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甘薯品種 F_(3282) 凝集素的提取及其性質(zhì)

甘薯品種 F_(3282) 凝集素的提取及其性質(zhì)

一、甘薯品種F_(3282)凝集素的提取及性質(zhì)研究(論文文獻(xiàn)綜述)

孫靖棣[1](2012)在《農(nóng)桿菌介導(dǎo)龍膽花色素苷5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶基因的番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及優(yōu)化》文中研究說明番茄(Lycopersicon esculentum Mill)系茄科(Solanaceae)番茄屬(Lycopersicon)一年生或多年生草本雙子葉植物,具有富含多種營養(yǎng)成分,較為容易成活,培育時間較短,基因組DNA組成較清楚,遺傳轉(zhuǎn)化較容易等優(yōu)點。番茄作為植物遺傳轉(zhuǎn)化研究中的模式植物,其研究結(jié)果不僅具有重要的理論意義而且具有重要的應(yīng)用價值。本研究以質(zhì)粒pCAMBIA1304為載體,龍膽UDP-葡萄糖:花色素苷5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶(Gt5GT7)基因為目的基因,構(gòu)建植物表達(dá)載體。以發(fā)根農(nóng)桿菌菌株A4為介導(dǎo)系統(tǒng),將Gt5GT7基因?qū)?0種基因型番茄植株,旨在建立高頻番茄遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)。主要研究結(jié)果如下:1、根據(jù)GenBank公布的Gt5GT7基因(AB363839)序列設(shè)計引物,并分別在兩端增加BglII和BstEII酶切位點,進(jìn)行pcr4topo-Gt5GT7質(zhì)粒的PCR擴(kuò)增反應(yīng),通過試劑盒回收純化提取Gt5GT7基因。再用限制性內(nèi)切酶BglII和BstEII對通過PCR擴(kuò)增獲得的Gt5GT7目的基因和pCAMBIA1304質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切?;厥誃glII和BstEII雙酶切得到目的基因Gt5GT7和pCAMBIA1304質(zhì)粒大片段,然后用Takara連接試劑盒連接Gt5GT7基因和pCAMBIA1304質(zhì)粒大片段,再將連接體系轉(zhuǎn)化大腸桿菌菌株DH5α。提取抗性菌落的質(zhì)粒,用BglII和BstEII對質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切檢測,結(jié)果表明,植物表達(dá)載體pCAMBIA1304-Gt5GT7構(gòu)建成功。2、采用電轉(zhuǎn)化法,將構(gòu)建成功的植物表達(dá)載體pCAMBIA1304-Gt5GT7導(dǎo)入到發(fā)根農(nóng)桿菌菌株A4中。利用重組的發(fā)根農(nóng)桿菌菌株A4為介導(dǎo)系統(tǒng),采用葉盤法,將植物表達(dá)載體pCAMBIA1304-Gt5GT7導(dǎo)入番茄,以建立高頻番茄遺傳轉(zhuǎn)化再生體系。3、本研究通過大量實驗篩選得出:最佳愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:MSB5+6-BA2.0mg/L+IAA0.2mg/L-0.5mg/L;最佳不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為: MSB5+6-BA2.0mg/L+IAA0.15mg/L-0.5mg/L;最佳生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:1/2MS+IBA0.5mg/L。4、以本研究中構(gòu)建的植物表達(dá)載體pCAMBIA1304-Gt5GT7為陽性對照,以野生型番茄植株基因組為陰性對照,對通過遺傳轉(zhuǎn)化得到轉(zhuǎn)Gt5GT7基因再生植株基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng),進(jìn)行檢測。檢測結(jié)果表明:有再生植株擴(kuò)增出大小為1892bp的目標(biāo)條帶,與陽性對照擴(kuò)增出的條帶位置相同,陰性對照無目標(biāo)條帶,初步說明目的基因Gt5GT7已整合到番茄基因組DNA中。5、在轉(zhuǎn)Gt5GT7基因的番茄再生植株中,表現(xiàn)型出現(xiàn)變化:未轉(zhuǎn)化番茄(賊不偷)成熟果實為綠色,轉(zhuǎn)基因番茄(賊不偷)再生植株成熟果實為淡橘色。

劉進(jìn)增,李為蘭,周峰[2](2011)在《不同的理化因素對糯米凝集素活性的影響》文中指出凝集素是一種能使血細(xì)胞發(fā)生凝集的糖蛋白,同時又是食品中的抗?fàn)I養(yǎng)因子,其凝集活性受多種因素影響.本文研究不同的理化因素對糯米凝集素活性的影響,以便提高食物的安全性.

劉紅霞[3](2008)在《合歡種子凝集素分離、部分功能鑒定和基因克隆》文中認(rèn)為植物凝集素是一種含有非催化結(jié)構(gòu)域并能可逆結(jié)合到特異單糖或寡糖上的植物(糖)蛋白。植物凝集素的諸多功能都與它最重要的性質(zhì)糖結(jié)合專一性有關(guān)。由于植物凝集素廣泛存在并且種類繁多,加之其特定的作用機(jī)理,使得植物凝集素在植物抗病蟲基因工程研究中具有較大的應(yīng)用潛力。本研究以合歡Albizia julibrissin Durazz種子為研究材料,分離了合歡種子凝集素,研究了其理化性質(zhì)及凝集素對幾種真菌孢子萌發(fā)和菌絲生長的影響;同時采用RT-PCR和RACE相結(jié)合的方法完成了合歡種子凝集素基因的分離克隆。在此基礎(chǔ)上利用生物信息學(xué)方法對獲得的合歡種子凝集素基因進(jìn)行了結(jié)構(gòu)功能預(yù)測分析。通過上述研究得到了以下結(jié)果:1.采用硫酸銨沉淀、分子篩層析并結(jié)合蛋白超敏可逆染色試劑盒的方法純化得到了合歡種子凝集素(Albizia julibrissin seed lectin,AJLs),用SDS-PAGE測定其相對分子量為25.4kDa,IEF-PAGE測定其等電點為7.96。蒽酮比色法測定其中性糖含量為2.65%,是一種糖蛋白;凝血活性測定表明,其最低凝集限度為1.95μg/ml,N-乙酰葡糖胺(GlcNAc,N-acetylgucosamine)是合歡種子凝集素的專一性抑制糖。2.對合歡種子凝集素的功能研究表明,凝集素對灰葡萄孢Botrytis cinerea和大麗輪枝菌Verticillium dahliae的孢子萌發(fā)具有較強(qiáng)的抑制作用;對細(xì)交鏈孢菌Alternaria alternata菌絲生長有一定的抑制作用,對尖孢鐮刀菌Fusariumoxysporum菌絲生長的抑制作用不明顯。3.首次克隆得到了合歡凝集素基因的cDNA全長序列。該cDNA全長序列由1096個核苷酸組成,開放閱讀框為747個核苷酸,編碼248個氨基酸。5’端和3’端各有82和267個核苷酸的非編碼區(qū)(UTR),3’端有polyA尾。4.利用相關(guān)軟件及在線生物信息學(xué)分析站點對合歡種子凝集素基因編碼蛋白的理化性質(zhì)進(jìn)行了分析。結(jié)果表明,目的蛋白的pI為8.14,預(yù)測分子量為26.8kDa。用ClustalX1.83軟件進(jìn)行了同源性比對,并構(gòu)建了目的蛋白的系統(tǒng)進(jìn)化樹。合歡種子凝集素基因編碼蛋白的氨基酸序列與含羞草亞科Mimosoideae球花豆屬的Parkia Platycephala氨基酸序列同源性達(dá)85%。5.利用在線生物信息學(xué)分析服務(wù)平臺對合歡種子凝集素cDNA基因編碼蛋白的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了預(yù)測。結(jié)果表明,目的蛋白在第12~34位氨基酸之間具有明顯的疏水區(qū)和跨膜區(qū)域。二級結(jié)構(gòu)預(yù)測說明目的蛋白的α螺旋的比例在30%以上,β折疊均在20%以下,是一種混合型蛋白。應(yīng)用同源建模法構(gòu)建了合歡種子凝集素基因編碼蛋白的三級結(jié)構(gòu),并采用PROCHECK軟件對模型的結(jié)構(gòu)質(zhì)量進(jìn)行了評價,最優(yōu)模型為EsyPreD方法構(gòu)建的模型。6.通過網(wǎng)絡(luò)服務(wù)器平臺進(jìn)行了合歡種子凝集素cDNA基因編碼蛋白的功能預(yù)測。結(jié)果顯示,合歡種子凝集素基因編碼的蛋白是Glycohydro18 superfamily的新成員,具有Glycohydro18的結(jié)構(gòu)功能域,活性位點位于第146~154之間(序列為LDGVDFDIE),而且有多個磷酸化位點。信號肽區(qū)域位于1~27個氨基酸,即MGTKLRNPKIILVLQVCLIMMVSTAKA??缒て挝挥诘?2~34位氨基酸殘基。亞細(xì)胞定位分析表明目的蛋白是一種分泌性蛋白(胞外蛋白)。本論文對合歡種子凝集素的研究填補(bǔ)了我國在含羞草亞科植物凝集素方面的研究空白,并為今后開展木本植物凝集素基因的在抗病蟲研究方面的應(yīng)用奠定了一定的理論基礎(chǔ),具有一定的的理論價值和現(xiàn)實意義。

陳莉[4](2007)在《麝香百合和仙客來轉(zhuǎn)Mn-SOD基因植株的獲得及其耐熱性鑒定》文中研究說明本研究以麝香百合、仙客來為材料,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將Mn-SOD基因轉(zhuǎn)入植株中,通過篩選、檢測,獲得轉(zhuǎn)Mn-SOD基因植株,并研究高溫逆境脅迫對轉(zhuǎn)基因和未轉(zhuǎn)基因植株的生理機(jī)制的影響,從而為提高其耐熱、抗衰老及其他方面的抗脅迫能力,實現(xiàn)品種的抗性改良奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法獲得麝香百合抗性植株通過研究Mn-SOD基因轉(zhuǎn)化中影響葉片轉(zhuǎn)化效率的多種因素,包括Kan濃度、抑菌素濃度、預(yù)培養(yǎng)時間、共培養(yǎng)時間,侵染菌液濃度和侵染時間等,確立了50mg/LKan,500mg/LCef,2d的預(yù)培養(yǎng),3d的共培養(yǎng),OD600為0.6,侵染10min的麝香百合遺傳轉(zhuǎn)化體系,并獲得了百合抗性植株。2篩選出仙客來塊莖誘導(dǎo)不定芽培養(yǎng)基和不定芽生根培養(yǎng)基以仙客來種子萌發(fā)產(chǎn)生的塊莖為外植體,誘導(dǎo)分化不定芽的最適培養(yǎng)基為MS+2.0mg/L6-BA+1.0 mg/L NAA,并且遮光處理可提高分化率。仙客來不定芽最適生根培養(yǎng)基為1/2MS+1.0mg/LIBA或MS+1.5mg/LNAA。3外源基因的檢測對31個百合抗性株系進(jìn)行PCR擴(kuò)增,結(jié)果有9個株系擴(kuò)增出663bp的特異條帶,而對照百合植株無特異性條帶出現(xiàn),初步證明外源基因已轉(zhuǎn)入百合植株中。分別對PCR檢測呈陽性的5個仙客來株系(由周連霞師姐轉(zhuǎn)化所得)和9個百合株系進(jìn)行Southern雜交檢測,有3個仙客來株系檢測到一條雜交帶,證明Mn-SOD基因已經(jīng)轉(zhuǎn)入到仙客來基因組中;而在百合株系中,未檢測出雜交條帶。4轉(zhuǎn)Mn-SOD基因仙客來和百合組培苗對高溫的抗性測定了轉(zhuǎn)基因和對照仙客來和百合組培苗在36℃高溫脅迫下的生理反應(yīng),結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因仙客來的SOD活性始終高于對照植株,細(xì)胞膜透性和MDA的含量上升的速度低于對照植株,可溶性蛋白含量高于對照植株,表明轉(zhuǎn)基因植株的耐熱性高于對照植株;轉(zhuǎn)基因百合的SOD活性也高于對照植株,細(xì)胞膜透性上升的速度低于對照植株,可溶性蛋白含量高于對照植株,但MDA在轉(zhuǎn)基因百合和對照百合植株中差異不明顯。

張桂寅[5](2005)在《棉花黃萎病抗性表現(xiàn)及其基因表達(dá)的研究》文中指出棉花黃萎病是嚴(yán)重影響棉花產(chǎn)量和纖維品質(zhì)的病害,選育和利用抗病品種是一種經(jīng)濟(jì)、有效的防治措施。深入研究棉花抗黃萎病基因表達(dá)規(guī)律,對有效地培育抗病品種具有重要意義。本研究利用我國20世紀(jì)50年代以來培育的108個棉花抗枯、黃萎病品種,研究了不同棉花品種的抗黃萎病反應(yīng)規(guī)律,分析了不同抗病基因型對產(chǎn)量和品質(zhì)性狀的影響;通過系譜分析了解不同來源抗病基因的抗黃萎病性能;分析了高抗海島棉品種和感病陸地棉品種分離世代表型癥狀與內(nèi)部癥狀的關(guān)系以及表型癥狀對遺傳方式確定的影響;采用表型癥狀和分子標(biāo)記相結(jié)合,研究了棉花抗病性對黃萎病菌不同致病力群落結(jié)構(gòu)的影響;利用cDNA-AFLP技術(shù)研究了海島棉品種在黃萎病菌誘導(dǎo)下抗病相關(guān)基因的差異表達(dá)。獲得主要結(jié)果如下: 1.利用因子分析法對陸地棉抗黃萎病反應(yīng)規(guī)律進(jìn)行研究,整個發(fā)病時期的病情發(fā)展由4個主因子決定,且第1、2主因子具有較大的方差貢獻(xiàn)率。第1主因子(F1)主要與品種的7月26日至8月5日的黃萎病病情指數(shù)有關(guān),第2主因子(F2)主要與品種的8月20日至9月4日的黃萎病病情指數(shù)有關(guān)。利用因子分析結(jié)果將108個品種劃分為4個類型,前期抗病性較好而后期發(fā)病較快的第Ⅰ類品種,其產(chǎn)量和纖維品質(zhì)均較差;而前后期病指均較低發(fā)病緩慢的第Ⅱ類品種則小區(qū)產(chǎn)量最高。第Ⅲ類品種前期發(fā)病較慢,中期發(fā)病較快,產(chǎn)量高于第Ⅳ類品種;前期發(fā)病較快,中期發(fā)病平緩,后期仍具有較高病指的第Ⅳ類品種,小區(qū)產(chǎn)量較低。某一階段的抗病性并不能完全代表品種的抗病性。 2.分析棉花品種黃萎病病指與產(chǎn)量及其構(gòu)成因素的關(guān)系得出,病情指數(shù)與產(chǎn)量呈顯著負(fù)相關(guān),對產(chǎn)量的影響主要由于單株結(jié)鈴數(shù)減少造成。開花初期的抗病性對產(chǎn)量及其構(gòu)成因素影響較小,當(dāng)?shù)谝粋€發(fā)病高峰到來后,抗病性對產(chǎn)量及其構(gòu)成因素影響增大??共⌒詫φR度和馬克隆值影響最大,對纖維長度和伸長率影響次之,對纖維比強(qiáng)度影響最小。利用偏相關(guān)分析不同病級病株比例與產(chǎn)量性狀的關(guān)系,結(jié)果表明0級單株的比例與產(chǎn)量性狀呈負(fù)相關(guān),1級病株的比例與產(chǎn)量性狀呈正相關(guān),2級和3級病株比例與產(chǎn)量性狀的關(guān)系隨生育進(jìn)程改變,4級病株比例與產(chǎn)量性狀呈顯著或極顯著負(fù)相關(guān);不同病級病株比例與纖維品質(zhì)性狀的關(guān)系和不同病級病株比例與產(chǎn)量性狀的關(guān)系基本一致。 3.分析了52個品種的系譜組成及不同來源抗性基因?qū)γ藁ㄆ贩N黃萎病抗性的影響,結(jié)果顯示岱字棉與斯字棉血統(tǒng)在我國棉花抗病品種中占有較大的比例,其次是福字棉。抗性最好的品種具有較大比例的斯字棉血統(tǒng);抗性最差的品種具有較小比例的斯字棉血統(tǒng),而多數(shù)品種含有金字棉血統(tǒng)成分;以福字棉血統(tǒng)為主的品種抗性較差。 4.在黃萎病發(fā)病高峰期對(邯208×Pima90-53)F2、(中棉所8號×Pima90-53)F2及(冀棉20號×邯208)F2單株的黃萎病抗性進(jìn)行了調(diào)查。分析表型癥狀與內(nèi)部癥狀的關(guān)系得出,外部表現(xiàn)病級與剖桿癥狀病級呈顯著正相關(guān)。對海島棉與陸地棉后代抗感單株分離比例分析可知,抗黃萎病基因受1對或少數(shù)2對主效顯性基因控制。 5.以海島棉品種Pima90-53和陸地棉15個品種為分離寄主,共分離出67個黃萎病菌系。以Pima90-53、冀棉20號、邯208和中棉所8號為鑒別寄主,對分離菌系進(jìn)行了致病力鑒定,結(jié)果顯示同一地塊所分離的菌系由致病力連續(xù)變化的多種致病力類型組成。品種的抗性與黃萎病不同

余萍,林少琴,林玉滿,林曉紅[6](2000)在《甘薯品種F3282凝集素的提取及性質(zhì)研究》文中認(rèn)為甘薯品種 F32 82 的浸取液 ,經(jīng)硫酸銨分級 ,甲殼素層析后 ,再經(jīng)分子篩過濾 ,獲得在 PAGE上呈現(xiàn)單一蛋白質(zhì)帶的甘薯凝集素 ( Ipomoea Batatas L ectin,IBL)。IBL對鴿、兔、人血等紅細(xì)胞均有凝集作用 ,其中對鴿血的凝集活性最高 ,最低凝集濃度為 0 .0 5μg/ ml。IBL除凝集紅細(xì)胞外 ,還可凝集小鼠脾細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞 ;其對熱相當(dāng)穩(wěn)定 ,90℃加熱 10 min,仍有部分活性 ;IBL對酸處理較堿處理穩(wěn)定 ,但可被阿拉伯糖或乳糖等解除凝集活性。IBL的中性糖含量為 5.4 %。

二、甘薯品種F_(3282)凝集素的提取及性質(zhì)研究(論文開題報告)

(1)論文研究背景及目的

此處內(nèi)容要求:

首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景,再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題,并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點或解決方法。

寫法范例:

本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。

(2)本文研究方法

調(diào)查法:該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。

觀察法:用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。

實驗法:通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。

文獻(xiàn)研究法:通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料,從而全面的、正確的了解掌握研究方法。

實證研究法:依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實踐的需要提出設(shè)計。

定性分析法:對研究對象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究,這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。

定量分析法:通過具體的數(shù)字,使人們對研究對象的認(rèn)識進(jìn)一步精確化。

跨學(xué)科研究法:運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進(jìn)行研究。

功能分析法:這是社會科學(xué)用來分析社會現(xiàn)象的一種方法,從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。

模擬法:通過創(chuàng)設(shè)一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。

三、甘薯品種F_(3282)凝集素的提取及性質(zhì)研究(論文提綱范文)

(1)農(nóng)桿菌介導(dǎo)龍膽花色素苷5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶基因的番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及優(yōu)化(論文提綱范文)

摘要
Abstract
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 番茄基因工程研究進(jìn)展
        1.1.1 抗蟲轉(zhuǎn)基因方面
        1.1.2 抗病轉(zhuǎn)基因方面
        1.1.3 抗逆轉(zhuǎn)基因方面
        1.1.4 改良品質(zhì)方面
        1.1.5 作為生物反應(yīng)器方面
    1.2 番茄遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)
        1.2.1 番茄遺傳轉(zhuǎn)化方法
        1.2.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化機(jī)理
        1.2.3 影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)番茄遺傳轉(zhuǎn)化的因素
    1.3 UDP-葡萄糖:花色素苷 5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶(5GT)
        1.3.1 植物糖基轉(zhuǎn)移酶(GTs)
        1.3.2 龍膽 UDP-葡萄糖:花色素苷 5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶(Gt5GT7)
第二章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 菌種和質(zhì)粒
        2.1.2 植物材料
        2.1.3 PCR 擴(kuò)增引物序列
        2.1.4 工具酶和生化試劑
        2.1.5 DNA Marker
        2.1.6 主要儀器設(shè)備
        2.1.7 培養(yǎng)基配方
    2.2 方法
        2.2.1 表達(dá)載體 pCAMBIA1304- Gt5GT7 的構(gòu)建及重組農(nóng)桿菌
        2.2.2 番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及優(yōu)化
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 表達(dá)載體 pCAMBIA1304-Gt5GT7 的構(gòu)建及重組農(nóng)桿菌
        3.1.1 質(zhì)粒 pcr4topo-Gt5GT7 的 PCR 擴(kuò)增
        3.1.2 質(zhì)粒 pCAMBIA1304 與目的基因 Gt5GT7 的雙酶切
        3.1.3 表達(dá)載體 pCAMBIA1304-Gt5GT7 的鑒定
        3.1.4 表達(dá)載體 pCAMBIA1304- Gt5GT7 重組農(nóng)桿菌菌株 A4
    3.2 番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及優(yōu)化
        3.2.1 Cl2滅菌時間對番茄種子發(fā)芽的影響
        3.2.2 不同預(yù)培養(yǎng)時間對番茄轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.2.3 農(nóng)桿菌菌液浸泡外植體的時間對轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.2.4 農(nóng)桿菌菌液濃度對外植體轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.2.5 共培養(yǎng)條件對番茄外植體轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.2.6 激素配比對不同基因型番茄愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        3.2.7 激素配比對不同基因型番茄不定芽誘導(dǎo)的影響
        3.2.8 激素配比對不同基因型番茄生根的影響
        3.2.9 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化
    3.3 轉(zhuǎn)基因植株的檢測
        3.3.1 再生轉(zhuǎn)化植株的 PCR 檢測
        3.3.2 轉(zhuǎn)基因番茄(賊不偷)果實的性狀分析
第四章 討論
    4.1 植物表達(dá)載體的構(gòu)建
    4.2 農(nóng)桿菌的鑒定
    4.3 無菌苗的獲得
    4.4 番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化
        4.4.1 基因型對番茄遺傳轉(zhuǎn)化的影響
        4.4.2 不同侵染條件對番茄遺傳轉(zhuǎn)化的影響
        4.4.3 激素對番茄遺傳轉(zhuǎn)化的影響
    4.5 GUS 組織化學(xué)分析法的改進(jìn)
    4.6 PCR 分子檢測
    4.7 轉(zhuǎn)基因番茄果實的性狀分析
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的主要科研成果
后記

(2)不同的理化因素對糯米凝集素活性的影響(論文提綱范文)

1 材料和方法
    1.1 實驗材料
    1.2 糯米凝集素的提取
    1.3 實驗處理
2 結(jié)果與分析
    2.1 不同溫度對糯米凝集素處理的結(jié)果
    2.2 不同pH值對糯米凝集素處理的結(jié)果
    2.3 不同化學(xué)因子對糯米凝集素處理的結(jié)果
3 討論

(3)合歡種子凝集素分離、部分功能鑒定和基因克?。ㄕ撐奶峋V范文)

摘要
ABSTRACT
1 引言
    1.1 植物凝集素的研究進(jìn)展
        1.1.1 凝集素的發(fā)現(xiàn)及定義
        1.1.2 凝集素的分布
        1.1.3 植物凝集素的命名與分類
        1.1.4 植物凝集素的性質(zhì)
        1.1.5 凝集素的功能
        1.1.6 植物凝集素的分離及基因的克隆
    1.2 植物凝集素在抗病蟲植物基因工程中的研究概況
    1.3 凝集素在植物抗病性方面的研究與應(yīng)用
    1.4 本論文的立體依據(jù)和技術(shù)路線
        1.4.1 立項依據(jù)與研究意義
        1.4.2 研究的技術(shù)路線
2 合歡種子凝集素的分離及部分性質(zhì)研究
    2.1 材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 試劑與儀器設(shè)備
    2.2 研究方法
        2.2.1 合歡種子凝集素蛋白粗提物的制備
        2.2.2 合歡凝集素(AJLs)的純化
        2.2.3 合歡種子凝集素性質(zhì)的測定
        2.2.4 N-末端氨基酸序列測定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 合歡種子凝集素(AJLs)的分離純化
        2.3.2 合歡種子凝集素(AJLs)的性質(zhì)測定
        2.3.3 合歡種子凝集素(AJLs)N-端氨基酸的測定
    2.4 討論
        2.4.1 合歡種子凝集素蛋白的分離方法的選擇
        2.4.2 關(guān)于合歡種子凝集素
        2.4.3 合歡種子凝集素(AJLs)N-端氨基酸的測定
    2.5 小結(jié)
3 合歡種子凝集素的對真菌生長的影響
    3.1 材料
        3.1.1 試驗用菌種
        3.1.2 合歡種子凝集素
        3.1.3 培養(yǎng)基
    3.2 研究方法
        3.2.1 試驗菌種的培養(yǎng)
        3.2.2 不同濃度合歡種子凝集素的配制
        3.2.3 接種方法
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 合歡種子凝集素對真菌孢子萌發(fā)的影響
        3.3.2 合歡種子凝集素對真菌對菌絲生長的抑制
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
4 合歡種子凝集素的基因克隆及序列分析
    4.1
        4.1.1 試驗材料
        4.1.2 試劑和儀器設(shè)備
    4.2 研究方法
        4.2.1 合歡總RNA提取和質(zhì)量檢測
        4.2.2 合歡種子凝集素基因片段的RT-PCR擴(kuò)增、克隆和鑒定
        4.2.3 合歡種子凝集素基因全長cDNA的獲得
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 DNA/RNA的質(zhì)量分析
        4.3.2 合歡凝集素基因片段克隆、鑒定和序列分析
        4.3.3 合歡種子凝集素基因全長cDNA的克隆、鑒定及分析
    4.4 討論
        4.4.1 關(guān)于合歡總RNA的提取
        4.4.2 關(guān)于合歡種子凝集素基因的cDNA全長序列的獲得方法
        4.4.3 關(guān)于合歡種子凝集素基因cDNA及其編碼蛋白的Blast分析
    4.5 小結(jié)
5 合歡種子凝集素基因編碼蛋白的結(jié)構(gòu)和功能預(yù)測
    5.1 材料和方法
        5.1.1 合歡種子凝集素cDNA編碼蛋白的結(jié)構(gòu)分析
        5.1.2 合歡凝集素基因編碼蛋白的功能預(yù)測
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 合歡凝集素基因編碼蛋白的結(jié)構(gòu)分析
        5.2.2 合歡凝集素基因編碼蛋白的功能預(yù)測
    5.3 討論
        5.3.1 氨基酸結(jié)構(gòu)預(yù)測分析
        5.3.2 功能預(yù)測
        5.3.3 合歡凝集素基因編碼蛋白系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
        5.3.4 關(guān)于Glyco_hydro_18 superfamily
    5.4 小結(jié)
6 結(jié)論及研究展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 研究展望
主要參考文獻(xiàn)
附錄1 正文中應(yīng)用的緩沖液和培養(yǎng)基的配制
附錄2 論文縮略詞表
附圖
    1.凝血活性測定圖
    2.AJLS對灰葡萄孢BOTRYTIS CINEREA孢子萌發(fā)的影響
    3.AJLS對尖孢鐮刀菌F.OXYSPORUM菌絲生長影響菌絲生長的影響
作者簡介
導(dǎo)師簡介
在讀期間獲得的成果及論著目錄
致謝

(4)麝香百合和仙客來轉(zhuǎn)Mn-SOD基因植株的獲得及其耐熱性鑒定(論文提綱范文)

摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物遺傳轉(zhuǎn)化和基因工程
        1.1.1 植物遺傳轉(zhuǎn)化
        1.1.2 植物基因工程
    1.2 植物的氧代謝
        1.2.1 活性氧的種類與特性
        1.2.2 活性氧對植物的傷害作用
        1.2.3 活性氧的清除系統(tǒng)
        1.2.4 植物超氧化物岐化酶(SOD)
    1.3 百合組織培養(yǎng)和遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展
        1.3.1 百合組織培養(yǎng)研究進(jìn)展
        1.3.2 百合遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展
    1.4 仙客來組織培養(yǎng)和遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展
        1.4.1 仙客來組織培養(yǎng)研究進(jìn)展
        1.4.2 仙客來遺傳轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展
    1.5 高溫逆境下的生理變化
    1.6 本研究的目的意義
第二章 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因麝香百合植株的獲得
    2.1 材料和方法
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 試驗菌株
        2.1.3 培養(yǎng)基
        2.1.4 卡那霉素對百合葉片抗生素敏感性的確定
        2.1.5 根癌農(nóng)桿菌的活化和抑菌素濃度對農(nóng)桿菌生長的影響
        2.1.6 根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的麝香百合轉(zhuǎn)化
        2.1.7 抗性植株的再生
        2.1.8 抗性植株的檢測
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 卡那霉素對麝香百合葉片的篩選壓的確定
        2.2.2 抑菌素濃度對農(nóng)桿菌生長的影響
        2.2.3 預(yù)培養(yǎng)對轉(zhuǎn)化效率的影響
        2.2.4 不同菌液濃度和侵染時間對轉(zhuǎn)化效率的影響
        2.2.5 共培養(yǎng)對轉(zhuǎn)化效率的影響
        2.2.6 抗性植株的獲得
        2.2.7 抗性植株P(guān)CR 鑒定
        2.2.8 抗性再生植株的Southern blot 檢測
第三章 仙客來組織培養(yǎng)及轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因仙客來抗性再生植株檢測的研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 種子無菌萌發(fā)
        3.1.3 塊莖誘導(dǎo)分化不定芽
        3.1.4 根的誘導(dǎo)
        3.1.5 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因仙客來抗性再生植株的Southern blot 檢測
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 由種子萌發(fā)產(chǎn)生的塊莖
        3.2.2 不同激素濃度對塊莖誘導(dǎo)不定芽的影響
        3.2.3 不同基本培養(yǎng)基對塊莖再生芽的影響
        3.2.4 不同培養(yǎng)基和激素對生根的影響
        3.2.5 仙客來抗性再生植株的Southern blot 檢測
第四章 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因仙客來和百合組培苗耐熱性鑒定
    4.1 材料和方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 高溫脅迫處理
        4.1.3 生理指標(biāo)的測定
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因仙客來組培苗耐熱性鑒定
        4.2.2 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因百合組培苗耐熱性鑒定
第五章 討論
    5.1 百合遺傳轉(zhuǎn)化體系的影響因素
        5.1.1 抗生素濃度對葉片遺傳轉(zhuǎn)化的影響
        5.1.2 預(yù)培養(yǎng)時間對葉片遺傳轉(zhuǎn)化的影響
        5.1.3 共培養(yǎng)時間對葉片遺傳轉(zhuǎn)化的影響
        5.1.4 農(nóng)桿菌濃度及侵染時間對葉片遺傳轉(zhuǎn)化的影響
        5.1.5 轉(zhuǎn)化體的篩選及檢測
    5.2 仙客來種子萌發(fā)及塊莖誘導(dǎo)不定芽的影響因素
    5.3 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因植株的耐熱性
第六章 結(jié)論
    6.1 獲得麝香百合抗性植株
    6.2 篩選出仙客來塊莖誘導(dǎo)不定芽培養(yǎng)基和不定芽生根培養(yǎng)基
    6.3 獲得轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因百合植株和仙客來植株
    6.4 轉(zhuǎn)Mn-SOD 基因仙客來和百合組培苗的耐熱性
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
致謝
個人簡介

(5)棉花黃萎病抗性表現(xiàn)及其基因表達(dá)的研究(論文提綱范文)

摘要
前言
第一章 陸地棉不同抗病基因型抗黃萎病反應(yīng)規(guī)律
    1.1 材料與方法
        1.1.1 供試材料
        1.1.2 試驗方法
        1.1.3 計算方法
    1.2 結(jié)果與分析
        1.2.1 不同時期棉花黃萎病指的相關(guān)分析
        1.2.2 棉花抗黃萎病性狀因子分析
        1.2.3 利用品種的因子得分分析不同類群的發(fā)病規(guī)律
        1.2.4 不同類群品種產(chǎn)量性狀及纖維品質(zhì)的表現(xiàn)
    1.3 討論
第二章 黃萎病發(fā)病級別對陸地棉品種產(chǎn)量及纖維品質(zhì)的影響
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試材料
        2.1.2 試驗方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 不同時期黃萎病抗性與產(chǎn)量及其構(gòu)成因素的相關(guān)分析
        2.2.2 不同時期黃萎病抗性與纖維品質(zhì)的相關(guān)分析
        2.2.3 不同發(fā)病級別單株組成對產(chǎn)量性狀的影響
        2.2.4 不同發(fā)病級別單株組成對纖維品質(zhì)的影響
    2.3 討論
第三章 我國棉花抗黃萎病骨干品種遺傳組成與抗病性分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試材料
        3.1.2 試驗方法
        3.1.2 數(shù)據(jù)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 52個品種主要血緣組成分析
        3.2.2 供試品種基于血緣組成的聚類分析
        3.2.3 不同血緣組成對棉花黃萎病抗性的影響
    3.3 討論
第四章 分離世代表型反應(yīng)癥狀與抗感類型劃分的研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試材料
        4.1.2 試驗方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 陸地棉感病品種×海島棉抗病品種F_2代田間抗病表現(xiàn)
        4.2.2 陸地棉抗病品種×陸地棉感病品種F_2代田間抗病表現(xiàn)
        4.2.3 陸地棉感病品種×海島棉抗病品種F_2代剖桿癥狀
        4.2.4 病株剖桿癥狀與外部抗病性表現(xiàn)相關(guān)性分析
    4.3 討論
第五章 棉花抗病性對黃萎病菌不同致病力群落結(jié)構(gòu)的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 供試材料
        5.1.2 試驗方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 分離寄主抗病性對黃萎病菌系致病力的影響
        5.2.2 分離寄主抗病性與黃萎病菌系的培養(yǎng)特性
        5.2.3 不同黃萎病菌系對培養(yǎng)溫度的反應(yīng)
        5.2.4 不同分離寄主分離菌系的ISSR分子鑒定
    5.3 討論
第六章 黃萎病菌誘導(dǎo)下棉花抗病相關(guān)基因的差異表達(dá)
    6.1 材料與方法
        6.1.1 供試材料
        6.1.2 試驗方法
    6.2 結(jié)果與分析
        6.2.1 RNA提取方法的改進(jìn)
        6.2.2 差異RNA的提取
        6.2.3 cDNA合成
        6.2.4 海島棉抗黃萎病品種比馬90-53 cDNA-AFLP分析
        6.2.5 差異片段的回收和二次擴(kuò)增
        6.2.6 差異片段的克隆測序
        6.2.7 克隆序列同源性分析
    6.3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡歷
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝

(6)甘薯品種F3282凝集素的提取及性質(zhì)研究(論文提綱范文)

1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 實驗方法
        1.2.1 甘薯凝集素的提取純化
        1.2.2 甘薯凝集素的純度測定
        1.2.3 甘薯凝集素的性質(zhì)測定
2 實驗結(jié)果
    2.1 甘薯凝集素的提取純化
    2.2 純化的IBL的凝血活性
    2.3 IBL對淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的凝集活性
    2.4 IBL的糖抑制
    2.5 IBL的熱穩(wěn)定性
    2.6 IBL的酸堿穩(wěn)定性
    2.7 IBL的中性糖含量
3 討 論

四、甘薯品種F_(3282)凝集素的提取及性質(zhì)研究(論文參考文獻(xiàn))

  • [1]農(nóng)桿菌介導(dǎo)龍膽花色素苷5-O-葡糖基轉(zhuǎn)移酶基因的番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及優(yōu)化[D]. 孫靖棣. 吉林師范大學(xué), 2012(03)
  • [2]不同的理化因素對糯米凝集素活性的影響[J]. 劉進(jìn)增,李為蘭,周峰. 南京曉莊學(xué)院學(xué)報, 2011(03)
  • [3]合歡種子凝集素分離、部分功能鑒定和基因克隆[D]. 劉紅霞. 北京林業(yè)大學(xué), 2008(07)
  • [4]麝香百合和仙客來轉(zhuǎn)Mn-SOD基因植株的獲得及其耐熱性鑒定[D]. 陳莉. 西北農(nóng)林科技大學(xué), 2007(06)
  • [5]棉花黃萎病抗性表現(xiàn)及其基因表達(dá)的研究[D]. 張桂寅. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué), 2005(06)
  • [6]甘薯品種F3282凝集素的提取及性質(zhì)研究[J]. 余萍,林少琴,林玉滿,林曉紅. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2000(06)

標(biāo)簽:;  ;  ;  ;  ;  

甘薯品種 F_(3282) 凝集素的提取及其性質(zhì)
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