一、脾虛證大鼠肝、脾組織蛋白激酶C活性變化的比較研究（論文文獻(xiàn)綜述）
任妍,周鳳華[1]（2021）在《基于脂代謝穩(wěn)態(tài)探討從肝脾論治阿爾茨海默病的中醫(yī)途徑與科學(xué)內(nèi)涵》文中研究說明阿爾茨海默?。ˋlzheimer disease,AD）是最常見的老年神經(jīng)退行性疾病,以神經(jīng)細(xì)胞外β-淀粉樣蛋白（Amyloid β-protein,Aβ）異常沉積與神經(jīng)元纖維纏結(jié)為典型病理特征。研究顯示,脂代謝紊亂會(huì)導(dǎo)致Aβ異常沉積與神經(jīng)元纖維纏結(jié),是影響AD遺傳和共病的重要途徑,在AD發(fā)病機(jī)制中起重要作用。中醫(yī)認(rèn)為肝脾兩臟與脂代謝關(guān)系密切,其功能失調(diào)會(huì)導(dǎo)致脂代謝紊亂。從肝脾論治能顯著調(diào)節(jié)體內(nèi)脂代謝紊亂,可能會(huì)成為中醫(yī)防治AD的重要治法。因此,本文主要探討從肝脾論治通過靶向調(diào)節(jié)脂代謝從而有效防治AD,旨在為AD的防治提供一種全新的思路和視角。
李諾[2]（2020）在《慢性萎縮性胃炎病證結(jié)合模型肝組織病理及能量代謝變化》文中認(rèn)為1研究目的:探討慢性萎縮性胃炎（CAG）病證結(jié)合大鼠肝組織病理及功能變化特征。觀察CAG病證結(jié)合模型大鼠PI3K/Akt信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)變化,初步探討中醫(yī)脾虛的本質(zhì)。2實(shí)驗(yàn)方法:實(shí)驗(yàn)由四部分組成。（1）以雄性Wistar大鼠為實(shí)驗(yàn)材料,采用“四因素”綜合造模法制備慢性萎縮性胃炎病證結(jié)合大鼠模型。用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物證候綜合評(píng)價(jià)量表分別采集造模第28周和40周大鼠的證候要素,綜合評(píng)價(jià)造模是否成功。（2）在造模成功基礎(chǔ)上,用全自動(dòng)檢測(cè)生化儀檢測(cè)大鼠外周血天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、血糖（GLU）、總膽固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）水平,分析CAG病證結(jié)合模型大鼠肝功及糖脂代謝的影響。（3）應(yīng)用HE染色、過碘酸-希夫染色,硝基藍(lán)四氮唑染色檢測(cè)CAG病證結(jié)合模型大鼠肝組織病理變化。（4）應(yīng)用免疫組化和western blot法檢測(cè)CAG病證結(jié)合模型大鼠PI3Kp85α、Akt、COXⅣ變化,初步探討CAG病證結(jié)合模型大鼠肝臟能量代謝改變的機(jī)制。3實(shí)驗(yàn)結(jié)果:造模28周,CAG大鼠表現(xiàn)為脾氣虛證候特征;造模40周,CAG大鼠出現(xiàn)脾虛為主、兼有血瘀的證候特征。與正常組比較,造模28周大鼠血清ALT和AST水平顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;造模40周,大鼠血清ALT水平仍顯著增高（P<0.05）,而AST水平變化不顯著（P>0.05）;造模28周大鼠血清GLU水平比正常組顯著增高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,造模40周大鼠血清GLU水平較正常組顯著增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與正常組相比,模型組28周大鼠血清TG、CHO、HDL水平顯著降低,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,血清LDL水平雖有增高,但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,模型組40周大鼠血清LDL水平顯著高于正常組,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,模型組40周大鼠血清TG、CHO、HDL水平顯著低于正常組,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與模型組第28周比較,造模第40周大鼠血清TG、CHO、HDL水平雖有降低降低,但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,血清LDL水平顯著增高,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。組織病理學(xué)觀察:造模28周時(shí),肝細(xì)胞索排列紊亂,肝細(xì)胞腫脹;肝組織呈現(xiàn)斑狀糖原缺失區(qū),中央靜脈周圍肝細(xì)胞的SDH含量顯著減少;透射電鏡下,肝細(xì)胞內(nèi)線粒體腫脹、變形,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減少,糖原顆粒減少,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)空泡樣改變。造模40周,肝細(xì)胞萎縮,肝血竇變小,炎性細(xì)胞數(shù)量增多;肝組織糖原缺失區(qū)顯著擴(kuò)大,肝小葉大部分呈現(xiàn)SDH含量減少的趨勢(shì);透射電鏡下,肝細(xì)胞內(nèi)線粒體腫脹、膨大、數(shù)量顯著減少,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)顯著減少,糖原顆粒數(shù)量顯著減少。與正常組比較,造模第40周大鼠肝臟PI3Kp85α蛋白相對(duì)含量增高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Akt蛋白相對(duì)含量顯著降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與正常對(duì)照組比較,第40周模型組大鼠肝組織COXIV蛋白含量顯著降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。4結(jié)論:CAG“四因素”綜合造模法能成功制備CAG病證結(jié)合大鼠模型且大鼠肝臟功能、糖脂代謝和組織病理均有顯著變化,表現(xiàn)為:轉(zhuǎn)氨酶水平增高,肝糖原合成、儲(chǔ)備減弱,血糖升高,膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白增高,低密度脂蛋白降低,線粒體腫脹、數(shù)量減少、氧化磷酸化功能減弱。CAG病證結(jié)合模型大鼠存在PI3K/Akt信號(hào)通路及COX Ⅳ蛋白低表達(dá)現(xiàn)象。
段永強(qiáng)[3]（2014）在《Ca2+/CaM信號(hào)通路在大鼠脾虛證軀體泛化效應(yīng)中的響應(yīng)及益氣健脾中藥干預(yù)研究》文中認(rèn)為研究背景中醫(yī)學(xué)所論述的“脾”是一個(gè)功能性結(jié)構(gòu)單位,從“脾”的生理功能來分析,包括了胃腸、胰腺、肝膽、脾臟甚至大腦等臟器的部分生理功能,是一個(gè)多系統(tǒng)、多器官的綜合功能單位；而在病機(jī)演變上,中醫(yī)“脾虛證”的發(fā)生涉及消化、免疫、內(nèi)分泌、神經(jīng)、運(yùn)動(dòng)等系統(tǒng)生理功能的紊亂；研究表明益氣健脾類單味中藥或復(fù)方（如人參、黨參、黃芪、紅芪以及四君子湯、六君子湯、補(bǔ)中益氣湯等）對(duì)脾虛證具有良好的防治作用。生命系統(tǒng)觀以及細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)理論認(rèn)為,生命現(xiàn)象（生理活動(dòng)和病理狀態(tài)）的發(fā)生本質(zhì)上都是機(jī)體內(nèi)外和不同系統(tǒng)、不同組織細(xì)胞之間多種細(xì)胞信號(hào)傳遞或相互影響的結(jié)果（即整合生理學(xué)和整合病理學(xué)）,這種認(rèn)識(shí)與中醫(yī)藥學(xué)的整體觀念、五臟一體觀等理論內(nèi)涵相一致。其中Ca2+/CaM信號(hào)通路中的關(guān)鍵分子具有多種生物學(xué)功能,并且與調(diào)節(jié)細(xì)胞各種酶的活性、調(diào)節(jié)肌肉收縮和舒張、調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)功能、參與刺激分泌藕聯(lián)、調(diào)節(jié)糖代謝、調(diào)節(jié)前列腺素和胰島素合成與釋放、增強(qiáng)大腦記憶等生理作用密切相關(guān)。近年來學(xué)界對(duì)脾虛證實(shí)質(zhì)的研究體現(xiàn)出從多系統(tǒng)、多臟器、多角度、多層次（細(xì)胞、分子和基因水平）研究的趨勢(shì)。從中醫(yī)臨床證候?qū)W的角度來分析,“脾虛”癥候要素包括：面色淡白或萎黃,納呆食少而運(yùn)化遲滯、腹脹或腹瀉、食后脹甚、神疲乏力、少氣懶言、肢體倦怠、嚴(yán)重者則形體消瘦、肌肉萎縮、倦怠少動(dòng)、惡風(fēng)易感、體虛多病、或肥胖浮腫、舌淡苔白、脈細(xì)或沉弱等“體虛”之證,涉及消化、神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫、物質(zhì)代謝、運(yùn)動(dòng)等系統(tǒng)生理功能的紊亂或低下,故“脾虛證”證候要素具有軀體泛化的趨勢(shì)和效應(yīng)?，F(xiàn)代研究證明Ca2+/CaM-CaMⅡ信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在多種疾病發(fā)生、多臟器功能紊亂中具有重要作用,而且基于上述Ca2+/CaM信號(hào)通路的生物學(xué)功能和脾虛證相關(guān)研究可以推測(cè)：Ca2+/CaM相關(guān)信號(hào)通路的生物學(xué)功能可能與中醫(yī)所論述的“脾主運(yùn)化、主統(tǒng)血、在體合肌肉主四肢、在志為思”等理論內(nèi)涵具有一定的相關(guān)性,但相關(guān)探討尚處于初步研究階段。研究目的本文基于中醫(yī)整體觀念,以“脾虛證”的臨床證候要素和病機(jī)演變規(guī)律研究為基礎(chǔ),提出“脾虛證軀體泛化效應(yīng)”的證候模式,并根據(jù)Ca2+/CaM相關(guān)信號(hào)通路生物學(xué)功能的認(rèn)識(shí),建立"Ca2+/CaM細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在脾虛證軀體泛化效應(yīng)中的可能作用”工作假說,以期從Ca2+/CaM細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑角度深入研究脾虛證病機(jī)內(nèi)涵、證候基礎(chǔ)以及紅芪提取物、四君子湯對(duì)該信號(hào)通路關(guān)鍵分子的干預(yù)作用。研究方法采用綜合法（苦寒耗氣法+游泳力竭法+饑飽失常法）建立脾虛證大鼠模型,并應(yīng)用紅芪提取物和四君子湯反證治療。通過檢測(cè)大鼠一般生存狀態(tài)、每日平均攝食量和每日平均體質(zhì)增加量、游泳耐力時(shí)間、胃殘留率和小腸推進(jìn)率、血清D-木糖含量、小腸組織胃腸激素GAS、MOT、SS、VIP含量等指標(biāo)評(píng)估脾虛證大鼠模型。在成功建立脾虛證大鼠模型的基礎(chǔ)上,檢測(cè)脾虛證發(fā)生過程中以及益氣健脾中藥（紅芪提取物、四君子湯）干預(yù)后各組大鼠空腹血糖、血清胰島素水平以及不同臟器（小腸、胰腺、骨骼肌、肝）組織代謝相關(guān)酶活性的變化；采用激光共聚焦技術(shù)檢測(cè)各組大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織游離鈣離子（[Ca2+]i）濃度；采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和蛋白免疫印跡技術(shù)檢測(cè)各組大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織Ca2+/CaM信號(hào)通路中CaM、CaMKⅡ基因和CaM、CaMKⅡ、磷酸化CaMKⅡ相關(guān)蛋白差異表達(dá)變化規(guī)律。研究結(jié)果1.脾虛組大鼠隨著造模時(shí)間的延長,逐漸出現(xiàn)怠動(dòng)少食、被毛稀疏、消瘦拱背、動(dòng)作遲緩,并伴見每日攝食量減少,體重增加緩慢、排便次數(shù)增多、肛周污穢,部分動(dòng)物出現(xiàn)脫肛等“脾虛”癥狀,脾虛證宏觀證候積分顯著升高,而且游泳耐力時(shí)間明顯下降（P<0.05）,胃殘留率升高而小腸推進(jìn)率降低（P<0.05）,血清D-木糖含量降低（P<0.05）,且以脾虛模型21d組變化顯著（P<0.05）；2.脾虛7d組大鼠空腹血糖、血清胰島素水平雖有降低趨勢(shì),但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）,隨著造模時(shí)間的延長,脾虛模型14d、21d組大鼠空腹血糖和血清胰島素水平有明顯下降趨勢(shì),以脾虛模型21d組變化顯著（P<0.05）；隨著造模時(shí)間的延長,脾虛組大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織Na+-K+-ATPase、 Ca2+-Mg2+-ATPase和SDH活性顯著下降（P<0.05）,LDH活性顯著升高（P<0.05）；與空白組比較,脾虛7d組大鼠小腸組織GAS、MOT有降低趨勢(shì),SS和VIP含量有升高趨勢(shì),但組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）,模型21d組大鼠小腸組織GAS、MOT顯著降低,SS和VIP含量顯著升高,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05,P<0.01）。3.脾虛21d組大鼠小腸組織[Ca2+]i濃度顯著升高（P<0.05）,但胰腺、骨骼肌和肝組織[Ca2+]i濃度顯著降低（P<0.05）,同時(shí)小腸組織Ca2+/CaM信號(hào)通路關(guān)鍵分子CaM、CaMKⅡ基因以及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ表達(dá)上調(diào)（P<0.05）,而胰腺、骨骼肌和肝組織CaM、CaMKⅡ基因以及CaM、CaMKⅡ, p-CaMKⅡ表達(dá)下調(diào)（P<0.05）。4.紅芪提取物、四君子湯能夠明顯改善脾虛大鼠一般生存狀態(tài),提高游泳耐力時(shí)間和血清D-木糖含量,降低胃殘留率,提高小腸推進(jìn)率（P<0.05）,升高小腸胃腸激素GAS、MOT水平,降低SS、VIP水平（P<0.05）,且以四君子湯作用顯著。5.紅芪提取物、四君子湯能夠明顯提高脾虛大鼠空腹血糖、血清胰島素水平（P<0.05）,提高小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase和SDH活性（P<0.05）,降低LDH活性（P<0.05）,并以四君子湯作用顯著。6.紅芪提取物、四君子湯能夠明顯降低小腸組織[Ca2+]i濃度（P<0.05）,升高胰腺、骨骼肌和肝組織[Ca2+]i濃度；同時(shí)紅芪提取物、四君子湯均能下調(diào)小腸組織CaM、CaMKⅡ基因以及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)（P<0.05）,上調(diào)胰腺、骨骼肌和肝組織CaM、CaMKⅡ基因以及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)（P<0.05）,且以四君子湯作用顯著。研究結(jié)論1.采用苦寒破氣法、游泳力竭法和饑飽失常法能夠成功復(fù)建較為理想的脾虛證動(dòng)物模型,表現(xiàn)為脾虛大鼠一般生存狀況較正常大鼠差,隨著造模時(shí)間的延長,模型大鼠逐漸出現(xiàn)平均每日攝食量減少,體重增長緩慢、肛溫降低且游泳耐力時(shí)間下降,脾虛證宏觀證候積分顯著升高；脾虛證大鼠胃殘留率升高而小腸推進(jìn)率減低,血清D-木糖、空腹血糖、血清胰島素水平下降；胃腸激素GAS、MOT、SS、VIP分泌紊亂,且造模時(shí)間以21d為宜。2.脾虛證大鼠空腹血糖、血清胰島素水平下降,存在糖代謝功能低下；小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+ATPase和SDH活性顯著下降,LDH活性顯著升高,提示脾虛證大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織細(xì)胞能量代謝紊亂。3. Ca2+/CaM-CaMKⅡ信號(hào)通路在脾虛證病程中存在表達(dá)差異,在小腸組織以高表達(dá)為主：[Ca2+]i濃度升高,CaM、CaMKⅡ基因和CaM、CaMKⅡ, p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)上調(diào)；而在胰腺、骨骼肌、肝臟組織中[Ca2+]i濃度降低,CaM、CaMKⅡ基因和CaM、CaMKⅡ, p-CaMKⅡ蛋白以低表達(dá)為主。4.脾虛證軀體泛化效應(yīng)的發(fā)生涉及機(jī)體糖代謝平衡紊亂,而且伴有小腸、胰腺和骨骼肌能量代謝紊亂,Ca2+/CaM-CaMKⅡ信號(hào)通路關(guān)鍵分子在脾虛大鼠不同組織中存在差異表達(dá)。5.紅芪提取物、四君子湯均能改善脾虛大鼠一般生存狀態(tài),延長游泳耐力時(shí)間,調(diào)節(jié)胃腸激素GAS、MOT、SS、VIP分泌和胃腸轉(zhuǎn)運(yùn)功能；提高脾虛大鼠空腹血糖、血清胰島素水平及小腸、胰腺、骨骼肌、肝組織能量代謝相關(guān)酶活性,調(diào)節(jié)小腸、胰腺、骨骼肌、肝組織CaM、CaMKⅡ基因和CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ蛋白正常表達(dá),且以四君子湯作用顯著,說明中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下的中藥復(fù)方四君子湯較單味藥紅芪提取物的干預(yù)作用更具有優(yōu)勢(shì)。
王雪姣[4]（2014）在《益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠肝、腎臟蛋白激酶C影響的實(shí)驗(yàn)研究》文中提出目的：觀察益氣健脾中藥和益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠體質(zhì)量，肝、腎臟重量，肝、腎臟器系數(shù)以及肝、腎臟蛋白激酶C（PKC）活性的變化，探討益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠肝、腎臟蛋白激酶C活性的影響。材料與方法：1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與細(xì)胞株清潔級(jí)裸小鼠40只，20±2g/只，購于中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（遼）2008-0005。飼料為SPF級(jí)，購于中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，并購入無菌墊料。人胃癌SGC-7901細(xì)胞株，購于中國醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞庫。2.實(shí)驗(yàn)方法（1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理40只裸小鼠中隨機(jī)選取30只腋下接種人胃癌SGC-7901細(xì)胞株，將成瘤裸鼠隨機(jī)分為模型組，補(bǔ)脾對(duì)照組和補(bǔ)脾抗癌組，每組10只，剩余10只未種瘤裸鼠設(shè)為空白組?？瞻捉M予0.9%NaCl溶液治療；模型組予0.9%NaCl溶液；補(bǔ)脾對(duì)照組給予益氣健脾中藥；補(bǔ)脾抗癌組給予益氣健脾抗癌中藥合用?？瞻捉M及模型組用0.9%NaCl溶液0.4ml/天，灌胃14天。藥物組分別給予相應(yīng)中藥0.4ml/天，灌胃14天。（2）胃癌裸鼠模型的制備選擇對(duì)數(shù)生長期腫瘤細(xì)胞，細(xì)胞濃度調(diào)至107/ml，在裸鼠腋下接種腫瘤細(xì)胞0.1ml，相當(dāng)于106細(xì)胞/只鼠，整個(gè)操作過程均要求無菌操作，每天觀察腫瘤的生長情況[89]。接種15天后，以在接種部位出現(xiàn)腫瘤結(jié)節(jié)直徑達(dá)0.8cm，質(zhì)地較硬等指標(biāo)認(rèn)定為成瘤。（3）樣品采集及指標(biāo)檢測(cè)（a）實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，所有動(dòng)物脫頸處死，打開腹腔，剝離腹膜，取新鮮組織，用0.9%NaCl溶液洗去血跡，觀察動(dòng)物的肝、腎組織大體情況并稱重，計(jì)算臟器系數(shù)。臟器系數(shù)=臟器重量（g）/體質(zhì)量（g）×100%。（b）肝、腎PKC測(cè)定: Western blot法檢測(cè)蛋白表達(dá)。結(jié)果：1.裸鼠體質(zhì)量、肝重、腎重測(cè)量結(jié)果與空白組比較，模型組體質(zhì)量、肝重、腎重均明顯下降。與模型組比較，補(bǔ)脾對(duì)照組與補(bǔ)脾抗癌組體質(zhì)量、肝重、腎重均明顯上升，但補(bǔ)脾對(duì)照組與補(bǔ)脾抗癌組體質(zhì)量、肝重及腎重?zé)o明顯差別。2.裸鼠肝系數(shù)、腎系數(shù)計(jì)算結(jié)果與空白組比較，模型組肝系數(shù)、腎系數(shù)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組比較，補(bǔ)脾對(duì)照組和補(bǔ)脾抗癌組肝系數(shù)、腎系數(shù)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而補(bǔ)脾對(duì)照組和補(bǔ)脾抗癌組兩組組間各指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。3.裸鼠肝、腎臟中PKC表達(dá)的檢測(cè)結(jié)果與空白組比較模型組裸鼠肝臟、腎臟中PKC活性明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與模型組比較，補(bǔ)脾對(duì)照組和補(bǔ)脾抗癌組裸鼠肝臟、腎臟中PKC活性較模型組均下降且差異顯著（P＜0.01）。其中補(bǔ)脾抗癌組肝臟PKC活性下降較補(bǔ)脾組下降更為顯著（P＜0.01），PKC活性基本恢復(fù)至空白組水平；補(bǔ)脾抗癌組腎臟PKC活性下降較補(bǔ)脾組下降更為顯著（P＜0.01），但與空白組比較仍存在差異（P＜0.05）。結(jié)論：1.胃癌裸鼠存在脾虛癥狀。2.益氣健脾和益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠體質(zhì)量、肝重、腎重、肝系數(shù)、腎系數(shù)具有調(diào)節(jié)作用。3.益氣健脾和益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠肝、腎臟中PKC具有調(diào)節(jié)作用。4.益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠肝、腎臟PKC的調(diào)節(jié)作用優(yōu)于益氣健脾中藥。
王雪姣,殷東風(fēng),唐廣義[5]（2013）在《益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠肝腎臟蛋白激酶C影響的實(shí)驗(yàn)研究》文中指出目的探討益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠肝臟和腎臟蛋白激酶C活性的影響。方法在40只裸小鼠中隨機(jī)選取30只腋下接種人胃癌SGC-7901細(xì)胞株,將成瘤裸鼠隨機(jī)分為模型組、補(bǔ)脾對(duì)照組和補(bǔ)脾抗癌組,每組10只,剩余10只未種瘤裸鼠設(shè)為空白組?？瞻捉M和模型組予0.9%NaCl溶液灌胃,補(bǔ)脾對(duì)照組予益氣健脾中藥灌胃,補(bǔ)脾抗癌組予益氣健脾合抗癌中藥灌胃。各組給予相應(yīng)的干預(yù)措施14天,觀察動(dòng)物的肝腎組織大體情況并稱重,計(jì)算臟器系數(shù),用Western Blot法檢測(cè)肝臟和腎臟PKC活性。結(jié)果與空白組比較,模型組瘤鼠肝系數(shù)、腎系數(shù)降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;與模型組比較,補(bǔ)脾對(duì)照組和補(bǔ)脾抗癌組肝系數(shù)、腎系數(shù)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。同時(shí)模型組肝臟和腎臟PKC活性較空白組明顯升高,補(bǔ)脾對(duì)照組和補(bǔ)脾抗癌組裸鼠肝臟和腎臟中PKC活性較模型組均下降（P<0.01）,其中補(bǔ)脾抗癌組較補(bǔ)脾對(duì)照組下降更為顯著（P<0.01）。結(jié)論胃癌瘤鼠存在脾虛癥狀,益氣健脾和益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠體質(zhì)量、肝重、腎重、肝系數(shù)、腎系數(shù),以及肝臟和腎臟中PKC活性均具有調(diào)節(jié)作用,且益氣健脾抗癌中藥對(duì)PKC的調(diào)節(jié)作用優(yōu)于益氣健脾中藥。
呂凌[6]（2012）在《基于蛋白質(zhì)組學(xué)的脾虛大鼠脾失健運(yùn)機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究》文中研究指明目的：在中醫(yī)脾藏象理論的指導(dǎo)下,引入蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究脾虛證脾失健運(yùn)的機(jī)理。在觀測(cè)脾虛大鼠血清胃泌素含量變化和血清淀粉酶、回腸組織琥珀酸脫氫酶和鈉鉀ATP酶活力變化的同時(shí),利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)全面系統(tǒng)地分析其回腸組織蛋白質(zhì)表達(dá)譜的變化,從系統(tǒng)生物學(xué)角度探討脾虛證脾失健運(yùn)的物質(zhì)基礎(chǔ)和發(fā)生機(jī)制。材料與方法：88只SPF級(jí)3月齡SD大白鼠隨機(jī)分成7組,即正常對(duì)照組、脾氣虛模型組、脾氣虛中藥對(duì)照組、脾陽虛模型組、脾陽虛中藥對(duì)照組、脾陰虛模型組和脾陰虛中藥對(duì)照組。造模期間各組大鼠采用標(biāo)準(zhǔn)固體飼料喂飼,模型組給藥的同時(shí)正常組灌飼等量生理鹽水。造模共計(jì)16天,1-8天采用勞倦過度結(jié)合飲食不節(jié)的方法建立脾氣虛模型；9-16天采用勞倦過度、飲食不節(jié)與藥物損傷相結(jié)合的方法建立脾陽虛、脾陰虛模型：在模型組造模成功的基礎(chǔ)上施加中藥治療,其中脾氣虛中藥對(duì)照組采用補(bǔ)中益氣湯治療,脾陽虛中藥對(duì)照組采用附子理中湯治療,脾陰虛中藥對(duì)照組采用理脾陰正方治療,具體方法為按1ml/100g劑量灌胃,日一次；在造模的第8天和第16天運(yùn)用模糊數(shù)學(xué)的方法對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià),符合納入標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)物取材備檢。形態(tài)學(xué)觀察方面,采用100×光鏡觀察各組大鼠胃和小腸病理學(xué)改變；生化指標(biāo)檢測(cè)方面,采用放射免疫方法測(cè)定血清胃泌素和血清淀粉酶的變化,用比色法測(cè)定琥珀酸脫氫酶和鈉鉀ATP酶活性的變化；回腸組織蛋白質(zhì)檢測(cè)方面,采用雙向電泳法分離差異表達(dá)的蛋白,凝膠銀染后經(jīng)選點(diǎn)、酶切和質(zhì)譜分析,用MASCOT軟件在蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫中搜索肽質(zhì)量指紋譜數(shù)據(jù)并確定蛋白質(zhì)。結(jié)果：1.與正常組比較,各模型組大鼠血清淀粉酶活力顯著降低（P<0.01）,其中脾陽虛模型組降低幅度最大,其次是脾氣虛模型組,脾陰虛模型組降低幅度最?。桓髦兴帉?duì)照組經(jīng)中藥對(duì)證治療后血清淀粉酶活力有所增強(qiáng)。2.與正常組比較,各模型組大鼠血清胃泌素含量顯著增高（P<0.05）,其中脾陽虛模型組增高幅度最大（P<0.01）,其次是脾陰虛模型組（P<0.01）,脾氣虛模型組大鼠增高幅度最小（P<0.05）；各中藥對(duì)照組經(jīng)中藥對(duì)證治療后血清胃泌素含量均有降低。3.100×光鏡下胃腸組織病理形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果顯示：①正常組大鼠胃底黏膜各層結(jié)構(gòu)完整,紋理清晰；回腸組織黏膜內(nèi)腺體排列整齊；②各模型組大鼠胃底黏膜結(jié)構(gòu)紊亂,結(jié)構(gòu)不清,可見壞死滲出等病理改變；回腸絨毛變矮或消失,可見炎性細(xì)胞浸潤、黏膜水腫；③各中藥對(duì)照組經(jīng)對(duì)證治療后胃腸組織結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常,未見明顯破壞。4.與正常組比較,各模型組大鼠Na+-K+-ATPase活力顯著降低（P<0.01）,其中脾氣虛模型組降低幅度最大,其次是脾陽虛模型組,脾陰虛模型組降低幅度最??；各中藥對(duì)照組經(jīng)中藥對(duì)證治療后Na+-K+-ATPase活力有所增強(qiáng)。5.與正常組比較,各模型組大鼠SDH活力均發(fā)生不同程度降低,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；各中藥對(duì)照組經(jīng)中藥對(duì)證治療后SDH活力有所增強(qiáng)。6.脾虛大鼠蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)了205個(gè)有差異性表達(dá)的蛋白點(diǎn),經(jīng)選點(diǎn)加酶切及質(zhì)譜鑒定,本次實(shí)驗(yàn)鑒定出22種與脾虛發(fā)生相關(guān)的蛋白質(zhì),其中7種蛋白表達(dá)下調(diào),15種蛋白表達(dá)上調(diào)。脾氣虛模型組有3種蛋白質(zhì)差異性表達(dá),分別是表達(dá)下調(diào)的白蛋白,表達(dá)上調(diào)的胰蛋白酶和葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78；脾陽虛模型組有12種蛋白質(zhì)差異性表達(dá),分別是表達(dá)下調(diào)的角蛋白19、甘油醛三磷酸脫氫酶、肌動(dòng)蛋白和角蛋白1,表達(dá)上調(diào)的蛋白二硫鍵異構(gòu)酶A3、埃茲蛋白、假定未知蛋白、磷酸化應(yīng)激誘導(dǎo)蛋白、丙酮酸激酶、結(jié)蛋白、角蛋白8和蛋白質(zhì)異戊烯基轉(zhuǎn)移酶；脾陰虛模型組有7種蛋白質(zhì)差異性表達(dá),分別是表達(dá)下調(diào)的肌動(dòng)蛋白、熱休克蛋白,表達(dá)上調(diào)的鈣聯(lián)蛋白、烏頭酸水合酶、Papss2、過氧化氫酶和乙醇脫氫酶。結(jié)論：1.根據(jù)中醫(yī)病因理論,采用勞倦過度結(jié)合飲食不節(jié)的方法可成功誘導(dǎo)脾氣虛大鼠模型,在此基礎(chǔ)上施加藥物損傷法可以成功誘導(dǎo)脾陽虛和脾陰虛大鼠模型。2.脾失健運(yùn)可表現(xiàn)出血清淀粉酶、鈉鉀ATP酶、琥珀酸脫氫酶活力下降和血清胃泌素含量升高,提示脾失健運(yùn)與消化吸收功能減弱以及能量的合成代謝能力下降關(guān)系密切。3.脾失健運(yùn)主要與物質(zhì)代謝、組織構(gòu)成、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞死亡和增殖方面相關(guān)的蛋白質(zhì)功能異常有關(guān),其中絕大部分與糖、脂類、蛋白質(zhì)代謝過程密切相關(guān)。4.脾失健運(yùn)的發(fā)生與細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載和細(xì)胞膜損傷密切相關(guān)。在繼發(fā)性病理機(jī)制中,脾氣虛或與血液循環(huán)障礙關(guān)系更為密切,印證了中醫(yī)學(xué)“氣為血之帥”、“氣虛則血虛”的理論；脾陽虛或與細(xì)胞骨架損傷和糖代謝異常的關(guān)系更為密切,印證了中醫(yī)學(xué)“陽虛為氣虛之極”的理論；脾陰虛或與過氧化損傷的關(guān)系更為密切,印證了中醫(yī)學(xué)“氣虛日久傷陰”的理論。
宋雪嬌[7]（2011）在《脾陰虛證大鼠胃動(dòng)素、胃蛋白酶、水通道蛋白4及蛋白質(zhì)組學(xué)改變的實(shí)驗(yàn)研究》文中提出中醫(yī)學(xué)中認(rèn)為脾為后天之本,氣血生化之源泉,生命體離開母體之后獨(dú)立生存,身體生命物質(zhì)的獲得主要依賴于脾。結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn),不單整個(gè)消化系統(tǒng)功能有脾的參與,脾且作用于內(nèi)分泌、自主神經(jīng)、免疫以及血液等其他系統(tǒng)的代謝。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,脾陰為后天陰液之本,主濡養(yǎng),主散精,參與運(yùn)化,參與統(tǒng)血。近年來,學(xué)術(shù)界在血清、器官組織及應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)方面對(duì)脾陰虛證的探討日益加深。本研究以脾陰虛證為模型,采用健康組為對(duì)照,探討脾陰虛證發(fā)生發(fā)展過程中的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)。目的：本實(shí)驗(yàn)通過觀察脾陰虛證模型大鼠胃動(dòng)素（MTL）、胃蛋白酶、水通道蛋白4（APQ4）、及蛋白質(zhì)組學(xué)方面的改變,探討它們?cè)谄㈥幪撟C時(shí)出現(xiàn)異常改變的作用機(jī)制,為揭示脾陰虛證本質(zhì)及采用中醫(yī)藥治療脾陰虛證提供了科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。材料與方法：采用飲食不節(jié)加勞倦過度結(jié)合耗傷陰液的方法塑造脾陰虛證大鼠模型。16天后,觀察各組大鼠生理狀態(tài)。并以光鏡下觀察各組大鼠胃底組織與回腸組織的形態(tài)學(xué)改變；采用免疫組化方法,測(cè)得各組大鼠回腸組織APQ4的表達(dá)差異；采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法（ELISA法）,檢測(cè)各組大鼠血清中MTL含量的表達(dá)差異；采用比色法,測(cè)定各組大鼠十二指腸胃蛋白酶活性的表達(dá)差異；應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),鑒定健康對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組回腸組織蛋白表達(dá)差異。結(jié)果：1.胃動(dòng)素的ELISA檢測(cè)結(jié)果：與健康對(duì)照組比較,脾陰虛實(shí)驗(yàn)組和脾陰虛中藥反證組MTL的表達(dá)均出現(xiàn)明顯降低（P<0.01）；與實(shí)驗(yàn)組比較,脾陰虛中藥反證組MTL的表達(dá)提高（P<0.05）。2.胃蛋白酶的比色法檢測(cè)結(jié)果：與健康對(duì)照組比較,脾陰虛實(shí)驗(yàn)組胃蛋白酶的表達(dá)顯著降低（P<0.01）,脾陰虛中藥反證組胃蛋白酶的表達(dá)降低（P<0.05）；脾陰虛實(shí)驗(yàn)組與脾陰虛中藥反證組之間,胃蛋白酶的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.水通道蛋白4的免疫組化檢測(cè)結(jié)果：光鏡下觀察,健康對(duì)照組陽性顆粒的表達(dá)在上皮細(xì)胞中呈現(xiàn)較深的棕色,數(shù)量較多；與健康對(duì)照組比較,脾陰虛實(shí)驗(yàn)組中陽性顆粒的表達(dá)明顯減少,并呈現(xiàn)淺淡的棕色；脾陰虛中藥反證組較實(shí)驗(yàn)組陽性顆粒表達(dá)顯著增多,顏色偏于較深的棕色。4.蛋白質(zhì)組學(xué)的質(zhì)譜鑒定結(jié)果：與健康對(duì)照組比較,脾陰虛實(shí)驗(yàn)組發(fā)現(xiàn)8個(gè)差異表達(dá)蛋白點(diǎn)。結(jié)論：塑造脾陰虛證大鼠模型,造模后血清中MTL含量下降,回腸APQ4陽性細(xì)胞表達(dá)減弱,十二指腸胃蛋白酶活性降低,它們的異常改變可能與脾陰虛證發(fā)生的病理學(xué)機(jī)制有關(guān)。在蛋白質(zhì)組學(xué)方面,實(shí)驗(yàn)組回腸鑒定出蛋白差異點(diǎn),這些蛋白表達(dá)的異?？赡芘c脾陰虛證發(fā)生的分子生物學(xué)機(jī)制有關(guān)。參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的熱休克蛋白90,其作用于端粒酶而影響端粒的長度,基于蛋白質(zhì)組學(xué)理論的端粒長度縮短可能是脾陰虛證發(fā)生的分子生物學(xué)機(jī)制之一。
高琳[8]（2009）在《干姜不同有效部位對(duì)理中丸調(diào)節(jié)脾陽虛模型消化功能及能量代謝的影響》文中研究說明理中丸是張仲景治療脾陽虛證的傳統(tǒng)名方,由干姜、人參、白術(shù)、炙甘草四味藥組成,功能溫中散寒,補(bǔ)氣健脾。干姜作為理中丸的君藥,在全方的配伍結(jié)構(gòu)中處于核心地位,在對(duì)脾胃虛寒證的治療中發(fā)揮著關(guān)鍵性作用。為了從實(shí)驗(yàn)的角度對(duì)君藥在方劑中核心配伍地位的內(nèi)涵進(jìn)行揭示,本實(shí)驗(yàn)以理中丸中的君藥干姜作為研究切入點(diǎn),借助中醫(yī)脾陽虛證候模型,對(duì)干姜及其不同有效部位對(duì)理中丸調(diào)節(jié)消化吸收及能量代謝功能的影響進(jìn)行了比較研究,從藥味和化學(xué)成分群兩個(gè)層次的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的角度,對(duì)君藥干姜決定理中丸主要功效的核心地位進(jìn)行了揭示。全文共分為脾陽虛模型的制備和干姜及其成分對(duì)理中丸藥效學(xué)影響的比較兩大部分。1“石膏-知母”復(fù)合法脾陽虛模型的制備1.1目的以清熱瀉火藥石膏-知母代替常用的大黃、番瀉葉類苦寒瀉下藥,并結(jié)合饑飽失常、勞倦過度的方法進(jìn)行造模,以期建立更符合中醫(yī)“寒涼傷陽、饑飽傷氣和勞倦傷脾”致病思路的中醫(yī)脾陽虛證候模型。1.2方法模型動(dòng)物隔日足量喂食,每日在25℃水中游泳,直至大鼠連續(xù)三次吐泡下沉,或沉入水底,3秒內(nèi)不能自行浮出水面,并以三種不同給藥頻率灌胃給予石膏一知母煎液,比較石膏-知母不同給藥方法對(duì)制備脾陽虛模型的影響。方法1:造模1-6日隔日灌胃4℃的石膏-知母煎液（濃度為4:1,下同）,劑量為10ml/kg（下同）;造模7-12日,每同灌胃石膏-知母煎液,自然恢復(fù)15天。方法2:隔日灌胃給予4℃的石膏-知母煎液,劑量為10ml/kg,連續(xù)20天,自然恢復(fù)12天。方法3:每R灌胃給予4℃的石膏一知母煎液,2ml/只,連續(xù)12天,自然恢復(fù)9天。觀察造模動(dòng)物的一般生物學(xué)特征改變,檢測(cè)體溫、體重、食量的變化,以及血中D-木糖、6AS、MLT含量和腸組織中N0水平等與消化吸收功能及能量代謝相關(guān)指標(biāo)。1.3結(jié)果三種造模方法均能引起造模動(dòng)物一般生物學(xué)特征的改變,出現(xiàn)腹瀉、倦怠、體溫下降、體重減輕等表現(xiàn)。其中方法2的影響最小,模型動(dòng)物恢復(fù)較快;方法1和方法3都能造成模型動(dòng)物一般生物學(xué)特征的明顯改變,且以方法3引起的模型癥狀變化更加明顯且穩(wěn)定。在消化吸收及能量代謝的相關(guān)指標(biāo)方面,造模方法3能使血中GAS、MLT、D-木糖含量降至正常水平以下,使腸運(yùn)動(dòng)抑制性神經(jīng)遞質(zhì)NO的水平降低,體溫減低明顯、食量減低、體重增長減慢。造模方法1對(duì)消化吸收相關(guān)藥理指標(biāo)的改變與造模方法3的影響相似,但對(duì)模型動(dòng)物的體重和食量的影響不明顯;造模方法2除能使模型動(dòng)物的體重減輕外,對(duì)其他各指標(biāo)均無顯著影響。1.4結(jié)論對(duì)比實(shí)驗(yàn)采用的三種石膏-知母的給藥方法,方法3的造模效果最為顯著和穩(wěn)定,即以每日灌胃給藥,連續(xù)12天,恢復(fù)9天,是本實(shí)驗(yàn)證實(shí)的最有效的脾陽虛證候模型制備方法。2干姜及其不同有效部位對(duì)理中丸消化吸收功能及代謝的影響2.1目的通過對(duì)理中丸中君藥干姜,以及干姜中揮發(fā)性成分和水溶性成分對(duì)理中丸主要功效影響的研究,從藥味和化學(xué)成分群兩個(gè)層次,證實(shí)君藥干姜及干姜中的主要活性成分群對(duì)理中丸整體功效的決定性影響,以初步揭示理中丸中君藥核心地位的藥理學(xué)和化學(xué)內(nèi)涵。2.2方法采用石膏-知母復(fù)合造模法制備大鼠脾陽虛證候模型,造模期為14天1;治療期間各給藥組分別給予治療藥物,連續(xù)給藥8天。供試藥物分別為理中丸、四君子湯供試液,干姜水溶性成分和不同劑量揮發(fā)性成分（大、中、小劑量比為2:1:0.5）分別代替干姜原藥材配伍入理中丸,組成的干姜水溶性成分理中配方和大、中、小劑量干姜揮發(fā)性成分理中配方供試液,其中揮發(fā)性成分的中劑量相當(dāng)于干姜的常規(guī)劑量。造模及治療過程中,對(duì)各組大鼠的體溫、體重、食量進(jìn)行測(cè)定;治療結(jié)束時(shí),測(cè)定下列兩組指標(biāo)。與消化吸收有關(guān)的指標(biāo)有:胃的排空率和腸推進(jìn)率;血中D-木糖（D-xylose）、胃泌素（GAS）、胃動(dòng)素（MLT）含量,膽堿酯酶（CHE）活性,胃組織中H+-K+-ATP酶活性,空腸組織中NO含量;腸中血管活性腸肽（VIP）和腸間質(zhì)細(xì)胞（ICC）含量（免疫組化法）;測(cè)定腸肌間神經(jīng)叢中膽堿能神經(jīng)（AchE陽性神經(jīng)）和氮能神經(jīng)（NOS陽性神經(jīng)）的分布（組織化學(xué)法）及累計(jì)光密度;觀察胃、腸的病理改變,以及干姜揮發(fā)性成分理中配方中、大劑量組大鼠肝的病理改變。與能量代謝相關(guān)的指標(biāo)有:空腹血糖值,血中肌酸激酶（CK）活性、乳酸（LD）水平;胃、空腸、骨骼肌線粒體ATP酶活性;肌糖元的含量;下丘腦中5-羥吲哚乙酸（5-HIAA）含量。2.3結(jié)果為了對(duì)不同層次的研究問題分別進(jìn)行說明,研究結(jié)果分為三個(gè)層次進(jìn)行表述。2.3.1理中丸與四君子湯對(duì)脾陽虛證消化吸收功能和能量代謝的影響差異在胃的運(yùn)動(dòng)和消化功能方面,四君子湯可提高血中MLT、GAS水平,增加胃的排空率,但作用明顯弱于理中丸。四君子湯對(duì)正常的胃H+-K+-ATP酶活性有明顯抑制作用,但理中丸作用不明顯。在腸的消化吸收功能方面,四君子湯和理中丸均可降低腸推進(jìn)率,且無明顯差異。四君子湯主要是通過降低血中CHE活性水平引起的,對(duì)NO無明顯影響。雖然四君子湯對(duì)提高模型大鼠D-木糖吸收率和增加食量方面的作用優(yōu)于理中丸,但兩方在增加模型動(dòng)物體重方面的作用無顯著差異。并且對(duì)胃腸病理形態(tài)的觀察顯示,四君子湯對(duì)胃、腸粘膜的保護(hù)作用較理中丸弱。在對(duì)能量代謝的影響方面,理中丸能改善造模引起的CK活性降低、LD和肌糖元含量升高;降低下丘腦中5-HIAA含量,升高體溫。理中丸對(duì)造模引起的代償性血糖升高、骨骼肌線粒體中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性增強(qiáng)均有明顯的抑制作用。理中丸除了對(duì)胃組織線粒體中的Na+-K+-ATP酶的活性有所降低外,對(duì)胃腸線粒體中的其他ATP酶活性均無明顯影響。而四君子湯不能糾正造模引起的大鼠體溫降低,對(duì)下丘腦中5-HIAA的含量沒有明顯影響;除了對(duì)血中CK的活性降低和對(duì)胃線粒體中ATP酶的抑制作用強(qiáng)于理中丸外,對(duì)其他指標(biāo)的影響均弱于理中丸。2.3.2干姜揮發(fā)性成分和水溶性成分對(duì)理中丸調(diào)節(jié)脾陽虛模型消化吸收功能和能量代謝作用的影響在對(duì)消化吸收功能的影響方面,干姜揮發(fā)性成分理中配方和干姜水溶性成分理中配方均能提高脾陽虛模型血中GAS和MLT水平,干姜揮發(fā)性成分理中配方的作用優(yōu)于干姜水溶性成分理中配方,也優(yōu)于理中丸原方;但兩者在增加胃排空率方面的作用無明顯差異。干姜水溶性成分理中配方對(duì)血中CHE的抑制作用較強(qiáng),同時(shí)能升高模型大鼠腸組織中降低的NO水平,降低模型大鼠腸中ICC數(shù)量,但對(duì)腸中VIP的含量無明顯影響。干姜揮發(fā)性成分理中配方對(duì)血中CHE活性的抑制作用弱于干姜水溶性成分理中配方,也不能提高空腸中抑制性神經(jīng)遞質(zhì)NO的釋放,且對(duì)腸組織VIP的含量也無明顯影響,僅在抑制腸中ICC的數(shù)量方面作用顯著。然而比較干姜揮發(fā)性成分理中配方、干姜水溶性成分理中配方和理中丸原方對(duì)大鼠小腸推進(jìn)率的抑制作用,三者并未顯示出明顯差異。此外,干姜揮發(fā)性成分理中配方對(duì)模型大鼠D-木糖的吸收率的增加和促進(jìn)體重增長方面的作用,優(yōu)于干姜水溶性成分理中配方和理中丸。在對(duì)胃腸組織形態(tài)的保護(hù)方面,干姜揮發(fā)性成分理中配方的作用更優(yōu)。在對(duì)能量代謝的影響方面,干姜揮發(fā)性成分理中配方能有效降低下丘腦5-HIAA水平,體溫明顯升高;同時(shí)能有效降低血中CK的活性和LD的含量,并能抑制造模引起的骨骼肌ATP酶活性及血糖的代償性增高,使之恢復(fù)正常水平。干姜水溶性成分理中配方對(duì)下丘腦中5-HIAA不但沒有降低作用,反而使其含量升高,對(duì)造模引起的體溫降低無明顯影響。除了對(duì)骨骼肌中ATP酶的抑制作用較為強(qiáng)烈外,干姜水溶性成分理中配方對(duì)其他各指標(biāo)的改善作用均弱于干姜揮發(fā)性成分理中配方。2.3.3不同劑量干姜揮發(fā)性成分對(duì)理中丸調(diào)節(jié)脾陽虛模型消化吸收功能和能量代謝的影響干姜揮發(fā)性成分中劑量配伍能顯著提高血中GAS和MLT水平,使之達(dá)到正常值以上,并能顯著提高胃排空率。干姜揮發(fā)性成分大、小劑量理中配方雖也具有相似的作用,但作用較干姜揮發(fā)性成分中劑量配方弱。各干姜揮發(fā)性成分理中配方主要通過影響膽堿能神經(jīng)功能和空腸ICC數(shù)量來抑制腸的運(yùn)動(dòng)功能。干姜揮發(fā)性成分中劑量配方對(duì)ICC數(shù)量的減少作用最強(qiáng),大劑量配方對(duì)抑制血中CHE活性的作用最突出。對(duì)腸中NO含量的影響中,除干姜揮發(fā)性成分小劑量能使其含量上升外,姜醚中、大劑量表現(xiàn)為降低的作用,但中劑量配方能使肌間神經(jīng)叢中氮能神經(jīng)的累積光密度值（IOD）增高。從對(duì)改善腸推進(jìn)率的作用來看,大、中、小劑量的干姜揮發(fā)性成分理中配方間沒有明顯差異。但對(duì)胃腸組織形態(tài)的保護(hù)方面,中劑量配方的作用更為顯著。對(duì)能量代謝功能的影響方面,中劑量和大劑量干姜揮發(fā)性成分理中配方可有效降低下丘腦5-HIAA水平,并使模型大鼠體溫上升至正常水平;小劑量干姜揮發(fā)性成分理中配方雖然對(duì)下丘腦5-HIAA水平也有降低作用,但對(duì)造模后大鼠的體溫降低未顯示出明顯改善作用。三劑量理中配方均能有效降低血中CK活性和LD水平,以及肌糖元含量,其中中劑量和大劑量干姜揮發(fā)性成分理中配方的作用更加明顯。對(duì)于造模引起的血糖及骨骼肌線粒體中Ca2+-Mg2+-ATP酶活性代償性增高,三劑量理中配方均有降低作用,中劑量配方對(duì)血糖的降低作用最突出,而小劑量配方對(duì)ATP酶的影響較明顯。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),大劑量干姜揮發(fā)性成分理中配方能導(dǎo)致血中GOT活性有所升高,使肝小葉中央靜脈周圍肝組織出現(xiàn)少量的細(xì)胞壞死,提示干姜揮發(fā)性成分配伍劑量過大時(shí),有可能引起肝臟的損害。而小劑量和中劑量干姜揮發(fā)性成分配伍對(duì)肝臟的功能未見損害作用。2.4結(jié)論在對(duì)脾陽虛證模型的治療中,理中丸所代表的溫陽健脾法是針對(duì)脾陽虛證進(jìn)行治療的基本立法,干姜是理中丸實(shí)現(xiàn)溫陽散寒作用的核心藥物;而在干姜所含的揮發(fā)性成分和水溶性成分中,干姜的揮發(fā)性成分成分對(duì)理中丸功效的影響最為突出,對(duì)理中丸調(diào)節(jié)脾陽虛證模型消化吸收功能和能量代謝具有決定性作用。隨著干姜揮發(fā)性成分在理中配方中配伍劑量的增加,理中配方的功效的作用強(qiáng)度發(fā)生改變,以揮發(fā)性成分中、大劑量配伍時(shí),其療效顯著提高,但大劑量干姜揮發(fā)性成分理中配方時(shí),存在對(duì)模型動(dòng)物的肝臟產(chǎn)生損害傾向,因此從本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果判斷,干姜揮發(fā)性成分以中劑量配伍時(shí),其療效最佳。通過上述的研究可以證明,君藥干姜在理中丸配伍結(jié)構(gòu)中的核心地位和功效上的決定性作用并不是方劑學(xué)理論中純粹理論層面上的假設(shè),而是具有重要的事實(shí)基礎(chǔ)的。對(duì)方劑藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的揭示,又會(huì)對(duì)方劑配伍理論的認(rèn)識(shí)產(chǎn)生至關(guān)重要的影響。
秦建設(shè)[9]（2007）在《脾陽虛證大鼠模型肝組織GSH-Px活性、端粒長度變化的實(shí)驗(yàn)研究》文中研究說明目的：觀察脾陽虛證大鼠模型肝組織谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性和肝細(xì)胞端粒長度的變化，探討中醫(yī)脾陽虛證的分子生物學(xué)基礎(chǔ)。方法：采用經(jīng)典的復(fù)合因素造模法（勞倦過度+飲食失節(jié)+苦寒傷陽藥）建立脾陽虛證大鼠模型：采用比色法檢測(cè)肝組織GSH-Px活性，用Southern blot法測(cè)定肝細(xì)胞端粒長度。結(jié)果：與正常對(duì)照組相比，脾陽虛證大鼠模型組肝組織GSH-Px活性降低，肝細(xì)胞端粒長度縮短。結(jié)論：機(jī)體內(nèi)GSH-Px活性降低、自由基蓄積損傷端粒，是脾陽虛證大鼠模型肝細(xì)胞端粒長度縮短的機(jī)制之一，提示端粒長度改變與脾陽虛之間有密切關(guān)系。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，人體是以五臟為中心的有機(jī)整體，五臟的生理功能在人體生命活動(dòng)中起著重要的作用。脾為五臟之一，位居中焦，為陰中之至陰，五行屬土，喜燥惡濕，與長夏之氣相通。脾的主要生理功能為主運(yùn)化、升清、統(tǒng)血，輸布水谷精微，為人體后天之本，氣血生化之源。端粒是位于真核生物線性染色體末端的一種特殊結(jié)構(gòu)。端粒的功能是保持染色體結(jié)構(gòu)的完整性，避免染色體丟失，防止核酸外切酶對(duì)DNA的降解、染色體末端的粘著、融合，同時(shí)參與染色體定位、復(fù)制。國內(nèi)外大量實(shí)驗(yàn)研究表明，端粒的縮短是細(xì)胞衰亡的“生物鐘”。自由基是機(jī)體內(nèi)性質(zhì)較活躍的強(qiáng)氧化劑，研究發(fā)現(xiàn)自由基及氧化應(yīng)激反應(yīng)都能損傷DNA結(jié)構(gòu)，使端?？s短而失去正常功能。近二十年來本學(xué)科對(duì)脾虛三證（脾氣虛證、脾陽虛證、脾陰虛證）與自由基的氧化與抗氧化之間的關(guān)系，進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。結(jié)果表明，自由基損傷是導(dǎo)致脾虛發(fā)生的重要病理機(jī)制之一，故此我們有理由推測(cè)，脾陽虛證的發(fā)生可能與端粒損傷之間存在一定相關(guān)性。目前，關(guān)于脾陽虛證端粒長度變化的實(shí)驗(yàn)研究國內(nèi)外尚無報(bào)道，因此，開展此項(xiàng)研究對(duì)于進(jìn)一步探討脾臟的分子生物學(xué)基礎(chǔ)具有重要意義。本次實(shí)驗(yàn)將通過對(duì)脾陽虛證大鼠模型肝組織端粒長度和GSH-Px活性變化的研究，進(jìn)一步揭示脾陽虛證的病理實(shí)質(zhì)，為臨床研究打下基礎(chǔ)。本次實(shí)驗(yàn)的具體內(nèi)容：（1）建立脾陽虛證大鼠動(dòng)物模型。（2）觀察脾陽虛證大鼠肝組織GSH-Px活性的變化。（3）觀察脾陽虛證大鼠肝細(xì)胞端粒長度的變化。
林庶茹,易杰[10]（2005）在《脾陽虛、脾陰虛模型大鼠肝脾組織蛋白激酶C活性變化的實(shí)驗(yàn)研究》文中研究表明
二、脾虛證大鼠肝、脾組織蛋白激酶C活性變化的比較研究（論文開題報(bào)告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點(diǎn)或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲(chǔ)管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲(chǔ)器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級(jí)分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級(jí)頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲(chǔ)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對(duì)象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對(duì)象從而得到有關(guān)信息。
實(shí)驗(yàn)法：通過主支變革、控制研究對(duì)象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。
定性分析法：對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對(duì)研究對(duì)象的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對(duì)某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會(huì)科學(xué)用來分析社會(huì)現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、脾虛證大鼠肝、脾組織蛋白激酶C活性變化的比較研究（論文提綱范文）
（1）基于脂代謝穩(wěn)態(tài)探討從肝脾論治阿爾茨海默病的中醫(yī)途徑與科學(xué)內(nèi)涵（論文提綱范文）
| 1 脂代謝穩(wěn)態(tài)的破壞是影響AD發(fā)病的重要途徑 |
| 1.1 腦脂穩(wěn)態(tài)與AD |
| 1.1.1 血腦屏障 |
| 1.1.2 淀粉樣前體蛋白 |
| 1.1.3 炎癥與氧化應(yīng)激 |
| 1.2 血脂穩(wěn)態(tài)與AD |
| 1.3 脂代謝失穩(wěn)所致AD共病與AD |
| 2 阿爾茨海默病的中醫(yī)病因病機(jī) |
| 2.1 髓?？仗?，髓減腦消 |
| 2.2 脾腎兩虛，臟腑失調(diào) |
| 2.3 痰濁蒙竅，瘀阻腦絡(luò) |
| 3 基于脂代謝穩(wěn)態(tài)從肝脾論治AD的路徑探討 |
| 3.1 從肝脾論治調(diào)節(jié)脂代謝防治AD的理論依據(jù) |
| 3.2 從肝脾論治調(diào)節(jié)脂代謝防治AD的實(shí)踐依據(jù) |
| 3.2.1 從肝脾論治對(duì)脂代謝穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié) |
| 3.2.2 從肝脾論治調(diào)節(jié)脂代謝防治防治AD |
| 3.3 中醫(yī)治法 |
| 4 討論 |
（2）慢性萎縮性胃炎病證結(jié)合模型肝組織病理及能量代謝變化（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 縮略詞表 |
| 第一部分 文獻(xiàn)綜述 |
| 綜述一 慢性萎縮性胃炎動(dòng)物模型研究進(jìn)展 |
| 1 慢性萎縮性胃炎病因造模法 |
| 2 病證結(jié)合動(dòng)物模型 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述二 慢性萎縮性胃炎和糖脂代謝紊亂相關(guān)性研究 |
| 1 糖脂代謝紊亂和慢性萎縮性胃炎的關(guān)聯(lián) |
| 2 糖脂代謝相互影響 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二部分 實(shí)驗(yàn)研究 |
| 前言 |
| 實(shí)驗(yàn)一 慢性萎縮性胃炎大鼠病證結(jié)合模型制備及評(píng)估 |
| 1 材料 |
| 2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 實(shí)驗(yàn)二 慢性萎縮性胃炎病證結(jié)合動(dòng)物模型大鼠肝功能及糖脂代謝變化 |
| 1 材料 |
| 2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 實(shí)驗(yàn)三 慢性萎縮性胃炎病證結(jié)合動(dòng)物模型大鼠肝臟病理學(xué)改變 |
| 1 材料 |
| 2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 實(shí)驗(yàn)四 慢性萎縮性胃炎大鼠肝臟PI3K/Akt信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá) |
| 1 材料 |
| 2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 結(jié)語 |
| 1 結(jié)論 |
| 2 創(chuàng)新點(diǎn) |
| 3 不足與展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 在校期間主要研究成果 |
| 個(gè)人簡歷 |
（3）Ca2+/CaM信號(hào)通路在大鼠脾虛證軀體泛化效應(yīng)中的響應(yīng)及益氣健脾中藥干預(yù)研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 脾的生理功能及脾虛證研究進(jìn)展 |
| 1.2.1 脾的生理功能 |
| 1.2.2 脾虛證的理論源流 |
| 1.2.3 脾虛證本質(zhì)研究 |
| 1.3 脾虛證動(dòng)物模型研究進(jìn)展 |
| 1.3.1 應(yīng)用苦寒傷中法復(fù)建脾虛證動(dòng)物模型 |
| 1.3.2 應(yīng)用破氣耗氣法復(fù)建脾虛證動(dòng)物模型 |
| 1.3.3 應(yīng)用飲食傷脾法復(fù)建脾虛證動(dòng)物模型 |
| 1.3.4 應(yīng)用勞倦傷脾法復(fù)建脾虛證動(dòng)物模型 |
| 1.3.5 應(yīng)用復(fù)合因素法復(fù)建脾虛證動(dòng)物模型 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二章 “脾虛證軀體泛化效應(yīng)”證候模式及工作假說的建立 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 基于理論與臨床的“脾虛證軀體泛化效應(yīng)”證候模式的建立 |
| 2.2.1 “脾虛證軀體泛化效應(yīng)”的文獻(xiàn)理論 |
| 2.2.2 “脾虛證軀體泛化效應(yīng)”的臨床研究 |
| 2.3 “脾虛證軀體泛化效應(yīng)”證候模式內(nèi)涵探討 |
| 2.3.1 中醫(yī)脾虛證與消化系統(tǒng)功能紊亂的關(guān)系 |
| 2.3.2 中醫(yī)脾虛證與免疫系統(tǒng)功能紊亂的關(guān)系 |
| 2.3.3 中醫(yī)脾虛證與神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂的關(guān)系 |
| 2.3.4 中醫(yī)脾虛證與內(nèi)分泌系統(tǒng)功能紊亂的關(guān)系 |
| 2.3.5 中醫(yī)脾虛證與能量代謝功能紊亂的關(guān)系 |
| 2.3.6 中醫(yī)脾虛證與運(yùn)動(dòng)功能紊亂的關(guān)系 |
| 2.4 “脾虛證軀體泛化效應(yīng)”證候模式的研究思路 |
| 2.4.1 基于系統(tǒng)觀和整體觀研究“脾虛證軀體泛化效應(yīng)”的思路 |
| 2.4.2 基于Ca~(2+)/CaM信號(hào)通路研究“脾虛證軀體泛化效應(yīng)”的工作假說及可行性分析 |
| 2.5 深化脾虛證本質(zhì)研究的意義 |
| 2.5.1 基于脾虛證研究拓展臨床應(yīng)用范圍 |
| 2.5.2 基于脾虛證實(shí)質(zhì)豐富癥狀學(xué)、疾病學(xué)和預(yù)防醫(yī)學(xué)研究內(nèi)涵 |
| 2.6 本論文的立題依據(jù)、研究目的和內(nèi)容 |
| 2.6.1 立題依據(jù) |
| 2.6.2 研究目的 |
| 2.6.3 研究內(nèi)容 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 論文實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線圖 |
| 第三章 脾虛證大鼠不同組織代謝相關(guān)酶活性、Ca~(2+)/CaM-CaMKⅡ信號(hào)通路的變化 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料、儀器與動(dòng)物 |
| 3.2.1 材料與試劑 |
| 3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 3.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 |
| 3.3 方法 |
| 3.3.1 藥物制備 |
| 3.3.2 脾虛證大鼠模型制備 |
| 3.3.3 分組與給藥 |
| 3.3.4 大鼠一般生存狀況觀察、宏觀證候評(píng)估及每日體重增加量、肛溫測(cè)定 |
| 3.3.5 大鼠胃排空率和小腸推進(jìn)率測(cè)定 |
| 3.3.6 大鼠血清D-木糖含量測(cè)定 |
| 3.3.7 大鼠小腸組織GAS、MOT、SS和VIP含量測(cè)定 |
| 3.3.8 大鼠空腹血糖測(cè)定 |
| 3.3.9 大鼠血清胰島素測(cè)定 |
| 3.3.10 大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織Na~+-K~+-ATPase、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性測(cè)定 |
| 3.3.11 大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織SDH、LDH活性測(cè)定 |
| 3.3.12 激光共聚焦測(cè)定各組大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織i濃度 |
| 3.3.13 實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定各組大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織CaM、CaMKⅡ基因表達(dá) |
| 3.3.14 蛋白免疫印跡法測(cè)定各組大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ蛋白表達(dá) |
| 3.3.15 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 |
| 3.4 結(jié)果 |
| 3.4.1 脾虛各組大鼠一般生存狀況 |
| 3.4.2 脾虛各組大鼠每日體重增加量和游泳耐力時(shí)間比較 |
| 3.4.3 脾虛各組大鼠肛溫和宏觀證候積分比較 |
| 3.4.4 脾虛各組大鼠每日攝食量和血清D-木糖含量比較 |
| 3.4.5 脾虛各組大鼠胃殘留率和小腸推進(jìn)率比較 |
| 3.4.6 脾虛各組大鼠空腹血糖和血清胰島素含量比較 |
| 3.4.7 脾虛各組大鼠小腸組織GAS和MOT含量比較 |
| 3.4.8 脾虛各組大鼠小腸組織SS和VIP含量比較 |
| 3.4.9 脾虛各組大鼠小腸組織Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性比較 |
| 3.4.10 脾虛各組大鼠小腸組織SDH、LDH活性比較 |
| 3.4.11 脾虛各組大鼠胰腺組織Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性比較 |
| 3.4.12 脾虛各組大鼠胰腺組織SDH和LDH活性比較 |
| 3.4.13 脾虛各組大鼠骨骼肌組織Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性比較 |
| 3.4.14 脾虛各組大鼠骨骼肌組織SDH、LDH活性比較 |
| 3.4.15 脾虛各組大鼠肝組織Na~+-K~+-ATPase、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性比較 |
| 3.4.16 脾虛各組大鼠肝臟組織SDH、LDH活性比較 |
| 3.4.17 脾虛各組大鼠小腸、胰腺組織[Ca~(2+)]i濃度比較 |
| 3.4.18 脾虛各組大鼠骨骼肌、肝組織[Ca~(2+)]i濃度比較 |
| 3.4.19 脾虛各組大鼠小腸組織CaM、CaMKⅡ基因表達(dá)量比較 |
| 3.4.20 脾虛各組大鼠胰腺組織CaM、CaMKⅡ基因表達(dá)量比較 |
| 3.4.21 脾虛各組大鼠骨骼肌組織CaM、CaMKⅡ基因表達(dá)量比較 |
| 3.4.22 脾虛各組大鼠肝組織CaM、CaMKⅡ基因表達(dá)量比較 |
| 3.4.23 脾虛各組大鼠小腸組織CaM、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)比較 |
| 3.4.24 脾虛各組大鼠胰腺組織CaM、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)比較 |
| 3.4.25 脾虛各組大鼠骨骼肌組織CaM、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)比較 |
| 3.4.26 脾虛各組大鼠肝組織CaM、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)比較 |
| 3.5 討論 |
| 3.6 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第四章 益氣健脾中藥對(duì)脾虛證大鼠不同組織代謝相關(guān)酶活性、Ca~(2+)/CaM-CaMKⅡ信號(hào)通路的影響 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料、儀器與動(dòng)物 |
| 4.2.1 材料與試劑 |
| 4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 4.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 |
| 4.3 方法 |
| 4.3.1 藥物制備 |
| 4.3.2 脾虛證大鼠模型制備 |
| 4.3.3 分組與給藥 |
| 4.3.4 大鼠一般生存狀況、宏觀證候評(píng)分及每日體重增加量、肛溫測(cè)定 |
| 4.3.5 大鼠胃排空率和小腸推進(jìn)率測(cè)定 |
| 4.3.6 大鼠血清D-木糖含量測(cè)定 |
| 4.3.7 大鼠小腸組織胃腸激素GAS、MOT、SS和VIP含量測(cè)定 |
| 4.3.8 大鼠空腹血糖含量測(cè)定 |
| 4.3.9 大鼠血清胰島素測(cè)定 |
| 4.3.10 大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織Na~+-K~+-ATPase、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性測(cè)定 |
| 4.3.11 大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織SDH、LDH活性測(cè)定 |
| 4.3.12 激光共聚焦測(cè)定各組大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織[Ca~(2+)]i濃度 |
| 4.3.13 實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定各組大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織CaM、CaMKⅡ基因表達(dá) |
| 4.3.14 蛋白免疫印跡法測(cè)定各組大鼠小腸、胰腺、骨骼肌和肝組織CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ蛋白表達(dá) |
| 4.3.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 |
| 4.4 結(jié)果 |
| 4.4.1 各組大鼠一般生存狀況 |
| 4.4.2 各組大鼠每日體重增加量和游泳耐力時(shí)間比較 |
| 4.4.3 各組大鼠肛溫和宏觀證候積分比較 |
| 4.4.4 各組大鼠每日攝食量和血清D-木糖含量比較 |
| 4.4.5 各組大鼠胃殘留率和小腸推進(jìn)率比較 |
| 4.4.6 各組大鼠空腹血糖和血清胰島素含量比較 |
| 4.4.7 各組大鼠小腸組織GAS和MOT含量比較 |
| 4.4.8 各組大鼠小腸組織SS和VIP含量比較 |
| 4.4.9 各組大鼠小腸組織Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性比較 |
| 4.4.10 各組大鼠小腸組織SDH和LDH活性比較 |
| 4.4.11 各組大鼠胰腺組織Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性比較 |
| 4.4.12 各組大鼠胰腺組織SDH和LDH活性比較 |
| 4.4.13 各組大鼠骨骼肌組織Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性比較 |
| 4.4.14 各組大鼠骨骼肌組織SDH和LDH活性比較 |
| 4.4.15 各組大鼠肝組織Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性比較 |
| 4.4.16 各組大鼠肝臟組織SDH和LDH活性比較 |
| 4.4.17 各組大鼠小腸、胰腺組織[Ca~(2+)]i濃度比較 |
| 4.4.18 各組大鼠骨骼肌、肝組織[Ca~(2+)]i濃度比較 |
| 4.4.19 各組大鼠小腸組織CaM、CaMKⅡ基因表達(dá)量比較 |
| 4.4.20 各組大鼠胰腺組織CaM、CaMKⅡ基因表達(dá)量比較 |
| 4.4.21 各組大鼠骨骼肌組織CaM、CaMKⅡ基因表達(dá)量比較 |
| 4.4.22 各組大鼠肝臟組織CaM、CaMKⅡ基因表達(dá)量比較 |
| 4.4.23 各組大鼠小腸組織CaM、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)比較 |
| 4.4.24 各組大鼠胰腺組織CaM、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)比較 |
| 4.4.25 各組大鼠骨骼肌組織CaM、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)比較 |
| 4.4.26 各組大鼠肝組織CaM、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ蛋白表達(dá)比較 |
| 4.5 討論 |
| 4.6 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 本論文的創(chuàng)新點(diǎn) |
| 全文結(jié)論 |
| 研究展望 |
| 英語縮略詞表 |
| 在學(xué)期間的研究成果 |
| 致謝 |
（4）益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠肝、腎臟蛋白激酶C影響的實(shí)驗(yàn)研究（論文提綱范文）
| 目錄 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文縮略語 |
| 前言 |
| 材料與方法 |
| 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 在學(xué)期間科研成績 |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡介 |
（5）益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠肝腎臟蛋白激酶C影響的實(shí)驗(yàn)研究（論文提綱范文）
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與細(xì)胞株 |
| 1.1.2 藥物與試劑 |
| 1.1.3 儀器 |
| 1.2 人胃癌SGC-7901細(xì)胞株體外培養(yǎng) |
| 1.3 分組、造模及給藥 |
| 1.4 檢測(cè)指標(biāo) |
| 1.4.1 臟器指數(shù) |
| 1.4.2 肝腎組織PKC測(cè)定 |
| 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 各組裸鼠體質(zhì)量、肝重、肝系數(shù)、腎重及腎系數(shù)情況 |
| 2.2 各組裸鼠肝臟中PKC表達(dá)情況 |
| 3 討論 |
（6）基于蛋白質(zhì)組學(xué)的脾虛大鼠脾失健運(yùn)機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| 目的 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 結(jié)論 |
| Abstract |
| Purpose |
| Material and method |
| Results |
| Conclusion |
| 文獻(xiàn)綜述一 |
| 1 脾虛證動(dòng)物模型研究進(jìn)展 |
| 1.1 動(dòng)物模型制備研究 |
| 1.2 動(dòng)物模型評(píng)價(jià)研究 |
| 1.3 動(dòng)物模型比較研究 |
| 2 脾虛證現(xiàn)代生物學(xué)研究進(jìn)展 |
| 2.1 脾虛證與消化吸收功能異常 |
| 2.2 脾虛證與細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的異常改變 |
| 2.3 脾虛證與物質(zhì)能量代謝障礙 |
| 2.4 脾虛證與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑 |
| 2.5 脾虛證與基因 |
| 2.6 脾虛證與端粒、端粒酶 |
| 2.7 脾虛對(duì)免疫系統(tǒng)功能的影響 |
| 2.8 脾虛對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)功能的影響 |
| 2.9 脾虛對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)功能的影響 |
| 2.10 脾虛對(duì)生殖系統(tǒng)功能的影響 |
| 3 述評(píng)及展望 |
| 3.1 述評(píng) |
| 3.2 展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 文獻(xiàn)綜述二 |
| 1 蛋白質(zhì)組學(xué)及其技術(shù)應(yīng)用 |
| 2 蛋白質(zhì)組學(xué)與中醫(yī)藥研究 |
| 2.1 蛋白質(zhì)組學(xué)與中醫(yī)證候?qū)W研究 |
| 2.2 蛋白質(zhì)組學(xué)與中藥學(xué)研究 |
| 3 述評(píng)與展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 前言 |
| 1 實(shí)驗(yàn)材料 |
| 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 |
| 1.2 藥物及制備 |
| 1.3 主要試劑 |
| 1.4 主要儀器及設(shè)備 |
| 2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 2.1 動(dòng)物模型復(fù)制與評(píng)價(jià) |
| 2.2 標(biāo)本采集與制備 |
| 2.3 生化指標(biāo)檢測(cè)方法 |
| 2.4 蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)方法 |
| 2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 各組大鼠生物學(xué)體征觀察結(jié)果 |
| 3.2 各組大鼠胃腸組織的病理學(xué)變化 |
| 3.3 各組大鼠生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果 |
| 3.4 蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)結(jié)果 |
| 分析討論 |
| 1 中醫(yī)學(xué)對(duì)脾虛證脾失健運(yùn)的認(rèn)識(shí) |
| 1.1 “脾”的字源含義 |
| 1.2 脾的中醫(yī)學(xué)功能系統(tǒng)聯(lián)屬 |
| 1.3 中醫(yī)學(xué)對(duì)“脾虛”的認(rèn)識(shí) |
| 1.4 本研究的科學(xué)假說與研究思路 |
| 2 脾虛證動(dòng)物模型的建立與評(píng)價(jià) |
| 3 脾失健運(yùn)與生命物質(zhì)基礎(chǔ)的異常改變 |
| 3.1 脾失健運(yùn)與血清淀粉酶活力的改變 |
| 3.2 脾失健運(yùn)與血清胃泌素含量的改變 |
| 3.3 脾失健運(yùn)與胃腸組織病理形態(tài)學(xué)改變 |
| 3.4 脾失健運(yùn)與Na~+-K~+-LATPase活力改變 |
| 3.5 脾失健運(yùn)與SDH活力改變 |
| 3.6 脾失健運(yùn)與蛋白質(zhì)組表達(dá)變化 |
| 4 在整體觀念指導(dǎo)下對(duì)特定病因所致脾失健運(yùn)機(jī)理的探討 |
| 4.1 對(duì)脾氣虛脾失健運(yùn)機(jī)理的探討 |
| 4.2 對(duì)脾陽虛脾失健運(yùn)機(jī)理的探討 |
| 4.3 對(duì)脾陰虛脾失健運(yùn)機(jī)理的探討 |
| 4.4 對(duì)脾氣虛、脾陽虛、脾陰虛三證脾失健運(yùn)機(jī)理異同的探討 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡歷 |
（7）脾陰虛證大鼠胃動(dòng)素、胃蛋白酶、水通道蛋白4及蛋白質(zhì)組學(xué)改變的實(shí)驗(yàn)研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文獻(xiàn)綜述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 1 實(shí)驗(yàn)材料 |
| 2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 |
| 4 結(jié)果 |
| 分析討論 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡歷 |
（8）干姜不同有效部位對(duì)理中丸調(diào)節(jié)脾陽虛模型消化功能及能量代謝的影響（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文縮略詞表 |
| 上篇:綜述 |
| 綜述一 脾陽虛證候模型研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述二 理中丸現(xiàn)代研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 下篇:實(shí)驗(yàn)研究 |
| 前言 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 研究思路 |
| 研究內(nèi)容 |
| 研究一 石膏一知母復(fù)合因素造模法制備大鼠脾陽虛 證候模型的比較研究 |
| 材料 |
| 方法 |
| 結(jié)果 |
| 結(jié)論 |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 研究二 干姜及其不同有效部位對(duì)理中丸調(diào)節(jié)脾陽虛模型 消化功能及能量代謝的影響 |
| 材料 |
| 方法 |
| 結(jié)果 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第一部分 理中丸與四君子湯對(duì)脾陽虛模型消化功能 及能量代謝影響的比較研究 |
| 材料及方法 |
| 結(jié)果 |
| 結(jié)論 |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二部分 干姜揮發(fā)性成分與水溶性成分對(duì)理中丸調(diào)節(jié)脾 陽虛模型消化功能及能量代謝的影響 |
| 材料及方法 |
| 結(jié)果 |
| 結(jié)論 |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第三部分 不同劑量干姜揮發(fā)性成分對(duì)理中丸調(diào)節(jié)脾陽虛 模型消化功能及能量代謝的影響 |
| 材料及方法 |
| 結(jié)果 |
| 結(jié)論 |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 結(jié)語 |
| 附表 |
| 附圖 |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡歷 |
（9）脾陽虛證大鼠模型肝組織GSH-Px活性、端粒長度變化的實(shí)驗(yàn)研究（論文提綱范文）
| 中英文名詞術(shù)語對(duì)照 |
| Abstract |
| 中文摘要 |
| 前言 |
| 實(shí)驗(yàn)材料和方法 |
| 觀測(cè)指標(biāo)與測(cè)定方法 |
| 結(jié)果與分析 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 綜述 |
| 個(gè)人簡歷 |
（10）脾陽虛、脾陰虛模型大鼠肝脾組織蛋白激酶C活性變化的實(shí)驗(yàn)研究（論文提綱范文）
| 1 材 料 |
| 2 方 法 |
| 3 結(jié) 果 |
| 4 討 論 |
四、脾虛證大鼠肝、脾組織蛋白激酶C活性變化的比較研究（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]基于脂代謝穩(wěn)態(tài)探討從肝脾論治阿爾茨海默病的中醫(yī)途徑與科學(xué)內(nèi)涵[J]. 任妍,周鳳華. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2021(06)
- [2]慢性萎縮性胃炎病證結(jié)合模型肝組織病理及能量代謝變化[D]. 李諾. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2020(04)
- [3]Ca2+/CaM信號(hào)通路在大鼠脾虛證軀體泛化效應(yīng)中的響應(yīng)及益氣健脾中藥干預(yù)研究[D]. 段永強(qiáng). 蘭州大學(xué), 2014(10)
- [4]益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠肝、腎臟蛋白激酶C影響的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 王雪姣. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué), 2014(06)
- [5]益氣健脾抗癌中藥對(duì)胃癌裸鼠肝腎臟蛋白激酶C影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 王雪姣,殷東風(fēng),唐廣義. 上海中醫(yī)藥雜志, 2013(10)
- [6]基于蛋白質(zhì)組學(xué)的脾虛大鼠脾失健運(yùn)機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 呂凌. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué), 2012(07)
- [7]脾陰虛證大鼠胃動(dòng)素、胃蛋白酶、水通道蛋白4及蛋白質(zhì)組學(xué)改變的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 宋雪嬌. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué), 2011(04)
- [8]干姜不同有效部位對(duì)理中丸調(diào)節(jié)脾陽虛模型消化功能及能量代謝的影響[D]. 高琳. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2009(10)
- [9]脾陽虛證大鼠模型肝組織GSH-Px活性、端粒長度變化的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 秦建設(shè). 遼寧中醫(yī)藥大學(xué), 2007(06)
- [10]脾陽虛、脾陰虛模型大鼠肝脾組織蛋白激酶C活性變化的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 林庶茹,易杰. 實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志, 2005(01)