一、高效液相色譜—熒光檢測法測定血清色氨酸（論文文獻綜述）
馮萌萌[1]（2021）在《氨基酸檢測方法的構(gòu)建及在炎癥性腸病中補充規(guī)律研究》文中認為本論文研究隸屬于“十三五”國家重點研發(fā)計劃項目《方便營養(yǎng)型蛋制品綠色加工關(guān)鍵技術(shù)研究及開發(fā)》（2018YFD0400301）。氨基酸（Amino Acids,AAs）是一種具有生物基礎(chǔ)意義的化合物,在食品科學(xué)和制藥工業(yè)中發(fā)揮著重要作用。液相色譜（Liquid Chromatography）和毛細管電泳（Capillary Electrophoresis）是分離技術(shù)的主要分析工具,同時結(jié)合紫外檢測器（UV）、熒光檢測器（FLD）、電化學(xué)檢測（ECD）和質(zhì)譜檢測器（Mass Spectrum）來測定各種樣品中的氨基酸。氨基酸分析過程中經(jīng)常遇到的問題是氨基酸分析物數(shù)量多、分子極性變化大、檢測靈敏度低。氨基酸分子不包含發(fā)色團,因此分子吸收系數(shù)低,紫外檢測的靈敏度往往不夠,而柱前衍生化是提高方法靈敏度和選擇性的有效方法。氨基酸分析在許多領(lǐng)域具有重要的意義,例如,賴氨酸、蛋氨酸等必需的氨基酸可用作營養(yǎng)強化劑和食品添加劑。而食源性活性物質(zhì)具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗疲勞、抗氧化、抗病毒、保護心血管、降血糖等多種藥理功效,為了提升食源性活性物質(zhì)的開發(fā)與利用,本文的主要研究內(nèi)容和結(jié)論如下:（1）通過優(yōu)化衍生反應(yīng)緩沖溶液、緩沖溶液p H、緩沖溶液濃度,色譜條件中流動相流速、梯度洗脫條件、檢測波長等AQC衍生氨基酸的衍生條件,建立了AQC柱前衍生高效液相色譜法測定血清中氨基酸的方法。結(jié)果表明:本方法顯示出較好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù)R2范圍為0.9905～0.9969）,檢出限和定量限分別在1.0198～3.1348 ng/L和3.0594～9.4044 ng/L的范圍內(nèi),日內(nèi)、日間精度分別在1.39%～3.21%和3.17%～7.45%范圍內(nèi),加標回收率在90.33%～110.66%范圍內(nèi)。本衍生方法步驟操作簡單,無干擾峰,具有較好的準確度和較高的靈敏度,能夠滿足血清中氨基酸的定量分析。（2）通過DSS誘導(dǎo)構(gòu)建小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型,采用AQC柱前衍生氨基酸的方法檢測血清中氨基酸的含量,研究蛋清發(fā)酵酸乳對結(jié)腸炎小鼠體內(nèi)氨基酸的補充效果。結(jié)果表明:與空白對照組相比,除了Asp、Gln、Ala、Thr和Ile,之外,結(jié)腸炎模型組血清中其他氨基酸的含量水平顯著降低（P<0.05）;經(jīng)過蛋清發(fā)酵酸乳干預(yù)治療后,20種氨基酸在血清中含量上升,其中Thr、His、Ile、Trp、Phe、Tyr、Ala、Glu、Asp和Ser含量顯著升高（P<0.05）。（3）通過對快速且穩(wěn)定的衍生試劑（OPA和FMOC-Cl）進行條件優(yōu)化和對比,選擇FMOC-Cl對氨基酸進行衍生;對衍生條件中萃取條件,質(zhì)譜條件中質(zhì)譜參數(shù)和駐留時間的優(yōu)化進行研究,建立了FMOC-Cl柱前衍生高效液相色譜串聯(lián)電噴霧質(zhì)譜法測定血清中氨基酸的方法。結(jié)果表明:本方法顯示較好的線性相關(guān)性（相關(guān)系數(shù)R2范圍為0.988～0.998）,檢出限范圍為0.0237～0.2391ng/m L,定量限范圍為0.079～0.7971ng/m L,日內(nèi)和日間精度范圍分別在1.34～4.94%和2.19～7.78%,加標回收率范圍在73.98～117.98%。本衍生方法操作步驟簡單,結(jié)果無雜峰干擾,可以同時進行定性和定量分析,具有較好的準確度和較高的靈敏度,能夠滿足血清中氨基酸的定量分析。（4）通過DSS誘導(dǎo)建立小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型,采用FMOC-Cl柱前衍生氨基酸的方法檢測血清中氨基酸的含量,研究蛋清肽對結(jié)腸炎小鼠體內(nèi)氨基酸的補充效果。結(jié)果表明:與空白對照組相比,結(jié)腸炎模型組血清中20種氨基酸的含量水平發(fā)生了顯著降低（P<0.05）;經(jīng)過蛋清肽干預(yù)治療后,20種氨基酸在血清中含量上升,其中Cys、Tyr、Arg、Phe和Lys的含量水平顯著升高（P<0.05）。
楊可[2]（2021）在《血漿吲哚類物質(zhì)的高效液相色譜-熒光檢測方法學(xué)研究及臨床應(yīng)用》文中研究說明目的:1.建立一種簡單、靈敏、準確的高效液相色譜-熒光檢測（High performance liquid chromatography with fluorescence detection,HPLC-FLD）方法同時測定血漿中五種吲哚類物質(zhì),包括硫酸吲哚酚（Indoxyl sulfate,3-INDS）、吲哚乙酸（Indole-3-acetic acid,IAA）、吲哚丙酸（Indole-3-propionate,IPA）、吲哚（Indole,IND）以及3-甲基吲哚（3-Methylindole,3-MI）。2.用建立的方法測定多囊卵巢綜合征（Polycystic ovary syndrome,PCOS）患者與對照組女性血漿中吲哚類物質(zhì)的含量,探索血漿吲哚類物質(zhì)在PCOS中的作用。方法:1.血漿樣本經(jīng)液液萃取處理后,采用HPLC-FLD法檢測血漿中的吲哚類物質(zhì)。待測物經(jīng)Shim-Pack VP-ODS柱（4.6 mm×150 mm,4.6μm）進行分離。流動相條件為10 mmol/L磷酸二氫鈉溶液:甲醇（40/60,v/v）;柱溫為35°C;流速為0.8 m L/min;激發(fā)波長(lex)和發(fā)射波長(lem)分別為280 nm和355 nm;進樣體積為50μL。2.用所建立的方法測定PCOS組與對照組血漿中吲哚類物質(zhì)的含量,采用相關(guān)性分析以及非參數(shù)檢驗等統(tǒng)計學(xué)方法,結(jié)合臨床糖代謝指標以及抑郁測評結(jié)果分析血漿吲哚類物質(zhì)在PCOS中的作用。結(jié)果:1.血漿中3-INDS的線性范圍為1.56～400.00μmol/L,IAA線性范圍為312.50～10000.00 nmol/L,IPA線性范圍為125.00～6000.00nmol/L,IND線性范圍為6.25～400.00 nmol/L,3-MI線性范圍為1.56～400.00 nmol/L。該方法的日內(nèi)精密度的變異均≤4.0%,日間精密度的變異均≤5.2%,平均回收率在90.1%～109.3%之間。2.與對照組相比,PCOS患者血漿3-INDS、IAA以及IND含量顯著升高。3-INDS,IAA,IND與空腹血糖,空腹胰島素和胰島素抵抗的穩(wěn)態(tài)模型評估（Homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR）等糖代謝參數(shù)顯著正相關(guān);3-MI水平與空腹血糖正相關(guān);3-INDS、IAA、IND和3-MI與胰高血糖素樣肽-1（Glucagon-like peptide-1,GLP-1）負相關(guān)。3-INDS（OR=1.208,95%CI:1.100～1.327,p=0.000）,IAA（OR=1.437,95%CI:1.095～1.885,p=0.009）和IND（OR=1.051,95%CI:1.023～1.080,p=0.000）是PCOS發(fā)生的危險因素。3.PCOS患者抑郁組血漿中IND濃度顯著高于非抑郁組（p<0.05）,血漿IND（OR=1.144,95%CI為1.028～1.272,p=0.014）是PCOS患者抑郁的危險因素,且對PCOS患者抑郁有較高的診斷效能,受試者工作特征（Receiver operating characteristic,ROC）曲線下面積（Area under the curve,AUC）為0.873,Cut-off值為53.64 nmol/L（Youden index=0.623,Sensitivity=90.9%,Specificity=71.4%）。結(jié)論:1.本研究建立了一種HPLC-FLD法同時檢測血漿中五種吲哚類物質(zhì)。該方法簡單、靈敏、準確,適用于臨床和科研。2.吲哚類物質(zhì)與PCOS糖代謝有關(guān)。3-INDS、IAA和IND是PCOS發(fā)生的危險因素。IND是PCOS抑郁發(fā)生的危險因素。
梁秋霞[3]（2020）在《基于化學(xué)衍生的羧基類化合物的色譜分析研究》文中研究表明羧基化合物是一類以羧基為官能團,以碳鏈為基本骨架的有機物。常見的羧基化合物以鹽、酯或游離酸的形式在生命體內(nèi)廣泛存在。其不僅是脂類、碳水化合物和氨基酸等細胞構(gòu)成物的中間代謝物,也是生理活動中生化反應(yīng)的底物或產(chǎn)物。它們在生命體內(nèi)濃度的高低與生物體生長發(fā)育,衰老和某些疾?。ㄌ悄虿?、炎癥）息息相關(guān)。此外,隨著人們對自然改造而濫用羧基化合物,羧基化合物也成為常見的環(huán)境污染物之一。因此,建立快速,靈敏度高,準確度高的羧基化合物分析方法具有極其重要的意義。本論文分別采用高效液相色譜-熒光檢測法（HPLC-FLD）,超高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）和毛細管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測法（CE-LIF）,并結(jié)合化學(xué)衍生、固相萃取和液相萃取等技術(shù),分析測定植物、動物組織和人血樣品中的羧基化合物。研究內(nèi)容主要有以下四個部分組成:（1）本實驗建立了以4,4-二氟-5,7-二甲基-4-硼-3a,4a-二吡咯甲烷-3-丙?；叶罚˙ODIPY?FL EDA,BODIPY類熒光染料）為柱前衍生試劑,采用HPLC-FLD法分離測定赤霉素A3（GA3）,吲哚乙酸（IAA）,脫落酸（ABA）,吲哚丁酸（IBA）,萘乙酸（NAA）,2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）六種羧基類植物激素的分析方法。詳細探討了色譜分離條件和衍生反應(yīng)條件。在20℃下,衍生反應(yīng)20 min內(nèi)完成。在λex/λem=490 nm/510 nm的波長下,六種羧基類植物激素在17 min達到基線分離。GA3,IAA,ABA,IBA,NAA,2,4-D的檢出限分別為0.75、2.00、0.55、3.00、0.05、0.50 nmol/L,衍生物的遷移時間和峰面積的相對標準偏差（RSD）分別在1.80-3.73%和3.46-5.01%之間。該方法已成功應(yīng)用于5種蔬菜水果中植物激素的殘留檢測,加標回收率在94.12-106.75%范圍內(nèi)。（2）建立了分離檢測赤霉素A3,吲哚乙酸,脫落酸,吲哚丁酸,萘乙酸,2,4-二氯苯氧乙酸六種羧基類植物激素的液液萃?。↙iquid–liquid extraction,LLE）-CE-LIF的方法。以BODIPY?FL EDA為熒光標記試劑,以28 mmol/L,p H=9.0的H3BO3-Na2B4O7緩沖溶液（含5 mmol/L SDS,4%異丙醇）為背景電解質(zhì),當(dāng)分離電壓為10.5 k V時,在λex=490 nm的波長下,六種羧基類植物激素在10 min內(nèi)達到基線分離。這六種分析物的檢出限分別為0.05、0.05、0.05、0.075、0.0125和0.05 nmol/L,日內(nèi)和日間精度分別小于5.68和6.96%,相對標準偏差（RSD）（n=5）的范圍分別為0.03%-1.23%（遷移時間）和1.14%-5.23%（峰面積）。該方法已成功應(yīng)用于擬南芥花中多種內(nèi)源性植物激素含量的測定,是研究植物激素功能和調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的有力輔助工具。且該方法也成功應(yīng)用于5種蔬菜水果中植物激素的殘留檢測,可作為食品中植物激素殘留一種分析方法。（3）建立了分離檢測12-POHSA,12-PAHSA,12-OAHSA和12-SAHSA四種支鏈脂肪酸酯（Fatty acid esters of hydroxy fatty acids,FAHFAs）的UPLC-MS/MS雙衍生化方法。在建立的方法中,使用固相萃?。⊿olid-phase extraction,SPE）從生物樣品中選擇性富集和純化FAHFAs。在該方法中,采取了一種雙衍生試劑的方法,即以（2-氨基乙基）三甲基銨（Cholamine）作為柱前衍生試劑,2-二甲基氨基乙胺（2-dimethylaminoethylamine,DMED）衍生的FAHFAs標準品作為內(nèi)標,作為同位素標志（Stable isotopically labeled,SIL）的替代品。衍生反應(yīng)在室溫下1 min內(nèi)完成。結(jié)果表明,在Cholamine標記后,FAHFAs的LOD和LOQ分別為0.02-0.07 pg/m L和0.06-0.12 pg/m L,檢測靈敏度分別提高了50-126倍。此外,在UPLC系統(tǒng)中,在色譜柱上15 min內(nèi)可以很好地分離FAHFAs,并具有尖銳的峰形。使用該方法,我們成功測定了人血清樣品,大鼠白脂肪,肺,腎,肝和心臟組織中FAHFAs的含量。結(jié)果顯示在大鼠的不同組織中觀察到3種FAHFAs（12-PAHSA,12-SAHSA和12-OAHSA）。另外,我們在人血清樣品中成功檢測出上述3種FAHFAs。（4）開發(fā)了UPLC-MS/MS測定13-PAHSA,12-PAHSA,10-PAHSA,9-PAHSA和5-PAHSA五種PAHSAs同分異構(gòu)體雙衍生化方法。采用上一章節(jié)的衍生條件下,五種同分異構(gòu)體成功與Cholamine和DMED發(fā)生衍生反應(yīng),DMED衍生的PAHSAs作為內(nèi)標,作為SIL的替代品。詳細探究了MRM模式的參數(shù)和五種同分異構(gòu)體在UPLC系統(tǒng)中分離條件,在最優(yōu)分離條件下五種同分異構(gòu)體在20 min內(nèi)成功分離。5種PAHSAs的LOD和LOQ分別為0.04-0.07 pg/m L和0.10-0.20 pg/m L。檢測的靈敏度增加了73-105倍,將這種快速、高靈敏、準確定量的分析方法應(yīng)用于分離和定量測定人體血液和小鼠組織的PAHSAs的含量。結(jié)果顯示在大鼠的不同組織中觀察到5種PAHSAs同分異構(gòu)體。并且,我們在人血清樣品中成功檢測出上述5種PAHSAs同分異構(gòu)體。
蘇美丞[4]（2020）在《不同加工工藝奶產(chǎn)品脂肪酸及色氨酸代謝物差異研究》文中進行了進一步梳理近年來,國民對食物的要求已經(jīng)從飽腹向注重食品品質(zhì)轉(zhuǎn)變,牛奶作為人們?nèi)粘Ｉ畹谋匦杵?其品質(zhì)評價對保障人體健康有著重要的作用。牛奶不僅含有脂肪酸、蛋白質(zhì)等六大營養(yǎng)素,其中還含有活性肽、色氨酸等微量的生物活性物質(zhì)。其中,脂肪酸作為一種熱敏性物質(zhì),其含量和種類易受溫度的影響而改變;色氨酸及其代謝物因其生物學(xué)功能備受關(guān)注,但其在不同牛奶中的分布、含量和檢測方法等還未被完全報道,因此,對不同牛奶產(chǎn)品中脂肪酸和色氨酸代謝物的的研究在牛奶營養(yǎng)品質(zhì)方面具有重要的意義。本課題以牛奶產(chǎn)品為研究對象,利用核磁共振氫譜技術(shù)對超高溫滅菌奶和復(fù)原奶中脂肪酸含量進行了分析;利用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),建立了牛奶中色氨酸及其12種代謝物的檢測研究方法,對不同牛奶產(chǎn)品中色氨酸及其12種代謝物的含量及分布進行了研究,以期為牛奶的營養(yǎng)品質(zhì)評價提供方法和數(shù)據(jù)參考。具體內(nèi)容如下。首先,利用核磁共振氫譜技術(shù),研究了超高溫滅菌奶和復(fù)原奶中的脂肪酸含量差異,超高溫滅菌奶和復(fù)原奶中,亞麻酸的含量分別為（0.98±0.11）%,（0.90±0.04）%;亞油酸的含量分別為（1.15±0.36）%,（1.11±0.36）%;油酸的含量分別為（27.30±0.56）%,（26.78±0.78）%;飽和脂肪酸含量分別為（43.26±1.56）%,（43.81±2.34）%。另外,對兩種牛奶脂肪酸的磁共振氫譜峰和含量進行了正交偏最小二乘法判別分析（OPLS-DA）和獨立樣本T檢驗,進一步對兩種奶中差異性脂肪酸進行分析,并根據(jù)結(jié)果對兩種奶進行了初步的營養(yǎng)學(xué)評價。其次,建立了牛奶中色氨酸及其12種代謝物的檢測方法,利用QuEChERS方法對樣本進行前處理,通過優(yōu)化提取溶劑、色譜條件和質(zhì)譜條件確定最終的檢測方法。本方法中批內(nèi)相對標準偏差（RSD%）為0.26%-11.33%;批間相對偏差為1.01%-13.68%;檢測限在0.01-2.00 ng/mL之間;定量限在0.02-5.00 ng/mL之間;目標化合物的回收率為44.67%-126.78%;本方法的前處理簡單,重現(xiàn)性好,靈敏度高,實現(xiàn)了奶中痕量色氨酸代謝物的檢測,為牛奶中色氨酸及其代謝物的檢測提供了行之有效的方法。最后,利用建立的奶中色氨酸及其代謝物的分析方法,檢測了巴氏殺菌奶、超高溫滅菌奶、復(fù)原奶和酸奶中色氨酸及其12種代謝物的含量。色氨酸在4種奶中的含量在8960.70-11771.40ng/100mL之間;犬尿氨酸（KYN）在超高溫滅菌奶中的含量最低（56.25±13.69 ng/100 mL）;犬尿酸（KA）在巴氏殺菌奶中的含量最低（103.95±5.36 ng/100 mL）;吲哚通路上的色氨酸代謝物在酸奶中的含量較高。通過方差分析,觀察到色氨酸的9種代謝物（犬尿氨酸,犬尿酸,色胺,煙酸,5-羥色氨酸,黃尿酸,吲哚乙酸,吲哚甲醛和吲哚-3-乙胺）在4種奶中的顯著性差異,從加工工藝角度解釋了出現(xiàn)差異的原因,并根據(jù)結(jié)果對4種奶進行了初步的營養(yǎng)學(xué)評價。另外,本研究首次報道了色氨酸的5種代謝物（3-羥基鄰氨基苯甲酸,黃尿酸,吲哚乙酸,吲哚甲醛,吲哚-3-乙胺）在巴氏殺菌奶、超高溫滅菌奶、復(fù)原奶和酸奶中的含量。
李晨[5]（2020）在《基于神經(jīng)化學(xué)指標的孤獨癥譜系障礙兒童辨識評估方法研究》文中研究表明孤獨癥譜系障礙（Autism Spectrum Disorder,ASD）是神經(jīng)發(fā)育性的疾病譜系,其發(fā)病率為1/59,是嚴重的全球性健康問題。目前ASD的病因尚不明確,早期干預(yù)能改善患者的行為但不能完全治愈,其前提是準確及時的發(fā)現(xiàn),目前臨床上主要是由專家參照診斷和篩查工具,觀察兒童的行為表現(xiàn)來進行診斷篩查及預(yù)后評估,依賴于測評者的主觀判斷,客觀性不足?；谏笜说腁SD辨識是新的取向之一。先期研究指向了遺傳因素,但發(fā)現(xiàn)單基因?qū)SD患病的解釋率較低,多基因（146個）用于辨識雖準,但檢測成本太高。后續(xù)研究提出單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及其代謝物、激素、氨基酸、有機酸、氧化應(yīng)激代謝物等作為識別指標。但已有研究多是探討單個或某一類的幾個指標,如此辨識有可能與其他疾病混淆。因此,整合與ASD有關(guān)的多系統(tǒng)的標志物成為了趨勢。近年來研究發(fā)現(xiàn),高達90%的ASD患者伴隨腸道疾病。這促使人們重視中樞神經(jīng)系統(tǒng)與腸道的交互作用在ASD中的作用。腸道菌群產(chǎn)生多種神經(jīng)信號物質(zhì),如氨基酸、酚類等分子刺激腸神經(jīng)系統(tǒng)的傳入神經(jīng)末梢,進而影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育及調(diào)控;在免疫反應(yīng)中,下丘腦-垂體-腎上腺軸（Hypothalamic–Pituitary–Adrenal axis,HPAA）產(chǎn)生糖皮質(zhì)激素,實現(xiàn)腦與腸道的雙向交流。這些研究形成了微生物-腸-腦軸（Microbiota-Gut-Brain Axis,MGBA）的概念。因此,本文基于腸道微生物與中樞神經(jīng)系統(tǒng)互作的原理,選取其中三類重要神經(jīng)化學(xué)代謝物對甲酚、氨基酸類及HPAA糖皮質(zhì)激素（皮質(zhì)醇和可的松）為指標開展ASD的辨識與預(yù)后評估研究,包括以下內(nèi)容:1、兒童尿液皮質(zhì)醇和可的松檢測及其在ASD辨識中的應(yīng)用研究使用聚苯乙烯納米纖維為固相萃取填料,對尿液進行前處理,結(jié)合高效液相色譜-質(zhì)譜檢測目標物,得到皮質(zhì)醇和可的松的線性范圍為0.6-150 ng/m L和0.8-200 ng/m L;檢出限為0.20 ng/m L和0.30 ng/m L;定量限為0.65 ng/m L和0.88ng/m L。招募50名ASD和58正常發(fā)育（TD）兒童,采集晨尿樣本并檢測,結(jié)果ASD組的皮質(zhì)醇和皮質(zhì)醇/可的松（RUCC）顯著低于TD組,可的松無差異。分別對皮質(zhì)醇和RUCC繪制接受者操作特性曲線（Receiver Operating Characteristic Curve,ROCC）,皮質(zhì)醇的靈敏度為0.845,特異度為0.800;RUCC的靈敏度為0.862,特異度為1.000,表明RUCC在ASD的篩查中有應(yīng)用前景。2、兒童尿液氨基酸檢測及其在ASD辨識中的應(yīng)用研究用醋酸纖維素（SFCA）針頭過濾器凈化尿樣,結(jié)合高效液相色譜檢測尿液氨基酸（酪氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和色氨酸）,線性范圍為:0.1-100μg/m L,檢出限為0.01-0.04μg/m L,定量限為0.05-0.2μg/m L。檢測ASD與TD兒童的晨尿樣本,發(fā)現(xiàn)ASD組幾種氨基酸都顯著低于TD組;分別用各氨基酸繪制ROCC,色氨酸的靈敏度和特異度最高（0.948,0.900）;對各氨基酸進行二分（ASD/TD）Logistic回歸分析,甲硫氨酸、苯丙氨酸和色氨酸對回歸方程有貢獻并可組合為新指標,該組合指標繪制的ROCC的靈敏度和特異度為0.966和0.94,高于所有單個氨基酸,并接近或超過傳統(tǒng)的篩查/診斷工具。向回歸分析中增加皮質(zhì)醇為自變量,得到新的回歸方程和組合指標并繪制ROCC,靈敏度和特異度升至1.00和0.96,體現(xiàn)出多類指標聯(lián)合辨識的優(yōu)勢。3、兒童尿液對甲酚檢測及其在ASD辨識中的應(yīng)用研究以聚吡咯納米纖維為固相萃取填料,對尿液進行前處理,結(jié)合高效液相色譜分析尿液對甲酚。檢出限為0.1μg/m L,定量限為0.35μg/m L,線性范圍為0.2-300μg/m L。檢測ASD與TD兒童的晨尿樣本進行,發(fā)現(xiàn)ASD組的尿液對甲酚含量顯著高于TD組。用對甲酚數(shù)值繪制ROCC,靈敏度和特異度為0.78和0.793。向回歸方程中繼續(xù)增加對甲酚,回歸方程不變,對甲酚對辨識模型沒有貢獻。4、兒童尿液三類神經(jīng)化學(xué)指標在ASD預(yù)后評估中的應(yīng)用研究招募3名ASD兒童開展執(zhí)行功能訓(xùn)練,訓(xùn)練前后測量執(zhí)行功能和神經(jīng)化學(xué)指標,干預(yù)后兒童的執(zhí)行功能有所改善,部分尿液氨基酸有明顯提高,RUCC略上升,尿液對甲酚、皮質(zhì)醇和可的松的變化趨勢不明。體現(xiàn)出部分神經(jīng)化學(xué)指標在預(yù)后評估中的潛在應(yīng)用價值。5、神經(jīng)化學(xué)指標辨識模型在人群中的驗證研究招募73名健康嬰兒和53名健康學(xué)齡前兒童為驗證樣本,采集晨尿樣本并分析神經(jīng)化學(xué)指標,帶入三種辨識模型（RUCC辨識、多氨基酸聯(lián)合辨識、氨基酸皮質(zhì)醇聯(lián)合辨識）中計算。在嬰兒組,RUCC模型的準確率為0,多氨基酸聯(lián)合模型和氨基酸皮質(zhì)醇聯(lián)合模型的正確率約為80%,在學(xué)齡前兒童組,三種辨識模型的正確率依次遞增（均高于90%）。以上結(jié)果表明辨識模型的使用具有年齡限制,多類指標聯(lián)合辨識體現(xiàn)出優(yōu)勢。
衛(wèi)蘭蘭[6]（2019）在《外界因素導(dǎo)致人體氧化應(yīng)激和腸道菌群代謝物變化的研究》文中研究表明正常情況下機體的氧化能力和抗氧化能力處于動態(tài)平衡中。但是,機體受到外界各種刺激后會發(fā)生一系列非特異性防御反應(yīng)來抵抗和適應(yīng)這些刺激,當(dāng)機體細胞內(nèi)產(chǎn)生的自由基的水平高于其抗氧化防御能力時,過量的自由基存在于組織或細胞內(nèi),就會引起氧化還原狀態(tài)失衡,誘發(fā)氧化應(yīng)激,并導(dǎo)致氧化損傷。氧化應(yīng)激是人類范圍極廣的綜合病癥的主要原因之一。腸道作為機體器官中與外界接觸面積最大的器官,寄居著大量的微生物,承載著食物消化、吸收和代謝的主要功能。所以,腸道中存在著非?；钴S的物質(zhì)和能量代謝,極易被氧自由基攻擊。更嚴重的是,氧化應(yīng)激會逐漸緩慢地給腸道帶來非常嚴重的損傷。所以,維持氧化還原平衡對維持腸道內(nèi)環(huán)境平衡至關(guān)重要。有報道表明益生菌能夠改變腸道內(nèi)的微生物結(jié)構(gòu),從而構(gòu)建腸道內(nèi)有利于消炎的環(huán)境,起到降低促炎細菌繁殖,并改善腸道屏障的完整性的作用,甚至某些益生菌還被證明可以降低腸道氧化應(yīng)激程度。尿液采集簡單方便,是非侵入性檢測最常用的生物樣品。腸道菌群代謝物可通過吸收后排泄進入尿液并在膀胱中積累,能夠反映身體的最終變化,可以在設(shè)定的時間段內(nèi)匯集和收集。所以,尿液是機體代謝的“集中營”,也是機體疾病的“晴雨表”。所以,本文利用本課題組創(chuàng)立的納米纖維固相萃取技術(shù)建立了人尿液樣本中谷胱甘肽等氧化應(yīng)激標志物和吲哚胺類腸道菌群代謝物的檢測方法,并且設(shè)計了不同應(yīng)激模式的人群研究范式,通過對人體無創(chuàng)樣本中氧化應(yīng)激生物標志物和腸道菌群代謝物吲哚類物質(zhì)的檢測,研究人體氧化應(yīng)激對腸道菌群代謝的影響。此外,利用靜電紡絲技術(shù)制備新的復(fù)合納米纖維材料作為乳酸菌包埋材料,并進行體外實驗考察了其對益生菌活性的保護作用。具體內(nèi)容如下:一、氧化應(yīng)激標志物和腸道微生物代謝物檢測方法建立（1）使用靜電紡絲技術(shù)制備PS-CuNPs復(fù)合納米纖維,,基于納米銅與谷胱甘肽的活性基團-SH形成Cu-S共價鍵的原理,實現(xiàn)了衍生反應(yīng)前對尿樣中谷胱甘肽選擇性提取。谷胱甘肽的標準曲線在濃度為10至1000 ng/mL范圍內(nèi)都表現(xiàn)出了良好的線性（R2≥0.99）。LOD和LOQ的值分別是1.1 ng/mL和3.7 ng/mL。對于低、中和高濃度的人工尿液樣品來說,回收率范圍為94.6%-95.7%,表明尿樣中谷胱甘肽的回收率良好。日內(nèi)精度和日間精度均小于10%,符合生物樣品的試驗要求。同時將建立的檢測方法應(yīng)用到高危嬰兒和正常嬰兒的尿液中GSH的檢測中,結(jié)果發(fā)現(xiàn),正常兒童尿中谷胱甘肽的平均水平為823±220 ng/mL,高危嬰兒尿中谷胱甘肽的平均水平為443±150 ng/mL,高危嬰兒尿液中谷胱甘肽濃度的顯著降低（P<0.05）,說明高危嬰兒體內(nèi)氧化應(yīng)激水平顯著升高,有可能發(fā)生氧化損傷。（2）基于高錳酸鉀在酸性溶液中可氧化硫醇類氨基酸產(chǎn)生微弱的化學(xué)發(fā)光,而甲醛可以大大增強高錳酸鉀-硫醇類氨基酸氧化發(fā)光體系的發(fā)光強度這一原理,建立了一個高效液相色譜結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測人乳中谷胱甘肽、半胱氨酸的方法。該方法具有分離效率高、檢測靈敏的特點,實現(xiàn)了不再需要對硫醇類氨基酸衍生,直接對其檢測的目的;半胱氨酸和谷胱甘肽的線性范圍為0.02-10μmol/mL和0.05-10μmol/mL,并且在線性范圍內(nèi)都表現(xiàn)出了良好的線性（R2≥0.99）;半胱氨酸和谷胱甘肽的的LOD分別是0.02μmol/mL和3.7μmol/mL,對半胱氨酸和谷胱甘肽的的低、中和高濃度的加標回收率范圍為96.3%-99.9%和96.1%-99.3%,表明母乳中谷胱甘肽的回收率良好;日內(nèi)精度和日間精度均小于10%,符合生物樣品的試驗要求。采集同一城市不同城區(qū)人體母乳樣本,運用新方法檢測母乳中谷胱甘肽和半胱氨酸。結(jié)果發(fā)現(xiàn),高污染地區(qū)谷胱甘肽和半胱氨酸濃度為0.63±0.05μg/mL、0.52±0.02μg/mL低污染地區(qū)其濃度為1.71±0.34μg/mL、1.12±0.04μg/mL,對照空氣重金屬（鉛、砷、鎘、汞）的檢測數(shù)據(jù)分析兩個地區(qū)的母乳樣本數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)來自污染環(huán)境比較嚴重的城區(qū)母乳中的胱甘肽和半胱氨酸含量比對照組低（P<0.05）,說明空氣污染微小的差異提升就會導(dǎo)致哺乳期女性體內(nèi)氧化應(yīng)激水平升高。（3）建立了尿液中腸道菌群代謝物吲哚胺類物質(zhì)的基于納米纖維固相萃取結(jié)合高效液相色譜-熒光的檢測方法。該方法可以省略傳統(tǒng)萃取方式中常用的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮吲哚類目標物的步驟,避免了其損失,提高了方法的靈敏度和準確性;褪黑素的線性范圍為2-400 ng/mL,吲哚-3-丙酸、吲哚和3-甲基吲哚的線性范圍為5-400 ng/mL,并且在線性范圍內(nèi)都表現(xiàn)出了良好的線性（R2≥0.99）。褪黑素、吲哚-3-丙酸、吲哚和3-甲基吲哚的LOD分別是0.28 ng/mL、0.59 ng/mL、0.55 ng/mL和0.37 ng/mL。對吲哚類物質(zhì)的低、中和高濃度的加標回收率范圍為96.3%-99.5%、97.3%-99.3%、81.3%-91.3%和89.3%-93.8%。數(shù)據(jù)表明尿液中吲哚類物質(zhì)的回收率良好;日內(nèi)精度和日間精度均小于10%,符合生物樣品的試驗要求。將新方法成功應(yīng)用于成年男性運動前后尿液中的吲哚類物質(zhì)檢測,運動前褪黑素、3-丙酸吲哚、吲哚、3-甲基吲哚的平均濃度分別為54.2±5.10 ng/mL、14.4±1.30 ng/mL、250.8±14.1 ng/mL和9.43±1.07 ng/mL,運動后其濃度分別為84.0±9.69 ng/mL、25.9±3.39 ng/mL、343.7±36.8 ng/mL和14.6±1.36 ng/mL,結(jié)果顯示運動后尿液中吲哚類物質(zhì)的濃度都顯著高于運動前（P<0.05）,說明短時間的運動應(yīng)激就可導(dǎo)致腸道菌群代謝物發(fā)生變化。二、環(huán)境污染導(dǎo)致的氧化應(yīng)激對兒童腸道菌群代謝物的影響分別在同一個城市的不同城區(qū)（環(huán)境污染指數(shù)高低略有不同）各選擇一個地理環(huán)境、管理模式基本匹配的幼兒園,采集兩個幼兒園大班兒童尿液樣本。利用前述建立的生物樣本中氧化應(yīng)激標志物和腸道菌群代謝物檢測方法體系檢測兒童尿液中谷胱甘肽和吲哚類的水平。高污染城區(qū)幼兒園兒童尿中GSH的平均水平為36.3±2.25 ng/mL,低污染城區(qū)幼兒園兒童尿液中GSH的平均水平為49.4±5.27 ng/mL;統(tǒng)計結(jié)果表明,高污染城區(qū)幼兒園兒童尿中GSH的濃度的顯著降低且兩組之間具有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）,說明高污染城區(qū)幼兒園兒童體內(nèi)氧化應(yīng)激水平顯著升高,有可能導(dǎo)致氧化損傷;高污染城區(qū)幼兒園兒童尿液中褪黑素、3-丙酸吲哚和吲哚的平均濃度分別為40.8±3.42 ng/mL、195.0±22.4 ng/mL和181.3±15.0 ng/mL,低污染城區(qū)幼兒園兒童尿液中目標物的平均水平為54.0±5.02 ng/mL、113.9±22.3 ng/mL和243.7±23.4 ng/mL;MEL、IPA和IND的濃度在兩組之間具有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）;通過結(jié)果推論,以尿液中谷胱甘肽含量下降為特征表現(xiàn)的兒童體內(nèi)氧化應(yīng)激水平升高,同時會聯(lián)動影響腸道微生物群宿主共代謝吲哚胺類物質(zhì)水平的變化。這些結(jié)果表明即使微小的環(huán)境變化也會給人們,尤其是兒童健康帶來顯著的影響。三、基于聚乙烯醇/絲素蛋白靜電紡絲技術(shù)的益生菌固載化研究利用靜電紡絲技術(shù)通過調(diào)節(jié)各組分配比制備出包埋有植物乳桿菌[ATCC8014]的聚乙烯醇/絲素蛋白/益生菌復(fù)合生物納米纖維材料。復(fù)合生物納米纖維在模擬胃液脅迫2.0h后,其在新鮮液體培養(yǎng)基生物量不受影響;而純益生菌在模擬胃液脅迫后,在新鮮液體培養(yǎng)基中不生長。比較實驗表明聚乙烯醇/絲素蛋白/益生菌細胞復(fù)合生物納米纖維材料在抗胃液脅迫的耐受能力方面顯現(xiàn)出突出的優(yōu)勢。該技術(shù)為活性益生菌新制劑研究進行了有益的探索。
梁先玉[7]（2019）在《分子印跡聚合物的制備及其在生物體液中酪氨酸和甘氨酸的代謝產(chǎn)物分析中的應(yīng)用研究》文中進行了進一步梳理氨基酸在生命體中是不可或缺的一類物質(zhì),一些非必需氨基酸及其代謝物與人類某些疾病有一定的關(guān)聯(lián)性。酪氨酸與甘氨酸是人體中重要的非必需氨基酸,這兩種非必需氨基酸的代謝異常與某些疾病有一定的聯(lián)系。研究發(fā)現(xiàn)肝腎疾病、惡性腫瘤等疾病發(fā)生時,酪氨酸、甘氨酸的代謝會出現(xiàn)異常。因此,研究建立簡便、靈敏、快速的分析方法并運用到人體體液中酪氨酸、甘氨酸的代謝物分離與分析檢測,對某些疾病的輔助診斷、治療與監(jiān)測有著重要的現(xiàn)實意義。本文研究制備了相關(guān)的分子印跡聚合物,并用于人體體液中酪氨酸、甘氨酸的代謝物的分離富集,結(jié)合超高效液相色譜分析技術(shù),構(gòu)建了人體體液中酪氨酸、甘氨酸的代謝物分析新方法,并用于實際尿樣檢測,取得了滿意的效果。其主要研究成果如下:1.以對羥苯基乙酸為模板分子,1-乙烯基咪唑為功能單體,三甲基丙烷三丙烯酸酯為交聯(lián)劑,N-N偶氮二異丁腈為引發(fā)劑,乙腈為溶劑,采用沉淀聚合的方法,制備了對羥苯基乙酸分子印跡聚合物（PHPAA-MIP）。根據(jù)吸附動力學(xué)實驗探究了PHPAA-MIP吸附機理,評估了PHPAA-MIP的識別性能及其選擇性能。結(jié)果表明,PHPAA-MIP對尿樣中的對羥苯基乳酸、對羥苯基乙酸以及對羥苯基丙酸有較高的選擇吸附性能。2.建立了基于分子印跡聚合物分離富集-超高效液相色譜法測定人體尿液中的對羥苯基乳酸、對羥苯基乙酸和對羥苯基丙酸的分析新方法。尿樣稀釋一倍,經(jīng)ENVI-C18柱除無機鹽,用PHPAA-MIP萃取目標分析物,最終的解吸液用UHPLC-FLD檢測。在優(yōu)化的萃取/解吸條件下,采用ZORBAX SB-C18快速分離柱,以50 mmol/L乙酸-乙酸銨（pH=5.3）:乙腈=95:5（V/V）為流動相,流速為0.2 mL/min下分離,熒光檢測波長為λex=277 nm、λem=316 nm。三種分析物的檢測限和定量限分別為8.5×10-3-2.8×10-2 mg/L與2.8×10-2-9.3×10-2 mg/L,加標回收率為75.7%-110.3%,相對標準偏差小于15%。該方選擇性好,可用于尿液中三種酪氨酸的代謝產(chǎn)物的同時測定。3.以N-苯基甘氨酸為模板分子,丙烯酰胺為功能單體,三甲基丙烷三丙烯酸酯為交聯(lián)劑,N-N偶氮二異丁腈為引發(fā)劑,乙腈為溶劑,采用沉淀聚合法制備了分子印跡聚合物（NPG-MIP）。采用各種分析技術(shù)對所制備的聚合物進行了表征,并研究了該分子印跡聚合物的吸附特性。結(jié)果表明,NPG-MIP對目標分析物的吸附比NIP具有更好的親和性,對目標分析物的結(jié)構(gòu)類似物選擇性差,印跡因子IF=4.7。該材料為從復(fù)雜樣品中（尿樣）分離NPG奠定了基礎(chǔ)。4.建立了基于分子印跡聚合物分離富集-超高效液相色譜法測定人體尿樣中N-苯基甘氨酸的分析新方法。尿樣稀釋20倍后,采用NPG-MIP印跡聚合物對尿樣進行前處理,UHPLC-DAD檢測其解吸液。在優(yōu)化萃取/解吸條件下,采用ZORBAX SB-C18快速分離柱,以20 mmol/L磷酸二氫鈉（pH=5.6）:甲醇=90:10（V/V）為流動相,流速為0.2 mL/min下分離,紫外檢測波長為λ=239 nm。NPG的線性范圍在0.5-100 mg/L,檢測限與定量限分別為1.6×10-2 mg/L和5.5×10-2mg/L,該方法的加標回收率高于84.7%,相對標準偏差小于11%。該方法對目標分析物具有較高的選擇性,為進一步探究甘氨酸的代謝與癌癥之間的關(guān)聯(lián)性提供了方法學(xué)基礎(chǔ)。
楊永麗[8]（2017）在《乳腺癌患者尿液中酪氨酸及其代謝產(chǎn)物分析新方法研究》文中提出酪氨酸屬于芳香氨基酸,在體內(nèi)由苯丙氨酸羥化而來,在人體新陳代謝過程中起著重要的作用,是人體健康狀況的重要參數(shù)。研究表明,酪氨酸的代謝紊亂不僅與氨基酸代謝疾病有關(guān),而且與惡性腫瘤有一定的相關(guān)性。因此,建立簡單、快速、靈敏的分析方法并且用于人體尿液中酪氨酸及其代謝產(chǎn)物含量的監(jiān)測,對于一些疾病的普查、早期診斷、監(jiān)測及預(yù)后評價具有極其重要的現(xiàn)實意義。然而,在已有的測定酪氨酸及其代謝產(chǎn)物的研究中,以血清中酪氨酸的代謝產(chǎn)物研究報道較多,而對尿液中酪氨酸的代謝產(chǎn)物研究介紹較少。本文應(yīng)用色譜及其聯(lián)用技術(shù),系統(tǒng)地探討了酪氨酸及其代謝產(chǎn)物分離分析條件,在此基礎(chǔ)上,研究建立了尿液中酪氨酸及其多種代謝產(chǎn)物同時分析新方法,并應(yīng)用于實際樣品分析,取得了令人滿意的效果。主要研究成果如下:1. 建立了氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定人體尿液中的對羥苯基丙酸、尿黑酸和對羥苯基乳酸的分析新方法。尿液經(jīng)乙腈除蛋白后,氮氣吹干,加入硅烷化試劑（BSTFA+1%TMCS）衍生,離心后取上清液過0.22μm有機相濾膜后直接進樣檢測。采用HP-5MS毛細管柱（30 m′0.25 mm′0.25μm）,流速為1.0m L/min,在優(yōu)化的色譜升溫程序下進行分離。實驗結(jié)果表明,對羥苯基丙酸、尿黑酸和對羥苯基乳酸的線性范圍均為0.0253.00 mg/L,線性相關(guān)系數(shù)在0.99930.9995之間,三種物質(zhì)的加標回收率在94.50%110.0%,相對標準偏差小于3.0%。該方法應(yīng)用于人體尿液中對羥苯基丙酸、尿黑酸和對羥苯基乳酸的同時測定,結(jié)果令人滿意。2.建立了超高效液相色譜-熒光法測定人體尿液中的對羥苯基乳酸、對羥苯基乙酸以及對羥苯基丙酸的分析新方法。尿樣經(jīng)離心后取上清液過GenerikC8/BCX固相萃取小柱凈化,取洗脫液進行檢測。采用ZO RBAX SB-C18快速分離柱,以50 mmol/L乙酸-乙酸銨（p H=6.8,5 mmol/L四丁基溴化銨）:乙腈=95:5（V/V）為流動相,在流速為0.2 m L/min下分離,熒光檢測波長為λex=277 nm,λem=316 nm。在優(yōu)化的色譜條件下,對羥苯基乳酸、對羥苯基乙酸和對羥苯基丙酸的線性范圍分別為0.054.0 mg/L、0.0550 mg/L及0.14.0 mg/L。檢出限分別為8.8′10-3 mg/L、4.8′10-3 mg/L及9.0′10-3 mg/L,健康人尿樣中三種待測物在三個添加水平下的平均加標回收率在85.0%120.0%之間,相對標準偏差在1.2%3.1%之間。此方法用于尿液中三種物質(zhì)的同時測定,結(jié)果令人滿意。3.建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定尿液中的酪氨酸、多巴、對羥苯基乳酸、對羥苯基乙酸、尿黑酸、對羥苯基丙酸和酪胺的分析新方法。尿液被超純水稀釋兩倍后離心,取上清液過0.22μm水系濾膜后直接進樣。采用Shim-pack GIST C18分離柱,以乙酸-乙酸銨（20 mmol/L）:乙腈=95:5（V/V）為流動相,流速為0.2 m L/min,在優(yōu)化的質(zhì)譜條件下,七種組分的線性較好且相關(guān)系數(shù)在0.99920.9998之間,尿樣中七種待測物在三個水平下的平均加標回收率在85.5%112.0%之間,相對標準偏差在1.0%5.0%之間。此方法簡單快速,為今后酪氨酸及其代謝產(chǎn)物的研究提供了重要的方法學(xué)參考。
賈雪峰[9]（2016）在《高效液相色譜—熒光/紫外檢測法分析測定茶葉和中藥姜黃中的活性成分》文中認為本文研究了六種兒茶素類化合物和三種姜黃素類化合物的熒光性質(zhì),考察了實驗條件對其熒光光譜的影響。采用高效液相熒光檢測法對茶葉和中藥姜黃中的活性成分進行了定性和定量分析。論文主要由以下兩部分組成:1、建立了同時測定茶葉中沒食子兒茶素、表沒食子兒茶素、兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、表兒茶素、沒食子兒茶素沒食子酸酯、表兒茶素沒食子酸酯和兒茶素沒食子酸酯含量的高效液相熒光檢測法。在C18反相柱上進行分離,以0.1%磷酸水溶液為流動相A,甲醇為流動相B,進行梯度淋洗,流速為1.0 m L·min-1,柱溫為35 oC,采用梯度波長進行熒光檢測,分析時間僅為20 min。該方法線性范圍更寬,靈敏度更高,測得各組分的日內(nèi)穩(wěn)定性和精密度的RSD在0.63%0.98%之間,回收率在87.7%106.1%之間。該方法應(yīng)用于六種不同市售茶葉中八種兒茶素組分含量的測定,結(jié)果準確、可靠。2、建立了同時測定中藥姜黃中姜黃素、去甲氧基姜黃素和雙去甲氧基姜黃素含量的高效液相熒光檢測法。在C18反相柱上進行分離,以乙腈-0.1%甲酸水（50:50）為流動相進行等度洗脫,流速為1.0 m L·min-1,柱溫為25 oC,以檢測波長λex/λem=432/524 nm進行熒光檢測,分析時間僅為12 min。該方法線性范圍更寬,靈敏度更高,測得各組分的日內(nèi)穩(wěn)定性和精密度的RSD在0.48%0.92%之間,回收率在98.7%103.7%之間。該方法應(yīng)用于姜黃市售藥材和對照藥材中三種姜黃素組分含量的測定,結(jié)果準確、可靠。
孫玄[10]（2015）在《大鼠尿液中蝶呤類化合物及氨基酸分析新方法的研究》文中研究說明國內(nèi)外文獻表明,蝶呤類化合物及氨基酸對生物體新陳代謝有著重要的意義,人體體液中蝶呤類化合物或氨基酸含量的變化,有可能為癌癥的早期診斷提供重要的參考價值。本文從生物體中蝶呤類化合物和氨基酸的分析技術(shù)、樣品前處理以及兩者與疾病相關(guān)性研究等方面進行了綜述。在此基礎(chǔ)上,建立了同時測定蝶呤類化合物和氨基酸的離子色譜熒光法和高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法,然后采用離子色譜熒光法對大鼠膀胱癌模型組和對照組進行尿液分析,尋找可能的膀胱癌腫瘤標志物。其主要研究成果如下:1.建立了大鼠尿液中的色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸的離子色譜熒光分析法。大鼠尿液利用三氯乙酸除蛋白后,采用MCX固相萃取小柱進行凈化,然后用離子色譜熒光法進行測定。3種物質(zhì)的儀器檢出限分別為0.08,0.3和0.002μmol/L,加標回收率在71.2%121.7%之間,RSD小于11.7%。2.建立了大鼠尿液中黃蝶呤、異黃蝶呤、蝶呤-6-羧酸、酪氨酸和色氨酸的高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）的分析方法。大鼠尿液除去蛋白后,稀釋50倍直接進樣分析,采用基質(zhì)標準曲線法消除基質(zhì)的影響。5種物質(zhì)的儀器檢出限分別為1.6,1.5,2.2,0.9和1.0 ng/m L,加標回收率在89.0%107.0%之間,RSD在0.30%5.19%之間。3.將離子色譜熒光法應(yīng)用于對照組和膀胱癌模型組大鼠尿液中色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸的同時測定。測定結(jié)果顯示3種物質(zhì)在膀胱癌發(fā)生發(fā)展過程中呈現(xiàn)出不同的發(fā)展趨勢,其中色氨酸和蝶呤-6-羧酸有可能成為膀胱癌潛在的標志物。
二、高效液相色譜—熒光檢測法測定血清色氨酸（論文開題報告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準備的觀點或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細分析其設(shè)計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實驗法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認事物間的因果關(guān)系。
文獻研究法：通過調(diào)查文獻來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實踐的需要提出設(shè)計。
定性分析法：對研究對象進行“質(zhì)”的方面的研究，這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認識進一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進行研究。
功能分析法：這是社會科學(xué)用來分析社會現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、高效液相色譜—熒光檢測法測定血清色氨酸（論文提綱范文）
（1）氨基酸檢測方法的構(gòu)建及在炎癥性腸病中補充規(guī)律研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 緒論 |
| 1.1 氨基酸概述 |
| 1.1.1 氨基酸的定義 |
| 1.1.2 氨基酸的結(jié)構(gòu)與功能 |
| 1.1.3 氨基酸的應(yīng)用 |
| 1.2 常見氨基酸分析方法 |
| 1.2.1 非衍生化檢測分析法 |
| 1.2.2 衍生化間接檢測分析法 |
| 1.3 氨基酸代謝在炎癥性腸病中的作用 |
| 1.3.1 氨基酸的主要功能 |
| 1.3.2 炎癥性腸病概述 |
| 1.3.3 氨基酸代謝在炎癥性腸病中的作用 |
| 1.4 本文的研究意義與主要研究內(nèi)容 |
| 1.4.1 研究意義 |
| 1.4.2 研究內(nèi)容 |
| 第2章 基于HPLC技術(shù)的AQC衍生氨基酸檢測方法的建立 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料與設(shè)備 |
| 2.2.1 實驗材料與試劑 |
| 2.2.2 實驗儀器與設(shè)備 |
| 2.3 實驗方法 |
| 2.3.1 動物飼養(yǎng)方法 |
| 2.3.2 液相色譜條件 |
| 2.3.3 氨基酸標準溶液的配制 |
| 2.3.4 衍生溶液的配制 |
| 2.3.5 血清樣品的制備 |
| 2.3.6 柱前衍生步驟 |
| 2.3.7 方法的內(nèi)部驗證 |
| 2.3.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 |
| 2.4 結(jié)果與討論 |
| 2.4.1 檢測波長的確定 |
| 2.4.2 流動相緩沖溶液p H的優(yōu)化 |
| 2.4.3 流動相緩沖溶液濃度的優(yōu)化 |
| 2.4.4 洗脫條件流速的優(yōu)化 |
| 2.4.5 流動相洗脫條件的優(yōu)化 |
| 2.4.6 方法的有效性 |
| 2.4.7 血清樣品中20 種氨基酸含量的測定 |
| 2.5 本章小結(jié) |
| 第3章 蛋清發(fā)酵酸乳對結(jié)腸炎小鼠氨基酸補充效果研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料與設(shè)備 |
| 3.2.1 實驗材料與試劑 |
| 3.2.2 實驗儀器與設(shè)備 |
| 3.3 實驗方法 |
| 3.3.1 雞蛋發(fā)酵酸乳的制備 |
| 3.3.2 動物飼養(yǎng)方法 |
| 3.3.3 潰瘍性結(jié)腸炎模型的建立 |
| 3.3.4 潰瘍性結(jié)腸炎模型的評價 |
| 3.3.5 血清中氨基酸含量的檢測 |
| 3.3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 |
| 3.4 結(jié)果與討論 |
| 3.4.1 血清中20 種氨基酸的含量 |
| 3.4.2 血清中必需氨基酸的補充效果 |
| 3.4.3 血清中非必需氨基酸的補充效果 |
| 3.4.4 血清中疏水性氨基酸的補充效果 |
| 3.4.5 血清中支鏈氨基酸的補充效果 |
| 3.5 本章小結(jié) |
| 第4章 基于HPLC-ESI-MS/MS技術(shù)的FMOC-Cl衍生氨基酸檢測方法的建立 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料與設(shè)備 |
| 4.2.1 實驗材料與試劑 |
| 4.2.2 實驗儀器與設(shè)備 |
| 4.3 實驗方法 |
| 4.3.1 主要溶液的配制 |
| 4.3.2 OPA的衍生化效果 |
| 4.3.3 FMOC-Cl的衍生化效果 |
| 4.3.4 液相色譜條件 |
| 4.3.5 質(zhì)譜條件 |
| 4.3.6 氨基酸標準溶液的配制 |
| 4.3.7 血清樣品的準備 |
| 4.3.8 方法的內(nèi)部驗證 |
| 4.3.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 |
| 4.4 結(jié)果與討論 |
| 4.4.1 OPA衍生氨基酸結(jié)果分析 |
| 4.4.2 FMOC-Cl衍生氨基酸結(jié)果分析 |
| 4.4.3 質(zhì)譜參數(shù)的優(yōu)化 |
| 4.4.4 駐留時間的優(yōu)化 |
| 4.4.5 色譜參數(shù)的優(yōu)化 |
| 4.4.6 萃取條件的優(yōu)化 |
| 4.4.7 衍生條件的優(yōu)化 |
| 4.4.8 血清樣品的前處理 |
| 4.4.9 方法的有效性 |
| 4.4.10 血清樣品中20 種氨基酸含量的測定 |
| 4.5 本章小結(jié) |
| 第5章 蛋清肽對結(jié)腸炎模型小鼠氨基酸補充效果研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料與設(shè)備 |
| 5.2.1 實驗材料 |
| 5.2.2 實驗試劑 |
| 5.2.3 實驗儀器與設(shè)備 |
| 5.3 實驗方法 |
| 5.3.1 動物飼養(yǎng)方法 |
| 5.3.2 潰瘍性結(jié)腸炎模型的建立 |
| 5.3.3 潰瘍性結(jié)腸炎模型的評價 |
| 5.3.4 血清中20 種氨基酸含量的檢測 |
| 5.3.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 |
| 5.4 結(jié)果與討論 |
| 5.4.1 樣本中20 種氨基酸的檢測結(jié)果 |
| 5.4.2 樣本血清中必需氨基酸濃度水平比較 |
| 5.4.3 小鼠體內(nèi)非必需氨基酸的補充效果 |
| 5.4.4 小鼠體內(nèi)疏水性氨基酸的補充效果 |
| 5.4.5 小鼠體內(nèi)支鏈氨基酸的補充效果 |
| 5.5 本章小結(jié) |
| 第6章 結(jié)論與展望 |
| 6.1 全文結(jié)論 |
| 6.2 創(chuàng)新點 |
| 6.3 展望 |
| 參考文獻 |
| 導(dǎo)師簡介 |
| 攻讀碩士學(xué)位期間所取得的科研成果 |
| 致謝 |
（2）血漿吲哚類物質(zhì)的高效液相色譜-熒光檢測方法學(xué)研究及臨床應(yīng)用（論文提綱范文）
| 英漢縮略語名詞對照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 高效液相色譜-熒光檢測法測定血漿吲哚類物質(zhì)的方法學(xué)研究 |
| 1 材料與方法 |
| 2 結(jié)果與討論 |
| 3 結(jié)論 |
| 第二部分 高效液相色譜-熒光檢測法測定血漿吲哚類物質(zhì)的臨床應(yīng)用 |
| 1 方法和研究對象 |
| 2 結(jié)果與討論 |
| 3 結(jié)論 |
| 全文總結(jié) |
| 參考文獻 |
| 綜述 多囊卵巢綜合征的臨床表現(xiàn)、發(fā)病機制以及治療方案 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
| 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章 |
（3）基于化學(xué)衍生的羧基類化合物的色譜分析研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 羧基化合物 |
| 1.3 羧基化合物的分析與檢測方法 |
| 1.4 萃取技術(shù) |
| 1.5 羧基化合物的化學(xué)衍生試劑 |
| 1.6 本論文的選題思想和設(shè)計 |
| 第二章 高效液相色譜-熒光檢測法測定食品中的植物激素殘留 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 實驗部分 |
| 2.3 結(jié)果與討論 |
| 2.4 結(jié)論 |
| 第三章 毛細管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測法測定植物中內(nèi)源性激素和食品植物激素殘留 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 實驗部分 |
| 3.3 結(jié)果與討論 |
| 3.4 結(jié)論 |
| 第四章 雙衍生化-超高效液相色譜-質(zhì)譜法測定支鏈脂肪酸酯 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 實驗部分 |
| 4.3 結(jié)果與討論 |
| 4.4 結(jié)論 |
| 第五章 超高效液相色譜-質(zhì)譜結(jié)合雙衍生化法測定PAHSAs同分異構(gòu)體 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 實驗部分 |
| 5.3 結(jié)果與討論 |
| 5.4 結(jié)論 |
| 第六章 結(jié)論與展望 |
| 6.1 結(jié)論 |
| 6.2 展望 |
| 參考文獻 |
| 攻讀碩士學(xué)位期間研究成果 |
| 致謝 |
（4）不同加工工藝奶產(chǎn)品脂肪酸及色氨酸代謝物差異研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 脂肪酸概述 |
| 1.1.1 脂肪酸介紹 |
| 1.1.2 脂肪酸的營養(yǎng)價值 |
| 1.1.3 牛奶產(chǎn)品中脂肪酸 |
| 1.1.4 脂肪酸檢測技術(shù) |
| 1.2 色氨酸及其代謝物 |
| 1.2.1 色氨酸代謝物及其生物學(xué)功能 |
| 1.2.2 食品中的色氨酸及其代謝物的研究 |
| 1.2.3 色氨酸及其代謝物的檢測方法 |
| 1.3 不同牛奶產(chǎn)品加工工藝介紹 |
| 1.4 選題的目的及意義 |
| 1.5 研究內(nèi)容 |
| 1.6 技術(shù)路線 |
| 第二章 基于~1HNMR的復(fù)原奶和超高溫滅菌奶脂肪酸分析 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 實驗材料與儀器 |
| 2.2.1 實驗材料 |
| 2.2.2 實驗試劑 |
| 2.2.3 實驗儀器 |
| 2.3 實驗方法 |
| 2.3.1 樣品預(yù)處理 |
| 2.3.2 數(shù)據(jù)采集與分析 |
| 2.4 結(jié)果與討論 |
| 2.4.1 ~1HNMR圖譜分析 |
| 2.4.2 正交偏最小二乘判別(OPLS-DA)分析和獨立樣本T檢驗 |
| 2.4.3 營養(yǎng)學(xué)評價 |
| 2.5 本章小結(jié) |
| 第三章 牛奶中色氨酸及其12種代謝物檢測方法的建立 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 實驗材料與儀器 |
| 3.2.1 實驗材料 |
| 3.2.2 實驗試劑與藥品 |
| 3.2.3 實驗儀器 |
| 3.3 實驗方法 |
| 3.3.1 標準溶液及其制備 |
| 3.3.2 色譜條件 |
| 3.3.3 質(zhì)譜條件 |
| 3.3.4 樣品前處理方法: |
| 3.4 實驗結(jié)果 |
| 3.4.1 標準曲線線性關(guān)系 |
| 3.4.2 檢測限和定量限 |
| 3.4.3 回收率和精密度 |
| 3.5 討論 |
| 3.5.1 色譜條件優(yōu)化 |
| 3.5.2 質(zhì)譜條件優(yōu)化 |
| 3.5.3 前處理方法優(yōu)化 |
| 3.6 本章小結(jié) |
| 第四章 牛奶中色氨酸及其12種代謝物含量分析及營養(yǎng)學(xué)評價 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 實驗材料與儀器 |
| 4.2.1 樣品收集 |
| 4.2.2 實驗試劑 |
| 4.2.3 實驗儀器 |
| 4.3 實驗方法 |
| 4.3.1 樣品前處理 |
| 4.3.2 色譜及質(zhì)譜參數(shù) |
| 4.3.3 數(shù)據(jù)處理分析 |
| 4.4 結(jié)果與討論 |
| 4.4.1 4 種奶中色氨酸及其12種代謝物含量分析 |
| 4.4.2 偏最小二乘判別分析和層次聚類分析 |
| 4.4.3 營養(yǎng)學(xué)評價 |
| 4.5 本章小結(jié) |
| 第五章 結(jié)論與展望 |
| 5.1 結(jié)論 |
| 5.2 展望 |
| 參考文獻 |
| 附錄 A |
| 致謝 |
| 作者簡歷 |
（5）基于神經(jīng)化學(xué)指標的孤獨癥譜系障礙兒童辨識評估方法研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要縮寫詞表 |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 孤獨癥譜系障礙概述 |
| 1.2 孤獨癥譜系障礙的診斷標準和工具 |
| 1.2.1 孤獨癥譜系障礙的診斷標準 |
| 1.2.2 孤獨癥譜系障礙的診斷和篩查工具 |
| 1.3 基于生化指標檢測的孤獨癥譜系障礙兒童識別與評估 |
| 1.3.1 已有研究回顧 |
| 1.3.2 腸道微生物-腸-腦軸與孤獨癥譜系障礙的關(guān)系 |
| 1.4 腸道微生物-腸-腦軸相關(guān)神經(jīng)化學(xué)標志物 |
| 1.4.1 下丘腦-垂體-腎上腺軸標志物 |
| 1.4.2 氨基酸類物質(zhì) |
| 1.4.3 腸道微生物代謝物對甲酚 |
| 1.4.4 上述三類目標物的檢測方法 |
| 1.4.5 尿液樣品前處理方法 |
| 1.5 論文研究內(nèi)容 |
| 第二章 兒童尿液中皮質(zhì)醇和可的松檢測及其在ASD辨識中應(yīng)用研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 尿液皮質(zhì)醇和可的松分析方法 |
| 2.2.1 儀器和試劑 |
| 2.2.2 電紡納米纖維的制備和表征 |
| 2.2.3 電紡納米纖維固相萃取柱的裝填與使用 |
| 2.2.4 高效液相色譜-質(zhì)譜條件及尿液樣本分析 |
| 2.2.5 方法學(xué)驗證 |
| 2.3 尿液皮質(zhì)醇與可的松分析方法實驗結(jié)果與討論 |
| 2.3.1 高效液相色譜-質(zhì)譜MRM圖 |
| 2.3.2 工作曲線和靈敏度 |
| 2.3.3 準確性和回收率 |
| 2.3.4 基質(zhì)效應(yīng) |
| 2.3.5 與已有方法對比 |
| 2.4 ASD兒童與正常發(fā)育兒童尿液皮質(zhì)醇和可的松的分析 |
| 2.4.1 被試和樣本 |
| 2.4.2 數(shù)據(jù)分析 |
| 2.4.3 被試特征與ABC量表得分 |
| 2.4.4 ASD和TD兒童尿液皮質(zhì)醇和可的松水平 |
| 2.4.5 晨尿皮質(zhì)醇、可的松、RUCC與 ABC量表得分的相關(guān)性 |
| 2.4.6 皮質(zhì)醇和RUCC的接受者操作特征曲線 |
| 2.4.7 分析結(jié)果討論 |
| 2.5 本章小結(jié) |
| 第三章 兒童尿液中氨基酸檢測及其在ASD辨識中應(yīng)用研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 尿液氨基酸分析方法 |
| 3.2.1 儀器和試劑 |
| 3.2.2 樣品前處理 |
| 3.2.3 高效液相色譜條件及方法學(xué)參數(shù) |
| 3.2.4 高效液相色譜圖 |
| 3.3 ASD兒童和TD兒童尿液氨基酸的分析 |
| 3.3.1 被試和樣本 |
| 3.3.2 數(shù)據(jù)分析 |
| 3.3.3 ASD兒童和TD兒童的尿液氨基酸水平 |
| 3.3.4 晨尿氨基酸與ABC量表得分的相關(guān)性 |
| 3.3.5 單個氨基酸的接受者操作特征曲線 |
| 3.3.6 多氨基酸的二元Logistic回歸分析 |
| 3.3.7 多氨基酸聯(lián)合的接受者操作特征曲線 |
| 3.3.8 與已有診斷/篩查工具對比 |
| 3.4 氨基酸與糖皮質(zhì)激素聯(lián)合指標的ASD辨識模型 |
| 3.4.1 尿液氨基酸與皮質(zhì)醇的二元Logistic回歸分析 |
| 3.4.2 氨基酸與皮質(zhì)醇聯(lián)合指標的接受者操作特征曲線 |
| 3.5 本章小結(jié) |
| 第四章 兒童尿液中對甲酚檢測及其在ASD辨識中應(yīng)用研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 尿液對甲酚分析方法建立 |
| 4.2.1 儀器和試劑 |
| 4.2.2 電紡納米纖維的制備與PFSPE器件 |
| 4.2.3 高效液相色譜條件 |
| 4.2.4 前處理條件優(yōu)化 |
| 4.2.5 方法學(xué)驗證 |
| 4.3 尿液對甲酚分析方法實驗結(jié)果與討論 |
| 4.3.1 納米纖維選用與表征 |
| 4.3.2 樣本前處理條件優(yōu)化結(jié)果 |
| 4.3.3 尿液對甲酚分析高效液相色譜圖 |
| 4.3.4 方法學(xué)參數(shù) |
| 4.3.5 與已有前處理方法對比 |
| 4.4 ASD兒童與TD兒童尿液對甲酚分析 |
| 4.4.1 被試和樣本 |
| 4.4.2 數(shù)據(jù)分析 |
| 4.4.3 ASD和TD兒童尿液對甲酚水平 |
| 4.4.4 尿液對甲酚與ABC量表得分的相關(guān)性分析 |
| 4.4.5 尿液對甲酚的接受者操作特性曲線 |
| 4.4.6 基于MGBA三類神經(jīng)化學(xué)指標的識別模型 |
| 4.5 神經(jīng)化學(xué)指標在ASD預(yù)后評估中的應(yīng)用 |
| 4.5.1 被試與樣本 |
| 4.5.2 ASD兒童干預(yù)前后執(zhí)行功能與注意力 |
| 4.5.3 ASD兒童干預(yù)前后糖皮質(zhì)激素改變 |
| 4.5.4 ASD兒童干預(yù)前后尿液氨基酸 |
| 4.5.5 ASD兒童干預(yù)前后尿液對甲酚 |
| 4.6 本章小結(jié) |
| 第五章 神經(jīng)化學(xué)指標的辨識作用在其他人群中的驗證 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 在嬰兒中的測試 |
| 5.2.1 被試與樣本 |
| 5.2.2 數(shù)據(jù)分析 |
| 5.2.3 嬰兒尿液神經(jīng)化學(xué)指標分析結(jié)果 |
| 5.2.4 嬰兒樣本驗證測試 |
| 5.3 在學(xué)齡前兒童中的測試 |
| 5.3.1 被試與樣本 |
| 5.3.2 學(xué)齡前兒童尿液神經(jīng)化學(xué)指標分析結(jié)果 |
| 5.3.3 學(xué)齡前兒童樣本驗證測試 |
| 5.4 本章小結(jié) |
| 總結(jié)與展望 |
| 1 研究的創(chuàng)新點與特色 |
| 2 研究的不足之處 |
| 3 未來研究的展望 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
| 附錄 |
| 作者簡介 |
（6）外界因素導(dǎo)致人體氧化應(yīng)激和腸道菌群代謝物變化的研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要縮寫詞表 |
| 緒論 |
| 1.氧化應(yīng)激 |
| 1.1 氧化應(yīng)激的危害 |
| 1.2 導(dǎo)致氧化應(yīng)激的原因 |
| 1.3 氧化應(yīng)激評價指標 |
| 1.4 氧化應(yīng)激檢測方法 |
| 2.腸道菌群 |
| 2.1 人體腸道菌群和營養(yǎng)物質(zhì)的吸收與代謝 |
| 2.2 氧化應(yīng)激對腸道菌群影響 |
| 2.3 腸道菌群的研究方法 |
| 2.4 腸道菌群代謝物檢測 |
| 2.5 益生菌干預(yù)對氧化應(yīng)激損傷的影響 |
| 2.6 腸道菌群移植包埋新理念 |
| 3.靜電紡絲納米纖維 |
| 4.本文的主要工作 |
| 第一章 銅納米粒子修飾的聚苯乙烯納米纖維選擇性提取-高效液相色譜法測定尿液中的谷胱甘肽 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 實驗部分 |
| 1.2.1 實驗材料 |
| 1.2.2 實驗儀器 |
| 1.2.3 納米纖維制備 |
| 1.2.4 尿液樣本的收集和前處理 |
| 1.2.5 標準溶液的制備 |
| 1.2.6 納米纖維固相萃取過程 |
| 1.2.7 色譜條件 |
| 1.3 結(jié)果和討論 |
| 1.3.1 纖維表征 |
| 1.3.2 納米纖維固相萃取條件的優(yōu)化 |
| 1.3.3 方法學(xué)研究 |
| 1.3.4 人群樣本檢測分析 |
| 1.4 結(jié)論 |
| 第二章 基于高效液相色譜—化學(xué)發(fā)光法檢測母乳中谷胱甘肽和半胱氨酸評價空氣重金屬暴露的哺乳期女性的氧化應(yīng)激水平 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 實驗部分 |
| 2.2.1 實驗設(shè)備 |
| 2.2.2 實驗試劑 |
| 2.2.3 高效液相色譜-化學(xué)發(fā)光檢測條件 |
| 2.3 母乳的收集 |
| 2.4 空氣中重金屬檢測 |
| 2.4.1 大氣采樣 |
| 2.4.2 采樣膜消解 |
| 2.4.3 ICP-MS檢測 |
| 2.5 統(tǒng)計分析 |
| 2.6 結(jié)果和討論 |
| 2.6.1 化學(xué)發(fā)光反應(yīng)條件優(yōu)化 |
| 2.6.2 方法學(xué)研究 |
| 2.6.3 母乳樣品的應(yīng)用 |
| 2.6.4 空氣中重金屬濃度 |
| 2.7 結(jié)論 |
| 第三章 基于納米纖維固相萃取結(jié)合高效液相色譜-熒光法檢測尿中腸道微生物群宿主共代謝吲哚胺類物質(zhì) |
| 3.1 引言 |
| 3.2 實驗 |
| 3.2.1 試劑和化學(xué)品 |
| 3.2.2 特征描述 |
| 3.2.3 尿液樣本的采集和預(yù)處理 |
| 3.2.4 樣品預(yù)處理及填充纖維固相萃取 |
| 3.2.5 色譜條件 |
| 3.3 結(jié)果和討論 |
| 3.3.1 PS和PPy納米纖維的形態(tài) |
| 3.3.2 萃取條件優(yōu)化 |
| 3.3.3 方法驗證 |
| 3.3.4 樣品分析 |
| 3.4 結(jié)論 |
| 第四章 環(huán)境污染導(dǎo)致的氧化應(yīng)激對兒童腸道菌群代謝物的影響 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 實驗部分 |
| 4.2.1 受試者及采樣 |
| 4.2.2 樣品檢測 |
| 4.2.3 數(shù)據(jù)分析 |
| 4.3 結(jié)果和討論 |
| 4.3.1 兩個地區(qū)兒童尿液中谷胱甘肽濃度 |
| 4.3.2 兩個地區(qū)兒童尿液中吲哚胺類物質(zhì)濃度 |
| 4.3.3 討論 |
| 4.4 本章小結(jié) |
| 第五章 基于聚乙烯醇-絲素蛋白靜電紡絲技術(shù)的益生菌固載化研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 實驗部分 |
| 5.2.1 實驗材料 |
| 5.2.2 實驗設(shè)備 |
| 5.2.3 菌株 |
| 5.2.4 培養(yǎng)基 |
| 5.2.5 益生菌細胞的傳代及培養(yǎng) |
| 5.2.6 植物乳桿菌[ATCC8014]生長曲線的測定 |
| 5.2.7 聚乙烯醇/絲素蛋白/植物乳桿菌[ATCC8014]細胞復(fù)合生物納米纖維材料的制備 |
| 5.2.8 材料表征 |
| 5.2.9 復(fù)合生物納米纖維材料對益生菌細胞保護作用驗證 |
| 5.3 結(jié)果與討論 |
| 5.3.1 植物乳桿菌[ATCC8014]細胞的生長曲線 |
| 5.3.2 復(fù)合生物納米纖維材料SEM表征 |
| 5.3.3 模擬胃液中脅迫實驗 |
| 5.4 總結(jié) |
| 總結(jié)與展望 |
| 1.總結(jié) |
| 2.創(chuàng)新 |
| 3.工作展望 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
| 作者簡介 |
（7）分子印跡聚合物的制備及其在生物體液中酪氨酸和甘氨酸的代謝產(chǎn)物分析中的應(yīng)用研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 酪氨酸和甘氨酸及其代謝產(chǎn)物分析研究現(xiàn)狀 |
| 1.1.1 酪氨酸、甘氨酸及其一些代謝產(chǎn)物概況 |
| 1.1.2 樣品前處理技術(shù) |
| 1.1.3 酪氨酸、甘氨酸及其代謝產(chǎn)物的分析方法 |
| 1.1.4 酪氨酸、甘氨酸及其代謝產(chǎn)物與疾病相關(guān)性研究 |
| 1.2 分子印跡聚合物在生物樣品分析中的應(yīng)用研究 |
| 1.2.1 分子印跡聚合物概述 |
| 1.2.2 分子印跡聚合物的制備方法 |
| 1.2.3 分子印跡聚合物應(yīng)用于生物樣品分析 |
| 1.3 本文研究的主要內(nèi)容 |
| 第二章 對羥苯基乙酸分子印跡聚合物的制備及其吸附性能研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 實驗部分 |
| 2.2.1 主要儀器與試劑 |
| 2.2.2 標準溶液的配置 |
| 2.2.3 色譜分析條件 |
| 2.2.4 對羥苯基乙酸分子印跡聚合物制備 |
| 2.2.5 紫外測定 |
| 2.2.6 PHPAA-MIP的表征 |
| 2.2.7 吸附實驗 |
| 2.3 結(jié)果與討論 |
| 2.3.1 對羥苯基乙酸分子印跡聚合物制備 |
| 2.3.2 對羥苯基乙酸分子印跡聚合物的表征 |
| 2.3.3 吸附實驗 |
| 2.4 結(jié)論 |
| 第三章 分子印跡聚合物富集分離-超高效液相色譜法測定人體尿液中酪氨酸的代謝物 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 實驗部分 |
| 3.2.1 主要儀器與試劑 |
| 3.2.2 標準溶液的配置 |
| 3.2.3 尿樣的采集與前處理 |
| 3.2.4 色譜分析條件 |
| 3.3 結(jié)果與討論 |
| 3.3.1 離子強度對MIP吸附目標物的影響 |
| 3.3.2 吸附條件的優(yōu)化 |
| 3.3.3 解吸條件的優(yōu)化 |
| 3.3.4 PHPAA-MIP對尿樣的凈化 |
| 3.3.5 SPE-MIP-UHPLC方法驗證 |
| 3.3.6 尿樣測定 |
| 3.4 結(jié)論 |
| 第四章 N-苯基甘氨酸分子印跡聚合物的制備及其吸附性能研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 實驗部分 |
| 4.2.1 主要儀器與試劑 |
| 4.2.2 標準溶液的配置 |
| 4.2.3 色譜分析條件 |
| 4.2.4 N-苯基甘氨酸分子印跡聚合物制備 |
| 4.2.5 NPG-MIP結(jié)構(gòu)表征 |
| 4.2.6 吸附實驗 |
| 4.3 結(jié)果與討論 |
| 4.3.1 N-苯基甘氨酸分子印跡聚合物制備 |
| 4.3.2 N-苯基甘氨酸分子印跡聚合物的表征 |
| 4.3.3 吸附實驗 |
| 4.4 結(jié)論 |
| 第五章 分子印跡聚合物富集分離...超高效液相色譜法測定人體尿液中N-苯基甘氨酸 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 實驗部分 |
| 5.2.1 主要儀器與試劑 |
| 5.2.2 色譜分析條件 |
| 5.2.3 尿樣的采集與前處理 |
| 5.3 結(jié)果與討論 |
| 5.3.1 吸附條件的優(yōu)化 |
| 5.3.2 解吸條件的優(yōu)化 |
| 5.3.3 PHPAA-MIP 對尿樣的凈化 |
| 5.3.4 SPE-MIP-UHPLC 方法驗證 |
| 5.3.5 尿樣測定 |
| 5.4 結(jié)論 |
| 第六章 小結(jié) |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
| 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果 |
（8）乳腺癌患者尿液中酪氨酸及其代謝產(chǎn)物分析新方法研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 酪氨酸及其代謝產(chǎn)物的研究現(xiàn)狀 |
| 1.1.1 酪氨酸及其代謝產(chǎn)物的概述 |
| 1.1.2 酪氨酸及其代謝產(chǎn)物分析方法的研究 |
| 1.1.3 酪氨酸及其代謝產(chǎn)物與疾病的相關(guān)性研究 |
| 1.2 乳腺癌的研究現(xiàn)狀 |
| 1.3 本文研究的主要內(nèi)容 |
| 第二章 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定人體尿液中的對羥苯基乳酸、對羥苯基丙酸和尿黑酸 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 實驗部分 |
| 2.2.1 儀器與試劑 |
| 2.2.2 標準溶液的配置 |
| 2.2.3 色譜條件 |
| 2.2.4 質(zhì)譜條件 |
| 2.2.5 尿樣的采集與處理 |
| 2.3 結(jié)果與討論 |
| 2.3.1 色譜分離條件的優(yōu)化 |
| 2.3.2 衍生條件的優(yōu)化 |
| 2.3.3 樣品前處理條件的優(yōu)化 |
| 2.3.4 線性方程、線性范圍和檢出限 |
| 2.3.5 回收率與精密度 |
| 2.3.6 樣品的測定 |
| 2.4 結(jié)論 |
| 第三章 超高效液相色譜-熒光法測定人體尿液中對羥苯基乳酸、對羥苯基乙酸和對羥苯基丙酸 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 實驗部分 |
| 3.2.1 儀器與試劑 |
| 3.2.2 標準溶液的配置 |
| 3.2.3 色譜分析條件 |
| 3.2.4 尿樣的采集與處理 |
| 3.3 結(jié)果與討論 |
| 3.3.1 色譜分離條件的優(yōu)化 |
| 3.3.2 樣品前處理條件選擇 |
| 3.3.3 線性方程、線性范圍和檢出限 |
| 3.3.4 回收率與精密度 |
| 3.3.5 樣品的測定 |
| 3.4 結(jié)論 |
| 第四章 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定人體尿液中的酪氨酸及其代謝產(chǎn)物 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 實驗部分 |
| 4.2.1 儀器與試劑 |
| 4.2.2 標準溶液的配置 |
| 4.2.3 色譜分離條件 |
| 4.2.4 質(zhì)譜條件 |
| 4.2.5 尿樣的采集與處理 |
| 4.3 結(jié)果與討論 |
| 4.3.1 色譜分離條件的選擇 |
| 4.3.2 質(zhì)譜條件的優(yōu)化 |
| 4.3.3 樣品前處理方法的選擇 |
| 4.3.4 線性方程、線性范圍和檢出限 |
| 4.3.5 回收率與精密度 |
| 4.3.6 樣品的測定 |
| 4.4 結(jié)論 |
| 第五章 小結(jié) |
| 致謝 |
| 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果 |
| 參考文獻 |
（9）高效液相色譜—熒光/紫外檢測法分析測定茶葉和中藥姜黃中的活性成分（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 緒論 |
| 1.1 茶葉的研究現(xiàn)狀 |
| 1.1.1 化學(xué)成分 |
| 1.1.2 藥理與臨床應(yīng)用 |
| 1.1.3 提取工藝 |
| 1.1.4 定量分析方法 |
| 1.2 姜黃的研究現(xiàn)狀 |
| 1.2.1 化學(xué)成分 |
| 1.2.2 藥理與臨床應(yīng)用 |
| 1.2.3 提取工藝 |
| 1.2.4 定量分析方法 |
| 1.3 本文研究內(nèi)容及意義 |
| 2 高效液相色譜法分析測定茶葉中八種兒茶素的含量 |
| 2.1 六種兒茶素類化合物的熒光性質(zhì)研究 |
| 2.1.1 儀器與試劑 |
| 2.1.2 實驗方法 |
| 2.1.3 結(jié)果與討論 |
| 2.2 茶葉中兒茶素類化合物的提取 |
| 2.2.1 儀器與試劑 |
| 2.2.2 實驗方法 |
| 2.2.3 結(jié)果與討論 |
| 2.3 高效液相色譜-熒光檢測法分析測定茶葉中八種兒茶素的含量 |
| 2.3.1 儀器與試劑 |
| 2.3.2 實驗方法 |
| 2.3.3 結(jié)果與討論 |
| 2.4 高效液相色譜-紫外檢測法分析測定茶葉中八種兒茶素的含量 |
| 2.4.1 儀器與試劑 |
| 2.4.2 實驗方法 |
| 2.4.3 結(jié)果與討論 |
| 2.5 本章小結(jié) |
| 3 高效液相色譜法分析測定中藥姜黃中三種姜黃素的含量 |
| 3.1 三種姜黃素類化合物的熒光性質(zhì)研究 |
| 3.1.1 儀器與試劑 |
| 3.1.2 實驗方法 |
| 3.1.3 結(jié)果與討論 |
| 3.2 中藥姜黃中姜黃素類化合物的提取 |
| 3.2.1 儀器與試劑 |
| 3.2.2 實驗方法 |
| 3.2.3 結(jié)果與討論 |
| 3.3 高效液相色譜-熒光檢測法分析測定中藥姜黃中三種姜黃素的含量 |
| 3.3.1 儀器與試劑 |
| 3.3.2 實驗方法 |
| 3.3.3 結(jié)果與討論 |
| 3.4 高效液相色譜-紫外檢測法分析測定中藥姜黃中三種姜黃素的含量 |
| 3.4.1 儀器與試劑 |
| 3.4.2 實驗方法 |
| 3.4.3 結(jié)果與討論 |
| 3.5 本章小結(jié) |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
（10）大鼠尿液中蝶呤類化合物及氨基酸分析新方法的研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 蝶呤類化合物的研究現(xiàn)狀 |
| 1.2.1 蝶呤類化合物概述 |
| 1.2.2 蝶呤類化合物分析方法研究進展 |
| 1.2.3 臨床應(yīng)用 |
| 1.3 氨基酸類化合物研究現(xiàn)狀 |
| 1.3.1 氨基酸類化合物概況 |
| 1.3.2 氨基酸類化合物分析方法 |
| 1.3.3 臨床應(yīng)用 |
| 1.4 本文研究的主要內(nèi)容 |
| 參考文獻 |
| 第二章 離子色譜熒光法同時測定大鼠尿液中的色氨酸、酪氨酸和蝶呤6羧酸 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 實驗部分 |
| 2.2.1 儀器與試劑 |
| 2.2.2 標準溶液的配制 |
| 2.2.3 色譜條件 |
| 2.2.4 尿樣前處理 |
| 2.3 結(jié)果與討論 |
| 2.3.1 淋洗液的選擇 |
| 2.3.2 熒光檢測波長的選擇 |
| 2.3.3 干擾實驗 |
| 2.3.4 凈化方法的選擇 |
| 2.3.5 標準曲線和檢出限 |
| 2.3.6 回收率和精密度實驗 |
| 2.3.7 樣品的測定 |
| 2.4 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 第三章 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定大鼠尿液中可能的五種癌癥標志物 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 實驗部分 |
| 3.2.1 儀器與試劑 |
| 3.2.2 標準溶液的配制 |
| 3.2.3 樣品前處理 |
| 3.2.4 色譜條件 |
| 3.2.5 質(zhì)譜條件 |
| 3.3 結(jié)果與討論 |
| 3.3.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化 |
| 3.3.2 色譜條件的選擇及優(yōu)化 |
| 3.3.3 基質(zhì)標準曲線與檢測限 |
| 3.3.4 回收率與精密度試驗 |
| 3.3.5 樣品的測定 |
| 3.4 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 第四章 大鼠尿液中酪氨酸、色氨酸和蝶呤6羧酸含量隨膀胱癌發(fā)展變化的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 實驗部分 |
| 4.2.1 儀器與試劑 |
| 4.2.2 大鼠膀胱癌模型的建立 |
| 4.2.3 MIR掃描檢查 |
| 4.2.4 色譜條件 |
| 4.2.5 尿樣前處理 |
| 4.3 結(jié)果與討論 |
| 4.3.1 大鼠模型膀胱癌階段的確定 |
| 4.3.2 尿樣分析 |
| 4.4 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
| 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果 |
四、高效液相色譜—熒光檢測法測定血清色氨酸（論文參考文獻）
- [1]氨基酸檢測方法的構(gòu)建及在炎癥性腸病中補充規(guī)律研究[D]. 馮萌萌. 吉林大學(xué), 2021(01)
- [2]血漿吲哚類物質(zhì)的高效液相色譜-熒光檢測方法學(xué)研究及臨床應(yīng)用[D]. 楊可. 重慶醫(yī)科大學(xué), 2021(01)
- [3]基于化學(xué)衍生的羧基類化合物的色譜分析研究[D]. 梁秋霞. 暨南大學(xué), 2020(03)
- [4]不同加工工藝奶產(chǎn)品脂肪酸及色氨酸代謝物差異研究[D]. 蘇美丞. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 2020(01)
- [5]基于神經(jīng)化學(xué)指標的孤獨癥譜系障礙兒童辨識評估方法研究[D]. 李晨. 東南大學(xué), 2020(01)
- [6]外界因素導(dǎo)致人體氧化應(yīng)激和腸道菌群代謝物變化的研究[D]. 衛(wèi)蘭蘭. 東南大學(xué), 2019(01)
- [7]分子印跡聚合物的制備及其在生物體液中酪氨酸和甘氨酸的代謝產(chǎn)物分析中的應(yīng)用研究[D]. 梁先玉. 南昌大學(xué), 2019(02)
- [8]乳腺癌患者尿液中酪氨酸及其代謝產(chǎn)物分析新方法研究[D]. 楊永麗. 南昌大學(xué), 2017(02)
- [9]高效液相色譜—熒光/紫外檢測法分析測定茶葉和中藥姜黃中的活性成分[D]. 賈雪峰. 河北師范大學(xué), 2016(08)
- [10]大鼠尿液中蝶呤類化合物及氨基酸分析新方法的研究[D]. 孫玄. 南昌大學(xué), 2015(03)