一、低劑量干擾素口腔粘膜施藥對乙型肝炎患者血漿細(xì)胞因子及細(xì)胞免疫功能的影響（論文文獻(xiàn)綜述）
張強[1]（2021）在《基于肝竇內(nèi)皮細(xì)胞微尺度生物力學(xué)性質(zhì)研究芪術(shù)顆粒抗肝纖維化機制》文中認(rèn)為肝纖維化（Hverfibrosis,LF）是肝膽系統(tǒng)疾病中的常見病,并且是大多數(shù)慢性肝病發(fā)展的必然階段。目前醫(yī)學(xué)界普遍認(rèn)為早期肝纖維化能夠逆轉(zhuǎn),但如何進(jìn)行逆轉(zhuǎn),目前尚未形成普遍的共識。肝纖維化早期產(chǎn)生的諸多病理變化中,人們對肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（sinusoidal endothelial cells,SECs）的病理變化給予的關(guān)注逐漸增多,其特征性的細(xì)胞學(xué)行為改變包括“窗口”尺寸與數(shù)量的變化以及連續(xù)性基底膜的形成,一旦SECs發(fā)生去窗口化后,則肝纖維化的進(jìn)程難以逆轉(zhuǎn),目前這已是不爭的事實。目前針對肝纖維化的治療,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)尚且只能給予病因治療,針對肝纖維化本身而言,目前還沒有療效肯定的藥物或治療手段問世。中醫(yī)藥學(xué)在治療肝纖維化方面的經(jīng)驗歷史較長,并對其發(fā)病機制形成了完整的認(rèn)識,尤其是在治未病思想指導(dǎo)下,針對慢性肝病給予早期干預(yù),這在一定程度上能夠降低患者未來發(fā)生肝纖維化、肝硬化的風(fēng)險。芪術(shù)顆粒是姚乃禮教授經(jīng)過多年的臨床經(jīng)驗總結(jié),結(jié)合目前中醫(yī)藥學(xué)界對肝纖維化的普遍認(rèn)識基礎(chǔ)上創(chuàng)制的治療肝纖維化常用方,本課題在國家自然基金“基于肝竇內(nèi)皮細(xì)胞微尺度生物力學(xué)性質(zhì)研究芪術(shù)顆?？垢卫w維化機制”（NO:81774282）的資助下,結(jié)合課題組前期的研究成果探討益氣活血方芪術(shù)顆粒治療肝纖維化的機制。1.基于益氣活血法治療肝纖維化臨床療效的Meta分析目的:以Meta分析的方法評價益氣活血法治療肝纖維化的臨床療效。方法:1.以PubMed、中國知識基礎(chǔ)設(shè)施工程數(shù)據(jù)庫、萬方數(shù)據(jù)知識服務(wù)平臺為檢索資料庫,檢索時間跨度為自建庫到2020年12月31日;以檢索詞“l(fā)iver fibrosis”、“hepatic fibrosis”為檢索詞,然后以“effect”或者“efficacy”作為關(guān)鍵詞逐篇進(jìn)行排除;以“肝纖維化”作為檢索詞進(jìn)行檢索,然后以“臨床觀察”、“療效分析”作為關(guān)鍵詞逐篇進(jìn)行排除。以上數(shù)據(jù)庫沒有語言限制。2.納入隨機對照臨床研究類文獻(xiàn),以肝纖維化四項、肝臟瞬時彈性成像、肝脾臟的形態(tài)、門脾靜脈的寬度、不良反應(yīng)、安全性等結(jié)局指標(biāo)作為考核指標(biāo)。結(jié)果:本次研究共納入合格文獻(xiàn)共93篇,其中有86篇文獻(xiàn)以肝纖維化四項作為臨床評價指標(biāo),兩組對比顯示中藥組的臨床療效比對照組更好,結(jié)果對比具有統(tǒng)計學(xué)差異[MD=51.15,95%CI（56.95,45.35）,P<0.00001]。15篇文獻(xiàn)以肝硬度值作為臨床考核指標(biāo),兩組對比顯示中藥組在改善肝硬度值方面具有更好的療效,比較結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異[MD=3.52,95%CI（4.78,2.26）,P<0.00001]。33 篇文獻(xiàn)研究以門靜脈直徑作為臨床考核指標(biāo),兩組對比顯示中藥組在改善門靜脈直徑方面具有更好的療效,比較結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異[MD=1.20,95%CI（2.14,0.26）,P=0.01]。31篇文獻(xiàn)研究以脾臟厚度作為臨床考核指標(biāo),兩組對比顯示中藥組在改善脾臟厚度方面具有更好的療效,比較結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異[MD=6.83,95%CI（9.54,4.12）,P<0.00001]。13篇文獻(xiàn)研究以脾靜脈直徑作為臨床考核指標(biāo),兩組對比顯示中藥組在改善脾靜脈直徑方面具有更好的療效,比較結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異[MD=1.77,95%CI（3.04,0.49）,P=0.007]。結(jié)論:以益氣活血為主要功效的中藥組方在治療肝纖維化方面相較于西藥而言具有更好的臨床療效。2.基于肝竇內(nèi)皮細(xì)胞微尺度生物力學(xué)性質(zhì)研究芪術(shù)顆粒抗肝纖維化機制目的:（1）研究芪術(shù)顆粒對肝纖維化大鼠肝臟炎癥因子、肝纖維化指標(biāo)以及病理組織學(xué)的調(diào)控作用。（2）通過qRT-PCR、Western blot、免疫熒光法明確芪術(shù)顆粒對肝竇內(nèi)皮細(xì)胞eNOSmRNA、eNOS、NO表達(dá)的影響。（3）基于多相多級次多孔介質(zhì)理論,明確芪術(shù)顆粒干預(yù)下肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的力學(xué)特征。方法:（1）以四氯化碳作為肝纖維化的誘導(dǎo)劑,構(gòu)建肝纖維化大鼠模型,造模同時給予芪術(shù)顆粒進(jìn)行干預(yù),通過Elisa法、HE以及Masson染色研究芪術(shù)顆粒對肝纖維化大鼠的生化、病理組織學(xué)的影響。（2）原位膠原酶灌注+離體消化+梯度密度分離法分離提取肝竇內(nèi)皮細(xì)胞。（3）以10%肝纖維化大鼠血清+5%的胎牛血清作為外在損傷因素作用于體外培養(yǎng)狀態(tài)的肝竇內(nèi)皮細(xì)胞,模擬體內(nèi)生化環(huán)境,構(gòu)建肝竇內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型。將細(xì)胞按照正常對照組、損傷組、正常大鼠血清損傷組、芪術(shù)顆粒含藥血清低、中、高濃度進(jìn)行分組。（4）采用 qRT-PCR、Western blot、免疫熒光法檢測胞內(nèi)eNOSmRNA、eNOS、NO的表達(dá)情況。（5）基于多相多級次多孔介質(zhì)理論,采用原子力顯微鏡表征芪術(shù)顆粒干預(yù)下肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的力學(xué)屬性。結(jié)果:（1）芪術(shù)顆粒能夠改善肝纖維化大鼠生化指標(biāo),改善肝臟病理組織形態(tài)。（2）經(jīng)過細(xì)胞形態(tài)以及免疫熒光鑒定可知,我們所提取的細(xì)胞為大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞,且純度較高。（3）經(jīng) qRT-PCR、Western blot、免疫熒光法檢測胞內(nèi) eNOSmRNA、eNOS、NO顯示芪術(shù)顆粒含藥血清能夠上調(diào)eNOSmRNA、eNOS、NO的表達(dá)。（4）經(jīng)過芪術(shù)顆粒含藥血清干預(yù)后,肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的骨架模量、粘度均有所提高,使肝竇內(nèi)皮細(xì)胞向正常力學(xué)狀態(tài)轉(zhuǎn)變,而其擴散系數(shù)無明顯變化。結(jié)論:（1）芪術(shù)顆粒能夠抑制肝臟炎癥狀態(tài),恢復(fù)肝臟正常組織形態(tài)。（2）芪術(shù)顆粒能夠上調(diào)eNOSmRNA、eNOS、NO的表達(dá),從而改善肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的病理狀態(tài),這可能是其抗肝纖維化的重要機制之一。（3）芪術(shù)顆粒能夠改善肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的力學(xué)狀態(tài),促進(jìn)肝竇內(nèi)皮細(xì)胞向正常力學(xué)狀態(tài)恢復(fù),這可能是其發(fā)揮抗肝纖維化的另一重要機制。
曹路[2]（2021）在《濕熱中阻方對脾胃濕熱小鼠炎癥因子和免疫功能的影響研究》文中提出目的:通過內(nèi)因濕熱法建立慢性胃炎脾胃濕熱證動物模型,觀察濕熱中阻方對脾胃濕熱證小鼠的輔助性T淋巴細(xì)胞1（Th1）分泌的γ-干擾素（IFN-γ）和輔助性T淋巴細(xì)胞2（Th2）分泌的白細(xì)胞介素-4（IL-4）,B淋巴瘤細(xì)胞-2基因（Bcl-2）和抑癌基因（p53）蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)作用,探討濕熱中阻方對脾胃濕熱證小鼠炎癥因子和免疫功能的影響。方法:將80只SPF級昆明小鼠,雌雄各半隨機分成6組,用于造模;將20只SP F級昆明小鼠,雌雄各半,作為正常組。造模組采用內(nèi)因濕熱法即高脂高糖飲食（使用白酒10m L/（Kg·d）、油脂10g/（Kg·d）隔日交替進(jìn)行灌胃,蜂蜜水自由飲用）復(fù)制脾胃濕熱證動物模型。然后將造模成功的小鼠隨機編號分組,即模型組,黃芩滑石湯組,濕熱中阻方低、中、高劑量組（6.2,12.4,24.8 g/Kg）,每組10只;從正常組中隨機選取10只小鼠作為對照組。造模成功的小鼠進(jìn)行連續(xù)14天的灌胃給藥,并且恢復(fù)正常飲食,對照組和模型組給予相同劑量的生理鹽水灌胃。兩周后,經(jīng)過末次給藥后,禁食不禁水16h,眼球取血后脫頸處死,取胃組織,一半置于4%多聚甲醛溶液中固定24h以上,脫水,浸蠟,包埋,3μm切片,HE染色;另一半置于液氮中冷凍保存,做WB實驗。用ELISA法檢測IFN-γ、IL-4的含量;用HE染色法觀察胃組織形態(tài)學(xué)的變化;用蛋白質(zhì)印跡法檢測Bcl-2、p53的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:（1）對照組:體重逐漸增加,反應(yīng)靈敏,進(jìn)食量和飲水量正常,大便成形,毛發(fā)光亮。模型組:體重減輕,精神萎靡,反應(yīng)遲鈍,毛發(fā)干枯無光澤,大便溏稀,進(jìn)食量和飲水量減少,肛溫較對照組高。濕熱中阻方和黃芩滑石湯組:灌胃一周后小鼠進(jìn)食量和飲水量逐漸增加,精神狀態(tài)好轉(zhuǎn),反應(yīng)較之前靈敏,體重較之前增加,毛發(fā)的光澤度增加,肛溫下降。其中以濕熱中阻方高劑量組的癥狀改善最為明顯。（2）模型組小鼠血清IL-4和IFN-γ值明顯高于對照組,濕熱中阻方高、中劑量組IL-4和IFN-γ值明顯低于模型組。（3）小鼠胃黏膜病理組織切片結(jié)果顯示,對照組小鼠胃黏膜層上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,胃小凹結(jié)構(gòu)清晰,上皮細(xì)胞排列緊密;固有層胃腺豐富,主細(xì)胞、壁細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,未見明顯炎癥。與對照組比較,模型組胃黏膜層可見上皮細(xì)胞脫落;固有層局部可見胃腺減少,結(jié)締組織增生;黏膜下層可見水腫,結(jié)締組織排列疏松;固有層與黏膜下層可見少量淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞浸潤。與模型組比較,陽性藥組固有層胃腺豐富,主細(xì)胞、壁細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,黏膜下層可見水腫,結(jié)締組織排列疏松,并伴有少量淋巴細(xì)胞浸潤。濕熱中阻方低、中、高劑量組隨藥物濃度增加,黏膜層上皮細(xì)胞脫落明顯減少,固有層與黏膜下層淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞浸潤明顯減輕。濕熱中阻方高劑量組僅黏膜層局部可見少量上皮細(xì)胞脫落,固有層胃腺豐富,主細(xì)胞、壁細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,未見明顯炎癥,胃黏膜恢復(fù)最為明顯。（4）與對照組比較,模型組小鼠胃組織Bcl-2和p53的蛋白表達(dá)水平明顯升高;與模型組比較,濕熱中阻方低、中、高劑量組Bcl-2和p53的蛋白表達(dá)明顯降低。結(jié)論:（1）以辛開苦降為法則的自擬方濕熱中阻方通過抑制炎癥因子IL-4和IFN-γ的產(chǎn)生,減少炎癥性滲出,促進(jìn)炎癥的吸收,從而減少過度免疫應(yīng)答引起的組織損傷。（2）以辛開苦降為法則的自擬方濕熱中阻方可以抑制Bcl-2和p53蛋白的表達(dá),促進(jìn)損傷細(xì)胞凋亡,減少致癌因子的表達(dá),可能具有預(yù)防細(xì)胞癌變和修復(fù)胃黏膜損傷的作用。（3）以辛開苦降為法則的自擬方濕熱中阻方成分較為復(fù)雜,對其藥理作用還需要進(jìn)一步深入研究,但由于實驗條件和實驗經(jīng)費的限制,本實驗只對其具有減少慢性胃炎脾胃濕熱證的細(xì)胞炎癥損傷和凋亡的作用機理進(jìn)行初步的探討,固有不足之處仍需進(jìn)一步改進(jìn)和完善。
奚婷[3]（2021）在《培元補腎安胎方治療RSA的臨床研究及基于內(nèi)膜衰老的藥物機制研究》文中研究表明目的1 探究培元補腎安胎方治療黃體功能不足（LPD）型復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（RSA）的臨床療效和安全性。2 通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接學(xué)探討培元補腎安胎方治療RSA的作用機制。3 探究孕酮誘導(dǎo)“種植窗期”子宮內(nèi)膜急性衰老對胚胎著床的影響。4 以“種植窗期”子宮內(nèi)膜急性衰老為切入點,探究培元補腎安胎方治療RSA的分子機制,并對上述網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測機制進(jìn)行驗證。方法1 采用臨床隨機對照研究方法,收集脾腎兩虛型LPD型RSA患者60例,隨機分為兩組:治療組30例和對照組30例。治療組予培元補腎安胎方和西藥地屈孕酮片治療,對照組予西藥地屈孕酮片治療。觀察對比兩組患者的一般情況、孕12周妊娠結(jié)局、治療前后中醫(yī)證候積分、血清E2、P和β-HCG、盆腔B超,及治療前后肝腎功、血常規(guī)等安全性指標(biāo)。2 采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法對培元補腎安胎方治療RSA的作用機制進(jìn)行分析,并運用分子對接學(xué)對結(jié)果進(jìn)行初步驗證,具體方法如下:通過檢索TCM、TCMSP數(shù)據(jù)庫得到培元補腎安胎方的化合物;通過TCMSP、Pubchem、CHEMBL得到化合物對應(yīng)的靶點;利用Genecards和OMIM數(shù)據(jù)庫收集RSA相關(guān)基因;利用R語言得到培元補腎安胎方治療RSA的潛在靶點;string數(shù)據(jù)庫構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)圖;應(yīng)用clusterProfiler包對共同靶點完成GO和KEGG富集分析;最后采用MOE軟件分子對接評估培元補腎安胎方重要活性成分與關(guān)鍵靶點的結(jié)合活性。3 采用體內(nèi)和體外實驗相結(jié)合方法,體內(nèi)實驗:將ICR雌鼠隨機分為PD0-PD9組、除衰組、對照組①、米非司酮（RU486）組、對照組②。PD0-PD9組分別于PD0-9天下午取材,除衰組、對照組①、RU486組、對照組②分別于PD5和PD9下午取材,觀察對比胚胎著床數(shù)目,應(yīng)用SA-β-gal染色、IHC、WB檢測子宮內(nèi)膜組織衰老標(biāo)志物（SA-β-gal活性、P16蛋白）的表達(dá)。體外實驗:不同濃度、時間點的甲羥孕酮（MPA）對2BS細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),應(yīng)用WB檢測各組2BS衰老標(biāo)志蛋白P53、P21、P16表達(dá)量,SA-β-gal染色檢測2BS SA-β-al活性,光學(xué)顯微鏡觀察2BS形態(tài)的改變,EdU檢測2BS增殖功能,RT-PCR檢測2BS SASP、PRL mRNA表達(dá)量。收集MPA誘導(dǎo)2BS的衰老上清液與HTR-8/SVneo共培養(yǎng),應(yīng)用CCK8、EdU、劃痕及Transwell實驗分別檢測HTR-8/SVneo的增殖、遷移和侵襲功能。4采用Clark經(jīng)典復(fù)發(fā)性流產(chǎn)模型鼠造模方法造模,將CBA/J雌鼠隨機分為12組。正常組B、模型組B、西藥組B、中藥低劑量組B、中藥中劑量組B、中藥高劑量組B在PD14取材計算胚胎丟失率;正常組A、模型組A、西藥組A、中藥低劑量組A、中藥中劑量組A、中藥高劑量組A在PD5下午取材,應(yīng)用HE染色觀察小鼠卵巢黃體面積,Elisa檢測血清P水平,SA-β-gal染色檢測內(nèi)膜的SA-β-gal活性,WB和RT-PCR檢測子宮內(nèi)膜P16、P53、P21蛋白和mRNA表達(dá),IHC檢測子宮P16蛋白定位分布及表達(dá)。結(jié)果1培元補腎安胎方對LPD型RSA臨床療效1.1保胎結(jié)局:治療組保胎成功率93.33%高于對照組70%（p<0.05）。1.2中醫(yī)證候療效:治療組總有效率96.67%高于對照組60.00%（p<0.01）。1.3中醫(yī)證候積分:治療后兩組患者脾腎兩虛型中醫(yī)證候總積分均明顯低于治療前（p<0.01）。治療組改善LPD型RSA患者脾腎兩虛型證候優(yōu)于對照組（p<0.05）。1.4止血時間:治療組平均止血時間4.29±0.46天短于對照組6.48±0.54天（p<0.05）。1.5腹痛消失時間:治療組平均腹痛消失時間5.48±0.35天短于對照組8.63±0.84天（p<0.05）。1.6血清激素水平:治療組在孕9、11、12周血清E2值高于對照組（p<0.05）;治療組孕6、7、9、11、12周血清P值高于對照組（p<0.05）;治療組孕8、9、10、11、12周血清β-HCG值高于對照組（p<0.01）。1.7 B超檢查:治療組胚胎發(fā)育與孕周相符22例,小于孕周6例,胎停育2例;對照組胚胎發(fā)育與孕周相符14例,小于孕周7例,停育9例。1.8不良反應(yīng):治療組肝功異常1例,對照組肝功異常3例、皮疹1例,兩組在安全性方面無差異（p>0.05）。2網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接探討培元補腎安胎方治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的作用機制2.1培元補腎安胎方潛在化合物及作用靶點:潛在化合物186個,作用靶點136個。2.2 RSA疾病靶點:經(jīng)過篩選去重共得到RSA靶點1658個。2.3共同靶點篩選及互作網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建:共同靶標(biāo)65個,潛在靶點分別至少與兩個化合物相連接。2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建和關(guān)鍵靶點的提取:PPI網(wǎng)絡(luò)中有65個節(jié)點,其中VEGFA、IL6、EGFR、MPAK8、ESR1等是關(guān)鍵靶點。2.5 GO和KEGG富集:GO主要涉及轉(zhuǎn)錄因子活性、單加氧酶活性等。KEGG主要涉及 PI3K-Akt、MPAK、P53 等。2.6分子對接:核心化合物和潛在靶點分子對接得分均≤-5.0 kcal/mol。3孕酮誘導(dǎo)“種植窗期”內(nèi)膜細(xì)胞衰老在胚胎著床中的作用研究3.1“種植窗期”內(nèi)膜存在急性衰老的生理表現(xiàn):IHC結(jié)果顯示,P16蛋白在子宮內(nèi)膜間質(zhì)成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞胞核呈陽性表達(dá),PD0-PD5組隨著懷孕天數(shù)的增加P16蛋白表達(dá)量逐漸增多,于PD5達(dá)到最大值,PD6-PD9組P16表達(dá)量逐漸減少。WB和β-gal染色也得出相同結(jié)果。3.2“種植窗期”內(nèi)膜衰老有利于胚胎著床:清除衰老細(xì)胞后胚胎著床數(shù)目、SA-β-gal活性、內(nèi)膜P16蛋白表達(dá)量少于對照組（p<0.01）。3.3孕酮可誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞衰老:與空白組相比,各組MPA干預(yù)后2BS細(xì)胞SA-β-gal活性和衰老標(biāo)志蛋白P16、P21、P53表達(dá)量增多（p<0.01）,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則、細(xì)胞核增大,其中MPA（8μM）作用16天,各指標(biāo)變化顯著（p<0.01）。EDU結(jié)果顯示MPA干預(yù)后2BS增殖減慢（;p<0.01）。RT-PCR實驗結(jié)果顯示,MPA組CXCL-2、CXCL-1 等 SASP、PRL mRNA 表達(dá)高于空白組（p<0.01）。3.4孕酮誘導(dǎo)細(xì)胞衰老是胚胎著床的重要條件:RU486阻斷孕酮作用后胚胎著床數(shù)目、內(nèi)膜P16蛋白表達(dá)量及SA-β-gal活性小于對照組（p<0.01）。3.5孕酮誘導(dǎo)形成的衰老微環(huán)境有利于滋養(yǎng)細(xì)胞功能:Senescent CM共培養(yǎng)的HTR-8/SVneo細(xì)胞水平和垂直遷移、侵襲功能強于Young CM組（p<0.01）。4基于“種植窗期”內(nèi)膜衰老探討培元補腎安胎方治療RSA的作用研究4.1胚胎丟失率:模型組胚胎丟失率高于正常組（p<0.01）,提示造模成功。中藥各劑量組和西藥組均低于模型組（p<0.05）。4.2血清P水平:模型組血清P水平低于正常組（p<0.05）。中藥中劑量組和西藥組血清P水平高于模型組（p<0.05）。4.3卵巢黃體面積:模型組黃體面積少于正常組（p<0.05）。中藥中劑量組和西藥組卵巢黃體面積多于模型組（p<0.05）。4.4 SA-β-gal染色:模型組內(nèi)膜SA-β-gal活性少于正常組（p<0.01）。中藥中、高劑量組和西藥組內(nèi)膜組織SA-β-gal活性多于模型組（p<0.01）。4.5內(nèi)膜組織P16、P53、P21蛋白和mRNA表達(dá):模型組P16、P53、P21蛋白和mRNA表達(dá)低于正常組（p<0.05）。中藥低、中劑量組、西藥組P16、P53、P21蛋白和mRNA表達(dá)高于模型組（p<0.05）。4.6免疫組化:P16蛋白在內(nèi)膜成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞的胞核中呈陽性表達(dá),模型組內(nèi)膜P16蛋白表達(dá)量低于正常組（p<0.01）,中藥低、中劑量組、西藥組內(nèi)膜P16蛋白表達(dá)量高于模型組（p<0.01）。結(jié)論1培元補腎安胎方能明顯改善脾腎兩虛證候,減輕陰道流血、腹痛癥狀,提高血清E2、P、β-HCG水平,促進(jìn)胚胎發(fā)育,提高LPD型RSA的保胎成功率。2通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)初步明確培元補腎安胎方治療RSA的分子機制可能是通過調(diào)控P53信號通路,調(diào)節(jié)細(xì)胞衰老,從而治療RSA。3“種植窗期”內(nèi)膜急性衰老是胚胎著床的必要條件之一,其中足量足時間的孕酮是誘導(dǎo)內(nèi)膜衰老的重要因素。4 P不足、“種植窗期”內(nèi)膜急性衰老不足可能是LPD型RSA發(fā)病機制。培元補腎安胎方可能通過提高血清P和卵巢黃體面積,增加“種植窗期”內(nèi)膜P53、P21、P16表達(dá),促進(jìn)“種植窗期”內(nèi)膜衰老從而發(fā)揮保胎作用。
黃佳麗[4]（2021）在《亞甲藍(lán)對新生小鼠脾臟T細(xì)胞免疫功能影響的研究》文中提出亞甲藍(lán)光病毒滅活血漿用于臨床輸注多年,是我國獲準(zhǔn)用于臨床輸注的一種病毒滅活血漿制品。免疫介導(dǎo)的反應(yīng)是輸注血漿最常見的不良反應(yīng)。亞甲藍(lán)光病毒滅活血漿中殘余亞甲藍(lán)遠(yuǎn)低于臨床引起不良反應(yīng)的劑量。現(xiàn)有的文獻(xiàn)表明,在低至病毒滅活血漿殘余亞甲藍(lán)濃度下,亞甲藍(lán)對免疫細(xì)胞無明顯影響。T細(xì)胞是適應(yīng)性免疫反應(yīng)中最主要的細(xì)胞。新生兒免疫功能發(fā)育不完全,T細(xì)胞與成人有所差異。本實驗擬研究不同濃度、劑量下亞甲藍(lán)對7日齡小鼠T細(xì)胞免疫功能的影響,為新生兒輸注亞甲藍(lán)光病毒滅活血漿以及亞甲藍(lán)作為臨床治療的安全性提供一定的理論依據(jù)。第一章不同濃度亞甲藍(lán)對新生小鼠脾臟T細(xì)胞免疫功能的影響目的:探討不同濃度亞甲藍(lán)對7日齡小鼠脾臟T細(xì)胞增殖、CD3+CD4+-/CD3+CD8+亞群、分泌細(xì)胞因子IFN-γ、IL-10的影響,為新生兒輸注亞甲藍(lán)光病毒滅活血漿以及亞甲藍(lán)作為臨床治療的安全性提供一定的理論依據(jù)。方法:在抗CD3ε/CD28抗體、IL-2的存在下,不同濃度亞甲藍(lán)與7日齡BALB/c小鼠脾臟單個核細(xì)胞培養(yǎng)72h后,流式細(xì)胞術(shù)檢測CFSE-CD3+T細(xì)胞的增殖、CD3+CD4+/CD3+CD8+比值,以及ELISA定量檢測IFN-γ、IL-10。結(jié)果和結(jié)論:亞甲藍(lán)濃度≦ 0.63μmol/L時,對7日齡小鼠脾臟T細(xì)胞的增殖以及單個核細(xì)胞分泌IFN-γ、IL-10的功能無影響;≧1.25μmol/L時,濃度依賴性抑制7日齡小鼠脾臟T細(xì)胞的增殖以及單個核細(xì)胞分泌IFN-y、IL-10的功能。亞甲藍(lán)濃度≦0.31μmol/L時,對7日齡小鼠脾臟T細(xì)胞CD3+CD4+/CD3+CD8+比值無影響;0.63-1.25μmol/L時,7日齡小鼠脾臟T細(xì)胞CD3+CD4+/CD3+CD8+比值呈濃度依賴性升高。第二章不同劑量亞甲藍(lán)對新生小鼠脾臟T細(xì)胞分化的影響目的:探討不同劑量亞甲藍(lán)對7日齡小鼠脾臟CD3+T細(xì)胞/有核細(xì)胞、CD3+CD4+/CD3+CD8+比值的影響,進(jìn)一步為新生兒輸注亞甲藍(lán)光病毒滅活血漿以及亞甲藍(lán)作為臨床治療的安全性提供一定的理論依據(jù)。方法:25只7日齡BALB/c小鼠隨機分為5組:A組（未處理）、B組（生理鹽水）、C組（亞甲藍(lán)/小鼠體重1Omg/kg）、D組（亞甲藍(lán)/小鼠體重20mg/kg）、E組（亞甲藍(lán)/小鼠體重40mg/kg）,0.01mL生理鹽水或亞甲藍(lán)溶液/小鼠體重（g）腹腔給藥72h后,流式細(xì)胞術(shù)檢測脾臟CD3+T細(xì)胞/有核細(xì)胞、CD3+CD4+/CD3+CD8+比值。結(jié)果和結(jié)論:未處理組與生理鹽水組相比,脾臟CD3+T細(xì)胞/有核細(xì)胞、CD3+CD4+/CD3+CD8+比值無差異;以10、20mg/kg亞甲藍(lán)/體重腹腔給藥與生理鹽水組相比,脾臟CD3+T細(xì)胞/有核細(xì)胞、CD3+CD4+/CD3+CD8+比值無差異;以40mg/kg亞甲藍(lán)/體重腹腔給藥與生理鹽水組相比,脾臟CD3+CD4+/CD3+CD8+比值有顯著差異,而CD3+T細(xì)胞/有核細(xì)胞比值無差異。
方桂玉[5]（2021）在《基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討益腎活血方調(diào)節(jié)PI3K/AKT/HIF-1α信號通路抗腎纖維化的機制研究》文中研究指明目的1、利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)以及Cytoscape可視化軟件,研究益腎活血方治療腎纖維化的有效成分及可能的作用靶點,探討益腎活血方治療RIF的作用機制。2、探討益氣活血法對腎纖維化大鼠PI3K、AKT、HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)及炎癥因子IL-6、TNF-α濃度的影響。方法1、利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)（TCMSP）建立益腎活血方的七味中藥黃芪、當(dāng)歸、丹參、大黃、紅花、三七、牛膝的化合物庫;Gene Cards數(shù)據(jù)庫、OMIM數(shù)據(jù)庫預(yù)測RIF的靶點;構(gòu)建益腎活血方化合物靶點-RIF疾病靶點互作網(wǎng)絡(luò),并通過DAVID網(wǎng)站對靶點網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行GO分析和KEGG富集分析,最后采用cytoscape軟件對分析結(jié)果做可視化網(wǎng)絡(luò)圖。2、動物實驗:將36只（體重260±20g）清潔級雄性SD大鼠隨機分為六組:假手術(shù)組組、模型組、氯沙坦組、益腎活血方低劑量組、益腎活血方中劑量組、益腎活血方高劑量組,每組6只。適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后,假手術(shù)組予游離單側(cè)輸尿管處理,余五組均用單側(cè)輸尿管結(jié)扎大鼠模型,益腎活血方不同劑量組和氯沙坦組予以對應(yīng)的藥物灌胃,假手術(shù)組和模型組按生理鹽水灌胃,療程14天。各組于藥物干預(yù)的第14天取材,行HE、Masson染色,并用Western blot法檢測各組腎組織VEGF、PI3K、AKT、HIF-1α的蛋白表達(dá),用ELISA檢測血清炎性因子IL-6、TNF-α的濃度。結(jié)果1網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)本研究通過TCMSP化合物分析平臺篩選,得到105個化合物;Gene Card、OMIM等靶點預(yù)測平臺找到了188個益腎活血方化合物-RIF疾病映射靶點進(jìn)行蛋白互作分析,可見蛋白互作頻次較高的有蛋白激酶相關(guān)受體（AKT1、MAPK1、MAPK8、JUN等）,炎癥相關(guān)受體（IL-6、IL-1B、TNF等）,生長因子相關(guān)受體（VEGFA、EGFR ESR1等）,根據(jù)GO分析顯示這些核心靶點主要涉及類固醇激素受體活性、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合催化功能、蛋白激酶的活性、細(xì)胞因子活性等分子功能,涉及炎癥趨化因子的調(diào)控、白細(xì)胞介素-6產(chǎn)生的調(diào)控、表皮生長因子激活的調(diào)控、腎上腺素能受體信號通路激活MAPK活性等生物過程,可能是通過抑制成纖維細(xì)胞因子生長分化、抑制炎癥趨化反應(yīng)、抑制炎癥反應(yīng)、抑制細(xì)胞凋亡、抗氧化應(yīng)激等多靶點發(fā)揮對RIF的治療作用。P13K-Akt、TNF、MAPK、HIF-1、VEGF、TLR、NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路等細(xì)胞信號通路提示為益腎活血方參與腎纖維的重要通路。以核心靶點IL-6、VEGF、MAPK、AKT1、EGFR、PTGS2為研究載體,對益腎活血方化學(xué)成分進(jìn)行分子對接研究,結(jié)果顯示益腎活血方化學(xué)成分與關(guān)鍵靶點具有較好的結(jié)合活性。2.1 HE染色與假手術(shù)組相比,模型組大鼠腎臟組織的腎實質(zhì)重度萎縮變薄,腎小球數(shù)量減少、萎縮,部分腎小管呈囊性擴張,間質(zhì)纖維組織增生。與模型組相比,氯沙坦組與益腎活血方各劑量組的腎實質(zhì)呈輕到中度萎縮,腎小球萎縮、數(shù)量減少,部分腎小管呈囊性擴張。纖維化程度減輕。2.2 Masson染色與假手術(shù)組相比,模型組大鼠梗阻側(cè)腎臟組織的膠原纖維藍(lán)染增多,間質(zhì)膠原纖維形成明顯,腎臟組織的小管基底膜及管周圍纖維組織顯著增生。與模型組相比,氯沙坦組與益腎活血方各劑量組大鼠梗阻側(cè)腎臟組織中膠原纖維藍(lán)染減少,小管基底膜及管周圍纖維組織呈中度增生。2.3 PI3K、AKT、HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)第14天,模型組的PI3K、AKT、HIF-1α、VEGF的蛋白表達(dá)均高于假手術(shù)組,組間比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。益腎活血方各劑量組和氯沙坦組的PI3K、AKT、HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)均低于模型組,組間比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。益腎活血方高劑量組和氯沙坦組的PI3K、AKT、HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)相近,組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。2.4炎性因子IL-6、TNF-α濃度第14日,模型組大鼠血清中IL-6、TNF-α的濃度均高于假手術(shù)組（P<0.05）。與模型組相比,各治療組大鼠血清中IL-6、TNF-α濃度均出現(xiàn)不同程度的下降（P<0.05）,益腎活血方高劑量組與氯沙坦組顯著低于低、中劑量組（P<0.05）,益腎活血方高劑量組與氯沙坦組大鼠血清IL-6、TNF-α濃度未見統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。結(jié)論1.網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)論表明益腎活血方可能是通過參與炎癥反應(yīng)、血管內(nèi)皮因子生長分化、氧化應(yīng)激、表皮生長因子增殖、免疫應(yīng)答等生物過程,調(diào)控P13K/Akt、HIF-1α、VEGF、MAPK、NF-ΚB、TLR等信號通路發(fā)揮延緩RIF發(fā)生發(fā)展作用。2.實驗研究證明益腎活血方能夠抑制腎纖維化大鼠的PI3K、AKT、HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá),降低血清炎性因子IL-6、TNF-α濃度,其作用機制可能在于益腎活血方抑制P13K/Akt/HIF-1α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮抑制炎癥反應(yīng)、抑制缺血缺氧狀態(tài)下的腎臟血管無序增生從而發(fā)揮抗RIF作用。
鮑欣[6]（2021）在《CA4納米粒子聯(lián)合DC101協(xié)同抗PD-1抗體增強肝癌治療療效及機制研究》文中研究表明研究背景:在全世界范圍內(nèi),肝細(xì)胞癌（簡稱肝癌）位居癌癥相關(guān)致死原因的第四位。臨床上,晚期肝癌的治療方法相當(dāng)有限。近期,免疫檢查點抑制劑抗PD-1抗體在肝癌的治療中顯現(xiàn)出一定療效。但抗PD-1抗體的療效在臨床上僅限于少部分肝癌患者,其客觀緩解率為20%或更低。考慮到抗PD-1抗體一旦發(fā)揮作用其抗腫瘤效率將達(dá)到空前水平,因此如何提高抗PD-1抗體治療肝癌的療效是目前迫切需解決的問題。免疫檢查點分子PD-1與它的配體PD-L1相結(jié)合致使T細(xì)胞耗竭?？筆D-1抗體具有阻止PD-1與PD-L1相結(jié)合的作用,釋放對包括CD8+T細(xì)胞在內(nèi)的T細(xì)胞的抑制效應(yīng)。預(yù)先存在的CD8+T細(xì)胞數(shù)被用來預(yù)測抗PD-1抗體治療的反應(yīng)性,但在臨床上仍不理想。新證據(jù)表明,抗PD-1抗體在癌癥治療中失敗的一個主要原因是CD8+T細(xì)胞與腫瘤負(fù)荷之間的不平衡,且抗PD-1抗體的療效與該比例呈正相關(guān)。當(dāng)較大腫瘤和較小腫瘤內(nèi)CD8+T細(xì)胞數(shù)量相等時,較大腫瘤中CD8+T細(xì)胞可能不足以有效的抑制腫瘤生長。因此,可以從減小腫瘤負(fù)荷和增加CD8+T細(xì)胞數(shù)量來提高抗PD-1抗體在HCC治療中的療效。腫瘤由血管供給氧氣和營養(yǎng)。阻斷腫瘤的血管會引起腫瘤的減小,降低腫瘤負(fù)荷。有研究表明,抗血管藥物聯(lián)合PD-1免疫檢查點抑制劑成功地用于不可手術(shù)切除的肝癌患者。因此,對于肝癌這種富血管腫瘤,抗血管藥物治療可以有效減小荷肝癌小鼠的腫瘤負(fù)荷?？寡芩幬镏械难茏钄鄤┛梢赃x擇性地破壞腫瘤內(nèi)已經(jīng)建立的血管。CA4是血管阻斷劑代表藥,其磷酸前藥CA4P已進(jìn)入III期臨床試驗。我們課題組合成的CA4納米粒子（CA4-NPs）與CA4P相比具有更強的腫瘤血管被動靶向作用,納米粒子在腫瘤血管的低滲透性使其具有更強的腫瘤抑制作用,可以更有效地減小荷肝癌小鼠的腫瘤負(fù)荷。在促血管生成大于抗血管生成因素作用下形成的異常的腫瘤血管系統(tǒng)抑制T細(xì)胞在內(nèi)皮細(xì)胞的滾動、粘附,最終使腫瘤內(nèi)浸潤的T細(xì)胞減少。被正?；哪[瘤血管結(jié)構(gòu)和功能更接近正常血管,腫瘤內(nèi)浸潤的T細(xì)胞增多。我們想利用腫瘤血管正?；黾痈伟﹥?nèi)T細(xì)胞數(shù)量,可以通過增加抗血管生成因素,打破腫瘤內(nèi)的抗血管生成因素和促血管生成因素的不平衡。近期研究表明阻斷VEGF/VEGF受體（VEGFR）2信號通路可以暫時正常化腫瘤的血管,增加腫瘤內(nèi)CD8+T細(xì)胞數(shù)量。VEGF/VEGFR2抑制劑具有阻斷CA4-NPs作用后升高的VEGF功能,使腫瘤血管系統(tǒng)暫時正常化增加腫瘤內(nèi)CD8+T數(shù)量。因此,CA4-NPs和VEGF/VEGFR2抑制劑的聯(lián)合具有減小荷肝癌小鼠的腫瘤負(fù)荷同時增加腫瘤內(nèi)浸潤的CD8+T細(xì)胞的潛力。在這項研究中,我們用CA4-NPs聯(lián)合VEGF/VEGFR2抑制劑DC101減小荷肝癌小鼠的腫瘤負(fù)荷同時增加腫瘤內(nèi)CD8+T數(shù)量協(xié)同抗PD-1抗體增強肝癌治療療效。研究目的:本研究在H22肝癌皮下腫瘤模型中驗證CA4-NPs聯(lián)合DC101協(xié)同抗PD-1抗體增強肝癌治療療效及其機制。揭示CA4-NPs對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷及DC101對肝癌血管正?；湍[瘤內(nèi)T細(xì)胞數(shù)量變化的影響。研究CA4-NPs聯(lián)合DC101對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷和腫瘤內(nèi)T細(xì)胞數(shù)量變化的影響。驗證抗PD-1抗體在CA4-NPs聯(lián)合DC101的協(xié)同作用下對H22荷瘤小鼠腫瘤的抑制作用和腫瘤內(nèi)CD8+T細(xì)胞的數(shù)量變化的影響。方法:1.CA4-NPs對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷的影響:構(gòu)建皮下H22鼠源性肝癌動物模型,利用CD31免疫組化染色評估CA4-NPs對腫瘤血管的影響;Ki67免疫組化染色評估CA4-NPs對腫瘤細(xì)胞增殖的影響;應(yīng)用H&E染色觀察CA4-NPs給藥后腫瘤組織的形態(tài)學(xué)改變。腫瘤長徑評估H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷。2.DC101對肝癌血管正?；淖饔煤湍[瘤內(nèi)CD8+T細(xì)胞數(shù)量的影響:用免疫熒光染色評估肝癌血管結(jié)構(gòu)、肝癌血管灌注及腫瘤內(nèi)缺氧;流式細(xì)胞術(shù)檢測分析DC101對肝癌內(nèi)T細(xì)胞數(shù)量的影響。3.CA4-NPs聯(lián)合DC101對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷及腫瘤內(nèi)CD8+T細(xì)胞數(shù)量的影響:用Ki67免疫組化染色評估CA4-NPs聯(lián)合DC101對肝癌細(xì)胞增殖的影響;應(yīng)用H&E染色觀察CA4-NPs聯(lián)合DC101給藥后肝癌組織內(nèi)的壞死情況;免疫熒光實驗評估CA4-NPs聯(lián)合DC101對肝癌血管正?；挠绊?流式細(xì)胞術(shù)檢測CA4-NPs聯(lián)合DC101治療后肝癌組織內(nèi)CD4+T細(xì)胞及CD8+T細(xì)胞數(shù)量變化。4.CA4-NPs聯(lián)合DC101協(xié)同抗PD-1抗體治療肝癌療效評估:在H22肝癌皮下腫瘤模型中觀察荷瘤小鼠的抑瘤情況、體重變化和生存時間;利用流式細(xì)胞術(shù)檢測CA4-NPs聯(lián)合DC101協(xié)同抗PD-1抗體對H22荷瘤小鼠腫瘤內(nèi)CD8+T細(xì)胞數(shù)量的影響;ELISA檢測H22荷瘤小鼠腫瘤內(nèi)的細(xì)胞因子。結(jié)果:1.CA4-NPs對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷的影響:與PBS組相比,CA4-NPs治療組肝癌組織切片中的CD31染色陽性的血管數(shù)量明顯減少（P<0.0001）,同時肝癌細(xì)胞的增殖降低（P<0.01）,肝癌組織細(xì)胞壞死增多（P<0.001）。CA4-NPs有效的減小H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷（P<0.01）。2.DC101對肝癌組織內(nèi)CD8+T細(xì)胞數(shù)量的影響:與PBS組相比,DC101治療組肝癌血管周細(xì)胞包被增加（P<0.05）,肝癌血管灌注FITC標(biāo)記的番茄凝集素（P<0.001）和Hechst 33342（P<0.01）增多,缺氧減少（P<0.05）;與PBS組相比,DC101使肝癌組織內(nèi)CD4+T細(xì)胞（P<0.01）及CD8+T細(xì)胞（P<0.001）數(shù)量增加。3.CA4-NPs聯(lián)合DC101對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷及腫瘤內(nèi)CD8+T細(xì)胞數(shù)量的影響:與PBS組相比,CA4-NPs聯(lián)合DC101抑制肝癌細(xì)胞的增殖（P<0.05）、引起肝癌的壞死增多（P<0.01）,同時CA4-NPs聯(lián)合DC101增加肝癌血管周細(xì)胞包被（P<0.01）、增加肝癌血管FITC標(biāo)記的番茄凝集素（P<0.01）和Hechst33342（P<0.01）的灌注,減少肝癌組織內(nèi)缺氧（P<0.05）。與PBS組相比,CA4-NPs聯(lián)合DC101增加了肝癌組織內(nèi)CD4+T細(xì)胞（P<0.05）和CD8+T細(xì)胞（P<0.001）數(shù)量。4.CA4-NPs聯(lián)合DC101協(xié)同抗PD-1抗體治療肝癌療效評估:CA4-NPs+DC101+anti-PD-1三藥聯(lián)合組在第10天腫瘤抑制率達(dá)到86.4%,明顯高于CA4-NPs+DC101組（63.5%）及anti-PD-1組（16.8%）,CA4-NPs+DC101和抗PD-1抗體之間協(xié)同作用的Q值為1.24,表明CA4-NPs+DC101與anti-PD-1有明顯的協(xié)同作用。三藥聯(lián)合組H22荷瘤小鼠的生存期（23天）明顯延長,是anti-PD-1組（12天）的1.9倍。在治療方案的第11天腫瘤組織Ki67免疫組化染色定量分析表明三藥聯(lián)合組陽性細(xì)胞數(shù)占比最少,腫瘤組織H&E染色定量分析揭示三藥聯(lián)合組壞死面積最大。治療方案的第11天,三藥聯(lián)合組肝癌組織的CD8+T細(xì)胞數(shù)量較PBS組,CA4-NPs+DC101組及anti-PD-1組顯著增加,同時ELISA結(jié)果表明三藥聯(lián)合治療組肝癌組織內(nèi)IFN-γ、TNF-α和IL-2明顯增高。結(jié)論:1.CA4-NPs阻斷肝癌血管,抑制肝癌細(xì)胞增殖,導(dǎo)致肝癌細(xì)胞壞死。CA4-NPs有效的減小H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷。2.DC101使肝癌血管結(jié)構(gòu)和功能正?；?增加了腫瘤內(nèi)的CD8+T細(xì)胞數(shù)量。3.CA4-NPs+DC101減小H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷,增加了肝癌組織內(nèi)CD8+T細(xì)胞數(shù)量。4.CA4-NPs聯(lián)合DC101協(xié)同抗PD-1抗體增加肝癌內(nèi)CD8+T細(xì)胞數(shù)量。CA4-NPs+DC101和抗PD-1抗體三藥聯(lián)合具有較強的協(xié)同作用,明顯抑制腫瘤生長,延長了H22荷瘤小鼠的生存期。
時瑩歌[7]（2021）在《刺激響應(yīng)聚氨基酸水凝膠的制備及其抗腫瘤應(yīng)用研究》文中指出近年來,人們對腫瘤微環(huán)境的認(rèn)識逐漸增加。調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境也日益成為腫瘤治療中的重要組成部分。免疫逃逸是腫瘤細(xì)胞演變出來逃避免疫系統(tǒng)“追殺”的一種機制。目前研究發(fā)現(xiàn),腫瘤免疫逃逸主要借助于兩個免疫檢查點通路,包括細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4（CTLA-4）通路和程序性細(xì)胞死亡受體-1/程序性細(xì)胞死亡配體-1（PD-1/PD-L1）通路。而且,腫瘤免疫逃逸過程也與腫瘤弱酸性、乏氧和高間質(zhì)壓的微環(huán)境密切相關(guān)。這三大特征既是腫瘤惡性增殖的結(jié)果也是促進(jìn)腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移的誘因。隨腫瘤細(xì)胞大量增殖,局部氧含量降低,腫瘤細(xì)胞代謝方式逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)樘墙徒?產(chǎn)生大量乳酸,在腫瘤細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化后以H+形式排出。加之腫瘤惡性增殖導(dǎo)致的血管扭曲,腫瘤局部代謝產(chǎn)物不能被及時運出,造成H+堆積,加劇酸性特征。缺氧和酸性特征共同刺激血管生成素分泌,大量結(jié)構(gòu)不完整的非功能性血管形成,造成血管“泄露”,腫瘤間質(zhì)壓力升高。而且,腫瘤微環(huán)境復(fù)雜多變。通過溫敏性可注射水凝膠局部給藥可以降低化療藥物通過全身給藥方式造成的全身毒性,增加病灶部位的藥物濃度,延長藥物釋放時間。本論文以可注射聚氨基酸水凝膠為載體,針對免疫檢查點阻斷與腫瘤微環(huán)境調(diào)節(jié),結(jié)合使用化療藥物,設(shè)計了載藥水凝膠體系用于抗腫瘤聯(lián)合治療。具體研究內(nèi)容和主要結(jié)論如下:（1）構(gòu)筑了負(fù)載化療藥物阿霉素（Dox）和免疫檢查點抑制劑aPD-L1抗體的溫敏可注射聚氨基酸水凝膠治療平臺。通過胺基封端甲氧基聚乙二醇（mPEG-NH2）引發(fā)γ-乙基-L-谷氨酸酯-N-羧基環(huán)內(nèi)酸酐（ELGNCA）開環(huán)聚合,合成了PEG-PELG兩嵌段共聚物,具有在體溫下熱敏成膠的特性。細(xì)胞毒性實驗證明材料沒有細(xì)胞毒性。體外降解實驗說明水凝膠具有可降解性。將藥物和聚合物溶液混合后體外成膠驗證了該水凝膠藥物緩釋的功能。體外細(xì)胞實驗結(jié)果顯示負(fù)載Dox和aPD-L1水凝膠會引起B(yǎng)16F10細(xì)胞膜表面鈣網(wǎng)蛋白（CRT）表達(dá)。進(jìn)一步研究了該載藥體系對移植B16F10黑色素瘤的C57BL/6N小鼠的腫瘤抑瘤效果。體內(nèi)抑瘤實驗結(jié)果證明了水凝膠緩釋藥物延長藥物作用時間有利于增強抗腫瘤效果,Dox和aPD-L1聯(lián)用可以提高腫瘤的抑制率、延緩腫瘤生長和延長小鼠生存期。（2）開發(fā)了生理相關(guān)溫度和pH雙重響應(yīng)PEG-聚氨基酸可注射水凝膠。在第一部分工作中使用的溫敏性材料的基礎(chǔ)上,通過增加氨基酸單元并經(jīng)側(cè)鏈“點擊”反應(yīng)引入可質(zhì)子化的雙N取代哌嗪,通過改變聚氨基酸鏈長、可質(zhì)子化鏈段比例和嵌段聚合物結(jié)構(gòu)等,合成出一系列具有溫度敏感性和可質(zhì)子化的聚氨基酸材料。材料的最小成膠濃度達(dá)1.5%（w/v）,成膠濃度范圍大,成膠溫度可以控制在0～70℃。聚氨基酸鏈段可以通過改變pH發(fā)生質(zhì)子化和去質(zhì)子化轉(zhuǎn)變,進(jìn)而產(chǎn)生溶膠-凝膠可逆相變。該系列水凝膠材料可以對于生理相關(guān)pH變化（pH 6.5～7.4）產(chǎn)生響應(yīng)。同時發(fā)現(xiàn),該系列聚合物所制備的水凝膠對多種材質(zhì)具有粘附性。其中,對PMMA的黏附能有一定的pH依賴性。（3）研究了可質(zhì)子化雙響應(yīng)PEG-聚氨基酸水凝膠用于Dox和NO供體單硝酸異山梨酯（ISMN）的局部緩釋與抗腫瘤性能。該材料制備的水凝膠表現(xiàn)出較好的體外與體內(nèi)成膠性能、降解性,以及良好的生物相容性。藥物釋放實驗說明可質(zhì)子化雙響應(yīng)水凝膠具有藥物緩釋的功能。細(xì)胞實驗顯示負(fù)載Dox水凝膠和游離Dox一樣,可以引起B(yǎng)16F10細(xì)胞CRT外翻。動物實驗證明,該水凝膠可以增加腫瘤內(nèi)的M1型巨噬細(xì)胞比例,ISMN可以緩解局部乏氧。通過負(fù)載Dox和ISMN的水凝膠對荷瘤小鼠模型瘤內(nèi)注射,發(fā)現(xiàn)載藥凝膠可以顯著抑制腫瘤生長。
駱廷蘭[8]（2021）在《成人原發(fā)免疫性血小板減少癥的治療進(jìn)展》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理原發(fā)免疫性血小板減少癥（Immune thrombocytopenia,ITP）是一種自身免疫介導(dǎo)的疾病,是引起血小板減少的最常見的病因。傳統(tǒng)上,它是由血小板計數(shù)少于100×109/L來定義的,但是治療通常取決于癥狀而不是血小板計數(shù)本身。臨床上為了快速提高血小板計數(shù)通常選擇輸注血小板,但有感染和免疫相關(guān)的輸血反應(yīng)風(fēng)險,因此臨床上出現(xiàn)了其他替代療法,達(dá)到更高的緩解率及更長的緩解時間。本文就成人原發(fā)免疫性血小板減少癥近年來的最新治療進(jìn)行綜述。
劉興麗[9]（2021）在《灌注竹葉提取物對不同環(huán)境溫度下小鼠物質(zhì)代謝的影響》文中提出為了研究灌注秦嶺佛坪巴山木竹竹葉提取物（Bamboo Leaves Extract,BLE）對不同環(huán)境溫度下小鼠血清物質(zhì)代謝的影響,探討冷應(yīng)激對小鼠體內(nèi)物質(zhì)代謝的影響途徑以及BLE可能的保護(hù)機制,本研究采用2×2雙因子重復(fù)試驗設(shè)計,選取健康的雌性昆明小鼠48只,隨機分成4組（常溫對照組、常溫BLE灌注組、冷應(yīng)激模型組、低溫BLE灌注組）,每個組12個重復(fù),每個重復(fù)1只小鼠,單籠飼養(yǎng),試驗周期持續(xù)28天。實驗分兩個階段進(jìn)行,分別于實驗的第14天和第28天早上灌胃結(jié)束后進(jìn)行摘眼球采血。采用LC-MS代謝組學(xué)方法就小鼠血清代謝物進(jìn)行測定,經(jīng)過主成分分析（Principal Component Analysis,PCA）、最小偏正交二乘判別分析（Orthogonal Projections to Latent Structures-Discriminant Analysis,OPLS-DA）、折疊分析（Fold Change,FC）以及T-test檢驗,篩選出各組顯著性變化的代謝產(chǎn)物,并在此基礎(chǔ)確定相應(yīng)的代謝通路。試驗結(jié)果及結(jié)論如下:1、對比分析常溫BLE灌注組小鼠和常溫對照組的全代謝圖譜特征,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在實驗第14天時,常溫BLE灌注組小鼠的甘油磷脂代謝、逆行內(nèi)源性大麻素信號、癌癥中的膽堿代謝、亞油酸代謝、花生四烯酸代謝、α-亞麻酸代謝、氨基酸的生物合成、苯丙氨酸代謝、色氨酸代謝、類固醇激素的合成、腎素-血管緊張素系統(tǒng)等有明顯差異,磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、哇巴因、四氫皮質(zhì)酮、磷酸烯醇式丙酮酸上調(diào);植物鞘氨醇、苯丙酮酸、檸檬酸、D-果糖、D-甘露糖、芥酸、血管緊張素Ⅱ、UDP-葡萄糖、癸酸、3-甲基二氧基吲哚、磷酸酯、血管緊張素Ⅳ、L-異亮氨酸、尿刊酸、馬尿酸、L-苯丙氨酸、犬尿喹啉酸、吲哚酚、5-羥色胺、硫酸膽固醇、α-亞麻酸、N-乙酰-L-苯丙氨酸、膽綠素等下調(diào)。在實驗第28天,常溫BLE灌注組小鼠的谷胱甘肽代謝、煙酸酯和煙酰胺代謝、嘧啶代謝、不飽和脂肪酸的生物合成、類固醇激素的合成等有明顯差異,磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、卟啉Ⅲ、溶血磷脂酰膽堿、芥酸上調(diào),D-尿膽素、1-甲基煙酰胺、d CTP、黃體酮下調(diào)。常溫灌注BLE可能對小鼠的糖代謝、脂質(zhì)代謝、氨基酸代謝產(chǎn)生影響。結(jié)論:基于代謝組學(xué)分析,常溫灌注BLE會使小鼠產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng),同時抑制小鼠的能量代謝,影響小鼠的腸道微生物,也存在保護(hù)心血管的可能。2、對比分析低溫處理組小鼠和常溫對照組的全代謝譜特征,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在實驗第14天時,低溫處理組小鼠的甘油磷脂代謝、逆行內(nèi)源性大麻素信號、糖基磷脂酰肌醇（GPI）-錨定生物合成、亞油酸代謝、花生四烯酸代謝、α-亞麻酸代謝、致病性大腸桿菌感染、精氨酸和脯氨酸代謝、丙氨酸,天冬氨酸和谷氨酸代謝、甘氨酸,絲氨酸和蘇氨酸代謝、苯丙氨酸代謝、檸檬酸循環(huán)、半乳糖代謝等有明顯變化,磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、二?；视?、磷脂酰乙醇胺上調(diào);α-酮戊二酸、L-苯丙氨酸、γ-生育酚、L-酪氨酸、檸檬酸、肌酸、乙酰輔酶A、脫氧胞苷、馬尿酸、脫氧腺苷、L-脯氨酸、L-谷氨酸、黃體酮、黃嘌呤、2-羥基乙烷磺酸鹽、L-異亮氨酸、6-酮-前列腺素F1α等下調(diào)。在實驗第28天,低溫處理組小鼠的甘油磷脂代謝、嘌呤代謝、嘧啶代謝、類固醇生物合成、脂肪酸生物合成、腎素分泌有明顯差異,卟啉Ⅲ、磷脂酰乙醇胺、膽固醇酯、磷酸酯、磷酸、苯乙酰甘氨酸、芥酸上調(diào);乳清酸、γ-谷氨酰半胱氨酸、L-谷氨酰胺、肌苷、脫氧胞苷、血管緊張素Ⅲ、黃體酮、脫氧腺苷、癸酸等下調(diào)。低溫處理可能對小鼠的糖代謝、脂質(zhì)代謝、氨基酸代謝、核苷酸代謝產(chǎn)生影響。結(jié)論:在低溫條件下,小鼠處于能量高消耗狀態(tài);低溫還會導(dǎo)致細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)變化,進(jìn)而影響細(xì)胞膜功能;影響小鼠體積內(nèi)多巴胺、5-羥色胺等神經(jīng)遞質(zhì)和L-肉毒堿、牛磺酸代謝產(chǎn)物等抗氧化物質(zhì)的合成,進(jìn)而影響小鼠的神經(jīng)系統(tǒng)以及免疫功能等,對小鼠造成氧化損傷;低溫抑制小鼠核苷酸的合成,影響小鼠生長發(fā)育。3、對比分析低溫BLE灌胃組小鼠和低溫處理組的全代謝譜特征,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在實驗第14天時,低溫BLE灌胃組小鼠的不飽和脂肪酸的生物合成、?；撬岽x、硫胺素代謝、多巴胺突觸、甘油磷脂代謝、花生四烯酸代謝、α-亞麻酸代謝、脯氨酸代謝、酪氨酸代謝有明顯變化,卟啉Ⅲ、D-尿膽素、促性腺激素釋放激素、尿苷、2-羥基乙烷磺酸鹽、L-酪氨酸、咖啡因、L-脯氨酸、溶血磷脂酰膽堿上調(diào);α-亞麻酸、神經(jīng)酸、癸酸、膽固醇酯、磷酸酯、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、3-羥基-N6,N6,N6-三甲基-L-賴氨酸下調(diào)。在實驗第28天時,低溫BLE灌胃組小鼠的生物素代謝、甘油磷脂代謝、花生四烯酸代謝、α-亞麻酸代謝、組氨酸代謝、酮體的合成與降解、β-丙氨酸代謝、纈氨酸,亮氨酸和異亮氨酸的生物合成等有明顯差異,白三烯E4、生物素上調(diào);磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、苯乙酰甘氨酸、磷脂酸、麥角硫氨酸、α-亞麻酸下調(diào)。結(jié)論:灌胃BLE通過影響?；撬岽x、甘油磷脂代謝、花生四烯酸代謝、α-亞麻酸代謝等途徑,提高冷應(yīng)激小鼠的抗氧化能力,改善其氧化損傷情況;通過影響脯氨酸代謝、酪氨酸代謝等通路,提高冷應(yīng)激小鼠的免疫力,恢復(fù)其活力。
唐榮霜[10]（2021）在《虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及實驗驗證研究》文中指出虎杖始載于《名醫(yī)別錄》,傳統(tǒng)記載虎杖可用于治療風(fēng)濕痹癥,現(xiàn)代研究也表明虎杖可用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,其有效成分和分子機制尚不明確。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是基于系統(tǒng)生物學(xué)和多向藥理學(xué)理論,通過構(gòu)建藥物-基因-靶點-疾病相互作用網(wǎng)絡(luò),對生物系統(tǒng)進(jìn)行分析,從而預(yù)測藥物的有效成分和分子機制的方法。本論文基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和實驗驗證相結(jié)合的研究方法,研究虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的有效成分和分子機制,以期為虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的臨床應(yīng)用提供依據(jù),并為虎杖的開發(fā)研究奠定基礎(chǔ)。實驗方法:一、通過TCMSP、TCMID、BATMAN-TCM、Phram Mapper數(shù)據(jù)庫篩選虎杖的活性成分并預(yù)測活性成分的靶點;從Drug Bank、TTD、Dis Ge NET、Gene Cards、OMIM數(shù)據(jù)庫收集RA的疾病靶點;然后應(yīng)用Venny 2.1.0軟件篩選虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的疾病靶點;用Cytoscape 3.7.2軟件構(gòu)建藥物-活性成分-疾病-靶點網(wǎng)絡(luò);利用STRING數(shù)據(jù)庫構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò);通過DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫進(jìn)行GO功能和KEGG通路富集分析,并使用Omicshare平臺呈現(xiàn)富集結(jié)果;最后利用Cytoscape3.7.2軟件構(gòu)建藥物-活性成分-靶點-通路網(wǎng)絡(luò)。二、以MH7A細(xì)胞為疾病研究模型,通過CCK-8法研究不同濃度的槲皮素、白藜蘆醇、木犀草素、大黃素、虎杖苷、β-谷甾醇作用24 h、48 h后對細(xì)胞增殖的影響,并計算不同成分作用不同時間的IC50值。通過ELISA實驗和Western Blot實驗探究了不同成分對炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和TLR4/NF-κB信號通路的影響。實驗結(jié)果:一、利用數(shù)據(jù)庫共篩選到14個虎杖活性成分,346個活性成分靶點,690個RA的疾病靶點;通過構(gòu)建韋恩圖,得到122個交集靶點;拓?fù)浞治霭l(fā)現(xiàn)關(guān)鍵活性成分主要包括槲皮素、白藜蘆醇、木犀草素、大黃素、虎杖苷、β-谷甾醇等;通過構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò),篩選得到20個關(guān)鍵靶點;GO功能分析發(fā)現(xiàn)其BP、CC、MF主要與炎癥反應(yīng)、細(xì)胞外間隙、細(xì)胞因子活性等有關(guān);KEGG通路分析發(fā)現(xiàn)主要與TNF信號通路、破骨細(xì)胞分化、Toll樣受體信號通路、T細(xì)胞受體信號通路、NF-κB信號通路等有關(guān)。然后構(gòu)建了藥物-活性成分-靶點-通路網(wǎng)絡(luò)。所以本研究選擇了槲皮素、白藜蘆醇、木犀草素、大黃素、虎杖苷、β-谷甾醇這6種活性成分和TLR4/NF-κB信號通路進(jìn)行后續(xù)的實驗驗證。二、（1）細(xì)胞增殖抑制實驗表明,這6種活性成分均能抑制MH7A細(xì)胞的增殖（P<0.01或P<0.05）,并且具有濃度依賴性。除大黃素、虎杖苷外,其余各成分48 h的IC50要小于24 h,這表明大多數(shù)成分在48h抑制細(xì)胞增殖的作用更強。（2）ELISA實驗表明,這6種活性成分均能抑制炎癥因子IL-1β、IL-8的分泌（P<0.01）;槲皮素能抑制TNF-α的分泌（P<0.01）,其余5種成分對TNF-α的分泌具有抑制趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;這6種活性成分對IL-6的分泌具有抑制趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。（3）Western Blot實驗表明,這6種活性成分對TLR4、NF-κB p65、p-p65、IκB-α的蛋白表達(dá)具有一定的抑制趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。實驗結(jié)論:虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的主要有效成分包括槲皮素、白藜蘆醇、木犀草素、大黃素、虎杖苷、β-谷甾醇等,其具有抑制MH7A細(xì)胞增殖,減少炎癥因子分泌和對相關(guān)通路的蛋白表達(dá)具有一定的抑制趨勢,分子機制可能與抑制TLR4/NF-κB信號通路有關(guān)。
二、低劑量干擾素口腔粘膜施藥對乙型肝炎患者血漿細(xì)胞因子及細(xì)胞免疫功能的影響（論文開題報告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實驗法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實踐的需要提出設(shè)計。
定性分析法：對研究對象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認(rèn)識進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會科學(xué)用來分析社會現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、低劑量干擾素口腔粘膜施藥對乙型肝炎患者血漿細(xì)胞因子及細(xì)胞免疫功能的影響（論文提綱范文）
（1）基于肝竇內(nèi)皮細(xì)胞微尺度生物力學(xué)性質(zhì)研究芪術(shù)顆?？垢卫w維化機制（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文縮略詞表 |
| 第一部分 文獻(xiàn)綜述 |
| 綜述一 中醫(yī)藥學(xué)治療肝纖維化的研究進(jìn)展 |
| 綜述二 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對肝纖維化的研究進(jìn)展 |
| 綜述三 益氣活血法對肝竇內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞生物學(xué)影響的研究 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二部分 基于益氣活血法治療肝纖維化臨床療效的Meta分析 |
| 前言 |
| 資料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第三部分 實驗研究 |
| 前言 |
| 實驗一 芪術(shù)顆粒對肝纖維化模型大鼠的影響研究 |
| 1.實驗材料 |
| 2.實驗方法 |
| 3.實驗結(jié)果 |
| 結(jié)論 |
| 實驗二 大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的原代分離與提取 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 實驗三 芪術(shù)顆粒含藥血清對肝竇內(nèi)皮細(xì)胞胞內(nèi)一氧化氮合成酶、一氧化氮的影響 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 結(jié)論 |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 實驗四 芪術(shù)顆粒含藥血清對肝竇內(nèi)皮細(xì)胞微尺度生物力學(xué)性質(zhì)影響的研究 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 小結(jié) |
| 結(jié)論 |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 創(chuàng)新性 |
| 致謝 |
| 個人簡歷 |
| 附件 |
| 中醫(yī)藥科技查新報告書 |
（2）濕熱中阻方對脾胃濕熱小鼠炎癥因子和免疫功能的影響研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文縮略語 |
| 引言 |
| 文獻(xiàn)綜述 |
| 1 脾胃濕熱證概述 |
| 2 慢性胃炎與脾胃濕熱證的相關(guān)性研究 |
| 3 小結(jié) |
| 實驗研究 |
| 1 實驗材料 |
| 2 實驗方法 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 5 小結(jié) |
| 結(jié)論 |
| 本文創(chuàng)新點 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 在學(xué)期間主要研究成果 |
| 個人簡介 |
（3）培元補腎安胎方治療RSA的臨床研究及基于內(nèi)膜衰老的藥物機制研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符號說明 |
| 第一章 文獻(xiàn)綜述 |
| 綜述一 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的西醫(yī)研究進(jìn)展 |
| 1 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因研究 |
| 2 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的治療現(xiàn)狀 |
| 3 小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述二 中醫(yī)藥治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的研究進(jìn)展 |
| 1 中醫(yī)病因病機 |
| 2 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的中醫(yī)證型分布狀況 |
| 3 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的中醫(yī)治療現(xiàn)狀 |
| 4 小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述三 子宮細(xì)胞衰老與女性生殖功能 |
| 1 衰老細(xì)胞 |
| 2 子宮的生理解剖及功能 |
| 3 子宮衰老細(xì)胞對女性生殖功能的影響 |
| 4 子宮衰老細(xì)胞的治療現(xiàn)狀 |
| 5 小結(jié)與展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二章 培元補腎安胎方治療黃體功能不足型復(fù)發(fā)性流產(chǎn)臨床療效觀察 |
| 前言 |
| 1 研究材料 |
| 2 研究方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 5 小結(jié)與展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第三章 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接探討培元補腎安胎方治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的作用機制 |
| 前言 |
| 1 材料與方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 4 小結(jié)與展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第四章 孕酮誘導(dǎo)“種植窗期”子宮內(nèi)膜細(xì)胞衰老在胚胎著床中的作用研究 |
| 前言 |
| 1 實驗材料 |
| 2 實驗方法 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 5 小結(jié)與展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第五章 基于“種植窗期”內(nèi)膜衰老探討培元補腎安胎方對復(fù)發(fā)性流產(chǎn)作用機制的研究 |
| 前言 |
| 1 實驗材料 |
| 2 實驗方法 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 5 小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 結(jié)語 |
| 1 研究總結(jié) |
| 2 創(chuàng)新點 |
| 3 不足與展望 |
| 致謝 |
| 附錄 |
| 在學(xué)期間主要研究成果 |
（4）亞甲藍(lán)對新生小鼠脾臟T細(xì)胞免疫功能影響的研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 不同濃度亞甲藍(lán)對新生小鼠脾臟T細(xì)胞免疫功能的影響 |
| 1.1 實驗材料 |
| 1.2 實驗方法 |
| 1.3 實驗結(jié)果 |
| 1.4 討論 |
| 第二章 不同劑量亞甲藍(lán)對新生小鼠脾臟T細(xì)胞分化的影響 |
| 2.1 實驗材料 |
| 2.2 實驗方法 |
| 2.3 實驗結(jié)果 |
| 2.4 討論 |
| 全文總結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 文獻(xiàn)綜述 亞甲藍(lán)光病毒滅活血漿的研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 攻讀學(xué)位期間成果 |
| 致謝 |
（5）基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討益腎活血方調(diào)節(jié)PI3K/AKT/HIF-1α信號通路抗腎纖維化的機制研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRIFCT |
| 引言 |
| 第一章 文獻(xiàn)研究 |
| 1 益腎活血立法的益腎活血方抗腎纖維化依據(jù) |
| 1.1 腎纖維化的形成機制 |
| 1.1.1 細(xì)胞外基質(zhì)沉積 |
| 1.1.2 炎癥因子 |
| 1.1.3 血小板源性生長因子 |
| 1.1.4 轉(zhuǎn)化生長因子 |
| 1.1.5 腎小管細(xì)胞上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化 |
| 1.1.6 氧化應(yīng)激反應(yīng) |
| 2 祖國醫(yī)學(xué)對腎纖維化的認(rèn)識 |
| 2.1 脾腎虧虛 |
| 2.2 水濕毒瘀蓄積 |
| 2.3 久病入絡(luò) |
| 3 益腎活血方與腎纖維化 |
| 3.1 益腎活血方組方 |
| 3.2 益腎活血方組方的現(xiàn)代藥理學(xué)研究 |
| 4 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的中藥復(fù)方研究 |
| 5 本課題研究目的及意義 |
| 第二章 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討益腎活血方治療腎纖維化的作用機制 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 活性化合物的篩選 |
| 1.2 活性化合物的靶點預(yù)測 |
| 1.3 RIF相關(guān)基因的篩選 |
| 1.4 可視化網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 |
| 1.5 蛋白互作(PPI)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建 |
| 1.6 Gene Ontology(GO)分析和KEGG通路分析 |
| 1.7 分子對接 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 活性化合物篩選 |
| 2.2 活性化合物的靶點預(yù)測 |
| 2.3 網(wǎng)絡(luò)關(guān)系構(gòu)建 |
| 2.3.1 藥物-化合物-疾病-靶點網(wǎng)絡(luò)圖 |
| 2.3.2 核心靶點PPI蛋白互作分析 |
| 2.4 GO及 KEGG分析 |
| 2.5 潛在活性成分-靶蛋白分子對接 |
| 3 討論 |
| 3.1 益腎活血方治療RIF的核心化合物及靶點 |
| 3.2 益腎活血方對細(xì)胞信號通路的調(diào)控 |
| 3.2.1 MAPK信號通路 |
| 3.2.2 NF-ΚB信號通路 |
| 3.2.3 PI3K/Akt/HIF-1α信號通路 |
| 第三章 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)成果論證益腎活血方調(diào)節(jié)PI3K/AKT/HIF-1α信號通路的抗腎纖維化機制 |
| 第一部分 動物實驗 |
| 1 實驗材料 |
| 1.1 實驗動物 |
| 2 實驗方法 |
| 2.1 造模和分組 |
| 2.2 給藥 |
| 2.3 腎臟組織樣本取材及固定 |
| 2.4 腎臟組織石蠟包埋切片 |
| 2.5 腎臟組織HE染色步驟 |
| 2.6 腎臟組織Masson染色步驟 |
| 2.7 模型評判標(biāo)準(zhǔn) |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 4.1 單側(cè)輸尿管梗阻大鼠模型的復(fù)制 |
| 4.2 益腎活血方改善單側(cè)輸尿管梗阻大鼠模型腎臟病理變化 |
| 4.3 益腎活血方減少單側(cè)輸尿管梗阻模型大鼠腎臟膠原纖維沉積 |
| 第二部分 WB檢測腎組織VEGF、HIF-1α、PI3K、AKT蛋白表達(dá) |
| 1 實驗 |
| 1.1 動物及分組、給藥方法 |
| 1.2 試劑和耗材 |
| 1.3 主要實驗儀器 |
| 1.4 試劑及配制 |
| 1.5 實驗方法 |
| 1.6 結(jié)果處理 |
| 1.7 實驗結(jié)果 |
| 2 統(tǒng)計分析 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 3.1 WB檢測腎組織PI3K、AKT、HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá) |
| 3.1.1 益腎活血方抑制PI3K的蛋白表達(dá) |
| 3.1.2 益腎活血方抑制AKT的蛋白表達(dá) |
| 3.1.3 益腎活血方抑制HIF-1α的蛋白表達(dá) |
| 3.1.4 益腎活血方抑制VEGF的蛋白表達(dá) |
| 第三部分 ELISA檢測血清IL-6、TNF-α表達(dá)水平 |
| 1 ELISA實驗方法及步驟 |
| 1.1 試劑和耗材 |
| 1.2 實驗方法 |
| 1.3 復(fù)溫 |
| 1.4 加樣 |
| 1.5 配液 |
| 1.6 洗滌 |
| 1.7 顯色 |
| 1.8 終止 |
| 1.9 測定 |
| 1.10 讀取實驗結(jié)果 |
| 2 統(tǒng)計學(xué)分析 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 3.1 血清中IL-6、TNF-α的濃度比較 |
| 4 討論 |
| 4.1 基于PI3K/AKT/HIF-1α信號通路探討益腎活血方抗腎纖維化的機制 |
| 4.1.1 PI3K/AKT/HIF-1α信號通路與炎癥 |
| 4.1.2 VEGF、HIF-α與血管新生 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 英文縮略詞表 |
| 綜述 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對復(fù)方中藥作用機制的研究和思考 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個人簡歷及攻讀學(xué)位期間獲得的科研成果 |
（6）CA4納米粒子聯(lián)合DC101協(xié)同抗PD-1抗體增強肝癌治療療效及機制研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 第1章 緒論 |
| 1.1 肝癌的流行病學(xué)和致病因素 |
| 1.1.1 肝癌的流行病學(xué) |
| 1.1.2 肝癌的致病因素 |
| 1.2 肝癌的治療 |
| 1.2.1 肝切除 |
| 1.2.2 肝移植 |
| 1.2.3 化療治療 |
| 1.2.4 放射治療 |
| 1.2.5 消融治療 |
| 1.2.6 靶向藥物治療 |
| 1.2.7 經(jīng)肝動脈介入治療 |
| 1.2.8 免疫治療 |
| 1.3 抗腫瘤納米藥 |
| 1.3.1 納米藥的特點 |
| 1.3.2 納米藥的作用機制 |
| 1.3.3 納米藥的分類 |
| 1.3.4 血管阻斷劑納米藥在腫瘤治療方面的應(yīng)用 |
| 1.4 腫瘤血管的正?；?/td> |
| 1.4.1 血管的生成 |
| 1.4.2 VEGF/VEGFR2信號途徑介導(dǎo)腫瘤血管生成 |
| 1.4.3 腫瘤血管正?；碚?/td> |
| 1.5 本論文的設(shè)計思路 |
| 第2章 CA4-NPs對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷的影響 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 實驗材料 |
| 2.2.1 細(xì)胞系 |
| 2.2.2 實驗動物 |
| 2.2.3 CA4-NPs藥物 |
| 2.2.4 主要實驗試劑 |
| 2.2.5 主要實驗儀器 |
| 2.3 實驗方法 |
| 2.3.1 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代及凍存 |
| 2.3.2 動物模型的建立 |
| 2.3.3 腫瘤體積的測量與計算 |
| 2.3.4 腫瘤負(fù)荷的評估 |
| 2.3.5 免疫組織化學(xué)染色 |
| 2.3.6 蘇木精-伊紅染色 |
| 2.3.7 酶聯(lián)免疫吸附試驗 |
| 2.3.8 統(tǒng)計學(xué)分析方法 |
| 2.4 實驗結(jié)果與討論 |
| 2.4.1 CA4-NPs對肝癌血管的作用 |
| 2.4.2 CA4-NPs對肝癌細(xì)胞增殖的影響 |
| 2.4.3 CA4-NPs對H22荷瘤小鼠腫瘤組織形態(tài)的影響 |
| 2.4.4 CA4-NPs對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷的影響 |
| 2.4.5 CA4-NPs治療后肝癌組織內(nèi)VEGF的表達(dá) |
| 2.5 本章小結(jié) |
| 第3章 DC101對肝癌組織內(nèi)CD8~+T細(xì)胞數(shù)量的影響 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 實驗材料 |
| 3.2.1 細(xì)胞系與實驗動物 |
| 3.2.2 主要實驗試劑 |
| 3.2.3 主要實驗儀器 |
| 3.3 實驗方法 |
| 3.3.1 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代 |
| 3.3.2 動物模型的建立 |
| 3.3.3 腫瘤體積的測量與計算 |
| 3.3.4 腫瘤負(fù)荷的評估 |
| 3.3.5 腫瘤血管周細(xì)胞包被的評估 |
| 3.3.6 FITC標(biāo)記的番茄凝集素腫瘤血管灌注實驗 |
| 3.3.7 Hoechst33342腫瘤血管灌注實驗 |
| 3.3.8 缺氧評估實驗 |
| 3.3.9 流式細(xì)胞術(shù)檢測 |
| 3.3.10 IHC染色 |
| 3.3.11 統(tǒng)計學(xué)分析 |
| 3.4 實驗結(jié)果與討論 |
| 3.4.1 DC101對肝癌血管周細(xì)胞包被、腫瘤血管灌注及腫瘤缺氧的影響 |
| 3.4.2 DC101對H22 荷瘤小鼠腫瘤內(nèi)CD8~+T細(xì)胞數(shù)量的影響 |
| 3.4.3 DC101對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷的影響 |
| 3.5 本章小結(jié) |
| 第4章 CA4-NPs+DC101對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷和腫瘤內(nèi)CD8~+T細(xì)胞數(shù)量的影響 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 實驗材料 |
| 4.2.1 細(xì)胞系與實驗動物 |
| 4.2.2 主要實驗試劑 |
| 4.2.3 主要實驗儀器 |
| 4.3 實驗方法 |
| 4.3.1 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代 |
| 4.3.2 動物模型的建立 |
| 4.3.3 腫瘤體積的測量與計算 |
| 4.3.4 腫瘤負(fù)荷的評估 |
| 4.3.5 IHC染色 |
| 4.3.6 H&E染色 |
| 4.3.7 肝癌血管周細(xì)胞包被的評估 |
| 4.3.8 FITC標(biāo)記的番茄凝集素肝癌血管灌注實驗 |
| 4.3.9 Hoechst33342 血管灌注實驗 |
| 4.3.10 缺氧評估實驗 |
| 4.3.11 流式細(xì)胞術(shù)檢測 |
| 4.3.12 統(tǒng)計學(xué)分析 |
| 4.4 實驗結(jié)果與討論 |
| 4.4.1 CA4-NPs+DC101對H22荷瘤小鼠腫瘤負(fù)荷的影響 |
| 4.4.2 CA4-NPs+DC101對肝癌組織內(nèi)CD8~+T細(xì)胞數(shù)量的影響 |
| 4.4.3 CA4-NPs+DC101治療后肝癌PD-L1的表達(dá) |
| 4.5 本章小結(jié) |
| 第5章 CA4-NPs聯(lián)合DC101協(xié)同抗PD-1抗體治療肝癌療效評估 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 實驗材料 |
| 5.2.1 細(xì)胞系與實驗動物 |
| 5.2.2 主要實驗試劑 |
| 5.2.3 主要實驗儀器 |
| 5.3 實驗方法 |
| 5.3.1 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代 |
| 5.3.2 動物模型的建立 |
| 5.3.3 腫瘤體積的測量與計算 |
| 5.3.4 抑瘤實驗 |
| 5.3.5 IHC染色 |
| 5.3.6 H&E染色 |
| 5.3.7 ALT、BUN及CREA水平檢測 |
| 5.3.8 流式細(xì)胞術(shù) |
| 5.3.9 ELISA |
| 5.3.10 統(tǒng)計學(xué)分析 |
| 5.4 實驗結(jié)果與討論 |
| 5.4.1 CA4-NPs+DC101+anti-PD-1對肝癌皮下移植瘤的腫瘤抑制結(jié)果 |
| 5.4.2 CA4-NPs+DC101 anti-PD-1對肝癌細(xì)胞增殖和腫瘤組織形態(tài)的影響 |
| 5.4.3 CA4-NPs+DC101+anti-PD-1對肝癌組織內(nèi)CD8~+T細(xì)胞數(shù)量的影響 |
| 5.4.4 CA4-NPs+ DC101+ anti-PD-1三藥聯(lián)合系統(tǒng)毒性 |
| 5.5 本章小結(jié) |
| 第6章 結(jié)論 |
| 創(chuàng)新性 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 作者簡介及科研成果 |
| 致謝 |
（7）刺激響應(yīng)聚氨基酸水凝膠的制備及其抗腫瘤應(yīng)用研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 緒論 |
| 1.1 水凝膠 |
| 1.1.1 溫度敏感性水凝膠 |
| 1.1.2 pH敏感性水凝膠 |
| 1.1.3 生物大分子敏感性水凝膠 |
| 1.1.4 外界因素 |
| 1.2 癌癥治療 |
| 1.2.1 傳統(tǒng)治療 |
| 1.2.2 免疫相關(guān)療法 |
| 1.2.3 聯(lián)合療法 |
| 1.3 抗腫瘤藥物載體 |
| 1.3.1 納米抗腫瘤藥物載體 |
| 1.3.2 水凝膠抗腫瘤藥物載體 |
| 1.4 本論文的選題依據(jù)和主要研究內(nèi)容 |
| 第2章 溫敏聚氨基酸水凝膠遞送Dox和aPD-L1用于黑色素瘤聯(lián)合治療 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 實驗材料及測試方法 |
| 2.2.1 試劑 |
| 2.2.2 測試儀器及方法 |
| 2.2.3 實驗細(xì)胞和動物 |
| 2.3 實驗方法 |
| 2.3.1 mPEG-NH_2合成 |
| 2.3.2 γ-乙基-L-谷氨酸酯(ELG)及γ-乙基-L-谷氨酸酯-N-羧酸酐(ELG NCA)合成 |
| 2.3.3 聚乙二醇-b-聚(γ-乙基-L-谷氨酸酯)(mPEG-b-PELG)合成 |
| 2.3.4 mPEG-b-PELG自組裝 |
| 2.3.5 二級結(jié)構(gòu) |
| 2.3.6 凝膠相圖 |
| 2.3.7 水凝膠微觀形貌 |
| 2.3.8 流變測試 |
| 2.3.9 水凝膠體外降解實驗 |
| 2.3.10 藥物體外釋放實驗 |
| 2.3.11 細(xì)胞培養(yǎng) |
| 2.3.12 細(xì)胞毒性實驗 |
| 2.3.13 體內(nèi)原位成膠實驗 |
| 2.3.14 CRT檢測 |
| 2.3.15 抗腫瘤實驗 |
| 2.3.16 免疫細(xì)胞因子分析 |
| 2.3.17 免疫細(xì)胞分析 |
| 2.3.18 組織病理學(xué)分析 |
| 2.3.19 統(tǒng)計分析 |
| 2.4 結(jié)果與討論 |
| 2.4.1 mPEG-b-PELG的合成與表征 |
| 2.4.2 mPEG-b-PELG的自組裝 |
| 2.4.3 mPEG-b-PELG的溶膠-凝膠相轉(zhuǎn)變 |
| 2.4.4 水凝膠的體外降解和藥物釋放 |
| 2.4.5 水凝膠的細(xì)胞相容性和體內(nèi)成膠 |
| 2.4.6 CRT檢測 |
| 2.4.7 水凝膠載帶aPD-L1和Dox聯(lián)合抑瘤實驗 |
| 2.5 本章小結(jié) |
| 第3章 生理相關(guān)pH和溫度雙響應(yīng)聚氨基酸粘附性水凝膠的制備 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 實驗材料及測試 |
| 3.2.1 試劑 |
| 3.2.2 測試儀器及方法 |
| 3.2.3 實驗細(xì)胞和動物 |
| 3.3 實驗方法 |
| 3.3.1 γ-丙炔基-L-谷氨酸酯(PLG)及γ-丙炔基-L-谷氨酸酯-N-羧酸酐(PLGNCA)合成 |
| 3.3.2 1-疊氮乙基-4-甲基哌嗪(AMP)的合成 |
| 3.3.3 單甲醚聚乙二醇-b-聚(γ-乙基-L-谷氨酸酯-co-γ-丙炔基-L-谷氨酸酯)(mPEG-b-P(ELG-co-PLG)和聚(γ-乙基-L-谷氨酸酯-co-γ-丙炔基-L-谷氨酸酯)-b-聚乙二醇-b-聚(γ-乙基-L-谷氨酸酯-co-γ-丙炔基-L-谷氨酸酯)(P(ELG-co-PLG)-b-PEG-b-P(ELG-co-PLG)的合成 |
| 3.3.4 AMP修飾mPEG-b-P(ELG-co-PLG)和P(ELG-co-PLG)-b-PEG-b-P(ELG-co-PLG) |
| 3.3.5 材料質(zhì)子化能力驗證 |
| 3.3.6 材料的二級結(jié)構(gòu) |
| 3.3.7 材料的臨界膠束濃度 |
| 3.3.8 膠束的粒徑和電位 |
| 3.3.9 膠束的微觀圖像 |
| 3.3.10 溶膠-凝膠相圖 |
| 3.3.11 水凝膠的pH可逆轉(zhuǎn)變 |
| 3.3.12 水凝膠的變溫核磁 |
| 3.3.13 水凝膠的微觀結(jié)構(gòu) |
| 3.3.14 水凝膠的力學(xué)強度 |
| 3.3.15 細(xì)胞毒性 |
| 3.3.16 水凝膠的生物降解性和生物相容性 |
| 3.4 結(jié)果與討論 |
| 3.4.1 PLG及PLGNCA的合成 |
| 3.4.2 AMP的合成 |
| 3.4.3 mPEG-b-P(ELG-co-PLG)和P(ELG-co-PLG)-b-PEG-b-P(ELG-co-PLG)的合成 |
| 3.4.4 EG_(45)(E_xPA_y)_m和(E_xPA_y)_mEG_(45)(E_xPA_y)_m的合成 |
| 3.4.5 材料質(zhì)子化能力驗證 |
| 3.4.6 溫度和pH響應(yīng)成膠 |
| 3.4.7 溶膠-凝膠相圖 |
| 3.4.8 水凝膠的流變學(xué)測試 |
| 3.4.9 水凝膠的黏附性 |
| 3.4.10 水凝膠的成膠機制 |
| 3.4.11 生物降解性和生物相容性 |
| 3.5 本章小結(jié) |
| 第4章 可質(zhì)子化雙響應(yīng)聚氨基酸水凝膠遞送Dox和ISMN用于黑色素瘤治療 |
| 4.1 引言 |
| 4.2. 實驗材料及測試方法 |
| 4.2.1 試劑 |
| 4.2.2 測試儀器及方法 |
| 4.2.3 實驗動物 |
| 4.3 實驗方法 |
| 4.3.1 mPEG-b-P(ELG-co-PLG/AMP)合成 |
| 4.3.2 水凝膠的溫度刺激響應(yīng)性 |
| 4.3.3 水凝膠及載藥水凝膠的力學(xué)強度 |
| 4.3.4 載藥水凝膠的微觀結(jié)構(gòu) |
| 4.3.5 水凝膠的體外降解和藥物釋放 |
| 4.3.6 水凝膠的生物降解性和生物相容性 |
| 4.3.7 水凝膠的緩沖作用 |
| 4.3.8 M1和M2極化 |
| 4.3.9 ISMN的細(xì)胞毒性 |
| 4.3.10 劃痕實驗 |
| 4.3.11 CRT檢測 |
| 4.3.12 載帶ISMN可質(zhì)子化水凝膠對腫瘤內(nèi)血管和乏氧的影響 |
| 4.3.13 載藥可質(zhì)子化水凝膠的抑瘤效果 |
| 4.4 結(jié)果與討論 |
| 4.4.1 水凝膠和載藥水凝膠的溫度刺激響應(yīng)性 |
| 4.4.2 水凝膠的體外降解和藥物釋放 |
| 4.4.3 水凝膠的體內(nèi)降解和生物相容性 |
| 4.4.4 水凝膠的緩沖能力 |
| 4.4.5 ISMN對細(xì)胞的影響 |
| 4.4.6 CRT表達(dá) |
| 4.4.7 載ISMN可質(zhì)子化雙響應(yīng)水凝膠對腫瘤乏氧情況的影響 |
| 4.4.8 載Dox和ISMN可質(zhì)子化雙響應(yīng)水凝膠的抑瘤效果 |
| 4.5 本章小結(jié) |
| 第5章 全文總結(jié)與展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的其他研究成果 |
（8）成人原發(fā)免疫性血小板減少癥的治療進(jìn)展（論文提綱范文）
| 英漢縮略語名詞對照 |
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 1 發(fā)病機制 |
| 2 診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 3 分類 |
| 4 治療現(xiàn)狀 |
| 5 結(jié)語 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀碩士期間發(fā)表的論文 |
（9）灌注竹葉提取物對不同環(huán)境溫度下小鼠物質(zhì)代謝的影響（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要符號對照表 |
| 第1章 前言 |
| 1.1 冷應(yīng)激的研究現(xiàn)狀 |
| 1.1.1 冷應(yīng)激的概念及其生理反應(yīng)機制 |
| 1.1.2 冷應(yīng)激對動物機體的影響 |
| 1.1.2.1 冷應(yīng)激對糖代謝的影響 |
| 1.1.2.2 冷應(yīng)激對脂質(zhì)代謝的影響 |
| 1.1.2.3 冷應(yīng)激對氨基酸代謝的影響 |
| 1.1.2.4 冷應(yīng)激對核苷酸代謝的影響 |
| 1.2 植物抗冷應(yīng)激的相關(guān)研究 |
| 1.3 竹葉提取物抗應(yīng)激相關(guān)研究進(jìn)展 |
| 1.3.1 竹葉提取物的抗氧化應(yīng)激研究 |
| 1.3.2 竹葉提取物的抗熱應(yīng)激研究 |
| 1.3.3 竹葉提取物的抗冷應(yīng)激研究 |
| 1.4 代謝組學(xué)的研究進(jìn)展 |
| 1.4.1 代謝組學(xué)的概念 |
| 1.4.2 代謝組學(xué)的分析方法 |
| 1.4.3 代謝組學(xué)的應(yīng)用 |
| 1.5 大熊貓主食竹代謝產(chǎn)物相關(guān)研究進(jìn)展 |
| 1.6 秦嶺大熊貓冬季的覓食生態(tài)學(xué)研究 |
| 1.7 研究目的及意義 |
| 1.8 技術(shù)路線 |
| 第2章 材料與方法 |
| 2.1 實驗材料 |
| 2.1.1 實驗原料 |
| 2.1.2 實驗動物 |
| 2.1.3 主要儀器及設(shè)備 |
| 2.1.4 主要試劑 |
| 2.2 實驗方法 |
| 2.2.1 巴山木竹葉提取物的制備 |
| 2.2.2 巴山木竹葉提取物混懸液的制備 |
| 2.2.3 實驗動物分組及處理 |
| 2.2.4 血清樣本的采集和制備 |
| 2.2.5 樣品前處理 |
| 2.2.6 LC/MS分析及條件設(shè)定 |
| 2.2.7 數(shù)據(jù)處理和模式識別 |
| 第3章 結(jié)果 |
| 3.1 數(shù)據(jù)質(zhì)量評估 |
| 3.2 數(shù)據(jù)模式識別 |
| 3.2.1 PCA分析 |
| 3.2.1.1 總體PCA分析 |
| 3.2.1.2 NT+CON組和NT+BLE組的PCA分析 |
| 3.2.1.3 NT+CON 組和LT+CON 組的PCA分析 |
| 3.2.1.4 LT+CON組和LT+BLE組的PCA分析 |
| 3.2.2 OPLS-DA分析 |
| 3.2.2.1 NT+CON組和NT+BLE組的OPLS-DA分析 |
| 3.2.2.2 NT+CON 組和LT+CON 組的OPLS-DA分析 |
| 3.2.2.3 LT+CON組和LT+BLE組的OPLS-DA分析 |
| 3.2.3 OPLS-DA模型檢驗 |
| 3.2.3.1 NT+CON組和NT+BLE組的OPLS-DA檢驗 |
| 3.2.3.2 NT+CON 組和LT+CON 組的OPLS-DA檢驗 |
| 3.2.3.3 LT+CON組和LT+BLE組的OPLS-DA檢驗 |
| 3.3 差異代謝物的篩選 |
| 3.3.1 NT+CON組和NT+BLE組的差異代謝物篩選 |
| 3.3.2 NT+CON 組和LT+CON 組的差異代謝物篩選 |
| 3.3.3 LT+CON組和LT+BLE組的差異代謝物篩選 |
| 3.4 差異代謝物的功能注釋 |
| 3.4.1 NT+CON組和NT+BLE組的注釋 |
| 3.4.2 NT+CON 組和LT+CON 組組的注釋 |
| 3.4.3 LT+CON組和LT+BLE組的注釋 |
| 3.5 KEGG富集分析 |
| 3.5.1 NT+CON組和NT+BLE組的KEGG富集 |
| 3.5.2 NT+CON 組和LT+CON 組的KEGG富集 |
| 3.5.3 LT+CON組和LT+BLE組的KEGG富集 |
| 第4章 討論 |
| 4.1 常溫灌注BLE對小鼠物質(zhì)代謝的影響 |
| 4.1.1 差異代謝物與糖代謝 |
| 4.1.2 差異代謝物與脂質(zhì)代謝 |
| 4.1.3 差異代謝物與氨基酸代謝 |
| 4.1.4 差異代謝物與輔助因子代謝 |
| 4.1.5 差異代謝物與微生物代謝 |
| 4.2 低溫處理對小鼠物質(zhì)代謝的影響 |
| 4.2.1 低溫處理對糖代謝的影響 |
| 4.2.2 低溫處理對脂質(zhì)代謝的影響 |
| 4.2.3 低溫處理對氨基酸代謝的影響 |
| 4.2.4 低溫處理對核苷酸代謝的影響 |
| 4.2.5 冷應(yīng)激對腸道菌群影響 |
| 4.3 灌注BLE對冷應(yīng)激小鼠物質(zhì)代謝的影響 |
| 第5章 結(jié)論及有待進(jìn)一步研究的問題 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 致謝 |
| 在學(xué)期間的科研情況 |
（10）虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及實驗驗證研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 研究工作的背景與意義 |
| 1.2 國內(nèi)外研究進(jìn)展 |
| 1.2.1 虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的研究概況 |
| 1.2.1.1 虎杖的傳統(tǒng)認(rèn)識 |
| 1.2.1.2 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的概況 |
| 1.2.1.3 虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的臨床應(yīng)用 |
| 1.2.1.4 虎杖的化學(xué)成分研究 |
| 1.2.1.5 虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥效學(xué)研究進(jìn)展 |
| 1.2.1.6 虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的分子機制研究進(jìn)展 |
| 1.2.2 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究方法概況 |
| 1.2.2.1 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的理論 |
| 1.2.2.2 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)常用的數(shù)據(jù)庫和軟件 |
| 1.2.2.3 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的應(yīng)用 |
| 1.2.2.4 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)存在的不足 |
| 1.2.3 TLR4/NF-κB信號通路 |
| 1.3 本文的主要貢獻(xiàn)與創(chuàng)新 |
| 1.4 本論文的結(jié)構(gòu)安排 |
| 1.4.1 文章結(jié)構(gòu) |
| 1.4.2 研究內(nèi)容流程圖 |
| 第二章 虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究 |
| 2.1 數(shù)據(jù)庫和軟件 |
| 2.1.1 數(shù)據(jù)庫 |
| 2.1.2 軟件 |
| 2.2 實驗方法 |
| 2.2.1 虎杖活性成分的篩選 |
| 2.2.2 活性成分靶點預(yù)測 |
| 2.2.3 RA疾病靶點預(yù)測 |
| 2.2.4 虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的潛在作用靶點預(yù)測 |
| 2.2.5 藥物-活性成分-靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 |
| 2.2.6 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建和關(guān)鍵靶點篩選 |
| 2.2.7 GO功能和KEGG通路富集分析 |
| 2.2.8 藥物-活性成分-靶點-通路網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 |
| 2.3 實驗結(jié)果 |
| 2.3.1 虎杖活性成分的篩選 |
| 2.3.2 活性成分靶點預(yù)測 |
| 2.3.3 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病靶點預(yù)測 |
| 2.3.4 虎杖活性成分治療RA的潛在作用靶點預(yù)測 |
| 2.3.5 藥物-活性成分-靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 |
| 2.3.6 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建和關(guān)鍵靶點篩選 |
| 2.3.7 GO功能富集分析 |
| 2.3.8 KEGG通路富集分析 |
| 2.3.9 藥物-活性成分-靶點-通路網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 |
| 2.4 討論 |
| 2.5 本章小結(jié) |
| 第三章 MH7A細(xì)胞培養(yǎng)及虎杖有效成分對細(xì)胞增殖的影響 |
| 3.1 實驗材料 |
| 3.1.1 細(xì)胞株 |
| 3.1.2 實驗試劑 |
| 3.1.3 實驗儀器與耗材 |
| 3.2 實驗方法 |
| 3.2.1 實驗試劑的配制 |
| 3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng) |
| 3.2.3 DMSO對 MH7A細(xì)胞增殖的影響 |
| 3.2.4 虎杖有效成分對MH7A細(xì)胞增殖的影響 |
| 3.3 數(shù)據(jù)處理及分析 |
| 3.4 實驗結(jié)果 |
| 3.4.1 DMSO對 MH7A細(xì)胞增殖的影響 |
| 3.4.2 虎杖有效成分對MH7A細(xì)胞增殖的影響 |
| 3.5 本章小結(jié) |
| 第四章 基于TLR4/NF-κB信號通路研究虎杖有效成分分子機制 |
| 4.1 實驗材料 |
| 4.1.1 實驗試劑 |
| 4.1.2 實驗儀器 |
| 4.1.3 實驗試劑的配制 |
| 4.2 有效成分對MH7A細(xì)胞炎癥因子分泌的影響 |
| 4.2.1 實驗方法 |
| 4.2.2 實驗結(jié)果 |
| 4.3 有效成分對MH7A細(xì)胞TLR4/NF-κB信號通路蛋白表達(dá)的影響 |
| 4.3.1 實驗方法 |
| 4.3.1.1 細(xì)胞總蛋白提取 |
| 4.3.1.2 蛋白濃度測定 |
| 4.3.1.3 SDS-PAGE電泳 |
| 4.3.1.4 轉(zhuǎn)膜 |
| 4.3.1.5 免疫反應(yīng) |
| 4.3.1.6 顯色 |
| 4.3.1.7 凝膠圖像分析 |
| 4.3.2 實驗結(jié)果 |
| 4.4 本章小結(jié) |
| 第五章 全文總結(jié)與展望 |
| 5.1 全文總結(jié) |
| 5.2 研究展望 |
| 致謝 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 攻讀碩士學(xué)位期間取得的成果 |
四、低劑量干擾素口腔粘膜施藥對乙型肝炎患者血漿細(xì)胞因子及細(xì)胞免疫功能的影響（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]基于肝竇內(nèi)皮細(xì)胞微尺度生物力學(xué)性質(zhì)研究芪術(shù)顆?？垢卫w維化機制[D]. 張強. 中國中醫(yī)科學(xué)院, 2021
- [2]濕熱中阻方對脾胃濕熱小鼠炎癥因子和免疫功能的影響研究[D]. 曹路. 長春中醫(yī)藥大學(xué), 2021(01)
- [3]培元補腎安胎方治療RSA的臨床研究及基于內(nèi)膜衰老的藥物機制研究[D]. 奚婷. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2021(01)
- [4]亞甲藍(lán)對新生小鼠脾臟T細(xì)胞免疫功能影響的研究[D]. 黃佳麗. 南方醫(yī)科大學(xué), 2021
- [5]基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討益腎活血方調(diào)節(jié)PI3K/AKT/HIF-1α信號通路抗腎纖維化的機制研究[D]. 方桂玉. 廣西中醫(yī)藥大學(xué), 2021
- [6]CA4納米粒子聯(lián)合DC101協(xié)同抗PD-1抗體增強肝癌治療療效及機制研究[D]. 鮑欣. 吉林大學(xué), 2021(01)
- [7]刺激響應(yīng)聚氨基酸水凝膠的制備及其抗腫瘤應(yīng)用研究[D]. 時瑩歌. 中國科學(xué)技術(shù)大學(xué), 2021(09)
- [8]成人原發(fā)免疫性血小板減少癥的治療進(jìn)展[D]. 駱廷蘭. 重慶醫(yī)科大學(xué), 2021(01)
- [9]灌注竹葉提取物對不同環(huán)境溫度下小鼠物質(zhì)代謝的影響[D]. 劉興麗. 西華師范大學(xué), 2021
- [10]虎杖治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及實驗驗證研究[D]. 唐榮霜. 電子科技大學(xué), 2021(01)