一、Fas在丁型肝炎致病機(jī)制中的作用（論文文獻(xiàn)綜述）
周小博[1]（2020）在《基于Th17、Treg細(xì)胞表達(dá)水平探討解毒化瘀方對(duì)HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭患者臨床療效研究》文中提出目的:觀(guān)察解毒化瘀方對(duì)乙型肝炎相關(guān)慢加急性肝衰竭（HBV-AC LF）患者的臨床療效及對(duì)Th17、Treg細(xì)胞表達(dá)水平的影響。方法:選擇HBV-ACLF患者50例,隨機(jī)分西藥組（西醫(yī)治療）25例和中西藥組（解毒化瘀方聯(lián)合西醫(yī)治療）25例,分別予治療前、治療4周、治療8周觀(guān)察患者生存、好轉(zhuǎn)情況,比較總療效、中醫(yī)證候積分、TBil、Alb、ALT、AST、PTA及MELD評(píng)分,評(píng)估解毒化瘀方對(duì)HBV-ACLF患者的臨床療效。與健康人外周血Th17、Treg所占CD4+T細(xì)胞的比例作對(duì)照,予治療前、治療8周檢測(cè)兩組患者外周血Th17、Treg細(xì)胞水平,觀(guān)察解毒化瘀方對(duì)HBV-ACLF患者Th17、Treg細(xì)胞表達(dá)水平的影響。結(jié)果:（1）中西藥組8周存活率（76%）優(yōu)于西藥組（48%）;中西藥組好轉(zhuǎn)率（60%）優(yōu)于西藥組（32%）,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;（2）兩組患者治療后中醫(yī)證候積分、TBi L、Alb、ALT、AST、PTA、MELD評(píng)分上較治療前均有所改善（P<0.05）;治療4周,中西藥組在中醫(yī)證候積分、TBi L、Alb、ALT、AST、PTA、MELD評(píng)分上改善優(yōu)于西藥組（P<0.05）;治療8周,中西藥組在中醫(yī)證候積分、TBi L、MELD評(píng)分上改善優(yōu)于西藥組（P<0.05）,在Alb、ALT、AST、PTA上對(duì)比無(wú)明顯差異（P>0.05）;（3）治療前HBV-ACLF患者Th17、Treg細(xì)胞水平較正常組明顯升高（P<0.01）。治療8周,中西藥組和西藥組的Th17細(xì)胞水平均下降,且中西藥組下降程度更明顯（P<0.05）;中西藥組Treg細(xì)胞水平下降,而西藥組Treg細(xì)胞明顯高于中西藥組,兩組間有顯著性差異（P<0.01）。結(jié)論:解毒化瘀方聯(lián)合西醫(yī)治療HBV-ACLF,可以提高患者存活率、好轉(zhuǎn)率;改善中醫(yī)證候積分、肝功能、凝血功能;降低Th17、Treg細(xì)胞水平,糾正免疫平衡失調(diào)。以解毒化瘀方為主的中西醫(yī)聯(lián)合治療,可以提高臨床療效,其療效機(jī)制可能與降低Th17、Treg細(xì)胞水平有關(guān)。
荊振唐[2]（2019）在《乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）通過(guò)下調(diào)AKT磷酸化促進(jìn)Fas介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡和肝臟損傷》文中研究表明Fas受體/配體（Fas/FasL）系統(tǒng)在肝細(xì)胞凋亡中起重要作用。當(dāng)FasL與Fas結(jié)合后,會(huì)通過(guò)Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域（Fas-associated death domain,FADD）傳遞細(xì)胞凋亡信號(hào),募集procaspase-8形成死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合物（death-inducing signaling complex,DISC）,隨后激活下游的caspases,從而誘發(fā)肝細(xì)胞凋亡。表面抗原（HBsAg）是慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者肝臟和外周血中最為豐富的HBV編碼蛋白,且HBsAg在Fas調(diào)控肝細(xì)胞凋亡中的作用目前并未被闡釋,因此本文旨在研究HBsAg對(duì)Fas介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制。本研究第一部分旨在探討HBsAg對(duì)Fas介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡的影響。首先我們建立了HepG2-pHBsAg和HepG2-pcDNA3.1混合克隆細(xì)胞株并驗(yàn)證表達(dá)。通過(guò)CCK-8、TUNEL以及AnnexinV實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)HBsAg增加HepG2細(xì)胞對(duì)人Fas單克隆抗體anti-Fas CH11誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的敏感性,此外HBsAg促進(jìn)anti-Fas CH11和FasL誘導(dǎo)的人原代肝細(xì)胞凋亡。以上結(jié)果表明:HBsAg可促進(jìn)Fas介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡。本研究第二部分旨在探討HBsAg促進(jìn)Fas介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡的機(jī)制。本部分第一章研究HBsAg對(duì)p53、mFas、sFas、FasL的表達(dá)以及Fas棕櫚?；揎椀挠绊?。為此采用realtime RT-PCR、半定量RT-PCR和western blot檢測(cè)HepG2-pHBsAg和HepG2-pcDNA3.1細(xì)胞株中p53、mFas、sFas以及FasL的mRNA和蛋白水平的差異。并通過(guò)酰基-生物素交換法（acyl-biotin exchange,ABE）對(duì)HBsAg是否影響Fas的棕櫚?；揎椷M(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)HBsAg對(duì)p53、mFas、sFas、FasL的表達(dá)以及Fas棕櫚?；揎椌鶡o(wú)影響。本部分第二章研究HBsAg對(duì)DISC的影響。為此,采用western blot檢測(cè)HBsAg對(duì)Fas的聚合、FADD、FLIPL/S以及procaspase-8蛋白水平的影響,采用免疫沉淀（Immunoprecipitation,IP）檢測(cè)HBsAg對(duì)DISC各組分募集的影響,采用caspase活性實(shí)驗(yàn)檢測(cè)caspase 8,9,3/7的活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在anti-Fas CH11處理下,HepG2-pHBsAg細(xì)胞中Fas的聚合,procaspase-8的活化高于對(duì)照組,FLIPL/S蛋白水平低于對(duì)照組,但FADD的蛋白水平與對(duì)照組相比無(wú)變化。進(jìn)一步以Fas抗體進(jìn)行免疫沉淀,結(jié)果發(fā)現(xiàn)HepG2-pHBsAg細(xì)胞中Fas聚合體和FADD、procaspase-8的募集高于對(duì)照組,FLIPL/S的募集低于對(duì)照組。并且HepG2-pHBsAg細(xì)胞中caspase8,9,3/7活性高于對(duì)照組。以上結(jié)果表明:HBsAg通過(guò)促進(jìn)Fas聚合體的形成,減少DISC上FLIPL/S的募集,從而促進(jìn)了procaspase-8的活化。本部分第三章研究AKT磷酸化在HBsAg促進(jìn)Fas介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡中的作用。為此,我們引入AKT特異性激動(dòng)劑SC79以及過(guò)表達(dá)AKT,采用AnnexinV檢測(cè)HBsAg對(duì)AKT激活引起的Fas介導(dǎo)凋亡減少的影響,采用western blot檢測(cè)HBsAg對(duì)AKT活化負(fù)調(diào)控DISC各組分的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在anti-Fas CH11作用下,SC79處理及AKT過(guò)表達(dá)后,細(xì)胞的凋亡率降低,但表達(dá)HBsAg的HepG2-pHBsAg細(xì)胞凋亡率仍高于HepG2-pcDNA3.1細(xì)胞。AKT活化后,Fas受體的聚合水平和procaspase-8的切割水平均降低,FLIPL/S蛋白水平升高,但表達(dá)HBsAg的HepG2-pHBsAg細(xì)胞,Fas受體的聚合水平和procaspase-8的切割水平仍高于HepG2-pcDNA3.1細(xì)胞,而FLIPL/S的表達(dá)水平低于HepG2-pcDNA3.1細(xì)胞。以上結(jié)果表明,HBsAg可通過(guò)恢復(fù)AKT激活所致的Fas受體聚合的減少和procaspase-8切割的減弱,以及FLIPL/S表達(dá)的增加,從而逆轉(zhuǎn)由AKT激活所引起的Fas介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡的減少。說(shuō)明,HBsAg促進(jìn)Fas介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡是AKT依賴(lài)性的。本部分第四章研究HBsAg下調(diào)AKT磷酸化水平的機(jī)制。為此,我們采用western blot檢測(cè)HepG2-pHBsAg和HepG2-pcDNA3.1細(xì)胞株中AKT上游PDPK1、pPDPK1（Ser241）、mTOR、pmTOR（Ser2481）以及PTEN蛋白水平的差異。發(fā)現(xiàn)HepG2-pHBsAg中pAKT（Thr308）、pAKT（Ser473）以及上游調(diào)控因子pPDPK1（Ser241）、pmTOR（Ser2481）水平均低于對(duì)照組。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力減輕劑4-PBA可以使HepG2-pHBsAg細(xì)胞中pAKT（Thr308）、pAKT（Ser473）、pPDPK1（Ser241）和pmTOR（Ser2481）蛋白水平升高。AnnexinV結(jié)果顯示,HBsAg促進(jìn)anti-Fas CH11介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡可以被4-PBA部分緩解。IP結(jié)果顯示HBsAg不與AKT、PDPK1、mTOR以及PTEN發(fā)生相互作用。以上結(jié)果表明HBsAg通過(guò)誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力（endoplasmic reticulum stress,ER stress）使PDPK1和mTORC2失活進(jìn)而抑制AKT的磷酸化。本部分第五章研究HBsAg突變對(duì)Fas介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡的影響。為此,我們選擇14種常見(jiàn)的HBsAg突變體,建立混合克隆細(xì)胞株并驗(yàn)證表達(dá)。從中篩選得到5個(gè)胞外分泌降低,胞內(nèi)滯留明顯的HBsAg突變細(xì)胞株（L49T,M133I,G145R,S204R和M213I）。采用western blot對(duì)其GRP94、p-eIF2α、eIF2α以及AKT、pAKT（Thr308）、pAKT（Ser473）蛋白水平進(jìn)行檢測(cè)。采用半定量RT-PCR對(duì)其剪接型XBP1（S）mRNA水平進(jìn)行檢測(cè),采用AnnexinV及western blot對(duì)其在Fas介導(dǎo)下的細(xì)胞凋亡及active caspase-8,tBID、Cytochrome C（胞質(zhì)/胞膜）、active caspase-3的蛋白水平進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn),HepG2-pHBsAg突變體中GRP94、p-eIF2α的蛋白水平和XBP1（S）mRNA水平均高于HepG2-pHBsAg,而pAKT（Thr308）、pAKT（Ser473）蛋白水平低于HepG2-pHBsAg。HepG2-pHBsAg突變體凋亡率以及active caspase-8、tBID、Cytochrome C（胞質(zhì)）、active caspase-3蛋白水平高于HepG2-pHBsAg,BID和Cytochrome C（胞膜）蛋白水平低于HepG2-pHBsAg。以上結(jié)果表明,L49T,M133I,G145R,S204R和M213I突變導(dǎo)致HBsAg胞內(nèi)滯留增多,增強(qiáng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力,進(jìn)一步促進(jìn)Fas介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡。本研究第三部分旨在探討HBsAg對(duì)Fas介導(dǎo)的小鼠肝臟功能的影響。為此,通過(guò)AAV8尾靜脈注射,實(shí)現(xiàn)小鼠肝臟HBsAg（包括G145R和S204R突變）表達(dá),通過(guò)anti-Fas Jo2腹腔注射建立小鼠急性肝衰竭（ALF）模型。對(duì)肝組織以及血清檢測(cè)發(fā)現(xiàn),和AAV8-HBsAg小鼠相比,AAV8-G145R和AAV8-S204R小鼠血清HBsAg量顯著降低,而肝內(nèi)滯留明顯。AAV8-HBsAg小鼠肝組織AKT磷酸化水平低于AAV8-control,AAV8-G145R和AAV8-S204R小鼠AKT磷酸化水平更低。AAV8-HBsAg小鼠肝組織GRP94、p-eIF2α蛋白水平高于AAV8-control,AAV8-G145R和AAV8-S204R小鼠GRP94、p-eIF2α蛋白水平更高。在anti-Fas Jo2處理下,AAV8-HBsAg小鼠ALF存活率及生存時(shí)間低于AAV8-control,AAV8-G145R和AAV8-S204R小鼠存活率及生存時(shí)間更低,SC79預(yù)處理能夠緩解anti-Fas Jo2誘導(dǎo)的小鼠ALF。此外,本部分研究結(jié)果還顯示,在anti-Fas Jo2處理下,AAV8-HBsAg小鼠血清ALT/AST、肝細(xì)胞凋亡率以及caspase 8,9,3/7活性均高于AAV8-control,AAV8-G145R和AAV8-S204R小鼠則更高,SC79預(yù)處理減輕肝細(xì)胞凋亡和肝臟損傷。以上結(jié)果表明,HBsAg可促進(jìn)小鼠肝臟組織細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力,抑制AKT磷酸化,引發(fā)嚴(yán)重的肝細(xì)胞凋亡和肝臟損傷,并使小鼠ALF死亡時(shí)間提前及死亡率增加,而HBsAg G145R和S204R突變可以增強(qiáng)這種作用。研究還提示AKT激動(dòng)劑SC79預(yù)處理能夠緩解anti-Fas Jo2誘導(dǎo)的小鼠ALF,意味著AKT激動(dòng)劑可保護(hù)Fas介導(dǎo)的ALF,強(qiáng)烈提示使用該類(lèi)藥物在臨床上可提高ALF患者生存率。
趙月[3]（2014）在《人源HBV人工感染沙鼠和C57BL/6小鼠的病理學(xué)研究》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理乙型肝炎（HB）是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一種以肝臟損傷為主要特征的嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的傳染病之一。由于HBV具有嚴(yán)格的宿主特異性,因而缺乏理想的細(xì)胞模型或動(dòng)物模型,從而阻礙了HBV的研究。本研究采用人源HBV對(duì)沙鼠和C57BL/6小鼠進(jìn)行感染試驗(yàn),目的在于探討人源HBV能否引起小鼠感染,并探討小鼠作為研究HBV傳播和致病機(jī)制的動(dòng)物模型的可能性。本研究選取沙鼠和C57BL/6小鼠用作人源HBV陽(yáng)性血清的人工感染試驗(yàn)動(dòng)物,采用ELISA、PCR、Real-time PCR、免疫組織化學(xué)和Western blot等方法對(duì)人源HBV感染后沙鼠和C57BL/6小鼠的血清、糞便和肝臟等組織進(jìn)行HBV相關(guān)病原和抗體的檢測(cè),來(lái)探討HBV在沙鼠和C57BL/6小鼠體內(nèi)的感染情況,并通過(guò)沙鼠和C57BL/6小鼠體內(nèi)細(xì)胞凋亡和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白的定位和表達(dá),初步揭示HBV感染致肝細(xì)胞損傷的機(jī)制。研究結(jié)果如下：1、人源HBV感染沙鼠后1d,在肝臟和腎臟組織中可檢測(cè)到HBV DNA;感染后2d和4w,只在肝臟中檢測(cè)到HBV DNA。感染C57BL/6小鼠后1d,肝臟中可檢測(cè)到HBV DNA。在血清、糞便、腦組織和唾液腺中,未能檢測(cè)到HBV DNA。血清ELISA檢測(cè)結(jié)果表明,在感染后1w內(nèi),HBsAg和HBeAg在小鼠血清中呈一過(guò)性出現(xiàn)；感染后1w,在沙鼠和C57BL/6小鼠的血清中均可檢測(cè)到HBsAb和HBcAb,而且HBsAb能夠在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中持續(xù)性在血清中被檢測(cè)到。肝臟組織中HBV相關(guān)抗原免疫組化染色結(jié)果表明沙鼠和C57小鼠感染人源HBV后肝臟中可檢測(cè)到抗原陽(yáng)性信號(hào),且強(qiáng)度隨感染時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)。Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)在感染后7d沙鼠肝臟中HBV抗原PreS1蛋白有明顯的表達(dá)。2、沙鼠和C57BL/6小鼠感染人源HBV后均出現(xiàn)明顯的組織病理學(xué)變化,呈現(xiàn)典型的病毒性肝炎的病理學(xué)變化。主要表現(xiàn)為肝竇擴(kuò)張、淤血,肝細(xì)胞胞漿疏松、顆粒變性,匯管區(qū)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和膽管增生等,病變程度隨感染時(shí)間的延長(zhǎng)而顯嚴(yán)重。電鏡觀(guān)察發(fā)現(xiàn),試驗(yàn)組小鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)松散,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,線(xiàn)粒體出現(xiàn)嚴(yán)重腫脹、空化。腎小管.上皮細(xì)胞胞質(zhì)疏松,線(xiàn)粒體腫脹、嵴消失,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡化,可見(jiàn)髓鞘樣小體,胞漿內(nèi)可見(jiàn)病毒包涵體,胞核內(nèi)可見(jiàn)病毒樣粒子。3、肝臟組織中增殖與修復(fù)相關(guān)蛋白免疫組化染色結(jié)果表明HBV感染后,沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟組織中PCNA和HSP70蛋白在體內(nèi)表達(dá)出現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì),攻毒后蛋白表達(dá)顯著高于對(duì)照組（P<0.05）,表明HBV感染后機(jī)體出現(xiàn)了相應(yīng)的抗損傷機(jī)制來(lái)減少損害。4、細(xì)胞凋亡相關(guān)分子的免疫組化染色結(jié)果表明感染后沙鼠和C57BL/6小鼠體內(nèi)Bax、Bcl-2、 Caspase-3和Fas/FasL的表達(dá)量均有不同程度的升高,顯著高于對(duì)照組（P<0.05）,表明HBV感染后細(xì)胞凋亡的線(xiàn)粒體途徑被激活,細(xì)胞凋亡在HBV感染導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷的機(jī)制中發(fā)揮了重要作用。5、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）相關(guān)分子免疫組化染色結(jié)果表明感染后沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟組織中GRP78、CHOP、JNK及Caspase-12的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。Western blot結(jié)果也證實(shí)感染后肝臟ERS相關(guān)分子的表達(dá)量較對(duì)照組均有所升高。ERS相關(guān)蛋白表達(dá)量的升高表明HBV感染后啟動(dòng)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng),促進(jìn)了肝細(xì)胞的凋亡。6、對(duì)沙鼠肝臟線(xiàn)粒體DNA不同區(qū)域基因序列擴(kuò)增,觀(guān)察、分析比較了人源HBV感染8w后,沙鼠肝臟線(xiàn)粒體DNA水平的變化,發(fā)現(xiàn)人源HBV感染后在沙鼠肝臟線(xiàn)粒體DNA的D-loop、 CytB和CytC三個(gè)區(qū)域均出現(xiàn)了一個(gè)堿基位點(diǎn)的改變,這些改變可能與線(xiàn)粒體結(jié)構(gòu)或功能的變化相關(guān)。上述研究結(jié)果表明,人源HBV感染可引起沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟組織發(fā)生明顯的病理?yè)p傷和炎癥反應(yīng),采用PCR、血清ELISA和肝臟免疫組織化學(xué)檢測(cè)在感染鼠體內(nèi)檢到HBV DNA及其相關(guān)抗原的存在,HBV可在小鼠體內(nèi)進(jìn)行短期的復(fù)制表達(dá),表明沙鼠和C57BL/6小鼠具有作為HBV感染動(dòng)物模型的潛質(zhì)。通過(guò)對(duì)HBV感染后沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟的細(xì)胞損傷、細(xì)胞凋亡和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等相關(guān)因子表達(dá)量的變化初步觀(guān)察研究發(fā)現(xiàn),HBV感染后可通過(guò)激活線(xiàn)粒體途徑和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑促進(jìn)肝細(xì)胞的凋亡,這可能是HBV感染引起肝細(xì)胞損傷的重要機(jī)制。
白繼麗[4]（2009）在《樹(shù)鼩（Tupaia belangeri）血液生化學(xué)指標(biāo)測(cè)定分析及HCV感染樹(shù)鼩初步研究》文中提出樹(shù)鼩（Tupaia belangeri）在醫(yī)學(xué)生物學(xué)領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用,但目前仍未實(shí)現(xiàn)其大量繁殖,國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)用樹(shù)鼩仍然主要取自野外,樹(shù)鼩實(shí)驗(yàn)前的很多背景都不清楚（如年齡、遺傳學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、及自身攜帶疾病情況等）,這樣就無(wú)法保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,實(shí)現(xiàn)其實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化是攻克上述問(wèn)題的關(guān)鍵,建立樹(shù)鼩的血液生化指標(biāo)的正常參考值是其標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)的重要內(nèi)容之一,本文建立人工飼養(yǎng)樹(shù)鼩的血液生化指標(biāo)的正常值范圍,用于篩選合格實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和為診斷樹(shù)鼩疾病提供依據(jù),樹(shù)鼩是研究人類(lèi)疾病良好的替代者,本文為建立一種更有效、更穩(wěn)定的樹(shù)鼩丙肝模型進(jìn)行一些有意義也有挑戰(zhàn)的嘗試。第一部分目的建立樹(shù)鼩血液學(xué)和血液生化指標(biāo)的正常值參考范圍。方法:應(yīng)用全自動(dòng)血細(xì)胞儀和生化分析儀測(cè)定140只健康成年樹(shù)鼩的血液學(xué)及血液生化指標(biāo)。結(jié)果:雌性與雄性比較,LYM%、PLT、RDW%、GLU、CREA的差異具有顯著性（P＜0.05）,TP、CHOL、TG的差異具有極顯著性（P＜0.01）,其他指標(biāo)的差異不具顯著性。結(jié)論:本文建立了健康樹(shù)鼩的血液學(xué)及生化指標(biāo)的正常值參考范圍,可為應(yīng)用該動(dòng)物進(jìn)行科學(xué)研究時(shí)提供參考。第二部分目的探討樹(shù)鼩感染重組丙型肝炎病毒的可能性。方法本實(shí)驗(yàn)設(shè)立重組HCV病毒組（A組）、人陽(yáng)性血清組（B組）、空白對(duì)照組（C組）,通過(guò)巢式PCR法檢測(cè)感染樹(shù)鼩血漿的HCVRNA,檢測(cè)樹(shù)鼩血漿ALT。結(jié)果A組樹(shù)鼩中5只樹(shù)鼩在接種病毒后,血漿（分別在接種后第8天和第15天）中檢測(cè)出HCVRNA,A組所有樹(shù)鼩在接種病毒后均表現(xiàn)出ALT異常地升高,多數(shù)在第29天時(shí)達(dá)到峰值,B組樹(shù)鼩中多數(shù)樹(shù)鼩ALT出現(xiàn)異常升高,但未檢測(cè)出HCVRNA。結(jié)論樹(shù)鼩可以感染重組HCV,但只出現(xiàn)過(guò)一過(guò)性病毒血癥,可能原因是HCV毒株的感染率及標(biāo)準(zhǔn)化、樹(shù)鼩的個(gè)體差異及標(biāo)準(zhǔn)化等問(wèn)題所致,樹(shù)鼩能否替代黑猩猩成為HCV動(dòng)物模型有待進(jìn)一步深入研究。
孫朝暉[5]（2006）在《基因芯片在病毒性肝炎分子診斷及基因表達(dá)譜研究中的應(yīng)用》文中研究說(shuō)明肝炎病毒是引起急慢病毒性肝炎的主要致病原因之一，全球范圍內(nèi)有5億多人感染了慢性肝炎。病毒性肝炎傳染性強(qiáng)、傳播途徑復(fù)雜、流行面廣和發(fā)病率高，可演變?yōu)槁愿窝住⒏斡不约案渭?xì)胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）。建立早期、敏感的方法對(duì)肝炎的診斷和預(yù)防將是目前控制肝炎繼續(xù)發(fā)展的重要途徑。乙型病毒性肝炎在我國(guó)是高流行區(qū)，已成為一個(gè)重要的健康問(wèn)題，年發(fā)病率為158／10萬(wàn)，現(xiàn)患慢性肝炎的病人約為1800萬(wàn)人，其中40％的患者逐漸發(fā)展為更為嚴(yán)重的各種肝并發(fā)癥，包括肝硬化和HCC等，而受乙型肝炎病毒（HBV）慢性感染的人群罹患HCC的相對(duì)危險(xiǎn)性比正常人群至少增加300倍；丙型肝炎在我國(guó)整體人群流行率為1～3％，丙型肝炎病毒（HCV）感染約70％～80％會(huì)轉(zhuǎn)為慢性，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于乙型肝炎的慢性化率（5％～10％），約20％會(huì)發(fā)展成肝硬化，其中約5％在20～30年內(nèi)發(fā)展為HCC。到目前為此，沒(méi)有十分有效的方法來(lái)防止和控制HCV的感染，也沒(méi)有較為有效的疫苗，所以建立早期診斷HCV感染的方法十分重要。HCV有多種基因型，不同HCV基因型感染所致疾病的嚴(yán)重程度不同，1型及混合型較重，2型較輕，不同基因型對(duì)干擾素（IFN）應(yīng)答及病毒血癥水平存
胡薛英[6]（2005）在《新型鴨肝炎病毒致病特性及感染鴨肝胰細(xì)胞凋亡的研究》文中研究表明本研究運(yùn)用病理形態(tài)學(xué)、臨床病理學(xué)、免疫組織化學(xué)和電鏡技術(shù)等多種研究方法,以新型鴨肝炎病毒人工感染9日齡健康櫻桃谷雛鴨,復(fù)制新型鴨肝炎病毒人工感染疾病模型,分別在接種后12h、24h、48h、72h、96h、168h和14d共7個(gè)時(shí)間點(diǎn),首次對(duì)新型鴨肝炎病毒感染過(guò)程中感染雛鴨谷丙轉(zhuǎn)氨酶等13項(xiàng)血清生化指標(biāo)的變化、組織病理學(xué)變化、病毒抗原的動(dòng)態(tài)分布、NO等細(xì)胞因子的變化進(jìn)行了系統(tǒng)的、動(dòng)態(tài)觀(guān)察與研究,同時(shí)重點(diǎn)觀(guān)察了感染雛鴨肝臟和胰臟的細(xì)胞凋亡以及凋亡相關(guān)因子Caspase-3、Bcl-2、Bax、p53的動(dòng)態(tài)變化。結(jié)果如下: 血清生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果表明:血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性升高;血清葡萄糖、總蛋白、白蛋白、球蛋白含量均表現(xiàn)降低;膽堿酯酶僅在接種后12h表現(xiàn)明顯升高;血清α—淀粉酶活性無(wú)改變;堿性磷酸酶、尿酸、肌酐,鈣、磷變化無(wú)明顯規(guī)律;。 血液、肝和腦組織中NO的含量,TNF-α和IL-2的測(cè)定結(jié)果表明:血清中NO含量在接種后48h至接種后96h升高;肝組織中NO含量?jī)H在接種后24h顯著升高;腦組織中NO含量在整個(gè)試驗(yàn)期間沒(méi)有變化。血清中的TNF和IL-2含量在接種后24h均表現(xiàn)升高,在接種后96h表現(xiàn)降低。 感染雛鴨的組織病理學(xué)變化結(jié)果顯示:感染雛鴨的肝組織在接種后24h表現(xiàn)出血性壞死性肝炎,接種后48-96小時(shí)呈增生性病變;胰臟組織在接毒后24h出現(xiàn)胰腺細(xì)胞的局灶性壞死及嗜酸性小體,隨時(shí)間推移,出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)并且逐漸增多,局灶性壞死及嗜酸性小體逐漸減少;接種后各時(shí)期腦組織病理變化呈非化膿性腦炎;脾臟表現(xiàn)壞死;腎小管出現(xiàn)壞死及異嗜性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。 感染雛鴨機(jī)體內(nèi)病毒抗原的動(dòng)態(tài)分布結(jié)果表明:接種后不同時(shí)間,在肝臟、脾臟、胰臟、胸腺和法氏囊組織中均可檢測(cè)到新型鴨肝炎病毒抗原,而腎臟、心臟、腦組織中均未檢測(cè)到病毒抗原。病毒抗原均位于陽(yáng)性細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。 接種后48h胰臟和接種后24h肝臟的超微結(jié)構(gòu)觀(guān)察結(jié)果顯示肝細(xì)胞和胰腺細(xì)胞出現(xiàn)凋亡細(xì)胞的形態(tài)特征,表現(xiàn)為細(xì)胞皺縮,細(xì)胞核染色質(zhì)凝集邊移。 TUNEL染色結(jié)果顯示接種后24h至接種后96h肝臟肝細(xì)胞中有TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞,且在接種后24h細(xì)胞凋亡指數(shù)最高;接種后24h至接種后168h胰腺細(xì)胞中有TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞,在接種后24h至48h,細(xì)胞凋亡指數(shù)增加,表明肝細(xì)胞和胰腺細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞凋亡。 感染雛鴨肝臟和胰臟組織中凋亡相關(guān)的調(diào)控因子的研究結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)感染新型鴨肝炎病毒雛鴨肝臟和胰臟組織中均可觀(guān)察到caspase-3、Bcl-2、Bax陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞,并且肝臟和胰臟中細(xì)胞凋亡指數(shù)變化方向與caspase-3、Bcl-2、Bax表達(dá)變化方向一致。在接種后12h-14d,實(shí)驗(yàn)感染新型鴨肝炎病毒雛鴨肝臟和胰臟組織中均未見(jiàn)p53陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞,表明肝臟和胰臟中細(xì)胞凋亡與p53無(wú)關(guān)。 上述結(jié)果表明,新型鴨肝炎病毒侵入后,在肝、脾、胰、胸腺和法氏囊組織中分布,可造成感染雛鴨出現(xiàn)以肝出血壞死、胰局灶性壞死及嗜酸性小體形成的特征性組織病理?yè)p傷,并且出現(xiàn)轉(zhuǎn)氨酶升高的臨床特征。同時(shí)可誘導(dǎo)肝細(xì)胞和胰腺細(xì)胞凋亡,與凋亡相關(guān)的調(diào)控基因及細(xì)胞因子亦發(fā)生相應(yīng)的變化。
顧小紅,李奇芬,王宇明[7]（2004）在《HBV和HDV感染患者肝組織中HDAg與Bc1-2、Bax和Bak表達(dá)的關(guān)系》文中研究指明目的 探討bc1 2、bax、Bak在乙型肝炎病毒和丁型肝炎病毒重疊感染患者病情加重機(jī)制中的作用。方法 采用免疫組化單、雙標(biāo)記染色技術(shù) ,檢測(cè) 77例伴HDV感染的乙型肝炎患者肝組織中HDAg、bcl 2、bax和Bak表達(dá)。以HDV陰性的 67例乙型肝炎作對(duì)照。結(jié)果 bcl 2、Bax和Bak均以肝細(xì)胞漿表達(dá)為主。HDAg以肝細(xì)胞核表達(dá)為主。HDAg與Bax和Bak表達(dá)及分布有相關(guān)性 ,它們?cè)诟餍透窝字械谋磉_(dá)強(qiáng)度有顯著性差異 （P <0 .0 5 ）。結(jié)論 HDAg、bax、Bak表達(dá)強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞分布均與肝組織炎癥活動(dòng)及病理?yè)p害程度相關(guān) ,HDV感染可誘導(dǎo)肝細(xì)胞表達(dá)bax和Bak ,增強(qiáng)肝細(xì)胞凋亡 ,這一機(jī)制在伴HDV感染的乙型肝炎患者病情加重中可能起一定的作用
顧小紅,馮愛(ài)娟,張?jiān)茤|,李奇芬,王宇明[8]（2004）在《丁型肝炎病人肝組織HDAg與bcl-2、bax、bak表達(dá)關(guān)系》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理目的 探討bcl 2、bax、bak在丁型肝炎發(fā)病機(jī)制中的作用。方法 采用免疫組化單、雙標(biāo)記染色技術(shù)等 ,檢測(cè)77例各型丁肝病人肝組織中HDAg、bcl 2、bax和bak表達(dá)。以HDV陰性的 67例乙型肝炎作對(duì)照。結(jié)果 bcl 2、bax和bak均以肝細(xì)胞漿表達(dá)為主。HDAg以肝細(xì)胞核表達(dá)為主。HDAg與bax和bak表達(dá)及分布有相關(guān)性 ,四成分在各型肝炎中的表達(dá)強(qiáng)度有顯著性差別 （P <0 .0 5 ）。結(jié)論 HDAg、bax、bak表達(dá)強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞分布均與肝組織炎癥活動(dòng)及病理?yè)p害程度相關(guān) ,HDV感染可誘導(dǎo)肝細(xì)胞表達(dá)bax和bak ,增強(qiáng)肝細(xì)胞凋亡 ,這一機(jī)制在丁型肝炎發(fā)病機(jī)制中可能有一定的重要作用
顧小紅[9]（2001）在《丁型肝炎病毒研究進(jìn)展》文中指出
顧小紅,李奇芬,王宇明[10]（2000）在《丁型肝炎病人肝組織HDVRNA與HBVDNA的表達(dá)及關(guān)系》文中提出目的探討丁型肝炎病人肝組織中 HDAg、HDVRNA與 HBVDNA表達(dá)及關(guān)系。方法應(yīng)用免疫組化和原位雜交技術(shù)檢測(cè)了 79例丁型肝炎病人肝組織 HDAg、HDVRAN、HBVDNA表達(dá) ,以 5 2例乙型肝炎病人肝組織 HBVDNA表達(dá)作對(duì)照。結(jié)果丁型肝炎 HBVDNA檢出率 （ 2 7% ）低于乙型肝炎 （ 44 % ） （ P<0 .0 5 ）。在壞死灶邊緣肝細(xì)胞和氣球樣變肝細(xì)胞漿內(nèi)有大量的 HDVRNA蓄積或 HDAg呈漿型強(qiáng)表達(dá) ,HDAg與 HDVRNA表達(dá)及分布呈一致性 （ P>0 .0 5 ）。HBVDNA與 HDAg表達(dá)強(qiáng)度呈負(fù)性相關(guān) （ P<0 .0 5 ）。結(jié)論 HDV感染會(huì)抑制 HBV復(fù)制 ,尤其是 HDAg或 HDVRNA強(qiáng)表達(dá)時(shí) ;在 HDV致病機(jī)制中可能既有 HDV的直接細(xì)胞毒性作用 ,也有 HBV和 HDV的協(xié)同作用
二、Fas在丁型肝炎致病機(jī)制中的作用（論文開(kāi)題報(bào)告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡(jiǎn)單簡(jiǎn)介論文所研究問(wèn)題的基本概念和背景，再而簡(jiǎn)單明了地指出論文所要研究解決的具體問(wèn)題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀(guān)點(diǎn)或解決方法。
寫(xiě)法范例：
本文主要提出一款精簡(jiǎn)64位RISC處理器存儲(chǔ)管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過(guò)程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲(chǔ)器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁(yè)面大小,采用多級(jí)分層頁(yè)表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級(jí)頁(yè)表轉(zhuǎn)換過(guò)程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲(chǔ)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對(duì)象的具體信息。
觀(guān)察法：用自己的感官和輔助工具直接觀(guān)察研究對(duì)象從而得到有關(guān)信息。
實(shí)驗(yàn)法：通過(guò)主支變革、控制研究對(duì)象來(lái)發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過(guò)調(diào)查文獻(xiàn)來(lái)獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。
定性分析法：對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過(guò)具體的數(shù)字，使人們對(duì)研究對(duì)象的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對(duì)某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會(huì)科學(xué)用來(lái)分析社會(huì)現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。
模擬法：通過(guò)創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來(lái)間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、Fas在丁型肝炎致病機(jī)制中的作用（論文提綱范文）
（1）基于Th17、Treg細(xì)胞表達(dá)水平探討解毒化瘀方對(duì)HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭患者臨床療效研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 文獻(xiàn)研究 |
| 1 Th17 細(xì)胞與Treg細(xì)胞的研究 |
| 1.1 Th17細(xì)胞:輔助性T淋巴細(xì)胞 |
| 1.2 Treg細(xì)胞:調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞 |
| 1.3 Th17、Treg細(xì)胞之間的平衡 |
| 1.4 Th17、Treg細(xì)胞在肝衰竭中的表達(dá)和作用 |
| 2 慢加急性肝衰竭疾病的概況 |
| 2.1 西醫(yī)對(duì)慢加急性肝衰竭的認(rèn)識(shí) |
| 2.1.1 ACLF的定義 |
| 2.1.2 基于“PIRO”概念對(duì)ACLF的認(rèn)識(shí) |
| 2.1.3 ACLF的預(yù)后模型 |
| 2.1.4 ACLF的治療 |
| 2.2 中醫(yī)對(duì)慢加急性肝衰竭的認(rèn)識(shí) |
| 2.2.1 病名、病因及病機(jī) |
| 2.2.2 辨證分型 |
| 2.2.3 治法方藥 |
| 第二部分 臨床實(shí)驗(yàn)研究 |
| 1 解毒化瘀方對(duì)HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭患者臨床療效 |
| 1.1 研究對(duì)象 |
| 1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 1.3 病例選擇標(biāo)準(zhǔn) |
| 1.4 治療方案 |
| 1.5 觀(guān)察指標(biāo) |
| 1.6 療效判定標(biāo)準(zhǔn) |
| 1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 |
| 1.8 研究結(jié)果 |
| 2 解毒化瘀方對(duì)Th17、Treg細(xì)胞水平的影響 |
| 2.1 實(shí)驗(yàn)原理 |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)材料 |
| 2.3 實(shí)驗(yàn)步驟 |
| 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 第三部分 討論 |
| 1 解毒化瘀方用藥分析 |
| 2 解毒化瘀方臨床療效分析 |
| 2.1 對(duì)HBV-ACLF患者生存率的影響 |
| 2.2 對(duì)HBV-ACLF患者好轉(zhuǎn)率的影響 |
| 2.3 對(duì)HBV-ACLF患者中醫(yī)證候總療效、總積分的影響 |
| 2.4 對(duì)HBV-ACLF患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的影響 |
| 2.5 對(duì)HBV-ACLF患者M(jìn)ELD評(píng)分的影響 |
| 3 解毒化瘀方調(diào)節(jié)Th17、Treg細(xì)胞水平 |
| 4 不足與展望 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附表1 中醫(yī)常見(jiàn)癥狀分級(jí)量化表 |
| 附圖1 |
| 附圖2 |
| 縮略詞表 |
| 綜述 慢加急性肝衰竭中西醫(yī)研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡(jiǎn)歷及攻讀期間獲得的科研成果 |
（2）乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）通過(guò)下調(diào)AKT磷酸化促進(jìn)Fas介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡和肝臟損傷（論文提綱范文）
| 附錄一 英文縮略詞表 |
| 附錄二 試劑配方 |
| 附錄三 主要儀器設(shè)備 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 乙型肝炎病毒表面抗原(HBs Ag)對(duì)Fas介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡的影響 |
| 引言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 第二部分 HBsAg促進(jìn)Fas介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究 |
| 第一章 HBsAg對(duì) p53、mFas、sFas和 FasL的表達(dá)以及Fas棕櫚?；揎椀挠绊?/td> |
| 引言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 第二章 HBsAg對(duì)死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合物(DISC)的影響 |
| 引言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 第三章 HBsAg下調(diào)AKT磷酸化促進(jìn)Fas介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡 |
| 引言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 第四章 HBsAg抑制AKT磷酸化的機(jī)制 |
| 引言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 第五章 胞內(nèi)滯留HBs Ag突變進(jìn)一步促進(jìn)Fas介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡 |
| 引言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 第三部分 HBsAg促進(jìn)Fas介導(dǎo)的小鼠肝臟損傷 |
| 引言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述 Fas/FasL通路在HBV感染中的作用及相關(guān)機(jī)制研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 攻讀學(xué)位期間完成的學(xué)術(shù)論文 |
| 致謝 |
（3）人源HBV人工感染沙鼠和C57BL/6小鼠的病理學(xué)研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 縮略詞表 |
| 第一章 文獻(xiàn)綜述 |
| 1 乙型肝炎病毒與乙肝流行病學(xué)研究進(jìn)展 |
| 1.1 乙型肝炎概述 |
| 1.2 HBV的發(fā)現(xiàn) |
| 1.3 HBV分類(lèi) |
| 1.4 HBV的形態(tài)特點(diǎn) |
| 1.5 HBV的復(fù)制周期 |
| 1.6 HBV的發(fā)病機(jī)理 |
| 1.7 HBV的基因型和分布 |
| 1.8 HBV在動(dòng)物中的流行 |
| 1.9 HBV受體研究進(jìn)展 |
| 2 HBV感染模型和動(dòng)物模型研究進(jìn)展 |
| 2.1 HBV感染的細(xì)胞模型 |
| 2.2 HBV感染的動(dòng)物模型 |
| 3 HBV與細(xì)胞凋亡 |
| 4 HBV與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS) |
| 5 本研究的目的和意義 |
| 第二章 人源HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠的病原學(xué)研究 |
| 試驗(yàn)一 人源HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠的PCR和血清學(xué)檢測(cè) |
| 1 前言 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.2 試驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 人源HBV陽(yáng)性血清DNA含量測(cè)定結(jié)果 |
| 3.2 沙鼠和C57BL/6小鼠血清、組織和糞便中HBV DNA的PCR檢測(cè) |
| 3.3 感染鼠肝臟中HBV DNA含量Real-time PCR測(cè)定結(jié)果 |
| 3.4 感染沙鼠和C57BL/6小鼠血清ELISA檢測(cè)結(jié)果 |
| 4 討論與小結(jié) |
| 試驗(yàn)二 人源HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠后HBV相關(guān)抗原的檢測(cè) |
| 1 前言 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.2 試驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟中HBV相關(guān)抗原免疫組化檢測(cè)結(jié)果 |
| 3.2 Western blot檢測(cè)肝臟中HBV抗原 |
| 4 討論與小結(jié) |
| 試驗(yàn)三 人源HBV體外與沙鼠和C57BL/6小鼠血液共培養(yǎng)試驗(yàn) |
| 1 前言 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.2 試驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 沙鼠和C57BL/6小鼠血液體外與HBV混合培養(yǎng)后DNA的PCR檢測(cè) |
| 3.2 PCR擴(kuò)增序列比對(duì) |
| 4 討論和小結(jié) |
| 第三章 人源HBV感染致沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟損傷機(jī)制的研究 |
| 試驗(yàn)一 人源HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠的病理學(xué)變化觀(guān)察 |
| 1 前言 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.2 試驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 HBV感染對(duì)肝臟臟器指數(shù)及血清AST、ALT的影響 |
| 3.2 HBV感染沙鼠的病理學(xué)變化觀(guān)察 |
| 3.3 HBV感染C57BL/6小鼠的病理學(xué)變化觀(guān)察 |
| 4 討論與小結(jié) |
| 試驗(yàn)二 HBV感染對(duì)沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟組織PCNA及HSP70表達(dá)的影響 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.2 試驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟組織中PCNA的表達(dá)情況 |
| 3.2 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟組織中HSP70的表達(dá)情況 |
| 4 討論與小結(jié) |
| 試驗(yàn)三 HBV感染對(duì)沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.2 試驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟組織中Bax和Bcl-2的表達(dá)情況 |
| 3.2 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟組織中Fas和FasL的表達(dá)情況 |
| 3.3 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟組織中Caspase 3的表達(dá)情況 |
| 4 討論與小結(jié) |
| 試驗(yàn)四 HBV感染對(duì)沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟組織ERS相關(guān)分子表達(dá)的影響 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.2 試驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝臟中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)分子的蛋白量變化 |
| 3.2 Western blot檢測(cè)HBV感染后肝臟中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)分子蛋白量變化 |
| 4 討論與小結(jié) |
| 試驗(yàn)五 人源HBV感染沙鼠線(xiàn)粒體DNA基因變化的觀(guān)察 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.2 試驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 沙鼠線(xiàn)粒體D-loop基因的擴(kuò)增結(jié)果 |
| 3.2 沙鼠線(xiàn)粒體CytC基因的擴(kuò)增結(jié)果 |
| 3.3 沙鼠線(xiàn)粒體CytB基因的擴(kuò)增結(jié)果 |
| 4 討論與小結(jié) |
| 結(jié)論 |
| 本研究創(chuàng)新點(diǎn) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 圖版與說(shuō)明 |
| 附錄 |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡(jiǎn)歷 |
（4）樹(shù)鼩（Tupaia belangeri）血液生化學(xué)指標(biāo)測(cè)定分析及HCV感染樹(shù)鼩初步研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 一、樹(shù)韻 |
| 二、丙型肝炎病毒 |
| 三、研究目的 |
| 實(shí)驗(yàn)研究 |
| 第一部分 樹(shù)韻血液學(xué)及生化指標(biāo)正常值測(cè)定及分析 |
| 一、實(shí)驗(yàn)材料與方法 |
| (一) 實(shí)驗(yàn)材料 |
| 二、結(jié)果 |
| 三、討論 |
| 四、小結(jié) |
| 第二部分 HCV感染樹(shù)韻體內(nèi)研究 |
| 一、實(shí)驗(yàn)材料與方法 |
| (一) 實(shí)驗(yàn)材料 |
| (二) 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 二、結(jié)果與分析 |
| 三、討論 |
| 四、小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 論文綜述 |
| 附錄 主要溶液的配制 |
| 致謝 |
| 研究生簡(jiǎn)歷 |
（5）基因芯片在病毒性肝炎分子診斷及基因表達(dá)譜研究中的應(yīng)用（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 肝炎病毒聯(lián)合診斷cDNA芯片的制備與應(yīng)用 |
| 1.1 材料與方法 |
| 1.2 結(jié)果 |
| 1.3 討論 |
| 第二章 肝炎病毒診斷分型寡核苷酸芯片的制備與應(yīng)用 |
| 2.1 材料與方法 |
| 2.2 結(jié)果 |
| 2.3 討論 |
| 第三章 利用寡核苷酸芯片對(duì)乙型肝炎基因表達(dá)譜的研究 |
| 3.1 材料與方法 |
| 3.2 結(jié)果 |
| 3.3 討論 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄：英文縮寫(xiě)詞表 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文 |
| 致謝 |
| 原創(chuàng)性聲明及版權(quán)使用授權(quán)說(shuō)明 |
（6）新型鴨肝炎病毒致病特性及感染鴨肝胰細(xì)胞凋亡的研究（論文提綱范文）
| 第一章 緒論 |
| 1.鴨病毒性肝炎與新型鴨肝炎病毒 |
| 2.細(xì)胞凋亡 |
| 3.細(xì)胞凋亡與肝胰組織損傷 |
| 4.細(xì)胞因子與細(xì)胞凋亡、肝胰組織損傷 |
| 5.本研究的目的與意義 |
| 第二章 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨的病理學(xué)觀(guān)察 |
| 實(shí)驗(yàn)一 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨血液生化指標(biāo)變化的動(dòng)態(tài)觀(guān)察 |
| 實(shí)驗(yàn)二 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨組織病理學(xué)變化的動(dòng)態(tài)觀(guān)察 |
| 實(shí)驗(yàn)三 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨組織內(nèi)病毒抗原分布的動(dòng)態(tài)觀(guān)察 |
| 第三章 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨肝胰組織的細(xì)胞凋亡研究 |
| 實(shí)驗(yàn)一 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨肝胰組織的電鏡觀(guān)察 |
| 實(shí)驗(yàn)二 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨肝胰組織細(xì)胞凋亡的檢測(cè) |
| 實(shí)驗(yàn)三 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨肝胰組織Caspase-3表達(dá)的動(dòng)態(tài)觀(guān)察 |
| 實(shí)驗(yàn)四 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨肝胰組織中Bcl-2表達(dá)的動(dòng)態(tài)觀(guān)察 |
| 實(shí)驗(yàn)五 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨肝胰組織中Bax表達(dá)的動(dòng)態(tài)觀(guān)察 |
| 實(shí)驗(yàn)六 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨肝胰組織中p53表達(dá)的動(dòng)態(tài)觀(guān)察 |
| 第四章 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)觀(guān)察 |
| 實(shí)驗(yàn)一 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨血液和組織內(nèi)NO的動(dòng)態(tài)觀(guān)察 |
| 實(shí)驗(yàn)二 新型鴨肝炎病毒感染雛鴨血液中TNF-α和IL-2的動(dòng)態(tài)觀(guān)察 |
| 第五章 總結(jié) |
| 第六章 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 圖版與說(shuō)明 |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡(jiǎn)介 |
（7）HBV和HDV感染患者肝組織中HDAg與Bc1-2、Bax和Bak表達(dá)的關(guān)系（論文提綱范文）
| 資料與方法 |
| 一、病例和標(biāo)本 |
| 二、主要試劑來(lái)源 |
| 三、免疫組化檢測(cè) |
| 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 |
| 結(jié) 果 |
| 一、HDAg的表達(dá) |
| 二、Bcl-2、Bax和Bak表達(dá) |
| 三、HDAg表達(dá)與Bcl-2、Bax和Bak表達(dá)的關(guān)系 |
| 討 論 |
四、Fas在丁型肝炎致病機(jī)制中的作用（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]基于Th17、Treg細(xì)胞表達(dá)水平探討解毒化瘀方對(duì)HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭患者臨床療效研究[D]. 周小博. 廣西中醫(yī)藥大學(xué), 2020(02)
- [2]乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）通過(guò)下調(diào)AKT磷酸化促進(jìn)Fas介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡和肝臟損傷[D]. 荊振唐. 福建醫(yī)科大學(xué), 2019(07)
- [3]人源HBV人工感染沙鼠和C57BL/6小鼠的病理學(xué)研究[D]. 趙月. 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué), 2014(03)
- [4]樹(shù)鼩（Tupaia belangeri）血液生化學(xué)指標(biāo)測(cè)定分析及HCV感染樹(shù)鼩初步研究[D]. 白繼麗. 中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué), 2009(S1)
- [5]基因芯片在病毒性肝炎分子診斷及基因表達(dá)譜研究中的應(yīng)用[D]. 孫朝暉. 第一軍醫(yī)大學(xué), 2006(02)
- [6]新型鴨肝炎病毒致病特性及感染鴨肝胰細(xì)胞凋亡的研究[D]. 胡薛英. 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué), 2005(05)
- [7]HBV和HDV感染患者肝組織中HDAg與Bc1-2、Bax和Bak表達(dá)的關(guān)系[J]. 顧小紅,李奇芬,王宇明. 實(shí)用肝臟病雜志, 2004(04)
- [8]丁型肝炎病人肝組織HDAg與bcl-2、bax、bak表達(dá)關(guān)系[J]. 顧小紅,馮愛(ài)娟,張?jiān)茤|,李奇芬,王宇明. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào), 2004(18)
- [9]丁型肝炎病毒研究進(jìn)展[J]. 顧小紅. 醫(yī)學(xué)綜述, 2001(04)
- [10]丁型肝炎病人肝組織HDVRNA與HBVDNA的表達(dá)及關(guān)系[J]. 顧小紅,李奇芬,王宇明. 免疫學(xué)雜志, 2000(03)
標(biāo)簽：細(xì)胞凋亡論文; 肝細(xì)胞論文; 血清蛋白論文; 肝炎癥狀論文; 健康論文;