磁性石墨烯復(fù)合材料(MGPLA-Cu)。采用FT-IR、XRD、TGA、VSM和SEM/TEM等手段進行表征,結(jié)果表明MGPLA-Cu復(fù)合材料中金屬親和基團的接枝密度為14.1μmol m-2。利用金屬親和基團與組氨酸殘基之間的特異性親和作用力,MGPLA-Cu復(fù)合材料對富組氨酸蛋白質(zhì)(血紅蛋白)表現(xiàn)出很高的選擇性吸附性能。在p H 8的磷酸鹽緩沖液中,200mg L-1血紅蛋白(Hb)在復(fù)合材料表面的吸附效率可達99%,并且其最大吸附容量為334 mg g-1。與此同時,未經(jīng)PLL修飾的金屬親和磁性石墨烯復(fù)合材料(MGA-Cu)對血紅蛋白的吸附選擇性差,吸附容量也僅為227 mg g-1。吸附在復(fù)合材料表面的Hb可通過碳酸鹽緩沖液(0.2 mol L-1,p H 10含0.05 mol L-1咪唑)有效回收,洗脫效率約為97%。MGPLA-Cu復(fù)合材料具有良好的可重復(fù)使用性,經(jīng)過5次吸附-洗脫操作循環(huán)后仍保持很高的吸附效率(>90%)。將MGPLA-Cu復(fù)合材料應(yīng)用于人全血樣品中Hb的分離純化,SDS-聚丙酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)結(jié)果證明本方法可以實現(xiàn)復(fù)雜樣品中Hb的高選擇性分離,且得到的Hb純度較高。第三章選擇羧甲基纖維素(CMC)為高密度配體修飾劑,對磁性石墨烯表面進行功能化,再進一步共價鍵合亞氨基二乙酸(IDA)并螯合銅離子,制備了高密度金屬親和-羧甲基纖維素功能化磁性石墨烯復(fù)合材料(MGCI-Cu)。采用多種表征手段證明了石墨烯表面的成功改性,得到金屬親和基團的接枝密度為6.17μmol m-2。該復(fù)合材料對富含組氨酸的蛋白質(zhì)表現(xiàn)出高選擇性吸附特性。同樣地,蛋白質(zhì)分子中的組氨酸殘基與MGCI-Cu復(fù)合材料中Cu2+離子之間較強的金屬親和作用力是實現(xiàn)富組氨酸蛋白質(zhì)選擇性吸附的主要驅(qū)動力,在p H為8的磷酸鹽緩沖液(0.2 mol L-1)中可實現(xiàn)對血紅蛋白(Hb)的高選擇性吸附。與Hb在無CMC配體接枝的MGI-Cu材料表面的吸附容量相比(435 mg g-1),其在MGCI-Cu復(fù)合材料表面的吸附容量顯著增加至769 mg g-1。用含有0.5 mol L-1咪唑的碳酸鹽緩沖液(0.2 mol L-1 p H 10)可以回收材料表面的Hb分子。MGCI-Cu復(fù)合材料經(jīng)過乙二胺四乙酸(EDTA)和Cu2+溶液再生后,至少可循環(huán)使用4次,顯示出良好的可重復(fù)使用性。實際應(yīng)用表明,MGCI-Cu復(fù)合材料可以實現(xiàn)人全血中Hb以及大腸桿菌(E.coli)裂解液中聚組氨酸標簽重組蛋白的高選擇性分離純化。
張曉霞[5](2020)在《磁性石墨烯基和磁性COFs基固定化金屬親和吸附劑的制備及應(yīng)用》文中研究說明樣品制備是大多數(shù)化學分析方法的一個重要和初步的過程。由于樣品的多樣性,選擇合適的吸附劑對其分析具有重要意義。在過去的十年中,隨著材料科學的快速發(fā)展,一些新型吸附材料在樣品預(yù)處理中表現(xiàn)出了優(yōu)越性。作為磁性固相萃取吸附劑的磁性納米復(fù)合材料,在樣品分離中具有廣泛的應(yīng)用前景,不僅能實現(xiàn)快速分離,而且磁性納米復(fù)合材料的表面可接枝多種功能基團,方便進一步改性。本文分別以磁性石墨烯和磁性COFs為基質(zhì),構(gòu)建了兩種固定化金屬親和型(IMA)吸附劑,并研究了吸附劑的吸附性能,主要內(nèi)容如下:(1)以磁性石墨烯為基質(zhì),將作為分子瓶刷骨架的聚甲基丙烯酸羥乙酯(PHEMA)通過表面引發(fā)原子轉(zhuǎn)移自由基聚合(SI-ATRP)接枝到聚多巴胺包覆的磁性氧化石墨烯表面。然后通過第二次ATRP在PHEMA骨架上接枝聚甲基丙烯酸縮水甘油酯(PGMA),得到瓶刷聚合物接枝的磁性石墨烯,將亞氨基二乙酸(IDA)錨定在納米復(fù)合材料上,再螯合銅離子后制成IMA吸附劑。用透射電子顯微鏡、熱重分析儀等對吸附劑進行表征,利用富含His的蛋白(牛血紅蛋白、BHb)和其他蛋白(溶菌酶和細胞色素-C)對其吸附性能進行評價。結(jié)果表明,所制備的吸附劑對富含His的蛋白具有較高的吸附能力,對BHb的最大吸附容量為378.6 mg g-1。采用該吸附劑從人全血中純化Hb,SDS-PAGE結(jié)果表明該吸附劑具有良好的純化性能。這表明IMA吸附劑在富集和純化富含His的蛋白質(zhì)方面具有潛在的應(yīng)用前景。(2)以磁性COFs為基質(zhì),采用合成后修飾將阿侖膦酸鈉(AS)接枝到磁性COFs表面,再螯合鈦離子,得到磁性COFs固定化金屬親和吸附劑。采用紅外光譜和X-射線粉末衍射等對制備的材料進行表征。該吸附劑具有核殼結(jié)構(gòu)、大的比表面積、尺寸排阻效應(yīng)、良好的磁響應(yīng),將其應(yīng)用于小分子核苷酸的選擇性富集。結(jié)果表明,磁性COFs固定化金屬親和吸附劑對核苷酸具有優(yōu)異的選擇性和吸附容量,回收率高,重復(fù)使用性好等優(yōu)點。
王婕[6](2020)在《固定化Ti4+磁性納米粒子選擇性富集磷酸化蛋白/磷酸肽研究》文中研究表明磷酸化是蛋白質(zhì)翻譯后修飾的重要行為之一,在生命調(diào)節(jié)中起著不可或缺的作用。異常的磷酸化蛋白/磷酸肽是很多疾病的生物標志物,所以磷酸化蛋白質(zhì)組學的研究則顯得尤為重要。質(zhì)譜通常用于對磷酸化蛋白/磷酸肽的定性分析。由于磷酸化蛋白/磷酸肽的低通量、難電離、以及容易受到非磷酸化蛋白/非磷酸肽的信號干擾,直接對其進行分析較為困難,有必要在質(zhì)譜分析前對磷酸化蛋白/磷酸肽進行分離富集。因此迫切需要開發(fā)出合成簡便且高效的吸附材料用于磷酸化蛋白/磷酸肽的富集。為了實現(xiàn)對目標物分析物的分離富集,本論文在課題組前期工作的基礎(chǔ)上進行創(chuàng)新,即選取阿侖膦酸鈉作為更為簡單的鰲合配體,設(shè)計了以四氧化三鐵(Fe3O4)磁性納米粒子為基質(zhì)的兩種不同類型的新型吸附劑,并深入研究了其性能。1.采用溶劑熱法合成Fe3O4磁性納米粒子,在其表面包覆多巴胺后以Fe3O4@PDA作為二級反應(yīng)平臺修飾阿侖膦酸鈉,最后鰲合Ti4+制得目標吸附劑。使用紅外光譜、X射線光電子能譜、X射線粉末衍射和透射電鏡等手段對吸附劑進行表征。重點研究了吸附劑對標準蛋白(β-酪蛋白和卵清蛋白)的吸附性能和動力學行為,通過改變?nèi)芤簆 H值和鹽濃度考察其對吸附劑的影響,實驗結(jié)果表明吸附劑是通過金屬配位方式進行吸附,并且吸附行為更符合朗繆爾模型和準二級動力學模型。同時與對照吸附劑Fe3O4@PDA-Ti4+進行了比較,著重從吸附劑與目標蛋白的結(jié)合強度,吸附容量以及吸附過程中吸附劑的穩(wěn)定性方面(Ti4+的流失量)進行研究。最后,使用吸附劑成功從實際樣品(雞蛋和牛奶)中分別選擇性分離富集出卵清蛋白和β-酪蛋白,表明本文制備的吸附劑在生物應(yīng)用方面具有潛在應(yīng)用價值。2.采用溶劑熱法制備Fe3O4磁性納米粒子,在其表面包覆一層二氧化硅以提高材料親水性,引入芐基氯型硅烷化試劑,以鍵合阿侖膦酸鈉金屬鰲合配體,最后鰲合Ti4+制得目標吸附劑。使用掃描電鏡、紅外光譜、熱重分析等手段分別對吸附劑進行表征。研究了吸附劑對β-酪蛋白酶解液中磷酸肽的性能,并探究了上樣條件中乙腈比例對磷酸肽富集情況的影響。同時,通過在標準混合蛋白樣品中的實際應(yīng)用對吸附劑的選擇性進行了考察。最后,使用吸附劑從實際樣品中選擇性富集磷酸化蛋白,證明了本論文所制備的吸附材料具有良好的選擇性和實用性。
侯恒磊,池偉亞,安寧,公丕勝,靳海波,齊莉,何廣湘,郭曉燕,張榮月[7](2020)在《固定化金屬親和層析介質(zhì)在蛋白純化中的應(yīng)用進展》文中研究說明隨著生物制藥技術(shù)的發(fā)展,生物制品的生產(chǎn)規(guī)模日益擴大,對下游分離純化技術(shù)也提出新的挑戰(zhàn),為滿足高效獲得符合要求的產(chǎn)品這一需求,各種快速分離純化蛋白的技術(shù)應(yīng)運而生,其中固定化金屬親和層析色譜在蛋白純化中的應(yīng)用取得了快速發(fā)展。固定化金屬親和層析具有配基選擇簡單且穩(wěn)定性高、特異性好、蛋白結(jié)合載量高、蛋白洗脫條件溫和、介質(zhì)易再生、制備工藝簡單、造價低等多項優(yōu)點,逐漸成為蛋白質(zhì)分離純化及多個相關(guān)領(lǐng)域中最有效的分離技術(shù)之一。本文對固定化金屬親和色譜的工作原理、構(gòu)成、應(yīng)用現(xiàn)狀進行了闡述,其中主要對蛋白載量和金屬離子泄露問題進行概括,對螯合層析介質(zhì)在蛋白質(zhì)純化中的前景進行了展望。
李南[8](2019)在《自組裝肽功能化微納米材料的制備及在分離富集中的應(yīng)用》文中提出蛋白質(zhì)非特異吸附是一種廣泛存在的自然現(xiàn)象,常發(fā)生于各種生化工程材料及納米材料表界面,近年來在免疫傳感、電泳分離、樣品富集分析、醫(yī)用組織材料和防污工程材料等研究領(lǐng)域倍受關(guān)注。特別是當進行復(fù)雜生物樣品(如血液、組織液、細胞外液等體液)分析時,人們對蛋白質(zhì)非特異吸附的考察與探究顯得尤為重要,主要原因在于蛋白質(zhì)分子在界面的非特異作用可能會導(dǎo)致裝置功能失效、分析物大量損失、檢測信號不準確等。盡管人們對于蛋白質(zhì)在界面非特異吸附方面的研究較為廣泛,但多數(shù)研究對于蛋白質(zhì)在基質(zhì)表面吸附的認識依然只停留在定性研究或宏觀現(xiàn)象的探究方面,然而在分子水平上對于蛋白質(zhì)在材料表界面吸附機理的理解仍然存在諸多爭議。但是對于蛋白質(zhì)分子在界面的吸附機理的考察不僅能促進人們對吸附機理的理解,也能為解決材料界面非特異吸附奠定基礎(chǔ),并且在尋找和開發(fā)各種生物防污材料方面,以及促進不同基質(zhì)領(lǐng)域的相互合作方面也起到了關(guān)鍵作用。鑒于此,本論文在分子水平上,以生化材料(包括微流控芯片材料、生物常用材料、磁性微納米材料)作為基質(zhì)表界面,對于多肽和蛋白質(zhì)在基質(zhì)表界面的自發(fā)吸附即自組裝吸附進行了系統(tǒng)地探究,并結(jié)合基質(zhì)材料本身在分離和富集研究領(lǐng)域的優(yōu)勢,初步建立了一種基于富含堿性氨基酸的自組裝肽功能化各種生化材質(zhì)用于復(fù)雜生物樣品分離和富集分析的方法。全文主要包括以下章節(jié)內(nèi)容:第1章緒論首先概述了多肽自組裝的應(yīng)用,其次介紹了研究中使用到的微流控芯片材料和磁性微納米粒子及其功能化與應(yīng)用研究,最后闡明本論文的研究內(nèi)容及目的。第2章蛋白質(zhì)/多肽在固體表面吸附機制研究我們之前的研究結(jié)果已經(jīng)初步證明了離子互補型肽 EAR16-Ⅱ[(Ala-Glu-Ala-Glu-Ala-Arg-Ala-Arg)2]在親疏水聚二甲基硅氧烷(PDMS)表面均能形成完整的以β-折疊為主的兩親性自組裝涂層,該涂層具有良好的生物兼容性和抗蛋白質(zhì)吸附性能。并得出初步結(jié)論,即多肽序列中的堿性氨基酸側(cè)鏈ε-氨基(ε-NH2)與基質(zhì)表面負電荷之間的離子型氫鍵對于多肽在親疏水PDMS表面的強吸附起到關(guān)鍵的作用。那么為了驗證這一假設(shè),本實驗中我們設(shè)計合成了離子互補型肽 EAK16-Ⅱ[(Ala-Glu-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Lys)2]及其季銨化衍生物QEAK16-Ⅱ[(Ala-Glu-Ala-Glu-Ala-LysMe3-Ala-LysMe3)2],在生理 pH 條件下,系統(tǒng)地研究了其在微流控常用基質(zhì)聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)表面的自組裝行為。結(jié)合原子力顯微鏡(AFM),水接觸角(WCA),X射線光電子能譜(XPS),衰減全反射傅里葉變換紅外光譜(ATR-FTIR)等表征技術(shù)、抗蛋白吸附實驗以及血液相容性實驗等進行驗證。第3章基于自組裝肽的微芯片和生物材料表面普適功能化研究在上述工作的基礎(chǔ)上,為了更進一步了解分子水平上多肽和蛋白質(zhì)在界面的自發(fā)吸附機理,為各種基體表面提供一種簡單普適低成本并且綠色環(huán)保的功能化方法,本章中我們設(shè)計了三條序列中疏水氨基酸(丙氨酸,A)和親水氨基酸(賴氨酸,K)交替排列的小分子肽,即(Ala-Lys-Ala-Lys,AK-Ⅳ),(Ala-Lys-Ala-Lys-Ala-Lys,AK-Ⅵ),和(Ala-Lys-Ala-Lys-Ala-Lys-Ala-Lys,AK-Ⅷ),以微流控常用材料PDMS和生化常用材料聚苯乙烯(PS)為基質(zhì)模型,在生理pH條件下,利用小分子肽對PDMS和PS表面進行自組裝吸附??疾炝嘶w表面小分子肽的抗蛋白非特異吸附性能和生物兼容性。此外,我們還比較了 BSA和AK-Ⅷ作為封閉試劑,在癌胚抗原(CEA)酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)中對抗原和檢測抗體的非特異性吸附的抑制效果。實驗結(jié)果表明,AK-Ⅷ表現(xiàn)出比BSA更好的封閉效果,不僅減少了抗原和檢測抗體的非特異性吸附,而且在CEA測定中提供更低的背景噪聲、更低的檢測限和更寬的線性范圍。該研究為解決基于PDMS的工程材料和PS的生物材料的非特異性蛋白質(zhì)吸附問題奠定了基礎(chǔ),為開發(fā)各種防污材料提供了一種新穎且普適的方法。第4章基于自組裝肽的C18功能化磁性氧化石墨烯的制備及在多肽分離富集中的應(yīng)用人血清中多肽有和疾病相關(guān)的標志物,因此對于血清中多肽的分離富集具有重要的意義。本實驗我們設(shè)計合成了氮端含有C18烷烴鏈的自組裝肽(C18-VKVKVK,C18VK-Ⅵ),探究了其在磁性氧化石墨烯(Fe3O4@GO)表面的自組裝行為,并利用C18鏈與多肽之間的相互作用,對肌紅蛋白酶解液和人血清中的痕量多肽進行高效的分離富集。第5章基于自組裝肽功能化磁性碳基材料固定Fe3+及在磷酸化肽分離富集中的應(yīng)用基于已報道的工作,本章我們利用一步自組裝法將親疏水性殘基交替排列的自組裝肽(EPAKAKAK,EPAK-Ⅵ)修飾在不同形貌磁性碳材料表面,用于固定Fe3+并選擇性富集磷酸化肽。鑒于前面工作對蛋白質(zhì)吸附機理的證明,設(shè)計該序列的意圖為:期望以AK-Ⅵ肽鏈分子作為錨,利用K的側(cè)鏈ε-NH2基團與磁性碳基材料表面負電荷形成穩(wěn)定的離子型氫鍵,因而在表面形成穩(wěn)定的吸附涂層,為了實現(xiàn)Fe3+固定,我們在AK-Ⅵ鏈氮端設(shè)計了酸性氨基酸谷氨酸(E)和疏水氨基酸脯氨酸(P),其中P的作用是控制多肽氮端空間構(gòu)型,使得谷氨酸在轉(zhuǎn)角處呈現(xiàn)立體結(jié)構(gòu),并作為Fe3+的連接臂,通過簡單的自組裝功能化法,將EPAK-Ⅵ自組裝于Fe3O4@GO和Fe3O4@C材料表面,一方面提高材料對Fe3+的親和性,另一方面利用自組裝肽的抗非特異吸附性能,選擇性地富集磷酸化肽段。實驗結(jié)果表明該方法可以高效高選擇性富集標準蛋白質(zhì)和實際樣品中的磷酸化肽段。第6章基于自組裝肽的巰基功能化磁性碳納米粒子的制備及在Cu(Ⅱ)分離富集中的應(yīng)用多肽是一種具有特殊結(jié)構(gòu)和多功能基團(如氨基,硫醇,羥基和羧基)的一類生物分子,已廣泛應(yīng)用于生物傳感、藥物載體、催化劑以及吸附劑等各種材料的功能性涂層?;谏鲜龉ぷ鲗Χ嚯脑诒砻孀园l(fā)吸附機理的驗證,本實驗中我們設(shè)計了富含-SH肽Cys-Lys-Cys-Lys-Cys-Lys(CK-Ⅵ),并通過自組裝法將其修飾到Fe3O4@C納米粒子表面,如果上述結(jié)論成立,那么該肽鏈分子CK-Ⅵ中ε-NH2基團與Fe3O4@C納米粒子表面的負電荷之間將會形成穩(wěn)定的離子型氫鍵,而-SH裸露于磁性納米粒子表面,這樣便為Cu(Ⅱ)離子的高效螯合提供有利的作用位點。實驗采用原子吸收光譜(AAS)測量吸附前后溶液中剩余Cu(Ⅱ)離子濃度進行定量分析,對各種實驗條件如溶液pH,吸附和洗脫時間,洗脫溶劑和吸附容量等進行優(yōu)化,并用于實際樣品自來水和湖水中的Cu(Ⅱ)離子的富集。第7章結(jié)論總結(jié)全文,提出問題。
劉彭如[9](2019)在《磁性限進親和介質(zhì)的制備及分離血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制肽的研究》文中提出隨著人們對食品和藥品的安全意識和自我保健意識的提高,通過非藥物方法來達到預(yù)防及治療疾病的觀念被越來越多的人所接受。從天然產(chǎn)物中分離血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制肽,開發(fā)具有調(diào)節(jié)血壓作用的保健食品來控制、緩解和輔助治療高血壓成為近些年的研究熱點。目前ACE抑制肽的分離主要是將不同分離方法結(jié)合的多步分離,并且每一步分離需要多次進行,過程繁瑣且分離效率低。為了滿足功能食品及醫(yī)學領(lǐng)域的需求,不僅需要進一步開發(fā)新的天然來源的ACE抑制肽結(jié)構(gòu),還需要研究如何快速高效的從天然產(chǎn)物中分離ACE抑制肽?;趯奶烊划a(chǎn)物中快速分離ACE抑制肽的需求背景,本課題將磁性分離、固定化金屬親和分離及限進介質(zhì)的優(yōu)勢結(jié)合,制備了新型磁性限進親和介質(zhì)(RAAM)用于快速高效的從酪蛋白酶解液及馬氏珠母貝肉酶解液中分離ACE抑制肽,相對于傳統(tǒng)分離ACE抑制肽的方法,本研究制備的RAAM能夠在一步分離中實現(xiàn)ACE抑制肽的有效富集,同時阻拒大分子雜蛋白的干擾,提高了分離效率,降低了純化成本。主要研究內(nèi)容如下:(1)通過反相微乳液法成功制備了磁性二氧化硅微球(mSiO2)。制備的mSiO2具有良好的球形度和超順磁性能,其粒徑分布約為200-250 nm,能從液體中實現(xiàn)快速分離。將制備的mSiO2進行氨基化改性,在優(yōu)化的條件下,得到的氨基含量最大為0.5042mmol·g-1。利用環(huán)氧氯丙烷(ECH)進行磁性微球的活化,在最優(yōu)的反應(yīng)條件下,環(huán)氧基密度最大可達155.8μmol·g-1。將Cu2+通過亞氨基二乙酸(IDA)固定在磁性微球表面制備了固定化金屬親和介質(zhì)(IMAM),Cu2+螯合量最大可達到49.36μmol·g-1。考察在不同吸附條件下IMAM對牛血清蛋白(BSA)吸附量的影響,IMAM對BSA的最大吸附吸附量為76.34 mg·g-1。(2)利用聚乙二醇單甲醚(mPEG)修飾IMAM制備了RAAM并考察其吸附性能。通過將mPEG進行醛基化改性,成功將醛基化的mPEG通過希夫堿反應(yīng)接枝到IMAM表面。對接枝不同分子量mPEG的RAAM的制備工藝條件進行了優(yōu)化,在最優(yōu)的反應(yīng)條件下,接枝不同分子量mPEG(MW1000、1900、5000)的RAAM的最大接枝率分別為10.33%、12.42%、14.17%。以BSA為大分子蛋白模型、FFVAP為小分子多肽模型,考察了接枝不同分子量mPEG的RAAM在單一模擬體系和混合模擬體系中的吸附性能,結(jié)果表明接枝mPEG的RAAM可以有效阻拒BSA的吸附,對于接枝接枝不同分子量mPEG(MW1000、1900、5000)的RAAM,接枝的mPEG分子量越大,其對BSA的阻拒性能越好,對FFVAP的吸附量也越高。將NH4Cl+NaCl作為洗脫液對介質(zhì)吸附的多肽進行洗脫,多肽回收率最大可以達到75.02%??疾炝薘AAM的重復(fù)使用性能,結(jié)果表明制備的RAAM可以再生后重復(fù)利用,這大大降低了純化成本。利用zeta電位、熒光光譜、微量量熱技術(shù)研究RAAM與BSA的相互作用機理。zeta電位結(jié)果表明BSA與吸附介質(zhì)之間存在靜電引力,同時RAAM由于接枝的mPEG對BSA有排斥作用,BSA在介質(zhì)表面的吸附取決于兩種作用力相互競爭的結(jié)果。熒光光譜結(jié)果表明,吸附介質(zhì)可以猝滅BSA的熒光效應(yīng),其猝滅機制是吸附介質(zhì)與BSA形成了配合物,屬于靜態(tài)猝滅機制。微量量熱分析結(jié)果表明,RAAM表面接枝的mPEG分子量越高,其與BSA結(jié)合過程中產(chǎn)生的熱量越大,這說明RAAM表面接枝的mPEG為有效阻拒BSA提供了一定的熵焓能壘。(3)利用胰蛋白酶和胃蛋白酶協(xié)同酶解酪蛋白,得到的酶解液具有ACE抑制活性。利用RAAM對酪蛋白酶解液進行純化,凝膠滲透色譜(GPC)結(jié)果表明RAAM可以阻拒大分子雜蛋白的吸附,有效富集酪蛋白酶解液中的ACE抑制肽,相比酶解液,經(jīng)過RAAM純化后的組分ACE抑制率提高了55.93%。將RAAM純化的組分利用反相高效液相色譜(RP-HPLC)繼續(xù)分離,選出抑制活性最高的組分進行質(zhì)譜鑒定,得到一個新的ACE抑制肽,其氨基酸序列為LLYQEPVLGPVR,IC50值為273.5±5.4μmol·L-1。根據(jù)Lineweaver-Buck雙倒數(shù)作圖法,確定了純化的ACE抑制肽LLYQEPVLGPVR對ACE的抑制模式為非競爭性抑制。分子對接結(jié)果顯示,ACE抑制肽LLYQEPVLGPVR是通過氫鍵作用與ACE結(jié)合,其結(jié)合位點位于ACE的非活性位點,從分子結(jié)構(gòu)上進一步證明了LLYQEPVLGPVR的非競爭抑制模式。(4)利用堿性蛋白酶酶解馬氏珠母貝肉蛋白,得到具有ACE抑制活性的酶解液。利用RAAM對馬氏珠母貝肉蛋白酶解液(POMPH)進行純化,并通過RP-HPLC純化出兩個新的具有抑制活性的ACE抑制肽,其氨基酸序列分別為HLHT和GWA,其IC50值分別為458.1±3.2μmol·L-1和109.3±1.5μmol·L-1。根據(jù)Lineweaver-Buck雙倒數(shù)作圖法,確定了純化的抑制肽對ACE的抑制模式,其中為HLHT為非競爭性抑制,而GWA為競爭性抑制。分子對接結(jié)果顯示,HLHT與ACE的非活性位點結(jié)合,而GWA與ACE的活性位點結(jié)合,進一步證明了純化的ACE抑制肽HLHT和GWA抑制模式。并通過對SD大鼠靜脈注射POMPH證實了其在體內(nèi)的有效降血壓作用。
李來明[10](2019)在《多功能化硅膠基質(zhì)材料的制備及其應(yīng)用研究》文中研究指明以硅膠為基質(zhì)的多功能化復(fù)合材料,在同時具有良好的機械強度、穩(wěn)定的物化性質(zhì)、極強的吸附能力、良好的生物相容性、易分離和多孔結(jié)構(gòu)的硅膠特性外,還由于其表面附帶不同的功能化基團,使其廣泛應(yīng)用于藥物分離、生物傳導(dǎo)、環(huán)境科學和催化技術(shù)等方面。隨著越來越多對多功能化硅膠的應(yīng)用前景的開發(fā),尋找制備簡單、應(yīng)用經(jīng)濟且高效的功能化硅膠材料是目前研究的一大熱點。對此,本論文制備和開發(fā)了一系列以硅膠為基質(zhì)的多種功能化復(fù)合材料,并將其應(yīng)用于重金屬吸附、催化科學及藥物分離等方面。首先,制備和表征一系列含不同量氮原子配體的氨基功能化硅膠,由于氮原子能與某些重金屬配位,因此系統(tǒng)的研究并對比了氨基系列功能化硅膠對重金屬Pb2+離子的吸附分離性能。同時將系列氨基功能化硅膠與過渡金屬鉑配位形成多相催化劑應(yīng)用于催化1-辛烯與甲基二氯硅烷的硅氫加成反應(yīng)中,通過比較它們各自對金屬的作用能力及催化性能,研究其含氮量與性能的關(guān)系。其次,由于不同功能化配體的吸/給電子效應(yīng)和位阻的差異,對金屬的相互作用也明顯不同,因此制備和表征了以含氮、硫及其雜環(huán)的4種配體的功能化硅膠,分別比較它們對金屬鉑的固載作用和催化硅氫加成反應(yīng)的效率。還選取不同的功能化硅膠應(yīng)用于對云南錳礦中金屬的吸附分析之中,對比不同的功能化基團對不同金屬離子的作用能力,旨在解決云南錳礦中金屬純化及分離困難的問題。第三,由于硼酸在游離狀態(tài)下易與金屬形成硼酸金屬鹽復(fù)合物,因此本論文首創(chuàng)了一種新型硼酸功能化硅膠負載鉑催化劑。其制備過程采用不同途徑獲得三種不同的硼酸功能化硅膠,再分別與催化金屬鉑作用得到該催化劑。采用各分析手段對其結(jié)構(gòu)進行表征并應(yīng)用于催化硅氫加成反應(yīng)中,通過催化條件優(yōu)化篩選出具有優(yōu)良的催化活性、反應(yīng)選擇性和重復(fù)使用性的新型催化劑。第四,研究發(fā)現(xiàn)硼酸基團的另一個作用是易與順式二醇化合物發(fā)生可逆的共價結(jié)合。因此本論文將所制硼酸功能化硅膠應(yīng)用于吸附和純化中藥羅漢果粗提物中的羅漢果糖苷V。結(jié)果發(fā)現(xiàn)硼酸功能化硅膠對羅漢果糖苷V的分離能力表現(xiàn)優(yōu)異,且能將羅漢果粗提物中羅漢果糖苷V的純度提高40%。與此同時,將硅膠包覆磁性納米材料后易于分離且吸附性能好,在分析化學樣品領(lǐng)域中也日益受到人們的關(guān)注。因此本文還在硅膠基質(zhì)的基礎(chǔ)上引入磁性材料得到磁性納米硅球,分別采用硼酸基、硝基、羧基、巰基和磺酸基等五種不同功能化基團修飾,并應(yīng)用于固載金屬鉑及催化硅氫加成反應(yīng)之中。比較不同功能化配體對金屬鉑的作用能力及所制催化劑的催化活性。最后,由于研究發(fā)現(xiàn)羧基表現(xiàn)出對金屬鉑的強烈作用,我們引入多羧基(EDTA)功能化磁性納米硅球來考察其對金屬鉑的固載能力和催化硅氫加成反應(yīng)的性能。該新型催化劑展示了較高的催化活性,且化學穩(wěn)定性好,重復(fù)使用性能佳,無環(huán)境污染。
二、A NOVEL METAL CHELATE AFFINITY ADSORBENT FOR PROTEIN UPTAKE(論文開題報告)
(1)論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求:
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景,再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題,并提出你的論文準備的觀點或解決方法。
寫法范例:
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細分析其設(shè)計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。
(2)本文研究方法
調(diào)查法:該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法:用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實驗法:通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認事物間的因果關(guān)系。
文獻研究法:通過調(diào)查文獻來獲得資料,從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實證研究法:依據(jù)現(xiàn)有的科學理論和實踐的需要提出設(shè)計。
定性分析法:對研究對象進行“質(zhì)”的方面的研究,這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法:通過具體的數(shù)字,使人們對研究對象的認識進一步精確化。
跨學科研究法:運用多學科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進行研究。
功能分析法:這是社會科學用來分析社會現(xiàn)象的一種方法,從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。
模擬法:通過創(chuàng)設(shè)一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、A NOVEL METAL CHELATE AFFINITY ADSORBENT FOR PROTEIN UPTAKE(論文提綱范文)
(1)基于大孔聚合物金屬螯合層析介質(zhì)的制備與評價研究(論文提綱范文)
學位論文數(shù)據(jù)集 |
摘要 |
abstract |
第一章 緒論 |
1.1 選題背景與研究意義 |
1.2 蛋白純化方法 |
1.2.1 沉淀法 |
1.2.2 離心法 |
1.2.3 電泳法 |
1.2.4 膜分離法 |
1.2.5 層析法 |
1.3 固定化金屬親和層析 |
1.3.1 IMAC基本原理 |
1.3.2 IMAC層析介質(zhì)組成 |
1.3.3 IMAC的應(yīng)用 |
1.3.4 存在的問題及解決辦法 |
1.4 金屬螯合層析介質(zhì)制備方法 |
1.4.1 偶聯(lián)小分子配基法 |
1.4.2 接枝聚合物長鏈配基法 |
1.5 研究目標和技術(shù)路線 |
1.5.1 研究目標 |
1.5.2 技術(shù)路線 |
第二章 表面接枝法制備三齒鎳螯合層析介質(zhì)及表征 |
2.1 前言 |
2.2 實驗儀器及材料 |
2.2.1 實驗材料及試劑 |
2.2.2 實驗儀器 |
2.3 實驗方法 |
2.3.1 金屬螯合層析介質(zhì)的制備 |
2.3.2 掃描電子顯微鏡測試 |
2.3.3 紅外光譜測試 |
2.3.4 GMA-IDA單體接枝量測定 |
2.3.5 鎳含量的測定 |
2.3.6 耐壓性測定 |
2.4 結(jié)果與討論 |
2.4.1 PGMA-IDA-Ni微球的制備過程分析 |
2.4.2 Ce~(4+)引發(fā)GMA-IDA接枝共聚的影響因素考察 |
2.4.3 接枝單體前后微球形貌分析 |
2.4.4 紅外分析 |
2.4.5 PGMA-IDA-Ni介質(zhì)Ni~(2+)螯合量的研究 |
2.4.6 接枝PGMA-IDA前后微球耐壓性對比研究 |
2.5 本章小結(jié) |
第三章 PGMA-IDA固定金屬離子介質(zhì)色譜性能考察 |
3.1 前言 |
3.2 實驗儀器及材料 |
3.2.1 實驗材料及試劑 |
3.2.2 實驗儀器 |
3.3 實驗方法 |
3.3.1 靜態(tài)載量的測定 |
3.3.2 動態(tài)載量的測定 |
3.3.3 化學穩(wěn)定性測試 |
3.3.4 接枝不同齒類功能單體 |
3.3.5 螯合銅(Ⅱ)、鋅(Ⅱ)、鈷(Ⅱ)離子的方法 |
3.3.6 微球螯合金屬離子含量的測定 |
3.4 結(jié)果與討論 |
3.4.1 不同螯合配基量 PGMA-IDA-Ni 介質(zhì)對靜態(tài)蛋白載量的影響 |
3.4.2 不同螯合配基量 PGMA-IDA-Ni 介質(zhì)對動態(tài)蛋白載量的影響 |
3.4.3 螯合不同金屬離子PGMA-IDA介質(zhì)蛋白載量的對比 |
3.4.4 PGMA-IDA-Ni 介質(zhì)化學穩(wěn)定性考察 |
3.4.5 四齒、五齒類改性單體的接枝 |
3.5 本章小結(jié) |
第四章 PGMA-IDA-Ni 介質(zhì)在分離實際混合蛋白體系中的應(yīng)用研究 |
4.1 前言 |
4.2 實驗儀器及材料 |
4.2.1 實驗試劑及材料 |
4.2.2 實驗儀器 |
4.3 實驗方法 |
4.3.1 流動相的配制 |
4.3.2 細胞破碎 |
4.3.3 融合蛋白的分離純化 |
4.3.4 SDS-PAGE凝膠電泳 |
4.3.5 凝膠過濾柱測定蛋白純度 |
4.4 結(jié)果與討論 |
4.4.1 六聚組氨酸標簽重組麥芽糖結(jié)合蛋白(6His-MBP)的純化 |
4.4.2 六聚組氨酸標簽重組 6His-SL11 蛋白的純化 |
4.5 本章小結(jié) |
第五章 結(jié)論與展望 |
5.1 結(jié)論 |
5.2 展望 |
參考文獻 |
致謝 |
研究成果及發(fā)表的學術(shù)論文 |
作者與導(dǎo)師簡介 |
(2)配位親和固相萃取吸附劑的制備及對生物活性成分的分析(論文提綱范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 緒論 |
1.1 樣品前處理簡介 |
1.1.1 樣品前處理的目的和意義 |
1.1.2 樣品前處理的要求 |
1.1.3 常見樣品前處理方法 |
1.2 固相萃取技術(shù)簡介 |
1.2.1 固相萃取技術(shù)概述 |
1.2.2 固相萃取原理及過程 |
1.2.3 固相萃取吸附劑的作用機理 |
1.2.4 固相萃取吸附劑的種類及應(yīng)用 |
1.3 生物活性成分 |
1.3.1 生物活性成分簡介 |
1.3.2 生物活性成分分類 |
1.3.3 生物活性成分的檢測方法 |
1.4 本論文的研究意義和主要內(nèi)容 |
1.4.1 本論文的研究意義 |
1.4.2 本論文的研究內(nèi)容 |
第2章 L-賴氨酸親和中空固相萃取吸附劑的制備及其在生物樣品中膽紅素的分離富集應(yīng)用 |
2.1 前言 |
2.2 材料與實驗 |
2.2.1 試劑及儀器 |
2.2.2 色譜分離條件 |
2.2.3 材料的合成 |
2.2.4 吸附試驗 |
2.2.5 標準樣品制備 |
2.2.6 從動物肝臟樣本中富集膽紅素 |
2.3 結(jié)果與討論 |
2.3.1 h-PDA@L-lys吸附劑的表征 |
2.3.2 吸附過程優(yōu)化 |
2.3.3 吸附動力學和靜態(tài)吸附過程 |
2.3.4 選擇吸附實驗和競爭吸附實驗 |
2.3.5 可重復(fù)利用性實驗 |
2.4 方法學評價 |
2.5 實際樣品分析 |
2.6 本章小結(jié) |
第3章 沒食子酸親和分子印跡固相萃取吸附劑的制備及其在中藥材中木犀草素的分離富集應(yīng)用 |
3.1 引言 |
3.2 實驗部分 |
3.2.1 儀器與試劑 |
3.2.2 色譜分析方法 |
3.2.3 沒食子酸親和印跡吸附劑的制備 |
3.2.4 印跡條件與固相萃取條件的優(yōu)化 |
3.2.5 平衡與吸附動力學實驗 |
3.2.6 選擇性吸附實驗和競爭吸附試驗 |
3.2.7 實際樣品分析 |
3.3 結(jié)果與討論 |
3.3.1 G-MIP吸附劑的表征 |
3.3.2 印跡條件的優(yōu)化 |
3.3.3 實驗條件的優(yōu)化 |
3.3.4 吸附平衡實驗和吸附動力學實驗 |
3.3.5 選擇性吸附試驗和競爭吸附試驗 |
3.3.6 吸附劑的穩(wěn)定性和重復(fù)利用性 |
3.4 方法評價 |
3.5 實際樣品分析 |
3.6 本章小結(jié) |
第4章 硼酸-金屬雙親和分子印跡吸附劑的制備及其在生物樣品中卵清蛋白的分離富集應(yīng)用 |
4.1 前言 |
4.2 實驗部分 |
4.2.1 儀器與試劑 |
4.2.2 硼酸-金屬雙親和分子印跡吸附劑的制備 |
4.2.3 印跡條件與固相萃取條件的優(yōu)化 |
4.2.4 平衡與吸附動力學實驗 |
4.2.5 選擇性吸附實驗 |
4.2.6 實際樣品分析 |
4.3 結(jié)果與討論 |
4.3.1 D-MIPs吸附劑的表征 |
4.3.2 印跡條件的優(yōu)化 |
4.3.3 實驗條件的優(yōu)化 |
4.3.4 吸附平衡實驗和吸附動力學實驗 |
4.3.5 選擇性吸附試驗 |
4.3.6 吸附劑的穩(wěn)定性和可重復(fù)利用性 |
4.4 方法評價 |
4.5 蛋白活性分析 |
4.6 實際樣品分析 |
4.7 本章小結(jié) |
結(jié)論 |
參考文獻 |
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文 |
致謝 |
(3)新型磁性親和納米復(fù)合物的制備及其在蛋白質(zhì)/多肽分離分析中的應(yīng)用(論文提綱范文)
中文摘要 |
ABSTRACT |
本論文的主要創(chuàng)新點 |
第一章 緒論 |
1.1 生物質(zhì)譜技術(shù) |
1.1.1 生物質(zhì)譜儀的組成 |
1.1.2 基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS) |
1.2 蛋白質(zhì)組學概述 |
1.2.1 蛋白質(zhì)組學的分析策略 |
1.2.2 蛋白質(zhì)組學研究的相關(guān)技術(shù) |
1.2.3 蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學 |
1.3 多肽組學研究概述 |
1.3.1 多肽組學的研究路線 |
1.3.2 多肽的提取方式 |
1.4 磁性納米材料用于蛋白質(zhì)/多肽的分離富集 |
1.4.1 磁性納米材料的制備 |
1.4.2 磁性納米材料的修飾 |
1.4.3 磁性納米材料用于低豐度蛋白/肽段的分離富集 |
1.4.4 磁性納米材料用于磷酸化蛋白/肽段的分離富集 |
1.5 本論文的選題思路和研究內(nèi)容 |
參考文獻 |
第二章 以鈷/鎳雙金屬有機框架為前驅(qū)體合成磁性納米孔碳基材料用于低豐度肽的分離富集 |
2.1 引言 |
2.2 實驗部分 |
2.2.1 材料與試劑 |
2.2.2 Co/Ni-ZIF前驅(qū)體和Co/Ni-MCN材料的制備 |
2.2.3 樣品的制備 |
2.2.4 低豐度肽的分離富集 |
2.2.5 MALDI-TOF MS分析 |
2.3 結(jié)果與討論 |
2.3.1 Co/Ni-ZIF前驅(qū)體合成條件優(yōu)化 |
2.3.2 Co/Ni-ZIF前驅(qū)體及Co/Ni-MCN材料的表征 |
2.3.3 低豐度肽的分離富集效果 |
2.3.4 實際樣品中低豐度肽的分離富集 |
2.3.5 與已報道用于低豐度肽分離富集的同類材料的比較 |
2.4 結(jié)論 |
參考文獻 |
第三章 基于溶劑熱法合成鉿/鈦雙金屬有機骨架的胍基功能化磁性材料用于磷酸化肽的分離富集 |
3.1 引言 |
3.2 實驗部分 |
3.2.1 材料與試劑 |
3.2.2 Fe_3O_4@Hf/Ti-MOF-Gua納米復(fù)合物的制備 |
3.2.3 樣品的制備 |
3.2.4 磷酸化肽的分離富集 |
3.2.5 MALDI-TOF MS分析 |
3.3 結(jié)果與討論 |
3.3.1 Fe_3O_4@Hf/Ti-MOF-Gua納米復(fù)合物的表征 |
3.3.2 磷酸化肽的分離富集效果 |
3.3.3 實際樣品中磷酸化肽的分離富集 |
3.3.4 與已報道用于磷酸化肽分離富集的MOF基材料的比較 |
3.4 結(jié)論 |
參考文獻 |
第四章 溶劑熱法合成磁性鎳基氧化鐵納米復(fù)合物用于大氣細顆粒物刺激肝細胞中單/全磷酸化肽的分離富集 |
4.1 引言 |
4.2 實驗部分 |
4.2.1 材料與試劑 |
4.2.2 兩種MNFOs納米復(fù)合物的制備 |
4.2.3 樣品的制備 |
4.2.4 全/單磷酸化肽的分離富集 |
4.2.5 MALDI-TOF MS分析 |
4.3 結(jié)果與討論 |
4.3.1 兩種MNFOs納米復(fù)合物的表征 |
4.3.2 MNFOs的合成機理解釋 |
4.3.3 兩種MNFOs對單/全磷酸化肽的選擇性富集效果 |
4.3.4 實際樣品中單/全磷酸化肽的分離富集 |
4.3.5 HL7702 細胞暴露PM_(2.1)磷酸化蛋白差異表達的分析 |
4.3.6 與已報道同類材料的比較 |
4.4 結(jié)論 |
參考文獻 |
第五章 基于有機分子輔助合成Fe_3O_4納米粒子的磁性氧化石墨烯用于低豐度肽和磷酸化肽的同時富集 |
5.1 引言 |
5.2 實驗部分 |
5.2.1 材料與試劑 |
5.2.2 Fe_3O_4納米粒子和Fe_3O_4/GO納米復(fù)合物的制備 |
5.2.3 樣品的制備 |
5.2.4 低豐度肽的分離富集 |
5.2.5 磷酸化肽的分離富集 |
5.2.6 低豐度肽/磷酸化肽的順序分離富集 |
5.2.7 MALDI-TOF MS分析 |
5.3 結(jié)果與討論 |
5.3.1 Fe_3O_4/GO的表征 |
5.3.2 2-甲基咪唑輔助合成Fe_3O_4納米粒子的機理解釋 |
5.3.3 實際樣品中低豐度肽的分離富集 |
5.3.4 實際樣品中磷酸化肽的分離富集 |
5.3.5 人血清中低豐度肽/磷酸化肽的順序富集 |
5.3.6 與已報道雙功能親和材料的比較 |
5.4 結(jié)論 |
參考文獻 |
第六章 總結(jié)與展望 |
附錄 |
致謝 |
(4)高密度金屬親和功能化磁性石墨烯選擇性分離純化富組氨酸蛋白質(zhì)(論文提綱范文)
摘要 |
ABSTRACT |
縮略語對照表 |
第一章 緒論 |
1.1 蛋白質(zhì)分離 |
1.1.1 蛋白質(zhì)分離過程 |
1.1.2 蛋白質(zhì)分離方法 |
1.2 金屬親和色譜 |
1.2.1 IMAC原理 |
1.2.2 IMAC作用力 |
1.2.3 IMAC材料及應(yīng)用 |
1.2.4 MOAC材料應(yīng)用 |
1.3 石墨烯 |
1.3.1 石墨烯簡介 |
1.3.2 石墨烯的功能化 |
1.3.3 石墨烯在樣品前處理中應(yīng)用進展 |
1.4 本論文選題思路和研究內(nèi)容 |
第二章 高密度金屬親和-聚賴氨酸功能化磁性石墨烯復(fù)合材料用于血紅蛋白的選擇性分離純化 |
2.1 前言 |
2.2 實驗部分 |
2.2.1 實驗儀器與試劑 |
2.2.2 MGPLA-Cu的制備 |
2.2.3 溶液配制 |
2.2.4 MGPLA-Cu復(fù)合材料的表征 |
2.2.5 MGPLA-Cu復(fù)合材料分離蛋白質(zhì) |
2.2.6 人全血中血紅蛋白分離純化 |
2.3 結(jié)果與討論 |
2.3.1 MGPLA-Cu復(fù)合材料的合成與表征 |
2.3.2 MGPLA-Cu復(fù)合材料吸附蛋白質(zhì)研究 |
2.3.3 人全血樣品中Hb的選擇性分離純化 |
2.4 本章小結(jié) |
第三章 高密度金屬親和-羧甲基纖維素功能化磁性石墨烯復(fù)合材料選擇性分離純化富組氨酸蛋白 |
3.1 前言 |
3.2 實驗部分 |
3.2.1 實驗試劑與儀器 |
3.2.2 MGCI-Cu的制備 |
3.2.3 溶液配制 |
3.2.4 MGCI-Cu復(fù)合材料的表征 |
3.2.5 MGCI-Cu復(fù)合材料分離蛋白質(zhì) |
3.2.6 菌株培養(yǎng)和重組蛋白表達 |
3.2.7 MGCI-Cu復(fù)合材料用于實際樣品中富組氨酸蛋白的分離純化 |
3.3 結(jié)果與討論 |
3.3.1 MGCI-Cu復(fù)合材料的合成與表征 |
3.3.2 蛋白質(zhì)在MGCI-Cu復(fù)合材料上的吸附性能 |
3.3.3 MGCI-Cu復(fù)合材料選擇性分離血紅蛋白 |
3.3.4 實際樣品中富組氨酸蛋白的選擇性分離純化 |
3.4 本章小結(jié) |
第四章 結(jié)論 |
參考文獻 |
攻讀碩士學位期間取得的科研成果 |
致謝 |
(5)磁性石墨烯基和磁性COFs基固定化金屬親和吸附劑的制備及應(yīng)用(論文提綱范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 緒論 |
1.1 樣品前處理方法 |
1.1.1 固相萃取(SPE) |
1.1.2 固相微萃取(SPME) |
1.1.3 分散固相萃取(dSPE) |
1.1.4 磁性固相萃取(MSPE) |
1.2 樣品前處理材料 |
1.2.1 石墨烯 |
1.2.2 金屬有機框架 |
1.2.3 共價有機框架 |
1.3 COFs的合成方法 |
1.4 COFs的功能化方法 |
1.5 原子轉(zhuǎn)移自由基聚合及其在分離材料制備中的應(yīng)用 |
1.6 石墨烯和COFs在樣品前處理中的應(yīng)用 |
1.6.1 石墨烯在樣品前處理中的應(yīng)用 |
1.6.2 COFs在樣品前處理中的應(yīng)用 |
1.7 本論文的研究思路和研究內(nèi)容 |
1.8 參考文獻 |
第二章 瓶刷聚合物改性磁性石墨烯基固定化金屬親和吸附劑的制備及應(yīng)用 |
2.1 前言 |
2.2 實驗部分 |
2.2.1 主要試劑 |
2.2.2 主要實驗儀器 |
2.2.3 瓶刷聚合物改性磁性石墨烯基固定化金屬親和吸附劑的制備 |
2.2.4 magGO@BR-IMA-Cu~(2+)吸附劑的吸附性能研究 |
2.2.5 人全血純化 |
2.3 結(jié)果與討論 |
2.3.1 magGO@BR-IMA-Cu~(2+)吸附劑的表征 |
2.3.2 magGO@BR-IMA-Cu~(2+)的吸附性能研究 |
2.3.3 人全血中血紅蛋白的選擇性分離 |
2.4 本章小結(jié) |
2.5 參考文獻 |
第三章 Ti~A(4+)固定化的磁性核-殼共價有機框架納米微球高選擇性富集核苷酸 |
3.1 前言 |
3.2 實驗部分 |
3.2.1 主要試劑 |
3.2.2 磁性COFs基固定化金屬親和吸附劑的制備 |
3.2.3 色譜條件 |
3.2.4 磁性COFs基固定化金屬親和吸附劑的吸附性能研究 |
3.3 結(jié)果與討論 |
3.3.1 磁性COFs的合成條件優(yōu)化 |
3.3.2 磁性COFs基固定化金屬親和吸附劑的表征 |
3.3.3 磁性COFs基固定化金屬親和吸附劑的吸附性能研究 |
3.4 本章小結(jié) |
3.5 參考文獻 |
攻讀碩士學位期間取得的科研成果 |
致謝 |
(6)固定化Ti4+磁性納米粒子選擇性富集磷酸化蛋白/磷酸肽研究(論文提綱范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 緒論 |
1.1 磷酸化蛋白組學研究背景 |
1.2 磷酸化蛋白PTM富集類型及發(fā)展 |
1.2.1 化學衍生法 |
1.2.2 固定金屬離子親和色譜法 |
1.2.3 金屬氧化物親和色譜法 |
1.2.4 其他原理或方法 |
1.3 金屬親和吸附劑 |
1.4 以磁性粒子為基質(zhì)的親和吸附劑結(jié)構(gòu)及修飾方法 |
1.4.1 磁性金屬鰲合型吸附劑 |
1.4.2 磁性金屬氧化物型吸附劑 |
1.5 本論文的研究內(nèi)容 |
1.6 參考文獻 |
第二章 基于聚多巴胺輔助制備固定化Ti~(4+)磁性納米粒子用于選擇性富集磷酸化蛋白 |
2.1 前言 |
2.2 實驗部分 |
2.2.1 主要試劑 |
2.2.2 主要儀器 |
2.2.3 磁性納米粒子Fe_3O_4@PDA@AS-Ti~(4+)的制備 |
2.2.4 表征 |
2.2.5 條件優(yōu)化 |
2.2.6 吸附動力學測定 |
2.2.7 吸附等溫線測定 |
2.2.8 吸附劑穩(wěn)定性 |
2.2.9 吸附劑重復(fù)利用 |
2.2.10 混合蛋白的選擇性 |
2.2.11 實際樣品分析 |
2.3 結(jié)果與討論 |
2.3.1 Fe_3O_4@PDA@AS-Ti~(4+)的合成 |
2.3.2 吸附劑的表征 |
2.3.3 條件優(yōu)化 |
2.3.4 吸附動力學 |
2.3.5 吸附等溫線 |
2.3.6 吸附劑穩(wěn)定性 |
2.3.7 吸附劑重復(fù)利用 |
2.3.8 混合蛋白的選擇性 |
2.3.9 實際樣品分析 |
2.4 本章小結(jié) |
2.5 參考文獻 |
第三章 基于芐基氯硅烷輔助制備固定化Ti~(4+)磁性納米粒子對磷酸肽和磷酸化蛋白的選擇性富集 |
3.1 前言 |
3.2 實驗部分 |
3.2.1 主要試劑 |
3.2.2 主要儀器 |
3.2.3 磁性納米粒子Fe_3O_4@SiO_2@AS-Ti~(4+)的合成 |
3.2.4 酶解液的制備 |
3.2.5 吸附劑對磷酸肽的富集測試 |
3.2.6 上樣溶液中乙腈比例的優(yōu)化 |
3.2.7 混合蛋白的選擇性測試 |
3.2.8 實際樣品分析 |
3.3 結(jié)果與討論 |
3.3.1 Fe_3O_4@SiO_2@AS-Ti~(4+)的合成 |
3.3.2 吸附劑的表征 |
3.3.3 吸附劑性能測試 |
3.3.4 富集條件中乙腈比例的優(yōu)化 |
3.3.5 吸附劑選擇性測試 |
3.3.6 實際樣品分析 |
3.4 本章小結(jié) |
3.5 參考文獻 |
攻讀碩士學位期間取得的科研成果 |
致謝 |
(7)固定化金屬親和層析介質(zhì)在蛋白純化中的應(yīng)用進展(論文提綱范文)
前言 |
1. 固定化金屬親和色譜的基本原理 |
2. IMAC固定相構(gòu)成 |
(1)載體基質(zhì) |
(2)螯合配基 |
(3)金屬離子 |
3. 應(yīng)用現(xiàn)狀 |
(1)生物純化方面的應(yīng)用 |
(2)金屬離子脫落問題及改進 |
(3)蛋白載量方面 |
4. 展望 |
(8)自組裝肽功能化微納米材料的制備及在分離富集中的應(yīng)用(論文提綱范文)
摘要 |
Abstract |
主要中英文名詞及英文縮寫 |
第1章 緒論 |
1.1 多肽自組裝 |
1.1.1 多肽自組裝概述 |
1.1.2 多肽自組裝應(yīng)用前景 |
1.2 微流控芯片 |
1.2.1 微流控芯片概述 |
1.2.2 制作材料 |
1.2.3 微流控芯片修飾方法 |
1.3 磁固相萃取 |
1.3.1 磁固相萃取概述 |
1.3.2 磁固相萃取材料 |
1.3.3 磁固相萃取應(yīng)用前景 |
1.4 本論文研宄內(nèi)容及目的 |
第2章 蛋白質(zhì)/多肽在固體表面吸附機制研究 |
2.1 引言 |
2.2 實驗部分 |
2.2.1 試劑與儀器 |
2.2.2 樣品溶液配制 |
2.2.3 PMMA表面樣品制備 |
2.2.4 EAK16-Ⅱ和QEAK16-Ⅱ修飾PMMA表面表征方法 |
2.2.5 PMMA芯片電泳分離及抗蛋白吸附表征 |
2.3 結(jié)果和討論 |
2.3.1 PMMA表面多肽自組裝涂層表征 |
2.3.2 PMMA通道非特異性蛋白質(zhì)吸附和血液相容性 |
2.3.3 氨基酸電泳分離實驗 |
2.4 小結(jié) |
第3章 基于自組裝肽的微芯片和生物材料表面普適功能化研究 |
3.1 引言 |
3.2 實驗部分 |
3.2.1 試劑與儀器 |
3.2.2 溶液配制 |
3.2.3 PDMS微芯片的制作 |
3.2.4 PDMS和PS表面樣品的制備 |
3.2.5 PDMS和PS樣品表面的表征 |
3.2.6 PDMS和PS表面抗蛋白吸附表征 |
3.2.7 ELISA中BSA和AK-Ⅷ封閉效果的比較 |
3.3 結(jié)果與討論 |
3.3.1 PDMS和PS樣品表面表征 |
3.3.2 PDMS和PS表面抗蛋白吸附及生物相容性表征 |
3.3.3 ELISA中BSA和AK-Ⅷ封閉效果比較分析 |
3.4 小結(jié) |
第4章 基于自組裝肽的C_(18)功能化磁性氧化石墨烯的制備及在多肽分離富集中的應(yīng)用 |
4.1 引言 |
4.2 實驗部分 |
4.2.1 試劑與儀器 |
4.2.2 氧化石墨烯(GO)的合成 |
4.2.3 Fe_3O_4納米粒子的制備 |
4.2.4 Fe_3O_4@GO復(fù)合材料的合成 |
4.2.5 Fe_3O_4@GO-C_(18)VK-Ⅵ的制備 |
4.2.6 材料表征 |
4.2.7 材料富集酶解產(chǎn)物中的肽段 |
4.3 實驗結(jié)果與討論 |
4.3.1 材料表征分析 |
4.3.2 材料富集肌紅蛋白酶解產(chǎn)物中多肽的可行性分析 |
4.3.3 Fe_3O_4@GO-C_(18)VK-Ⅵ富集肌紅蛋白酶解產(chǎn)物中多肽的條件考察 |
4.3.4 Fe_3O_4@GO-C_(18)VK-Ⅵ富集人血清酶解產(chǎn)物中的多肽 |
4.4 小結(jié) |
第5章 基于自組裝肽功能化磁性碳基材料固定Fe3+及在磷酸化肽分離富集中的應(yīng)用 |
5.1 引言 |
5.2 實驗部分 |
5.2.1 試劑與儀器 |
5.2.2 合成不同粒徑Fe_3O_4納米粒子 |
5.2.3 Fe_3O_4@GO和Fe_3O_4@C磁性材料的制備 |
5.2.4 多肽EPAK-Ⅵ自組裝磁性復(fù)合材料的制備 |
5.2.5 Fe~(3+)固定的自組裝肽EPAK-Ⅵ功能化磁性復(fù)合材料的制備 |
5.2.6 磁性復(fù)合材料富集磷酸化肽段 |
5.3 結(jié)果與討論 |
5.3.1 磁性復(fù)合材料的表征 |
5.3.2 材料富集磷酸化肽的可行性分析 |
5.3.3 材料富集磷酸化肽的條件考察 |
5.3.4 材料富集磷酸化肽的選擇性探究 |
5.3.5 材料的循環(huán)利用 |
5.3.6 材料富集人血清中的磷酸化肽 |
5.4 小結(jié) |
第6章 基于自組裝肽的巰基功能化磁性碳納米粒子的制備及在Cu(Ⅱ)分離富集中的應(yīng)用 |
6.1 引言 |
6.2 實驗部分 |
6.2.1 試劑與儀器 |
6.2.2 Fe_3O_4納米粒子的制備 |
6.2.3 Fe_3O_4@C納米粒子的制備 |
6.2.4 Fe_3O_4@C-SH復(fù)合納米材料的合成 |
6.2.5 吸附實驗研究 |
6.2.6 誤差分析 |
6.2.7 解吸與重復(fù)實驗 |
6.3 結(jié)果與討論 |
6.3.1 磁性納米粒子的表征 |
6.3.2 材料吸附Cu(Ⅱ)離子可行性分析 |
6.3.3 材料吸附Cu(Ⅱ)條件考察 |
6.3.4 吸附等溫線模型分析 |
6.3.5 吸附動力學模型分析 |
6.3.6 溫度影響以及吸附熱力學模型分析 |
6.3.7 吸附劑解吸實驗 |
6.3.8 競爭離子吸附實驗 |
6.3.9 吸附劑循環(huán)利用 |
6.3.10 實際樣品分析 |
6.4 小結(jié) |
第7章 總結(jié) |
參考文獻 |
附錄1 |
附錄2 |
致謝 |
攻讀學位期間科研成果 |
(9)磁性限進親和介質(zhì)的制備及分離血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制肽的研究(論文提綱范文)
摘要 |
ABSTRACT |
符號說明 |
第一章 緒論 |
1.1 引言 |
1.2 生物活性肽的種類及功能 |
1.2.1 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制肽 |
1.2.2 其他生物活性肽 |
1.3 固定化金屬親和分離 |
1.3.1 固定化金屬親和色譜(IMAC)的組成 |
1.3.2 IMAC的應(yīng)用進展 |
1.4 限進介質(zhì)(RAM)及其應(yīng)用進展 |
1.4.1 內(nèi)表面反相(ISRP)RAM |
1.4.2 半滲透表面(SPS)RAM |
1.4.3 分子印跡(MIP)RAM |
1.5 主要研究內(nèi)容 |
1.5.1 研究的目的與意義 |
1.5.2 研究內(nèi)容 |
第二章 磁性固定化金屬親和介質(zhì)的制備及其吸附性能研究 |
2.1 引言 |
2.2 試劑與儀器 |
2.2.1 原料與試劑 |
2.2.2 儀器設(shè)備 |
2.3 實驗方法 |
2.3.1 磁性Fe_3O_4 納米顆粒的制備 |
2.3.2 磁性二氧化硅微球(mSiO_2)的制備 |
2.3.3 mSiO_2 的氨基化改性 |
2.3.4 IMAM(mSiO_2@Cu~(2+))的制備 |
2.3.5 表征和分析方法 |
2.3.6 IMAM吸附BSA的研究 |
2.4 結(jié)果與討論 |
2.4.1 mSiO_2 氨基化改性的工藝條件研究 |
2.4.2 mSiO_2 微球及mSiO_2-NH2 微球的表征 |
2.4.3 環(huán)氧基活化的工藝優(yōu)化 |
2.4.4 制備IMAM的工藝優(yōu)化 |
2.4.5 吸附條件對IMAM吸附BSA的影響 |
2.5 本章小結(jié) |
第三章 磁性限進親和介質(zhì)的制備及阻拒蛋白質(zhì)吸附的機理研究 |
3.1 引言 |
3.2 試劑與儀器 |
3.2.1 原料與試劑 |
3.2.2 儀器設(shè)備 |
3.3 實驗方法 |
3.3.1 RAAM(mSiO_2@Cu~(2+)-mPEG)的制備 |
3.3.2 RAAM的表征 |
3.3.3 接枝不同分子量mPEG的 RAAM在模擬體系中的吸附研究 |
3.3.4 RAAM的洗脫條件及重復(fù)利用性考察 |
3.3.5 RAAM阻拒BSA的機理研究 |
3.4 結(jié)果與討論 |
3.4.1 RAAM的表征 |
3.4.2 RAAM制備工藝的優(yōu)化 |
3.4.3 RAAM在模擬體系中的吸附效果考察 |
3.4.4 洗脫條件的優(yōu)化及重復(fù)利用性考察 |
3.4.5 RAAM阻拒大分子蛋白的機理研究 |
3.5 本章小結(jié) |
第四章 磁性限進親和介質(zhì)在分離酪蛋白酶解液中ACE抑制肽的應(yīng)用 |
4.1 引言 |
4.2 試劑與儀器 |
4.2.1 原料與試劑 |
4.2.2 儀器設(shè)備 |
4.3 實驗方法 |
4.3.1 酪蛋白的酶解 |
4.3.2 RAAM分離酪蛋白酶解液中的ACE抑制肽 |
4.3.3 分子量分布的測定 |
4.3.4 RP-HPLC分離 |
4.3.5 ACE抑制肽的結(jié)構(gòu)鑒定 |
4.3.6 ACE制肽的抑制類型 |
4.3.7 分子對接模擬 |
4.4 結(jié)果與討論 |
4.4.1 酪蛋白的酶解及抑制活性的測定 |
4.4.2 GPC測定分子量分布 |
4.4.3 RP-HPLC分離 |
4.4.4 ACE抑制肽的質(zhì)譜鑒定 |
4.4.5 ACE抑制肽LLYQEPVLGPVR構(gòu)效關(guān)系 |
4.4.6 ACE抑制肽LLYQEPVLGPVR的抑制模式 |
4.4.7 分子對接模擬 |
4.5 本章小結(jié) |
第五章 磁性限進親和介質(zhì)在分離馬氏珠母貝肉蛋白酶解液中ACE抑制肽的應(yīng)用 |
5.1 引言 |
5.2 試劑與儀器 |
5.2.1 原料與試劑 |
5.2.2 儀器設(shè)備 |
5.3 實驗方法 |
5.3.1 馬氏珠母貝肉蛋白的酶解 |
5.3.2 RAAM純化馬氏珠母貝肉蛋白酶解液中的ACE抑制肽 |
5.3.3 分子量分布的測定 |
5.3.4 RP-HPLC分離ACE抑制肽 |
5.3.5 ACE抑制肽的結(jié)構(gòu)鑒定 |
5.3.6 ACE抑制肽的抑制類型測定 |
5.3.7 分子對接模擬 |
5.3.8 POMPH在 SD大鼠體內(nèi)的抗高血壓活性 |
5.4 結(jié)果與討論 |
5.4.1 GPC分析分子量分布 |
5.4.2 抑制率的測定 |
5.4.3 RP-HPLC分離 |
5.4.4 ACE抑制肽的質(zhì)譜鑒定 |
5.4.5 ACE抑制肽的構(gòu)效關(guān)系 |
5.4.6 ACE抑制肽的抑制模式 |
5.4.7 分子對接模擬 |
5.4.8 POMPH在 SD大鼠體內(nèi)的降血壓作用 |
5.5 本章小結(jié) |
第六章 結(jié)論與展望 |
6.1 主要結(jié)論 |
6.2 創(chuàng)新點 |
6.3 展望 |
參考文獻 |
致謝 |
攻讀博士期間取得的學術(shù)成果 |
(10)多功能化硅膠基質(zhì)材料的制備及其應(yīng)用研究(論文提綱范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第1章 文獻綜述 |
1.1 功能化硅膠載體 |
1.1.1 無機載體硅膠性質(zhì) |
1.1.2 功能化硅膠載體 |
1.1.2.1 功能化硅膠載體概述 |
1.1.2.2 硅膠功能化修飾原理 |
1.1.2.3 硅膠功能化修飾方法 |
1.1.3 功能化硅膠的應(yīng)用 |
1.1.3.1 功能化硅膠在環(huán)境科學上的應(yīng)用 |
1.1.3.2 功能化硅膠在催化領(lǐng)域的應(yīng)用 |
1.1.3.3 功能化硅膠在分離科學上的應(yīng)用 |
1.2 功能化磁性納米硅膠材料 |
1.2.1 磁性材料特性 |
1.2.2 磁性納米Fe_3O_4 |
1.2.2.1 磁性納米Fe_3O_4的制備 |
1.2.2.2 磁性納米Fe_3O_4復(fù)合載體 |
1.2.2.3 Fe_3O_4@SiO_2納米材料的制備 |
1.2.2.4 Fe_3O_4@SiO_2表面修飾 |
1.2.3 磁性納米復(fù)合材料的應(yīng)用 |
1.2.3.1 在生物醫(yī)藥研究中的應(yīng)用 |
1.2.3.2 在催化領(lǐng)域中的應(yīng)用 |
1.2.3.3 在分離富集中的應(yīng)用 |
1.2.3.4 在其他領(lǐng)域的應(yīng)用 |
1.3 硼酸功能化硅膠 |
1.3.1 硼酸概述 |
1.3.2 硼酸功能化材料的應(yīng)用 |
1.3.2.1 硼酸與金屬 |
1.3.2.2 硼酸與糖類及糖蛋白/糖肽類 |
1.3.2.3 硼酸與分子固定化 |
1.3.2.4 硼酸與藥物釋放 |
1.3.2.5 其他應(yīng)用 |
1.4 功能化配體與金屬 |
1.4.1 金屬與含氨配體 |
1.4.2 金屬與含硫配體 |
1.4.3 金屬與含磷配體 |
1.4.4 金屬與雜環(huán)配體 |
1.5 硅氫加成反應(yīng) |
1.5.1 硅氫加成反應(yīng)概述 |
1.5.2 催化硅氫加成反應(yīng)的催化劑及催化機理 |
1.5.2.1 催化劑 |
1.5.2.2 催化機理 |
1.5.3 固載型催化劑在硅氫加成上的應(yīng)用 |
1.6 本論文立題依據(jù)及研究內(nèi)容 |
1.6.1 立題依據(jù) |
1.6.2 本論文主要研究內(nèi)容 |
第2章 氨基系列功能化硅膠的合成及應(yīng)用 |
2.1 引言 |
2.2 實驗儀器及材料 |
2.2.1 實驗儀器 |
2.2.2 實驗材料 |
2.3 實驗部分 |
2.3.1 氨基硅膠的合成 |
2.3.1.1 單胺及二氨基功能化硅膠的合成 |
2.3.1.2 氯丙基鍵合硅膠的合成 |
2.3.1.3 系列氨基功能化硅膠的合成 |
2.3.2 氨基系列鍵合硅膠的表征 |
2.3.2.1 紅外光譜(FT-IR) |
2.3.2.2 X射線衍射(XRD) |
2.3.2.3 場發(fā)射掃描電子顯微鏡(SEM)和X射線能譜(EDS) |
2.3.2.4 元素分析(EA) |
2.3.3 材料的應(yīng)用 |
2.3.3.1 重金屬離子吸附研究 |
2.3.3.2 在催化硅氫加成方面的應(yīng)用 |
2.4 實驗結(jié)果與討論 |
2.4.1 氨基硅膠材料的表征 |
2.4.1.1 紅外光譜 |
2.4.1.2 掃描電鏡與X射線能譜 |
2.4.1.3 元素分析 |
2.4.1.4 X射線衍射 |
2.4.2 氨基功能化硅膠對金屬離子的吸附應(yīng)用 |
2.4.2.1 金屬離子濃度對吸附性能的影響 |
2.4.2.2 pH對吸附性能的影響 |
2.4.2.3 吸附時間對吸附性能的影響 |
2.4.2.4 溫度對吸附性能的影響 |
2.4.3 氨基功能化硅膠固載金屬鉑型催化劑催化硅氫加成反應(yīng) |
2.4.3.1 不同氨基功能化硅膠固載金屬鉑能力 |
2.4.3.2 不同氨基功能化硅膠固載Pt催化劑催化性能考察 |
2.5 小結(jié) |
第3章 以S、N及雜環(huán)為配位基團的功能化硅膠的合成與應(yīng)用 |
3.1 引言 |
3.2 實驗儀器及材料 |
3.2.1 實驗儀器 |
3.2.2 實驗材料 |
3.3 實驗部分 |
3.3.1 材料的制備 |
3.3.1.1 SiO_2-SH的制備 |
3.3.1.2 SiO_2-SA的制備 |
3.3.1.3 SiO_2-8Q的合成 |
3.3.1.4 SiO_2-AMT的合成 |
3.3.2 材料的表征 |
3.3.2.1 各功能化基團含量測定 |
3.3.2.2 紅外光譜 |
3.3.2.3 場發(fā)射掃描電子顯微鏡(SEM) |
3.3.2.4 元素分析 |
3.3.3 催化應(yīng)用 |
3.3.3.1 制備固載金屬Pt催化劑 |
3.3.3.2 原子吸收分析金屬Pt含量 |
3.3.3.3 幾種催化劑催化硅氫加成反應(yīng)的比較 |
3.3.4 對錳礦的吸附研究 |
3.3.4.1 ICP-MS全分析錳礦溶液中的金屬含量 |
3.3.4.2 材料對錳礦的吸附性能 |
3.4 實驗結(jié)果與討論 |
3.4.1 材料的表征 |
3.4.1.1 紅外光譜 |
3.4.1.2 各功能化基團的定量分析 |
3.4.1.3 掃描電子顯微鏡(SEM) |
3.4.2 催化研究 |
3.4.2.1 對金屬Pt的固載能力 |
3.4.2.2 催化性能考察 |
3.4.2.3 穩(wěn)定性研究 |
3.4.3 對錳礦的吸附研究 |
3.5 小結(jié) |
第4章 硼酸功能化硅膠固載金屬Pt催化劑的制備與應(yīng)用 |
4.1 引言 |
4.2 實驗儀器及材料 |
4.2.1 實驗儀器 |
4.2.2 實驗材料 |
4.3 實驗部分 |
4.3.1 硼酸功能化硅膠的制備 |
4.3.1.1 復(fù)合物I合成路線(CPTES途徑) |
4.3.1.2 復(fù)合物II的合成路線(GPTES途徑) |
4.3.1.3 復(fù)合物III的合成路線(APTES途徑) |
4.3.2 硼酸功能化硅膠負載金屬Pt催化劑 |
4.3.3 硼酸功能化固載金屬Pt催化劑的表征 |
4.3.3.1 紅外光譜(FT-IR) |
4.3.3.2 場發(fā)射掃描電子顯微鏡(SEM)與X射線能譜(EDS) |
4.3.3.3 透射電子顯微鏡(TEM) |
4.3.3.4 X光電子能譜(XPS) |
4.3.3.5 電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀(ICP-OES) |
4.3.3.6 紫外光譜(UV) |
4.3.4 硼酸功能化硅膠在金屬Pt催化劑的活性評價 |
4.3.4.1 硼酸功能化硅膠固載Pt催化劑的驗證 |
4.3.4.2 硼酸功能化硅膠固載Pt催化劑的催化產(chǎn)率計算 |
4.3.4.3 核磁共振(NMR) |
4.4 實驗結(jié)果與討論 |
4.4.1 材料的表征 |
4.4.1.1 紅外表征(FT-IR) |
4.4.1.2 場發(fā)射掃描電子顯微鏡(SEM)與X射線能譜(EDS)分析 |
4.4.1.3 透射電子顯微鏡(TEM)表征 |
4.4.1.4 金屬鉑固載含量測定(ICP-OES) |
4.4.1.5 XPS表征 |
4.4.1.6 UV表征固載前后溶液中鉑含量的變化 |
4.4.2 硼酸功能化硅膠固載Pt催化劑催化硅氫加成反應(yīng)的應(yīng)用 |
4.4.3 各催化劑的催化條件的優(yōu)化及比較 |
4.4.3.1 不同催化劑用量及金屬Pt負載量的影響 |
4.4.3.2 不同反應(yīng)溫度的影響 |
4.4.3.3 不同反應(yīng)時間的影響 |
4.4.3.4 物料加入順序的影響 |
4.4.3.5 不同催化劑催化性能對比 |
4.4.3.6 催化劑重復(fù)利用特性 |
4.4.4 催化劑的適用性研究 |
4.4.4.1 端基鏈式烯烴的硅氫加成反應(yīng) |
4.4.4.2 產(chǎn)物的NMR鑒定 |
4.5 小結(jié) |
第5章 硼酸功能化硅膠對羅漢果糖苷V的吸附研究 |
5.1 引言 |
5.2 實驗儀器及材料 |
5.2.1 實驗儀器 |
5.2.2 實驗材料 |
5.3 實驗部分 |
5.3.1 硼酸功能化硅膠的制備 |
5.3.2 硼酸功能化硅膠的表征 |
5.3.3 HPLC分析羅漢果糖苷V |
5.3.4 硼酸功能化鍵合硅膠吸附羅漢果糖苷V的應(yīng)用 |
5.3.4.1 靜態(tài)吸附實驗 |
5.3.4.2 吸附實驗 |
5.3.4.3 吸附數(shù)據(jù)分析 |
5.3.4.4 半制備液相色譜法制備羅漢果糖苷V純品 |
5.4 實驗結(jié)果與討論 |
5.4.1 材料的表征 |
5.4.2 羅漢果糖苷V的HPLC分析 |
5.4.3 吸附分析 |
5.4.3.1 濃度對吸附性能的影響 |
5.4.3.2 pH值對吸附性能的影響 |
5.4.3.3 時間對吸附性能的影響 |
5.4.3.4 溫度對吸附性能的影響 |
5.4.3.5 解吸及回收率 |
5.4.4 半制備純化羅漢果糖苷V |
5.4.4.1 制備及純化 |
5.4.4.2 NMR定性研究 |
5.5 小結(jié) |
第6章 多種功能化納米磁性硅球的制備及在固載鉑催化劑上的應(yīng)用 |
6.1 引言 |
6.2 實驗儀器及材料 |
6.2.1 實驗儀器 |
6.2.2 實驗材料 |
6.3 實驗部分 |
6.3.1 磁性硅球中間體的制備 |
6.3.1.1 磁性Fe_3O_4納米粒子的制備 |
6.3.1.2 Fe_3O_4@SiO_2納米粒子的制備 |
6.3.1.3 中間體(Fe_3O_4@SiO_2-GP)的制備 |
6.3.2 磁性硅球的功能化 |
6.3.2.1 磁性硅球的硼酸基功能化(Fe_3O_4@SiO_2-APBA)的合成 |
6.3.2.2 磁性硅球的硝基功能化(Fe_3O_4@SiO_2-NA)的合成 |
6.3.2.3 磁性硅球的羧基功能化(Fe_3O_4@SiO_2-ABC)的合成 |
6.3.2.4 磁性硅球的巰基功能化(Fe_3O_4@SiO_2-AT)的合成 |
6.3.2.5 磁性硅球的磺酸基功能化(Fe_3O_4@SiO_2-SAA)的合成 |
6.3.3 固載金屬鉑型催化劑的合成 |
6.3.4 磁性材料的表征手段 |
6.3.4.1 傅里葉變換紅外(FT-IR)光譜表征 |
6.3.4.2 N_2等溫吸附線的測定(Brenauer-Emmett-Teller,BET) |
6.3.4.3 X射線衍射(XRD) |
6.3.4.4 原子吸收(AAS)測定固載金屬鉑含量 |
6.3.4.5 振動樣品磁強計(VSM) |
6.3.4.6 場發(fā)射掃描電子顯微鏡(SEM)和X射線能譜(EDS) |
6.3.4.7 透射電子顯微鏡(TEM) |
6.3.4.8 X射線光電子能譜(XPS)表征 |
6.3.4.9 氣相色譜(GC)分析催化產(chǎn)物 |
6.3.5 多功能化磁性硅球固載金屬Pt的催化性能考察 |
6.4 實驗結(jié)果與討論 |
6.4.1 材料的表征及結(jié)構(gòu)分析 |
6.4.1.1 傅里葉變換紅外(FT-IR)光譜表征 |
6.4.1.2 N_2等溫吸附線的測定(Brenauer-Emmett-Teller,BET) |
6.4.1.3 X射線衍射(XRD) |
6.4.1.4 功能化磁球的磁性測定(VSM) |
6.4.1.5 形貌特征分析(TEM和 SEM) |
6.4.1.6 金屬鉑含量分析(AAS) |
6.4.1.7 XPS分析 |
6.4.1.8 紫外分析(UV) |
6.4.2 催化應(yīng)用研究催化性能 |
6.4.2.1 1-己烯和甲基二氯硅烷硅氫化反應(yīng) |
6.4.2.2 苯乙烯和甲基二氯硅烷硅氫化反應(yīng) |
6.4.2.3 催化適用范圍考察 |
6.4.2.4 重復(fù)性考察 |
6.5 小結(jié) |
第7章 多羧基磁性硅球的制備與表征及其應(yīng)用 |
7.1 引言 |
7.2 實驗儀器及材料 |
7.2.1 實驗儀器 |
7.2.2 實驗材料 |
7.3 實驗部分 |
7.3.1 .多羧基磁性硅球固載鉑催化劑材料的制備 |
7.3.1.1 磁性納米粒子Fe_3O_4的制備 |
7.3.1.2 磁性納米硅球Fe_3O_4@SiO_2的制備 |
7.3.1.3 氨基功能化磁性硅膠(Fe_3O_4@SiO_2-AP)的合成 |
7.3.1.4 多羧基功能化磁性硅球(Fe_3O_4@SiO_2-EDTA)的合成 |
7.3.1.5 催化劑Fe_3O_4@SiO_2-EDTA@Pt的制備 |
7.3.2 材料的表征 |
7.3.2.1 紅外表征(FT-IR) |
7.3.2.2 X射線衍射(XRD) |
7.3.2.3 場發(fā)射掃描電子顯微鏡(SEM)和X射線能譜(EDS) |
7.3.2.4 透射電子顯微鏡(TEM) |
7.3.2.5 X光電子能譜(XPS) |
7.3.2.6 熱重分析(TGA) |
7.3.2.7 金屬鉑固載含量測定-原子吸收(AAS) |
7.3.2.8 振動樣品磁強計(VSM) |
7.3.2.9 紫外-可見分光光度儀表征(UV-Vis) |
7.3.2.10 N_2等溫吸附線的測定(Brenauer-Emmett-Teller,BET) .. |
7.3.2.11 氣相色譜分析(GC) |
7.3.3 數(shù)據(jù)分析及催化應(yīng)用 |
7.3.3.1 Fe_3O_4@SiO_2-AP中氨基的含量測定 |
7.3.3.2 Fe_3O_4@SiO_2-EDTA中羧基的含量測定 |
7.3.3.3 催化硅氫加成活性研究 |
7.3.3.4 產(chǎn)物分析方法及計算 |
7.4 實驗結(jié)果與討論 |
7.4.1 材料的表征 |
7.4.1.1 基團的含量測定 |
7.4.1.2 紅外表征(FT-IR) |
7.4.1.3 X射線粉末衍射(XRD) |
7.4.1.4 場發(fā)射掃描電子顯微鏡(SEM)與XDS能譜圖 |
7.4.1.5 透射電子顯微鏡(TEM) |
7.4.1.6 X射線光電子能譜(XPS)表征 |
7.4.1.7 熱重分析(TGA) |
7.4.1.8 磁性測定表征(VSM) |
7.4.1.9 紫外吸收表征(UV) |
7.4.1.10 BET及 AAS |
7.4.2 磁性Fe_3O_4@SiO_2-NH_2-EDTA@Pt催化硅氫加成反應(yīng)的應(yīng)用.. |
7.4.2.1 催化性能驗證 |
7.4.2.2 催化時間優(yōu)化 |
7.4.2.3 催化劑用量優(yōu)化 |
7.4.2.4 催化溫度優(yōu)化 |
7.4.2.5 底物物料比對催化反應(yīng)的影響 |
7.4.2.6 加入底物順序?qū)Υ呋磻?yīng)的影響 |
7.4.3 催化適用性及重復(fù)利用性研究 |
7.4.3.1 雙鍵位置與順反不同的烯烴 |
7.4.3.2 烯烴的適用范圍考察 |
7.4.3.3 催化劑的重復(fù)利用性 |
7.5 小結(jié) |
第8章 結(jié)論與展望 |
8.1 結(jié)論 |
8.2 展望 |
參考文獻 |
發(fā)表論文和參加科研情況說明 |
附錄 |
致謝 |
四、A NOVEL METAL CHELATE AFFINITY ADSORBENT FOR PROTEIN UPTAKE(論文參考文獻)
- [1]基于大孔聚合物金屬螯合層析介質(zhì)的制備與評價研究[D]. 侯恒磊. 北京石油化工學院, 2021(02)
- [2]配位親和固相萃取吸附劑的制備及對生物活性成分的分析[D]. 佟育奎. 哈爾濱師范大學, 2021(08)
- [3]新型磁性親和納米復(fù)合物的制備及其在蛋白質(zhì)/多肽分離分析中的應(yīng)用[D]. 李嘉元. 南京大學, 2020(12)
- [4]高密度金屬親和功能化磁性石墨烯選擇性分離純化富組氨酸蛋白質(zhì)[D]. 梁毅勛. 西北大學, 2020(06)
- [5]磁性石墨烯基和磁性COFs基固定化金屬親和吸附劑的制備及應(yīng)用[D]. 張曉霞. 西北大學, 2020(02)
- [6]固定化Ti4+磁性納米粒子選擇性富集磷酸化蛋白/磷酸肽研究[D]. 王婕. 西北大學, 2020(02)
- [7]固定化金屬親和層析介質(zhì)在蛋白純化中的應(yīng)用進展[J]. 侯恒磊,池偉亞,安寧,公丕勝,靳海波,齊莉,何廣湘,郭曉燕,張榮月. 當代化工研究, 2020(03)
- [8]自組裝肽功能化微納米材料的制備及在分離富集中的應(yīng)用[D]. 李南. 陜西師范大學, 2019
- [9]磁性限進親和介質(zhì)的制備及分離血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制肽的研究[D]. 劉彭如. 廣西大學, 2019(06)
- [10]多功能化硅膠基質(zhì)材料的制備及其應(yīng)用研究[D]. 李來明. 天津大學, 2019(01)
標簽:蛋白質(zhì)磷酸化論文; 親和層析論文; 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)論文; 蛋白質(zhì)純化論文; 多肽合成論文;