一、細(xì)胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因的檢測(cè)（論文文獻(xiàn)綜述）
孫嘉慧[1]（2020）在《病原菌及其耐藥性的快速檢測(cè)及藥物組合優(yōu)化抑制》文中研究表明細(xì)菌污染會(huì)導(dǎo)致許多嚴(yán)重的疾病,時(shí)刻威脅著人類的生存和發(fā)展。尤其是日益嚴(yán)重的細(xì)菌耐藥問(wèn)題,不僅造成了很大的公共衛(wèi)生威脅還給國(guó)家?guī)?lái)了巨大的財(cái)政負(fù)擔(dān)。細(xì)菌污染不僅是發(fā)展中國(guó)家面臨的主要問(wèn)題,也是發(fā)達(dá)國(guó)家面臨的主要問(wèn)題?？咕幬锏膹V泛應(yīng)用甚至是濫用導(dǎo)致細(xì)菌耐藥問(wèn)題日益突出,不僅會(huì)產(chǎn)生多重耐藥細(xì)菌,而且還會(huì)使大量有效的抗菌藥物失效,致使臨床無(wú)藥可用。誠(chéng)如2011年世界衛(wèi)生組織所言“遏制細(xì)菌耐藥——今天不行動(dòng),明天就無(wú)藥可用”。細(xì)菌檢測(cè)是制定高效治療方案延緩細(xì)菌耐藥進(jìn)程的第一步,因此找到一種方便、快捷、低成本且準(zhǔn)確度高的細(xì)菌感染快速檢測(cè)手段就顯得非常重要。這樣不僅可有效降低在環(huán)境、醫(yī)療、食品領(lǐng)域細(xì)菌感染的風(fēng)險(xiǎn),還可以為后續(xù)的治療提供依據(jù),指導(dǎo)臨床合理用藥。然而目前的方法無(wú)論是平板培養(yǎng)、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、表面等離子體共振（SPR）、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）、表面增強(qiáng)拉曼散射（SERS）、質(zhì)譜等都無(wú)法滿足日益嚴(yán)峻的檢測(cè)需求,因此進(jìn)一步優(yōu)化檢測(cè)手段,實(shí)現(xiàn)細(xì)菌及多重耐藥細(xì)菌的快速高效檢測(cè)迫在眉睫。同時(shí)在檢測(cè)的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步尋求合理快速的細(xì)菌耐藥解決方案也需提上日程。抗生素聯(lián)合治療是應(yīng)對(duì)抗生素功效下降和減輕耐藥性發(fā)生的主流方法之一。通過(guò)以不同的劑量組合多種無(wú)效的抗生素,依靠藥物間的協(xié)同作用可以恢復(fù)療效,甚至可以帶來(lái)更好的治療效果。因此,快速尋找有效組合對(duì)于提高臨床治療效果并降低患者治療費(fèi)用非常重要。但抗生素的相互作用機(jī)制和對(duì)耐藥細(xì)菌的殺傷作用是系統(tǒng)的、復(fù)雜的。單純基于細(xì)菌作用機(jī)制下的聯(lián)合用藥指導(dǎo)已不能滿足日益迫切的細(xì)菌耐藥的需求。同時(shí),抗生素的大量存在,也給聯(lián)合用藥的藥物選擇造成了困難。面對(duì)成百上千的抗生素,我們無(wú)法對(duì)每一個(gè)潛在組合進(jìn)行探究,同時(shí)在不增加劑量和生物毒性的前提下,找到最優(yōu)的組合進(jìn)行治療。并且繁雜的組合優(yōu)化實(shí)驗(yàn)和藥物篩選手段,也減緩了發(fā)現(xiàn)具有協(xié)同作用抗生素可能的進(jìn)程。面對(duì)這么一個(gè)復(fù)雜系統(tǒng),我們應(yīng)該更加合理的選擇抗生素,更加高效快捷的找到藥效強(qiáng)、劑量小的最優(yōu)的抗生素組合?；谝陨蠁?wèn)題,本論文進(jìn)行了如下研究:1)設(shè)計(jì)了基于酶促抑制反應(yīng)的細(xì)菌快速?gòu)V譜檢測(cè)試紙。利用細(xì)菌代謝實(shí)現(xiàn)了對(duì)活細(xì)菌的快速?gòu)V譜檢測(cè)。本方法無(wú)需任何復(fù)雜外部?jī)x器,通過(guò)顏色變化便可判定結(jié)果。通過(guò)實(shí)現(xiàn)對(duì)五種臨床常見細(xì)菌的檢測(cè),證明了此方法的可行性。同時(shí)此方法對(duì)活菌的檢測(cè)具有特異性,只需幾微升樣本就能在20分鐘內(nèi)完成檢測(cè)。最終通過(guò)實(shí)現(xiàn)對(duì)腹腔感染小鼠腹水細(xì)菌含量的檢測(cè),驗(yàn)證了方法的實(shí)際應(yīng)用性。2)實(shí)現(xiàn)了基于對(duì)苯醌介導(dǎo)的大腸桿菌鑒定及其細(xì)菌耐藥性的檢測(cè)。通過(guò)將對(duì)苯醌作為氧化還原介質(zhì),開發(fā)了一種簡(jiǎn)單且高效的比色法和電化學(xué)聯(lián)合的生物測(cè)定方法,用來(lái)分析大腸桿菌的存在及其相對(duì)耐藥性水平。本方法可以從四種臨床常見細(xì)菌中特異性檢測(cè)出大腸桿菌,檢測(cè)下限為1.0×103 CFU/m L。同時(shí)通過(guò)實(shí)現(xiàn)對(duì)不同耐藥性的大腸桿菌的檢測(cè),證明了本方法對(duì)耐藥性檢測(cè)的可行性。3)實(shí)現(xiàn)了利用算法的大規(guī)模組合抗生素的優(yōu)化篩選。應(yīng)對(duì)大規(guī)模組合藥物篩選的難題,研發(fā)了一款新的大規(guī)模藥物組合優(yōu)化算法,實(shí)現(xiàn)了針對(duì)多重耐藥菌的抗生素組合優(yōu)化篩選。通過(guò)算法優(yōu)化,僅僅通過(guò)兩輪實(shí)驗(yàn),120個(gè)測(cè)試組合,就從26種失效抗生素上億個(gè)可能組合中,成功篩選出能抑制耐藥細(xì)菌生長(zhǎng)的優(yōu)化組合,為治療耐藥細(xì)菌提供了一種可行的方案。4)設(shè)計(jì)了基于微流控技術(shù)的藥物篩選和藥物組合優(yōu)化芯片。為了實(shí)現(xiàn)快速高效的組合藥物的篩選,解決傳統(tǒng)藥物篩選費(fèi)時(shí)費(fèi)力的問(wèn)題。利用微流體中液體層流擴(kuò)散的性質(zhì),設(shè)計(jì)了一款藥物組合篩選芯片,實(shí)現(xiàn)了芯片上的藥物濃度篩選和藥物組合優(yōu)化,為藥物的篩選提供了一種便捷可行的實(shí)驗(yàn)方法。綜上所述,面對(duì)愈發(fā)嚴(yán)重的細(xì)菌耐藥問(wèn)題,本論文首先提出了兩種細(xì)菌快速檢測(cè)的新手段;之后設(shè)計(jì)了大規(guī)模藥物組合篩選算法,實(shí)現(xiàn)了抗生素組合的快速篩選,來(lái)抑制多重耐藥細(xì)菌;最后通過(guò)微流控芯片實(shí)現(xiàn)了藥物組合篩選的個(gè)性化和自動(dòng)化?？傊?本論文從檢測(cè)到治療,再到優(yōu)化篩選手段,層層遞進(jìn),提出了一套完善的細(xì)菌耐藥解決方案。
葛玉梅,胡慶豐,朱永澤,周永列,呂火烊[2]（2017）在《龜頭包皮炎患者淋病奈瑟菌分離與鑒定及其耐藥機(jī)制研究》文中提出目的分離鑒定龜頭化膿性包皮炎病原菌,檢測(cè)分離菌株耐藥性并了解其耐藥機(jī)制。方法采取尿道分泌物及龜頭膿包液標(biāo)本,革蘭染色鏡檢并采用Mycoplasma IST 2試劑盒檢測(cè)支原體。上述標(biāo)本接種哥倫比亞血平板、淋病奈瑟菌選擇平板、酵母菌鑒定平板進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng),獲得的菌落用VITEK 2-compact全自動(dòng)細(xì)菌檢測(cè)分析系統(tǒng)進(jìn)行鑒定,另采用PCR檢測(cè)上述標(biāo)本及菌落的淋病奈瑟菌16SrRNA基因。采用K-B法檢測(cè)分離菌株對(duì)5種常用抗生素的敏感性,采用β-內(nèi)酰胺酶和超廣譜β-內(nèi)酰胺酶確證試驗(yàn)了解該菌株產(chǎn)酶情況,PCR檢測(cè)該菌株耐藥相關(guān)tetM、TEM、mefA和ermF基因。結(jié)果各標(biāo)本支原體檢測(cè)結(jié)果均為陰性。尿道分泌物標(biāo)本分離培養(yǎng)結(jié)果均為陰性,龜頭膿包液血平板和選擇平板培養(yǎng)結(jié)果為陽(yáng)性。VITEK 2-compact系統(tǒng)和16SrRNA-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示分離菌株為淋病奈瑟菌。該菌株產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶且對(duì)青霉素G、環(huán)丙沙星、四環(huán)素耐藥,其基因組攜帶tetM、TEM、mefA和ermF基因。結(jié)論淋病奈瑟菌可引起龜頭化膿性包皮炎,該淋病奈瑟菌菌株多重耐藥并與其攜帶的耐藥基因密切相關(guān)。
魏榮旋,趙慶,王和[3]（2010）在《細(xì)胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因酶切圖譜分析》文中提出目的探討細(xì)胞壁缺陷對(duì)淋病奈瑟菌隱蔽性質(zhì)粒B（cppB）基因的影響以及細(xì)胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB的變異特點(diǎn)。方法用青霉素誘導(dǎo)淋病奈瑟菌成為細(xì)胞壁缺陷型并獲得其純培養(yǎng)物,cppB基因特異性引物PCR檢測(cè)細(xì)胞壁缺陷型純培養(yǎng)物的cppB基因,并對(duì)其cppB基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行限制性核酸內(nèi)切酶圖譜分析。結(jié)果細(xì)菌型和細(xì)胞壁缺陷型均具有cppB基因擴(kuò)增產(chǎn)物,經(jīng)過(guò)限制性內(nèi)切酶HindⅢ、HinfⅠ、HpaⅡ和MspⅠ消化和電泳,在5%PAGE凝膠電泳中,呈現(xiàn)出相同的電泳條帶。結(jié)論淋病奈瑟菌細(xì)菌型及其細(xì)胞壁缺陷型對(duì)cppB基因限制性核酸內(nèi)切酶（HindⅢ、HinfⅠ、MspⅠ、HpaⅡ）的分析沒有發(fā)現(xiàn)淋病奈瑟菌L型具有與其親代細(xì)菌型不同的圖譜,提示細(xì)胞壁缺陷沒有導(dǎo)致淋病奈瑟菌的cppB基因發(fā)生這些核酸酶切位點(diǎn)中核苷酸序列的改變。
田從魁,崔承彬,李長(zhǎng)偉[4]（2010）在《細(xì)胞壁通透性調(diào)控在真菌菌株選育中的應(yīng)用》文中研究指明真菌細(xì)胞壁作為小分子進(jìn)出細(xì)胞的第一道屏障有其特殊性。通過(guò)物理或化學(xué)方法使細(xì)胞壁部分或完全喪失生理功能來(lái)調(diào)控其通透性并結(jié)合現(xiàn)有的生物技術(shù)進(jìn)行真菌菌株選育是1種新的菌株選育思路。本文主要綜述調(diào)控真菌細(xì)胞壁的方法并結(jié)合已有研究結(jié)果討論其在真菌菌株選育中的應(yīng)用。
李雪瑩,唐立[5]（2007）在《微生態(tài)學(xué)方法學(xué)的研究進(jìn)展》文中認(rèn)為
易旭,王和[6]（2006）在《細(xì)胞壁缺陷對(duì)白喉棒狀桿菌Tox基因影響》文中提出目的探討細(xì)胞壁缺陷對(duì)白喉棒狀桿菌毒力基因及其表達(dá)的影響。方法以非高滲分離培養(yǎng)法誘導(dǎo)并獲得產(chǎn)毒性白喉棒狀桿菌穩(wěn)定L型純培養(yǎng)物,提取白喉棒狀桿菌穩(wěn)定L型的染色體DNA,用Tox基因特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并進(jìn)行序列測(cè)定和分析。分別采用對(duì)流免疫電泳（CIEP）和十二烷基磺酸鈉-不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）檢測(cè)白喉棒狀桿菌穩(wěn)定L型可溶性代謝產(chǎn)物中的白喉毒素蛋白質(zhì)。結(jié)果白喉棒狀桿菌在氨芐青霉素作用下可發(fā)生細(xì)胞壁缺陷而成為L(zhǎng)型,該穩(wěn)定L型的傳代培養(yǎng)物可仍然保留同其親代細(xì)菌型一致的Tox基因及其核苷酸序列;但在其可溶性代謝產(chǎn)物中并未檢測(cè)到白喉毒素蛋白質(zhì)。結(jié)論白喉棒狀桿菌穩(wěn)定L型雖然保留了Tox基因但并不能表達(dá)白喉毒素蛋白質(zhì),提示細(xì)胞壁缺陷可影響Tox基因在宿主菌細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。
王強(qiáng)[7]（2006）在《雞IGF-I基因PCR-SSCP分析及其與肉用性狀關(guān)系的研究》文中研究表明胰島素樣生長(zhǎng)因子-I（IGF-1）是動(dòng)物體內(nèi)重要的調(diào)節(jié)因子之一,因此,研究雞的IGF-1基因多態(tài)性與其重要經(jīng)濟(jì)性狀間的關(guān)系,使得IGF-1基因越來(lái)越受到重視,并被作為一個(gè)重要的候選基因進(jìn)行研究。目前,對(duì)IGF-1多態(tài)性的研究主要是采用PCR-RFLP技術(shù),由于酶切技術(shù)可能會(huì)存在有些序列不能被限制性內(nèi)切酶所識(shí)別,而導(dǎo)致其檢測(cè)受到限制。相反,PCR-SSCP技術(shù)能夠更加靈活的應(yīng)用于SNPs的檢測(cè)、篩選。本實(shí)驗(yàn)對(duì)新?lián)P州雞（130只）、雪山雞（100只）和萊航雞（47只）的IGF-1基因進(jìn)行了PCR-SSCP多態(tài)性檢測(cè);并結(jié)合測(cè)序驗(yàn)證。對(duì)設(shè)計(jì)的引物進(jìn)行了PCR擴(kuò)增和電泳檢測(cè)最優(yōu)條件的探索,建立和完善了特定位點(diǎn)的PCR-SSCP檢測(cè)方法。建立統(tǒng)計(jì)分析模型,應(yīng)用GLM過(guò)程對(duì)新?lián)P州雞部分生長(zhǎng)和屠宰性狀進(jìn)行分析。本論文得到的結(jié)論如下:1.本實(shí)驗(yàn)確立了檢測(cè)雞胰島素樣生長(zhǎng)因子I（IGF-I）基因5’-UTR、Exon1和3’-UTR的最佳PCR-SSCP方法。并在新?lián)P州雞、雪山雞和萊航雞共發(fā)現(xiàn)了四個(gè)多態(tài)位點(diǎn);分別為:23F/R、26F/R、28F/R和29F/R。2.對(duì)多態(tài)位點(diǎn)進(jìn)行基因型頻率和基因頻率以及基因型分布分析,其結(jié)果:新?lián)P州雞23F/R等位基因A頻率:0.8038,等位基因B頻率:0.1962;28F/R等位基因A頻率:0.3846,等位基因B頻率:0.6154。雪山雞等位基因頻率為:26F/R A:0.8200,B:0.1800;28F/R A:0.3819,B:0.6181;經(jīng)基因型分布卡方檢驗(yàn),發(fā)現(xiàn)新?lián)P州雞上的兩個(gè)多態(tài)位點(diǎn)處于哈代-溫伯格平衡（P=0.929、P=0.966）,雪山雞不處于哈代-溫伯格平衡（P=0.002、P=0.112）,并發(fā)現(xiàn)多態(tài)位點(diǎn)存在品種分布差異。3.對(duì)存在多態(tài)的4個(gè)座位PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序,測(cè)序結(jié)果顯示在IGF-I存在插入突變G（23F/R）和同義替換C→G（28F/R）;可能涉及T→C（26F/R）和C→A（29F/R）。4.在早期體重方面,23F/R基因型中,二周齡體重BB型與AB型差異顯著（P<0.05）,但AA型與AB型和BB型均不顯著（P>0.05）;在十二周齡,BB型對(duì)AA型型在龍骨長(zhǎng)上,接近差異顯著水平（P=0.068）。而28F/R基因型中在十二周齡體
余華,王和[8]（2004）在《細(xì)胞壁缺陷結(jié)核分枝桿菌IS986序列的檢測(cè)與分析》文中提出
魏榮旋,王和[9]（2003）在《聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)型多態(tài)性檢測(cè)細(xì)胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因變異》文中研究指明目的 :檢測(cè)與分析淋病奈瑟菌 L 型的 cpp B基因 ,探討細(xì)胞壁缺陷對(duì)淋病奈瑟菌 cpp B基因的影響。方法 :用青霉素誘導(dǎo)淋病奈瑟菌成為 L 型并獲得穩(wěn)定 L 型純培養(yǎng)物 ,用 cpp B基因特異性引物以聚合酶鏈反應(yīng) （PCR）檢測(cè)穩(wěn)定 L型純培養(yǎng)物的 cpp B基因和進(jìn)行單鏈構(gòu)型多態(tài)性 （SSCP）分析。結(jié)果 :淋病奈瑟菌的細(xì)菌型及其 L型都具有 cpp B基因擴(kuò)增產(chǎn)物 ,但 PCR-SSCP分析可見異常泳動(dòng) DNA帶型 （細(xì)菌型有 2條帶、L型有 3條帶 ）。結(jié)論 :細(xì)胞壁缺陷淋病奈瑟菌仍然具有 cpp B基因 ,但其堿基序列可以發(fā)生改變
魏榮旋,王和[10]（2003）在《cppB基因PCR檢測(cè)淋病奈瑟菌穩(wěn)定L型的評(píng)價(jià)》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理目的對(duì)淋病奈瑟菌隱蔽性質(zhì)粒B（crypticplasmidB ,cppB）基因用于淋病奈瑟菌穩(wěn)定L型基因診斷的評(píng)價(jià)。方法用非高滲液體培養(yǎng)基培養(yǎng)青霉素誘導(dǎo)形成和自發(fā)形成的淋病奈瑟菌穩(wěn)定L型 ,獲得純培養(yǎng)物以特異性cppB基因引物進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng) （PCR）檢測(cè)。結(jié)果淋病奈瑟菌細(xì)菌型可檢出cppB基因 ,但不論誘導(dǎo)形成還是自發(fā)形成的穩(wěn)定L型傳 5代后純培養(yǎng)物cppB基因檢測(cè)均為陰性反應(yīng)。結(jié)論細(xì)胞壁缺陷可導(dǎo)致淋病奈瑟菌cppB基因丟失 ,導(dǎo)致cppB基因鑒定淋病奈瑟菌的假陰性或診斷淋病的漏診和誤診
二、細(xì)胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因的檢測(cè)（論文開題報(bào)告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡(jiǎn)單簡(jiǎn)介論文所研究問(wèn)題的基本概念和背景，再而簡(jiǎn)單明了地指出論文所要研究解決的具體問(wèn)題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點(diǎn)或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡(jiǎn)64位RISC處理器存儲(chǔ)管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過(guò)程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲(chǔ)器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁(yè)面大小,采用多級(jí)分層頁(yè)表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級(jí)頁(yè)表轉(zhuǎn)換過(guò)程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲(chǔ)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對(duì)象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對(duì)象從而得到有關(guān)信息。
實(shí)驗(yàn)法：通過(guò)主支變革、控制研究對(duì)象來(lái)發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過(guò)調(diào)查文獻(xiàn)來(lái)獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。
定性分析法：對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過(guò)具體的數(shù)字，使人們對(duì)研究對(duì)象的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對(duì)某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會(huì)科學(xué)用來(lái)分析社會(huì)現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。
模擬法：通過(guò)創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來(lái)間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、細(xì)胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因的檢測(cè)（論文提綱范文）
（1）病原菌及其耐藥性的快速檢測(cè)及藥物組合優(yōu)化抑制（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 細(xì)菌感染與耐藥 |
| 1.1.1 細(xì)菌感染的危害 |
| 1.1.2 抗菌藥物的研究與發(fā)展 |
| 1.1.3 細(xì)菌耐藥現(xiàn)狀 |
| 1.1.4 細(xì)菌耐藥機(jī)制 |
| 1.2 細(xì)菌檢測(cè)與鑒定 |
| 1.2.1 微生物檢測(cè)在遏制細(xì)菌耐藥中的作用 |
| 1.2.2 細(xì)菌檢測(cè)常用方法 |
| 1.3 藥物聯(lián)合治療 |
| 1.3.1 藥物聯(lián)合治療的意義 |
| 1.3.2 藥物組合優(yōu)化的意義 |
| 1.3.3 藥物組合優(yōu)化的常用方法 |
| 1.4 基于微流控技術(shù)的藥物及藥物組合篩選手段研究 |
| 1.4.1 微流控技術(shù)的發(fā)展 |
| 1.4.2 微流控藥物篩選技術(shù) |
| 1.4.3 微流控技術(shù)在藥物篩選上的應(yīng)用 |
| 1.5 選題意義和研究思路 |
| 第二章 基于酶促抑制反應(yīng)的廣譜細(xì)菌快速檢測(cè)試紙 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 2.2.1 材料和設(shè)備 |
| 2.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)和預(yù)處理 |
| 2.2.3 葡萄糖與GOX的催化顯色反應(yīng)條件優(yōu)化 |
| 2.2.4 細(xì)菌檢測(cè)基本操作 |
| 2.2.5 腹腔感染小鼠樣本制備 |
| 2.2.6 數(shù)據(jù)處理方法 |
| 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 |
| 2.3.1 基于酶促抑制反應(yīng)的細(xì)菌快速檢測(cè)原理和驗(yàn)證 |
| 2.3.2 葡萄糖和GOX反應(yīng)體系優(yōu)化結(jié)果 |
| 2.3.3 廣譜細(xì)菌快速檢測(cè)與定量 |
| 2.3.4 混合細(xì)菌快速檢測(cè) |
| 2.3.5 檢測(cè)穩(wěn)定性測(cè)試 |
| 2.3.6 腹腔感染小鼠腹水檢測(cè)結(jié)果 |
| 2.4 本章小結(jié) |
| 第三章 基于對(duì)苯醌介導(dǎo)的大腸桿菌及其耐藥性檢測(cè) |
| 3.1 引言 |
| 3.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 3.2.1 材料和設(shè)備 |
| 3.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)和前處理 |
| 3.2.3 實(shí)驗(yàn)室人工誘導(dǎo)耐藥細(xì)菌 |
| 3.2.4 對(duì)苯醌濃度的優(yōu)化 |
| 3.2.5 大腸桿菌檢測(cè) |
| 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 |
| 3.3.1 原理及可行性分析 |
| 3.3.2 對(duì)苯醌濃度優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 3.3.3 大腸桿菌濃度的比色法及電化學(xué)檢測(cè)結(jié)果 |
| 3.3.4 特異性測(cè)試 |
| 3.3.5 耐藥型細(xì)菌檢測(cè) |
| 3.4 本章小結(jié) |
| 第四章 基于大規(guī)模藥物組合篩選算法的多重耐藥細(xì)菌抑制 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 4.2.1 材料和設(shè)備 |
| 4.2.2 數(shù)據(jù)處理 |
| 4.2.3 大腸桿菌菌株培養(yǎng)和抗生素的配制 |
| 4.2.4 大腸桿菌生長(zhǎng)曲線測(cè)試 |
| 4.2.5 最小抑制濃度測(cè)試 |
| 4.2.6 大腸桿菌耐藥性誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn) |
| 4.2.7 模擬驗(yàn)證 |
| 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 |
| 4.3.1 STRICT技術(shù)原理—基于因果的統(tǒng)計(jì)分析 |
| 4.3.2 基于STRICT的組合藥物篩選設(shè)計(jì) |
| 4.3.3 抗生素的選擇 |
| 4.3.4 多重耐藥細(xì)菌的誘導(dǎo) |
| 4.3.5 基于STRICT的組合抗生素篩選結(jié)果 |
| 4.3.6 STRICT模擬驗(yàn)證 |
| 4.4 本章小結(jié) |
| 第五章 基于微流控芯片技術(shù)的藥物組合快速篩選 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 5.2.1 材料和設(shè)備 |
| 5.2.2 細(xì)胞培養(yǎng) |
| 5.2.3 微流控芯片的設(shè)計(jì)與制作 |
| 5.2.4 COMSOL仿真模擬測(cè)試 |
| 5.2.5 微流控芯片濃度梯度量化 |
| 5.2.6 微流控芯片中細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)測(cè)試 |
| 5.2.7 芯片上藥物組合篩選 |
| 5.2.8 與96 孔板上細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)照 |
| 5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 |
| 5.3.1 微流控芯片的設(shè)計(jì)原理與COMSOL仿真結(jié)果 |
| 5.3.2 微流控芯片內(nèi)濃度梯度量化結(jié)果 |
| 5.3.3 微流控芯片內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況評(píng)估 |
| 5.3.4 微流控芯片藥物組合篩選結(jié)果 |
| 5.3.5 微流控芯片與96 孔板上細(xì)胞培養(yǎng)的比較 |
| 5.3.6 藥物相互作用的統(tǒng)計(jì)學(xué)定量分析 |
| 5.4 本章小結(jié) |
| 第六章 總結(jié)與展望 |
| 6.1 總結(jié) |
| 6.2 創(chuàng)新點(diǎn) |
| 6.3 展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 附錄1. 第四章第一次迭代數(shù)據(jù),26種抗生素,80種藥物優(yōu)化組合(0:0;1:0.5×MIC-_(50);2:0.5×MIC) |
| 附錄2. 第四章第二次迭代數(shù)據(jù),10種抗生素,40種藥物優(yōu)化組合(0:0;1:MIC20;2:MIC_(50);3:MIC) |
| 附錄3. 第四章第三次迭代數(shù)據(jù),5種抗生素,20種藥物優(yōu)化組合(ug/mL) |
| 附錄4. 第四章STRICT原始代碼 |
| 附錄5. 第五章不同濃度藥物作用下微室內(nèi)細(xì)胞存活率數(shù)據(jù)表 |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文 |
（2）龜頭包皮炎患者淋病奈瑟菌分離與鑒定及其耐藥機(jī)制研究（論文提綱范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 菌株來(lái)源及分離培養(yǎng) |
| 1.2 菌株鑒定 |
| 1.3 藥物敏感試驗(yàn) |
| 1.4 β-內(nèi)酰胺酶和超廣譜β-內(nèi)酰胺酶確證試驗(yàn) |
| 1.5 耐藥基因檢測(cè) |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 臨床標(biāo)本檢查結(jié)果 |
| 2.2 分離菌株生化反應(yīng)鑒定結(jié)果 |
| 2.3 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.4 β-內(nèi)酰胺酶及ESBLs確證試驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.5 tetM、TEM、mefA、ermF基因PCR檢測(cè)結(jié)果 |
| 3 討論 |
（4）細(xì)胞壁通透性調(diào)控在真菌菌株選育中的應(yīng)用（論文提綱范文）
| 1 真菌細(xì)胞壁的組成 |
| 2 真菌細(xì)胞壁的通透性調(diào)控 |
| 2.1 物理方法 |
| 2.1.1 機(jī)械研磨 |
| 2.1.2 超聲波 |
| 2.1.3 微波 |
| 2.1.4 其他物理方法 |
| 2.2 化學(xué)方法 |
| 2.2.1 作于細(xì)胞壁的藥物 |
| 2.2.2 有機(jī)溶劑 |
| 2.2.3 其他化學(xué)物質(zhì) |
| 2.3 生物方法 |
| 3 真菌菌株選育現(xiàn)狀 |
| 4 細(xì)胞壁通透性調(diào)控在真菌菌株選育中的應(yīng)用前景 |
| 5 討論與展望 |
（5）微生態(tài)學(xué)方法學(xué)的研究進(jìn)展（論文提綱范文）
| 1 色譜技術(shù) |
| 1.1 高效色譜技術(shù) |
| 1.2 氣相色譜分析法 |
| 2 電泳技術(shù) |
| 2.1 SDS-PAGE |
| 2.2 PCR-DGGE技術(shù) |
| 2.3 PCR-TGGE技術(shù) |
| 3 分子雜交技術(shù) |
| 3.1核酸探針 |
| 4 聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù) |
| 4.1 隨機(jī)引物聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) |
| 4.2 聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性銀染技術(shù) |
| 4.3 16S rRNA熒光定量PCR |
| 4.4 定量PCR技術(shù) |
| 5 生物芯片技術(shù) |
| 6 流式細(xì)胞技術(shù) |
| 7 激光共聚焦顯微鏡 |
| 8 DNA指紋圖法 |
| 9 重組DNA技術(shù) |
（6）細(xì)胞壁缺陷對(duì)白喉棒狀桿菌Tox基因影響（論文提綱范文）
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 結(jié) 果 |
| 2.1 白喉棒狀桿菌穩(wěn)定L型的生物學(xué)特性 |
| 2.2 白喉棒狀桿菌穩(wěn)定L型Tox基因PCR結(jié)果 |
| 2.3 白喉棒狀桿菌穩(wěn)定L型Tox基因擴(kuò)增片段核苷酸序列分析 |
| 2.4 白喉棒狀桿菌細(xì)菌型及其穩(wěn)定L型毒素蛋白質(zhì) |
| 3 討 論 |
（7）雞IGF-I基因PCR-SSCP分析及其與肉用性狀關(guān)系的研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 第一章 文獻(xiàn)綜述 |
| 1. 分子遺傳標(biāo)記 |
| 2. 單鏈構(gòu)象基因多態(tài)性的檢測(cè)方法——PCR-SSCP |
| 2.1 PCR-SSCP 方法的建立與發(fā)展 |
| 2.2 PCR-SSCP 方法的原理 |
| 2.3 PCR-SSCP 方法的特點(diǎn) |
| 2.4 PCR-SSCP 技術(shù)今后的發(fā)展趨勢(shì) |
| 2.5 PCR-SSCP 方法在單核苷酸多態(tài)性檢測(cè)的應(yīng)用 |
| 3 類胰島素樣生長(zhǎng)因子-I（IGF-1） |
| 3.1 禽類生長(zhǎng)軸 |
| 3.2 類胰島素樣生長(zhǎng)因子-I 的起源、主要功能和基本結(jié)構(gòu) |
| 3.3 IGF-1 在生物體內(nèi)的作用 |
| 3.4 IGF-1 基因在畜禽上的研究進(jìn)展 |
| 第二章雞 IGF-1 基因 PCR-SSCP 分析的研究 |
| 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/td> |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)器材及試劑 |
| 2.3 禽血紅細(xì)胞DNA樣的提取 |
| 2.4 引物設(shè)計(jì)與篩選 |
| 2.5 PCR擴(kuò)增與產(chǎn)物檢測(cè) |
| 2.6 PCR產(chǎn)物的SSCP分析 |
| 2.7 PCR產(chǎn)物的測(cè)序 |
| 3 統(tǒng)計(jì)方法的建立 |
| 3.1 基因頻率和基因型頻率的計(jì)算 |
| 4 結(jié)果與分析 |
| 4.1 血液中提取雞基因組DNA |
| 4.2 IGF-1 基因 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)果 |
| 4.3 PCR-SSCP檢測(cè)結(jié)果 |
| 4.4 基因頻率和基因型頻率的分析 |
| 4.5 IGF-1基因型的Hardy-Weinberg平衡定律檢驗(yàn) |
| 5 討論與結(jié)論 |
| 5.1 基因組DNA的提取 |
| 5.2 影響 PCR 反應(yīng)的因素 |
| 5.3 影響SSCP分析的因素 |
| 5.4 雞 IGF-I 基因突變情況 |
| 5.5 基因型分布檢驗(yàn) |
| 5.6 遺傳多態(tài)性分析 |
| 5.7 對(duì)IGF-1突變位點(diǎn)進(jìn)行蛋白質(zhì)分析 |
| 第三章 新?lián)P州雞IGF-1基因的多態(tài)性位點(diǎn)對(duì)其生長(zhǎng)、屠宰測(cè)定指標(biāo)相關(guān)性分析 |
| 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/td> |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 |
| 2.2 IGF-1基因多態(tài)性分析 |
| 2.3 主要儀器 |
| 2.4 生長(zhǎng)、屠宰指標(biāo) |
| 2.5 屠體指標(biāo)測(cè)定 |
| 2.6 肉質(zhì)測(cè)定 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 基因型與新?lián)P州雞早期發(fā)育分析 |
| 3.2 基因型與屠體各組成部分的關(guān)系 |
| 4 討論與小結(jié) |
| 4.1 突變位點(diǎn)基因型與新?lián)P州雞早期體重和龍骨、脛骨發(fā)育分析 |
| 4.2 突變位點(diǎn)基因型與新?lián)P州雞屠宰指標(biāo)分析 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 IGF-1基因內(nèi)含子1多態(tài)及序列分析初探 |
| 1 研究目的及意義 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 主要試劑及儀器 |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 |
| 2.3 基因組DNA的提取 |
| 2.4 引物設(shè)計(jì) |
| 2.5 PCR反應(yīng)程序的建立 |
| 2.6 PCR產(chǎn)物的初步鑒定及測(cè)序 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 PCR產(chǎn)物檢測(cè)與電泳結(jié)果 |
| 3.2 測(cè)序結(jié)果與分析 |
| 4 討論與結(jié)論 |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄 |
（9）聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)型多態(tài)性檢測(cè)細(xì)胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因變異（論文提綱范文）
| 1 材料與方法 |
| 1.1 菌種 |
| 1.2 培養(yǎng)基 |
| 1.3 誘導(dǎo)劑 |
| 1.4 PCR檢測(cè)試劑 |
| 1.5 L型誘導(dǎo) |
| 1.6 細(xì)菌型培養(yǎng) |
| 1.7 聚合酶鏈反應(yīng) |
| 1.8 單鏈構(gòu)型多態(tài)性(SSCP)分析[6] |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 淋病奈瑟菌L型 |
| 2.2 cppB基因的PCR |
| 2.3 cppB基因的PCR-SSCP |
| 3 討論 |
四、細(xì)胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因的檢測(cè)（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]病原菌及其耐藥性的快速檢測(cè)及藥物組合優(yōu)化抑制[D]. 孫嘉慧. 上海交通大學(xué), 2020(01)
- [2]龜頭包皮炎患者淋病奈瑟菌分離與鑒定及其耐藥機(jī)制研究[J]. 葛玉梅,胡慶豐,朱永澤,周永列,呂火烊. 中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào), 2017(05)
- [3]細(xì)胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因酶切圖譜分析[J]. 魏榮旋,趙慶,王和. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué), 2010(09)
- [4]細(xì)胞壁通透性調(diào)控在真菌菌株選育中的應(yīng)用[J]. 田從魁,崔承彬,李長(zhǎng)偉. 中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2010(05)
- [5]微生態(tài)學(xué)方法學(xué)的研究進(jìn)展[J]. 李雪瑩,唐立. 中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志, 2007(05)
- [6]細(xì)胞壁缺陷對(duì)白喉棒狀桿菌Tox基因影響[J]. 易旭,王和. 中國(guó)公共衛(wèi)生, 2006(12)
- [7]雞IGF-I基因PCR-SSCP分析及其與肉用性狀關(guān)系的研究[D]. 王強(qiáng). 揚(yáng)州大學(xué), 2006(04)
- [8]細(xì)胞壁缺陷結(jié)核分枝桿菌IS986序列的檢測(cè)與分析[J]. 余華,王和. 中華結(jié)核和呼吸雜志, 2004(05)
- [9]聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)型多態(tài)性檢測(cè)細(xì)胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因變異[J]. 魏榮旋,王和. 中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志, 2003(06)
- [10]cppB基因PCR檢測(cè)淋病奈瑟菌穩(wěn)定L型的評(píng)價(jià)[J]. 魏榮旋,王和. 貴州醫(yī)藥, 2003(01)
標(biāo)簽：細(xì)菌培養(yǎng)論文; 細(xì)菌細(xì)胞壁論文; 細(xì)菌結(jié)構(gòu)論文; 淋病論文; 基因型論文;