一、白細(xì)胞介素13在支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制中的作用（論文文獻(xiàn)綜述）
張赟[1]（2020）在《誘導(dǎo)痰液IL-25水平在兒童支氣管哮喘發(fā)病中的臨床意義研究》文中研究指明研究背景:在兒童時(shí)期,支氣管哮喘（Bronchial asthma）是一種最常見的慢性呼吸道炎癥疾病,支氣管哮喘全球發(fā)病率逐年升高,在發(fā)達(dá)國家和發(fā)展中國家,兒童和成人哮喘發(fā)病患者總?cè)藬?shù)已上升到3億以上,尤其是兒童哮喘,發(fā)病人數(shù)占35%以上,并且我國是支氣管哮喘病死率最高的國家之一,造成了嚴(yán)重的醫(yī)療負(fù)擔(dān)和社會負(fù)擔(dān)。雖然近些年來《全球哮喘倡議指南》（GINA指南）得到很大的推廣及應(yīng)用,但是我國兒童哮喘控制情況仍然不盡如人意,哮喘兒童每年哮喘急性發(fā)作人數(shù)占全部患者人數(shù)的比率達(dá)66%,因此探尋支氣管哮喘的發(fā)病機(jī)制是我們的重要任務(wù)。免疫學(xué)界認(rèn)為支氣管哮喘的發(fā)生與Th1/Th2平衡的破壞有重要關(guān)系,當(dāng)變應(yīng)原或其他因素進(jìn)入哮喘患者體內(nèi)后,過敏原可通過抗原呈遞細(xì)胞激活氣道黏膜上的T細(xì)胞,因此活化和促進(jìn)Th2型氣道炎癥反應(yīng),產(chǎn)生IL-4、IL-10和IL-13等多種活性細(xì)胞因子,從而激活肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞及肺泡巨噬細(xì)胞等多種肺部炎癥細(xì)胞,造成炎癥細(xì)胞在氣道中浸潤和聚集。這些炎癥細(xì)胞還能相互作用并且分泌出多種活性細(xì)胞炎癥介質(zhì),從而成了一個(gè)相互作用的復(fù)雜免疫網(wǎng)絡(luò),從而導(dǎo)致氣道平滑肌收縮,黏液分泌增加,血管通透性增加,炎癥細(xì)胞浸潤,產(chǎn)生氣道高反應(yīng)性及氣道重塑等支氣管哮喘病理生理特征。由于哮喘對兒童的嚴(yán)重不良影響,因此,獲取有效的炎癥評估指標(biāo)及優(yōu)質(zhì)的抗哮喘藥物一直是迫切需要解決的問題。目前已有許多研究證實(shí),在支氣管哮喘發(fā)病中,有多種類型的炎癥細(xì)胞和細(xì)胞因子發(fā)揮了重要的作用。作為白介素17（Interleukin-17,IL-17）家族中的新成員,白細(xì)胞介素-25（Interleukin-25,IL-25）是一種免疫促炎性細(xì)胞因子,目前被公認(rèn)在支氣管哮喘的免疫功能方面發(fā)揮了十分重要的作用。IL-25在不同類型的肺細(xì)胞中表達(dá)增加,不僅包括肺結(jié)構(gòu)細(xì)胞,如氣道內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞,還包括嗜酸性粒細(xì)胞、T細(xì)胞和肥大細(xì)胞。當(dāng)暴露于過敏原后,支氣管粘膜下層的這些細(xì)胞會增加,并且分泌IL-25或?qū)L-25產(chǎn)生迅速的免疫反應(yīng)。IL-25能活化Th2型細(xì)胞產(chǎn)生一系列免疫反應(yīng),可以產(chǎn)生Th2型細(xì)胞因子如IL-4、IL-10、IL-15等,也可以產(chǎn)生嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子,從而導(dǎo)致血清特異性IgE升高和嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤。在活體模型中證實(shí)肺組織發(fā)生了明顯的病理變化,IL-25能夠引起氣道炎癥和氣道重塑以及增強(qiáng)過敏性炎癥反應(yīng)。而通過阻斷IL-25,氣道高反應(yīng)性和肺組織輕微的嗜酸性粒細(xì)胞浸潤以及杯狀細(xì)胞增生也得到了顯著的改善。因此,IL-25在哮喘的發(fā)病中發(fā)揮了重要作用,受到研究者們的廣泛的關(guān)注。誘導(dǎo)痰作為一種相對安全、無創(chuàng)的方法,可以通過分析痰液細(xì)胞組成和可溶性炎癥介質(zhì)來評價(jià)氣道炎癥。并且通過誘導(dǎo)痰細(xì)胞分析評價(jià)痰嗜酸粒細(xì)胞增多的百分比,能夠直接評估氣道炎癥反應(yīng),是一種客觀監(jiān)測哮喘的方法。有研究者對哮喘兒童進(jìn)行了痰細(xì)胞測定,發(fā)現(xiàn)不同的細(xì)胞組分可以介導(dǎo)不同炎癥細(xì)胞,如中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,產(chǎn)生的氣道炎癥,其中嗜中性粒細(xì)胞氣道炎癥占主導(dǎo)地位。最近的研究也得出結(jié)論,誘導(dǎo)痰的分析可以識別與肺功能參數(shù)、哮喘控制和體重指數(shù)（BMI）相關(guān)的不同“高細(xì)胞因子”模式。目前罕見對支氣管哮喘患兒痰中IL-25（Sputum interleukin-25,SpIL-25）的研究報(bào)道,并且IL-25在兒童支氣管哮喘氣道炎癥中的作用機(jī)制及對治療的反應(yīng)的機(jī)制尚不明確,我們通過對IL-25在支氣管哮喘兒童痰液中的表達(dá)變化及作用機(jī)制研究,將為支氣管哮喘的診斷及治療提供新的臨床思路及理論依據(jù)。研究目的:1.探討哮喘兒童誘導(dǎo)痰液中IL-25濃度水平變化及其與血液中IL-25表達(dá)水平的相關(guān)性。2.探討哮喘患兒誘導(dǎo)痰液IL-25表達(dá)水平和呼出氣一氧化氮水平、肺功能、誘導(dǎo)痰細(xì)胞計(jì)數(shù)百分比等臨床數(shù)據(jù)的相關(guān)性。3.在蛋白及基因水平探討哮喘患兒痰液中IL-25表達(dá)水平與臨床指標(biāo)及抗哮喘治療效果的相關(guān)性,探索IL-25是否可作為一種炎癥介質(zhì)評估治療效果。研究方法:1.研究對象及分組:選擇2013年6月至2016年12月于山東大學(xué)齊魯兒童醫(yī)院確診為支氣管哮喘的兒童62例,他們?yōu)闉檩p-中度哮喘患者,男29例,女33例,年齡6～18歲。所有患者診斷均符合《全球哮喘倡議指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)。選取18例（女8例,男10例）年齡匹配的非哮喘健康兒童作為對照組,納入研究兒童要求能夠獨(dú)立完成肺功能,并且所有受試者的FEV1>預(yù)測值的75%。哮喘兒童根據(jù)其抗哮喘藥物的使用分為A組:未接受抗哮喘藥物治療的未控制的哮喘兒童;B組:應(yīng)用抗哮喘藥物治療控制哮喘兒童。2.完善臨床指標(biāo)的測試及標(biāo)本收集,包括采用德國耶格-8800肺功能儀測定兒童基線肺活量,進(jìn)行乙酰膽堿激發(fā)試驗(yàn)及誘導(dǎo)痰試驗(yàn);并且測定并收集研究人群呼出氣一氧化氮（Fractional exhaled nitric oxide,FENO）水平、血清總免疫球蛋白E（Immunoglobulin E,IgE）、全血C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein,CRP）、外周血嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)等數(shù)據(jù)。3.采用ELISA（Enzyme linked immunosorbent assay）方法檢測血清及誘導(dǎo)痰液上清液IL-25水平表達(dá)變化。4.采用免疫印跡法（Western blot）檢測誘導(dǎo)痰液中IL-25蛋白表達(dá)。5.采用qRT-PCR法檢測研究對象血液及誘導(dǎo)痰液IL-25基因表達(dá)水平。研究結(jié)果:1.支氣管哮喘兒童痰液IL-25水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性檢測1.1血清及痰液中IL-25水平變化通過ELASE方法檢測IL-25水平發(fā)現(xiàn),A組誘導(dǎo)痰液中IL-25水平為（47.16±13.50 pg/ml）顯著升高（P<0.001）,明顯高于其他兩組（B組39.14±9.03 pg/ml,對照組36.76±6.48 pg/ml）,A組和B組誘導(dǎo)痰IL-25濃度水平和血清中IL-25水平顯著相關(guān)（A組r=0.669,P<0.01;B組r=0.576,P<0.05）。1.2誘導(dǎo)痰中細(xì)胞計(jì)數(shù)通過對誘導(dǎo)痰液細(xì)胞計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn),A組哮喘兒童的誘導(dǎo)痰嗜中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)百分比下降（P<0.001）,而嗜酸性粒細(xì)胞的計(jì)數(shù)百分比顯著增加（P<0.001）。A組患者誘導(dǎo)痰液嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)百分比與誘導(dǎo)痰液IL-25水平呈正相關(guān)（分別為r=0.886,P<0.01;r=0.655,P<0.01）。1.3肺功能檢測結(jié)果通過對入選兒童肺功能測定發(fā)現(xiàn),在A組中,SpIL-25水平與FEV1（pred）（r=0.956,P<0.01）和PC20（mg/ml）（r=0.549,P<0.05）具有顯著相關(guān)性。1.4 FENO檢測結(jié)果通過對入選兒童FENO檢測發(fā)現(xiàn),A組哮喘患者的FENO水平明顯升高（P<0.001）。A組血清SpIL-25水平與FENO水平具有相關(guān)性（r=-0.77,P<0.01）。我們發(fā)現(xiàn)哮喘兒童SpIL-25水平與血液IL-25水平（r=0.669,P<0.01）、FENO（r=-0.483,P<0.05）和嗜酸性粒細(xì)胞（r=0.405,P<0.05）均具有相關(guān)性。1.5肺功能、誘導(dǎo)痰液細(xì)胞計(jì)數(shù)與誘導(dǎo)痰液IL-25水平相關(guān)性分析通過統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)哮喘兒童的FEV1/FVC%預(yù)測值、FEF25-75%的預(yù)測、誘導(dǎo)痰巨噬細(xì)胞（%）CRP與誘導(dǎo)痰液IL-25濃度水平無相關(guān)性。2.0支氣管哮喘兒童誘導(dǎo)痰液IL-25蛋白及基因的表達(dá)2.1誘導(dǎo)痰液IL-25蛋白表達(dá)通過Western blot方法檢測發(fā)現(xiàn),各研究組誘導(dǎo)痰中IL-25蛋白表達(dá)水平不同。通過對比蛋白表達(dá)的比值,支氣管哮喘兒童IL-25蛋白的表達(dá)水平明顯增加,A組表達(dá)水平最高,表達(dá)量最多。與B組和健康對照組相比,A組誘導(dǎo)痰中IL-25蛋白水平的比值顯著升高（P<0.001）。2.2誘導(dǎo)痰液IL-25mRNA表達(dá)2.2.1實(shí)時(shí)熒光定量qRT-PCR結(jié)果顯示3組兒童血液及誘導(dǎo)痰液IL-25mRNA的相對表達(dá)量的總體均數(shù)具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均<0.001）。A組中誘導(dǎo)痰液和血液IL-25的相對表達(dá)量均高于B組和健康對照組（分別P<0.05;P<0.001）。2.2.2誘導(dǎo)痰液和血液中IL-25mRNA表達(dá)水平相關(guān)性分析顯示A組和B組支氣管哮喘患兒IL-25mRNA表達(dá)呈線性相關(guān)、表達(dá)水平存在顯著差異性。兩組患兒誘導(dǎo)痰液和血液中IL-25mRNA的表達(dá)呈線性相關(guān)性（r=0.379,F=68.3,P=0.009）。A組患者誘導(dǎo)痰液和血液IL-25mRNA的相對表達(dá)量明顯高于B組（P<0.05）和健康對照組（P<0.001）。B組患者和健康對照組相比無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.168）。2.2.3哮喘患兒LI-25mRNA的表達(dá)水平與病情嚴(yán)重度和抗哮喘治療分組相關(guān)性分析結(jié)果哮喘患兒血液和痰液LI-25mRNA的表達(dá)水平與哮喘患兒疾病嚴(yán)重程度具有顯著差異性（分別P=0.04和P=0.042）;經(jīng)過抗哮喘治療,哮喘患兒血液和痰液LI-25mRNA的表達(dá)水平均顯著下降（分別P=0.021和P=0.026）,提示IL-25可以作為評估哮喘疾病嚴(yán)重程度和抗哮喘治療效果的一種炎癥介質(zhì)。2.2.4哮喘息兒痰液LI-25mRNA的表達(dá)水平與血液CRP、FENO、FEV1/FVC（%）及誘導(dǎo)痰液嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)（%）相關(guān)性分析顯示統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn),支氣管哮喘患兒痰液LI-25mRNA的表達(dá)與血液CRP水平相關(guān)性（r=0.361,P=0.007）;哮喘患兒痰液LI-25mRNA的表達(dá)水平與哮喘患兒呼出氣NO水平具有線性相關(guān)（r=0.26,P=0.04）;哮喘患兒FEV1/FVC（%）和痰液LI-25mRNA的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性（r=-0.344,P=0.01）,痰液IL-25mRNA在支氣管哮喘患兒中的表達(dá)與誘導(dǎo)痰液嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)（%）具有顯著相關(guān)性（r=0.404,P=0.03）,提示IL-25可以作為一種炎癥介質(zhì)用來評估哮喘兒童氣道炎癥。結(jié)論:1.支氣管哮喘兒童的誘導(dǎo)痰液和血液IL-25濃度升高,同時(shí)IL-25的表達(dá)在蛋白及基因水平明顯升高。2.哮喘兒童痰液IL-25濃度水平和血液IL-25濃度水平、FENO、誘導(dǎo)痰嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)具有線性相關(guān)性。3.哮喘兒童誘導(dǎo)痰液LI-25mRNA的表達(dá)水平與血液CRP、FENO、FEV1/FVC（%）及誘導(dǎo)痰液嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)（%）、病情嚴(yán)重程度和抗哮喘治療有明顯相關(guān)性。4.誘導(dǎo)痰中IL-25水平在抗哮喘治療后在濃度水平下降,同時(shí)在蛋白及基因水平也明顯下降,提示IL-25表達(dá)水平能夠作為評估藥物療效和哮喘控制狀態(tài)的重要生物標(biāo)志物。
林成創(chuàng)[2]（2020）在《重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白在支氣管哮喘中的作用及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究》文中認(rèn)為目的:支氣管哮喘（以下簡稱哮喘）是最常見的氣道慢性炎癥性疾病之一,據(jù)統(tǒng)計(jì),哮喘作為一個(gè)全球重大公共衛(wèi)生問題,影響3億左右人口,不同國家和地區(qū)患病率有所不同,中國大陸地區(qū)哮喘患病率為1.24%,約有3000萬哮喘患者,且多數(shù)哮喘患者病情控制欠佳,容易反復(fù)發(fā)作,嚴(yán)重影響生活質(zhì)量。目前治療哮喘的一線藥物仍以糖皮質(zhì)激素為主,此類藥物雖可以相對較好地控制哮喘,但該類藥物治療周期長,長期使用可引起多種副作用。此外,仍有約40%哮喘患者對糖皮質(zhì)激素治療不敏感,臨床治療亟需新研發(fā)的、安全有效的治療藥物。近年來發(fā)現(xiàn)Th17/Treg細(xì)胞失衡在哮喘的發(fā)病中起了重要作用,這為哮喘的治療提供了新的思路。本課題使用卵清蛋白（OVA）及氫氧化鋁（AL（OH）3）腹腔注射致敏加霧化激發(fā)的方式建立BALB/c小鼠哮喘氣道炎癥模型,以重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白（rLZ-8）進(jìn)行干預(yù),并與正常小鼠、模型組小鼠及地塞米松干預(yù)組小鼠對比,明確rLZ-8對哮喘小鼠氣道炎癥的干預(yù)作用及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制;同時(shí)使用rLZ-8對體外培養(yǎng)小鼠脾臟T細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),觀察其對T細(xì)胞增殖分化影響,探究rLZ-8對哮喘的作用及其免疫調(diào)節(jié)機(jī)制,以期為哮喘的更多治療選擇提供理論依據(jù)。方法:1.rLZ-8對小鼠哮喘的緩解作用及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究建立小鼠哮喘氣道炎癥模型和觀察藥物治療效果:將BALB/c小鼠用隨機(jī)數(shù)字表法分為4組:分別為對照（Control）組,模型（Model）組,地塞米松注射液（DEX）組,rLZ-8組,每組8只。以O(shè)VA和AL（OH）3混合致敏液在第0、7、13天腹腔注射致敏,第19天至32天予OVA溶液霧化激發(fā)的方法誘導(dǎo)建立哮喘模型,并從第19天開始分別給予生理鹽水、DEX、rLZ-8等對應(yīng)藥物干預(yù)2周后,采用ELISA法檢測各組小鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF）中細(xì)胞因子IL-17A、IL-10、IFN-γ和IL-4的水平,HE染色觀察肺組織炎癥浸潤等病理改變。免疫組織化學(xué)檢測肺組織嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白（ECP）及成熟樹突狀細(xì)胞（DC）表面分子（CD11c和CD86）水平,流式細(xì)胞術(shù)檢測哮喘小鼠脾臟細(xì)胞中CD11c-CD80+成熟DC和CD11c+CD86+成熟DC的比例。流式細(xì)胞術(shù)檢測哮喘小鼠脾臟細(xì)胞中CD4+IFN-γ+Th1細(xì)胞、CD4+IL-4+Th2細(xì)胞、CD4+IL-17A+Th17細(xì)胞、CD4+Foxp3+ Treg細(xì)胞的比例。Real-time PCR檢測肺組織中轉(zhuǎn)錄因子T-bet、IFN-γ、ROR γ t、Foxp3 mRNA 表達(dá)水平,Western Blotting 檢測肺組織中 STAT3 信號通路表達(dá)。2.rLZ-8對哮喘相關(guān)T細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用分選BALB/c小鼠脾臟CD3+T細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),用Annexin V/PI法檢測rLZ-8對T細(xì)胞的毒性并得到實(shí)驗(yàn)用藥的安全濃度。用CD3CD28抗體刺激CD3+T細(xì)胞活化并給予DEX和rLZ-8干預(yù)后,采用ELISA法檢測T細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子IL-1 β、IL-10和TGF-β 1的表達(dá)水平。CFSE標(biāo)記CD3+T細(xì)胞后刺激誘導(dǎo)分化,予DEX和rLZ-8干預(yù)后采用流式細(xì)胞術(shù)測定CD4+IL-17A+Th17細(xì)胞的比例,采用Real-time PCR檢測Th17細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ROR γ t表達(dá)水平,以研究Th17細(xì)胞分化情況。流式分選CD4+CD25+T細(xì)胞和CD4+CD25-T細(xì)胞,用CFSE標(biāo)記CD4+CD25+Treg細(xì)胞后進(jìn)行體外培養(yǎng)并予DEX和rLZ-8干預(yù),然后流式細(xì)胞術(shù)測定Treg細(xì)胞增殖情況。體外誘導(dǎo)CD4+CD25-T細(xì)胞分化為Treg,并予DEX和rLZ-8干預(yù),然后采用流式細(xì)胞術(shù)測定CD4+Foxp3+Treg細(xì)胞比例以研究Treg細(xì)胞分化情況,并提取細(xì)胞蛋白進(jìn)行Western Blotting檢測STAT3蛋白在各組T細(xì)胞中的表達(dá)。依據(jù)計(jì)量資料的正態(tài)性,使用單因素ANOVA方差分析、獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和秩和檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較,組間比較采用Dunnett’ sT3法或者LSD法,P<0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.rLZ-8對小鼠哮喘的緩解作用及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究肺組織HE染色和免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示OVA誘導(dǎo)建立哮喘模型組小鼠肺部病理出現(xiàn)明顯哮喘氣道炎癥特征,HE染色結(jié)果顯示rLZ-8和DEX減輕了小鼠氣道炎性浸潤,免疫組化結(jié)果顯示rLZ-8和DEX減少了肺部成熟DC（P<0.01）及嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）浸潤（P<0.01）,流式檢測也顯示rLZ-8降低了哮喘小鼠脾臟中成熟DC細(xì)胞（CD11c+CD86+和 CD11c+CD80+DC）的比例（P<0.01）。rLZ-8降低了哮喘小鼠BALF上清液IgE的表達(dá)水平（P<0.01）和Th17細(xì)胞主要效應(yīng)因子IL-17A的表達(dá)水平（P<0.01）,并提高Treg細(xì)胞因子IL-10的水平（P<0.01）,但未改變Th1細(xì)胞因子IFN-γ和Th2細(xì)胞因子IL-4的水平（P>0.05）。哮喘小鼠肺組織Real-time PCR顯示rLZ-8降低了小鼠的Th17細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子RORγt的表達(dá)水平（P<0.01）并提高Treg細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子Foxp3的表達(dá)水平（P<0.05）,但對Th1細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子T-bet的水平及Th2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子GATA3的水平則無影響（P>0.05）。rLZ-8下調(diào)小鼠脾臟中CD4+IL-17A+Th17細(xì)胞的比例并上調(diào)CD4+Foxp3+Treg細(xì)胞的比例（P<0.01）,但對CD4+IL-4+Th2細(xì)胞和CD4+IFN-γ+Th1的細(xì)胞比例無顯著影響（P>0.05）。此外,rLZ-8抑制肺組織中STAT3信號通路的活化（P<0.01）。2.rLZ-8對T細(xì)胞調(diào)節(jié)作用的體外研究rLZ-8抑制了 CD3+T細(xì)胞培養(yǎng)液中Th17相關(guān)細(xì)胞因子IL-1 β的表達(dá)（P<0.01）,促進(jìn)了 Treg細(xì)胞因子IL-10和TGF-β 1的表達(dá),（P<0.01）。在體外刺激CD3+T細(xì)胞活化的研究中發(fā)現(xiàn)rLZ-8降低了 Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子ROR y tmRNA的表達(dá)水平和CD4+IL-17A+Th17細(xì)胞的比例（P<0.01）,并抑制了 STAT3信號通路的活化（P<0.01）,說明Th17細(xì)胞的免疫應(yīng)答受到抑制。CD4+CD25+Treg細(xì)胞體外增殖研究和CD4+CD25-T細(xì)胞體外分化研究中,發(fā)現(xiàn)rLZ-8不能促進(jìn)CD4+CD25+T細(xì)胞的增殖（P>0.05）,但是可以誘導(dǎo)CD4+CD25-T細(xì)胞向CD4+Foxp3+Treg的分化（P<0.01）,而DEX則表現(xiàn)為促進(jìn)CD4+CD25+T細(xì)胞增殖的作用（P<0.01）,但不誘導(dǎo)Treg分化（P>0.05）。結(jié)論:本研究結(jié)果揭示了rLZ-8具有改善哮喘小鼠氣道炎癥方面的免疫調(diào)節(jié)作用,其機(jī)制可能是通過抑制STAT3信號通路,調(diào)節(jié)Th17/Treg細(xì)胞平衡,表現(xiàn)為抑制了 Th17細(xì)胞的增殖活化及轉(zhuǎn)錄因子ROR γ t、細(xì)胞因子IL-17A的釋放,同時(shí)促進(jìn)了 CD4+Foxp3+Treg的分化及其轉(zhuǎn)錄因子Foxp3和細(xì)胞因子IL-10的釋放,并抑制了 DC成熟,從而發(fā)揮改善哮喘小鼠氣道炎癥的免疫調(diào)節(jié)作用。因此,有良好免疫調(diào)節(jié)功能的rLZ-8具備成為哮喘治療藥物的可能。
夏利欣[3]（2020）在《IL-26與成人支氣管哮喘的相關(guān)性及臨床意義初探》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理在臨床上,支氣管哮喘是呼吸系統(tǒng)常見病和多發(fā)病之一,以氣道慢性炎癥為特征,由多種細(xì)胞和細(xì)胞組分參與,嚴(yán)重危害人體健康。目前認(rèn)為,Th1/Th2平衡失調(diào)導(dǎo)致的Th2細(xì)胞應(yīng)答優(yōu)勢是支氣管哮喘發(fā)病的主要機(jī)制。Th2細(xì)胞的活化以及由其誘導(dǎo)的炎癥介質(zhì)釋放,最終導(dǎo)致了氣道的高反應(yīng)性。此外,Th17細(xì)胞也被發(fā)現(xiàn)參與哮喘的發(fā)病,其分泌的細(xì)胞因子IL-17、IL-22等,可通過募集中性粒細(xì)胞引起氣道炎癥。IL-26是一種重要的細(xì)胞因子,主要由NK細(xì)胞和Th17細(xì)胞分泌,并且以后者為主。研究發(fā)現(xiàn),IL-26在變態(tài)反應(yīng)性疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病中呈現(xiàn)高表達(dá)。然而,IL-26是否與成人支氣管哮喘相關(guān),尚缺乏相關(guān)臨床數(shù)據(jù)。本研究通過檢測正常對照組、發(fā)作期哮喘患者以及治療后哮喘患者血清IL-26濃度,及其與肺功能等臨床檢測指標(biāo)的相關(guān)性,并行流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血白細(xì)胞IL-26+Th17細(xì)胞在各組的變化,評估其與成人支氣管哮喘的相關(guān)性,進(jìn)而初步探討IL-26在支氣管哮喘臨床診斷以及治療中的意義。目的:通過檢測哮喘患者外周血中IL-26的濃度及其他各項(xiàng)臨床指標(biāo),來初步研究IL-26與成人支氣管哮喘的相關(guān)性及臨床意義。方法:分為健康組、發(fā)作組和治療組進(jìn)行分組。發(fā)作組及治療組收集自2018年12月至2019年6月在武漢市中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科住院治療的支氣管哮喘患者,診斷和治療標(biāo)準(zhǔn)按照《支氣管哮喘防治指南（2016年版）》解讀;健康組募集自武漢市中心醫(yī)院體檢中心。共收集到發(fā)作組28例,治療組24例,健康組20例。臨床常規(guī)檢測血常規(guī)、肺功能;ELISA檢測血清IL-4、IL-26、IgE;流式細(xì)胞檢測CD4+T IL-17A+IL-26+的細(xì)胞比例。采用單因素方差分析、顯著性Student-T檢驗(yàn)、卡方檢驗(yàn)以及Pearson相關(guān)性方法來進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析,P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:（1）血常規(guī)嗜酸性粒細(xì)胞比值（EOS%）、嗜堿性粒細(xì)胞比值（BAS%）、中性粒細(xì)胞比值（NEU%）:發(fā)作組EOS%,BAS%和NEU%明顯高于健康組和治療組（P<0.05）,健康組與治療組無顯著差異。（2）肺功能:發(fā)作組FEV1%Pre、FEV1/FVC和PEF較治療組和健康組明顯降低（P<0.05）,治療組FEV1%Pre、FEV1/FVC和PEF低于健康組（P<0.05）。（3）血清ELISA檢測:發(fā)作組IL-26、IL-4、IgE表達(dá)顯著高于健康組和治療組（P<0.05）,健康組與治療組無顯著差異。（4）相關(guān)性分析:在哮喘發(fā)作組中,IL-26 與 FEV1%Pre、FEV1/FVC 均呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）;IL-4 與 IgE 與FEV1%Pre、FEV1/FVC 均呈負(fù)相關(guān);IL-26 與 IL-4、IL-26 均呈正相關(guān)（P<0.05）;（5）在IL-26+IL-17A+CD4+T細(xì)胞比例中,發(fā)作組明顯高于健康組和治療組（P<0.05）,發(fā)作組IL-26+CD4+T細(xì)胞比例明顯高于健康組和治療組（P<0.05）。結(jié)論:（1）血清IL-26在哮喘組病人中升高,血清IL-26與肺功能指標(biāo)（FEV1%Pre,FEV1/FVC）呈負(fù)相關(guān)顯示血清IL-26作為哮喘診斷指標(biāo)的潛力。（2）哮喘發(fā)作時(shí),哮喘組IL-26+IL-17A+CD4+T細(xì)胞高于健康組和治療組,但規(guī)范治療后可降低這些細(xì)胞表達(dá);IL-26+IL-17A+CD4+T細(xì)胞占IL-26+CD4+T細(xì)胞的11%,這提示還有其它CD4+T細(xì)胞參與IL-26分泌。
蔡秋景[4]（2020）在《TGF-β1/Smad3信號通路調(diào)節(jié)小鼠氣道平滑肌細(xì)胞表達(dá)IL-33參與哮喘機(jī)制》文中提出研究背景支氣管哮喘（哮喘）是一種以可逆性氣流受限和氣道高反應(yīng)性為顯著特征的慢性呼吸道炎癥性疾病。目前研究普遍表明,氣道重塑是發(fā)生可逆性氣流受限以及氣道高反應(yīng)性的病理結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。隨著疾病進(jìn)展,氣道重塑不斷加重使支氣管哮喘患者對常規(guī)的治療藥物及治療方案的反應(yīng)性不斷降低,在某些哮喘患者中甚至出現(xiàn)藥物抵抗。在以上過程中,氣道平滑肌細(xì)胞（airwaysmoothmusclecell,ASMC）增生以及肥大等變化被認(rèn)為是氣道重塑主要作用機(jī)制。轉(zhuǎn)化生長因子（Transforming growth factor,TGF）-β 1/Smad 信號通路是氣道平滑肌細(xì)胞參與哮喘發(fā)病機(jī)制的重要信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,其與氣道平滑肌細(xì)胞增殖及蛋白表達(dá)息息相關(guān)。在Smad蛋白家族中,雖然Smad2和Smad3結(jié)構(gòu)十分相似,但是Smad3蛋白中的某部分氨基酸結(jié)構(gòu)可以直接與DNA序列結(jié)合,以調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄,即Smad3蛋白可以參與TGF-β 1引起的靶基因調(diào)節(jié)作用。白細(xì)胞介素（Interleukin,IL）-33被認(rèn)為哮喘易感,并且能夠在鼻病毒誘發(fā)的支氣管哮喘加重過程中起到關(guān)鍵作用。先前的研究表明,氣道平滑肌細(xì)胞可以分泌IL-33,IL-33與TGF-β 1/Smad3信號通路的相關(guān)性研究,目前尚未報(bào)道。國內(nèi)外研究表明,1,25-（OH）2D3（又稱骨化三醇）可以減輕體內(nèi)及體外條件下的氣道重塑,并且其影響氣道平滑肌細(xì)胞的具體機(jī)制仍在研究?；趪鴥?nèi)外最新研究,我們推測TGF-β1可通過TGF-β1/Smad3信號通路刺激氣道平滑肌細(xì)胞表達(dá)IL-33,從而促進(jìn)哮喘中的炎癥反應(yīng);骨化三醇可協(xié)同布地奈德,更有效抑制氣道炎癥和氣道重塑,發(fā)揮其治療哮喘的作用。并對此進(jìn)行課題研究,旨在發(fā)現(xiàn)哮喘新的治療靶點(diǎn)。研究目的1.通過用不同濃度TGF-β 1培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠氣道平滑肌細(xì)胞,探究不同濃度TGF-β 1對氣道平滑肌細(xì)胞表達(dá)分泌IL-33的影響;2.采用TGF-β 1/Smad3信號通路阻斷劑（SIS3）干預(yù),觀察干預(yù)TGF-β 1/Smad3信號通路后對氣道平滑肌細(xì)胞表達(dá)分泌IL-33的影響;3.研究骨化三醇協(xié)同布地奈德對支氣管哮喘的治療作用及可能存在的作用機(jī)制。研究方法1.將小鼠氣道平滑肌細(xì)胞分成不同濃度[0ng/mL（空白）、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL]TGF-β 1組,獲取細(xì)胞培養(yǎng)上清液和總蛋白,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測各組上清液中IL-33的濃度,采用Western blotting法檢測各組細(xì)胞IL-33的蛋白表達(dá)情況。2.加入TGF-β 1/Smad3信路阻斷劑（SIS3）處理小鼠氣道平滑肌細(xì)胞,分為空白組、預(yù)處理TGF-β 1組、未預(yù)處理SIS3組和預(yù)處理SIS3組,采用ELISA法檢測各組上清液中IL-33濃度,采用Western blotting法檢測各組Smad3、pSmad3及IL-33蛋白表達(dá)情況。3.將小鼠氣道平滑肌細(xì)胞分為空白組、TGF-β 1組、SIS3組、布地奈德組、骨化三醇組、藥物共處理組,采用ELISA法檢測各組上清液中IL-33濃度,采用Western blotting法檢測各組Smad3、pSmad3及IL-33蛋白表達(dá)情況。研究結(jié)果1.ELISA表明,不同濃度TGF-β 1刺激小鼠氣道平滑肌細(xì)胞后,細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-33濃度不同;10ng/mL TGF-β 1作用效果最佳,1 ng/mL TGF-β 1和100 ng/mL TGF-β 1的作用效果沒有顯著差異。同時(shí),Westernblotting顯示,不同濃度TGF-β 1刺激小鼠氣道平滑肌細(xì)胞后,各組細(xì)胞不同程度表達(dá)IL-33;10ng/mL TGF-β 1組細(xì)胞IL-33蛋白表達(dá)量最高。2.加入SIS3后,通過ELISA檢測各組細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-33的濃度,結(jié)果表明,與預(yù)處理TGF-β 1組比較,預(yù)處理SIS3組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-33的濃度明顯減少。Westernblotting表明,在加入SIS3后,TGF-β 1/Smad3信號通路受到抑制,Smad3蛋白磷酸化水平下降,Smad3蛋白、pSmad3蛋白表達(dá)減少,IL-33蛋白表達(dá)也明顯減少。3.藥物處理各組小鼠氣道平滑肌細(xì)胞后,ELISA顯示,布地奈德組較骨化三醇組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-33濃度更低,且藥物共處理組IL-33濃度低于各單獨(dú)用藥組。Westernblotting顯示,藥物共處理組的Smad3蛋白、pSmad3蛋白、IL-33蛋白表達(dá)水平出現(xiàn)明顯降低的趨勢。研究結(jié)論①不同濃度TGF-β 1刺激氣道平滑肌細(xì)胞不同程度表達(dá)分泌IL-33,說明IL-33與TGF-β 1具有相關(guān)性。10ng/ml TGF-β 1為該作用的最佳濃度。②TGF-β 1/Smad3信號通路可調(diào)節(jié)氣道平滑肌細(xì)胞表達(dá)分泌IL-33,在氣道平滑肌細(xì)胞參與哮喘發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用。③骨化三醇聯(lián)合布地奈德可通過TGF-β 1/Smad3信號通路有效抑制小鼠氣道平滑肌細(xì)胞表達(dá)分泌IL-33,抑制氣道炎癥,從而治療哮喘。
劉粉[5]（2020）在《IL-33通過上調(diào)纖維細(xì)胞促纖維化作用促進(jìn)哮喘氣道重塑機(jī)制的研究》文中研究說明支氣管哮喘是一種以氣道慢性炎癥、平滑肌功能紊亂和氣道重塑為主要病理改變的氣道炎癥性疾病。其中氣道重塑是導(dǎo)致支氣管哮喘患者不可逆性氣流受限、肺功能受損的病理基礎(chǔ)。氣道重塑的病理表現(xiàn)主要包括上皮結(jié)構(gòu)與功能的改變、微血管的重構(gòu)、平滑肌異常增生與肥大、基底膜增厚、細(xì)胞外基質(zhì)沉積等。其中氣道上皮的改變主要表現(xiàn)為對不同刺激因子的易感性增強(qiáng)及損傷后上皮的異常修復(fù)。氣道上皮在損傷修復(fù)中會產(chǎn)生多種促炎因子,如白細(xì)胞介素-33（IL-33）、白細(xì)胞介素-25（IL-25）、胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素（TSLP）等,其中IL-33是氣道上皮損傷后釋放,誘導(dǎo)氣道炎癥的重要因子。白細(xì)胞介素-33廣泛表達(dá)于多種組織中,IL-33可由多種結(jié)構(gòu)細(xì)胞如成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及上皮細(xì)胞等和炎性細(xì)胞產(chǎn)生。但在不同種類的細(xì)胞IL-33的表達(dá)水平差異很大。相對而言,IL-33更多是由與外界相通的黏膜系如呼吸道、消化道等產(chǎn)生。有研究發(fā)現(xiàn),IL-33具有雙重作用:一方面,IL-33位于細(xì)胞核內(nèi),在轉(zhuǎn)錄調(diào)控中起作用;另一方面IL-33作為細(xì)胞因子可被分泌到細(xì)胞外,通過與其特異性受體ST2（ST2為IL-33的特異性受體,屬于IL-1受體家族的成員,IL-33通過與ST2結(jié)合啟動細(xì)胞膜表面IL-33/ST2信號傳導(dǎo)通路發(fā)揮生物活性）結(jié)合并相互作用發(fā)揮其細(xì)胞因子的作用。IL-33與其受體ST2的相互作用參與了機(jī)體多種疾病的生物學(xué)活性,其中包括促進(jìn)支氣管哮喘炎癥過程中的Th2反應(yīng)。近年來越來越多的研究表明IL-33在支氣管哮喘氣道重塑這一病理改變的發(fā)生發(fā)展過程中有及其重要的作用,其可通過誘導(dǎo)纖維細(xì)胞活化并產(chǎn)生白細(xì)胞介素-13（IL-13）、白細(xì)胞介素-5（IL-5）,進(jìn)而在哮喘氣道炎癥反應(yīng)中起重要作用。有研究表明IL-33/ST2軸可通過對肥大細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、Th2等細(xì)胞產(chǎn)生作用,進(jìn)而參與哮喘的發(fā)生、發(fā)展。近期的研究還證實(shí)IL-33在無外源性抗原刺激時(shí)促進(jìn)固有免疫細(xì)胞產(chǎn)生IL-5,IL-13等,而IL-13可促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和活化,增強(qiáng)平滑肌細(xì)胞的收縮力,進(jìn)而在哮喘氣道重塑中起重要作用。我們既往有研究發(fā)現(xiàn)IL-33可通過IL-33/ST2信號通路促進(jìn)哮喘氣道重塑。同時(shí)有研究證實(shí)IL-33/ST2活化后可通過下游的NF-κB和MAPK信號通路,促進(jìn)Th2細(xì)胞因子的產(chǎn)生,進(jìn)而參與多種疾病如過敏性休克、特應(yīng)性皮炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、自身免疫疾病等的發(fā)生和發(fā)展過程。越來越多的研究發(fā)現(xiàn),IL-33介導(dǎo)了支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制的許多環(huán)節(jié),有望為支氣管哮喘的個(gè)體化治療提供一個(gè)新靶點(diǎn)。纖維細(xì)胞是一類獨(dú)特的骨髓間充質(zhì)祖細(xì)胞,其特征是特異性表達(dá)造血細(xì)胞標(biāo)記物（CD34、CD45和白細(xì)胞特異性蛋白1）和基質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物（I型膠原和脯氨酸-4-羥化酶）。其最初在外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）中分離出來,并在損傷修復(fù)中作為CD45+CD45RO+CD34+CD11b+CD13+HLA-DR+細(xì)胞,這些細(xì)胞在TGF-β1刺激下產(chǎn)生纖維蛋白和膠原,并表達(dá)成肌細(xì)胞標(biāo)志物α-平滑肌肌動蛋白。越來越多的證據(jù)表明,纖維細(xì)胞是循環(huán)間充質(zhì)祖細(xì)胞,作為成纖維細(xì)胞和成肌細(xì)胞的可再生來源,在組織損傷修復(fù)與慢性炎癥中至關(guān)重要。其是參與巨噬細(xì)胞促炎特性和成纖維細(xì)胞組織重塑特性的一類獨(dú)特的細(xì)胞,在人類很多疾病的特異性炎癥反應(yīng)中起重要作用。因其可特異性表達(dá)CD34和I型膠原而與成纖維細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等相關(guān)細(xì)胞區(qū)別。有研究發(fā)現(xiàn)纖維細(xì)胞的數(shù)量與上皮下基底膜的厚度呈明顯正相關(guān),提示纖維細(xì)胞與哮喘氣道重塑密切相關(guān),現(xiàn)已有研究證實(shí)纖維細(xì)胞在一些模型中能夠促進(jìn)α-平滑肌肌動蛋白的表達(dá)而在組織重塑中起重要作用。還有研究發(fā)現(xiàn)循環(huán)中的纖維細(xì)胞可能是通過在氣道上皮下聚集而引起氣道平滑肌增生肥厚,并可分泌血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）進(jìn)而促進(jìn)哮喘氣道重塑。尤其是最近的研究發(fā)現(xiàn)哮喘患者外周血來源的纖維細(xì)胞與IL-17A作用可產(chǎn)生促炎細(xì)胞介質(zhì),還可以與Th2型細(xì)胞因子作用產(chǎn)生膠原。故纖維細(xì)胞在介導(dǎo)支氣管哮喘的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。體外培養(yǎng)外周血單個(gè)核細(xì)胞加入血小板源性生長因子可產(chǎn)生纖維細(xì)胞,用IL-33刺激后纖維細(xì)胞表達(dá)增加。IL-33在不增加內(nèi)源性轉(zhuǎn)化生長因子β1產(chǎn)生的情況下,增強(qiáng)了纖維細(xì)胞的增殖及表達(dá)α-SMA增多。IL-33刺激后纖維細(xì)胞組成性地表達(dá)IL-13和IL-5增加。還有研究發(fā)現(xiàn)IL-33能促進(jìn)過敏性哮喘患者循環(huán)中纖維細(xì)胞的遷移和增殖。但I(xiàn)L-33活化的纖維細(xì)胞與氣道重塑的相互作用及機(jī)制尚不清楚。迄今為止,國內(nèi)外研究表明氣道上皮細(xì)胞和纖維細(xì)胞均在支氣管哮喘的發(fā)生發(fā)展中起重要作用,而IL-33在哮喘相關(guān)的氣道炎癥中有至關(guān)重要的作用。但是有關(guān)氣道上皮與纖維細(xì)胞之間的相互作用,IL-33對哮喘氣道重塑的影響以及IL-33如何通過纖維細(xì)胞進(jìn)而對氣道重塑產(chǎn)生影響的研究證據(jù)尚不充足。研究目的:1.探討IL-33/ST2-p38MAPK信號通路可通過增強(qiáng)纖維細(xì)胞的促纖維化作用進(jìn)而促進(jìn)哮喘氣道重塑。2.通過體外培養(yǎng)纖維細(xì)胞,對IL-33/ST2-p38MAPK信號通路進(jìn)行干預(yù),進(jìn)而研究該信號通路對哮喘氣道重塑標(biāo)志物的影響。3.通過建立小鼠哮喘模型,采用ST2的抗體或者p38 MAPK的特異性拮抗劑（SB203580）干預(yù),在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中觀察IL-33/ST2-p38MAPK信號通路可通過誘導(dǎo)纖維細(xì)胞增殖進(jìn)而參與哮喘氣道重塑。研究方法:1.從32例支氣管哮喘患者和30例對照組患者（纖維支氣管鏡活檢）分別獲取肺組織標(biāo)本,應(yīng)用蘇木精-伊紅染色法（HE）以觀察哮喘患者氣道重塑相關(guān)的病理學(xué)表現(xiàn),采用免疫組織化學(xué)染色法（IHC）觀察IL-33及氣道重塑標(biāo)記物I型膠原（Collagen Ⅰ）、纖維連接蛋白-1（FN1）與α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）在各組患者肺組織中的表達(dá)情況。2.ELISA法檢測哮喘患者及對照組患者中外周血IL-33的表達(dá)水平,應(yīng)用流式細(xì)胞學(xué)檢測兩組患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中纖維細(xì)胞的比例,并對外周血IL-33的表達(dá)水平與纖維細(xì)胞的比例行相關(guān)性分析。3.體外培養(yǎng)纖維細(xì)胞,加入IL-33刺激細(xì)胞,采用Western blot和qPCR方法檢測細(xì)胞中I型膠原、纖維連接蛋白-1（FN1）及α-SMA的表達(dá)水平,應(yīng)用流式細(xì)胞學(xué)檢測IL-33對纖維細(xì)胞增殖的影響。4.體外培養(yǎng)纖維細(xì)胞,應(yīng)用ST2的抗體和（或）p38 MAPK的抑制劑（SB203580）預(yù)處理纖維細(xì)胞,再加入IL-33刺激細(xì)胞,采用Western blot和qPCR方法觀察纖維細(xì)胞中I型膠原、FN1及α-SMA和ST2的表達(dá)水平,應(yīng)用流式細(xì)胞學(xué)檢測抑制IL-33/ST2-p38MAPK信號通路后對纖維細(xì)胞增殖的影響。5.建立小鼠哮喘動物模型,采用IHC觀察小鼠氣道上皮中IL-33、Collagen I、FN1、α-SMA的表達(dá)情況。給予ST2抗體和（或）SB203580預(yù)處理后,應(yīng)用IHC、Western blot和qPCR的方法檢測抑制IL-33/ST2-p38MAPK信號通路后對小鼠哮喘氣道重塑的影響,同時(shí)應(yīng)用流式細(xì)胞學(xué)檢測抑制IL-33/ST2-p38MAPK信號通路后對纖維細(xì)胞增殖的影響。研究結(jié)果:1.通過比較哮喘患者和對照組患者的肺組織HE染色,發(fā)現(xiàn)哮喘患者的氣道上皮具有明顯的與氣道重塑相關(guān)的病理學(xué)表現(xiàn),如:基底膜增厚、氣道上皮細(xì)胞化生與脫落,炎性細(xì)胞浸潤,膠原沉積等。同時(shí)進(jìn)行IHC染色,發(fā)現(xiàn)哮喘患者氣道組織中IL-33、Ⅰ型膠原、FN1及α-SMA的表達(dá)較對照組明顯增加。2.與對照組比較,哮喘患者外周血IL-33的水平及外周血單個(gè)核細(xì)胞中的纖維細(xì)胞的比例均增加,相關(guān)性分析顯示兩者呈明顯正相關(guān)。3.體外培養(yǎng)的纖維細(xì)胞應(yīng)用IL-33處理后,其細(xì)胞中Ⅰ型膠原、FN1及α-SMA的表達(dá)均顯著增加,同時(shí)可促進(jìn)纖維細(xì)胞增殖。4.體外培養(yǎng)纖維細(xì)胞,應(yīng)用ST2的抗體和（或）SB203580預(yù)處理后,其細(xì)胞中Ⅰ型膠原、FN1及α-SMA和ST2的表達(dá)水平較對照組明顯降低,纖維細(xì)胞的數(shù)目也明顯降低。5.在小鼠哮喘動物模型中,HE染色顯示氣道上皮杯狀細(xì)胞增多,氣道上皮平滑肌增生,基底膜增厚,應(yīng)用ST2抗體和（或）SB203580預(yù)處理的小鼠哮喘模型則上述表現(xiàn)減弱。通過IHC染色發(fā)現(xiàn)小鼠肺組織中IL-33、Ⅰ型膠原、FN1及α-SMA的表達(dá)較對照組明顯增加,肺泡灌洗液中纖維細(xì)胞的數(shù)目較對照組增加。應(yīng)用ST2抗體和（或）SB203580預(yù)處理后,IHC提示哮喘氣道重塑的病理學(xué)改變?nèi)缁啄ぴ龊袷菧p輕的,且氣道上皮表達(dá)IL-33,Ⅰ型膠原、FN1及α-SMA亦減少,流式細(xì)胞學(xué)提示纖維細(xì)胞數(shù)量也是明顯降低的。研究結(jié)論:1.哮喘患者氣道上皮細(xì)胞分泌的IL-33增加,可通過與纖維細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合,通過p38 MAPK信號通路,引起纖維細(xì)胞中Ⅰ型膠原、FN1及α-SMA的表達(dá)增加,進(jìn)而導(dǎo)致哮喘氣道重塑的加劇。2.通過體內(nèi)及體外抑制IL-33/ST2-p38MAPK信號通路,可降低纖維細(xì)胞中氣道重塑標(biāo)志物的表達(dá),并改善實(shí)驗(yàn)動物的氣道重塑的相關(guān)表現(xiàn)。3.IL-33可通過ST2-p38MAPK信號通路誘導(dǎo)纖維細(xì)胞活化進(jìn)而促進(jìn)哮喘氣道重塑,提示IL-33/ST2-p38MAPK信號通路可能成為支氣管哮喘治療的一個(gè)新的有效靶點(diǎn)。
戴銀芳[6]（2019）在《兒童支氣管哮喘的不同呼出氣一氧化氮水平與臨床特征及部分細(xì)胞因子相關(guān)性研究》文中認(rèn)為目的:分析呼出氣體一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide,FeNO）不同水平的兒童支氣管哮喘臨床特征,為兒童哮喘分型提供幫助;動態(tài)觀察哮喘患兒外周血相關(guān)細(xì)胞因子（IL-4、IL-5、IL-9、IL-17及IL-21）的變化,分析其可能的病理機(jī)制,為哮喘的診斷治療提供新的依據(jù)。方法:選取2017年12月至2018年9月期間在蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院呼吸科門診就診的5-12歲哮喘初診患者。按照兒童支氣管哮喘防治指南（2016年版）進(jìn)行診斷和治療,根據(jù)FeNO的水平分為FeNO正常組（FeNO<25ppb）和FeNO升高組（FeNO≥25ppb）,于入組0月、1月、3月、6月動態(tài)觀察不同組別患兒的臨床表現(xiàn)、肺功能進(jìn)行分析;并檢測兩組患兒外周血IL-4、IL-5、IL-9、IL-17及IL-21的表達(dá)水平,并分析其臨床意義。本研究共納入支氣管哮喘兒童41例,男27例,女14例,男女比例1.92:1。年齡5～12歲,年齡中位數(shù)7歲。對這些患者隨訪6個(gè)月。按照FeNO水平分為兩組,比較分析兩組不同的臨床特征及相關(guān)細(xì)胞因子情況。并隨機(jī)選取5-12歲健康兒童作為對照組,性別不限。結(jié)果:FeNO升高組,臨床表現(xiàn)為咳嗽的有18例（18/22例）,喘息的有13例（13/22例）;胸悶的有2例（2/22例）。伴隨鼻炎和（或）特應(yīng)性皮炎者20例（20/22例）。一級親屬存在哮喘/鼻炎/特應(yīng)性皮炎者14例（14/22例）。間歇狀態(tài)患者11例（11/22例）,輕度持續(xù)者9例（9/22例）,中度持續(xù)者2例（2/22例）。FeNO正常組,臨床表現(xiàn)為咳嗽的有15例（15/19例）,喘息的有15例（15/19例）;胸悶的有6例（6/19例）。伴隨鼻炎和（或）特應(yīng)性皮炎者10例（10/19例）。一級親屬存在哮喘/鼻炎/特應(yīng)性皮炎者8例（8/19例）。間歇狀態(tài)患者8例（8/19例）,輕度持續(xù)者10例（10/19例）,中度持續(xù)者1例（1/19例）。FeNO升高組與FeNO正常組相比較,伴有鼻炎和（或）特應(yīng)性皮炎者為FeNO升高組多于FeNO正常組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。FeNO升高組治療前及治療1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月的中位數(shù)分別為42ppb、33ppb、23ppb、15ppb;FeNO正常組治療前及治療1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月的中位數(shù)分別為13ppb、15ppb、13ppb、10ppb。兩組治療前及治療1個(gè)月、3個(gè)月時(shí)比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療6個(gè)月時(shí),兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。FeNO升高組、FeNO正常組治療前的FEV1/FVC、MMEF與對照組比較,FeNO升高組、FeNO正常組的FEV1/FVC、MMEF均低于對照組（P<0.05）。FeNO升高組與FeNO正常組分別比較治療1個(gè)月、3個(gè)月及6個(gè)月時(shí)FEV1/FVC,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）,但兩組與對照組相比,數(shù)值均低于對照組（P<0.05）。治療1個(gè)月時(shí),FeNO升高組的MMEF低于FeNO正常組（Z=-2.078,P=0.038）;治療3個(gè)月及6個(gè)月時(shí),FeNO升高組的MMEF與FeNO正常組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。而與對照組相比,治療1個(gè)月時(shí),FeNO升高組的MMEF較對照組低（Z=-3.653,P<0.001）;治療3個(gè)月及6個(gè)月時(shí),FeNO升高組的MMEF與對照組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在治療3個(gè)月時(shí),FeNO正常組的MMEF較對照組低（Z=-2.797,P=0.005）;治療1個(gè)月及6個(gè)月時(shí),FeNO正常組的MMEF與對照組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。對兩組進(jìn)行組內(nèi)比較,比較肺功能指標(biāo)在治療前后的差異,發(fā)現(xiàn)FeNO升高組內(nèi)FEV1/FVC、MMEF治療后改善較FeNO正常組明顯。FeNO升高組的22例患者3個(gè)月隨訪時(shí)達(dá)臨床癥狀穩(wěn)定的有19例,完成6個(gè)月隨訪的11例患者達(dá)臨床穩(wěn)定狀態(tài)的有9例。支氣管激發(fā)試驗(yàn)由陽性轉(zhuǎn)為陰性的情況,3個(gè)月轉(zhuǎn)陰的有9例,6個(gè)月轉(zhuǎn)陰的有7例。FeNO正常組的19例患者3個(gè)月隨訪時(shí)達(dá)臨床癥狀穩(wěn)定的有14例,完成6個(gè)月隨訪的11例患者達(dá)臨床穩(wěn)定狀態(tài)的有9例。支氣管激發(fā)試驗(yàn)由陽性轉(zhuǎn)為陰性的情況,3個(gè)月轉(zhuǎn)陰的有7例,6個(gè)月轉(zhuǎn)陰的有5例。FeNO升高組外周血嗜酸性粒細(xì)胞升高者有17例（17/22例）。過敏原陰性有2例（2/22例）,塵螨過敏者20例（20/22例）,級別均在4級以上,霉菌過敏者5例（5/22例）,貓毛、狗毛過敏者2例（2/22例）,動物皮屑過敏者1例（1/22例）,花粉過敏者3例（3/22例）,食物過敏4例（4/22例）。FeNO正常組外周血嗜酸性粒細(xì)胞升高者有10例（10/19例）。過敏原陰性有5例（5/19例）,塵螨過敏者16例（16/19例）,級別均在4級以上,霉菌過敏者7例（7/19例）,食物過敏5例（5/19例）。FeNO升高組與FeNO正常組的過敏原表現(xiàn)無差異（P>0.05）。41例哮喘患者的外周血IL-4、IL-5、IL-9、IL-17、IL-21水平在治療前及治療1個(gè)月時(shí)均高于對照組（P<0.05）。治療3個(gè)月時(shí),FeNO升高組及FeNO正常組的IL-9水平與對照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;FeNO升高組及FeNO正常組的IL-4、IL-5、IL-17、IL-21水平高于對照組（P<0.05）。治療6個(gè)月時(shí),FeNO升高組的IL-5、IL-21水平高于對照組（P<0.05）;FeNO升高組的IL-4、IL-9、IL-17水平與對照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。FeNO正常組的IL-4水平與對照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;FeNO正常組的IL-5、IL-17、IL-21水平高于對照組（P<0.05）,IL-9水平低于對照組（P<0.05）。FeNO升高組與FeNO正常組兩組比較時(shí),在治療前,FeNO升高組的IL-4、IL-5水平高于FeNO正常組（P<0.05）;FeNO升高組的IL-9水平與FeNO正常組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;FeNO升高組的IL-17、IL-21水平低于FeNO正常組（P均<0.05）。治療1個(gè)月時(shí),FeNO升高組的IL-4、IL-5水平高于FeNO正常組（P均<0.05）;FeNO升高組的IL-9水平與FeNO正常組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;FeNO升高組的IL-17、IL-21的水平低于FeNO正常組（P<0.05）。治療3個(gè)月時(shí),兩組比較,IL-4、IL-5水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）;FeNO升高組的IL-9水平與FeNO正常組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;FeNO升高組的IL-17、IL-21水平低于FeNO正常組（P<0.05）。治療6個(gè)月時(shí),兩組比較,IL-4、IL-5水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）,但兩組治療前后比較,FeNO升高組的IL-4、IL-5水平改善較FeNO正常組明顯;FeNO升高組IL-9水平高于FeNO正常組（P<0.05）;FeNO升高組的IL-17、IL-21水平低于FeNO正常組（P<0.05）。IL-5、IL-17與FeNO高低無相關(guān)性（P>0.05）;FeNO升高組的IL-4、IL-9、IL-21 與 FeNO 水平呈正相關(guān)（P<0.05）;FeNO 正常組的 IL-4、IL-5、IL-9、IL-17、IL-21與FeNO水平均無相關(guān)性（P>0.05）。結(jié)論:1.呼出氣體一氧化氮不同水平的哮喘患者的臨床特點(diǎn)不同,呼出氣體一氧化氮水平高的患者更易合并鼻炎、濕疹及特應(yīng)性皮炎。2.哮喘患者外周血Th2/Th9/Th17分泌的標(biāo)志性細(xì)胞因子參與了哮喘的免疫病理;FeNO水平升高組的IL-4、IL-9及IL-21均與FeNO水平呈正相關(guān)。3.哮喘患者臨床癥狀和體征不能確切反映哮喘的表型,FeNO更有助于哮喘的分型及反映治療前后的改善情況。
田福玲[7]（2019）在《基于“天氣通于肺”理論的支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠自噬功能及中藥干預(yù)機(jī)制研究》文中認(rèn)為目的:探討“天氣通于肺”的理論淵源及主要內(nèi)容,分析霧霾的特性及其與哮喘寒飲蘊(yùn)肺證的關(guān)系,研究煙熏環(huán)境下寒涼刺激誘發(fā)的支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠的致病機(jī)制,以及中藥對肺組織內(nèi)細(xì)胞自噬的干預(yù)機(jī)制。方法:本文采用理論探討與實(shí)驗(yàn)研究相結(jié)合的方法。1.理論研究:運(yùn)用文獻(xiàn)研究和理論分析的方法,探討“天氣通于肺”的理論內(nèi)涵、淵源及主要內(nèi)容,肺與自然的相關(guān)性,霧霾的特性及其與哮喘寒飲蘊(yùn)肺證的關(guān)系。同時(shí)研究肺陽與哮喘寒飲蘊(yùn)肺證的關(guān)系以及寒飲蘊(yùn)肺證的內(nèi)涵、病因病機(jī)及治療。2.實(shí)驗(yàn)研究:采用卵清白蛋白（OVA）致敏,給予寒涼和飲冷刺激、利用香煙煙霧給予煙熏刺激,以及讓大鼠在水中游泳使其勞累的方法,構(gòu)建煙熏環(huán)境下支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證病證結(jié)合的大鼠模型,并分別用小青龍湯及溫陽化飲方進(jìn)行干預(yù),觀察相關(guān)檢測指標(biāo)。結(jié)果:運(yùn)用中醫(yī)傳統(tǒng)病因與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)病理模型相結(jié)合的造模方法,成功復(fù)制了煙熏環(huán)境下哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠病證結(jié)合模型。對比研究煙熏組和非煙熏組支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠肺功能和血清中炎性細(xì)胞因子的變化,明確了霧霾能加重支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證的發(fā)病程度,以及霧霾加重支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證的病理機(jī)制。結(jié)果顯示:霧霾可以使支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠肺功能的吸氣阻力（Ri）、呼氣阻力（Re）升高,順應(yīng)性（Cdyn）降低,導(dǎo)致大鼠哮喘癥狀加重;其機(jī)制可能在于煙熏可誘導(dǎo)哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠血清IL-13、TGF-β1的水平升高,降低IFN-γ的水平,從而加重氣道炎癥反應(yīng)。對煙熏環(huán)境下寒飲蘊(yùn)肺證大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察及藥物干預(yù),并檢測造模動物的肺功能、病理切片、炎癥因子等指標(biāo),結(jié)果顯示:溫陽化飲方可促使大鼠周圍血中IL-10、IL-18、IFN-γ不同程度的提高,使大鼠周圍血中IL-4、IL-5、IL-13、TGF-β和TNF-α不同程度的降低,從而抑制過敏反應(yīng),調(diào)控炎癥的發(fā)生、發(fā)展;其機(jī)制可能是通過降低大鼠的自噬基因Atg和自噬蛋白Beclin1和LC3-a/b表達(dá),抑制細(xì)胞外基質(zhì)的分泌和肺成纖維細(xì)胞膠原沉積過程,減緩氣道重塑,抑制哮喘的發(fā)生發(fā)展。結(jié)論:“天氣通于肺”中的“天氣”,指的是自然界的清凈之氣,與肺氣是相通應(yīng)的。霧霾是一種復(fù)合型致病因素,其性彌散,常兼夾濕邪、熱邪侵犯人體肺臟而發(fā)病。煙草煙霧在性質(zhì)和致病特點(diǎn)上與霧霾有很多相似之處,而二者含有的顆粒物的主要成分均是PM2.5。人體津液的正常輸布需要陽氣的蒸騰氣化作用,肺陽充足,則宣發(fā)肅降功能正常,津液得以正常輸布。支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證病證的病理機(jī)制是肺陽虛,導(dǎo)致痰飲內(nèi)停,致使大鼠血清IL-13、TGF-β1的水平升高,降低IFN-γ的水平,從而加重氣道炎癥反應(yīng);“溫陽化飲方”的作用機(jī)制可能在于通過降低自噬基因Atg的表達(dá)及蛋白Beclin1和LC3水平,減輕哮喘氣道炎癥水平,逆轉(zhuǎn)氣道重塑,調(diào)控氣道高反應(yīng)。
迪麗努爾·烏甫爾[8]（2019）在《哮喘合并抑郁的影響因素及抑郁相關(guān)基因多態(tài)性研究》文中研究指明目的:支氣管哮喘是常見慢性疾病之一,除了引起軀體上的不適,還常常導(dǎo)致患者出現(xiàn)焦慮、抑郁,嚴(yán)重影響哮喘的控制和患者的生活質(zhì)量,出現(xiàn)“惡性循環(huán)”。為了從遺傳學(xué)的角度了解哮喘合并抑郁的分子機(jī)制,本研究對抑郁相關(guān)基因多態(tài)性與支氣管哮喘合并抑郁風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行關(guān)聯(lián)性研究。首先通過支氣管哮喘合并抑郁的發(fā)生率及其影響因素研究,探討支氣管哮喘合并抑郁與支氣管哮喘的控制及生活質(zhì)量之間的關(guān)系;然后以支氣管哮喘和抑郁共性敏感的神經(jīng)-免疫網(wǎng)絡(luò)指標(biāo)為依據(jù),檢測各組患者血漿IL-17、TNF-α、IL-6、5-HT水平,探索支氣管哮喘合并抑郁神經(jīng)-免疫網(wǎng)絡(luò)共性敏感指標(biāo)的變化規(guī)律及其與抑郁病情進(jìn)展的關(guān)聯(lián)性;最后,通過篩選84個(gè)與抑郁密切相關(guān)的單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism SNP）位點(diǎn),分析其在支氣管哮喘、支氣管哮喘合并抑郁和健康對照組之間的分布差異,分析這些位點(diǎn)和支氣管哮喘合并抑郁的相關(guān)性;進(jìn)一步行遺傳關(guān)聯(lián)性研究,明確同一個(gè)基因的SNP之間是否存在連鎖效應(yīng),連鎖的SNP形成的單倍型和支氣管哮喘合并抑郁的相關(guān)性,探究支氣管哮喘合并抑郁在影響哮喘的控制和降低生活質(zhì)量可能的機(jī)制。方法:1)對符合納入標(biāo)準(zhǔn)的387例支氣管哮喘患者進(jìn)行一般資料及問卷調(diào)查研究。采用Logistic回歸分析法進(jìn)行哮喘合并抑郁癥的影響因素分析;采用線性相關(guān)分析Zung氏抑郁自評量表（Self-rating depression scale SDS）與支氣管哮喘控制測試（Asthma control test ACT）及成人哮喘生命質(zhì)量評分表（Asthma quality of life questionnaire AQLQ）之間的相關(guān)性;2)采用ELISA方法檢測各組患者血漿IL-17、TNF-α、IL-6表達(dá)水平,高效液相色普法檢測血漿中的5-HT水平,分析支氣管哮喘合并抑郁神經(jīng)-免疫網(wǎng)絡(luò)共性敏感指標(biāo)的變化規(guī)律及其與抑郁病情進(jìn)展的關(guān)聯(lián)性;3)利用UCSC基因組瀏覽器和haploview4.2軟件確定與抑郁相關(guān)的84個(gè)基因位點(diǎn)。采用離心柱法提取DNA,應(yīng)用SNP Scan分析法對抑郁相關(guān)84個(gè)基因位點(diǎn)進(jìn)行基因型分析。采用卡方檢驗(yàn)、Logistic回歸分析法,研究共顯性、顯性、隱性等遺傳模式下各SNP的OR值和置信區(qū)間。評估其與支氣管哮喘合并抑郁的關(guān)聯(lián)性;進(jìn)一步行連鎖分析和單倍型關(guān)聯(lián)分析,采用Logistic回歸分析評估連鎖的SNP形成的單倍型和哮喘合并抑郁的關(guān)聯(lián)性。結(jié)果:1)本研究共調(diào)查符合納入標(biāo)準(zhǔn)的387例哮喘患者,其合并抑郁的檢出率為62.5%,單因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示:支氣管哮喘合并抑郁患者與單純哮喘患者相比,在性別,年齡,文化程度,婚姻狀況,是否工作,家庭月收入,是否合并其他疾病,病情持續(xù)狀態(tài),是否用藥,臨床癥狀（咳嗽,夜間氣憋）方面具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）;采用Logistic多元回歸模型分析發(fā)現(xiàn):輕度持續(xù)（與間歇發(fā)作相比,OR=2.529,95%CI=1.379-4.640）,中/重度持續(xù)（與間歇發(fā)作相比,OR=2.260,95%CI=1.124-4.543）;有治療用藥史（與未治療用藥比較,OR=2.461,95%CI=1.388-4.366）,是哮喘患者合并抑郁的危險(xiǎn)因素。線性相關(guān)分析結(jié)果顯示,隨著SDS評分增加,AQLQ總分逐漸降低,呈線性負(fù)相關(guān)（P=0.000,r=-0.527）。隨著SDS評分增加,ACT評分也逐漸下降,呈線性負(fù)相關(guān)（P=0.000,r=-0.533）;2)與健康對照組相比,支氣管哮喘合并輕度抑郁患者組5-羥色胺無明顯差異（P>0.05）,支氣管哮喘合并中度抑郁患者組5-羥色胺有明顯差異（Z=-3.79,P<0.05）,支氣管哮喘合并重度抑郁患者組5-羥色胺有明顯差異（Z=-2.172,P<0.05）;支氣管哮喘合并輕度抑郁與支氣管哮喘合并中度抑郁比較5-羥色胺有明顯差異（Z=-2.883,P<0.05）,與支氣管哮喘合并重度抑郁比較5-羥色胺有明顯差異（Z=-2.587,P<0.05）,支氣管哮喘合并中度抑郁與支氣管哮喘合并重度抑郁比較5-羥色胺無明顯差異（P>0.05）。IL-17水平,與健康對照組相比,支氣管哮喘合并輕度抑郁患者組有明顯差異（Z=-4.95,P<0.05）,支氣管哮喘合并中度抑郁患者組有明顯差異（Z=-4.79,P<0.05）,支氣管哮喘合并重度抑郁患者組有明顯差異（Z=-4.03,P<0.05）;支氣管哮喘合并輕度抑郁與支氣管哮喘合并中度抑郁比較IL-17水平有明顯差異（Z=-2.01,P<0.05）,與支氣管哮喘合并重度抑郁比較IL-17水平有明顯差異（Z=-2.55,P<0.05）,支氣管哮喘合并中度抑郁與支氣管哮喘合并重度抑郁比較IL-17水平有明顯差異（Z=-2.46,P<0.05）;即健康對照組與支氣管哮喘合并抑郁患者組比較IL-17水平有明顯差異,且哮喘合并不同程度的抑郁組之間也存在明顯差異。IL-6水平,與健康對照組相比,支氣管哮喘合并輕度抑郁患者組IL-6水平有明顯差異（Z=-7.15,P<0.05）,支氣管哮喘合并中度抑郁患者組IL-6水平有明顯差異（Z=-5.81,P<0.05）;支氣管哮喘合并重度抑郁患者組IL-6水平有明顯差異（Z=-4.17,P<0.05）;支氣管哮喘合并輕度抑郁與支氣管哮喘合并中度抑郁比較IL-6水平無明顯差異（P>0.05）,與支氣管哮喘合并重度抑郁比較IL-6水平無明顯差異（P>0.05）,支氣管哮喘合并中度抑郁與支氣管哮喘合并重度抑郁比較IL-6水平無明顯差異（P>0.05）;即健康對照組與支氣管哮喘合并抑郁患者組之間比較IL-6有明顯差異,但哮喘合并不同程度的抑郁患者組比較無明顯差異。TNF-α水平,與健康對照組相比,支氣管哮喘合并輕度抑郁患者組TNF-α水平有明顯差異（Z=-5.53,P<0.05）,支氣管哮喘合并中度抑郁患者組TNF-α水平有明顯差異（Z=-3.68,P<0.05）;支氣管哮喘合并重度抑郁患者組TNF-α有明顯差異（Z=-2.34,P<0.05）;支氣管哮喘合并輕度抑郁與支氣管哮喘合并中度抑郁比較TNF-α水平無明顯差異（P>0.05）,與支氣管哮喘合并重度抑郁比較TNF-α水平無明顯差異（P>0.05）,支氣管哮喘合并中度抑郁與支氣管哮喘合并重度抑郁比較TNF-α水平無明顯差異（P>0.05）;即健康對照組與支氣管哮喘合并抑郁患者組之間比較TNF-α水平有明顯差異（P<0.05）,但哮喘合并不同程度的抑郁患者組之間比較無明顯差異（P>0.05）;3)分析健康對照組、單純哮喘組和哮喘合并抑郁組之間的基因型以及等位基因頻率發(fā)現(xiàn),有18個(gè)位點(diǎn)在共顯性、顯性、隱性模型或者等位基因的分布差異至少存在一個(gè)顯著性的卡方值。對抑郁相關(guān)SNP的基因型和哮喘患病狀態(tài)做Logistic分析發(fā)現(xiàn),84個(gè)位點(diǎn)中有24個(gè)位點(diǎn)至少存在回歸關(guān)系。觀察84個(gè)位點(diǎn)在哮喘患者中的連鎖狀態(tài)時(shí)發(fā)現(xiàn),總共有16對SNP處于高度連鎖狀態(tài),形成了單倍體;支氣管哮喘患者組與健康對照組相比,3個(gè)基因的4種單倍體型與哮喘狀態(tài)有顯著關(guān)聯(lián),分別為GRPHN基因rs10129827,rs28762177的GG型（OR=1.258,P=0.02582）,BDFN基因rs6265,rs2049046的CA型（OR=1.267,P=0.0176）,TT型（OR=0.763,P=0.008）,HTR1A基因rs878567,rs6295的TT型（OR=1.28,P=0.030）。結(jié)論:1)支氣管哮喘患者易合并抑郁癥,抑郁癥是支氣管哮喘的常見伴發(fā)疾病,其受多種因素影響,且抑郁顯著影響支氣管哮喘疾病控制及生活質(zhì)量;2)發(fā)現(xiàn)IL-17、IL-6、TNF-α、5-HT變化水平與支氣管哮喘合并抑郁的發(fā)生存在密切關(guān)系;其中IL-17和5-HT與支氣管哮喘合并抑郁的發(fā)展及病情嚴(yán)重程度密切相關(guān),提示支氣管哮喘合并抑郁患者神經(jīng)免疫網(wǎng)絡(luò)可能處于紊亂狀態(tài);而這四個(gè)指標(biāo)可能為診斷哮喘合并抑郁發(fā)生發(fā)展的潛在生物學(xué)標(biāo)記物;3)抑郁相關(guān)的84個(gè)基因位點(diǎn),在單純哮喘組、哮喘合并抑郁組和健康對照組之間的分布存在差異性,并且發(fā)現(xiàn)部分位點(diǎn)和疾病狀態(tài)具有顯著的相關(guān)性,位點(diǎn)間存在較強(qiáng)的相互作用,共同控制疾病的易感性。BDFN基因CA型和GRPHN基因的GG型可能是哮喘合并抑郁的風(fēng)險(xiǎn)因素,而BDFN基因TT型和HTR1A基因的TT型可能為哮喘合并抑郁的保護(hù)因素。哮喘合并抑郁患者rs1800044（HT1RA）、rs12520799（DNANP1）、rs6265（BDNF）等3個(gè)位點(diǎn)會造成異義突變,HT1RA和BDNF基因分別是炎癥細(xì)胞因子的受體和調(diào)節(jié)者,異義突變可能會導(dǎo)致炎癥細(xì)胞因子水平和活性的失調(diào),是導(dǎo)致哮喘和抑郁的發(fā)生的部分分子機(jī)制。研究表明,rs1800044（HT1RA）、rs12520799（DNANP1）、rs6265（BDNF）可能是支氣管哮喘合并抑郁的重要遺傳基礎(chǔ)。研究結(jié)果為哮喘合并抑郁及其發(fā)病機(jī)制的進(jìn)一步認(rèn)識、早期篩查、早期預(yù)防以及分子遺傳學(xué)早期診斷提供了一定的研究基礎(chǔ)。
吳佳佳[9]（2017）在《“從腸論治”對過敏性哮喘小鼠肺腸Th17/Treg及腸道菌群的影響》文中提出目的:以大承氣湯為“從腸論治”的實(shí)驗(yàn)方,過敏性哮喘小鼠為肺病模型,著眼于“從腸論治”對肺腸免疫細(xì)胞分化及腸道菌群的影響,探究“從腸論治”的細(xì)胞分子機(jī)制,為肺腸理論指導(dǎo)臨床實(shí)踐提供可靠的循證依據(jù)。方法:1構(gòu)建過敏性哮喘小鼠模型及給藥方案:本研究選取成年雌性C57BL/6小鼠為實(shí)驗(yàn)對象,分組情況視每次實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?整個(gè)研究過程基本包括4組,即正常組、模型組、“從腸論治”組及陽性藥對照組。采用卵清白蛋白（Ovalbumin,OVA）誘導(dǎo)激發(fā)建立過敏性哮喘小鼠模型,全程可分為兩個(gè)階段:（1）兩次致敏:分別于第0、14天,腹腔注射由OVA和氫氧化鋁配制而成的抗原液。（2）霧化激發(fā):自第21天起,1%的OVA溶液連續(xù)霧化激發(fā)7天,1次/天,30分鐘/次。正常組予以無菌生理鹽水腹腔注射及霧化吸入?！皬哪c論治”組,陽性藥對照組于每次霧化前1h灌胃給藥,正常組及模型組予等量生理鹽水。2過敏性哮喘小鼠肺腸病理形態(tài)的動態(tài)觀察:模型組設(shè)有造模第7天、造模21天、造模第26天和造模第28天取材。取小鼠左肺下葉和大、小腸,10%甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋,切片,HE染色,鏡下觀察拍照。3探究過敏性哮喘小鼠其他非黏膜組織的損傷情況:分別取正常組和模型組小鼠心、肝、腎組織,進(jìn)行常規(guī)病理組織切片,HE染色,鏡下觀察兩組小鼠各組織的病理形態(tài)。全自動生化分析儀測定兩組小鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、血清尿素氮（BUN）水平,判斷小鼠的肝腎功能是否正常。4“從腸論治”對過敏性哮喘小鼠肺腸炎癥的影響:通過觀察肺組織大體形態(tài)、肺指數(shù)、肺組織HE染色及PAS染色反映“從腸論治”對過敏性哮喘小鼠肺部炎細(xì)胞浸潤和黏液分泌情況的影響。大、小腸形態(tài)學(xué)觀察、測定腸組織長度及病理HE染色,觀察“從腸論治”后腸道炎癥的變化。5“從腸論治”對過敏性哮喘小鼠肺腸Th17/Treg的影響;無菌獲取肺淋巴細(xì)胞和大腸固有層淋巴細(xì)胞,采用細(xì)胞流式染色法,流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞并獲得數(shù)據(jù),比較各組淋巴細(xì)胞總數(shù)、Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞百分比的變化。6“從腸論治”對過敏性哮喘小鼠腸道菌群的影響;提取小鼠糞便中腸道菌群的16SrDNA,進(jìn)行V3-V4區(qū)域基因序列檢測,分析各組小鼠腸道菌群多樣性的變化以及各組小鼠腸道菌群總數(shù)、腸桿菌科、腸球菌科、乳酸桿菌科、雙歧桿菌科、擬桿菌科及梭桿菌科等主要菌群含量的變化情況。結(jié)果:1過敏性哮喘小鼠的一般情況:（1）體重變化:正常組和模型組小鼠體重變化平穩(wěn),無明顯差異（p>0.05）。（2）糞便變化:模型組小鼠平均糞便粒數(shù)減少、糞便含水率下降（p<0.05）,糞便濕重明顯下降（p<0.01）,較模型組相比。（3）激發(fā)階段表現(xiàn):模型組小鼠異?；钴S,狂躁不安,抓耳撓鼻,出現(xiàn)呼吸急促,弓背等表現(xiàn)。2過敏性哮喘小鼠肺腸損傷的動態(tài)變化及特異性:（1）肺腸HE結(jié)果表明,在致敏階段,肺腸組織結(jié)構(gòu)均正常,未發(fā)現(xiàn)病理變化。霧化激發(fā)5天后,肺組織內(nèi)出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤,大腸組織固有層也可見淋巴細(xì)胞的增多;霧化激發(fā)7天后,肺與大腸的炎性改變更加明顯。（2）小腸、心、肝、腎HE結(jié)果顯示均為正常組織形態(tài),而且生化檢測也表明哮喘小鼠肝腎功能正常。3各組小鼠肺大體形態(tài)、肺指數(shù)、肺組織HE染色及PSA染色結(jié)果:與正常組相比,模型組小鼠肺大體觀有充血、腫脹等表現(xiàn),肺指數(shù)明顯增加（p<0.01）,肺組織內(nèi)幾乎不見無正常肺泡結(jié)構(gòu),支氣管周圍有大量炎細(xì)胞,氣管黏液分泌增加?！皬哪c論治”組肺指數(shù)較模型組有所下降（p<0.05）,陽性藥對照組肺指數(shù)也明顯降低（p<0.01）,兩組小鼠肺組織炎性病理損傷有明顯改善。4各組小鼠大、小腸形態(tài)、長度及HE染色結(jié)果:與正常組相比,模型組大、小腸未見有組織充血,水腫等變化,大腸長度顯著增加（p<0.01）,黏膜固有層,肌層見大量淋巴細(xì)胞浸潤;與模型組相比,“從腸論治”組大腸長度明顯變短（p<0.01）,大腸炎性損傷減輕。三組小鼠小腸均為正常組織結(jié)構(gòu),長度未增長或變短（p>0.05）。5各組小鼠肺腸淋巴細(xì)胞總數(shù)、Th17細(xì)胞及Treg細(xì)胞百分比結(jié)果:與正常組比,模型組小鼠肺組織和大腸固有層淋巴細(xì)胞總數(shù)、Th17細(xì)胞百分比明顯增加（p<0.01）,肺組織中Treg比例明顯減少（p<0.01）,大腸固有層Treg細(xì)胞未發(fā)生明顯變化（p>0.05）;與模型組相比,“從腸論治”組肺組織和大腸固有層淋巴細(xì)胞總數(shù),Th17百分比均減少（p<0.05）,肺組織Treg百分比增加（p<0.05）,大腸固有層Treg基本無變化（p>0.05）。6各組小鼠腸道菌群的變化情況:（1）腸道菌群多樣性的變化:與正常小鼠相比,過敏性哮喘小鼠腸道菌群的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,乳桿菌屬的比例明顯減少,普雷沃菌屬的比例增加;Beta多樣性分析顯示:模型組小鼠腸道菌群的多樣性發(fā)生了較大的變化,較正常小鼠相比,而且NMDS分析也顯示正常組與模型組小鼠的腸道菌群存在一定的差異性。經(jīng)大承氣湯“從腸論治”后,腸道乳桿菌屬比例增加,一定程度改善了腸道菌群的多樣性。（2）腸道主要固有菌群的定性、定量分析:①菌群測序結(jié)果:與正常組相比,模型組小鼠腸道菌群總數(shù)減少（p<0.01）,腸桿菌科及腸球菌科數(shù)量增加（p<0.05）,乳酸桿菌科數(shù)量降低顯著（p<0.05）,雙歧桿菌科、擬桿菌科及梭桿菌科無明顯變化;經(jīng)大承氣湯“從腸論治”后小鼠道菌群總數(shù)增加不顯著（p>0.05）,腸桿菌科數(shù)量下降（p<0.05）,腸球菌科和乳酸桿菌科無明顯變化（p>0.05）;未檢測到分節(jié)絲狀桿菌科。（2）平板活菌計(jì)數(shù)法結(jié)果:與正常組相比,模型組糞便中大腸桿菌,腸球菌含量量顯著增加（p<0.01）,乳酸桿菌數(shù)量明顯降低（p<0.01）;經(jīng)大承氣湯治療后大腸桿菌、腸球菌均減少（p<0.01）,乳酸桿菌增加（p<0.05）;雙岐桿菌及類桿菌在各組含量無明顯差異（p>0.05）。結(jié)論:1過敏性哮喘小鼠的大腸組織可發(fā)生炎性損傷,伴發(fā)大腸傳導(dǎo)功能失常,而其他非黏膜組織,如心、肝、腎無任何異常。2“從腸論治”對過敏性哮喘小鼠肺腸炎癥有一定改善作用,其作用的可能機(jī)制是:大承氣湯“從腸治肺”,藥物直接作用于腸道,調(diào)節(jié)了哮喘小鼠腸道微生態(tài)的平衡,減少腸道Th17細(xì)胞的分化,通過黏膜免疫系統(tǒng)間的相互影響,肺部失衡的Treg/Th17也得到了糾正,最終緩解了肺部炎癥。
趙春蘭[10]（2017）在《Th1/Th2與Treg/Th17平衡對兒童哮喘的調(diào)節(jié)作用研究》文中認(rèn)為研究目的支氣管哮喘（bronchial asthma,簡稱哮喘）是一種常見的兒童氣道慢性炎癥性疾病,目前正嚴(yán)重威脅著兒童的身體和心理健康,但哮喘發(fā)病的免疫學(xué)機(jī)制目前仍未完全闡明。目前認(rèn)為Th1/Th2、Treg/Th17兩大細(xì)胞平衡失調(diào)是哮喘發(fā)病的重要機(jī)制。本研究通過檢測外周血中T淋巴細(xì)胞亞群和Th17/Treg細(xì)胞百分率,檢測哮喘患兒血清中Th1、Th2、Th17和Treg類細(xì)胞因子的表達(dá)情況,以及Tim-3在哮喘發(fā)病機(jī)制中對Th1/Th2、Treg/Th17失衡的影響,以此探討在兒童哮喘發(fā)病過程中Th1/Th2、Treg/Th17平衡失調(diào)的情況。研究方法1、以2013.10-2014.12于山東大學(xué)齊魯兒童醫(yī)院初次確診哮喘或停止規(guī)范激素吸入超過3個(gè)月后哮喘復(fù)發(fā)的患兒（哮喘組,n=81）和同期擇期手術(shù)兒童（對照組,n=38）為研究對象;2、收集兩組患兒外周血,流式細(xì)胞儀檢測外周血中T淋巴細(xì)胞亞群水平、Th17/Treg細(xì)胞百分率;3、CBA法檢測血清中Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、IFN-γ、IL-17A以及IL-12/IL-23p40的表達(dá)情況;4、實(shí)時(shí)PCR法測定外周血中Tim-3 mRNA的相對表達(dá)量。研究結(jié)果1、一般資料統(tǒng)計(jì)分析,兩組在年齡和性別構(gòu)成上無顯著性差別;2、與對照組比較,各年齡組CD3T、CD4T細(xì)胞百分率及2歲以內(nèi)CD4/CD8T細(xì)胞比例均明顯降低（P<0.01或P<0.05）,各年齡組的CD8T細(xì)胞百分率及大于2歲的CD4/CD8T細(xì)胞比例在兩組無明顯差別（P>0.05）;3、與對照組比較,哮喘組患兒外周血CD4+IL17+Th17細(xì)胞百分率顯著增高,具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;哮喘組患兒CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞百分率低于對照組,但兩組間沒有明顯差異（P>0.05）;4、與對照組比較,哮喘組患兒血清中Th1類細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ含量顯著增高,具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,而兩組患兒血清中TNF含量沒有明顯差異（P>0.05）;5、哮喘組患兒血清Th2類細(xì)胞因子IL-4、IL-6比對照組低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01或P<0.05）,而IL-10濃度則明顯高于對照組（P<0.05）;6、哮喘組患兒血清Treg細(xì)胞因子IL-12/IL-23p40顯著低于對照組（P<0.01）,而Th17細(xì)胞因子IL-17A的表達(dá)在兩組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;7、哮喘組患兒外周血細(xì)胞中Tim-3 mRNA的相對表達(dá)量明顯高于對照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究結(jié)論兒童哮喘發(fā)生過程中可能存在T淋巴細(xì)胞免疫功能紊亂,且Th1和Th17細(xì)胞功能亢進(jìn),Th2和Treg細(xì)胞功能降低,Th1/Th2和Treg/Th17失衡可能是哮喘發(fā)病的重要機(jī)制,Tim-3可能通過調(diào)節(jié)Th1/Th2與Treg/Th17失衡影響著哮喘的發(fā)展。
二、白細(xì)胞介素13在支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制中的作用（論文開題報(bào)告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點(diǎn)或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實(shí)驗(yàn)法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。
定性分析法：對研究對象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認(rèn)識進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會科學(xué)用來分析社會現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、白細(xì)胞介素13在支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制中的作用（論文提綱范文）
（1）誘導(dǎo)痰液IL-25水平在兒童支氣管哮喘發(fā)病中的臨床意義研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符號說明 |
| 前言 |
| 第一部分 兒童支氣管哮喘痰液IL-25水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性研究 |
| 材料方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 第二部分 支氣管哮喘兒童誘導(dǎo)痰液IL-25蛋白及基因的表達(dá) |
| 材料方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述 細(xì)胞因子IL-25與支氣管哮喘 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄 |
| 學(xué)位論文評閱及答辯情況表 |
| 附英文論文一 |
| 附英文論文二 |
（2）重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白在支氣管哮喘中的作用及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文獻(xiàn)研究 |
| 第一節(jié) 中醫(yī)對哮喘的認(rèn)識 |
| 一、古代中醫(yī)對哮喘的認(rèn)識 |
| 二、現(xiàn)代中醫(yī)對哮喘的認(rèn)識與辨治 |
| 第二節(jié) 哮喘的西醫(yī)研究進(jìn)展 |
| 一、哮喘的定義 |
| 二、哮喘的流行病學(xué)研究 |
| 三、哮喘的病因 |
| 四、哮喘的治療 |
| 五、哮喘與Th17/Treg細(xì)胞平衡 |
| 第三節(jié) RLZ-8的免疫研究進(jìn)展 |
| 一、凝集紅細(xì)胞作用 |
| 二、免疫活性 |
| 三、抑制過敏性反應(yīng) |
| 四、抗癌活性 |
| 五、抗炎 |
| 六、其他作用 |
| 第二章 RLZ-8對哮喘小鼠的作用及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究 |
| 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料及試劑 |
| 一、實(shí)驗(yàn)動物 |
| 二、主要實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 三、實(shí)驗(yàn)試劑 |
| 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 一、主要試劑的配制 |
| 二、實(shí)驗(yàn)分組及小鼠哮喘模型的建立 |
| 三、肺組織組織學(xué)檢測 |
| 四、支氣管肺泡灌洗液(BALF)免疫學(xué)檢測 |
| 五、肺組織mRNA提取及Real-time PCR檢測 |
| 六、流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠脾臟細(xì)胞表型 |
| 七、Western Blotting檢測 |
| 八、統(tǒng)計(jì)方法 |
| 第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 一、rLZ-8降低哮喘小鼠肺部炎癥細(xì)胞浸潤 |
| 二、rLZ-8抑制OVA誘導(dǎo)的哮喘小鼠脾臟CD11c~+ DC的成熟 |
| 三、rLZ-8影響哮喘小鼠BALF細(xì)胞因子的水平 |
| 四、rLZ-8調(diào)控哮喘小鼠肺組織mRNA表達(dá) |
| 五、rLZ-8降低了哮喘小鼠脾臟Th17的比例并增加了Treg細(xì)胞的比例 |
| 六、rLZ-8抑制哮喘小鼠STAT3信號通路活化 |
| 第四節(jié) 討論 |
| 一、OVA誘導(dǎo)建立小鼠哮喘模型 |
| 二、rLZ-8對Th17/Treg細(xì)胞平衡的調(diào)控作用 |
| 三、rLZ-8對肺組織相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控作用 |
| 四、rLZ-8調(diào)控哮喘小鼠氣道炎癥因子的釋放 |
| 五、rLZ-8抑制哮喘小鼠肺部DC成熟 |
| 六、rLZ-8抑制小鼠肺組織STAT3信號通路 |
| 第三章 RLZ-8干預(yù)哮喘氣道炎癥的免疫機(jī)制體外研究 |
| 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料及試劑 |
| 一、實(shí)驗(yàn)動物 |
| 二、實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 三、實(shí)驗(yàn)試劑 |
| 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 一、主要試劑的配制 |
| 二、小鼠脾臟CD3~+T細(xì)胞的提取 |
| 三、Annexin/pi法進(jìn)行細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn) |
| 四、ELISA檢測CD3~+T細(xì)胞培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子分泌 |
| 五、rLZ-8對體外CD4~+IL-17A~+ Th17細(xì)胞分化影響的體外研究 |
| 六、小鼠脾臟CD4~+CD25~+ Treg細(xì)胞的提取 |
| 七、CSFE檢測rLZ-8對CD4~+CD25~+ Treg細(xì)胞的體外增殖作用 |
| 八、小鼠脾臟CD4~+CD25~- T細(xì)胞的提取 |
| 九、流式細(xì)胞術(shù)檢測rLZ-8對Treg的分化影響 |
| 十、Western Blotting檢測CD3~+T淋巴細(xì)胞中STAT3的表達(dá) |
| 十一、統(tǒng)計(jì)方法 |
| 第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 一、rLZ-8對CD3~+T細(xì)胞毒性 |
| 二、rLZ-8對CD3~+T細(xì)胞細(xì)胞因子水平的影響 |
| 三、rLZ-8抑制Th17的體外活化和增殖 |
| 四、rLZ-8促進(jìn)CD4~+Foxp3~+Treg體外分化 |
| 五、rLZ-8抑制STAT3信號通路在體外的活化 |
| 第四節(jié) 討論 |
| 一、rLZ-8直接從細(xì)胞層面和轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)作用于Th17/Treg細(xì)胞平衡 |
| 二、rLZ-8對體外培養(yǎng)T細(xì)胞細(xì)胞因子釋放的影響 |
| 三、rLZ-8抑制體外培養(yǎng)T細(xì)胞STAT3信號通路 |
| 結(jié)語 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 在校期間發(fā)表論文情況 |
| 致謝 |
| 統(tǒng)計(jì)學(xué)審核證明 |
（3）IL-26與成人支氣管哮喘的相關(guān)性及臨床意義初探（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 縮略詞表 |
| 第1章 緒論 |
| 第2章 研究報(bào)告 |
| 2.1 研究背景 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.4 討論 |
| 2.5 結(jié)論 |
| 第3章 總結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述 白細(xì)胞介素26的最新研究進(jìn)展及在成人支氣管哮喘中的表達(dá) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡介 |
| 附錄 |
（4）TGF-β1/Smad3信號通路調(diào)節(jié)小鼠氣道平滑肌細(xì)胞表達(dá)IL-33參與哮喘機(jī)制（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 符號說明 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 附圖 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述 氣道平滑肌細(xì)胞在支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制中的研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文 |
| 附件 |
（5）IL-33通過上調(diào)纖維細(xì)胞促纖維化作用促進(jìn)哮喘氣道重塑機(jī)制的研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符號說明 |
| 前言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 附圖表 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間的學(xué)術(shù)成果 |
| 英文論文Ⅰ |
| 英文論文Ⅱ |
| 學(xué)位論文評閱及答辯情況表 |
（6）兒童支氣管哮喘的不同呼出氣一氧化氮水平與臨床特征及部分細(xì)胞因子相關(guān)性研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第一部分 兒童支氣管哮喘的不同呼出氣一氧化氮水平與臨床特征的研究 |
| 對象與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二部分 兒童支氣管哮喘的不同呼出氣一氧化氮水平與部分細(xì)胞因子的研究 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 結(jié)論 |
| 本文不足之處和以后研究方向 |
| 綜述 呼出氣一氧化氮檢測在兒童支氣管哮喘中的臨床應(yīng)用 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 縮略詞表 |
| 附件 |
| 攻讀碩士期間公開發(fā)表的論文 |
| 致謝 |
（7）基于“天氣通于肺”理論的支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠自噬功能及中藥干預(yù)機(jī)制研究（論文提綱范文）
| 提要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 理論研究 |
| 1.“天氣通于肺”的理論闡釋 |
| 1.1 “天”字考源 |
| 1.2 “氣”的考源 |
| 1.3 肺與天氣相通 |
| 1.4 肺與其它臟腑的關(guān)系 |
| 2.霧霾的理論探析 |
| 2.1 霧霾是復(fù)雜的外感毒邪 |
| 2.2 煙草煙霧是有毒之邪氣 |
| 3.哮喘的中醫(yī)研究 |
| 3.1 哮喘的內(nèi)涵研究 |
| 3.2 哮喘的病因病機(jī) |
| 3.3 哮喘寒飲蘊(yùn)肺證探析 |
| 結(jié)論 |
| 第二部分 實(shí)驗(yàn)研究 |
| 實(shí)驗(yàn)一 煙熏支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠模型的研究 |
| 1.實(shí)驗(yàn)材料 |
| 1.1 實(shí)驗(yàn)動物 |
| 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑、儀器 |
| 2.實(shí)驗(yàn)方法 |
| 2.1 動物分組 |
| 2.2 造模方法 |
| 3.觀察及檢測指標(biāo) |
| 3.1 大鼠一般行為學(xué)檢查 |
| 3.2 大鼠肺功能的檢測 |
| 3.3 ELISA法檢測細(xì)胞因子表達(dá) |
| 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 |
| 5.結(jié)果 |
| 5.1 大鼠一般行為學(xué)檢查 |
| 5.2 各組大鼠不同階段體重變化 |
| 5.3 各組大鼠肺功能變化 |
| 5.4 各組大鼠血清中細(xì)胞因子含量變化 |
| 6.討論 |
| 6.1 煙熏環(huán)境下支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠模型的建立 |
| 6.2 煙熏對哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠肺功能的影響 |
| 6.3 煙熏對哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠血清中炎性細(xì)胞因子的影響 |
| 實(shí)驗(yàn)二 煙熏支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠自噬相關(guān)基因研究以及中藥干預(yù)機(jī)制 |
| 1.實(shí)驗(yàn)材料 |
| 1.1 實(shí)驗(yàn)動物 |
| 1.2 實(shí)驗(yàn)用藥 |
| 1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑、藥品 |
| 1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 2.實(shí)驗(yàn)方法 |
| 2.1 動物分組 |
| 2.2 造模方法 |
| 2.3 藥物干預(yù) |
| 2.4 觀察及檢測指標(biāo) |
| 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 |
| 4.結(jié)果 |
| 4.1 各組大鼠一般行為學(xué)觀察 |
| 4.2 各組大鼠不同治療階段游泳時(shí)間比較 |
| 4.3 各組大鼠飲食和飲水量比較 |
| 4.4 各組大鼠不同治療階段肛溫比較 |
| 4.5 各組大鼠不同治療階段體重變化比較 |
| 4.6 各組大鼠不同臟器重量比較 |
| 4.7 各組大鼠肺功能變化 |
| 4.8 各組大鼠血清中細(xì)胞因子表達(dá) |
| 4.9 各組大鼠肺組織自噬基因Atg的表達(dá) |
| 4.10 各組大鼠肺組織LC3和Beclin1 免疫印跡結(jié)果 |
| 4.11 各組大鼠透射電鏡肺泡細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) |
| 4.12 各組大鼠肺組織HE染色觀察 |
| 5.討論 |
| 5.1 哮喘與氣道炎癥反應(yīng) |
| 5.2 氣道高反應(yīng)性及氣道重塑在支氣管哮喘發(fā)病中的病理機(jī)制 |
| 5.3 細(xì)胞自噬在支氣管哮喘發(fā)病中的病理機(jī)制 |
| 5.4 中藥對煙熏環(huán)境下支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠模型的影響 |
| 5.5 細(xì)胞自噬對煙熏哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠氣道炎癥的影響 |
| 5.6 溫陽化飲方對煙熏環(huán)境下哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠細(xì)胞自噬的影響 |
| 6.結(jié)論 |
| 結(jié)語 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 致謝 |
| 查新報(bào)告 |
| 論文 |
（8）哮喘合并抑郁的影響因素及抑郁相關(guān)基因多態(tài)性研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 支氣管哮喘合并抑郁影響因素研究 |
| 1 研究內(nèi)容與方法 |
| 1.1 研究對象 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 質(zhì)量控制 |
| 1.4 樣本量計(jì)算 |
| 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 4 小結(jié) |
| 第二部分 支氣管哮喘合并抑郁患者IL-17、IL-6、TNF-α、5-HT變化水平研究 |
| 1 研究內(nèi)容與方法 |
| 1.1 研究對象 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 4 小結(jié) |
| 第三部分 哮喘合并抑郁與抑郁相關(guān)基因單核苷酸多態(tài)性關(guān)聯(lián)性研究 |
| 1 研究內(nèi)容與方法 |
| 1.1 研究對象 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 數(shù)據(jù)分析 |
| 1.4 質(zhì)量控制 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 4 小結(jié) |
| 結(jié)論 |
| 致謝 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 綜述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 攻讀博士期間的學(xué)術(shù)及獲獎(jiǎng)成果 |
| 個(gè)人簡歷 |
| 導(dǎo)師評閱表 |
（9）“從腸論治”對過敏性哮喘小鼠肺腸Th17/Treg及腸道菌群的影響（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 文獻(xiàn)綜述 |
| 綜述一 肺與大腸相表里理論的研究進(jìn)展 |
| 1 “肺與大腸相表里”的理論內(nèi)涵 |
| 2 肺與大腸相表里的現(xiàn)代機(jī)制研究 |
| 3 肺與大腸相表里的臨床運(yùn)用 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述二 過敏性哮喘的發(fā)生機(jī)制研究進(jìn)展 |
| 1 哮喘與發(fā)病因素 |
| 2 過敏性哮喘的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制 |
| 3 過敏性哮喘與腸道菌群 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 前言 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二部分 實(shí)驗(yàn)研究 |
| 實(shí)驗(yàn)一 過敏性哮喘小鼠模型中的肺腸組織形態(tài)動態(tài)變化 |
| 1 材料與方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 4 小結(jié) |
| 實(shí)驗(yàn)二 “從腸論治”對過敏性哮喘肺腸炎癥及Treg/Th17的影響 |
| 1 材料與方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 4 小結(jié) |
| 實(shí)驗(yàn)三 “從腸論治”對過敏性哮喘小鼠腸道菌群的影響 |
| 1 材料與方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 4 小結(jié) |
| 結(jié)語 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 創(chuàng)新點(diǎn) |
| 附錄 |
| 英文縮略詞 |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡歷 |
| 在學(xué)期間主要研究成果 |
（10）Th1/Th2與Treg/Th17平衡對兒童哮喘的調(diào)節(jié)作用研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符號說明 |
| 前言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 附表 |
| 附圖 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 |
四、白細(xì)胞介素13在支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制中的作用（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]誘導(dǎo)痰液IL-25水平在兒童支氣管哮喘發(fā)病中的臨床意義研究[D]. 張赟. 山東大學(xué), 2020(04)
- [2]重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白在支氣管哮喘中的作用及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究[D]. 林成創(chuàng). 廣州中醫(yī)藥大學(xué), 2020(06)
- [3]IL-26與成人支氣管哮喘的相關(guān)性及臨床意義初探[D]. 夏利欣. 長江大學(xué), 2020(04)
- [4]TGF-β1/Smad3信號通路調(diào)節(jié)小鼠氣道平滑肌細(xì)胞表達(dá)IL-33參與哮喘機(jī)制[D]. 蔡秋景. 山東大學(xué), 2020(02)
- [5]IL-33通過上調(diào)纖維細(xì)胞促纖維化作用促進(jìn)哮喘氣道重塑機(jī)制的研究[D]. 劉粉. 山東大學(xué), 2020(08)
- [6]兒童支氣管哮喘的不同呼出氣一氧化氮水平與臨床特征及部分細(xì)胞因子相關(guān)性研究[D]. 戴銀芳. 蘇州大學(xué), 2019(02)
- [7]基于“天氣通于肺”理論的支氣管哮喘寒飲蘊(yùn)肺證大鼠自噬功能及中藥干預(yù)機(jī)制研究[D]. 田福玲. 山東中醫(yī)藥大學(xué), 2019(05)
- [8]哮喘合并抑郁的影響因素及抑郁相關(guān)基因多態(tài)性研究[D]. 迪麗努爾·烏甫爾. 新疆醫(yī)科大學(xué), 2019(07)
- [9]“從腸論治”對過敏性哮喘小鼠肺腸Th17/Treg及腸道菌群的影響[D]. 吳佳佳. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2017(05)
- [10]Th1/Th2與Treg/Th17平衡對兒童哮喘的調(diào)節(jié)作用研究[D]. 趙春蘭. 泰山醫(yī)學(xué)院, 2017(06)
標(biāo)簽：支氣管哮喘論文; 對照組論文; 白細(xì)胞介素論文; 炎癥細(xì)胞因子論文; 呼吸道疾病論文;