一、乙型肝炎病毒經(jīng)生殖細胞傳播的研究進展（論文文獻綜述）
彭松緒[1]（2019）在《乙肝病毒宮內(nèi)傳播遺傳易感性和環(huán)境影響因素及其交互作用研究》文中提出在乙肝病毒（HBV）宮內(nèi)傳播人群調(diào)查的基礎上,采用候選基因策略來探索乙肝病毒宮內(nèi)傳播的遺傳易感基因,并從遺傳、環(huán)境及其交互作用方面來探討HBV宮內(nèi)傳播的發(fā)生機制,為有效干預或阻斷乙肝的母嬰傳播提供科學依據(jù)。第一部分乙肝病毒宮內(nèi)傳播發(fā)生率與影響因素研究目的:了解武漢市HBsAg陽性孕產(chǎn)婦HBV宮內(nèi)傳播的流行現(xiàn)狀,探索HBV宮內(nèi)傳播發(fā)生的影響因素,明確其關鍵危險因素及危險程度。方法:以2012年5月至2017年8月期間進入乙肝母嬰傳播隊列的HBsAg陽性孕婦及其嬰幼兒為研究對象,探索HBV宮內(nèi)傳播的相關影響因素。采用多因素非條件Logistic回歸進行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果:（1）最終納入分析的孕婦為1506人,新生兒1532名,武漢市HBsAg陽性孕婦分娩的新生兒中乙肝病毒宮內(nèi)傳播發(fā)生率為8.35%（128/1532）。（2）多因素回歸分析結(jié)果顯示,調(diào)整其他因素后,母親孕期HBeAg陽性（OR=4.26,95%CI:2.60-6.98,P<0.001）、孕晚期HBV DNA陽性（OR=1.67,95%CI:1.02-2.74,P=0.041）、剖宮產(chǎn)（OR=0.29,95%CI:0.19-0.44,P<0.001）與乙肝病毒宮內(nèi)傳播的發(fā)生風險密切相關。結(jié)論:母親孕期HBeAg陽性和孕晚期HBV DNA陽性是新生兒HBV宮內(nèi)傳播的危險因素,而剖宮產(chǎn)則有可能是新生兒HBV宮內(nèi)傳播的保護因素。第二部分RLR-MAVS和c GAS-STING信號通路基因及其他基因遺傳變異與HBV宮內(nèi)傳播關聯(lián)性研究目的:探討RLR-MAVS和c GAS-STING信號通路基因及其他基因遺傳變異與HBV宮內(nèi)傳播的關系。方法:采用病例對照研究設計,自2013年1月-2017年8月在武漢市婦幼保健院收集HBs Ag陽性孕婦及其新生兒作為研究對象,共納入1356名HBs Ag陽性孕婦分娩的新生兒,包括乙肝病毒宮內(nèi)傳播新生兒107名,同期收集的未發(fā)生宮內(nèi)傳播的新生兒1249名。通過文獻查閱選擇RLR-MAVS和c GAS-STING信號通路相關基因及IL10、IL12A、IL12B、TLR3、TLR9、TNFSF14作為候選基因,利用Mass ARRAY基因檢測系統(tǒng)進行基因分型。采用多因素非條件Logistic回歸、累積效應分析、多因子降維法進行統(tǒng)計分析。結(jié)果:在RIG-I/MAVS信號通路中,與INTS10 rs28413168 GG基因型攜帶新生兒相比,此位點攜帶CC/CG基因型的新生兒HBV宮內(nèi)傳播的發(fā)生風險增加了100%（OR=2.00,95%CI:1.26-3.19;P=0.004）。在c GAS-STING通路,新生兒攜帶MB21D1 rs311678 GG/AG基因型HBV宮內(nèi)傳播風險顯著低于攜帶AA基因型新生兒（OR=0.48,95%CI:0.30-0.78;P=0.003）。與攜帶IL10 rs1800872 CC基因型的新生兒相比,此位點攜帶AA基因型的新生兒HBV宮內(nèi)傳播的發(fā)生風險顯著增加（OR=3.01,95%CI:1.02-9.84;P=0.047）。新生兒TLR3 rs3775291位點多態(tài)性與HBV宮內(nèi)傳播密切相關,該位點攜帶TT基因型的新生兒相較于CT/CC基因型的新生兒,其發(fā)生HBV宮內(nèi)傳播的風險顯著增加（OR=2.09,95%CI:1.07-4.12;P=0.032）。此外,未發(fā)現(xiàn)新生兒其它SNP與HBV宮內(nèi)傳播的發(fā)生風險間存在顯著的關聯(lián)。多因素非條件Logistic回歸模型中校正產(chǎn)婦分娩年齡、產(chǎn)次、孕期HBe Ag、孕晚期HBV DNA和分娩方式后,發(fā)現(xiàn)新生兒攜帶58個風險等位基因發(fā)生HBV宮內(nèi)傳播的風險是攜帶02風險等位基因的新生兒發(fā)生風險的4.34倍（95%CI:1.44-13.09;P=0.009）。結(jié)論:新生兒INTS10 rs28413168、MB21D1 rs311678、IL10 rs1800872、TLR3rs3775291位點基因多態(tài)性與HBV宮內(nèi)傳播遺傳易感性密切相關。新生兒攜帶危險等位基因越多,發(fā)生HBV宮內(nèi)傳播的風險越高。第三部分基因遺傳變異與環(huán)境因素的交互作用對HBV宮內(nèi)傳播的影響目的:探討INTS10 rs28413168、MB21D1 rs311678、IL10 rs1800872、TLR3rs3775291位點基因多態(tài)性是否與環(huán)境因素（孕期HBe Ag、HBV DNA和分娩方式）之間存在交互作用進而影響HBV宮內(nèi)傳播的發(fā)生。方法:研究對象同第二部分。采用多因素非條件Logistic回歸分析中乘積相互作用和Andersson Tomas等提供的相加交互效應模型來評估INTS10 rs28413168、MB21D1 rs311678、IL10 rs1800872、TLR3 rs3775291與孕期HBe Ag、HBV DNA和分娩方式之間的交互作用。結(jié)果:（1）INTS10 rs28413168多態(tài)性與HBe Ag之間存在相加交互作用（AP=0.54,95%CI:0.21-0.86;SI=2.57,95%CI:1.06-6.25）;IL10 rs1800872基因多態(tài)性與HBe Ag之間存在相加交互作用（AP=0.57,95%CI:0.10-1.04）。（2）MB21D1rs311678基因多態(tài)性與HBV DNA之間存在相加交互作用（AP=0.41,95%CI:0.07-0.75）。（3）MB21D1 rs311678多態(tài)性與分娩方式之間存在相加交互作用（RERI=4.14,95%CI:0.43-7.84;AP=0.56,95%CI:0.28-0.84;SI=2.84,95%CI:1.14-7.04）;IL10 rs1800872基因多態(tài)性與分娩方式之間存在相加交互作用（AP=0.58,95%CI:0.24-0.92）;TLR3 rs3775291位點多態(tài)性與分娩方式之間存在相乘交互作用（P=0.020）。結(jié)論:基因-環(huán)境交互作用研究提示環(huán)境因素如產(chǎn)婦孕期HBe Ag和HBV DNA狀態(tài)、分娩方式可能對新生兒HBV宮內(nèi)傳播的遺傳易感性具有疊加和促進作用。
王棟平,周文慧,呂文良[2]（2017）在《乙型肝炎病毒母嬰傳播阻斷的研究進展》文中研究說明母嬰傳播是乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）主要傳播途徑之一,能否阻斷母嬰傳播是控制慢性乙型肝炎流行的關鍵。本文就乙型肝炎病毒母嬰傳播的方式、阻斷策略、阻斷后的HBV-M模式及乙型肝炎病毒的生殖細胞傳播與隱匿性感染的母嬰傳播問題進行了綜述。
楊靜[3]（2011）在《乙型肝炎病毒父嬰垂直傳播途徑的研究》文中提出研究背景:乙型肝炎病毒感染,是危害人類健康的全球性問題,是全球性的公共衛(wèi)生問題。2004年統(tǒng)計,全世界約有20億人口,占世界人口的1/3,曾感染乙肝病毒,其中包含了3.5億的乙肝病毒攜帶者,每年約有100萬人死于乙肝病毒感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝癌。亞洲和非洲是高流行區(qū),其中,我國人群約1.2億人攜帶乙肝病毒,約占總?cè)丝诘?0%。約80%的乙肝患者是通過家族性傳播而感染HBV,另有20%左右是經(jīng)血液、體液、醫(yī)療途徑水平傳播所得。關于母嬰垂直傳播已經(jīng)得以證實,并被用于指導臨床,臨床通過使用免疫阻斷劑主動或被動阻斷母嬰垂直傳播乙肝病毒,從而降低母嬰垂直傳播的感染率。乙肝病毒父嬰垂直傳播假設的提出:70年代初,國外有學者研究發(fā)現(xiàn)乙肝患者精液中檢測出乙肝表面抗原（HbsAg）,初步證明精液有傳染性。1985年,Hadchouel等用分子雜交技術,對3例乙型肝炎患者的精子進行研究,發(fā)現(xiàn)其中兩例的精子中整合的HBV-DNA序列與細胞中的HBV-DNA限速酶譜是一致的,提示乙肝病毒可能可以通過生殖細胞垂直傳播給下一代。他們提出“乙肝病毒有可能通過生殖細胞垂直傳播”的假設。近二十年來,父嬰垂直傳播的假說提出后,大量學者對這一課題從臨床調(diào)查、分子機制、動物模擬實驗等方面進行了研究,尋找父嬰垂直傳播的途徑和證據(jù),但各研究結(jié)果并不完全相同,甚至可能完全相反。本文通過對父嬰垂直傳播臨床傳播幾率和分子機制研究,分析是否存在父嬰垂直傳播的可能以及父嬰垂直傳播與HBV基因型以及HBV分子變異是否有關系等。研究目的:1、以父親感染乙型肝炎病毒,而母親無乙型肝炎病毒血清學標志夫婦的新生兒臍血為研究對象,通過HBV DNA PCR擴增技術,研究臨床垂直傳播陽性率,探討HBV能否從父親傳播到新生兒。2、研究HBV DNA PCR陽性臍血標本的血清基因型,探討HBV基因型與HBV的父嬰垂直傳播是否有關。3、通過對HBV DNA PCR陽性臍血標本的S基因序列檢測,探討HBV基因變異是否與HBV的父嬰垂直傳播有關。研究方法:1、選取56對男性感染乙型肝炎病毒,而女性血清學檢測無乙型肝炎病毒標志物并且無其他病毒性肝炎病史的夫婦做為研究對象,采用熒光定量PCR擴增技術,檢測此類夫婦新生兒臍血中是否有HBV表達。2、對HBV DNA PCR陽性臍血標本,另設計引物,擴增獲得HBV DNA的S區(qū)序列,通過采用DNA鏈末端合成終止法檢測S區(qū)基因堿基序列,鑒定標本血清基因型。3、通過對HBV DNA PCR陽性臍血標本血清中的HBV DNA做S區(qū)序列檢測,檢測其是否發(fā)生變異。研究結(jié)果:1、父親HbsAg+而母親HbsAg-的新生兒臍血經(jīng)PCR擴增后,檢測出有2例標本含有HBV DNA,本研究中父嬰垂直傳播陽性率是4%（2/56）。2、將PCR擴增陽性的臍血標本做血清HBV DNA S區(qū)基因序列檢測,發(fā)現(xiàn)該2例陽性標本為A-H型血清基因型中的B型。3、對PCR擴增陽性的臍血標本做血清HBV DNA S區(qū)序列堿基檢測,發(fā)現(xiàn)核苷酸發(fā)生變異。研究結(jié)論:1、通過臨床調(diào)查,感染乙型肝炎病毒的男性能將HBV通過生殖過程垂直傳遞給新生兒,從而感染新生兒。2、感染乙型肝炎病毒的男性傳遞HBV給子代的陽性率與該男性攜帶HBV的HBV DNA載量有關,HBV DNA拷貝數(shù)越大,HBV越容易發(fā)生父嬰垂直傳播,也可能與HBeAg是否陽性有一定關系。3、兩例陽性標本基因序列分析,發(fā)現(xiàn)父親與新生兒HBV基因序列與HBV B型基因高度同源,同源性分別為97.19%、98.50%和98.69%、98.89%。4、兩例陽性標本基因序列分析,發(fā)現(xiàn)父親與新生兒HBV基因序列高度同源,達到98.56%和99.06%,但同時基因序列也發(fā)生了變異。
周旭平[4]（2011）在《乙型肝炎病毒DNA在人卵母細胞和胚胎中的整合及HBV感染婦女ART結(jié)局的研究》文中研究說明背景：乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）是一種引起乙型肝炎（hepatitiS B）的嗜肝性病毒。全球有20多億人有乙型肝炎病毒感染史,其中約有3.5億人為HBV的慢性攜帶者,HBV的感染與80%的原發(fā)性肝細胞癌具有相關性,每年約有100多萬人死于因HBV感染引起的嚴重肝臟疾病。我國是乙型肝炎高發(fā)區(qū),1-60歲人群中HBsAg陽性率為7.2%,其中處在婚育年齡人群乙肝病毒攜帶率近10%。乙型肝炎病毒廣泛存在于乙肝患者的體液中,如唾液、淚液、汗液、乳汁、精液、內(nèi)分泌液和血液。血清HBeAg、HBV-DNA和Pre-S1均是反應乙肝病毒復制或傳染性的重要指標,在HBV感染早期,具有較高的一致檢出率,然而HBVDNA是復制活動最直接和可靠的指標。傳播渠道多樣化：輸血、性交、醫(yī)源性及密切的生活接觸等水平傳播和父嬰、母嬰之間的垂直傳播（vertical transmission）.垂直傳播是HBV傳播的主要途徑之一,其可分為母嬰傳播和父嬰傳播。母嬰垂直傳播可分為3個水平：產(chǎn)前傳播、產(chǎn)時傳播及產(chǎn)后傳播。產(chǎn)前傳播可分為經(jīng)胎盤傳播（transplacental transmission）和經(jīng)生殖細胞（generative cells）傳播。近年來,經(jīng)過適當?shù)闹鲃?、被動?lián)合免疫干預,能夠有效阻斷多數(shù)HBV的感染,但仍然有約10%的嬰兒阻斷失敗。研究發(fā)現(xiàn)在人類生殖腺及生殖細胞如睪丸、精子、精漿以及卵巢中的顆粒細胞、卵細胞中有HBV的存在和表達,從而使得乙型肝炎病毒經(jīng)生殖細胞進行垂直傳播的學說得以發(fā)展。乙型肝炎病毒亦可影響人類生殖能力。HBV感染可以通過全身或局部的免疫作用、病毒基因的整合干擾基因組正常機能以及肝炎病毒蛋白表達影響精子的產(chǎn)生、導致形態(tài)和活力的改變,從而降低人類生殖能力。隨著人類輔助生殖技術日益進步、人類生活模式變化以及環(huán)境的影響,越來越多的人接受輔助生殖技術助孕治療,其中不乏有乙型肝炎攜帶不孕夫婦。在這一領域中,病毒感染影響輔助生殖技術治療結(jié)局的問題引起人們的關注。然而,HBV感染是否降低輔助生殖治療的結(jié)局?目前尚未有一致的觀點。本課題擬研究乙型肝炎病毒攜帶患者血清和卵泡液中病毒載量的關系；體內(nèi)病毒復制狀態(tài)與發(fā)生經(jīng)卵母細胞垂直傳播的關系；女性乙肝病毒攜帶者血清和卵泡液中病毒含量與輔助生殖治療結(jié)局的關系,為臨床對HBV攜帶患者開展ART治療提供理論依據(jù)。材料與方法：收集2009年2月～2009年12月在浙江大學附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院生殖內(nèi)分泌科接受常規(guī)體外受精/卵胞漿單精子注射-胚胎移植治療的176例乙肝病毒攜帶婦女的血清和卵泡液；176例中的106例乙肝病毒攜帶婦女廢棄的卵母細胞206個及胚胎441個。采用熒光定量PCR方法檢測血清與卵母細胞的HBV DNA濃度,用HBV DNA全長作為探針采用原位雜交方法（Fluorescence in situ hybridization, FISH）檢測HBV DNA在胚胎和卵母細胞中的整合。通過統(tǒng)計軟件分析血清和卵泡液中病毒載量與發(fā)生HBV DNA在卵母細胞和胚胎中整合的關系。同時選擇2006年01月-2009年12月在本中心接受體外受精助孕治療的513對女性乙肝病毒攜帶不孕夫婦的557個周期作為暴露組。以女方年齡（年齡±1）、取卵時間（天數(shù)±1）以及ART受精方式（IVF和ICSI）作為匹配條件,利用SPSS統(tǒng)計軟件隨機抽取1：1本院同年的,夫婦雙方均為乙肝陰性周期作為非暴露組。兩組建立回顧性隊列,分析女方乙肝攜帶對于著床率（孕囊數(shù)/ET胚胎數(shù)）、臨床妊娠率（超聲證實為宮內(nèi)孕婦女數(shù)／完成移植周期數(shù)）、流產(chǎn)率（發(fā)生流產(chǎn)婦女數(shù)／宮內(nèi)孕婦女總數(shù)）,分娩數(shù)（完成分娩婦女數(shù)／完成胚胎移植周期數(shù)）以及周期得孩率（活產(chǎn)胎兒數(shù)/ART啟動周期數(shù)）,同時分析女性體內(nèi)病毒復制狀態(tài)如HBeAg血清狀態(tài)、血清病毒拷貝數(shù)及卵泡液中病毒含量對于ART結(jié)局的影響。結(jié)果：血清中HBV DNA陽性檢出率為54.4%,卵泡液可檢測到乙肝病毒DNA,陽性率為45.7%；多數(shù)血清中HBV DNA含量高于卵泡液（P<0.05）,然而少部分患者其卵泡液中病毒含量較血清中高。線性相關分析發(fā)現(xiàn)血清和卵泡液間乙肝病毒DNA含量存在中等強度正相關,（R=0.427,P=0.001）。卵母細胞內(nèi)HBV DNA整合信號的陽性率為8.25%,早期胚胎內(nèi)的陽性率為12.92%；HBeAg陽性組卵母細胞的HBV DNA陽性率顯著高于HBeAg陰性組（14.8%VS 4.5%,P<0.05）,前者胚胎的陽性率較后者有增高趨勢（17.1%VS 10.6%,P=0.051）；血清HBV DNA>106組胚胎及卵母細胞中HBV DNA整合的陽性率顯著高于HBV DNA<106組（P<0.05）；卵泡液中HBV DNA≥105組胚胎及卵母細胞中HBV DNA整合的陽性率顯著高于HBV DNA<105組（P<0.05）；著床率、臨床妊娠率、以及周期得孩率陽性組較陰性對照組稍低而流產(chǎn)率稍增加,但未達到統(tǒng)計學差異（P>0.05）,活胎分娩周期在陽性組中顯著低于對照組（P<0.05）; HBV DNA>105病人流產(chǎn)率比HBV DNA<105組顯著性增加,周期得孩率顯著性降低（P<0.05）；卵泡液HBV DNA陽性組的著床率、臨床妊娠率、活胎分娩周期以及周期得孩率較陰性組顯著性降低（P<0.05）。結(jié)論：1、乙型肝炎病毒攜帶患者卵泡液中存在乙肝病毒的復制；2、進一步驗證乙肝病毒DNA可整合到人卵母細胞和胚胎中；3、卵泡液中的HBV DNA含量多數(shù)較血清中低,兩者存在中等程度的正相關；4、血清中HBeAg陽性病毒在卵母細胞中的整合率顯著增高；5、血清HBV DNA>1.0×106拷貝/毫升,卵跑液中HBV DNA濃度≥1.0×105拷貝/毫升時病毒在卵母細胞及胚胎中的整合率顯著增高；6、乙肝攜帶狀態(tài)對婦女卵巢儲備能力以及卵巢對促排卵治療的反應性無影響；7、女方乙肝攜帶夫婦經(jīng)體外受精胚胎移植治療后最終獲得活胎分娩的周期較陰性對照組有顯著性降低；8、女方血清HBV DNA>1.O×105拷貝/毫升夫婦經(jīng)體外受精胚胎移植治療后流產(chǎn)率顯著增加,周期得孩率明顯降低（P<0.05）；9、卵泡液中HBV DNA陽性患者接受體外受精胚胎移植治療后胚胎著床率、臨床妊娠率顯著降低,活胎分娩周期、周期得孩率均顯著降低。
王亮[5]（2010）在《乙醇在HBV DNA轉(zhuǎn)染中對大鼠血睪屏障的影響及其機制探討》文中提出目的乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）垂直傳播是指HBV以生殖細胞作為載體,把HBV DNA帶入胚胎,使子代發(fā)病或成為HBV攜帶者的一種新的、尚待證明的傳播方式。HBV父嬰垂直傳播研究的關鍵點在于闡明HBV通過血睪屏障轉(zhuǎn)染精子的途徑。本課題通過活體轉(zhuǎn)染不同組的大鼠睪丸,旨在探討機體大量攝入乙醇后,血睪屏障（blood-testis barrier,BTB）的結(jié)構(gòu)完整性和生理機能的改變,以及能否有效阻止含HBV DNA的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染生精小管生精上皮細胞,并進一步探討影響B(tài)TB完整性的因素和作用機制。方法取20只Wistar成年雄性大鼠隨機分為兩組,每組10只。A組為實驗乙醇組,每只按1ml·100g-1·d-1灌胃50%乙醇,連續(xù)40天；B組為空白組,每只按1ml·100g-1·d-1灌胃生理鹽水,連續(xù)40天。向睪丸轉(zhuǎn)染含HBV DNA的質(zhì)粒,應用聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR）、實時熒光定量PCR（Real-time quantitative PCR, Real-time PCR）、原位雜交（in situ hybridization, ISH）和透射電子顯微鏡（transmission electron microscopy, TEM）檢測睪丸組織HBV DNA的轉(zhuǎn)染情況。結(jié)果①PCR:A組樣本可見特異的HBV DNA陽性條帶；②通過Real-time PCR的檢測發(fā)現(xiàn)A組HBV DNA平均含量高于B組,差異有統(tǒng)計學意義；③原位雜交：A組發(fā)現(xiàn)陽性雜交信號彌散,可被廣泛發(fā)現(xiàn)于生精上皮基底室和近腔室的生精細胞上；④TEM：A組大鼠睪丸的生精小管基膜厚薄不均,基膜組織疏松增厚,成波浪式皺褶,可見基膜斷裂,精原細胞與支持細胞及生精小管的基膜之間出現(xiàn)較多空泡,生精小管、生精上皮、生精細胞及支持細胞與相鄰細胞之間的間隙擴大。結(jié)論①乙醇的攝入會破壞大鼠睪丸血睪屏障的完整性,引起生精小管的基膜、支持細胞等超微結(jié)構(gòu)異常；②血睪屏障的損傷及生精小管的結(jié)構(gòu)異?？梢詫е麓笫蟛G丸的整個生精上皮易受到HBV DNA的轉(zhuǎn)染,造成轉(zhuǎn)染率的升高。血睪屏障是支持細胞的主要功能之一,它保護著處于分化狀態(tài)的生精細胞,防止自身免疫反應,并具有調(diào)控生精細胞分裂和分化,維持曲精小管內(nèi)有利于精子發(fā)生和成熟排放的特殊微環(huán)境等重要作用。血睪屏障的完整性是其起保護功能的重要基礎,乙醇可以破壞其完整性,使全部生精細胞易受HBV的感染。
李茜[6]（2010）在《pcDNA3.1-preS1-GFP重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在小鼠精子內(nèi)的表達》文中研究指明目的構(gòu)建含有綠色熒光蛋白（green fluorescent protein, GFP）基因與乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV） preS1基因的重組真核表達載體pcDNA3.1-preS1-GFP,觀察并檢測該重組質(zhì)粒在小鼠精子內(nèi)的表達。方法采用聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR）方法,以pBR322-HBV質(zhì)粒為模板擴增HBV preSl基因片段,將PCR擴增得到的HBV preSl基因片段與含有GFP的真核表達載體pcDNA3.1-GFP分別進行EcoR I和Xba I雙酶切,以T4連接酶過夜連接,經(jīng)酶切及測序鑒定后,用脂質(zhì)體LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染小鼠精子,在熒光顯微鏡下觀察GFP有無表達,并應用PCR檢測HBV preS1基因的存在。結(jié)果①利用DNA重組技術將preS1基因插入到pcDNA3.1-GFP質(zhì)粒中,經(jīng)雙酶切及測序鑒定,成功構(gòu)建了pcDNA3.1-preS1-GFP真核表達載體；②將重組質(zhì)粒按一定比例轉(zhuǎn)染小鼠精子后,在熒光顯微鏡下觀察到轉(zhuǎn)染精子頭部有較明亮的綠色熒光；③提取轉(zhuǎn)染精子DNA,經(jīng)PCR擴增得到位于HBV preSl基因區(qū)域內(nèi)長約589bp的片段,與預期一致。結(jié)論①以上研究結(jié)果證實,重組質(zhì)粒pcDNA3.1-preS1-GFP已得到成功構(gòu)建,這為建立新型HBV垂直傳遞小鼠模型提供了可能；②重組真核表達載體pcDNA3.1-preS1-GFP在小鼠精子內(nèi)的表達,表明重組質(zhì)粒pcDNA3.1-preS1-GFP可用于制備轉(zhuǎn)基因小鼠,同時GFP還可作為HBVpreS1基因存在與否的報告基因。因此本研究為建立新的HBV垂直傳遞小鼠模型,進而更好地研究HBV的垂直傳播機制奠定了實驗基礎。
史利華[7]（2009）在《PCR-ELISA法檢測HBV感染者精液HBV DNA的意義》文中研究表明研究目的: 1,檢測成年男性乙型肝炎病毒感染者精液中乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸（HBV DNA）含量,分析精液與血清中HBV DNA含量有無相關性。從而為探索乙型肝炎病毒經(jīng)精液或精子細胞傳播可能性提供依據(jù)。2,比較PCR-ELISA法和FQ-PCR法檢測HBV感染者精液HBV DNA檢出情況及臨床意義。材料與方法:選取乙型肝炎病毒（HBV）感染者,血清表面抗原（HBsAg）陽性病例52例,留取其精液標本。用聚合酶鏈反應酶聯(lián)免疫吸附測定（PCR-ELISA）法檢測乙型肝炎病毒感染者精液及血清中HBV DNA的檢出率（陽性率）,同時也用熒光定量聚合酶鏈反應（FQ-PCR）法檢測感染者精液中HBV DNA。將用PCR-ELISA法測得的精液及血清HBV DNA拷貝數(shù)進行Spearman秩相關對數(shù)直線相關分析及進行拷貝數(shù)Wilcoxon秩和檢驗探討精液與血清HBV DNA定量檢測的關系。同時將用FQ-PCR法測得的精液HBV DNA陽性率和用PCR-ELISA法測得的精液HBV DNA陽性率進行卡方檢驗（X^2檢驗）檢測兩組的陽性率差異是否有顯著性;用秩和檢驗兩組的HBV NDA拷貝數(shù)來檢測兩組的拷貝數(shù)是否有顯著性差異。結(jié)果:1,PCR-ELISA法檢測:乙型肝炎病毒感染者的精液HBV DNA陽性檢出率為15.38%（8/52）。平均拷貝數(shù)為4.06×104/㏕。血清HBV DNA陽性檢出率為73.08%（38/52）。平均拷貝數(shù)2.05×107/㏕。用Spearman秩相關對數(shù)直線相關分析精液中HBV DNA與血清中的HBV DNA拷貝數(shù)等級間存在正相關關系。將精液中HBV DNA與血清中的HBV DNA拷貝數(shù)用Wilcoxon秩和檢驗分析,可認為乙型肝炎病毒感染者精液及血清HBV DNA檢出結(jié)果有顯著性差異,精液HBV DNA拷貝數(shù)低于其血清值。2,FQ-PCR法檢測:精液HBV DNA陽性檢出率為19.23%（10/52）,平均拷貝數(shù)為4.27×104/㏕。3,用卡方檢驗（X^2）PCR-ELISA法和FQ-PCR法檢測所得的兩組精液HBV DNA陽性檢出率,0.050<P<0.100,按?=0.05尚不能認為兩種方法檢測精液HBV DNA陽性率的差異有顯著性。用Wilcoxon秩和檢驗兩組精液HBV DNA拷貝數(shù),0.050<P<0.100。亦不能認為PCR-ELISA法和FQ-PCR法檢測所得的兩組精液HBV DNA的拷貝數(shù)有顯著性差異。結(jié)論:1,乙型肝炎病毒感染者一部分人的精液具有傳染乙肝病毒的可能。2,精液中HBV DNA的陽性檢出率和血清病毒載量呈正相關。3,PCR-ELISA法和FQ-PCR法檢測HBV感染者HBV DNA陽性率及拷貝數(shù)無顯著的差異。二者對定量檢測精液HBV DNA具有較高的特異性及靈敏度,可幫助了解精液中乙型肝炎病毒的感染狀態(tài)。
歐陽奇琦[8]（2009）在《大鼠血睪屏障在HBV DNA轉(zhuǎn)染中的保護作用及其影響因素》文中進行了進一步梳理目的與背景乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）垂直傳播是指HBV以生殖細胞作為載體,把HBV DNA帶入胚胎,使子代成為HBV攜帶者或發(fā)病的一種新的、尚待證明的傳播方式。HBV父嬰傳播研究的關鍵點在于闡明HBV通過血睪屏障轉(zhuǎn)染精子的途徑。本課題通過活體轉(zhuǎn)染不同組的大鼠睪丸,旨在探討血睪屏障能否有效阻止含HBV DNA的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染曲細精管生精上皮細胞及影響血睪屏障完整性的因素。方法取20只Wistar成熟雄性大鼠隨機分為實驗組（A組）和對照組（B組）,A組于后肢肌注注射氫化可的松,B組注射生理鹽水,持續(xù)31天,向睪丸轉(zhuǎn)染含HBV DNA的質(zhì)粒,應用聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction,PCR）、實時熒光定量PCR（real-timequantitative PCR,real-time PCR）、原位雜交（in situ hybridization,ISH）和透射電子顯微鏡（transmission electron microscopy,TEM）檢測睪丸組織HBV DNA的轉(zhuǎn)染情況。結(jié)果①A組樣本的睪丸組織經(jīng)PCR檢測發(fā)現(xiàn)組織中存在有HBV DNA;②通過real-time PCR的檢測發(fā)現(xiàn)A組HBV DNA平均含量高于B組,差異有統(tǒng)計學意義;③在A組樣本的睪丸組織中,HBV DNA分布彌散,可廣泛發(fā)現(xiàn)于生精上皮基底室和近腔室的生精細胞上;④在電子顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)A組生精小管基膜基膜厚薄不均,基膜組織疏松增厚,成波浪式皺褶,可見基膜斷裂,精原細胞與支持細胞及生精小管的基膜之間出現(xiàn)較多空泡。結(jié)論①正常大鼠生精小管基膜完整、平滑、致密、厚薄均勻,氫化可的松可引起大鼠睪丸生精小管的基膜、緊密連接、支持細胞等超微結(jié)構(gòu)異常;②血睪屏障的破壞會會增加睪丸組織感染HBV DNA的風險;③生精小管的結(jié)構(gòu)異常及血睪屏障的損傷會導致大鼠睪丸的整個生精上皮易受到HBV DNA的轉(zhuǎn)染,造成轉(zhuǎn)染率的升高。血睪屏障的完整性是血睪屏障起保護功能的重要基礎,破壞其完整性會使全部生精細胞易受HBV的感染。
黃天華[9]（2008）在《乙肝病毒基因經(jīng)生殖細胞垂直傳遞研究進展》文中研究表明乙型肝炎是危害人類健康的全球性疾病。大量研究表明,乙肝病毒（HBV）基因能夠整合到人精子基因組中;攜帶 HBV 的人精子能正常地完成受精過程;受精后,由人精子帶入胚胎細胞中的 HBV 基因能夠復制和表達。它可能造成的嚴重后果是:①成為 HBV 經(jīng)生殖細胞垂直傳播新途徑;②HBV 基因整合到宿主配子基因組可增加配子染色體的不穩(wěn)定性,進而誘發(fā)配子染色體畸變,導致流產(chǎn)、死產(chǎn)和出生缺陷率增加;③隨著胚胎發(fā)育和個體生長,潛藏在宿主基因組中的 HBV 基因有可能增加肝細胞腫瘤發(fā)生的風險。
張紅[10]（2008）在《HBV攜帶者接受IVF處理的垂直傳播風險及超排周期血清E2比值及P/E2比值與妊娠率的關系》文中研究說明乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一種嚴重危害人類健康的世界性傳染病,是全世界關注的衛(wèi)生問題。我國是乙型肝炎高發(fā)區(qū),目前,隨著婦女生育年齡推遲及不孕癥發(fā)病率的升高,攜帶乙肝病毒的不孕癥患者中接受體外受精-胚胎移植（in vitro fertilization- embryotransfer,IVF-ET）治療的夫婦也越來越多,了解乙肝病毒攜帶者接受體外受精處理的垂直傳播風險有重要意義。隨著輔助生育技術的發(fā)展,體外授精胚胎移植成為治療不孕癥的重要方法。目前,雖然臨床妊娠率已得到較大幅度的提高,仍有大多數(shù)的治療周期未能成功。妊娠率受多方面因素影響,如患者的年齡、胚胎質(zhì)量、子宮內(nèi)膜容受性及超促排卵導致的激素水平改變等。其中,激素水平的改變與妊娠率的關系一直有爭議。本研究分為兩個部分:1.乙肝病毒攜帶者接受體外受精處理的垂直傳播風險。2.超促排卵周期不同時期血清E2比值及P/E2比值與妊娠率的關系。第一部分乙肝病毒攜帶者接受體外受精處理的垂直傳播風險的探討目的:探討合并乙肝病毒感染的不孕癥患者接受體外授精處理的安全性。材料和方法:選取2007年5月-2008年3月于我院接受體外授精-胚胎移植（IVF-ET）治療的合并乙肝病毒感染的不孕癥患者女149名、男144名,應用酶聯(lián)免疫方法（ELISA）,女性患者于取卵日分別檢測血液、卵泡液、授精培養(yǎng)液的HBV血清學五項標志物（乙肝表面抗原:HBsAg、乙肝表面抗體:anti-HBs、乙肝e抗原:HBe Ag、乙肝e抗體:anti-HBe、乙肝核心抗體:antiHBc-IgG）;男性患者排精日分別檢測血液、精液、洗滌后精液的HBV五項標志物。結(jié)果:1.18例女性血液HBV大三陽者,卵泡液、授精培養(yǎng)液中檢測均為HBV大三陽（100%和100%）;131例女性血液HBV小三陽者,卵泡液檢測為小三陽者84例（64.1%）,其中授精培養(yǎng)液檢測仍為小三陽者8例（6.1%）,授精培養(yǎng)液檢測為陰性者76例（58.0%）;女性血液HBV小三陽者卵泡液檢測為陰性者47例（35.9%）,授精培養(yǎng)液檢測全為陰性;2.23例男性血液HBV大三陽者,精液HBV檢測6例（26.1%）為大三陽,17例（73.9%）為陰性,洗滌后精液HBV檢測均為陰性;121例男性血液HBV小三陽者,精液HBV檢測7例（5.8%）為小三陽,114例（94.2%）為陰性,洗滌后精液HBV檢測均為陰性。結(jié)論:體外授精處理不能改變女性乙肝大三陽患者的垂直傳播風險,女性大三陽患者傳播風險比小三陽者大,體外授精過程有可能降低女性乙肝小三陽患者和男性乙肝患者的垂直傳播風險。第二部分超促排卵周期不同時期血清E2比值及P/E2比值與妊娠率的關系。目的:探討藥物促排卵周期不同時期血清E2比值及P/E2比值與妊娠率的關系。對象和方法:695名接受常規(guī)體外受精胚胎移植術的不孕患者,于HCG日、移植前1天、移植第7日檢測血清E2水平;移植第7日同時檢測血清P水平。分別比較HCG日E2與移植前1天E2的比值、HCG日E2與移植第7天E2的比值、移植第7天P的絕對值及P/E2的比值與妊娠率的關系。結(jié)果:HCG日E2與移植前1天E2的比值與妊娠率無相關性;HCG日E2與移植第7天E2的比值與妊娠率呈負相關性,比值越高妊娠率越低,有顯著性差異;移植第7天P/E2的比值與妊娠率呈負相關性,比值越高妊娠率越低,有顯著性差異。結(jié)論:在IVF周期中,HCG日E2與移植第7天E2的比值、移植第7天孕雌激素比值可以作為預測IVF妊娠結(jié)局的指標之一。
二、乙型肝炎病毒經(jīng)生殖細胞傳播的研究進展（論文開題報告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準備的觀點或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細分析其設計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關信息。
實驗法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認事物間的因果關系。
文獻研究法：通過調(diào)查文獻來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學理論和實踐的需要提出設計。
定性分析法：對研究對象進行“質(zhì)”的方面的研究，這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認識進一步精確化。
跨學科研究法：運用多學科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進行研究。
功能分析法：這是社會科學用來分析社會現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、乙型肝炎病毒經(jīng)生殖細胞傳播的研究進展（論文提綱范文）
（1）乙肝病毒宮內(nèi)傳播遺傳易感性和環(huán)境影響因素及其交互作用研究（論文提綱范文）
| 全文縮寫詞 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 乙肝病毒宮內(nèi)傳播發(fā)生率與影響因素研究 |
| 1 研究背景 |
| 2 材料和方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 5 小結(jié) |
| 第二部分 RLR-MAVS和 cGAS-STING信號通路基因及其他基因遺傳變異與HBV宮內(nèi)傳播關聯(lián)性研究 |
| 1 研究背景 |
| 2 材料和方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 5 結(jié)論 |
| 第三部分 基因遺傳變異與環(huán)境因素的交互作用對HBV宮內(nèi)傳播的影響 |
| 1 研究背景 |
| 2 材料和方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 5 結(jié)論 |
| 創(chuàng)新點與局限性 |
| 參考文獻 |
| 綜述 |
| 參考文獻 |
| 附錄 Ⅰ |
| 附錄 Ⅱ 博士期間研究工作總結(jié) |
| 致謝 |
（2）乙型肝炎病毒母嬰傳播阻斷的研究進展（論文提綱范文）
| 1 乙型肝炎病毒母嬰傳播的方式 |
| 1.1 宮內(nèi)感染 |
| 1.2 產(chǎn)時感染 |
| 1.3 產(chǎn)后感染 |
| 2 乙型肝炎病毒母嬰傳播的阻斷策略 |
| 2.1 分娩前阻斷HBV的宮內(nèi)感染 |
| 2.2 分娩時阻斷HBV母嬰傳播 |
| 2.3 分娩后主被動聯(lián)合免疫 |
| 3 母嬰傳播阻斷后HBV-M模式 |
| 4 關于HBV母嬰傳播的其他問題 |
| 4.1 HBV生殖細胞傳播 |
| 4.2 HBV隱匿性感染的母嬰傳播 |
| 5 小結(jié)與展望 |
（3）乙型肝炎病毒父嬰垂直傳播途徑的研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 乙肝病毒父嬰垂直傳播的臨床調(diào)查 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 第二章 乙型肝炎病毒父嬰垂直傳播的分子機制 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 參考文獻 |
| 綜述 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
（4）乙型肝炎病毒DNA在人卵母細胞和胚胎中的整合及HBV感染婦女ART結(jié)局的研究（論文提綱范文）
| 致謝 |
| 中文摘要 |
| Abstracts |
| 主要縮略語中英文對照表 |
| 目次 |
| 引言 |
| 第一部分:血清和卵泡液中HBV載量及人卵母細胞和胚胎中HBV DNA的檢測 |
| 資料和方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 第二部分:乙肝病毒感染婦女ART結(jié)局的研究 |
| 資料和方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 綜述 |
| 參考文獻 |
| 作者簡歷及在學期間發(fā)表的文章 |
（5）乙醇在HBV DNA轉(zhuǎn)染中對大鼠血睪屏障的影響及其機制探討（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 實驗材料 |
| 1.1 實驗動物 |
| 1.2 外源基因 |
| 1.3 主要試劑 |
| 1.4 材料與儀器 |
| 第二章 實驗方法 |
| 2.1 質(zhì)粒PBR322-HBV轉(zhuǎn)染液的配制 |
| 2.2 PBR322-HBV DNA質(zhì)粒導入睪丸組織 |
| 2.3 提取睪丸組織及睪丸DNA樣本 |
| 2.4 PCR及實時熒光定量PCR檢測睪丸中的HBV DNA |
| 2.5 原位雜交(ISH)檢測睪丸中的HBV DNA |
| 2.6 透射電子顯微鏡檢測(TEM) |
| 2.7 統(tǒng)計學處理 |
| 第三章 實驗結(jié)果 |
| 3.1 PCR試驗結(jié)果 |
| 3.2 實時熒光定量PCR試驗結(jié)果 |
| 3.3 睪丸組織原位雜交結(jié)果 |
| 3.4 透射電鏡觀察不同組睪丸超微結(jié)構(gòu)的變化 |
| 第四章 討論 |
| 4.1 HBV的分子生物學特性及作用 |
| 4.2 HBV垂直傳播的研究 |
| 4.3 血睪屏障的作用及意義 |
| 4.4 乙醇對血睪屏障的影響機制探討 |
| 4.5 BTB的破壞與HBV DNA轉(zhuǎn)染睪丸的關系 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 綜述及參考文獻 |
| 攻讀學位期間的研究成果 |
| 致謝 |
（6）pcDNA3.1-preS1-GFP重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在小鼠精子內(nèi)的表達（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第1章 材料與方法 |
| 1.1 研究對象 |
| 1.2 試劑與材料 |
| 1.3 器材及其來源 |
| 1.4 方法 |
| 第2章 結(jié)果 |
| 2.1 pcDNA3.1-preS1-GFP重組載體鑒定 |
| 2.2 轉(zhuǎn)染前后精子活力評估結(jié)果 |
| 2.3 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染精子后綠色熒光的鑒定 |
| 2.4 轉(zhuǎn)染后精子DNA內(nèi)preS1的檢測與表達 |
| 第3章 討論 |
| 3.1 HBV的垂直傳遞 |
| 3.2 pcDNA3.1-preS1-GFP重組載體的構(gòu)建 |
| 3.3 重組載體的轉(zhuǎn)染與表達 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 綜述 |
| 參考文獻 |
| 攻讀學位期間的研究成果 |
| 致謝 |
（7）PCR-ELISA法檢測HBV感染者精液HBV DNA的意義（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 主要縮略語中英文對照表 |
| 前言 |
| 正文 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 綜述 |
| 附錄 |
| 致謝 |
（8）大鼠血睪屏障在HBV DNA轉(zhuǎn)染中的保護作用及其影響因素（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 實驗材料 |
| 1.1 實驗動物 |
| 1.2 外源基因 |
| 1.3 主要試劑 |
| 1.4 材料與儀器 |
| 第二章 實驗方法 |
| 2.1 質(zhì)粒PBR322-HBV轉(zhuǎn)染液的配制 |
| 2.2 PBR322-HBV DNA質(zhì)粒導入睪丸組織 |
| 2.3 提取睪丸組織及睪丸DNA樣本 |
| 2.4 PCR及實時熒光定量PCR檢測睪丸中的HBV DNA |
| 2.5 原位雜交(ISH)檢測睪丸中的HBV DNA |
| 2.6 透射電子顯微鏡檢測(TEM) |
| 2.7 統(tǒng)計學處理 |
| 第三章 實驗結(jié)果 |
| 3.1 PCR試驗結(jié)果 |
| 3.2 實時熒光定量PCR試驗結(jié)果 |
| 3.3 睪丸組織原位雜交結(jié)果 |
| 3.4 透射電鏡觀察不同組睪丸超微結(jié)構(gòu)的變化 |
| 第四章 討論 |
| 4.1 HBV的分子生物學特性及作用 |
| 4.2 HBV父嬰垂直傳播的研究 |
| 4.3 血睪屏障的作用及意義 |
| 4.4 血睪屏障的破壞及HBV DNA轉(zhuǎn)染方法的研究 |
| 4.5 血睪屏障的破壞與HBV DNA轉(zhuǎn)染睪丸的關系 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 綜述及參考文獻 |
| 攻讀學位期間的研究成果 |
| 致謝 |
（10）HBV攜帶者接受IVF處理的垂直傳播風險及超排周期血清E2比值及P/E2比值與妊娠率的關系（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 中英文縮略詞 |
| 第一部分 乙肝病毒攜帶者接受體外受精處理的垂直傳播風險的探討 |
| 1.前言 |
| 2.資料與方法 |
| 3.結(jié)果 |
| 4.討論 |
| 5.結(jié)論 |
| 第二部分 超促排卵周期不同時期血清E2比值及P/E2比值與妊娠率的關系 |
| 1.前言 |
| 2.對象和方法 |
| 3.結(jié)果 |
| 4.討論 |
| 5.結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 綜述 |
| 致謝 |
| 攻讀學位期間的主要的研究成果 |
四、乙型肝炎病毒經(jīng)生殖細胞傳播的研究進展（論文參考文獻）
- [1]乙肝病毒宮內(nèi)傳播遺傳易感性和環(huán)境影響因素及其交互作用研究[D]. 彭松緒. 華中科技大學, 2019(04)
- [2]乙型肝炎病毒母嬰傳播阻斷的研究進展[J]. 王棟平,周文慧,呂文良. 中國病毒病雜志, 2017(01)
- [3]乙型肝炎病毒父嬰垂直傳播途徑的研究[D]. 楊靜. 廣州醫(yī)學院, 2011(05)
- [4]乙型肝炎病毒DNA在人卵母細胞和胚胎中的整合及HBV感染婦女ART結(jié)局的研究[D]. 周旭平. 浙江大學, 2011(07)
- [5]乙醇在HBV DNA轉(zhuǎn)染中對大鼠血睪屏障的影響及其機制探討[D]. 王亮. 青島大學, 2010(03)
- [6]pcDNA3.1-preS1-GFP重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在小鼠精子內(nèi)的表達[D]. 李茜. 青島大學, 2010(03)
- [7]PCR-ELISA法檢測HBV感染者精液HBV DNA的意義[D]. 史利華. 廣州醫(yī)學院, 2009(07)
- [8]大鼠血睪屏障在HBV DNA轉(zhuǎn)染中的保護作用及其影響因素[D]. 歐陽奇琦. 青島大學, 2009(10)
- [9]乙肝病毒基因經(jīng)生殖細胞垂直傳遞研究進展[J]. 黃天華. 國際遺傳學雜志, 2008(04)
- [10]HBV攜帶者接受IVF處理的垂直傳播風險及超排周期血清E2比值及P/E2比值與妊娠率的關系[D]. 張紅. 中南大學, 2008(04)
標簽：乙肝表面抗原陽性論文; pcr論文; 乙肝病毒論文; 乙肝陰性論文; 兩對半論文;