一、Lovastatin對(duì)HL-60細(xì)胞HMG-CoA還原酶mRNA表達(dá)及細(xì)胞增殖功能的影響（論文文獻(xiàn)綜述）

徐數(shù)娜^[1]（2013）在《辛伐他汀單獨(dú)或聯(lián)合阿糖胞苷對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞株增殖和凋亡影響的研究》文中研究表明目的（1）研究辛伐他?。╯imvastatin，SIM）對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞株NB4、HL60、KG1細(xì)胞株增殖影響，并初步探求其作用機(jī)制。（2）研究SIM與阿糖胞苷（Cytarabine，Ara-c）聯(lián)合作用于NB4、HL60、KG1等白血病細(xì)胞株后對(duì)細(xì)胞增殖的影響，分析兩藥物是否有協(xié)同作用，并探討其作用機(jī)制。方法（1）細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒（Cell Counting Kit，CCK-8）法檢測(cè)不同濃度SIM對(duì)NB4、HL60、KG1三種細(xì)胞株細(xì)胞增殖情況的影響，并計(jì)算各細(xì)胞株的半抑制濃度（half maximal inhibitory concentration，IC50）；并檢測(cè)SIM（后續(xù)試驗(yàn)均采用IC50濃度）聯(lián)合不同解救劑，如甲基戊酸（mevalonate）、鯊烯（squalene）、法尼基焦磷酸鹽（Farnesy pyrophosphate salt，F(xiàn)PP）、香葉基香葉基焦磷酸鹽（Geranylgeranylpyrophosphate salt,GGPP）等共同培養(yǎng)細(xì)胞株24h后，對(duì)各細(xì)胞增殖率的影響。（2）流式細(xì)胞儀法（flow cytometry，F(xiàn)CM）檢測(cè)SIM單獨(dú)、SIM聯(lián)合不同解救劑處理NB4、HL60、KG1細(xì)胞株24h或48h后各組細(xì)胞凋亡率；以及SIM單獨(dú)或聯(lián)合細(xì)胞毒藥物Ara-c后的。（3）western法檢測(cè)SIM單獨(dú)或聯(lián)合各解救劑共同作用后，RAS和RHO的膜蛋白含量變化。（4）為進(jìn)步一明確SIM是否有化療增敏作用，我們檢測(cè)SIM單獨(dú)或聯(lián)合細(xì)胞毒藥物Ara-c作用NB4、HL60、KG1三細(xì)胞株細(xì)胞后，對(duì)各細(xì)胞株細(xì)胞增殖及凋亡的影響。同時(shí)我們還檢測(cè)了P65/NF-κB在SIM單獨(dú)或聯(lián)合Ara-c作用后的變化。結(jié)果（1）辛伐他汀對(duì)NB4、HL60、KG1等細(xì)胞有增殖抑制作用，均表現(xiàn)出時(shí)間和劑量的依賴(lài)性；但各細(xì)胞株對(duì)SIM敏感程度不同，NB4>HL60>KG1；當(dāng)SIM聯(lián)合不同解救劑作用于三種細(xì)胞株后，結(jié)果表明甲基戊酸、FPP和GGPP對(duì)三細(xì)胞株均有解救作用；而鯊烯對(duì)三細(xì)胞株的增殖抑制無(wú)影響，表明無(wú)解救作用；結(jié)果還表明對(duì)于三細(xì)胞株而言，GGPP的解救效果均優(yōu)于FPP的解救效果。（2）辛伐他汀對(duì)NB4、HL60、KG1等細(xì)胞有誘導(dǎo)凋亡作用，該效應(yīng)也呈時(shí)間劑量依賴(lài)性效應(yīng)；在SIM聯(lián)合甲基戊酸、FPP、GGPP共同作用后，三細(xì)胞的凋亡率較單用SIM處理時(shí)降低（p<0.05），但是SIM聯(lián)合鯊烯時(shí)與單用SIM相比細(xì)胞凋亡率無(wú)明顯改變（p>0.05）。（3）SIM能夠下調(diào)NB4、HL60及KG1細(xì)胞膜上RAS和RHO蛋白的表達(dá)量，伴隨藥物作用濃度增加及作用時(shí)間延長(zhǎng)，此下調(diào)效應(yīng)更為顯著；在甲基戊酸、GGPP、和FPP解救SIM作用后兩種蛋白在細(xì)胞膜上的表達(dá)量有不同程度的恢復(fù)，但是鯊烯解救SIM的作用后兩種蛋白在細(xì)胞膜上的含量較單獨(dú)使用SIM時(shí)均無(wú)明顯改善。（4）SIM與低劑量的Ara-c聯(lián)合培養(yǎng)細(xì)胞后，細(xì)胞增殖率較對(duì)照組、單用SIM組或單用小劑量Ara-c組有明顯降低（p<0.05），金氏公式計(jì)算NB4、HL60細(xì)胞在兩藥聯(lián)合后Q值分別為1.4734、1.3799，兩藥物具有協(xié)同作用，KG1細(xì)胞Q值為1.1057，具有相加作用。SIM與低劑量的Ara-c聯(lián)合培養(yǎng)細(xì)胞后，細(xì)胞凋亡率較對(duì)照組、單用SIM組或單用小劑量Ara-c組有明顯增加（p<0.05）。P65/NF-κB表達(dá)水平檢測(cè)表明，單獨(dú)使用小劑量Ara-c后，三細(xì)胞株細(xì)胞核內(nèi)P65/NF-κB表達(dá)水平時(shí)較陰性對(duì)照組增加；而單獨(dú)應(yīng)用SIM處理細(xì)胞后，細(xì)胞核內(nèi)P65/NF-κB表達(dá)水平較陰性對(duì)照組減少；在SIM聯(lián)合Ara-c共同處理細(xì)胞后，表達(dá)量較陰性對(duì)照組及單獨(dú)使用Ara-c組降低（p<0.05）。結(jié)論（1）SIM對(duì)NB4、HL60、KG1均有抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用，呈現(xiàn)時(shí)間和劑量依賴(lài)效應(yīng)，且三細(xì)胞株對(duì)SIM的敏感性不同（NB4>HL60>KG1）。（2）甲基戊酸、GGPP、FPP可不同程度的解救SIM的細(xì)胞毒性作用，而鯊烯卻無(wú)此效應(yīng)。（3）SIM能夠下調(diào)NB4、HL60、KG1細(xì)胞株細(xì)胞膜上RAS和RHO蛋白的表達(dá)量。當(dāng)聯(lián)合甲基戊酸、GGPP、FPP后細(xì)胞膜上的RAS和RHO蛋白的表達(dá)量有不同程度的恢復(fù)，聯(lián)合鯊烯時(shí)無(wú)此效果。（4）SIM能夠增強(qiáng)Ara-c對(duì)AML細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，兩者可發(fā)揮協(xié)同作用，并且使P65/NFκB入核量較單用Ara-c組有明顯的下調(diào)。

張旭輝^[2]（2011）在《辛伐他汀對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞的影響》文中指出一、辛伐他汀對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞株增殖的影響目的研究辛伐他汀（Simvastatin,SIM）對(duì)急性髓系白血?。ˋcute Myeloid Leukemia, AML）細(xì)胞株NB4、HL-60和SHI-1細(xì)胞增殖的影響,并初步探討其作用機(jī)制。方法MTT法及臺(tái)盼藍(lán)拒染法檢測(cè)不同濃度SIM作用后NB4、HL-60和SHI-1細(xì)胞的增殖水平。Annexin-V抗體檢測(cè)SIM作用后三種細(xì)胞株的凋亡率,并檢測(cè)了藥物作用前后細(xì)胞周期分布的變化。Elisa法檢測(cè)SIM及化療藥物作用后三種細(xì)胞株中細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的變化。定量PCR法檢測(cè)SIM下游羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶（HMG-CoA R）和低密度脂蛋白受體（LDL R）基因在藥物作用前后轉(zhuǎn)錄本表達(dá)水平的變化。結(jié)果SIM對(duì)NB4、HL-60和SHI-1細(xì)胞均有增殖抑制作用,但三細(xì)胞株對(duì)SIM的敏感性為各不相同,敏感性從高到低依次為NB4>HL60>SHI-1。SIM抑制細(xì)胞增殖的機(jī)制可能與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期阻滯以及細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平調(diào)節(jié)相關(guān)。SIM可誘導(dǎo)NB4及HL-60細(xì)胞凋亡,對(duì)SHI-1細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡的作用較弱。同時(shí)還能使細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期。ELISA法檢測(cè)SIM及柔紅霉素（DNR）、阿糖胞苷（Ara-C）作用后細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平發(fā)現(xiàn),SIM能夠降低細(xì)胞內(nèi)膽固醇濃度,DNR及Ara-C均使細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平迅速上升,但當(dāng)SIM與化療藥物共同作用后,細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平顯著降低,對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用也較化療藥物單獨(dú)作用時(shí)明顯增強(qiáng)。定量PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)SIM作用后HMG-CoA R和LDL R轉(zhuǎn)錄本表達(dá)水平均明顯增加,且呈時(shí)間依賴(lài)性。結(jié)論SIM能夠抑制NB4、HL-60和SHI-1等AML細(xì)胞增殖,并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,使細(xì)胞阻滯于G0/G1期。但對(duì)具有多藥耐藥表型的SHI-1細(xì)胞,SIM作用相對(duì)較弱。細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平對(duì)AML細(xì)胞有保護(hù)作用,通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平也能夠影響細(xì)胞增殖。SIM能夠增加細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。二、辛伐他汀對(duì)SHI-1細(xì)胞多藥耐藥基因表達(dá)水平的影響目的研究SIM對(duì)SHI-1細(xì)胞多藥耐藥（MDR1）基因表達(dá)的影響。方法臺(tái)盼藍(lán)拒染法檢測(cè)SIM處理及無(wú)血清培養(yǎng)后SHI-1細(xì)胞的增殖水平與細(xì)胞活力。FCM檢測(cè)無(wú)血清培養(yǎng)狀態(tài)下SHI-1細(xì)胞多藥耐藥蛋白（p-gp）表達(dá)水平的變化,以及不同濃度SIM對(duì)SHI-1細(xì)胞p-gp表達(dá)水平的影響。定量PCR法檢測(cè)無(wú)血清培養(yǎng)及SIM對(duì)MDR-1基因轉(zhuǎn)錄本表達(dá)水平的影響。采用Elisa法檢測(cè)了無(wú)血清培養(yǎng)后細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的變化,并進(jìn)一步檢測(cè)了SIM作用后,SHI-1對(duì)化療藥物敏感性的變化。結(jié)果SHI-1細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)條件下,細(xì)胞生長(zhǎng)速度明顯低于正常血清培養(yǎng)組,且呈時(shí)間依賴(lài)性。當(dāng)在無(wú)血清培養(yǎng)條件下,再同時(shí)加入SIM處理細(xì)胞,對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用顯著增強(qiáng)。無(wú)血清培養(yǎng)還能夠下調(diào)SHI-1細(xì)胞p-gp蛋白的表達(dá)水平,培養(yǎng)3天后p-gp表達(dá)量降至43.6%。SIM對(duì)SHI-1細(xì)胞的p-gp蛋白表達(dá)水平也有抑制作用,呈濃度依賴(lài)性。當(dāng)在無(wú)血清培養(yǎng)條件下,同時(shí)加用SIM處理細(xì)胞,細(xì)胞p-gp水平顯著下調(diào)。定量PCR檢測(cè)表明,無(wú)血清培養(yǎng)及SIM均能夠下調(diào)MDR1基因mRNA表達(dá)水平,聯(lián)合應(yīng)用后下調(diào)作用更為顯著。Elisa法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平發(fā)現(xiàn),無(wú)血清培養(yǎng)條件下細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平較有血清培養(yǎng)組上升,當(dāng)加入SIM同時(shí)作用后,細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平則明顯下降。對(duì)化療藥物敏感性試驗(yàn)則證實(shí),SIM預(yù)先作用的SHI-1細(xì)胞對(duì)柔紅霉素更為敏感,細(xì)胞死亡率明顯高于未處于組。結(jié)論SIM及無(wú)血清培養(yǎng)能夠顯著抑制具有多藥耐藥表型的SHI-1細(xì)胞增殖,并能夠下調(diào)SHI-1細(xì)胞p-gp蛋白及MDR1基因轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)水平;在無(wú)血清培養(yǎng)條件下同時(shí)加入SIM處理細(xì)胞時(shí),以上三項(xiàng)抑制作用更為顯著。SIM預(yù)先處理細(xì)胞,能夠增加多藥耐藥細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性,增強(qiáng)藥物對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用。三、辛伐他汀對(duì)急性髓系白血病CD34+細(xì)胞的影響目的初步探討SIM對(duì)AML患者及正常健康志愿者的骨髓CD34+細(xì)胞的影響。方法收集AML患者及正常健康志愿者的骨髓5～10ml,采用Ficoll梯度離心方法提取單個(gè)核細(xì)胞,采用CD34+磁珠分選其中CD34+和CD34-細(xì)胞。臺(tái)盼藍(lán)拒染法觀察不同濃度的SIM對(duì)兩組細(xì)胞增殖的影響。定量PCR法檢測(cè)HMG-CoA R和LDL R轉(zhuǎn)錄本在SIM作用前后表達(dá)水平的變化。結(jié)果共收集15例初治AML患者和8例正常健康志愿者的骨髓,CD34磁珠分選了骨髓單個(gè)核細(xì)胞中的CD34+和CD34-細(xì)胞。不同濃度SIM作用于AML患者及正常志愿者的CD34+細(xì)胞24小時(shí)后發(fā)現(xiàn),正常CD34+細(xì)胞的增殖呈劑量依賴(lài)性下降;但AML患者的CD34+細(xì)胞對(duì)SIM反應(yīng)表現(xiàn)出了異質(zhì)性。以正常CD34+細(xì)胞對(duì)20μM SIM的反應(yīng)為標(biāo)準(zhǔn),AML患者CD34+細(xì)胞可分為正常反應(yīng)和異常反應(yīng)組,對(duì)SIM敏感的為正常反應(yīng)組,對(duì)SIM不敏感的為異常反應(yīng)組。進(jìn)一步進(jìn)行藥敏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),正常反應(yīng)組AML患者的CD34+細(xì)胞對(duì)DNR較為敏感,異常反應(yīng)組則對(duì)DNR敏感性較差。當(dāng)SIM與DNR共同應(yīng)用后,細(xì)胞的增殖抑制率明顯增加。正常反應(yīng)組和異常反應(yīng)組AML患者CD34-細(xì)胞對(duì)SIM反應(yīng)相似。定量PCR法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),5例正常反應(yīng)組和4例異常反應(yīng)組AML患者的CD34+細(xì)胞中HMG-CoA R及LDL R的mRNA表達(dá)水平均較對(duì)照組有明顯增加。結(jié)論正常健康志愿者CD34+細(xì)胞在SIM作用后呈劑量依賴(lài)性下降,AML患者CD34+細(xì)胞對(duì)SIM反應(yīng)呈異質(zhì)性,分為正常反應(yīng)組和異常反應(yīng)組。SIM能夠增加兩組細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。SIM作用于兩組細(xì)胞后,細(xì)胞內(nèi)HMG-CoA R及LDL R的mRNA表達(dá)水平均增加。

于潔^[3]（2008）在《惡性血液病低密度脂蛋白膽固醇受體及HMG-CoA還原酶活性的研究》文中研究說(shuō)明第一篇K562和HL-60細(xì)胞低密度脂蛋白膽固醇受體及HMG-CoA還原酶活性變化及意義目的:尋找白血病細(xì)胞和正常細(xì)胞之間脂質(zhì)代謝的差異,進(jìn)而利用這種差異進(jìn)行靶向治療,尋找抑制白血病細(xì)胞增殖但對(duì)正常細(xì)胞無(wú)損傷的有效方法。方法:參照孟凡青方法并加以改進(jìn),采用低濃度阿托伐他汀抑制細(xì)胞內(nèi)源性膽固醇合成途徑,提供外源性低密度脂蛋白膽固醇供細(xì)胞生長(zhǎng),應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)抑制率,進(jìn)而判斷低密度脂蛋白受體活性。應(yīng)用紫外分光光度法測(cè)定細(xì)胞3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A（HMG-CoA）還原酶活性;采用MTT法觀察HMG-CoA抑制劑阿托伐他汀對(duì)白血病細(xì)胞系K562、HL-60和正常細(xì)胞系HK-2細(xì)胞增殖作用的影響:將對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的細(xì)胞按每孔100μl接種于96孔培養(yǎng)板中,阿托伐他汀用含10%胎牛血清的RPMI1640分別配成10,20,40,80,160μmol/L加入培養(yǎng)體系,每孔100μl,以不加藥物而加含10%胎牛血清的RPMI1640 100μl及上述細(xì)胞100μl的培養(yǎng)體系為對(duì)照。結(jié)果:與正常細(xì)胞HK-2比較,白血病細(xì)胞K562、HL-60低密度脂蛋白膽固醇受體活性增高、HMG-CoA還原酶活性增高（p＜0.05）;阿托伐他汀以時(shí)間和劑量依賴(lài)性的方式抑制K562、HL-60細(xì)胞增殖,即隨著阿托伐他汀處理濃度的加大、作用時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞存活率逐漸下降。阿托伐他汀對(duì)HK-2細(xì)胞增殖抑制作用與時(shí)間及劑量無(wú)關(guān)。結(jié)論:白血病細(xì)胞系K562、HL-60細(xì)胞低密度脂蛋白膽固醇受體和HMG-CoA還原酶活性較正常細(xì)胞HK-2增高;應(yīng)用HMG-CoA還原酶抑制劑（阿托伐他汀）干擾細(xì)胞內(nèi)源性膽固醇合成途徑可以抑制白血病細(xì)胞系K562、HL-60細(xì)胞的增殖;MTT方法是一種測(cè)定細(xì)胞LDL受體活性的可靠、簡(jiǎn)便、安全的方法。第二篇急性白血病細(xì)胞低密度脂蛋白膽固醇受體及HMG-CoA還原酶活性變化及意義目的研究急性白血病患者骨髓細(xì)胞低密度脂蛋白膽固醇受體及HMG-CoA還原酶活性變化及意義。方法以20例非惡性血液病患者骨髓為對(duì)照,實(shí)驗(yàn)組分為初治組、緩解組、復(fù)發(fā)組、持續(xù)緩解組及未緩解組。檢測(cè)了56例急性白血病患者化療前后骨髓細(xì)胞低密度脂蛋白膽固醇受體及HMG-CoA還原酶活性;觀察了HMG-CoA還原酶抑制劑—阿托法他?。⑵胀祝?duì)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組細(xì)胞的增殖抑制作用。實(shí)驗(yàn)方法同第一章。結(jié)果與對(duì)照組比較,初治組、復(fù)發(fā)組及未緩解組急性白血病細(xì)胞低密度脂蛋白膽固醇受體活性增高、HMG-CoA還原酶活性增高（p＜0.001）,緩解組及持續(xù)緩解組其二者活性與對(duì)照組差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。阿托法他?。⑵胀祝┮詴r(shí)間和劑量依賴(lài)性的方式抑制初治急性白血病患者、復(fù)發(fā)和未緩解患者骨髓細(xì)胞的增殖,但對(duì)于后兩組患者的抑制率低于初治患者。阿托伐他對(duì)緩解組急性白血病患者骨髓細(xì)胞及對(duì)照骨髓細(xì)胞增殖抑制作用與時(shí)間及劑量無(wú)關(guān)。結(jié)論初治急性白血病患者低密度脂蛋白膽固醇受體及HMG-CoA還原酶活性明顯高于對(duì)照組,完全緩解后恢復(fù)至接近對(duì)照組水平,復(fù)發(fā)后及未緩解時(shí)升高。檢測(cè)低密度脂蛋白膽固醇受體及HMG-CoA還原酶活性對(duì)急性白血病的病情判斷、預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)、估計(jì)預(yù)后可能有一定意義。阿托伐他汀具有抑制急性白血病細(xì)胞增殖的作用,HMG-CoA還原酶抑制劑具有輔助治療白血病的可能性。

趙麗艷^[4]（2008）在《氟伐他汀對(duì)人早幼粒白血病HL-60細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用及其機(jī)制的研究》文中提出近年大量證據(jù)表明,某些惡性腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)外誘導(dǎo)劑的作用下,可向正常細(xì)胞逆轉(zhuǎn)（誘導(dǎo)分化）。誘導(dǎo)分化治療能使腫瘤細(xì)胞重新分化為正常細(xì)胞,其本身并無(wú)明顯細(xì)胞毒性、骨髓和免疫抑制等毒性作用,這已成為人類(lèi)腫瘤治療的新方向,但目前尚缺乏高效、低毒的分化誘導(dǎo)劑。他汀類(lèi)藥物是3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑,已廣泛用于臨床高血脂的治療。氟伐他?。‵lu）是其中的一種。他汀類(lèi)藥物具有多向性效應(yīng),除降血脂外,它還具有其他生物學(xué)作用。然而,有關(guān)氟伐他?。‵lu）對(duì)人早幼粒白血病HL-60細(xì)胞（HL-60細(xì)胞）的誘導(dǎo)分化作用尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究應(yīng)用細(xì)胞學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)、分子生物學(xué)等技術(shù),觀察Flu對(duì)HL-60細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用、對(duì)細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、凋亡及VEGF基因表達(dá)的影響等,并探討Flu誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞分化的主要分子機(jī)制。本研究結(jié)果證明,Flu能誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞分化;Flu呈劑量和時(shí)間依賴(lài)方式抑制HL-60細(xì)胞的增殖和細(xì)胞生長(zhǎng);經(jīng)Flu處理后,HL-60細(xì)胞阻滯在G0/G1期,進(jìn)入S期細(xì)胞減少;Flu能誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡;經(jīng)Flu處理的HL-60細(xì)胞VEGF基因表達(dá)明顯降低。在Flu處理的同時(shí)加入甲羥戊酸,可逆轉(zhuǎn)Flu對(duì)HL-60細(xì)胞的上述影響,提示Flu對(duì)HL-60細(xì)胞生物行為的作用是甲羥戊酸途徑依賴(lài)的,這可能是Flu誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞分化的重要分子機(jī)制。

鄭龍志^[5]（2007）在《阿伐他汀對(duì)膽管癌QBC939細(xì)胞系增殖及侵襲的影響》文中研究表明目的:研究阿伐他?。ˋtorvastatin）對(duì)人膽管癌QBC939細(xì)胞系的增殖調(diào)亡及侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響,并進(jìn)一步探討其作用的可能機(jī)制。方法:應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)QBC939細(xì)胞,以MTT法檢測(cè)阿伐他汀對(duì)細(xì)胞的殺傷抑制作用;瓊脂糖凝膠電泳分析細(xì)胞的調(diào)亡情況;Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)和運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲力及運(yùn)動(dòng)能力的改變;半定量RT-PCR法檢測(cè)p27、MMP-9、RhoC mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果:阿伐他汀可抑制QBC939細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖,且呈劑量-時(shí)間雙效應(yīng)關(guān)系;IC50為25μmol/L,最佳作用時(shí)間為48h。瓊脂糖凝膠電泳分析顯示,阿伐他汀可誘導(dǎo)QBC939細(xì)胞發(fā)生調(diào)亡。Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)和運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)顯示,阿伐他汀能夠抑制QBC939細(xì)胞的體外侵襲和運(yùn)動(dòng)能力,且隨著阿伐他汀濃度的提高透膜細(xì)胞數(shù)目逐漸減少,呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系。半定量RT-PCR法測(cè)定顯示,經(jīng)阿伐他汀處理的QBC939細(xì)胞中p27表達(dá)上升,MMP-9表達(dá)下降,而RhoC表達(dá)并無(wú)明顯改變。結(jié)論:阿伐他汀可抑制人膽管癌QBC939細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖、誘導(dǎo)調(diào)亡,并能抑制細(xì)胞體外侵襲及運(yùn)動(dòng)能力;其機(jī)制可能與阿伐他汀干擾QBC939細(xì)胞中p27、MMP-9的表達(dá)有關(guān)。

廖海球^[6]（2007）在《人雄激素非依賴(lài)性前列腺癌細(xì)胞Caveolin-1基因的表達(dá)及辛伐他汀的干預(yù)研究》文中研究指明前列腺癌為西方國(guó)家最常見(jiàn)的惡性腫瘤，居西方國(guó)家男性所有惡性腫瘤發(fā)病率的第二位，死亡率的首位。我國(guó)前列腺癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，目前已位居泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤的第三位。前列腺癌從發(fā)生到臨床表現(xiàn)需要長(zhǎng)達(dá)十幾年甚至幾十年的時(shí)間。大量研究表明，正常前列腺組織發(fā)展為前列腺癌經(jīng)歷了前列腺上皮細(xì)胞內(nèi)瘤、局部前列腺癌、侵襲性前列腺癌和轉(zhuǎn)移性前列腺癌等階段。約2／3的前列腺癌患者就診時(shí)已是晚期，只能采用雄激素阻斷為主的綜合治療。阻斷雄激素能有效的緩解前列腺癌癥狀，但12～18個(gè)月后，約1／3的病人前列腺癌會(huì)復(fù)發(fā)，并轉(zhuǎn)變?yōu)樾奂に胤且蕾?lài)性前列腺癌。目前，臨床上尚無(wú)有效的方法來(lái)治療雄激素非依賴(lài)性前列腺癌，因此對(duì)該類(lèi)患者的治療已經(jīng)成為臨床關(guān)注的焦點(diǎn)之一。在雄激素依賴(lài)性前列腺癌細(xì)胞向雄激素非依賴(lài)性前列腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化過(guò)程中，有多種因子參與或介導(dǎo)。近年來(lái)研究表明，Caveolin-1不僅與維持膽固醇平衡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)等多種生理功能密切相關(guān)外，而且在惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的多方面、多環(huán)節(jié)上發(fā)揮著關(guān)鍵的調(diào)控作用。新近研究發(fā)現(xiàn)Caveolin-1在前列腺癌尤其是進(jìn)展期前列腺癌中呈高表達(dá)，可能參與前列腺癌的發(fā)生與發(fā)展。他汀類(lèi)藥物，羥甲基戊二酸單酰輔酶A（HMG-CoA）還原酶的抑制劑，是目前臨床治療動(dòng)脈粥樣硬化極為重要的一類(lèi)調(diào)脂藥。最近的研究發(fā)現(xiàn)，他汀類(lèi)藥物對(duì)人白血病細(xì)胞株HL-60、黑素瘤、纖維瘤、乳腺癌等多種細(xì)胞有明顯抑制增殖及誘導(dǎo)凋亡的作用。但是，他汀類(lèi)藥物能否抑制前列腺癌細(xì)胞尤其是雄激素非依賴(lài)性前列癌細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)凋亡，以及是否通過(guò)Caveolin-1基因發(fā)生作用，目前尚未見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。本研究采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）、Western blot法檢測(cè)人雄激素非依賴(lài)性前列腺癌PC-3和PC-3m細(xì)胞系中Caveolin-1mRNA及蛋白表達(dá)情況，初步探討Caveolin-1過(guò)表達(dá)是否與前列腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)；采用HMA-CoA還原酶抑制劑辛伐他汀觀察其對(duì)人前列腺癌PC-3細(xì)胞增殖、凋亡及Caspase-9，8，3活性與Caveolin-1表達(dá)的影響，探討辛伐他汀對(duì)人前列腺癌的作用及可能的分子機(jī)制，為臨床上前列腺癌的預(yù)防與治療提供新的理論與方法。第一章Caveolin-1在人雄激素非依賴(lài)性前列腺癌PC-3和PC-3m細(xì)胞中的表達(dá)及意義目的：研究人前列腺癌PC-3和PC-3m細(xì)胞中Caveolin-1mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)，分析Caveolin-1與前列腺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，探討Caveolin-1過(guò)表達(dá)在PC-3m具有高侵襲性和轉(zhuǎn)移性中的作用，為雄激素非依賴(lài)性前列腺癌基因治療提供新靶點(diǎn)。方法：以人前列腺癌PC-3和PC-3m細(xì)胞系為研究對(duì)象，采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（R7-PCR）、Western blot法檢測(cè)Caveolin-1mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)。結(jié)果：1．人前列腺癌PC-3和PC-3m細(xì)胞中均有Caveolin-1mRNA的表達(dá)，PC-3m細(xì)胞中的Caveolin-1表達(dá)水平明顯高于PC-3細(xì)胞，兩者有顯著性差異（P＜0.05）。2．人前列腺癌PC-3和PC-3m細(xì)胞中均有Caveolin-1蛋白質(zhì)表達(dá)，PC-3m細(xì)胞中Caveolin-1蛋白質(zhì)表達(dá)量較PC-3細(xì)胞增加，兩者有顯著性差異（P＜0.05）。結(jié)論：1．PC-3、PC-3m細(xì)胞中存在Caveolin-1mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)。2．Caveolin-1過(guò)表達(dá)可能與人前列腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)。3．Caveolin-1可作為前列腺癌基因治療的一個(gè)靶點(diǎn)。第二章辛伐他汀對(duì)人雄激素非依賴(lài)性前列腺癌PC-3細(xì)胞的作用研究目的：觀察辛伐他汀對(duì)人前列腺癌PC-3細(xì)胞增殖、凋亡的影響，探討辛伐他汀對(duì)人前列腺癌的作用及可能分子機(jī)制。方法：四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）比色法檢測(cè)PC-3細(xì)胞的增殖；Hoechst 33258染色后熒光顯微鏡法觀察PC-3細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變，并計(jì)算凋亡核百分率；Annexin V-FITC／PI雙染色，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡；Caspase活性定量檢測(cè)試劑盒檢測(cè)半胱天冬特異性蛋白酶-9，8，3（Caspase-9，8，3）的活性；RT-PCR及Western blot檢測(cè)Caveolin-1mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)。結(jié)果：1．辛伐他汀可顯著抑制PC-3細(xì)胞的體外增殖，并呈濃度和時(shí)間依賴(lài)性（P＜0.05）。2．Hoechst 33258染色顯示PC-3細(xì)胞經(jīng)辛伐他?。?0μmol／L）分別處理24h和48h后，細(xì)胞出現(xiàn)凋亡，形態(tài)學(xué)變化表現(xiàn)為凋亡細(xì)胞體積縮小，核固縮，鏡下細(xì)胞核呈致密濃染或碎塊狀致密濃染。FACS檢測(cè)結(jié)果顯示，20μmol／L辛伐他汀處理12h、24h、48h后的凋亡細(xì)胞數(shù)分別為14.81±1.08％、23.42±2.33％、40.77±4.06％。PC-3細(xì)胞分別經(jīng)10μmol／L、20μmol／L、40μmol／L辛伐他汀處理48h后，凋亡細(xì)胞數(shù)逐漸增多，凋亡核百分率計(jì)數(shù)分別為（11.20±3.33）％，（31.20±3.08）％，（56.24±4.50）％。FAGS檢測(cè)結(jié)果顯示，10μmol／L、20μmol／L、40μmol／L辛伐他汀處理PC-3細(xì)胞48h后的凋亡細(xì)胞數(shù)分別為17.26±1.44％、32.45±2.56％、60.47±3.98％。PC-3細(xì)胞經(jīng)辛伐他汀（20μmol／L、40μmol／L）處理12h后，Caspase-9，8，3的活性顯著增加。3．RT-PCR及Western blot檢測(cè)顯示10μmol／L、20μmol／L、40μmol／L辛伐他汀處理48h后Caveolin-1mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平均降低。結(jié)論：1．辛伐他汀能明顯抑制人前列腺癌PC-3細(xì)胞的體外增殖。2．辛伐他汀可誘導(dǎo)人前列腺癌PC-3細(xì)胞發(fā)生凋亡。3．辛伐他汀抑制人前列腺癌PC-3細(xì)胞的增殖及誘導(dǎo)PC-3細(xì)胞凋亡可能與降低Caveolin-1的表達(dá)有關(guān)。4．HMA-CoA還原酶抑制劑為臨床上前列腺癌的預(yù)防與治療提供了一種新方法。

郭麗萍^[7]（2007）在《美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖和侵襲轉(zhuǎn)移能力的抑制作用及其放化療增敏作用》文中指出肺癌已占據(jù)全球癌癥死亡的首位,發(fā)病率和病死率逐年上升,其中非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）占肺癌總數(shù)的80%,其惡性度高,對(duì)放療、化療不敏感,5年生存率不足15%。研究發(fā)現(xiàn),惡性腫瘤細(xì)胞對(duì)膽固醇及其前體物質(zhì)的濃度要求較高,所以限制膽固醇的合成和利用,可作為腫瘤預(yù)防和治療的輔助手段。美伐他?。╩evastatin,M）屬HMG-CoA還原酶抑制劑,是甲羥戊酸（mevalonate,MVA,系類(lèi)異戊二烯的前體）合成途徑的限速酶。另外,甲羥戊酸還是除膽固醇外,長(zhǎng)醇、泛醌等多種生物合成類(lèi)異戊二烯化合物的前體。甲羥戊酸衍生物即類(lèi)異戊二烯類(lèi)化合物可以影響Ras和Rho蛋白的細(xì)胞膜精確定位,它們構(gòu)成細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)并維持其完整性,并參與細(xì)胞的增殖、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和抑制腫瘤細(xì)胞侵襲等重要生物學(xué)功能[2]。近年來(lái),研究發(fā)現(xiàn)美伐他汀可抑制多種惡性腫瘤細(xì)胞（如結(jié)腸癌細(xì)胞、HL-60細(xì)胞）的增殖并誘導(dǎo)凋亡,并可以起到抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的作用。同時(shí)發(fā)現(xiàn),他汀類(lèi)藥物可以增強(qiáng)某些細(xì)胞毒藥物以及放療和化療的抗腫瘤作用,而且并不影響正常組織的功能。迄今為止,他汀類(lèi)藥物這些作用的確切分子機(jī)制尚不完全清楚。本研究擬探討了美伐他汀對(duì)NSCLC增殖和侵襲轉(zhuǎn)移能力的抑制作用及其放化療增敏作用,旨在為美伐他汀的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù),為NSCLC的治療提供新的思路。本實(shí)驗(yàn)分為如下四個(gè)部分:第一部分:美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞體外增殖的影響目的:研究美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞體外增殖的影響和影響機(jī)制。方法:1.四唑氮藍(lán)比色試驗(yàn)（MTT）檢測(cè)美伐他汀對(duì)肺腺癌細(xì)胞株A549和肺鱗癌細(xì)胞株NCI-H520的體外增殖抑制作用。2.流式細(xì)胞儀檢測(cè)美伐他汀對(duì)NSCLC細(xì)胞周期影響。3.應(yīng)用RT-PCR方法和流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)P21mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1.美伐他汀對(duì)肺腺癌細(xì)胞株A549和肺鱗癌細(xì)胞株NCI-H520均有明顯的體外增殖抑制作用,IC50值均為50μmol/L,而且隨美伐他汀劑量的增大和作用時(shí)間的延長(zhǎng),抑制作用明顯增強(qiáng),即有明顯的時(shí)間和劑量依賴(lài)關(guān)系。2.隨著美伐他汀作用劑量加大,細(xì)胞周期發(fā)生改變, G0/G1期細(xì)胞明顯增加,說(shuō)明美伐他汀可以引起NSCLC細(xì)胞周期阻滯。A549和NCI-H520細(xì)胞經(jīng)25-100 ummol/L美伐他汀作用后, G0/G1細(xì)胞比例分別為44.46%、68.15%、71.16%和48.48%、70.24%、82.86%,明顯高于對(duì)照（P<0.05,P<0.01）。3加入外源性甲羥戊酸可完全逆轉(zhuǎn)美伐他汀對(duì)A549和NCI-H520細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制作用和對(duì)其細(xì)胞周期的影響。4.美伐他汀作用后A549與NCI-H520細(xì)胞各組P21 mRNA的表達(dá)水平均無(wú)明顯變化;P21胞膜蛋白進(jìn)行性下降（P<0.05,P<0.01）,成劑量依賴(lài)性;而P21總蛋白表達(dá)無(wú)明顯變化（P>0.05）。結(jié)論:1.美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株有明顯的增殖抑制作用,且呈劑量和時(shí)間依賴(lài)性。2.美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的抑制作用與其誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯有關(guān)。3.加入外源性MVA可以完全消除美伐他汀對(duì)A549、NCI-H520細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期分布的影響,說(shuō)明美伐他汀對(duì)NSCLC細(xì)胞增殖的抑制作用是通過(guò)抑制甲羥戊酸的合成介導(dǎo)的。4.美伐他汀通過(guò)影響ras蛋白的異戊二烯化,即P21蛋白的膜定位,達(dá)到抑制NSCLC細(xì)胞增殖的作用。第二部分:美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞凋亡的影響目的:研究美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞凋亡的影響和影響機(jī)制方法:1.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)、丫啶橙雙色熒光顯微鏡和電鏡分析檢測(cè)了美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞凋亡的影響,2.采用RT-PCR技術(shù)分析了美伐他汀作用后凋亡相關(guān)因子X(jué)IAP、Survivin mRNA的表達(dá)3.采用western blot技術(shù)分析了美伐他汀作用Survivin蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1.丫啶橙雙色熒光染色顯示美伐他汀作用于A549和NCI-H520細(xì)胞48小時(shí),均出現(xiàn)不同程度的早期凋亡細(xì)胞和少量中晚期凋亡細(xì)胞（呈現(xiàn)橙色熒光,可見(jiàn)核的斷裂和濃縮）,而且隨美伐他汀劑量的增大,改變?cè)矫黠@。其中晚期凋亡細(xì)胞百分率分別為8.17%、21.83%和29.53%和18.58%、21.67%和36.39%,凋亡率顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。2.透射電鏡從形態(tài)學(xué)上證實(shí)美伐他汀作用NSCLC細(xì)胞后可以出現(xiàn)凋亡的形態(tài)學(xué)改變:50μmol/L美伐他汀處理A549 48h后,出現(xiàn)早期凋亡細(xì)胞的形態(tài)的改變:細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡變性,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,有出芽現(xiàn)象。100μmol/L美伐他汀處理A549和NCI-H520細(xì)胞48h后出現(xiàn)典型的凋亡細(xì)胞,表現(xiàn)為外形不規(guī)則,體積明顯縮小,胞漿濃縮,核碎裂,染色質(zhì)邊緣化、染色質(zhì)濃集。3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)25-100μmol/L美伐他汀作用于A549和NCI-H520細(xì)胞后其凋亡率明顯增高（P<0.05）,呈劑量依賴(lài)性。加入外源性甲羥戊酸后A549和NCI-H520細(xì)胞凋亡率與對(duì)照組比較結(jié)果均無(wú)顯著性差異。4.細(xì)胞周期的改變:細(xì)胞周期檢測(cè)亞G1峰發(fā)現(xiàn):隨著美伐他汀作用劑量加大A549和NCI-H520細(xì)胞亞G1峰越來(lái)越明顯。5. 50-100μmol/L美伐他汀作用48小時(shí)后,NSCLC細(xì)胞的survivin mRNA及蛋白的表達(dá)逐漸降低,呈劑量依賴(lài)性。6. 25-100μmol/L美伐他汀作用24小時(shí)后,NSCLC細(xì)胞的XIAP mRNA的表達(dá)逐漸降低,成劑量依賴(lài)性。結(jié)論:1.美伐他汀作用NSCLC細(xì)胞后可以出現(xiàn)凋亡的形態(tài)學(xué)及流式細(xì)胞學(xué)變化,即美伐他汀可以誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞發(fā)生凋亡。2.美伐他汀誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞凋亡的機(jī)制可能與降低XIAP、survivin的表達(dá)有關(guān)。3.加入外源性MVA可以完全消除美伐他汀對(duì)A549、NCI-H520細(xì)胞凋亡的影響,說(shuō)明美伐他汀誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞凋亡的機(jī)制是通過(guò)抑制甲羥戊酸的合成介導(dǎo)的。第三部分:美伐他汀對(duì)NSCLC細(xì)胞體外粘附能力和侵襲力的影響目的:研究美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞體外粘附能力和侵襲力的影響方法:1應(yīng)用粘附試驗(yàn)、Transwell法檢測(cè)美伐他汀對(duì)NSCLC細(xì)胞株的體外粘附和侵襲能力的影響。2應(yīng)用western blot方法檢測(cè)MMP和NF-κB蛋白的表達(dá)探討美伐他汀影響NSCLC細(xì)胞株粘附和侵襲能力的機(jī)制。結(jié)果:1.美伐他汀對(duì)A549細(xì)胞體外粘附有明顯的抑制作用,呈劑量依賴(lài)性,即隨美伐他汀劑量的增加其粘附率逐漸下降。2.美伐他汀對(duì)A549和NCI-H520細(xì)胞體外侵襲能力有明顯的抑制作用,呈劑量依賴(lài)性,即隨美伐他汀劑量的增加侵襲抑制作用明顯增強(qiáng)。25、50、100μmol/L美伐他汀作用后,A549平均穿膜細(xì)胞數(shù)分別為123.68、67.20和29.41,NCI-H520平均穿膜細(xì)胞數(shù)為136.36、58.80和27.97,明顯低于對(duì)照組和MVA組（P<0.01）,隨著美伐他汀濃度增高穿膜細(xì)胞數(shù)減少,且50、100μmol/L組的穿膜細(xì)胞數(shù)明顯低于25μmol/L組（P<0.01）。加入MVA后兩組細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)接近對(duì)照組。3. western blot顯示美伐他汀作用A549和NCI-H520細(xì)胞后MMP-2、MMP-9、NF-κB（p65）的蛋白表達(dá)逐漸降低,呈劑量依賴(lài)性。結(jié)論:1.美伐他汀可降低NSCLC細(xì)胞的體外粘附能力。2.美伐他汀可以抑制NSCLC細(xì)胞的體外侵襲能力,3.美伐他汀抑制NSCLC細(xì)胞的粘附和體外侵襲能力,其機(jī)制可能與減少M(fèi)MP-9、MMP-2、NF-κB P65蛋白表達(dá)有關(guān)。第四部分美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌的放療和化療的增敏作用及機(jī)制目的:探討美伐他汀對(duì)NSCLC的放療和化療增敏作用及其機(jī)制。方法:1. MTT法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)放療、順鉑（DDP）、足葉乙甙（VP16）單獨(dú)應(yīng)用的增殖抑制率及與美伐他汀聯(lián)合應(yīng)用的增殖抑制率,并根據(jù)金氏公式計(jì)算Q值,評(píng)價(jià)兩藥的合用效應(yīng),檢測(cè)了美伐他汀對(duì)NSCLC的放療和化療的影響,2.應(yīng)用Western印跡法檢測(cè)p53蛋白在其中發(fā)揮的作用,探討美伐他汀對(duì)NSCLC放療和化療增敏的作用機(jī)制。結(jié)果:1. 10Gy放療聯(lián)合10-100umol/L美伐他汀作用24-72小時(shí)抑制率均顯著高于單獨(dú)放療組,且隨美伐他汀劑量增大、作用時(shí)間的延長(zhǎng),抑制率明顯增加。2.放療聯(lián)合25umol/L美伐他汀作用48小時(shí)后,凋亡率分別為41.27%和49.19%,明顯高于單獨(dú)放療組和美伐他汀組（P<0.01）。3. DDP對(duì)肺腺癌、鱗癌細(xì)胞株均有明顯的體外抑制作用,且抑制作用呈劑量依賴(lài)型和時(shí)間依賴(lài)性。1.25、2.5mg/L的DDP分別聯(lián)合10-100umol/L美伐他汀后對(duì)NSCLC抑制作用明顯增強(qiáng),且兩藥聯(lián)合的Q值>1.15,二者合用有協(xié)同作用。4. VP16對(duì)肺腺癌、鱗癌細(xì)胞株均有明顯的體外抑制作用,且抑制作用呈劑量依賴(lài)型和時(shí)間依賴(lài)性。1.25、2.5mg/L的VP16分別聯(lián)合10-100umol/L美伐他汀后對(duì)NSCLC抑制作用明顯增強(qiáng),且兩藥聯(lián)合的Q值>1.15,二者合用有協(xié)同作用。5.美伐他汀聯(lián)合順鉑作用于A549、NCI-H520細(xì)胞后凋亡率明顯增加,分別55.27%和42.93%,明顯高于單用藥組（P<0.01）。6.western blot顯示美伐他汀作用A549和NCI-H520細(xì)胞后P53蛋白表達(dá)逐漸增強(qiáng),呈劑量依賴(lài)性。結(jié)論:1美伐他汀可增強(qiáng)DDP、VP16對(duì)NSCLC的抑制作用,具有化療增敏作用,其機(jī)制可能與誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期阻滯和上調(diào)P53蛋白表達(dá)有關(guān)。2美伐他汀有放療增敏作用,其機(jī)制可能與誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞調(diào)亡和上調(diào)P53蛋白表達(dá)有關(guān)。

張敬^[8]（2007）在《辛伐他汀對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的體外作用及其機(jī)制研究》文中提出目的:通過(guò)研究辛伐他?。⊿imvastatin）對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的體外作用,觀察辛伐他汀聯(lián)合抗癌藥物奧沙利鉑（Oxaliplation）對(duì)SW480細(xì)胞體外作用的影響,進(jìn)一步闡明辛伐他汀抑制腫瘤細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)凋亡的可能機(jī)制,并探討其用于結(jié)腸癌治療及化學(xué)預(yù)防的可行性。方法:1體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480,采用四甲基偶氮唑藍(lán)（tetrzolium-based colorimetric assay, MTT）比色法檢測(cè)辛伐他汀對(duì)該細(xì)胞增殖的影響;流式細(xì)胞儀測(cè)定辛伐他汀對(duì)SW480細(xì)胞周期分布和凋亡的影響;光學(xué)顯微鏡及透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;采用流式細(xì)胞術(shù)（flow cytometry,FCM）半定量檢測(cè)辛伐他汀處理細(xì)胞48h后bcl-2、cyclind1蛋白的表達(dá)水平。2采用MTT比色法檢測(cè)辛伐他汀與抗癌藥物奧沙利鉑聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的增殖抑制作用,采用金氏公式[1]分析相互作用指數(shù)（Iteraction Index）,評(píng)價(jià)聯(lián)合后的作用,如q>0.85表示相加作用,q<0.85為拮抗作用;流式細(xì)胞儀檢測(cè)辛伐他汀聯(lián)合不同濃度奧沙利鉑對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果:1 MTT比色法顯示辛伐他?。?、5、10、20μmol/L）對(duì)SW480細(xì)胞增殖具有抑制作用。不同濃度辛伐他汀處理細(xì)胞2472h后,與對(duì)照組相比,各處理組OD值均有不同程度下降,差異具有極顯著性（P<0.01）。各實(shí)驗(yàn)組間比較,差異亦具有極顯著性（P<0.01）。且隨辛伐他汀處理濃度的增大、作用時(shí)間的延長(zhǎng),OD值逐漸下降,即辛伐他汀對(duì)SW480細(xì)胞的增殖抑制作用呈明顯的時(shí)間-劑量依賴(lài)效應(yīng)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布顯示,0、2、5、10、20μmol/L辛伐他汀作用SW480細(xì)胞48h后,隨藥物濃度增大,G0/G1期細(xì)胞逐漸增多,S期細(xì)胞逐漸減少,G2/M期細(xì)胞變化不明顯。即辛伐他汀可阻滯SW480細(xì)胞周期進(jìn)程于G0/G1期,該作用呈劑量-效應(yīng)依賴(lài)關(guān)系。0、5、10、20μmol/L辛伐他汀處理細(xì)胞48h后,流式細(xì)胞儀可測(cè)得典型的亞二倍體凋亡峰,依辛伐他汀濃度增大而逐漸升高,凋亡百分率分別為:1.97%、11.71%、26.66%、34.07%。光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)果顯示:未經(jīng)藥物作用的細(xì)胞呈菱形或梭形,形態(tài)飽滿(mǎn),而用藥組細(xì)胞皺縮,破裂,呈不規(guī)則形,有的細(xì)胞兩端出現(xiàn)細(xì)長(zhǎng)的偽足,細(xì)胞胞漿中出現(xiàn)空泡,脫落細(xì)胞增多。透射電鏡下觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,細(xì)胞體積縮小,胞質(zhì)濃縮,胞核向外呈銳角突起,染色質(zhì)高度濃縮,電子密度增高,邊集于核膜下或呈新月?tīng)?有的出現(xiàn)核固縮。流式細(xì)胞儀間接分析細(xì)胞bcl-2、cyclind1蛋白表達(dá)顯示,0、5、10、20μmol/L辛伐他汀處理SW480細(xì)胞48h后,bcl-2、cyclind1的熒光指數(shù)FI值隨處理濃度增大而逐漸減小。對(duì)于每一種蛋白,比較其處理組和對(duì)照組的FI值,差異均具有顯著性（P<0.05）。2 MTT比色法分析辛伐他汀聯(lián)合奧沙利鉑對(duì)SW480細(xì)胞的增殖抑制作用,結(jié)果顯示:2、5、10μmol/L的辛伐他汀可加強(qiáng)奧沙利鉑對(duì)SW480細(xì)胞的增殖抑制作用。且隨辛伐他汀濃度的增大,其對(duì)奧沙利鉑的協(xié)同作用增強(qiáng)。金氏公式分析相互作用指數(shù)顯示,不同濃度奧沙利鉑聯(lián)合2、5、10μmol/L的辛伐他汀的q值均大于0.85。流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率結(jié)果顯示,2μmol/L辛伐他汀與不同濃度奧沙利鉑聯(lián)合作用細(xì)胞48h后,細(xì)胞凋亡百分率隨奧沙利鉑濃度增高而增大,與對(duì)照組比較差異具有顯著性（P<0.05）,且與單用奧沙利鉑組比較差異具有顯著性（P<0.05）。結(jié)論:1 HMG-CoA還原酶抑制劑辛伐他汀具有抑制結(jié)腸癌細(xì)胞SW480增殖及誘導(dǎo)其凋亡的作用,為臨床結(jié)腸癌的治療和化學(xué)預(yù)防提供了新的思路和理論依據(jù)。2辛伐他汀抑制結(jié)腸癌細(xì)胞SW480增殖的作用呈時(shí)間-劑量依賴(lài)關(guān)系。3辛伐他汀阻滯結(jié)腸癌細(xì)胞SW480于G0/G1期并可誘導(dǎo)該細(xì)胞凋亡。4辛伐他汀可通過(guò)下調(diào)bcl-2、cyclind1蛋白的表達(dá)而發(fā)揮其抑制結(jié)腸癌細(xì)胞SW480增殖、誘導(dǎo)該細(xì)胞凋亡的作用。5辛伐他汀可協(xié)同奧沙利鉑對(duì)SW480細(xì)胞的增殖抑制作用。6辛伐他汀可強(qiáng)化奧沙利鉑誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡的作用,推測(cè)辛伐他汀可增加SW480細(xì)胞對(duì)化療藥的敏感性。

康蘭,胡申江,孫雅遜^[9]（2007）在《阿托伐他汀對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠HMG-CoA還原酶表達(dá)的影響》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理目的:評(píng)價(jià)阿托伐他汀對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）HMG-CoA還原酶表達(dá)的影響。方法:12只8周齡的SHR隨機(jī)分為蒸餾水飼養(yǎng)組（SHRDW組,n=6）與阿托伐他汀治療組（SHRATV組,n=6）,并以6只同周齡的正常血壓大鼠（WKY）作為對(duì)照（WKY組,n=6）。采用RT-PCR與Westernblotting法分別檢測(cè)HMG-CoA還原酶的mRNA及蛋白表達(dá)。同時(shí)檢測(cè)血壓與血脂。結(jié)果:給藥10周后,SHRATV組收縮壓顯著低于治療前及SHRDW組（P<0.05）,其血清TC、TG、LDL-C及HDL-C的水平與SHRDW組及WKY組相比,也明顯降低（P<0.05）;SHRATV組HMG-CoA還原酶mRNA的表達(dá)水平在給藥10周后顯著低于WKY組及SHRDW組（P<0.05）,其蛋白表達(dá)水平同樣出現(xiàn)類(lèi)似的結(jié)果。結(jié)論:阿托伐他汀能夠下調(diào)HMG-CoA還原酶的mRNA及蛋白表達(dá)水平,不僅使SHR的血脂降低,在某種程度上,還可能與其血壓的下降有關(guān)。

楊永長(zhǎng),黃文芳,盧賢瑜^[10]（2006）在《他汀類(lèi)藥物抗腫瘤研究進(jìn)展》文中提出他汀類(lèi)藥物的抗腫瘤作用近年來(lái)備受關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn),他汀類(lèi)藥物能抑制腫瘤細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)其分化或凋亡,而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)明顯毒副作用。體外實(shí)驗(yàn)證明,他汀類(lèi)藥物可抑制Ras、RhoGTPase和核纖層蛋白異戊二烯化,影響細(xì)胞周期進(jìn)程和凋亡相關(guān)基因表達(dá),抑制血管形成等?，F(xiàn)綜述他汀類(lèi)藥物抗腫瘤的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展。

二、Lovastatin對(duì)HL-60細(xì)胞HMG-CoA還原酶mRNA表達(dá)及細(xì)胞增殖功能的影響（論文開(kāi)題報(bào)告）

（1）論文研究背景及目的

此處內(nèi)容要求：

首先簡(jiǎn)單簡(jiǎn)介論文所研究問(wèn)題的基本概念和背景，再而簡(jiǎn)單明了地指出論文所要研究解決的具體問(wèn)題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點(diǎn)或解決方法。

寫(xiě)法范例：

本文主要提出一款精簡(jiǎn)64位RISC處理器存儲(chǔ)管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過(guò)程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲(chǔ)器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁(yè)面大小,采用多級(jí)分層頁(yè)表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級(jí)頁(yè)表轉(zhuǎn)換過(guò)程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲(chǔ)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。

（2）本文研究方法

調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對(duì)象的具體信息。

觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對(duì)象從而得到有關(guān)信息。

實(shí)驗(yàn)法：通過(guò)主支變革、控制研究對(duì)象來(lái)發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。

文獻(xiàn)研究法：通過(guò)調(diào)查文獻(xiàn)來(lái)獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。

實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。

定性分析法：對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。

定量分析法：通過(guò)具體的數(shù)字，使人們對(duì)研究對(duì)象的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步精確化。

跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對(duì)某一課題進(jìn)行研究。

功能分析法：這是社會(huì)科學(xué)用來(lái)分析社會(huì)現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。

模擬法：通過(guò)創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來(lái)間接研究原型某種特性的一種形容方法。

三、Lovastatin對(duì)HL-60細(xì)胞HMG-CoA還原酶mRNA表達(dá)及細(xì)胞增殖功能的影響（論文提綱范文）

（1）辛伐他汀單獨(dú)或聯(lián)合阿糖胞苷對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞株增殖和凋亡影響的研究（論文提綱范文）

（2）辛伐他汀對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞的影響（論文提綱范文）

（3）惡性血液病低密度脂蛋白膽固醇受體及HMG-CoA還原酶活性的研究（論文提綱范文）

（4）氟伐他汀對(duì)人早幼粒白血病HL-60細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用及其機(jī)制的研究（論文提綱范文）

（5）阿伐他汀對(duì)膽管癌QBC939細(xì)胞系增殖及侵襲的影響（論文提綱范文）

（6）人雄激素非依賴(lài)性前列腺癌細(xì)胞Caveolin-1基因的表達(dá)及辛伐他汀的干預(yù)研究（論文提綱范文）

（7）美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖和侵襲轉(zhuǎn)移能力的抑制作用及其放化療增敏作用（論文提綱范文）

（8）辛伐他汀對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的體外作用及其機(jī)制研究（論文提綱范文）

（9）阿托伐他汀對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠HMG-CoA還原酶表達(dá)的影響（論文提綱范文）

（10）他汀類(lèi)藥物抗腫瘤研究進(jìn)展（論文提綱范文）

四、Lovastatin對(duì)HL-60細(xì)胞HMG-CoA還原酶mRNA表達(dá)及細(xì)胞增殖功能的影響（論文參考文獻(xiàn)）

• [1]辛伐他汀單獨(dú)或聯(lián)合阿糖胞苷對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞株增殖和凋亡影響的研究[D]. 徐數(shù)娜. 蘇州大學(xué), 2013(11)
• [2]辛伐他汀對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞的影響[D]. 張旭輝. 蘇州大學(xué), 2011(06)
• [3]惡性血液病低密度脂蛋白膽固醇受體及HMG-CoA還原酶活性的研究[D]. 于潔. 青島大學(xué), 2008(07)
• [4]氟伐他汀對(duì)人早幼粒白血病HL-60細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用及其機(jī)制的研究[D]. 趙麗艷. 吉林大學(xué), 2008(11)
• [5]阿伐他汀對(duì)膽管癌QBC939細(xì)胞系增殖及侵襲的影響[D]. 鄭龍志. 福建醫(yī)科大學(xué), 2007(01)
• [6]人雄激素非依賴(lài)性前列腺癌細(xì)胞Caveolin-1基因的表達(dá)及辛伐他汀的干預(yù)研究[D]. 廖海球. 中南大學(xué), 2007(02)
• [7]美伐他汀對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖和侵襲轉(zhuǎn)移能力的抑制作用及其放化療增敏作用[D]. 郭麗萍. 河北醫(yī)科大學(xué), 2007(06)
• [8]辛伐他汀對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的體外作用及其機(jī)制研究[D]. 張敬. 河北醫(yī)科大學(xué), 2007(06)
• [9]阿托伐他汀對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠HMG-CoA還原酶表達(dá)的影響[J]. 康蘭,胡申江,孫雅遜. 中國(guó)病理生理雜志, 2007(01)
• [10]他汀類(lèi)藥物抗腫瘤研究進(jìn)展[J]. 楊永長(zhǎng),黃文芳,盧賢瑜. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2006(11)

標(biāo)簽：辛伐他汀論文;  細(xì)胞增殖論文;  細(xì)胞凋亡論文;  前列腺癌論文;  mol論文;