一、有氧運(yùn)動(dòng)和膳食脂肪對(duì)ApoE基因缺陷小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成過(guò)程中SR-B1基因及蛋白表達(dá)的影響（論文文獻(xiàn)綜述）

劉蓓蓓^[1]（2021）在《動(dòng)脈粥樣硬化誘發(fā)的海馬代謝異常影響突觸可塑相關(guān)蛋白表達(dá)的機(jī)制及運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理研究目的:動(dòng)脈粥樣硬化是以血管內(nèi)膜黃色粥樣脂質(zhì)沉淀為特征的慢性、漸進(jìn)性動(dòng)脈疾病,是多種心腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)因素和病理基礎(chǔ)。近年來(lái),動(dòng)脈粥樣硬化與認(rèn)知損害的關(guān)系漸漸受到關(guān)注。發(fā)生在主動(dòng)脈和冠狀動(dòng)脈等部位的動(dòng)脈粥樣硬化即可造成腦血流量減少、微血管損傷增加、血腦屏障滲透性增加、炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激加劇、白質(zhì)病變和腦代謝異常等一系列腦結(jié)構(gòu)和功能的病理改變,從而誘發(fā)突觸可塑性和認(rèn)知功能損害。我們推測(cè)腦代謝異常是動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致突觸可塑性下降、認(rèn)知功能受損的根本原因和核心機(jī)制,而AMPK、SIRT1、mTOR等與能量代謝密切相關(guān)的信號(hào)通路可能在動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的代謝紊亂和認(rèn)知損害中發(fā)揮著關(guān)鍵性的調(diào)控作用。有氧運(yùn)動(dòng)作為干預(yù)機(jī)體物質(zhì)代謝與能量平衡的有效手段,也可參與腦代謝的調(diào)節(jié)。因此,本研究通過(guò)構(gòu)建動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型,探究動(dòng)脈粥樣硬化對(duì)海馬代謝和突觸可塑相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,討論海馬代謝異常與突觸可塑相關(guān)蛋白表達(dá)受損的關(guān)系,并揭示有氧運(yùn)動(dòng)的干預(yù)效應(yīng)。研究方法:健康雄性SD大鼠42只隨機(jī)分為對(duì)照組（C,N=10）和高脂組（HFD,N=32）。高脂組大鼠進(jìn)行10周的高脂膳食聯(lián)合維生素D3腹腔注射,實(shí)驗(yàn)第10周末,對(duì)照組和高脂膳食組大鼠均禁食不禁水12h過(guò)夜后尾靜脈采血2ml/只,用于檢測(cè)血糖、血脂等指標(biāo),判定HFD組中患有高脂血癥和高膽固醇血癥的大鼠為動(dòng)脈粥樣硬化模型（M,n=18）,并隨機(jī)抽取模型組2只和對(duì)照組大鼠1只,麻醉處死后取主動(dòng)脈進(jìn)行組織切片染色。將其余M組大鼠隨機(jī)分為動(dòng)脈粥樣硬化組（AS,n=8）和動(dòng)脈粥樣硬化運(yùn)動(dòng)組（TAS,n=8）。TAS組大鼠在小動(dòng)物跑臺(tái)上進(jìn)行適應(yīng)性運(yùn)動(dòng)3天,隨后進(jìn)行為期4周、每周5天的有氧運(yùn)動(dòng)。運(yùn)動(dòng)干預(yù)結(jié)束后,各組大鼠均通過(guò)Y迷宮進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn),次日經(jīng)麻醉后取腦組織,快速分離出海馬組織備檢。通過(guò)GC-MS技術(shù)檢測(cè)大鼠海馬內(nèi)代謝產(chǎn)物的變化,通過(guò)Western blot檢測(cè)海馬內(nèi)能源底物轉(zhuǎn)運(yùn)體FATP-1/GLUT-1/MCT1/MCT2,代謝關(guān)鍵酶AR/G6PD/SCOT/FASN/P-ACC/ACC/SDHA/DHCR24,突觸可塑蛋白SY38/Homer/PSD95/NMDAR/GABAR,能量代謝相關(guān)信號(hào)通路AMPK、SIRT1、mTOR-raptor/rictor-P70S6K/4EBP和NF-κB/NLRP3/IL-1β等蛋白的表達(dá)或活性。研究結(jié)果:（1）有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)前,AS組大鼠的TC、TG、LDL升高,且與TAS組大鼠水平相近。4周的有氧運(yùn)動(dòng)后,AS組大鼠TC、LDL水平仍高于C組大鼠,而TAS組LDL水平較AS組顯著下降。（2）動(dòng)脈粥樣硬化模型大鼠海馬代謝異常,與對(duì)照組相比,AS組大鼠海馬內(nèi)磷酸戊糖途徑中間產(chǎn)物如3-磷酸甘油酸、5-磷酸木酮糖和5-磷酸核糖,某些氨基酸如蘇氨酸、吡啶甲酸、4-羥基脯氨酸,三羧酸循環(huán)中間產(chǎn)物琥珀酸和壬酸等游離脂肪酸均顯著增加,而花生四烯酸甲酯和硬脂酸甲酯則明顯減少。（3）運(yùn)動(dòng)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化模型大鼠海馬代謝的調(diào)節(jié)作用:TAS組大鼠海馬內(nèi)琥珀酸、支鏈氨基酸、壬酸和desmosterol水平顯著下降,而花生四烯酸甲酯、硬脂酸甲酯、甘油醛-3-磷酸和果糖1,6-二磷酸升高。（4）AS組大鼠海馬FATP-1表達(dá)升高而MCT2表達(dá)下降,海馬GLUT-1表達(dá)下降而MCT1表達(dá)上調(diào),而TAS組海馬內(nèi)GLUT1表達(dá)上調(diào)。（5）AS組大鼠在空間識(shí)別實(shí)驗(yàn)中進(jìn)入新異臂次數(shù)減少、新異臂停留時(shí)間縮短。TAS組上述指標(biāo)較AS組均表現(xiàn)出上升趨勢(shì)。（6）AS組大鼠海馬內(nèi)Homer1a、SY38、GABAR蛋白水平較對(duì)照組降低;TAS組大鼠海馬內(nèi)Homer1a和SY38表達(dá)有上升趨勢(shì)。（7）AS組大鼠的海馬內(nèi)AR、G6PD和SCOT表達(dá)上調(diào)的同時(shí)FASN和ACC表達(dá)下調(diào);TAS組大鼠海馬內(nèi)AR含量減少。（8）AS組大鼠海馬p-AMPK升高,TAS組海馬p-AMPK有下降趨勢(shì)。（9）AS組大鼠海馬胞漿SIRT1蛋白顯著下降而TAS組顯著升高。（10）AS組大鼠海馬RAGE均明顯升高,NF-κB-NLRP3-L-1β信號(hào)激活。TAS組大鼠海馬內(nèi)IL-1β減少。（11）AS組大鼠海馬mTOR、Raptor、Rictor、4EBP蛋白含量均顯著減少。TAS組大鼠海馬內(nèi)4EBP表現(xiàn)出升高的趨勢(shì)。研究結(jié)論:動(dòng)脈粥樣硬化大鼠海馬代謝異常,表現(xiàn)為糖酵解減少,三羧酸循環(huán)受阻,磷酸戊糖途徑激活,脂肪酸氧化障礙,膽固醇合成和氨基酸代謝受阻。這一過(guò)程伴隨海馬內(nèi)AMPK信號(hào)和NF-κB/NLRP3/IL-1β信號(hào)通路激活,mTOR信號(hào)通路抑制,導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激,使突觸可塑相關(guān)蛋白表達(dá)和空間識(shí)別能力受損。有氧運(yùn)動(dòng)能夠有效改善動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的外周血脂異常和海馬代謝異常,緩解海馬內(nèi)炎癥反應(yīng),有助于緩解動(dòng)脈粥樣硬化造成的海馬突觸可塑蛋白表達(dá)受損。

李特^[2]（2021）在《Phactr1缺乏通過(guò)促進(jìn)M1巨噬細(xì)胞極化和泡沫細(xì)胞形成促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展》文中指出背景:目前部分研究提示磷酸酶肌動(dòng)蛋白調(diào)控因子1（Phactr1）的遺傳變異與動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病相關(guān),然而Phactr1是如何影響動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展以及其相關(guān)機(jī)制尚未明確,需要進(jìn)行深入研究及探討。因此,明確Phactr1的作用機(jī)制及其影響將促進(jìn)我們對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)一步理解,根據(jù)相關(guān)研究結(jié)果,可能會(huì)發(fā)現(xiàn)治療動(dòng)脈粥樣硬化疾病的新靶點(diǎn)?；谏鲜鲈?深入研究其作用機(jī)制是一項(xiàng)具有重要臨床意義的課題。目的:深入了解Phactr1在斑塊穩(wěn)定性中的作用,探討Phactr1在動(dòng)脈粥樣硬化中潛在的作用機(jī)制,在Phactr1缺陷小鼠中對(duì)ox-LDL誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞極化,炎癥反應(yīng)和泡沫細(xì)胞形成進(jìn)行研究。方法:應(yīng)用Apoe基因敲除小鼠(Apoe-/-)、Phactr1全基因敲除小鼠(Phactr1-/-)、Apoe和Phactr1雙基因敲除小鼠(Phactr1-/-Apoe-/-,DKO)及KLF4δMC過(guò)表達(dá)、Apoe、Phactr1基因敲除小鼠(KLF4δMC/Phactr1-/-Apoe-/-)建立動(dòng)脈硬化模型,給予八周大雄性DKO和Apoe-/-小鼠高脂飲食（16%的脂肪和1.3%的膽固醇）,持續(xù)16周,對(duì)總甘油三酯（TG）,總膽固醇（TC）,低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）進(jìn)行測(cè)定。對(duì)小鼠血管組織進(jìn)行染色后評(píng)估細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量、斑塊的形態(tài)、斑塊的負(fù)荷、壞死面積以及纖維帽厚度。通過(guò)定量RT-PCR檢測(cè)小鼠巨噬細(xì)胞中Phactr1 m RNA的表達(dá)。通過(guò)定量RT-PCR及ELISA分析對(duì)小鼠炎癥反應(yīng)程度（TNF-α和IL-6）進(jìn)行評(píng)估。通過(guò)BM移植策略評(píng)估造血Phactr1缺乏對(duì)動(dòng)脈硬化的影響。通過(guò)定量RT-PCR對(duì)TNF-α、IL-6、Arg1、CD206及KLF4的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。同時(shí),我們應(yīng)用免疫印跡和定量分析檢測(cè)LOX-1,SR-A,CD36,ABCA1、ABCG1及KLF4的蛋白質(zhì)表達(dá)情況。用免疫印跡分析p38MAPK和CREB的磷酸化情況。通過(guò)雙重?zé)晒馑孛笀?bào)告基因測(cè)定系統(tǒng)對(duì)CREB反應(yīng)元件的熒光素酶活性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:（1）Phactr1熒光強(qiáng)度在晚期動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中較強(qiáng),并且主要在Mac2陽(yáng)性細(xì)胞中表達(dá),晚期病變的Apoe-/-小鼠Phactr1表達(dá)增加,而正常飲食的Apoe-/-小鼠Phactr1的表達(dá)實(shí)際上較低。（P<0.05）（2）高脂飲食16周后,Phactr1+/+和Phactr1-/-小鼠的體重和食物攝入量沒(méi)有差異。高脂飲食的Apoe-/-小鼠血漿中TC,TG和LDL-C含量較高,Phactr1-/-Apoe-/-小鼠的血脂水平與Apoe-/-小鼠相當(dāng)。（P<0.05）（3）主動(dòng)脈竇橫截面上的油紅O染色顯示,Phactr1-/-Apoe-/-小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊比Apoe-/-小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊更顯著。Phactr1-/-Apoe-/-小鼠壞死核區(qū)域更大,纖維帽更薄,巨噬細(xì)胞堆積更多。Phactr1缺乏導(dǎo)致Apoe-/-小鼠主動(dòng)脈竇動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中膠原蛋白的積累明顯減少。（P<0.05）（4）Phactr1-/-Apoe-/-小鼠主動(dòng)脈中TNF-α和IL-6含量更高,血漿中TNF-α和IL-6水平也升高。（P<0.05）（5）與移植了Apoe-/-BM細(xì)胞的Apoe-/-小鼠相比,移植Phactr1-/-Apoe-/-BM細(xì)胞的Apoe-/-小鼠的斑塊更顯著。富含脂質(zhì)的壞死核的面積顯著增加,纖維帽厚度相應(yīng)減少,巨噬細(xì)胞負(fù)荷增加。（P<0.05）（6）移植Phactr1-/-Apoe-/-BM細(xì)胞的Apoe-/-小鼠,主動(dòng)脈中TNF-α和IL-6的表達(dá)顯著增加,血漿TNF-α和IL-6的水平升高。（P<0.05）（7）在存在ox-LDL的情況下,Phactr1的表達(dá)上調(diào)并在12小時(shí)達(dá)到峰值。ox-LDL至少部分通過(guò)Lox-1/NF-κB途徑誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞中Phactr1表達(dá)。（8）Phactr1的缺失顯著促進(jìn)BMDMs中M1巨噬細(xì)胞標(biāo)志物如TNF-α和IL-6的表達(dá),而M2表型標(biāo)記物如Arg1和CD206的表達(dá)則顯著降低。Phactr1-/-BMDMs中,M1巨噬細(xì)胞比例增加,而M2巨噬細(xì)胞比例則受到抑制。（P<0.05）（9）與Phactr1+/+BMDMs相比,Phactr1-/-BMDMs中的致動(dòng)脈粥樣硬化細(xì)胞因子水平更高,包括TNF-α,IL-6,RANTES,CCL2,IL-1β,IFN-γ以及M-CSF。Phactr1的沉默增強(qiáng)了ox-LDL誘導(dǎo)的這些細(xì)胞因子的表達(dá)。（P<0.05）（10）與Phactr1+/+BMDMs相比,Phactr1的缺失導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量顯著增加。Phactr1-/-BMDMs中細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量明顯高于Phactr1+/+BMDMs中的膽固醇水平。（P<0.05）（11）與Phactr1+/+BMDMs相比,Phactr1基因敲除導(dǎo)致BMDMs中LOX-1,SR-A和CD36的水平升高,而Phactr1基因敲除對(duì)ABCA1和ABCG1的表達(dá)沒(méi)有明顯影響。（P<0.05）（12）Phactr1和CREB在BMDM中直接相互作用。Phactr1和CREB之間的直接相互作用通過(guò)Flag-Phactr1和HA-CREB共轉(zhuǎn)染的HEK293T細(xì)胞免疫共沉淀進(jìn)一步證實(shí)。Phactr1過(guò)表達(dá)可增強(qiáng)CREB反應(yīng)元件的活性。（P<0.05）（13）Phactr1-/-BMDMs中KLF4的表達(dá)降低。使用CREB抗體在KLF4啟動(dòng)子上進(jìn)行的Ch IP-q PCR表明Phactr1敲除降低了CREB對(duì)BMDMs中KLF4啟動(dòng)子（片段1內(nèi)的CREB結(jié)合基序）的結(jié)合。Phactr1過(guò)表達(dá)后HEK293T細(xì)胞中KLF4的轉(zhuǎn)錄活性顯著增強(qiáng)。（P<0.05）（14）通過(guò)轉(zhuǎn)導(dǎo)KLF4腺病毒（Ad-KLF4）來(lái)過(guò)表達(dá)KLF4可減少因Phactr1缺失誘導(dǎo)的M1表型標(biāo)志物的表達(dá),恢復(fù)M2表型標(biāo)志物的表達(dá)。（P<0.05）（15）在Phactr1缺陷的BMDM中,KLF4過(guò)表達(dá)減輕了清道夫受體Lox-1,CD36和SR-A的增加趨勢(shì)。（P<0.05）（16）KLF4上調(diào)顯著降低了Phactr1-/-BMDM中細(xì)胞內(nèi)膽固醇的含量。Ad-KLF4上調(diào)可減少因Phactr1缺乏所致的泡沫細(xì)胞的形成。油紅色O染色區(qū)域的測(cè)量結(jié)果顯示,與接受Phactr1-/-Apoe-/-BM的DKO(Phactr1-/-Apoe-/-)小鼠相比,接受KLF4δMC/Phactr1-/-Apoe-/-BM細(xì)胞的DKO小鼠斑塊面積明顯減少。（P<0.05）結(jié)論:（1）在小鼠動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中巨噬細(xì)胞Phactr1表達(dá)增加。（2）Phactr1可抑制M1促炎表型,其減少可促進(jìn)向易損斑塊表型發(fā)展的速度,Phactr1可延緩動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展。（3）Phactr1是巨噬細(xì)胞介導(dǎo)炎癥、巨噬細(xì)胞極化以及泡沫細(xì)胞形成的關(guān)鍵因素。（4）KLF4過(guò)表達(dá)能夠部分抵消因Phactr1缺乏對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的加劇作用。

張瑞^[3]（2020）在《艾灸及艾煙調(diào)節(jié)Rho/ROCK信號(hào)通路干預(yù)ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制研究》文中研究指明動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis,AS）是多種心腦血管疾病的主要病理基礎(chǔ),是一種以粥樣斑塊為顯著特征的慢性病理過(guò)程,屬中醫(yī)學(xué)“痰”、“瘀”的范疇。艾灸療法以其溫陽(yáng)通脈,活血化瘀的特性在防治AS方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)?，F(xiàn)代研究證明,艾灸可以通過(guò)改善脂質(zhì)代謝、炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、血小板活化以及內(nèi)皮細(xì)胞功能多個(gè)途徑,起到多靶點(diǎn)治療AS的作用。艾煙是艾灸起效的重要因素之一,課題組前期研究也證明了艾煙在抗AS中的作用。Rho/ROCK信號(hào)通路在人體內(nèi)廣泛分布,該通路的異常激活可以活化血小板,損傷內(nèi)皮功能,促使巨噬細(xì)胞泡沫化,抑制膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)途徑,加重炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激,與AS的各項(xiàng)發(fā)病機(jī)制均有深入的聯(lián)系,也是近年來(lái)抗AS治療中新的靶點(diǎn)和焦點(diǎn)。課題組前期研究發(fā)現(xiàn),艾灸對(duì)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)途徑及炎癥反應(yīng)展現(xiàn)出確切的改善作用。因此,開展艾灸干預(yù)Rho/ROCK信號(hào)通路的研究,一方面是對(duì)課題組前期成果的進(jìn)一步深化;另一方面,對(duì)于揭示艾灸防治AS的機(jī)制,有著較大的意義?；谏鲜龌A(chǔ),我們提出假說(shuō),艾灸及艾煙可能通過(guò)調(diào)節(jié)Rho/ROCK信號(hào)通路,發(fā)揮調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝及膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)途徑、緩解炎癥反應(yīng)的作用,來(lái)實(shí)現(xiàn)防治AS的作用。目的:觀察艾灸及艾煙對(duì)ApoE-/-小鼠脂質(zhì)代謝、胸主動(dòng)脈病理等AS常規(guī)指標(biāo)的作用,通過(guò)對(duì)比陽(yáng)性藥物辛伐他汀以驗(yàn)證艾灸及艾煙抗AS的效應(yīng)。以Rho/ROCK信號(hào)通路作為切入點(diǎn),通過(guò)對(duì)比ROCK抑制劑法舒地爾探討艾灸及艾煙改善AS的可能作用機(jī)制。方法:在前兩章實(shí)驗(yàn)中,將60只8周齡雄性ApoE-/-小鼠隨機(jī)分為4組:模型組、艾灸組、艾煙組和辛伐他汀組各15只,以高脂飼料喂養(yǎng)。15只8周齡雄性C57BL/6非轉(zhuǎn)基因小鼠作為空白對(duì)照組,以普通飼料喂養(yǎng)?？瞻捉M和模型組小鼠均采用固定器固定,每日抓取固定20 min;艾灸組采用固定器固定小鼠,在膻中穴施灸20min;艾煙組采用固定器固定小鼠后,將固定器放入5-15mg/m3的艾煙環(huán)境中20 min;辛伐他汀組小鼠每日每只按2.8 mg/kg的劑量給藥,各組每周均干預(yù)6天。連續(xù)干預(yù)14周后取材,采用生化法檢測(cè)血清中TG、TC、LDL-C、HDL-C脂代謝相關(guān)指標(biāo)含量,ELISA法檢測(cè)血清ApoA1、ox-LDL等脂蛋白水平;HE染色和油紅“O”染色從橫向和縱向觀察胸主動(dòng)脈的斑塊病理變化及結(jié)構(gòu)改變。在后兩章實(shí)驗(yàn)中,藥物組選用法舒地爾,其余小鼠品系、飼養(yǎng)、分組、干預(yù)情況與前兩章一致。免疫組化法、Western blot法和RT-PCR法檢測(cè)胸主動(dòng)脈Rho、ROCK2、PPARγ、LXRα和ABCA1的陽(yáng)性面積比、蛋白表達(dá)水平和mRNA表達(dá)量;ELISA法檢測(cè)TGF-β1、IL-6、IL-10和IL-17等炎癥因子水平。結(jié)果:1.血脂及脂蛋白模型組小鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C和ox-LDL含量顯著高于空白組（P<0.01）,ApoA1含量顯著低于空白組（P<0.01）;艾灸組小鼠血清中TC含量與模型組相比顯著降低（P<0.01）,TG、LDL-C和ox-LDL含量下降（P<0.05）,HDL-C含量顯著升高（P<0.01）,ApoA1含量上升（P<0.05）;艾煙組小鼠血清中TC、LDL-C和ox-LDL含量與模型組相比顯著降低（P<0.01）,TG含量下降但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）,HDL-C含量上升（P<0.05）,ApoA1含量顯著升高（P<0.01）;辛伐他汀組小鼠血清中TC、TG、LDL-C含量與模型組相比顯著降低（P<0.01）,ox-LDL含量下降但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）,HDL-C含量上升但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）,ApoA1含量明顯升高（P<0.01）。2.胸主動(dòng)脈病理觀察HE和油紅“O”染色結(jié)果顯示,模型組動(dòng)脈粥樣斑塊病變最為嚴(yán)重,主動(dòng)脈管腔狹窄,斑塊內(nèi)可見泡沫細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)以及膽固醇結(jié)晶,血管中膜向內(nèi)膜增生。艾灸組和辛伐他汀組病理改善顯著,動(dòng)脈粥樣斑塊與模型組相比面積較小,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較少,血管中膜平滑肌增生程度較輕,兩組組間差異不明顯。艾煙組小鼠主動(dòng)脈管腔狹窄,可見動(dòng)脈粥樣斑塊,斑塊內(nèi)可見泡沫細(xì)胞和炎性細(xì)胞浸潤(rùn),程度較模型組輕,血管內(nèi)膜結(jié)構(gòu)破壞,血管中膜增生。3.Rho/ROCK信號(hào)通路免疫組化結(jié)果顯示,模型組小鼠主動(dòng)脈Rho、ROCK2表達(dá)和陽(yáng)性面積與空白組相比增加,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與模型組相比,艾灸組、艾煙組和法舒地爾組Rho、ROCK2表達(dá)和陽(yáng)性面積減少,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。Western blot結(jié)果顯示,模型組小鼠主動(dòng)脈Rho、ROCK2蛋白表達(dá)量較空白組升高,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與模型組相比,艾灸組、艾煙組和法舒地爾組小鼠主動(dòng)脈Rho、ROCK2蛋白表達(dá)量降低,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。RT-PCR結(jié)果顯示,模型組小鼠主動(dòng)脈Rho、ROCK2的mRNA表達(dá)較空白組升高,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與模型組相比,艾灸組、艾煙組和法舒地爾組小鼠主動(dòng)脈Rho、ROCK2的mRNA表達(dá)降低,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。4.膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)及炎癥因子免疫組化結(jié)果顯示,模型組小鼠主動(dòng)脈PPARγ表達(dá)和陽(yáng)性面積與空白組相比減少（P<0.05）、LXRα顯著減少（P<0.01）,ABCA1減少但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）;與模型組相比,艾灸組、艾煙組和法舒地爾組PPARγ、LXRα表達(dá)和陽(yáng)性面積顯著增加（P<0.01）,ABCA1增加但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。Western blot結(jié)果顯示,模型組小鼠主動(dòng)脈PPARy和LXRα蛋白含量較空白組明顯降低（P<0.01）,ABCA1蛋白表達(dá)量較空白組明顯升高（P<0.01）;與模型組相比,艾灸組、艾煙組和法舒地爾組小鼠主動(dòng)脈PPARγ和LXRα蛋白表達(dá)量顯著升高（P<0.01）,艾灸組、艾煙組和法舒地爾組小鼠主動(dòng)脈LXRα蛋白表達(dá)量顯著升高（P<0.01）。艾灸組和法舒地爾組小鼠主動(dòng)脈ABCA1蛋白表達(dá)量顯著降低（P<0.01）,而艾煙組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。RT-PCR結(jié)果顯示,模型組小鼠主動(dòng)脈PPARγ、LXRα、ABCA1的mRNA表達(dá)量較空白組明顯降低（P<0.01）;與模型組相比,艾灸組、艾煙組和法舒地爾組小鼠主動(dòng)脈PPARy、LXRα、ABCA1 的 mRNA 表達(dá)量顯著升高（P<0.01）。模型組小鼠血清TGF-β1含量低于空白組（P<0.05）,IL-10含量顯著低于空白組（P<0.01）,IL-6、IL-17含量顯著高于空白組（P<0.01,P<0.05）;艾灸組小鼠血清中TGF-β1和IL-10含量與模型組相比顯著升高（P<0.01）,IL-6和IL-17含量與模型組相比下降（P<0.05）;艾煙組小鼠血清中TGF-β1和IL-10含量與模型組相比上升（P<0.05）,IL-6含量與模型組相比顯著降低（P<0.01）,IL-17含量下降但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）;法舒地爾組小鼠血清中TGF-β1和IL-10含量與模型組相比顯著升高（P<0.01）,IL-6含量與模型組相比下降（P<0.05）,IL-17含量與模型組相比顯著降低（P<0.01）。結(jié)論:1.艾灸及艾煙均可通過(guò)調(diào)節(jié)脂代謝紊亂、改善主動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣病理狀況,從而減緩AS發(fā)生發(fā)展。2.艾灸及艾煙可下調(diào)Rho/ROCK信號(hào)通路相關(guān)指標(biāo)的蛋白和mRNA表達(dá)。3.艾灸及艾煙可上調(diào)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)途徑相關(guān)指標(biāo),可雙向調(diào)節(jié)炎癥因子水平,以減緩AS病理進(jìn)程。4.艾灸及艾煙調(diào)節(jié)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)途徑和炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制,可能與其調(diào)控Rho/ROCK信號(hào)通路有關(guān)。

王亞鑫^[4]（2020）在《有氧運(yùn)動(dòng)通過(guò)調(diào)控miR-21a誘導(dǎo)的靶基因表達(dá)改善高脂血癥》文中研究說(shuō)明目的:有氧運(yùn)動(dòng)影響miRNA水平是調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的重要機(jī)制,研究表明miR-21a是參與維持脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)的重要靶點(diǎn)。通過(guò)生物信息預(yù)測(cè)分析發(fā)現(xiàn)FABP7,HMGCR,PPARα,PTEN,ACAT1和OLR1是miR-21a的靶基因,并且與脂質(zhì)代謝密切相關(guān),因此設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證有氧運(yùn)動(dòng)通過(guò)調(diào)控miR-21a誘導(dǎo)的其靶基因的表達(dá)來(lái)改善高脂血癥。方法:將SPF級(jí)8周齡雄性小鼠隨機(jī)分為3組:正常對(duì)照組（Normal Control group,NC）,高脂/高膽固醇飲食組（High fat/high cholesteol group,HH）,高脂/高膽固醇加有氧運(yùn)動(dòng)組（High fat/high cholesteol plus aerobic exercise group,HHE）,其中NC組進(jìn)行正常飲食,HH組和HHE組進(jìn)行高脂/高膽固醇飲食,HHE組在高脂/高膽固醇飲食的基礎(chǔ)上進(jìn)行8周的有氧運(yùn)動(dòng)。運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度為:18m/min×45min,6%坡度,6天/周。最后一次運(yùn)動(dòng)結(jié)束后,注射麻醉劑,眼眶取血,收集肝臟組織。分離血漿,分光光度計(jì)檢測(cè)血脂水平;HE染色肝臟組織,檢查肝臟脂肪變性等級(jí);qPCR檢測(cè)miR-21a及其靶基因的表達(dá)水平。結(jié)果:1、高脂/高膽固醇飲食組小鼠體重呈現(xiàn)快速上升的趨勢(shì),顯著高于正常對(duì)照組（P<0.05）。然而,在高脂/高膽固醇飲食的基礎(chǔ)上,8周有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)可以明顯減輕高脂血癥小鼠的體重（P<0.05）。2、與NC組相比,HH組血清TG、TC、LDL-C、HDL-C含量明顯升高,脂質(zhì)積累明顯。在有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)8周后,HHE組小鼠血脂含量恢復(fù)到正常水平。3、高脂/高膽固醇飲食小鼠肝臟發(fā)生了脂肪變性,脂滴增多,出現(xiàn)了炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)后,通過(guò)肉眼觀察或染色HHE組小鼠的肝臟,發(fā)現(xiàn)與正常小鼠的肝臟組織形態(tài)相似,肝細(xì)胞中脂滴減少,肝細(xì)胞排列整齊。4、高脂/高膽固醇飲食小鼠的miR-21a水平顯著降低,靶基因FABP7、HMGCR、ACAT1和OLR1的表達(dá)水平顯著升高,而PPARα、PTEN表達(dá)降低（P<0.05）。有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)后,miR-21a的表達(dá)顯著升高,靶基因FABP7、HMGCR、ACAT1和OLR1mRNA水平降低,PPARα、PTEN mRNA表達(dá)顯著升高（P<0.05）。5、在miR-21a KD小鼠中,體重及血脂水平升高。肝臟中miR-21a的靶基因FABP7,HMGCR,ACAT1及OLR1的表達(dá)水平升高（P<0.05）。而PPARα,PTEN無(wú)顯著性變化。6、MiR-21a KD小鼠進(jìn)行4周的有氧運(yùn)動(dòng)后,miR-21a的表達(dá)水平升高,靶基因也出現(xiàn)了相應(yīng)的改變,血脂水平明顯下降。結(jié)論:1、有氧運(yùn)動(dòng)可以調(diào)節(jié)脂質(zhì)平衡,減輕體重,改善高脂血癥。2、miR-21a可以通過(guò)調(diào)節(jié)靶基因FABP7,HMGCR,ACAT1和OLR1的表達(dá)來(lái)影響脂質(zhì)代謝。3、有氧運(yùn)動(dòng)可以通過(guò)miR-21a介導(dǎo)的相關(guān)脂質(zhì)代謝靶基因的改變來(lái)改善高脂血癥。

哈略^[5]（2020）在《艾灸及艾煙改善動(dòng)脈粥樣硬化的細(xì)胞自噬機(jī)制研究》文中研究指明背景:動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis,AS）是多種心腦血管疾病的主要病理基礎(chǔ),是一種以粥樣斑塊為顯著特征的慢性病理過(guò)程,在中醫(yī)理論上屬于“痰”、“瘀”的范疇,屬于艾灸療法的適應(yīng)癥范圍。艾灸療法改善AS的臨床及機(jī)制研究已有大量報(bào)道,為艾灸抗AS的安全性和有效性提供了一定的科學(xué)依據(jù)。現(xiàn)代研究證明,艾灸可以通過(guò)改善AS過(guò)程中的脂質(zhì)代謝、炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、血小板活化以及內(nèi)皮細(xì)胞功能多個(gè)方面,起到多靶點(diǎn)治療AS的作用。艾煙是艾灸起效的重要因素之一,課題組前期研究也證明了艾煙在抗AS中不可替代的作用。細(xì)胞自噬是機(jī)體中的一項(xiàng)重要促存活機(jī)制,與AS各種發(fā)病機(jī)制均有深入的聯(lián)系,也是近年來(lái)抗AS治療中新的靶點(diǎn)和焦點(diǎn)。學(xué)者們認(rèn)為自噬不足及過(guò)度自噬都會(huì)對(duì)AS的病理進(jìn)程產(chǎn)生不利影響,這一現(xiàn)象反映了中醫(yī)理論中陰陽(yáng)平衡、對(duì)立統(tǒng)一的理念,同時(shí)自噬在微觀層面上改善能量代謝、清除病理產(chǎn)物的作用與氣的“氣化”和“驅(qū)邪外出”等功能具有高度一致性。因此,已有不少學(xué)者著手研究中醫(yī)藥療法調(diào)控自噬,改善心血管疾病的機(jī)制,并且取得了一定的成果。針刺、艾灸調(diào)控自噬防治心血管疾病的研究已有報(bào)道,但直接觀察艾灸調(diào)控自噬對(duì)AS的研究還亟待開展。文獻(xiàn)報(bào)道及課題組前期研究發(fā)現(xiàn),艾灸對(duì)自噬通路及相關(guān)自噬蛋白展現(xiàn)出確切的調(diào)控作用,課題組預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也體現(xiàn)了艾灸對(duì)AS過(guò)程中自噬的確切調(diào)控作用。基于上述基礎(chǔ),我們提出假說(shuō),艾灸及艾煙可以通過(guò)調(diào)控AS過(guò)程中的自噬功能,來(lái)實(shí)現(xiàn)防治AS的作用。目的:觀察艾灸及艾煙兩種干預(yù)手段對(duì)AS動(dòng)物模型的影響,從病理改變、脂質(zhì)代謝、斑塊穩(wěn)定性等方面探討艾灸及艾煙防治AS的效應(yīng),然后通過(guò)對(duì)自噬特異性、自噬信號(hào)通路及凋亡水平等方面指標(biāo)觀察,從自噬角度探討艾灸防治AS的作用機(jī)制。方法:54只8周齡ApoE載脂蛋白基因敲除小鼠按照隨機(jī)數(shù)字表方法隨機(jī)分為三組:模型組、艾灸組和艾煙組。18只同齡C57BL/6小鼠作為空白對(duì)照。艾灸組小鼠每日抓取,固定,予以艾灸膻中穴治療,每次20 min,每日1次,每周6次,共干預(yù)12周。艾煙組小鼠每日接受固定濃度的艾煙暴露。模型組和空白組每日抓取固定,但不予任何干預(yù)。采用血液生化方法檢測(cè)血脂四項(xiàng)（TC、TG、HDL、LDL）,采用Elisa法檢測(cè)VLDL、ApoA1及ox-LDL,分別使用油紅“O”和HE染色法觀察主動(dòng)脈病理切片。采用Masson染色法處理主動(dòng)脈切片,計(jì)算ELA、CA、CD68、FCT、Ⅵ等斑塊穩(wěn)定性指標(biāo)。采用免疫組化法檢測(cè)主動(dòng)脈內(nèi)TNF-α、P38MAPK、NF-κB蛋白表達(dá),采用Elisa法檢測(cè)主動(dòng)脈內(nèi)MMP-2、MMP-9、TIMP-1。使用透射電鏡觀察血管內(nèi)皮自噬小體數(shù)目,使用 Western blot 法檢測(cè)小鼠主動(dòng)脈 P62、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Atg5、Atg12 蛋白表達(dá),使用免疫熒光法檢測(cè)小鼠主動(dòng)脈及肝臟P62、Beclin-1、LC3-Ⅱ表達(dá)。使用Western blot法及RT-PCR方法觀察自噬信號(hào)通路p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR、PI3K在蛋白及mRNA水平上的的表達(dá),使用Western blot法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Caspase-3表達(dá)。結(jié)果:1.AS病理進(jìn)程及血脂水平模型組小鼠經(jīng)過(guò)12周高脂喂養(yǎng),體內(nèi)存在較為明顯的AS病變（血脂紊亂,AS斑塊形成）;與空白組相比,小鼠血清TC（P<0.01）、TG（P<0.01）、LDL（P<0.01）、VLDL（P<0.01）顯著升高,載脂蛋白ApoA1（P<0.05）及HDL（P<0.01）含量顯著下降。以上AS常規(guī)指標(biāo)結(jié)果提示本次研究AS模型建立成功。相比于模型組,經(jīng)過(guò)12周的干預(yù)治療,艾灸組小鼠體內(nèi)AS病理改變減輕（血脂紊亂減輕、主動(dòng)脈斑塊縮小、內(nèi)皮損傷改善）;艾灸組小鼠血清TC（P<0.01）、TG（P<0.01）、LDL（P<0.05）、VLDL（P<0.01）顯著下降,載脂蛋白ApoA1及HDL含量有升高趨勢(shì),但無(wú)顯著差異（P>0.05）。艾煙組小鼠體內(nèi)AS病理改變減輕（血脂紊亂減輕、主動(dòng)脈斑塊縮小、內(nèi)皮損傷改善）;艾煙組小鼠血清 TC（P<0.05）、TG（P<0.05）、VLDL（P<0.05）顯著下降,LDL含量有下降趨勢(shì),但無(wú)顯著差異（P>0.05）。載脂蛋白ApoA1及HDL含量有升高趨勢(shì),但無(wú)顯著差異（P>0.05）。2.斑塊穩(wěn)定性相比于模型組,經(jīng)過(guò)12周的干預(yù)治療,艾灸組小鼠體內(nèi)CA（P<0.01）、FCT（P<0.01）水平顯著升高,ELA（P<0.01）水平顯著下降,斑塊易損指數(shù)Ⅵ（P<0.05）顯著降低;炎癥因子 TNF-α（P<0.05）、NF-κB（P<0.05）、MMP-9（P<0.05）、MMP-2（P<0.05）水平顯著下降,TIMP-1（P<0.05）水平顯著升高。艾煙組小鼠體內(nèi)CA（P<0.01）、FCT（P<0.01）水平顯著升高,ELA（P<0.01）水平顯著下降,易損斑塊指數(shù)Ⅵ（P<0.05）顯著降低;炎癥因子TNF-α（P<0.05）、MMP-9（P<0.05）、MMP-2（P<0.05）水平顯著下降,TIMP-1水平升高但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。3.自噬特異性相比于模型組,經(jīng)過(guò)12周的干預(yù)治療,電鏡下艾灸組小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮自噬小體及自噬溶酶體顯著增多。Western blot顯示艾灸組小鼠主動(dòng)脈促自噬蛋白Beclin-1（P<0.01）、LC3-Ⅱ/LC-Ⅰ比值（P<0.01）、Atg12（P<0.05）顯著升高,Atg5表現(xiàn)出升高趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）;自噬抑制蛋白P62（P<0.01）顯著降低。免疫熒光顯示艾灸組小鼠主動(dòng)脈Beclin-1（P<0.05）、LC3-Ⅱ（P<0.05）表達(dá)顯著增強(qiáng)。艾灸組小鼠肝臟內(nèi)Beclin-1（P<0.05）、LC3-Ⅱ（P<0.05）顯著升高,P62 表達(dá)無(wú)顯著差異（P>0.05）。相比于模型組,經(jīng)過(guò)12周的干預(yù)治療,電鏡下艾煙組小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞自噬小體及自噬溶酶體顯著增多。Western blot顯示艾煙組小鼠主動(dòng)脈促自噬蛋白Beclin-1（P<0.01）、LC3-Ⅱ/LC-Ⅰ 比值（P<0.05）、Atg12（P<0.05）顯著升高,Atg5 表現(xiàn)出升高趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）;自噬抑制蛋白P62（P<0.01）顯著降低。免疫熒光顯示艾煙組小鼠主動(dòng)脈Beclin-1（P<0.05）、LC3-Ⅱ（P<0.05）表達(dá)顯著增強(qiáng)。艾煙組小鼠肝臟內(nèi)Beclin-1、LC3-Ⅱ、P62表達(dá)與模型組無(wú)顯著差異（P>0.05）。4.PI3K/Akt/mTOR 信號(hào)通路結(jié)果顯示,相比于模型組,經(jīng)過(guò)12周的干預(yù)治療,艾灸組小鼠主動(dòng)脈內(nèi)p-Akt/Akt比值（P<0.01）、p-mTOR/mTOR/比值（P<0.01）顯著下降,PI3K相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著差異（P>0.05）。相比于模型組,經(jīng)過(guò)12周的干預(yù)治療,艾煙組小鼠主動(dòng)脈內(nèi)p-mTOR/mTOR/比值（P<0.01）顯著下降、p-Akt/Akt比值有下降趨勢(shì),但無(wú)顯著差異（P>0.05）,PI3K相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著差異（P>0.05）。RT-PCR結(jié)果顯示,相比于模型組,艾灸組小鼠mTOR mRNA及AktmRNA含量顯著下降（P<0.05）。相比于模型組,艾煙組小鼠mTOR mRNA含量顯著下降（P<0.05）,AktmRNA有下降趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。5.細(xì)胞凋亡蛋白相比于模型組,經(jīng)過(guò)12周的干預(yù)治療,艾灸組小鼠主動(dòng)脈內(nèi)Bcl-2蛋白含量顯著升高（P<0.05）,Caspase-3蛋白含量顯著下降（P<0.05）。相比于模型組,經(jīng)過(guò)12周的干預(yù)治療,艾煙組小鼠主動(dòng)脈內(nèi)Caspase-3蛋白含量顯著下降（P<0.05）,Bcl-2蛋白含量有升高趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。結(jié)論:1.艾灸和艾煙都可以改善AS小鼠體內(nèi)病理進(jìn)展,減輕炎癥反應(yīng),糾正血脂紊亂,增強(qiáng)斑塊穩(wěn)定性。2.艾灸和艾煙都可以上調(diào)AS小鼠體內(nèi)自噬水平,艾灸改善自噬是艾灸防治AS的全新靶點(diǎn)。3.艾灸及艾煙可通過(guò)抑制PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路中的相關(guān)活性分子,從而提升細(xì)胞內(nèi)自噬水平,起到延緩AS病理進(jìn)程,改善斑塊穩(wěn)定性的作用。4.艾灸及艾煙通過(guò)上調(diào)Bcl-2、下調(diào)Caspase-3蛋白表達(dá),抑制細(xì)胞凋亡,展現(xiàn)出一定的調(diào)控自噬/凋亡平衡的作用。5.艾灸和艾煙的調(diào)節(jié)作用基本一致,在調(diào)控血脂方面艾灸干預(yù)的效果優(yōu)于艾煙干預(yù)。

張栩^[6]（2011）在《有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性及基質(zhì)金屬蛋白酶，IL-6水平的影響》文中研究說(shuō)明背景頸動(dòng)脈粥樣硬化是引起缺血性腦血管病的重要原因,頸動(dòng)脈閉塞、粥樣斑塊或血栓的脫落均可引起腦梗死。頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性與腦梗死密切相關(guān)。易損斑塊的特點(diǎn)是脂質(zhì)核心較大,纖維帽薄,炎性細(xì)胞豐富。易損斑塊破裂及血栓形成的危險(xiǎn)高?；|(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases, MMPs）是與動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis, AS）發(fā)生、發(fā)展過(guò)程關(guān)系密切的一類蛋白水解酶。MMPs是降解細(xì)胞外基質(zhì)（extracelluar matrix, ECM）最重要的酶類。越來(lái)越多的證據(jù)表明,MMPs通過(guò)降解AS斑塊的纖維帽,誘發(fā)斑塊破裂,導(dǎo)致血栓形成或栓塞。運(yùn)動(dòng)對(duì)AS的防治有非常積極的作用,運(yùn)動(dòng)可降低動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的心腦血管病的死亡率。以往關(guān)于運(yùn)動(dòng)抗AS的機(jī)制研究多集中在運(yùn)動(dòng)對(duì)脂代謝,血管內(nèi)皮功能,以及運(yùn)動(dòng)的抗氧化功能,影響血管收縮舒張功能影響上近年來(lái)的研究認(rèn)為,適當(dāng)?shù)倪\(yùn)動(dòng)能顯著改善機(jī)體抗炎癥的能力。這可能是運(yùn)動(dòng)可以有效防治AS的新機(jī)制。但運(yùn)動(dòng)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性的影響未見報(bào)導(dǎo)。本研究以ApoE基因缺陷小鼠建立AS動(dòng)物模型,通過(guò)頸動(dòng)脈套管的方法建立頸動(dòng)脈狹窄及易損斑塊模型,觀察有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成的影響。并通過(guò)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊病理學(xué)檢測(cè),易損指數(shù)測(cè)定以及基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）、基質(zhì)金屬蛋白酶-14（MMP-14）的表達(dá),探討運(yùn)動(dòng)對(duì)AS的影響機(jī)制。目的1.觀察有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性的影響。2.觀察有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)MMP-9、MMP-14水平變化的影響。方法1.頸動(dòng)脈易損斑塊動(dòng)物模型的構(gòu)建通過(guò)頸動(dòng)脈套管構(gòu)建AS易損斑塊動(dòng)物模型。96只10周齡雄性ApoE基因缺陷小鼠隨機(jī)分為有氧運(yùn)動(dòng)組（n=48）及對(duì)照組（n=48）,均給予高脂飲食（含0.25%膽固醇和15%脂肪）。給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物施行右頸總動(dòng)脈套管術(shù)以誘發(fā)AS病變。造模成功4周后,運(yùn)動(dòng)組以坡度為0%,15米／分的速度在國(guó)產(chǎn)電動(dòng)鼠類跑臺(tái)上進(jìn)行跑步訓(xùn)練。每天運(yùn)動(dòng)30分鐘,每周運(yùn)動(dòng)6天,周日休息,共運(yùn)動(dòng)8周。對(duì)照組采取限制應(yīng)激刺激。手術(shù)4周后,將小鼠放在能夠限制其活動(dòng)的籠子中,每次1小時(shí),每天1次,持續(xù)8周。2.造模成功12周后,測(cè)量?jī)山M小鼠血脂水平3.觀察有氧運(yùn)動(dòng)與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形態(tài)結(jié)構(gòu),易損指數(shù)及MMP-9、MMP-14表達(dá)的關(guān)系3.1病理學(xué)檢測(cè)：對(duì)頸動(dòng)脈斑塊進(jìn)行H&E染色以觀察斑塊的形態(tài)結(jié)構(gòu)。測(cè)量斑塊面積和纖維帽的厚度,計(jì)算斑塊的破裂率。對(duì)頸動(dòng)脈斑塊進(jìn)行油紅0染色以檢測(cè)斑塊內(nèi)脂質(zhì)含量。對(duì)頸動(dòng)脈斑塊進(jìn)行天狼猩紅染色以檢測(cè)斑塊內(nèi)膠原含量。并通過(guò)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞（MOMA-2）、平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-actin）、MMP-9及MMP-14的蛋白水平。檢測(cè)斑塊內(nèi)膠原、脂質(zhì)、巨噬細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞的含量。計(jì)算易損指數(shù)：易損指數(shù)=（巨噬細(xì)胞+脂質(zhì)）陽(yáng)性面積百分比／（平滑肌細(xì)胞十膠原）陽(yáng)性面積百分比。3.2 RT-PCR檢測(cè)：取新鮮頸動(dòng)脈斑塊組織,提取RNA, RT-PCR檢測(cè)MMP-9和MMP-14mRNA的表達(dá)量。3.3 Western blot檢測(cè)：取新鮮頸動(dòng)脈斑塊組織,提取蛋白質(zhì),Western blot檢測(cè)斑塊內(nèi)MMP-9和HMP-14蛋白質(zhì)水平。結(jié)果1.有氧運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組在實(shí)驗(yàn)開始的體重比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。實(shí)驗(yàn)?zāi)┢冢ㄌ幩廊〔那埃┑捏w重比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）2.血液生化指標(biāo)檢測(cè)：有氧運(yùn)動(dòng)組及對(duì)照組血清TC,TG,HDL-C,LDL-C水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。3.有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的影響3.1病理學(xué)檢測(cè)：有氧運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組比較,斑塊面積差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（斑塊面積分別為81000±9000um2和82000±12000um2,P>0.05）。有氧運(yùn)動(dòng)組膠原含量明顯增加（分別為16.44%±4.73%和11.33%±3.58%,P<0.05）。脂質(zhì)含量明顯減少（分別為12.54%±2.11%和21.23%±3.46%,P<0.05）。纖維帽厚度明顯增加（分別為7.35±1.25um和6.63±0.97um,P<0.05）。帽/核比值明顯增加（分別為0.09±0.01和0.06±0.01,P<0.05）。有氧運(yùn)動(dòng)組斑塊中有5個(gè)纖維帽中斷,5個(gè)斑塊內(nèi)埋藏的纖維帽,未見血栓和出血現(xiàn)象。斑塊破裂率為20.8%。對(duì)照組斑塊中有4個(gè)斑塊破裂并血栓形成,4個(gè)斑塊內(nèi)出血,6個(gè)斑塊內(nèi)埋藏的纖維帽,10個(gè)纖維帽中斷。斑塊破裂率為50%。兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。有氧運(yùn)動(dòng)組易損指數(shù)明顯降低（分別為0.80±0.53和2.84±1.12,P<0.05）。3.2免疫組化染色有氧運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組比較,巨噬細(xì)胞明顯減少（分別為7.57%±2.67%和15.42%±3.11%,P<0.05）。α-SMC-actin明顯增加（分別為12.97%±1.91%和5.87%±1.19%,P<0.05）。MMP-9明顯減少（分別為4.19%±0.32%和9.89%±0.88%,P<0.05）。MMP-14明顯減少（分別為6.69%±0.56%和12.42%±1.54%,P<0.05）。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.3 RT-PCR檢測(cè)與對(duì)照組相比,有氧運(yùn)動(dòng)組頸動(dòng)脈斑塊組織中MMP-9mRNA的表達(dá)量降低68.4%,兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。MMP-14 mRNA的表達(dá)量降低78.3%,兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P<0.05)。3.4免疫印跡檢測(cè)與對(duì)照組相比,有氧運(yùn)動(dòng)組頸動(dòng)脈斑塊組織中MMP-9蛋白的表達(dá)量降低62.8%（P<0.05）。MMP-14蛋白的表達(dá)量降低55.1%（P<0.05）。兩組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1.有氧運(yùn)動(dòng)增加頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊纖維帽厚度,增加帽核比,降低斑塊破裂率。有氧運(yùn)動(dòng)降低斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞和脂質(zhì)的含量,增加斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞及膠原的表達(dá),降低斑塊易損指數(shù)。有氧運(yùn)動(dòng)能減少頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的易損性。2.有氧運(yùn)動(dòng)降低ApoE基因缺陷小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)MMP-9,MMP-14mRNA及蛋白表達(dá)有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)載脂蛋白E基因缺陷小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化的抗炎性影響背景頸動(dòng)脈粥樣硬化是缺血性腦血管病的重要病理學(xué)基礎(chǔ)。動(dòng)脈粥樣硬化（Aterosclerosis, AS）是一個(gè)慢性炎癥過(guò)程。炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中的一個(gè)極為重要的因素。大量研究證明C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein, CRP）,白細(xì)胞介素6（interleukin 6,IL-6）等炎癥因子水平增高與AS的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。CRP是典型的炎癥反應(yīng)刺激物,在創(chuàng)傷和感染等應(yīng)激反應(yīng)時(shí)升高。近年研究認(rèn)為,CRP是心血管缺血事件的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。炎性細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子如IL-6、IL-8等可導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞的活化,平滑肌細(xì)胞的增生凋亡及AS病變的進(jìn)展。炎癥因子可促進(jìn)纖維帽的降解,使膠原成分減少,斑塊易于破裂。動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是一種多因素疾病。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物載脂蛋白E （ApoE）基因缺陷小鼠是研究AS的較好的動(dòng)物模型。已有研究證實(shí),有氧運(yùn)動(dòng)能減少斑塊面積,延緩AS形成,是防治動(dòng)脈粥樣硬化及其并發(fā)癥的有效措施。本研究通過(guò)觀察有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形態(tài)結(jié)構(gòu)的作用,及運(yùn)動(dòng)對(duì)1L-6水平的影響,揭示運(yùn)動(dòng)抗動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制。目的1.觀察有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊病理形態(tài)的影響。2.觀察有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)IL-6水平變化的影響。方法1.頸動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的構(gòu)建通過(guò)頸動(dòng)脈套管方法構(gòu)建頸動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型。80只10周齡雄性ApoE基因缺陷小鼠隨機(jī)分為有氧運(yùn)動(dòng)組（n=40）及對(duì)照組（n=40）,均給予高脂飲食（含0.25%膽固醇和15%脂肪）。給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物施行右頸總動(dòng)脈套管術(shù)以誘發(fā)AS病變。造模成功4周后,運(yùn)動(dòng)組以坡度為0%,15米/分的速度在國(guó)產(chǎn)電動(dòng)鼠類跑臺(tái)上進(jìn)行跑步訓(xùn)練。每天運(yùn)動(dòng)30分鐘,每周運(yùn)動(dòng)6天,周日休息,共運(yùn)動(dòng)12周。對(duì)照組采取限制活動(dòng),手術(shù)4周后,將小鼠放在能夠限制其活動(dòng)的籠子中,每次1小時(shí),每天1次,持續(xù)12周。2.造模成功16周后,測(cè)量?jī)山M小鼠血脂水平及血清IL-6水平3.觀察有氧運(yùn)動(dòng)與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形態(tài)結(jié)構(gòu)及斑塊內(nèi)IL-6表達(dá)的關(guān)系3.1病理學(xué)檢測(cè)：對(duì)頸動(dòng)脈斑塊進(jìn)行H&E染色以觀察斑塊的形態(tài)結(jié)構(gòu)。測(cè)量斑塊面積和纖維帽的厚度。對(duì)頸動(dòng)脈斑塊進(jìn)行油紅0染色以檢測(cè)斑塊內(nèi)脂質(zhì)含量。對(duì)頸動(dòng)脈斑塊進(jìn)行天狼猩紅染色以檢測(cè)斑塊內(nèi)膠原含量。并通過(guò)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞（MOMA-2）、平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-actin）、IL-6的蛋白水平。檢測(cè)斑塊內(nèi)膠原、脂質(zhì)、巨噬細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞的含量。3.2 RT-PCR檢測(cè)：取新鮮頸動(dòng)脈斑塊組織,提取RNA, RT-PCR檢測(cè)IL-6mRNA的表達(dá)量。3.3 Western blot檢測(cè)：取新鮮頸動(dòng)脈斑塊組織,提取蛋白質(zhì),Western blot檢測(cè)斑塊內(nèi)IL-6蛋白質(zhì)水平。結(jié)果1.有氧運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組在實(shí)驗(yàn)開始的體重比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）,實(shí)驗(yàn)?zāi)┢冢ㄌ幩廊〔那埃┑捏w重比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）2.血液生化指標(biāo)檢測(cè)2.1兩組血清TC,TG,HDL-C,LDL-C水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。有氧運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組比較,TC（分別為14.13±2.86mmol/L和16.37±3.21mmol/L,P<0.05）。TG（分別為0.39±0.11mmol/L和0.71±0.12mmol/L,P<0.05）。HDL-C（分別為3.42±0.24 mmol/L和1.44±0.26mmol/L,P<0.05）。LDL-C（分別為7.01±1.02mmol/L和5.13±1.17 mmol/L,P<0.05）2.2 IL-6水平：有氧運(yùn)動(dòng)組組和對(duì)照組的血清IL-6水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。（分別為61.27±9.64 pg/ml和182.38±10.89 pg/ml,P<0.05）3.有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的影響3.1病理學(xué)檢測(cè)：有氧運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組比較,斑塊面積差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（斑塊面積分別為75000±10050μm2和83000±11000um2,P<0.05）,有氧運(yùn)動(dòng)組膠原含量明顯增加（分別為16.34±4.72%和11.04±3.52,P<0.05）,脂質(zhì)含量明顯減少（分別為12.35±2.11%和21.33±3.66%,P<0.05）,纖維帽厚度明顯增加（分別為7.35±1.45um和6.53±0.86um,P<0.05）,帽/核比值明顯增加（分別為0.09±0.02和0.05±0.01,P<0.05）。3.2免疫組化染色有氧運(yùn)動(dòng)組和對(duì)照組比較,巨噬細(xì)胞明顯減少（分別為8.67%±2.57%和16.43%±3.12%,P<0.05）,α-SMC-actin明顯增加（分別為13.67%±1.71%和5.57%±1.29%,P<0.05）,IL-6明顯減少（分別為3.59%±0.43%和9.88%±0.53%,P<0.05）,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.3 RT-PCR檢測(cè)與對(duì)照組相比,有氧運(yùn)動(dòng)組頸動(dòng)脈斑塊組織中IL-6mRNA的表達(dá)量降低59.2%,兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。3.4免疫印跡檢測(cè)與對(duì)照組相比,有氧運(yùn)動(dòng)組頸動(dòng)脈斑塊組織中IL-6蛋白的表達(dá)量降低63.9%（P<0.05）,兩組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1.有氧運(yùn)動(dòng)增加頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊纖維帽厚度,增加帽核比。有氧運(yùn)動(dòng)降低斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞和脂質(zhì)的含量,增加斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞及膠原的表達(dá)。有氧運(yùn)動(dòng)能減輕頸動(dòng)脈粥樣硬化程度。2.有氧運(yùn)動(dòng)降低ApoE基因缺陷小鼠血清及頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)IL-6mRNA及蛋白表達(dá)

袁凌燕,陸愛云^[7]（2009）在《運(yùn)動(dòng)與動(dòng)脈粥樣硬化研究的動(dòng)物模型質(zhì)量思考與分析》文中研究說(shuō)明由于動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜,需借助動(dòng)物模型以簡(jiǎn)化條件,有目的地研究AS的發(fā)病機(jī)制和治療方法。AS的形成是一個(gè)長(zhǎng)期的、漸進(jìn)的過(guò)程,從脂紋、纖維斑塊、粥樣斑塊到最后的復(fù)合病變,每個(gè)階段都有特定的形態(tài)和病理特征。尋求一種與人

劉善云^[8]（2008）在《耐力訓(xùn)練影響ApoE-/-小鼠炎癥因子表達(dá)與AS防治機(jī)制研究》文中提出動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）是嚴(yán)重危害人類健康的疾病之一。當(dāng)前,以AS為病理基礎(chǔ)的心、腦血管疾病的發(fā)病率和死亡率均居各種疾病前列。研究AS的發(fā)病機(jī)理及其防治手段成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)和重要課題。一般認(rèn)為,AS的發(fā)生發(fā)展是多種遺傳因素和環(huán)境因素相互作用的結(jié)果。近年研究顯示,AS是血管內(nèi)皮損傷后的一種高度特異性的慢性炎癥反應(yīng)過(guò)程,炎癥是AS中一個(gè)關(guān)鍵的致病機(jī)制。因此,抗炎治療有望成為AS新的防治手段。運(yùn)動(dòng)鍛煉作為AS綜合防治中的重要干預(yù)手段之一是運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域極為關(guān)注的課題。在運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域雖早已開展相關(guān)研究工作,但多為整體、器官水平的研究。已有研究證實(shí),有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)AS形成具有明顯的干預(yù)效果,但對(duì)其機(jī)制的研究尚顯不足。目前尚未見到有關(guān)運(yùn)動(dòng)干預(yù)AS炎癥反應(yīng)機(jī)制方面的研究報(bào)道,并缺乏運(yùn)動(dòng)對(duì)已經(jīng)形成的AS的治療或改善作用的相關(guān)研究。運(yùn)動(dòng)鍛煉抗阻AS病理進(jìn)程的機(jī)制尚缺乏足夠的實(shí)驗(yàn)與理論依據(jù)。目的:本研究以參與AS炎癥反應(yīng)調(diào)控的核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）及其誘導(dǎo)的炎癥因子表達(dá)在AS中的作用為主線,深入探討運(yùn)動(dòng)對(duì)AS的干預(yù)效果。在復(fù)制實(shí)驗(yàn)動(dòng)物AS模型的基礎(chǔ)上,采用病理學(xué)、生物化學(xué)及分子生物學(xué)等研究方法及相關(guān)技術(shù),從運(yùn)動(dòng)影響AS炎癥反應(yīng)角度探討運(yùn)動(dòng)對(duì)AS的干預(yù)作用,并從分子水平進(jìn)一步闡明運(yùn)動(dòng)防治AS的可能機(jī)制。方法:選取8周齡ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠48只,飼以“西方類型”膳食,隨機(jī)分為AS預(yù)防組（14周實(shí)驗(yàn)組）和AS治療組（26周實(shí)驗(yàn)組）,即:14周AS模型組（H組）、14周跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)組（HE組）,26周AS模型組（HH組）、14周造模+12周跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)組（H+E組）;并選取8周齡同品系C57BL/6J小鼠24只作為對(duì)照組,隨機(jī)分為14周對(duì)照組（N1組）和26周對(duì)照組（N2組）。每組12只,雄性。令HE組和H+E組小鼠在動(dòng)物活動(dòng)跑臺(tái)上進(jìn)行耐力性運(yùn)動(dòng)（13m/min,60min/次,每周5次）,分別用于觀察耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)AS形成的預(yù)防作用和運(yùn)動(dòng)對(duì)已經(jīng)形成的AS的治療或改善效果。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每周測(cè)量小鼠體重的變化,并觀察其生長(zhǎng)狀況、飲食量、精神狀況及對(duì)運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的適應(yīng)能力等。實(shí)驗(yàn)周期結(jié)束后,采取眼球摘除法從小鼠眼眶靜脈叢采集血液標(biāo)本,用于測(cè)定血脂和氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）水平;并取心臟及主動(dòng)脈近心端1-1.5cm組織制備主動(dòng)脈根部冰凍切片,從主動(dòng)脈瓣尖出現(xiàn)起作連續(xù)橫切,切片厚度7μm。每間隔10張取1張,分別用于油紅0染色、HE染色、原位雜交及免疫組化分析等。采用常規(guī)生化檢測(cè)法測(cè)定血脂水平;采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫ELISA法測(cè)定OX-LDL水平;主動(dòng)脈根部冰凍切片行油紅0染色,通過(guò)計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)評(píng)估AS斑塊面積;主動(dòng)脈切片行HE染色光鏡下分析主動(dòng)脈組織病理變化;主動(dòng)脈切片行原位雜交法測(cè)定主動(dòng)脈NF-κBmRNA表達(dá);主動(dòng)脈切片行免疫組化法測(cè)定主動(dòng)脈NF-κBp65及相關(guān)炎癥因子的表達(dá)等。通過(guò)對(duì)主動(dòng)脈AS斑塊面積進(jìn)行定量評(píng)估和組織病理分析,并結(jié)合OX-LDL對(duì)NF-κB的激活及其誘導(dǎo)的炎癥因子表達(dá)和相關(guān)分析,從分子水平上深入研究與闡明運(yùn)動(dòng)防治AS的可能機(jī)制。結(jié)果:1、ApoE-/-小鼠生長(zhǎng)狀況及體重的變化實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各組小鼠體重均呈穩(wěn)步增長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育正常,運(yùn)動(dòng)組小鼠對(duì)運(yùn)動(dòng)負(fù)荷適應(yīng)良好。2、耐力訓(xùn)練對(duì)ApoE-/-小鼠AS形成及主動(dòng)脈組織病理形態(tài)學(xué)的影響①耐力訓(xùn)練對(duì)ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈AS形成的干預(yù)效果與正常對(duì)照組(C57BL/6J)小鼠比較,22周齡ApoE-/-小鼠（H組）主動(dòng)脈根部血管內(nèi)膜上可見到大量被染成鮮紅色的AS斑塊,斑塊面積占血管腔總面積的41.79±6.93%;耐力運(yùn)動(dòng)組（HE組）主動(dòng)脈根部亦可見AS斑塊,但與H組比較,其斑塊面積顯著減小,斑塊面積占血管腔面積比例為25.07±7.94%（P＜0.01）。主動(dòng)脈切片經(jīng)HE染色光學(xué)顯微鏡觀察病理特征顯示,H組小鼠主動(dòng)脈可見許多脂紋-纖維斑塊期病變和少量粥樣斑塊病變,結(jié)果提示本實(shí)驗(yàn)中ApoE-/-小鼠AS模型建立已經(jīng)成功;與H組比較,HE組小鼠主動(dòng)脈AS病變程度明顯減輕,AS病變多限于脂紋期,僅局部形成少量纖維斑塊。表明14周耐力運(yùn)動(dòng)具有預(yù)防或減少AS形成的作用。②耐力訓(xùn)練對(duì)ApoE-/-小鼠已形成的AS的干預(yù)效果與H組比較,HH組小鼠主動(dòng)脈AS病變進(jìn)一步加重,AS斑塊面積與血管腔總面積比例達(dá)58.80±6.40%,且多為粥樣斑塊病變或出現(xiàn)易損斑塊特征。對(duì)已形成AS的H+E組小鼠實(shí)施12周耐力運(yùn)動(dòng)干預(yù)后發(fā)現(xiàn),其主動(dòng)脈AS斑塊面積占血管腔總面積比例為50.35±3.52%,與H組比較有顯著性差異（P＜0.05）,但較HH組AS斑塊面積顯著減少（P＜0.05）,且病變程度相對(duì)減輕。表明12周耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)ApoE-/-小鼠已經(jīng)形成的AS具有減緩或控制其病變進(jìn)程的作用。3、耐力訓(xùn)練對(duì)ApoE-/-小鼠血脂水平的影響與正常對(duì)照組比較,ApoE-/-小鼠血清TC、TG、LDL-C水平均顯著升高,HDL-C顯著降低,表明ApoE-/-小鼠出現(xiàn)典型的高膽固醇血癥和血脂紊亂;而耐力性運(yùn)動(dòng)對(duì)ApoE-/-小鼠血脂及脂蛋白成分均未產(chǎn)生明顯的影響。4、耐力訓(xùn)練對(duì)ApoE-/-小鼠血清OX-LDL水平的影響與正常對(duì)照組比較,ApoE-/-小鼠OX-LDL水平明顯升高;與H組比較,HE組OX-LDL水平顯著降低（P＜0.05）;與HH組比較,H+E組OX-LDL水平顯著降低（P＜0.05）。提示ApoE-/-小鼠體內(nèi)存在異常氧化狀態(tài)和較高的OX-LDL水平,而耐力性運(yùn)動(dòng)能有效地減少OX-LDL的生成。5、耐力訓(xùn)練對(duì)ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈NF-κBmRNA及其蛋白表達(dá)的影響與正常對(duì)照組比較,ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈NF-κBmRNA及NF-κBp65均呈高度表達(dá)。與H組比較,HE組NF-κBmRNA、NF-κBp65表達(dá)強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率均顯著降低（P＜0.01）;與HH組比較,H+E組主動(dòng)脈NF-κBmRNA、NF-κBp65表達(dá)強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率均顯著降低（P＜0.05）。提示ApoE-/-小鼠血管壁中NF-κBmRNA及NF-κBp65高度表達(dá),而耐力運(yùn)動(dòng)可有效地抑制或降低其表達(dá)量。6、耐力訓(xùn)練對(duì)ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈炎癥因子表達(dá)的影響與正常對(duì)照組比較,各組ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈炎癥因子TNF-α、ICAM-1和MMP-9均呈高度表達(dá),提示AS病變與炎癥反應(yīng)有密切關(guān)系;而耐力運(yùn)動(dòng)能有效地減少ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈相關(guān)炎癥因子的表達(dá)。7、ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈AS斑塊面積與NF-κBp65、OX-LDL的相關(guān)關(guān)系相關(guān)分析表明,ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈AS斑塊面積與NF-κBp65、OX-LDL之間呈顯著正相關(guān)。結(jié)論:1、14周耐力訓(xùn)練能有效地預(yù)防ApoE-/-小鼠AS的形成。2、12周耐力訓(xùn)練對(duì)ApoE-/-小鼠已經(jīng)形成的AS起到了減緩其病變進(jìn)展的作用。3、耐力訓(xùn)練防治AS的效果可能是通過(guò)下列機(jī)制發(fā)揮抗AS作用:耐力訓(xùn)練通過(guò)降低ApoE-/-小鼠OX-LDL水平和NF-κBmRNA的表達(dá),進(jìn)而下調(diào)參與AS形成的相關(guān)炎癥因子ICAM-1和MMP-9的表達(dá),降低了AS病灶中的炎癥反應(yīng),從而起到抑制或減緩AS發(fā)展的作用,可能是運(yùn)動(dòng)防治AS的重要機(jī)制之一。

吳衛(wèi)東^[9]（2008）在《有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)ApoE基因缺陷小鼠AS形成中脂聯(lián)素mRNA表達(dá)的影響》文中研究說(shuō)明動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）是一種嚴(yán)重危害人類身體健康的心血管疾病,在世界范圍內(nèi)其發(fā)病率和死亡率均居各種疾病前列。當(dāng)前由多種復(fù)雜因素共同作用形成的AS的發(fā)病率仍在逐年遞增。在發(fā)達(dá)國(guó)家由AS所致的心血管疾病更是被視為健康第一殺手,因此,防治AS已成為提高人們健康水平的重要研究課題。目前,防治AS的主要方法是控制飲食、改變靜態(tài)生活方式、適當(dāng)增加運(yùn)動(dòng),以及養(yǎng)成健康的生活習(xí)慣。近年關(guān)于有氧運(yùn)動(dòng)防治AS的積極作用有大量報(bào)道,同時(shí)關(guān)于其作用機(jī)制的探討也逐步深入,但主要集中在有氧運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)機(jī)體血脂代謝、提高機(jī)體抗氧化性及減少機(jī)體炎癥因子等方面,對(duì)運(yùn)動(dòng)防治AS過(guò)程中脂肪細(xì)胞因子發(fā)揮的作用研究較少。隨著科學(xué)研究手段的進(jìn)步以及研究層次的不斷拓展與深入,研究發(fā)現(xiàn)脂肪組織分泌產(chǎn)生的脂聯(lián)素（adiponectin,APN）可以通過(guò)多種途徑發(fā)揮保護(hù)心血管系統(tǒng)的作用,是重要的抗AS脂肪細(xì)胞因子,同時(shí)有氧運(yùn)動(dòng)作為防治AS的一種經(jīng)濟(jì)有效的手段已被廣泛研究證實(shí)。因此,從理論上推測(cè)有氧運(yùn)動(dòng)可以通過(guò)提高脂肪組織脂聯(lián)素mRNA的表達(dá)發(fā)揮防治AS的作用,探討有氧運(yùn)動(dòng)防治AS的機(jī)制很有必要。研究目的:本文試圖通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究運(yùn)動(dòng)防治AS過(guò)程中脂聯(lián)素的變化,分析脂聯(lián)素在此過(guò)程中的作用,為全面地認(rèn)識(shí)AS運(yùn)動(dòng)防治機(jī)理,科學(xué)制定防治AS的運(yùn)動(dòng)處方提供理論依據(jù)。研究方法:本研究以20只8周齡雄性ApoE基因缺陷小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,隨機(jī)分為安靜組（C,10只）和運(yùn)動(dòng)組（E,10只）。兩組小鼠均飼以“西方類型”膳食飼料,C組不進(jìn)行運(yùn)動(dòng),E組進(jìn)行14周跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)。14周末處死實(shí)驗(yàn)小鼠,比較兩組小鼠體重、內(nèi)臟脂肪重量及脂體比,同時(shí)觀察兩組小鼠胸主動(dòng)脈的病理變化,檢測(cè)其脂肪組織脂聯(lián)素mRNA的表達(dá)水平、血清脂聯(lián)素水平及血脂水平,比較其差異。研究結(jié)果:①經(jīng)過(guò)14周有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng),E組小鼠與C組小鼠的絕對(duì)體重和體重增益均無(wú)顯著性差異,但是E組小鼠的附睪和腎周脂肪墊重量,以及脂體比均顯著低于C組（P<0.05）,提示14周有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)雖未能顯著改變兩組小鼠的絕對(duì)體重,但是顯著減少了腹部?jī)?nèi)臟脂肪的積累,改善了脂體比。②顯微鏡下觀察主動(dòng)脈竇血管壁HE染色結(jié)果顯示,E組小鼠與C組小鼠相比,其纖維彈力板和內(nèi)膜完好。主動(dòng)脈竇ORO染色結(jié)果顯示,E組小鼠與C組小鼠相比,AS斑塊著色較淺,著色區(qū)域較小,提示有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)能有效延緩AS的發(fā)生和發(fā)展。③經(jīng)過(guò)14周有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng),兩組小鼠血清TG、TC、LDL、HDL水平均未呈現(xiàn)顯著性差異。有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)未能改善ApoE基因缺陷小鼠的血脂結(jié)構(gòu),提示有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)ApoE基因缺陷小鼠這種特殊AS動(dòng)物模型的心血管功能的影響可能存在著其它機(jī)制。④RT-PCR結(jié)果顯示,E組小鼠脂肪組織脂聯(lián)素mRNA的表達(dá)顯著高于C組（P<0.05）;E組小鼠血清脂聯(lián)素含量也顯著高于C組（P<0.01）。提示14周有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可以顯著提高ApoE基因缺陷小鼠脂聯(lián)素mRNA的表達(dá)以及血清脂聯(lián)素的含量。結(jié)論:①14周有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)有效延緩了ApoE基因缺陷小鼠AS的發(fā)生發(fā)展。②14周有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)顯著提高了脂肪組織脂聯(lián)素mRNA的表達(dá)以及血清脂聯(lián)素水平,這可能是有氧運(yùn)動(dòng)防治AS的重要機(jī)制之一。

韓旭^[10]（2008）在《載脂蛋白E基因多態(tài)性與冠心病中醫(yī)證型的關(guān)系及通心絡(luò)膠囊干預(yù)的臨床與實(shí)驗(yàn)研究》文中認(rèn)為目的:1.首次應(yīng)用國(guó)內(nèi)最先進(jìn)的基因測(cè)序技術(shù)為基礎(chǔ),研究冠心?。–HD）的載脂蛋白E（ApoE）基因多態(tài)性分布,探究CHD發(fā)病遺傳易感性的關(guān)系,為CHD臨床及流行病學(xué)研究打下基礎(chǔ)。2.探究ApoE基因多態(tài)性與CHD中醫(yī)證型的相關(guān)性,為CHD臨床辨證施治提供分子生物學(xué)依據(jù)。3.觀察ApoE基因多態(tài)性對(duì)通心絡(luò)膠囊干預(yù)CHD中醫(yī)證型和血脂治療效應(yīng)的影響,闡述通心絡(luò)膠囊治療CHD的作用機(jī)制。4.通過(guò)通心絡(luò)膠囊對(duì)載脂蛋白E基因敲除[ApoE（-/-）]模型組小鼠血脂、心肌、冠狀動(dòng)脈斑塊、主動(dòng)脈斑塊病理組織學(xué)變化及血清血栓素B2（TXB2）、6-酮-前列腺素F1α（6-Keto-PGF1α）、內(nèi)皮素（ET）、循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞（CEC）、組織金屬蛋白酶抑制劑-1（TIMP-1）、基質(zhì)金屬蛋白酶1（MMP1）和基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9）水平等指標(biāo)的干預(yù)變化,探究其與CHD ApoE基因多態(tài)性的相關(guān)度并試析其機(jī)理。方法:1.將2006年3月至2007年12月收集的118例符合納入標(biāo)準(zhǔn)的不同證型CHD患者（全部來(lái)源于江蘇省中醫(yī)院心內(nèi)科、老年科門診及住院患者）設(shè)立為試驗(yàn)組,另設(shè)立123例健康人群為對(duì)照組（均來(lái)自江蘇省中醫(yī)院體檢中心）。通過(guò)采集血標(biāo)本,Promega公司血液基因組DNA提取試劑盒進(jìn)行模板DNA的提取,PCR擴(kuò)增后進(jìn)行基因測(cè)序。將測(cè)序結(jié)果用DNA sequencing analysis 5.1自動(dòng)分析原始測(cè)序數(shù)據(jù),獲得測(cè)序電泳圖和序列。將樣品序列用DNA star seqman與標(biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行比對(duì),觀察樣本基因序列的多態(tài)性改變,將正常對(duì)照組ApoE基因表型分布和等位基因頻率比較;同時(shí)將CHD組患者的中醫(yī)證型及其ApoE基因表型分布和等位基因頻率相聯(lián)系,并進(jìn)行組間和組內(nèi)比較分析。2.將臨床收集的118例CHD患者隨機(jī)設(shè)立為通心絡(luò)膠囊治療組和常規(guī)治療對(duì)照組,通過(guò)采集血標(biāo)本,以全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血總膽固醇（TC）、三酸甘油酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等指標(biāo),同時(shí)記錄并分析比較ApoE基因多態(tài)性和CHD的不同中醫(yī)證型對(duì)中藥通心絡(luò)干預(yù)反應(yīng)的差異及療效。3.將40只ApoE（-/-）小鼠作為實(shí)驗(yàn)組,建立高脂血癥和冠狀動(dòng)脈粥樣硬化模型,隨機(jī)分為模型組、辛伐他汀組、通心絡(luò)膠囊高、中、低劑量組5組,分別給予辛伐他汀及不同劑量的通心絡(luò)膠囊進(jìn)行干預(yù),另選8只同系的小鼠作為正常對(duì)照組。通過(guò)對(duì)TC、TG、HDL-C、LDL-C等指標(biāo)變化,模型組小鼠心肌、冠狀動(dòng)脈斑塊、主動(dòng)脈斑塊病理組織學(xué)變化及血清TXB2、6-Keto-PGF1α、ET、CEC、MMP1、MMP9和TIMP-1水平的觀察、比較,分析通心絡(luò)膠囊對(duì)ApoE（-/-）小鼠血脂的調(diào)節(jié)作用和對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的影響作用及機(jī)理。4.描述性統(tǒng)計(jì)分析,定性指標(biāo)以頻數(shù)表,百分率或構(gòu)成比描述;定量指標(biāo)以均數(shù),標(biāo)準(zhǔn)差描述。兩組對(duì)比分析,定性資料采用卡方檢驗(yàn),Fisher精確概率法,Wilcoxon秩和檢驗(yàn),CMHx2檢驗(yàn);定量資料符合正態(tài)分布用t檢驗(yàn)（組間進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),以0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn),方差不齊時(shí)選用Satterthwaite方法進(jìn)行校正的t檢驗(yàn)）,不符合正態(tài)分布用Wilcoxon秩和檢驗(yàn),Wilcoxon符號(hào)秩和檢驗(yàn)。假設(shè)檢驗(yàn)統(tǒng)一使用雙側(cè)檢驗(yàn),給出檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量及其對(duì)應(yīng)的P值。以P≤0.05作為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,以P≤0.01作為有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上統(tǒng)計(jì)分析均用SAS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。結(jié)果:1.118例CHD患者共檢出E2/2、E3/3、E4/4三種純合子和E2/3、E2/4、E3/4三種雜合子,且ApoE基因表型以E3/3純合子占大多數(shù),E2/2純合子最低;CHD組攜帶的E2/4、E3/4、E4/4三種基因型頻率較對(duì)照組有增加的趨勢(shì),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=5.004,P＜0.05）;而E3/3基因型其頻率較對(duì)照組則有減少的趨勢(shì),差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=6.8743,P＜0.01）。123例對(duì)照組中,等位基因分布頻率則以ε3最高,占到74.39%。通過(guò)比較,CHD組ε3等位基因分布頻率明顯低于對(duì)照組（X2=9.2898,P＜0.05）,而ε4等位基因分布頻率則明顯高于對(duì)照組（X2=13.927,P＜0.01）,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.118例入選的CHD患者,根據(jù)辨證分型標(biāo)準(zhǔn),共分為以下6型:寒凝心脈證13例（占總例數(shù)的11.02%,以下同）,痰濁閉阻證29例（24.58%）,心血瘀阻證33例（27.96%）,心腎陰虛證11例（9.32%）,氣陰兩虛證27例（22.88%）,陽(yáng)氣虛衰證5例（4.24%）。3.118例入選的CHD患者不同中醫(yī)證型檢出的基因表型比例不一,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析可以看出:5例E2/2基因表型中僅見2例寒凝心脈證,痰濁閉阻證、心腎陰虛證、陽(yáng)氣虛衰證各1例;16例E2/3基因表型中以心血瘀阻證、痰濁閉阻證、氣陰兩虛證為主,占該基因表型的75.0%;56例E3/3基因表型中心腎陰虛證、陽(yáng)氣虛衰證最少,僅占該基因表型的14.28%,而心血瘀阻證、痰濁閉阻證、氣陰兩虛證最多,占75.00%;E3/4基因表型中心血瘀阻證、氣陰兩虛證比例相對(duì)較高,占該基因表型的52.94%;E4/4基因表型中也以心血瘀阻證和氣陰兩虛證為多,分別占該基因型的50.00%和43.75%。參照國(guó)內(nèi)外丈獻(xiàn)常將意義相近的基因表型合并分析的情況,我們也將E2/2基因表型和E2/3基因表型合并,E2/4、E3/4基因表型和E4/4基因表型合并,再與E3/3基因表型一起進(jìn)行分析,結(jié)果表明:E2/4+E3/4+E4/4型中心血瘀阻證、痰濁閉阻證、氣陰兩虛證所占比例最高,為82.93%;其次是E3/3型中心血瘀阻證、痰濁閉阻證、氣陰兩虛證所占比例為75.00%;最低是E2/2+E2/3型中心血瘀阻證、痰濁閉阻證、氣陰兩虛證所占比例為61.90%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析可以看出,E2/4+E3/4+E4/4型中:痰濁閉阻證、心血瘀阻證、氣陰兩虛證相互比較P＞0.05,痰濁閉阻證、心血瘀阻證、氣陰兩虛證三種證型與寒凝心脈證、心腎陰虛組證、陽(yáng)氣虛衰證三種證型比較P＜0.05,說(shuō)明CHD的主要證型為心血瘀阻證、痰濁閉阻證、氣陰兩虛證。通過(guò)對(duì)CHD組不同中醫(yī)證型ApoE等位基因頻率比較,則發(fā)現(xiàn):心血瘀阻證、氣陰兩虛證二種證型ε4等位基因頻率明顯高于寒凝心脈證、痰濁閉阻證、心腎陰虛證、陽(yáng)氣虛衰證四種證型（p＜0.05）;ε3等位基因頻率不同中醫(yī)證型間則大致相等;ε2等位基因頻率不同中醫(yī)證型間心血瘀阻證較低,而寒凝心脈證、心腎陰虛證、陽(yáng)氣虛衰證較高。4.ApoE多態(tài)性對(duì)通心絡(luò)膠囊干預(yù)CHD療效的影響方面:治療組改善中醫(yī)證型療效優(yōu)于對(duì)照組,p＜0.05。ε2、ε3、ε4各等位基因療后氣陰兩虛證、痰濁閉阻證、心血瘀阻證均有明顯改善（p＜0.05）,痰濁閉阻證的癥狀積分降低改善率最高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）,其它各基因型間的氣陰兩虛證及心血瘀阻證改善率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。治療組ε4型對(duì)于中藥治療改善痰濁閉阻證療效最好,優(yōu)于ε2、ε3型;對(duì)照組,各等位基因?qū)τ跉怅巸商撟C、痰濁閉阻證、心血瘀阻證的癥狀積分改善率,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P＞0.05;兩組組內(nèi)同基因型療前后自身比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P＜0.05。治療組與對(duì)照組組內(nèi)各不同基因型比較,TC、LDL-C降低和HDL-C升高的改善率,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P＜0.05;TG降低的改善率,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P＞0.05,提示兩組各基因型對(duì)于TC、LDL-C降低和HDL-C升高均有療效,而對(duì)TG的療效影響無(wú)差異。治療組與對(duì)照組組間各相同基因型間療前后改善率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P＞0.05,說(shuō)明兩組各相同基因型對(duì)于藥物調(diào)脂反應(yīng)相同。5.動(dòng)物實(shí)驗(yàn),首先造模成功,然后從以下三方面進(jìn)行了研究:①通心絡(luò)膠囊對(duì)ApoE（-/-）小鼠血脂的影響:模型組血清TC、TG和LDL-C均明顯增高,HDL-C水平下降,與正常組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）。通心絡(luò)膠囊中、高劑量組小鼠的血清TC,TG和LDL-C均明顯低于模型組,與模型組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05或P＜0.01）。通心絡(luò)膠囊中、高劑量組小鼠的血清HDL-C水平高于模型組,與模型組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。低劑量組小鼠的血清TC、TG、LDL-C及HDL-C水平與模型組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。②通心絡(luò)膠囊對(duì)ApoE（-/-）小鼠小鼠AS的影響:實(shí)驗(yàn)顯示通心絡(luò)膠囊對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的形成有一定的抑制作用,其中以高劑量組效果最好,其作用強(qiáng)于中劑量組、低劑量組。模型組所有小鼠冠狀動(dòng)脈病變主要位于心肌內(nèi)的小分支,動(dòng)脈主干及大分支未見明顯病變,CHD評(píng)分4.0±1.76;辛伐他汀組冠狀血管及肝臟病變較模型組減輕,CHD評(píng)分為2.3±1.16;通心絡(luò)低劑量組CHD評(píng)分為3.8±2.35,中劑量組CHD評(píng)分為3.0±1.25,高劑量組評(píng)分為1.7±2.06。不同組AS比較可見,通心絡(luò)低劑量組與模型組間在AS心肌細(xì)胞變性壞死,心肌間質(zhì)炎癥、水腫,冠狀動(dòng)脈心內(nèi)分支管壁脂質(zhì)變性程度及管周脂質(zhì)沉積等方面比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）,而辛伐他汀組和通心絡(luò)中劑量組在這些方面與模型組卻有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）,通心絡(luò)高劑量組則有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。實(shí)驗(yàn)顯示:通心絡(luò)膠囊對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的形成有一定的抑制作用,其中以高劑量組效果最好,其作用強(qiáng)于中劑量組、低劑量組。通心絡(luò)膠囊防治小鼠主動(dòng)脈粥樣硬化有一定的減輕作用,但各劑量組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③通心絡(luò)膠囊干預(yù)ApoE（-/-）小鼠冠狀動(dòng)脈粥樣硬化形成機(jī)理的研究:通心絡(luò)膠囊干預(yù)ApoE（-/-）小鼠后,通心絡(luò)高、中、低劑量組和辛伐他汀組與模型組相比,血清TXB2、6-Keto-PGF1α含量差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;但是,模型組ApoE（-/-）小鼠血清TXB2、6-Keto-PGF1α含量高于正常組,與正常組相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。模型組小鼠血清ET含量高于正常組,與正常組相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;通心絡(luò)膠囊三個(gè)劑量組小鼠血清ET含量均低于模型組,與之相比,有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通心絡(luò)高劑量組在造模后第4、8、12周血中CEC均低于模型組,與模型組相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）,而通心絡(luò)中劑量組在造模后第4周和12周時(shí)血中CEC與模型組相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）,表明通心絡(luò)膠囊可干預(yù)高血脂對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷作用。通心絡(luò)高劑量組小鼠血清MMP1和MMP9水平均低于模型組,而TIMF-1水平高于模型組,與模型組相比,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。通心絡(luò)中、低劑量組小鼠血清MMP9水平低于模型組,與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。表明通心絡(luò)膠囊有抑制實(shí)驗(yàn)性脂質(zhì)紊亂及動(dòng)脈硬化小鼠血清MMP1和MMP9活性作用。結(jié)論:1.CHD的主要證型為心血瘀阻證、痰濁閉阻證、氣陰兩虛證。2.ε4基因是CHD的易感等位基因,是CHD發(fā)生的重要遺傳易患因素,并可能與CHD患者心臟事件的的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān);密切關(guān)注ε4等位基因攜帶者的血脂水平,進(jìn)行積極針對(duì)性地干預(yù),將有利于防止或延緩冠心病的發(fā)生和發(fā)展。3.ε3等位基因可視為CHD發(fā)生的保護(hù)基因。4.CHD的主要基本證型心血瘀阻證、痰濁閉阻證、氣陰兩虛證與ApoE E3/4、E4/4基因表型及ε4等位基因密切相關(guān)。ApoE基因多態(tài)性、血脂水平與CHD之間存在因果關(guān)系,ApoE不同基因型可通過(guò)血脂代謝作用而影響CHD的發(fā)病。5.通心絡(luò)膠囊干預(yù)CHD總療效顯著;ApoE多態(tài)性對(duì)通心絡(luò)膠囊干預(yù)CHD不同中醫(yī)證型的療效均具有影響,但對(duì)氣陰兩虛證、痰濁閉阻證、心血瘀阻證具有明顯療效,尤以ε4等位基因的痰濁閉阻證療效最為顯著;對(duì)于TC、LDL-C降低和HDL-C升高均有顯著療效。6.通心絡(luò)膠囊可干預(yù)ApoE（-/-）小鼠血脂水平,并對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷、內(nèi)皮功能和炎癥因子的抑制有調(diào)節(jié)作用,從而有利于調(diào)節(jié)血脂、減輕冠狀A(yù)S。7.在人群中進(jìn)行ApoE基因多態(tài)性檢測(cè),對(duì)CHD的早期預(yù)防、監(jiān)測(cè)和積極地針對(duì)性治療均有較為重要的意義。8.臨床上中醫(yī)藥辨證論治可以有效改善CHD患者癥狀,提高臨床療效。

二、有氧運(yùn)動(dòng)和膳食脂肪對(duì)ApoE基因缺陷小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成過(guò)程中SR-B1基因及蛋白表達(dá)的影響（論文開題報(bào)告）

（1）論文研究背景及目的

此處內(nèi)容要求：

首先簡(jiǎn)單簡(jiǎn)介論文所研究問(wèn)題的基本概念和背景，再而簡(jiǎn)單明了地指出論文所要研究解決的具體問(wèn)題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點(diǎn)或解決方法。

寫法范例：

本文主要提出一款精簡(jiǎn)64位RISC處理器存儲(chǔ)管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過(guò)程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲(chǔ)器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁(yè)面大小,采用多級(jí)分層頁(yè)表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級(jí)頁(yè)表轉(zhuǎn)換過(guò)程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲(chǔ)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。

（2）本文研究方法

調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對(duì)象的具體信息。

觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對(duì)象從而得到有關(guān)信息。

實(shí)驗(yàn)法：通過(guò)主支變革、控制研究對(duì)象來(lái)發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。

文獻(xiàn)研究法：通過(guò)調(diào)查文獻(xiàn)來(lái)獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。

實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。

定性分析法：對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。

定量分析法：通過(guò)具體的數(shù)字，使人們對(duì)研究對(duì)象的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步精確化。

跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對(duì)某一課題進(jìn)行研究。

功能分析法：這是社會(huì)科學(xué)用來(lái)分析社會(huì)現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。

模擬法：通過(guò)創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來(lái)間接研究原型某種特性的一種形容方法。

三、有氧運(yùn)動(dòng)和膳食脂肪對(duì)ApoE基因缺陷小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成過(guò)程中SR-B1基因及蛋白表達(dá)的影響（論文提綱范文）

（1）動(dòng)脈粥樣硬化誘發(fā)的海馬代謝異常影響突觸可塑相關(guān)蛋白表達(dá)的機(jī)制及運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用（論文提綱范文）

（2）Phactr1缺乏通過(guò)促進(jìn)M1巨噬細(xì)胞極化和泡沫細(xì)胞形成促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展（論文提綱范文）

（3）艾灸及艾煙調(diào)節(jié)Rho/ROCK信號(hào)通路干預(yù)ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制研究（論文提綱范文）

（4）有氧運(yùn)動(dòng)通過(guò)調(diào)控miR-21a誘導(dǎo)的靶基因表達(dá)改善高脂血癥（論文提綱范文）

（5）艾灸及艾煙改善動(dòng)脈粥樣硬化的細(xì)胞自噬機(jī)制研究（論文提綱范文）

（6）有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性及基質(zhì)金屬蛋白酶，IL-6水平的影響（論文提綱范文）

（7）運(yùn)動(dòng)與動(dòng)脈粥樣硬化研究的動(dòng)物模型質(zhì)量思考與分析（論文提綱范文）

（8）耐力訓(xùn)練影響ApoE-/-小鼠炎癥因子表達(dá)與AS防治機(jī)制研究（論文提綱范文）

（9）有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)ApoE基因缺陷小鼠AS形成中脂聯(lián)素mRNA表達(dá)的影響（論文提綱范文）

（10）載脂蛋白E基因多態(tài)性與冠心病中醫(yī)證型的關(guān)系及通心絡(luò)膠囊干預(yù)的臨床與實(shí)驗(yàn)研究（論文提綱范文）

四、有氧運(yùn)動(dòng)和膳食脂肪對(duì)ApoE基因缺陷小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成過(guò)程中SR-B1基因及蛋白表達(dá)的影響（論文參考文獻(xiàn)）

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• [4]有氧運(yùn)動(dòng)通過(guò)調(diào)控miR-21a誘導(dǎo)的靶基因表達(dá)改善高脂血癥[D]. 王亞鑫. 山西大學(xué), 2020(01)
• [5]艾灸及艾煙改善動(dòng)脈粥樣硬化的細(xì)胞自噬機(jī)制研究[D]. 哈略. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2020(04)
• [6]有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性及基質(zhì)金屬蛋白酶，IL-6水平的影響[D]. 張栩. 山東大學(xué), 2011(06)
• [7]運(yùn)動(dòng)與動(dòng)脈粥樣硬化研究的動(dòng)物模型質(zhì)量思考與分析[J]. 袁凌燕,陸愛云. 中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志, 2009(03)
• [8]耐力訓(xùn)練影響ApoE-/-小鼠炎癥因子表達(dá)與AS防治機(jī)制研究[D]. 劉善云. 河北師范大學(xué), 2008(12)
• [9]有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)ApoE基因缺陷小鼠AS形成中脂聯(lián)素mRNA表達(dá)的影響[D]. 吳衛(wèi)東. 河北師范大學(xué), 2008(01)
• [10]載脂蛋白E基因多態(tài)性與冠心病中醫(yī)證型的關(guān)系及通心絡(luò)膠囊干預(yù)的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[D]. 韓旭. 南京中醫(yī)藥大學(xué), 2008(12)

標(biāo)簽：動(dòng)脈硬化癥論文;  血脂異常論文;  血清蛋白論文;  血脂檢查論文;  基因合成論文;