一、甘薯品種F_(3282)凝集素的提取及性質(zhì)研究(論文文獻(xiàn)綜述)
孫靖棣[1](2012)在《農(nóng)桿菌介導(dǎo)龍膽花色素苷5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶基因的番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及優(yōu)化》文中研究說明番茄(Lycopersicon esculentum Mill)系茄科(Solanaceae)番茄屬(Lycopersicon)一年生或多年生草本雙子葉植物,具有富含多種營養(yǎng)成分,較為容易成活,培育時間較短,基因組DNA組成較清楚,遺傳轉(zhuǎn)化較容易等優(yōu)點。番茄作為植物遺傳轉(zhuǎn)化研究中的模式植物,其研究結(jié)果不僅具有重要的理論意義而且具有重要的應(yīng)用價值。本研究以質(zhì)粒pCAMBIA1304為載體,龍膽UDP-葡萄糖:花色素苷5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶(Gt5GT7)基因為目的基因,構(gòu)建植物表達(dá)載體。以發(fā)根農(nóng)桿菌菌株A4為介導(dǎo)系統(tǒng),將Gt5GT7基因?qū)?0種基因型番茄植株,旨在建立高頻番茄遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)。主要研究結(jié)果如下:1、根據(jù)GenBank公布的Gt5GT7基因(AB363839)序列設(shè)計引物,并分別在兩端增加BglII和BstEII酶切位點,進(jìn)行pcr4topo-Gt5GT7質(zhì)粒的PCR擴(kuò)增反應(yīng),通過試劑盒回收純化提取Gt5GT7基因。再用限制性內(nèi)切酶BglII和BstEII對通過PCR擴(kuò)增獲得的Gt5GT7目的基因和pCAMBIA1304質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切?;厥誃glII和BstEII雙酶切得到目的基因Gt5GT7和pCAMBIA1304質(zhì)粒大片段,然后用Takara連接試劑盒連接Gt5GT7基因和pCAMBIA1304質(zhì)粒大片段,再將連接體系轉(zhuǎn)化大腸桿菌菌株DH5α。提取抗性菌落的質(zhì)粒,用BglII和BstEII對質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切檢測,結(jié)果表明,植物表達(dá)載體pCAMBIA1304-Gt5GT7構(gòu)建成功。2、采用電轉(zhuǎn)化法,將構(gòu)建成功的植物表達(dá)載體pCAMBIA1304-Gt5GT7導(dǎo)入到發(fā)根農(nóng)桿菌菌株A4中。利用重組的發(fā)根農(nóng)桿菌菌株A4為介導(dǎo)系統(tǒng),采用葉盤法,將植物表達(dá)載體pCAMBIA1304-Gt5GT7導(dǎo)入番茄,以建立高頻番茄遺傳轉(zhuǎn)化再生體系。3、本研究通過大量實驗篩選得出:最佳愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:MSB5+6-BA2.0mg/L+IAA0.2mg/L-0.5mg/L;最佳不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為: MSB5+6-BA2.0mg/L+IAA0.15mg/L-0.5mg/L;最佳生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:1/2MS+IBA0.5mg/L。4、以本研究中構(gòu)建的植物表達(dá)載體pCAMBIA1304-Gt5GT7為陽性對照,以野生型番茄植株基因組為陰性對照,對通過遺傳轉(zhuǎn)化得到轉(zhuǎn)Gt5GT7基因再生植株基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng),進(jìn)行檢測。檢測結(jié)果表明:有再生植株擴(kuò)增出大小為1892bp的目標(biāo)條帶,與陽性對照擴(kuò)增出的條帶位置相同,陰性對照無目標(biāo)條帶,初步說明目的基因Gt5GT7已整合到番茄基因組DNA中。5、在轉(zhuǎn)Gt5GT7基因的番茄再生植株中,表現(xiàn)型出現(xiàn)變化:未轉(zhuǎn)化番茄(賊不偷)成熟果實為綠色,轉(zhuǎn)基因番茄(賊不偷)再生植株成熟果實為淡橘色。
劉進(jìn)增,李為蘭,周峰[2](2011)在《不同的理化因素對糯米凝集素活性的影響》文中指出凝集素是一種能使血細(xì)胞發(fā)生凝集的糖蛋白,同時又是食品中的抗?fàn)I養(yǎng)因子,其凝集活性受多種因素影響.本文研究不同的理化因素對糯米凝集素活性的影響,以便提高食物的安全性.
劉紅霞[3](2008)在《合歡種子凝集素分離、部分功能鑒定和基因克隆》文中認(rèn)為植物凝集素是一種含有非催化結(jié)構(gòu)域并能可逆結(jié)合到特異單糖或寡糖上的植物(糖)蛋白。植物凝集素的諸多功能都與它最重要的性質(zhì)糖結(jié)合專一性有關(guān)。由于植物凝集素廣泛存在并且種類繁多,加之其特定的作用機(jī)理,使得植物凝集素在植物抗病蟲基因工程研究中具有較大的應(yīng)用潛力。本研究以合歡Albizia julibrissin Durazz種子為研究材料,分離了合歡種子凝集素,研究了其理化性質(zhì)及凝集素對幾種真菌孢子萌發(fā)和菌絲生長的影響;同時采用RT-PCR和RACE相結(jié)合的方法完成了合歡種子凝集素基因的分離克隆。在此基礎(chǔ)上利用生物信息學(xué)方法對獲得的合歡種子凝集素基因進(jìn)行了結(jié)構(gòu)功能預(yù)測分析。通過上述研究得到了以下結(jié)果:1.采用硫酸銨沉淀、分子篩層析并結(jié)合蛋白超敏可逆染色試劑盒的方法純化得到了合歡種子凝集素(Albizia julibrissin seed lectin,AJLs),用SDS-PAGE測定其相對分子量為25.4kDa,IEF-PAGE測定其等電點為7.96。蒽酮比色法測定其中性糖含量為2.65%,是一種糖蛋白;凝血活性測定表明,其最低凝集限度為1.95μg/ml,N-乙酰葡糖胺(GlcNAc,N-acetylgucosamine)是合歡種子凝集素的專一性抑制糖。2.對合歡種子凝集素的功能研究表明,凝集素對灰葡萄孢Botrytis cinerea和大麗輪枝菌Verticillium dahliae的孢子萌發(fā)具有較強(qiáng)的抑制作用;對細(xì)交鏈孢菌Alternaria alternata菌絲生長有一定的抑制作用,對尖孢鐮刀菌Fusariumoxysporum菌絲生長的抑制作用不明顯。3.首次克隆得到了合歡凝集素基因的cDNA全長序列。該cDNA全長序列由1096個核苷酸組成,開放閱讀框為747個核苷酸,編碼248個氨基酸。5’端和3’端各有82和267個核苷酸的非編碼區(qū)(UTR),3’端有polyA尾。4.利用相關(guān)軟件及在線生物信息學(xué)分析站點對合歡種子凝集素基因編碼蛋白的理化性質(zhì)進(jìn)行了分析。結(jié)果表明,目的蛋白的pI為8.14,預(yù)測分子量為26.8kDa。用ClustalX1.83軟件進(jìn)行了同源性比對,并構(gòu)建了目的蛋白的系統(tǒng)進(jìn)化樹。合歡種子凝集素基因編碼蛋白的氨基酸序列與含羞草亞科Mimosoideae球花豆屬的Parkia Platycephala氨基酸序列同源性達(dá)85%。5.利用在線生物信息學(xué)分析服務(wù)平臺對合歡種子凝集素cDNA基因編碼蛋白的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了預(yù)測。結(jié)果表明,目的蛋白在第12~34位氨基酸之間具有明顯的疏水區(qū)和跨膜區(qū)域。二級結(jié)構(gòu)預(yù)測說明目的蛋白的α螺旋的比例在30%以上,β折疊均在20%以下,是一種混合型蛋白。應(yīng)用同源建模法構(gòu)建了合歡種子凝集素基因編碼蛋白的三級結(jié)構(gòu),并采用PROCHECK軟件對模型的結(jié)構(gòu)質(zhì)量進(jìn)行了評價,最優(yōu)模型為EsyPreD方法構(gòu)建的模型。6.通過網(wǎng)絡(luò)服務(wù)器平臺進(jìn)行了合歡種子凝集素cDNA基因編碼蛋白的功能預(yù)測。結(jié)果顯示,合歡種子凝集素基因編碼的蛋白是Glycohydro18 superfamily的新成員,具有Glycohydro18的結(jié)構(gòu)功能域,活性位點位于第146~154之間(序列為LDGVDFDIE),而且有多個磷酸化位點。信號肽區(qū)域位于1~27個氨基酸,即MGTKLRNPKIILVLQVCLIMMVSTAKA??缒て挝挥诘?2~34位氨基酸殘基。亞細(xì)胞定位分析表明目的蛋白是一種分泌性蛋白(胞外蛋白)。本論文對合歡種子凝集素的研究填補(bǔ)了我國在含羞草亞科植物凝集素方面的研究空白,并為今后開展木本植物凝集素基因的在抗病蟲研究方面的應(yīng)用奠定了一定的理論基礎(chǔ),具有一定的的理論價值和現(xiàn)實意義。
陳莉[4](2007)在《麝香百合和仙客來轉(zhuǎn)Mn-SOD基因植株的獲得及其耐熱性鑒定》文中研究說明本研究以麝香百合、仙客來為材料,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將Mn-SOD基因轉(zhuǎn)入植株中,通過篩選、檢測,獲得轉(zhuǎn)Mn-SOD基因植株,并研究高溫逆境脅迫對轉(zhuǎn)基因和未轉(zhuǎn)基因植株的生理機(jī)制的影響,從而為提高其耐熱、抗衰老及其他方面的抗脅迫能力,實現(xiàn)品種的抗性改良奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法獲得麝香百合抗性植株通過研究Mn-SOD基因轉(zhuǎn)化中影響葉片轉(zhuǎn)化效率的多種因素,包括Kan濃度、抑菌素濃度、預(yù)培養(yǎng)時間、共培養(yǎng)時間,侵染菌液濃度和侵染時間等,確立了50mg/LKan,500mg/LCef,2d的預(yù)培養(yǎng),3d的共培養(yǎng),OD600為0.6,侵染10min的麝香百合遺傳轉(zhuǎn)化體系,并獲得了百合抗性植株。2篩選出仙客來塊莖誘導(dǎo)不定芽培養(yǎng)基和不定芽生根培養(yǎng)基以仙客來種子萌發(fā)產(chǎn)生的塊莖為外植體,誘導(dǎo)分化不定芽的最適培養(yǎng)基為MS+2.0mg/L6-BA+1.0 mg/L NAA,并且遮光處理可提高分化率。仙客來不定芽最適生根培養(yǎng)基為1/2MS+1.0mg/LIBA或MS+1.5mg/LNAA。3外源基因的檢測對31個百合抗性株系進(jìn)行PCR擴(kuò)增,結(jié)果有9個株系擴(kuò)增出663bp的特異條帶,而對照百合植株無特異性條帶出現(xiàn),初步證明外源基因已轉(zhuǎn)入百合植株中。分別對PCR檢測呈陽性的5個仙客來株系(由周連霞師姐轉(zhuǎn)化所得)和9個百合株系進(jìn)行Southern雜交檢測,有3個仙客來株系檢測到一條雜交帶,證明Mn-SOD基因已經(jīng)轉(zhuǎn)入到仙客來基因組中;而在百合株系中,未檢測出雜交條帶。4轉(zhuǎn)Mn-SOD基因仙客來和百合組培苗對高溫的抗性測定了轉(zhuǎn)基因和對照仙客來和百合組培苗在36℃高溫脅迫下的生理反應(yīng),結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因仙客來的SOD活性始終高于對照植株,細(xì)胞膜透性和MDA的含量上升的速度低于對照植株,可溶性蛋白含量高于對照植株,表明轉(zhuǎn)基因植株的耐熱性高于對照植株;轉(zhuǎn)基因百合的SOD活性也高于對照植株,細(xì)胞膜透性上升的速度低于對照植株,可溶性蛋白含量高于對照植株,但MDA在轉(zhuǎn)基因百合和對照百合植株中差異不明顯。
張桂寅[5](2005)在《棉花黃萎病抗性表現(xiàn)及其基因表達(dá)的研究》文中指出棉花黃萎病是嚴(yán)重影響棉花產(chǎn)量和纖維品質(zhì)的病害,選育和利用抗病品種是一種經(jīng)濟(jì)、有效的防治措施。深入研究棉花抗黃萎病基因表達(dá)規(guī)律,對有效地培育抗病品種具有重要意義。本研究利用我國20世紀(jì)50年代以來培育的108個棉花抗枯、黃萎病品種,研究了不同棉花品種的抗黃萎病反應(yīng)規(guī)律,分析了不同抗病基因型對產(chǎn)量和品質(zhì)性狀的影響;通過系譜分析了解不同來源抗病基因的抗黃萎病性能;分析了高抗海島棉品種和感病陸地棉品種分離世代表型癥狀與內(nèi)部癥狀的關(guān)系以及表型癥狀對遺傳方式確定的影響;采用表型癥狀和分子標(biāo)記相結(jié)合,研究了棉花抗病性對黃萎病菌不同致病力群落結(jié)構(gòu)的影響;利用cDNA-AFLP技術(shù)研究了海島棉品種在黃萎病菌誘導(dǎo)下抗病相關(guān)基因的差異表達(dá)。獲得主要結(jié)果如下: 1.利用因子分析法對陸地棉抗黃萎病反應(yīng)規(guī)律進(jìn)行研究,整個發(fā)病時期的病情發(fā)展由4個主因子決定,且第1、2主因子具有較大的方差貢獻(xiàn)率。第1主因子(F1)主要與品種的7月26日至8月5日的黃萎病病情指數(shù)有關(guān),第2主因子(F2)主要與品種的8月20日至9月4日的黃萎病病情指數(shù)有關(guān)。利用因子分析結(jié)果將108個品種劃分為4個類型,前期抗病性較好而后期發(fā)病較快的第Ⅰ類品種,其產(chǎn)量和纖維品質(zhì)均較差;而前后期病指均較低發(fā)病緩慢的第Ⅱ類品種則小區(qū)產(chǎn)量最高。第Ⅲ類品種前期發(fā)病較慢,中期發(fā)病較快,產(chǎn)量高于第Ⅳ類品種;前期發(fā)病較快,中期發(fā)病平緩,后期仍具有較高病指的第Ⅳ類品種,小區(qū)產(chǎn)量較低。某一階段的抗病性并不能完全代表品種的抗病性。 2.分析棉花品種黃萎病病指與產(chǎn)量及其構(gòu)成因素的關(guān)系得出,病情指數(shù)與產(chǎn)量呈顯著負(fù)相關(guān),對產(chǎn)量的影響主要由于單株結(jié)鈴數(shù)減少造成。開花初期的抗病性對產(chǎn)量及其構(gòu)成因素影響較小,當(dāng)?shù)谝粋€發(fā)病高峰到來后,抗病性對產(chǎn)量及其構(gòu)成因素影響增大??共⌒詫φR度和馬克隆值影響最大,對纖維長度和伸長率影響次之,對纖維比強(qiáng)度影響最小。利用偏相關(guān)分析不同病級病株比例與產(chǎn)量性狀的關(guān)系,結(jié)果表明0級單株的比例與產(chǎn)量性狀呈負(fù)相關(guān),1級病株的比例與產(chǎn)量性狀呈正相關(guān),2級和3級病株比例與產(chǎn)量性狀的關(guān)系隨生育進(jìn)程改變,4級病株比例與產(chǎn)量性狀呈顯著或極顯著負(fù)相關(guān);不同病級病株比例與纖維品質(zhì)性狀的關(guān)系和不同病級病株比例與產(chǎn)量性狀的關(guān)系基本一致。 3.分析了52個品種的系譜組成及不同來源抗性基因?qū)γ藁ㄆ贩N黃萎病抗性的影響,結(jié)果顯示岱字棉與斯字棉血統(tǒng)在我國棉花抗病品種中占有較大的比例,其次是福字棉。抗性最好的品種具有較大比例的斯字棉血統(tǒng);抗性最差的品種具有較小比例的斯字棉血統(tǒng),而多數(shù)品種含有金字棉血統(tǒng)成分;以福字棉血統(tǒng)為主的品種抗性較差。 4.在黃萎病發(fā)病高峰期對(邯208×Pima90-53)F2、(中棉所8號×Pima90-53)F2及(冀棉20號×邯208)F2單株的黃萎病抗性進(jìn)行了調(diào)查。分析表型癥狀與內(nèi)部癥狀的關(guān)系得出,外部表現(xiàn)病級與剖桿癥狀病級呈顯著正相關(guān)。對海島棉與陸地棉后代抗感單株分離比例分析可知,抗黃萎病基因受1對或少數(shù)2對主效顯性基因控制。 5.以海島棉品種Pima90-53和陸地棉15個品種為分離寄主,共分離出67個黃萎病菌系。以Pima90-53、冀棉20號、邯208和中棉所8號為鑒別寄主,對分離菌系進(jìn)行了致病力鑒定,結(jié)果顯示同一地塊所分離的菌系由致病力連續(xù)變化的多種致病力類型組成。品種的抗性與黃萎病不同
余萍,林少琴,林玉滿,林曉紅[6](2000)在《甘薯品種F3282凝集素的提取及性質(zhì)研究》文中認(rèn)為甘薯品種 F32 82 的浸取液 ,經(jīng)硫酸銨分級 ,甲殼素層析后 ,再經(jīng)分子篩過濾 ,獲得在 PAGE上呈現(xiàn)單一蛋白質(zhì)帶的甘薯凝集素 ( Ipomoea Batatas L ectin,IBL)。IBL對鴿、兔、人血等紅細(xì)胞均有凝集作用 ,其中對鴿血的凝集活性最高 ,最低凝集濃度為 0 .0 5μg/ ml。IBL除凝集紅細(xì)胞外 ,還可凝集小鼠脾細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞 ;其對熱相當(dāng)穩(wěn)定 ,90℃加熱 10 min,仍有部分活性 ;IBL對酸處理較堿處理穩(wěn)定 ,但可被阿拉伯糖或乳糖等解除凝集活性。IBL的中性糖含量為 5.4 %。
二、甘薯品種F_(3282)凝集素的提取及性質(zhì)研究(論文開題報告)
(1)論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求:
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景,再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題,并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點或解決方法。
寫法范例:
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。
(2)本文研究方法
調(diào)查法:該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法:用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實驗法:通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法:通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料,從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實證研究法:依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實踐的需要提出設(shè)計。
定性分析法:對研究對象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究,這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法:通過具體的數(shù)字,使人們對研究對象的認(rèn)識進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法:運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法:這是社會科學(xué)用來分析社會現(xiàn)象的一種方法,從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。
模擬法:通過創(chuàng)設(shè)一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、甘薯品種F_(3282)凝集素的提取及性質(zhì)研究(論文提綱范文)
(1)農(nóng)桿菌介導(dǎo)龍膽花色素苷5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶基因的番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及優(yōu)化(論文提綱范文)
摘要 |
Abstract |
引言 |
第一章 文獻(xiàn)綜述 |
1.1 番茄基因工程研究進(jìn)展 |
1.1.1 抗蟲轉(zhuǎn)基因方面 |
1.1.2 抗病轉(zhuǎn)基因方面 |
1.1.3 抗逆轉(zhuǎn)基因方面 |
1.1.4 改良品質(zhì)方面 |
1.1.5 作為生物反應(yīng)器方面 |
1.2 番茄遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù) |
1.2.1 番茄遺傳轉(zhuǎn)化方法 |
1.2.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化機(jī)理 |
1.2.3 影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)番茄遺傳轉(zhuǎn)化的因素 |
1.3 UDP-葡萄糖:花色素苷 5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶(5GT) |
1.3.1 植物糖基轉(zhuǎn)移酶(GTs) |
1.3.2 龍膽 UDP-葡萄糖:花色素苷 5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶(Gt5GT7) |
第二章 材料與方法 |
2.1 材料 |
2.1.1 菌種和質(zhì)粒 |
2.1.2 植物材料 |
2.1.3 PCR 擴(kuò)增引物序列 |
2.1.4 工具酶和生化試劑 |
2.1.5 DNA Marker |
2.1.6 主要儀器設(shè)備 |
2.1.7 培養(yǎng)基配方 |
2.2 方法 |
2.2.1 表達(dá)載體 pCAMBIA1304- Gt5GT7 的構(gòu)建及重組農(nóng)桿菌 |
2.2.2 番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及優(yōu)化 |
第三章 結(jié)果與分析 |
3.1 表達(dá)載體 pCAMBIA1304-Gt5GT7 的構(gòu)建及重組農(nóng)桿菌 |
3.1.1 質(zhì)粒 pcr4topo-Gt5GT7 的 PCR 擴(kuò)增 |
3.1.2 質(zhì)粒 pCAMBIA1304 與目的基因 Gt5GT7 的雙酶切 |
3.1.3 表達(dá)載體 pCAMBIA1304-Gt5GT7 的鑒定 |
3.1.4 表達(dá)載體 pCAMBIA1304- Gt5GT7 重組農(nóng)桿菌菌株 A4 |
3.2 番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及優(yōu)化 |
3.2.1 Cl2滅菌時間對番茄種子發(fā)芽的影響 |
3.2.2 不同預(yù)培養(yǎng)時間對番茄轉(zhuǎn)化效率的影響 |
3.2.3 農(nóng)桿菌菌液浸泡外植體的時間對轉(zhuǎn)化效率的影響 |
3.2.4 農(nóng)桿菌菌液濃度對外植體轉(zhuǎn)化效率的影響 |
3.2.5 共培養(yǎng)條件對番茄外植體轉(zhuǎn)化效率的影響 |
3.2.6 激素配比對不同基因型番茄愈傷組織誘導(dǎo)的影響 |
3.2.7 激素配比對不同基因型番茄不定芽誘導(dǎo)的影響 |
3.2.8 激素配比對不同基因型番茄生根的影響 |
3.2.9 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化 |
3.3 轉(zhuǎn)基因植株的檢測 |
3.3.1 再生轉(zhuǎn)化植株的 PCR 檢測 |
3.3.2 轉(zhuǎn)基因番茄(賊不偷)果實的性狀分析 |
第四章 討論 |
4.1 植物表達(dá)載體的構(gòu)建 |
4.2 農(nóng)桿菌的鑒定 |
4.3 無菌苗的獲得 |
4.4 番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化 |
4.4.1 基因型對番茄遺傳轉(zhuǎn)化的影響 |
4.4.2 不同侵染條件對番茄遺傳轉(zhuǎn)化的影響 |
4.4.3 激素對番茄遺傳轉(zhuǎn)化的影響 |
4.5 GUS 組織化學(xué)分析法的改進(jìn) |
4.6 PCR 分子檢測 |
4.7 轉(zhuǎn)基因番茄果實的性狀分析 |
結(jié)論 |
參考文獻(xiàn) |
附錄 |
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的主要科研成果 |
后記 |
(2)不同的理化因素對糯米凝集素活性的影響(論文提綱范文)
1 材料和方法 |
1.1 實驗材料 |
1.2 糯米凝集素的提取 |
1.3 實驗處理 |
2 結(jié)果與分析 |
2.1 不同溫度對糯米凝集素處理的結(jié)果 |
2.2 不同pH值對糯米凝集素處理的結(jié)果 |
2.3 不同化學(xué)因子對糯米凝集素處理的結(jié)果 |
3 討論 |
(3)合歡種子凝集素分離、部分功能鑒定和基因克?。ㄕ撐奶峋V范文)
摘要 |
ABSTRACT |
1 引言 |
1.1 植物凝集素的研究進(jìn)展 |
1.1.1 凝集素的發(fā)現(xiàn)及定義 |
1.1.2 凝集素的分布 |
1.1.3 植物凝集素的命名與分類 |
1.1.4 植物凝集素的性質(zhì) |
1.1.5 凝集素的功能 |
1.1.6 植物凝集素的分離及基因的克隆 |
1.2 植物凝集素在抗病蟲植物基因工程中的研究概況 |
1.3 凝集素在植物抗病性方面的研究與應(yīng)用 |
1.4 本論文的立體依據(jù)和技術(shù)路線 |
1.4.1 立項依據(jù)與研究意義 |
1.4.2 研究的技術(shù)路線 |
2 合歡種子凝集素的分離及部分性質(zhì)研究 |
2.1 材料 |
2.1.1 植物材料 |
2.1.2 試劑與儀器設(shè)備 |
2.2 研究方法 |
2.2.1 合歡種子凝集素蛋白粗提物的制備 |
2.2.2 合歡凝集素(AJLs)的純化 |
2.2.3 合歡種子凝集素性質(zhì)的測定 |
2.2.4 N-末端氨基酸序列測定 |
2.3 結(jié)果與分析 |
2.3.1 合歡種子凝集素(AJLs)的分離純化 |
2.3.2 合歡種子凝集素(AJLs)的性質(zhì)測定 |
2.3.3 合歡種子凝集素(AJLs)N-端氨基酸的測定 |
2.4 討論 |
2.4.1 合歡種子凝集素蛋白的分離方法的選擇 |
2.4.2 關(guān)于合歡種子凝集素 |
2.4.3 合歡種子凝集素(AJLs)N-端氨基酸的測定 |
2.5 小結(jié) |
3 合歡種子凝集素的對真菌生長的影響 |
3.1 材料 |
3.1.1 試驗用菌種 |
3.1.2 合歡種子凝集素 |
3.1.3 培養(yǎng)基 |
3.2 研究方法 |
3.2.1 試驗菌種的培養(yǎng) |
3.2.2 不同濃度合歡種子凝集素的配制 |
3.2.3 接種方法 |
3.3 結(jié)果與分析 |
3.3.1 合歡種子凝集素對真菌孢子萌發(fā)的影響 |
3.3.2 合歡種子凝集素對真菌對菌絲生長的抑制 |
3.4 討論 |
3.5 小結(jié) |
4 合歡種子凝集素的基因克隆及序列分析 |
4.1 |
4.1.1 試驗材料 |
4.1.2 試劑和儀器設(shè)備 |
4.2 研究方法 |
4.2.1 合歡總RNA提取和質(zhì)量檢測 |
4.2.2 合歡種子凝集素基因片段的RT-PCR擴(kuò)增、克隆和鑒定 |
4.2.3 合歡種子凝集素基因全長cDNA的獲得 |
4.3 結(jié)果與分析 |
4.3.1 DNA/RNA的質(zhì)量分析 |
4.3.2 合歡凝集素基因片段克隆、鑒定和序列分析 |
4.3.3 合歡種子凝集素基因全長cDNA的克隆、鑒定及分析 |
4.4 討論 |
4.4.1 關(guān)于合歡總RNA的提取 |
4.4.2 關(guān)于合歡種子凝集素基因的cDNA全長序列的獲得方法 |
4.4.3 關(guān)于合歡種子凝集素基因cDNA及其編碼蛋白的Blast分析 |
4.5 小結(jié) |
5 合歡種子凝集素基因編碼蛋白的結(jié)構(gòu)和功能預(yù)測 |
5.1 材料和方法 |
5.1.1 合歡種子凝集素cDNA編碼蛋白的結(jié)構(gòu)分析 |
5.1.2 合歡凝集素基因編碼蛋白的功能預(yù)測 |
5.2 結(jié)果與分析 |
5.2.1 合歡凝集素基因編碼蛋白的結(jié)構(gòu)分析 |
5.2.2 合歡凝集素基因編碼蛋白的功能預(yù)測 |
5.3 討論 |
5.3.1 氨基酸結(jié)構(gòu)預(yù)測分析 |
5.3.2 功能預(yù)測 |
5.3.3 合歡凝集素基因編碼蛋白系統(tǒng)進(jìn)化樹分析 |
5.3.4 關(guān)于Glyco_hydro_18 superfamily |
5.4 小結(jié) |
6 結(jié)論及研究展望 |
6.1 結(jié)論 |
6.2 研究展望 |
主要參考文獻(xiàn) |
附錄1 正文中應(yīng)用的緩沖液和培養(yǎng)基的配制 |
附錄2 論文縮略詞表 |
附圖 |
1.凝血活性測定圖 |
2.AJLS對灰葡萄孢BOTRYTIS CINEREA孢子萌發(fā)的影響 |
3.AJLS對尖孢鐮刀菌F.OXYSPORUM菌絲生長影響菌絲生長的影響 |
作者簡介 |
導(dǎo)師簡介 |
在讀期間獲得的成果及論著目錄 |
致謝 |
(4)麝香百合和仙客來轉(zhuǎn)Mn-SOD基因植株的獲得及其耐熱性鑒定(論文提綱范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文獻(xiàn)綜述 |
1.1 植物遺傳轉(zhuǎn)化和基因工程 |
1.1.1 植物遺傳轉(zhuǎn)化 |
1.1.2 植物基因工程 |
1.2 植物的氧代謝 |
1.2.1 活性氧的種類與特性 |
1.2.2 活性氧對植物的傷害作用 |
1.2.3 活性氧的清除系統(tǒng) |
1.2.4 植物超氧化物岐化酶(SOD) |
1.3 百合組織培養(yǎng)和遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展 |
1.3.1 百合組織培養(yǎng)研究進(jìn)展 |
1.3.2 百合遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展 |
1.4 仙客來組織培養(yǎng)和遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展 |
1.4.1 仙客來組織培養(yǎng)研究進(jìn)展 |
1.4.2 仙客來遺傳轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展 |
1.5 高溫逆境下的生理變化 |
1.6 本研究的目的意義 |
第二章 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因麝香百合植株的獲得 |
2.1 材料和方法 |
2.1.1 植物材料 |
2.1.2 試驗菌株 |
2.1.3 培養(yǎng)基 |
2.1.4 卡那霉素對百合葉片抗生素敏感性的確定 |
2.1.5 根癌農(nóng)桿菌的活化和抑菌素濃度對農(nóng)桿菌生長的影響 |
2.1.6 根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的麝香百合轉(zhuǎn)化 |
2.1.7 抗性植株的再生 |
2.1.8 抗性植株的檢測 |
2.2 結(jié)果與分析 |
2.2.1 卡那霉素對麝香百合葉片的篩選壓的確定 |
2.2.2 抑菌素濃度對農(nóng)桿菌生長的影響 |
2.2.3 預(yù)培養(yǎng)對轉(zhuǎn)化效率的影響 |
2.2.4 不同菌液濃度和侵染時間對轉(zhuǎn)化效率的影響 |
2.2.5 共培養(yǎng)對轉(zhuǎn)化效率的影響 |
2.2.6 抗性植株的獲得 |
2.2.7 抗性植株P(guān)CR 鑒定 |
2.2.8 抗性再生植株的Southern blot 檢測 |
第三章 仙客來組織培養(yǎng)及轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因仙客來抗性再生植株檢測的研究 |
3.1 材料與方法 |
3.1.1 植物材料 |
3.1.2 種子無菌萌發(fā) |
3.1.3 塊莖誘導(dǎo)分化不定芽 |
3.1.4 根的誘導(dǎo) |
3.1.5 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因仙客來抗性再生植株的Southern blot 檢測 |
3.2 結(jié)果與分析 |
3.2.1 由種子萌發(fā)產(chǎn)生的塊莖 |
3.2.2 不同激素濃度對塊莖誘導(dǎo)不定芽的影響 |
3.2.3 不同基本培養(yǎng)基對塊莖再生芽的影響 |
3.2.4 不同培養(yǎng)基和激素對生根的影響 |
3.2.5 仙客來抗性再生植株的Southern blot 檢測 |
第四章 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因仙客來和百合組培苗耐熱性鑒定 |
4.1 材料和方法 |
4.1.1 材料 |
4.1.2 高溫脅迫處理 |
4.1.3 生理指標(biāo)的測定 |
4.2 結(jié)果與分析 |
4.2.1 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因仙客來組培苗耐熱性鑒定 |
4.2.2 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因百合組培苗耐熱性鑒定 |
第五章 討論 |
5.1 百合遺傳轉(zhuǎn)化體系的影響因素 |
5.1.1 抗生素濃度對葉片遺傳轉(zhuǎn)化的影響 |
5.1.2 預(yù)培養(yǎng)時間對葉片遺傳轉(zhuǎn)化的影響 |
5.1.3 共培養(yǎng)時間對葉片遺傳轉(zhuǎn)化的影響 |
5.1.4 農(nóng)桿菌濃度及侵染時間對葉片遺傳轉(zhuǎn)化的影響 |
5.1.5 轉(zhuǎn)化體的篩選及檢測 |
5.2 仙客來種子萌發(fā)及塊莖誘導(dǎo)不定芽的影響因素 |
5.3 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因植株的耐熱性 |
第六章 結(jié)論 |
6.1 獲得麝香百合抗性植株 |
6.2 篩選出仙客來塊莖誘導(dǎo)不定芽培養(yǎng)基和不定芽生根培養(yǎng)基 |
6.3 獲得轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因百合植株和仙客來植株 |
6.4 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因仙客來和百合組培苗的耐熱性 |
參考文獻(xiàn) |
縮略詞表 |
致謝 |
個人簡介 |
(5)棉花黃萎病抗性表現(xiàn)及其基因表達(dá)的研究(論文提綱范文)
摘要 |
前言 |
第一章 陸地棉不同抗病基因型抗黃萎病反應(yīng)規(guī)律 |
1.1 材料與方法 |
1.1.1 供試材料 |
1.1.2 試驗方法 |
1.1.3 計算方法 |
1.2 結(jié)果與分析 |
1.2.1 不同時期棉花黃萎病指的相關(guān)分析 |
1.2.2 棉花抗黃萎病性狀因子分析 |
1.2.3 利用品種的因子得分分析不同類群的發(fā)病規(guī)律 |
1.2.4 不同類群品種產(chǎn)量性狀及纖維品質(zhì)的表現(xiàn) |
1.3 討論 |
第二章 黃萎病發(fā)病級別對陸地棉品種產(chǎn)量及纖維品質(zhì)的影響 |
2.1 材料與方法 |
2.1.1 供試材料 |
2.1.2 試驗方法 |
2.2 結(jié)果與分析 |
2.2.1 不同時期黃萎病抗性與產(chǎn)量及其構(gòu)成因素的相關(guān)分析 |
2.2.2 不同時期黃萎病抗性與纖維品質(zhì)的相關(guān)分析 |
2.2.3 不同發(fā)病級別單株組成對產(chǎn)量性狀的影響 |
2.2.4 不同發(fā)病級別單株組成對纖維品質(zhì)的影響 |
2.3 討論 |
第三章 我國棉花抗黃萎病骨干品種遺傳組成與抗病性分析 |
3.1 材料與方法 |
3.1.1 供試材料 |
3.1.2 試驗方法 |
3.1.2 數(shù)據(jù)分析 |
3.2 結(jié)果與分析 |
3.2.1 52個品種主要血緣組成分析 |
3.2.2 供試品種基于血緣組成的聚類分析 |
3.2.3 不同血緣組成對棉花黃萎病抗性的影響 |
3.3 討論 |
第四章 分離世代表型反應(yīng)癥狀與抗感類型劃分的研究 |
4.1 材料與方法 |
4.1.1 供試材料 |
4.1.2 試驗方法 |
4.2 結(jié)果與分析 |
4.2.1 陸地棉感病品種×海島棉抗病品種F_2代田間抗病表現(xiàn) |
4.2.2 陸地棉抗病品種×陸地棉感病品種F_2代田間抗病表現(xiàn) |
4.2.3 陸地棉感病品種×海島棉抗病品種F_2代剖桿癥狀 |
4.2.4 病株剖桿癥狀與外部抗病性表現(xiàn)相關(guān)性分析 |
4.3 討論 |
第五章 棉花抗病性對黃萎病菌不同致病力群落結(jié)構(gòu)的影響 |
5.1 材料與方法 |
5.1.1 供試材料 |
5.1.2 試驗方法 |
5.2 結(jié)果與分析 |
5.2.1 分離寄主抗病性對黃萎病菌系致病力的影響 |
5.2.2 分離寄主抗病性與黃萎病菌系的培養(yǎng)特性 |
5.2.3 不同黃萎病菌系對培養(yǎng)溫度的反應(yīng) |
5.2.4 不同分離寄主分離菌系的ISSR分子鑒定 |
5.3 討論 |
第六章 黃萎病菌誘導(dǎo)下棉花抗病相關(guān)基因的差異表達(dá) |
6.1 材料與方法 |
6.1.1 供試材料 |
6.1.2 試驗方法 |
6.2 結(jié)果與分析 |
6.2.1 RNA提取方法的改進(jìn) |
6.2.2 差異RNA的提取 |
6.2.3 cDNA合成 |
6.2.4 海島棉抗黃萎病品種比馬90-53 cDNA-AFLP分析 |
6.2.5 差異片段的回收和二次擴(kuò)增 |
6.2.6 差異片段的克隆測序 |
6.2.7 克隆序列同源性分析 |
6.3 討論 |
結(jié)論 |
參考文獻(xiàn) |
作者簡歷 |
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 |
致謝 |
(6)甘薯品種F3282凝集素的提取及性質(zhì)研究(論文提綱范文)
1 材料與方法 |
1.1 材料 |
1.2 實驗方法 |
1.2.1 甘薯凝集素的提取純化 |
1.2.2 甘薯凝集素的純度測定 |
1.2.3 甘薯凝集素的性質(zhì)測定 |
2 實驗結(jié)果 |
2.1 甘薯凝集素的提取純化 |
2.2 純化的IBL的凝血活性 |
2.3 IBL對淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的凝集活性 |
2.4 IBL的糖抑制 |
2.5 IBL的熱穩(wěn)定性 |
2.6 IBL的酸堿穩(wěn)定性 |
2.7 IBL的中性糖含量 |
3 討 論 |
四、甘薯品種F_(3282)凝集素的提取及性質(zhì)研究(論文參考文獻(xiàn))
- [1]農(nóng)桿菌介導(dǎo)龍膽花色素苷5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶基因的番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及優(yōu)化[D]. 孫靖棣. 吉林師范大學(xué), 2012(03)
- [2]不同的理化因素對糯米凝集素活性的影響[J]. 劉進(jìn)增,李為蘭,周峰. 南京曉莊學(xué)院學(xué)報, 2011(03)
- [3]合歡種子凝集素分離、部分功能鑒定和基因克隆[D]. 劉紅霞. 北京林業(yè)大學(xué), 2008(07)
- [4]麝香百合和仙客來轉(zhuǎn)Mn-SOD基因植株的獲得及其耐熱性鑒定[D]. 陳莉. 西北農(nóng)林科技大學(xué), 2007(06)
- [5]棉花黃萎病抗性表現(xiàn)及其基因表達(dá)的研究[D]. 張桂寅. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué), 2005(06)
- [6]甘薯品種F3282凝集素的提取及性質(zhì)研究[J]. 余萍,林少琴,林玉滿,林曉紅. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2000(06)
標(biāo)簽:凝集素論文; 仙客來論文; 農(nóng)桿菌論文; 種子植物論文; 基因合成論文;