一、激光誘變微生物技術(shù)的研究進(jìn)展（論文文獻(xiàn)綜述）
孫瑩,王海曼,宋剛,葛菁萍[1]（2020）在《利用氦氖激光誘變提高枯草芽孢桿菌纖溶酶活力的研究》文中研究指明通過誘變篩選纖溶酶活性高的枯草芽孢桿菌菌株,得到突變株HDBF-N7HN5。使用氦氖激光誘變,設(shè)置不同的誘變時(shí)間,通過不同的蛋白平板處理,篩選高產(chǎn)突變株并檢測纖溶酶活力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在氦氖激光誘變處理45 min后,最高產(chǎn)突變株纖溶酶活力達(dá)到429.89±5.74 IU/mL。突變株經(jīng)過10次傳代培養(yǎng)后,保持穩(wěn)定的高產(chǎn)纖溶酶特性。纖溶酶粗酶液處理血凝塊的絕對溶解率可達(dá)到57.74±0.72%,10倍稀釋液處理血凝塊的絕對溶解率也能達(dá)到26.89±0.68%,菌株產(chǎn)生的纖溶酶具有良好的體外溶栓效果。本研究結(jié)果既提高了微生物纖溶酶活性,也為該菌株產(chǎn)纖溶酶的產(chǎn)業(yè)化提供了依據(jù)。
朱洪霞[2]（2020）在《產(chǎn)脂肪酶菌種的誘變篩選及其發(fā)酵工藝的研究》文中指出少根根霉是一種常見的工業(yè)微生物,也是被美國FDA認(rèn)證的食品安全菌。少根根霉脂肪酶具有較強(qiáng)的sn-1,3位專一性,可高效水解甘油三酯一位和三位的酯鍵,在醫(yī)藥、食品、化工等多個(gè)領(lǐng)域均有應(yīng)用,但目前少根根霉野生菌的脂肪酶產(chǎn)量不高,為了獲得具有較強(qiáng)產(chǎn)脂肪酶能力的目的菌株,需對少根根霉進(jìn)行誘變選育,并且通過發(fā)酵工藝的優(yōu)化使其脂肪酶活進(jìn)一步提高,基于此目的本文以少根根霉為出發(fā)菌株做了以下幾點(diǎn)工作。1.實(shí)驗(yàn)分別采用了紫外+LiCl誘變、硫酸二乙酯（DES）誘變對少根根霉進(jìn)行誘變選育。首先,通過實(shí)驗(yàn)確定最佳誘變條件。然后,對少根根霉進(jìn)行紫外+LiCl誘變,最終得到1株目的菌株酶活為522 U/mL,編號為Z-3。接下來以Z-3為出發(fā)菌株進(jìn)行DES誘變,經(jīng)初篩及復(fù)篩后,最終得到一株目的菌株55#,經(jīng)遺傳穩(wěn)定性試驗(yàn)驗(yàn)證其酶活穩(wěn)定在620U/mL,是誘變前酶活（46 U/mL）的13.5倍。2.為提高少根根霉在發(fā)酵過程中的脂肪酶產(chǎn)量,本文對發(fā)酵過程中的培養(yǎng)條件及培養(yǎng)基成分進(jìn)行了選擇優(yōu)化。首先對發(fā)酵時(shí)的菌體形態(tài)以及接種量進(jìn)行確定,接下來對發(fā)酵培養(yǎng)基中的成分進(jìn)行了探究優(yōu)化,通過搖瓶發(fā)酵分別研究了誘導(dǎo)油、氮源、碳源以及無機(jī)鹽離子等成分及培養(yǎng)條件等多個(gè)因素對少根根霉發(fā)酵產(chǎn)酶的作用及影響,確定最佳接種量為15%,最優(yōu)培養(yǎng)基為:Tryptone 10 g/L,（NH4）2SO4 3 g/L,Glucose 20 g/L,KH2PO41g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L,Corn oil 10 g/L,以菌球形態(tài)在發(fā)酵 pH 為 7,搖床轉(zhuǎn)速為200r/min,30℃條件下進(jìn)行發(fā)酵,測得酶活最高是3068U/mL,是對發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化前的4.95倍。3.利用冷丙酮法將發(fā)酵液中的脂肪酶分離出來,將預(yù)處理后的發(fā)酵液與丙酮在冰浴條件下緩慢混合,沉淀完全后在4℃,6000 r/min,條件下離心6 min,丙酮回收,將剩余的沉淀取出置放于平皿中,于通風(fēng)櫥中使其自然風(fēng)干后研磨成粉,其酶活為224800 U/g,酶活收率為46.9%。
葛新宇[3]（2020）在《脈沖強(qiáng)光對果膠酶生產(chǎn)菌黑曲霉的誘變研究》文中研究表明黑曲霉,是一種常見的曲霉屬真菌,被認(rèn)定為安全菌種,可以用來生產(chǎn)多種酶制劑,很好地應(yīng)用于工業(yè)、化工、醫(yī)藥等行業(yè)領(lǐng)域,在生物技術(shù)發(fā)展和生產(chǎn)生活中起到很大作用,目前報(bào)道的果膠酶生產(chǎn)菌大多是黑曲霉。脈沖強(qiáng)光誘變技術(shù)是一種新型誘變方式,其研究起步較晚,具有高強(qiáng)度、瞬時(shí)性、操作簡便、安全性高的特點(diǎn)。本文采用響應(yīng)面設(shè)計(jì)法確定了脈沖強(qiáng)光處理黑曲霉高產(chǎn)果膠酶的最佳誘變參數(shù),并與紫外誘變進(jìn)行對比?？疾旃z酶活力、突變株菌體性能、突變株產(chǎn)酶酶學(xué)性質(zhì),進(jìn)而說明脈沖強(qiáng)光的誘變能力。同時(shí),本研究探討了脈沖強(qiáng)光的誘變機(jī)理,討論脈沖強(qiáng)光能否作為一種新型環(huán)保的誘變方法來提高黑曲霉產(chǎn)果膠酶的活性。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及結(jié)果如下:（1）確定脈沖強(qiáng)光法的最佳誘變條件并篩選高果膠酶活力突變株。本實(shí)驗(yàn)以突變株果膠酶活力為指標(biāo),采用單因素和響應(yīng)面分析的方法,確定脈沖電壓2075V,脈沖次數(shù)36次,脈沖距離5.4cm為脈沖強(qiáng)光誘變的最佳條件。通過篩選成功得到遺傳性能穩(wěn)定的脈沖強(qiáng)光高酶活力突變株L9（188.21±1.22 U/mL）,優(yōu)于紫外突變株U39（138.10±1.01U/mL）。（2）測定突變株的菌株性能。與原始株相比,突變株L9對酸、溫度、酒精的耐受性有不同程度的提高（p<0.05）。突變株L9較原始株對數(shù)生長略有延長,菌體生長量增多。（3）突變株產(chǎn)果膠酶的酶學(xué)性質(zhì)。研究表明突變株L9和原始菌株產(chǎn)果膠酶活力在45℃時(shí)最大,在pH 5.0下顯示最佳活性。突變菌株L9果膠酶的pH穩(wěn)定性明顯高于原始菌株,同時(shí)誘變菌株果膠酶的熱穩(wěn)定性有較明顯的提升。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,脈沖強(qiáng)光誘變方式會對菌株產(chǎn)酶性質(zhì)產(chǎn)生一定影響,穩(wěn)定性能有所提高。（4）誘變機(jī)理的初探。通過RAPD-PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn),突變株L9在引物擴(kuò)增后,條帶出現(xiàn)變化,產(chǎn)生差異。這可能是由于形成了嘧啶二聚體,進(jìn)而阻礙堿基間正常配對,引起突變株L9基因組DNA損傷。SDS-PAGE電泳結(jié)果表明,突變株L9的全細(xì)胞菌體蛋白條帶與原始株不同,說明脈沖強(qiáng)光誘變處理影響了菌株遺傳物質(zhì)的表達(dá)。以上結(jié)果說明,脈沖強(qiáng)光技術(shù)操作簡便、安全可靠,可作為一種誘變方式誘變選育黑曲霉高產(chǎn)果膠酶突變株,并且在提高果膠酶活力方面效果優(yōu)于紫外誘變。
李先艷[4]（2019）在《高性能氧化亞鐵硫桿菌菌株的誘變與培育》文中研究指明對生物煙氣脫硫技術(shù)中的脫硫微生物氧化亞鐵硫桿菌（Thiobacillus ferrooxidans,簡稱T.f菌）進(jìn)行培育,為解決其耐溫性低,脫硫效率低等問題,采用低溫等離子的誘變手段對其進(jìn)行改良,主要研究內(nèi)容及結(jié)論如下:（1）從某煤礦酸性水樣中分離出四株T.f菌,選取生長周期最短的M1作為后續(xù)研究對象,通過測定其Fe2+氧化率確定菌株最適pH為2,溫度為30℃,接種量為10%,且Fe2+氧化率在一定程度反應(yīng)菌體的生物活性與生長量。（2）低溫等離子體誘變M1結(jié)果顯示:致死率隨誘變時(shí)間增長、誘變功率增大而升高,突變率與功率和時(shí)間的變化并不具有明顯的線性關(guān)系,M1最佳誘變時(shí)間為60s,誘變功率為50W。在最佳條件下誘變M1,通過測定Fe2+平均氧化率篩選出高性能正突變菌Y-2,Y-2菌株在細(xì)菌生長周期內(nèi)Fe2+平均氧化率為74%,繼代培養(yǎng)6代后Fe2+平均氧化率僅下降10%,遺傳性能較其他組更為穩(wěn)定。（3）在35℃、38℃、42℃條件下對Y-2進(jìn)行高溫培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示誘變菌與對照菌在38℃條件下均能保持活性,三期培養(yǎng)中pH值的變化規(guī)律均呈先增大后減小的趨勢,Fe2+的氧化速率與T.f菌活性符合在有限環(huán)境容量下微生物的“S”型生長曲線。低溫等離子誘變可提高菌體對高溫的耐受性,但無法逆轉(zhuǎn)菌株活性隨溫度升高而減小這一規(guī)律,經(jīng)誘變的Y-2菌株可在38℃溫度條件下保持良好的生物活性。（4）在模擬生物煙氣脫硫裝置脫硫試驗(yàn)中T.f菌脫硫率隨氣流量的增大而減小,Y-2正突變菌脫硫的最佳氣流量為0.3m3/h,增加初始Fe3+濃度可提高脫硫效率但也會抑制菌體對Fe2+的氧化,反應(yīng)前增加一定量Fe2+可加快菌體的氧化速率且能促進(jìn)Fe3+與菌體的協(xié)調(diào)催化氧化作用。
陳大為[5]（2018）在《放線菌ZZ-9耐藥性菌株篩選及涂抹劑研制》文中認(rèn)為蘋果樹腐爛病是我國蘋果產(chǎn)區(qū)發(fā)生普遍的一種病害,該病害是由valsa mali引起的。發(fā)生嚴(yán)重時(shí),可造成毀園。目前,防治蘋果樹腐爛病多采用化學(xué)農(nóng)藥防治為主,其不僅污染環(huán)境,而且引起病原菌產(chǎn)生抗藥性等問題。因此,采用生物防治以及開發(fā)高效、低毒的生物制劑,成為當(dāng)下防治蘋果樹腐爛病的研究熱點(diǎn)。本試驗(yàn)以前期室內(nèi)先篩選出一株對蘋果樹腐爛病有較好防效的生防放線菌為試驗(yàn)材料,對其進(jìn)行耐藥菌株的微波誘變選育和生防制劑研制,并對其生防制劑防效和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了測定。所取得的研究結(jié)果如下:1.對放線菌ZZ-9菌株進(jìn)行不同時(shí)間的微波誘變處理。結(jié)果表明,在微波輻照15-60 s條件下,獲得4株耐70μg/mL甲基硫菌靈的突變菌株ZZ-9A、ZZ-9B、ZZ-9C和ZZ-9D。通過對4株突變菌株進(jìn)行抑菌率和傳代穩(wěn)定性測定,篩選出一株抑菌率較好且傳代穩(wěn)定的突變菌株ZZ-9B。菌株ZZ-9B與70μg/m L甲基硫菌靈協(xié)同作用測定表明,當(dāng)菌株ZZ-9B與甲基硫菌靈配比為8:2時(shí),在離體枝條上對蘋果樹腐爛病的協(xié)同防效為89.42%,明顯高于突變菌株和甲基硫菌靈單獨(dú)使用時(shí)的防效。2.采用菌絲生長速率法對不同類型的表面活性劑、防腐劑、紫外保護(hù)劑、滲透劑和載體在不同濃度下對放線菌ZZ-9菌株生長及其抑菌活性進(jìn)行了測定。助劑篩選結(jié)果表明:ZZ-9生防制劑各助劑分別為1%吐溫-80、1.5%硫酸鏈霉素、1.5%木質(zhì)素磺酸鈉、0.1%三氧硅烷時(shí),對蘋果樹腐爛病菌的抑制率均達(dá)80%以上,顯著高于對照。同時(shí),利用響應(yīng)面法對ZZ-9生防制劑的最佳助劑條件進(jìn)行了優(yōu)化,確定其最佳助劑濃度為:60 m L活菌發(fā)酵液中分別加入594μL吐溫-80、912 mg硫酸鏈霉素、894 mg木質(zhì)素磺酸鈉及66μL三氧硅烷在此條件下,ZZ-9菌劑對蘋果樹腐爛病菌的抑制率最高,達(dá)86.51%。載體篩選結(jié)果表明,2.0%的黃原膠使ZZ-9制劑呈稠黏液,附著性強(qiáng),為最佳載體。3.對ZZ-9涂抹劑進(jìn)行防效評價(jià)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測,結(jié)果表明,ZZ-9涂抹劑對蘋果樹腐爛病病原菌的抑制率為89.54%;在離體枝條保護(hù)作用試驗(yàn)中,ZZ-9涂抹劑處理后,病疤平均面積為101.72 mm2,顯著低于對照,防效為83.61%;在離體枝條治療作用試驗(yàn)中,ZZ-9涂抹劑處理后,病疤平均面積為154.77 mm2,顯著低于對照,與甲硫·萘乙酸相差52.30 mm2;治療效果為73.13%。ZZ-9涂抹劑呈黑褐色粘稠狀液體,流動性差,成膜性好,且厚度適中,在蘋果枝條或樹干上有較好的附著性,pH為5.65;有效活菌數(shù)為12.12×107cfu/mL;在（50±2）℃、（-4±2）℃以及紫外燈照射條加下,其活菌數(shù)與抑菌率均有一定程度下降,但仍正常條件差異不大;隨著時(shí)間的增長,ZZ-9涂抹劑的雜菌數(shù)基本保持穩(wěn)定,均低于1.30×106cfu/m L,且其在120 d,仍能保持較好防效。
高宏正,李國強(qiáng),鄧素貞,孫海風(fēng),沈義成,張瑞豪,陳國強(qiáng),劉幫會,周士坦,孟春曉,高政權(quán)[6]（2015）在《微生物誘變育種概況及激光在微生物誘變中的應(yīng)用》文中提出微生物在人類的糧食、能源、健康、資源和環(huán)境保護(hù)等問題中顯露出越來越重要的作用。品種優(yōu)劣對于微生物藥物的工業(yè)化生產(chǎn)具有決定性意義。野生微生物品種往往因產(chǎn)率低而不能直接用于工業(yè)生產(chǎn),因此選育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、低耗的微生物誘變品種是微生物研究的重點(diǎn)領(lǐng)域。以人工誘發(fā)基因突變?yōu)榛A(chǔ)的誘變育種是一種經(jīng)典而高效的微生物遺傳育種方法,目前大部分工業(yè)用的生產(chǎn)菌種是通過誘變育種選育出來的。文章總結(jié)與比較了三大類常用微生物誘變方法——化學(xué)誘變、物理誘變、生物法誘變的優(yōu)缺點(diǎn),并對已廣泛應(yīng)用于微藻、病毒、環(huán)境、食品、藥物等領(lǐng)域物理誘變中的激光誘變法的優(yōu)缺點(diǎn)和應(yīng)用前景進(jìn)行了重點(diǎn)論述,希望對同行業(yè)者有一定的啟示作用。
高宏正[7]（2015）在《激光誘變適于制備生物柴油的小球藻的研究》文中指出人口不斷增長,工業(yè)不斷進(jìn)步,全球能源急劇緊缺,地球上的化石能源儲存是有限的,按照目前的消耗速度終有一天化石能源會被消耗殆盡,屆時(shí),人類社會的發(fā)展會受到限制。而解決這一問題的方法在于開發(fā)尋找到一種新型可實(shí)際應(yīng)用的能源,這一課題已經(jīng)迫在眉睫。誘變育種以其效率高,成本低,簡單實(shí)用的特性得到廣泛的關(guān)注。本文主要通過對9號小球藻、31號小球藻和海水小球藻使用He-Ne（氦氖）激光、Nd:YAG（倍頻雅閣）激光和半導(dǎo)體激光進(jìn)行誘變處理,測定不同處理組的油脂產(chǎn)率,從而篩選出高產(chǎn)油脂突變藻株,共18株。對篩選出的高產(chǎn)藻株進(jìn)行繼代培養(yǎng),進(jìn)行油脂產(chǎn)率的研究,結(jié)果表明9號小球藻Nd:YAG激光8min處理組,31號小球藻He-Ne激光4min處理組和Nd:YAG激光12min處理組,海水小球藻Nd:YAG激光4min處理組油脂產(chǎn)率高于對照組;同時(shí)對這四個(gè)處理組進(jìn)行硝酸還原酶活力和乙酰輔酶A羧化酶的測定,除了31號小球藻He-Ne激光4min處理組兩種酶活則略低于對照組,其余三種高產(chǎn)藻株均高于對照組。因此可以初步判斷,激光引發(fā)的突變未直接影響31號小球藻He-Ne激光4min處理組的兩種酶,而對于其他三種藻株的兩種酶則產(chǎn)生了直接影響。然后本實(shí)驗(yàn)選取了幾種在油脂合成途徑上具有關(guān)鍵作用的7種基因進(jìn)行研究,分別是BC（生物素羧化酶）、FATA（脂酰ACP硫解酶）、ACP（?；d體蛋白）、SAD（硬脂酰ACP去飽和酶）、MCTK（丙二酸單酰-COA-ACP轉(zhuǎn)酰酶）、FAD（ω-3脂肪酸去飽和酶）、KAS基因（β-酮脂酰-ACP合酶）。9號小球藻Nd:YAG激光8min處理組,31號小球藻He-Ne激光4min處理組和Nd:YAG激光12min處理組,海水小球藻Nd:YAG激光4min處理組7種基因表達(dá)量明顯超過對照組,對比油脂產(chǎn)率可以發(fā)現(xiàn)這7種基因?qū)τ椭a(chǎn)率有直接的影響。共篩選出4株能夠穩(wěn)定遺傳高產(chǎn)油率的突變藻株分別是9號小球藻Nd:YAG激光處理8min,31號小球藻He-Ne激光處理4min,Nd:YAG激光處理12min和海水小球藻Nd:YAG激光處理4min。為誘變育種研究提供一種思路,也為清潔能源的研究提供參考。
周曉杭[8]（2014）在《β-甘露聚糖酶高產(chǎn)菌株的選育及其固定化細(xì)胞產(chǎn)酶條件優(yōu)化》文中研究說明β-甘露聚糖酶（β-mannanase）的研究及應(yīng)用一直是人們關(guān)注的熱點(diǎn)。篩選出β-甘露聚糖酶高產(chǎn)菌株并將其應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐具有重要意義。本文即是通過誘變育種技術(shù)的使用,篩選獲得一株β-甘露聚糖酶高產(chǎn)菌株,并通過菌體固定化技術(shù)等手段,確定了該菌株應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐的可能性。該研究為β-甘露聚糖酶的生產(chǎn)奠定了菌株基礎(chǔ)。本文首先選取紫外線、氦氖激光和亞硝基胍依次對地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）HDYM-04進(jìn)行誘變。以β-甘露聚糖酶酶活力為檢測指標(biāo),結(jié)果表明,紫外線的最佳誘變劑量為照射距離50cm,照射時(shí)間10s,篩選出的高產(chǎn)突變株U2-12的β-甘露聚糖酶酶活為1103±32.19 U/mL,較出發(fā)菌株（酶活為322.33±9.88 U/mL）高出241.84%;氦氖激光的最佳誘變劑量為照射距離5 cm,照射時(shí)間30 min,篩選出的高產(chǎn)突變株N2-10的β-甘露聚糖酶為1204.33±18.61 U/mL,較出發(fā)菌株（酶活為322.33±9.88 U/mL）高出273.63%;較U2-12高出1 0.52%;亞硝基胍的最佳誘變劑量為亞硝基胍濃度3 mg/mL,作用時(shí)間16 min,篩選出的高產(chǎn)突變株G2-3的β-甘露聚糖酶酶活為1259.33±39.37 U/mL,較出發(fā)菌株（酶活為322.33±9.88 U/mL）高出290.70%;較U2-12高出 14.17%;較N2-10高出9.86%。為了提高高產(chǎn)突變株G2-3的發(fā)酵能力,本文繼續(xù)對該菌株進(jìn)行發(fā)酵條件的優(yōu)化,在確定各單因素對菌株生產(chǎn)β-甘露聚糖酶的影響后,采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)確定各單因素的最佳組合。結(jié)果表明:當(dāng)培養(yǎng)溫度為36℃,接種量為2%,魔芋粉加入量為]%,初始pH值7.0,搖床轉(zhuǎn)速150 r/min時(shí),G2-3代謝產(chǎn)生的β-甘露聚糖酶酶活為1579.58±59.41 U/mL,較未優(yōu)化前提高了32.91%。為了從分子角度明確誘變對出發(fā)菌株堿基序列和氨基酸序列的影響,探索β-甘露聚糖酶基因序列中與酶活變化相關(guān)的位點(diǎn),本文對地衣芽孢桿菌HDYM-04及誘變后各菌株,包括高產(chǎn)突變株U2-12、N2-10、G2-3,低產(chǎn)突變株U1-36、N1-41、G1-10,β-甘露聚糖酶基因進(jìn)行克隆并測序,利用bioedit軟件分析比對了這些菌株序列的差別,結(jié)果顯示,高產(chǎn)突變株具有5個(gè)突變熱點(diǎn),低產(chǎn)突變株具有9個(gè)突變熱點(diǎn),活性變化位點(diǎn)在β-甘露聚糖酶基因1～13 bp、16～18 bp、30 bp、187 bp、202～203 bp、213 bp、226～227 bp、255～256bp、264～265 bp、301 bp和471 bp處。31～202 bp和302～444 bp為地衣芽胞桿菌HDYM-04 甘露聚糖酶基因保守區(qū)。由于β-甘露聚糖酶可以應(yīng)用到飼料生產(chǎn)、染料脫色等實(shí)際生產(chǎn)中,為了適應(yīng)生產(chǎn)實(shí)際,本文還探索了利用固定化技術(shù)在該酶生產(chǎn)中的可行性。首先從海藻酸鈉法、聚乙烯醇法、卡拉膠法這三種固定化方法中,確定最佳固定化方法為聚乙烯醇法。并對該固定化方法進(jìn)行條件優(yōu)化,,確定當(dāng)聚乙烯醇濃度為2%,菌體濃度為1:1時(shí),最高β-甘露聚糖酶酶活保留率可以達(dá)到41.93±0.90%,比初始固定化菌體提高了 1 8.60%。對優(yōu)化后的固定化菌體進(jìn)行最佳發(fā)酵條件的研究表明,當(dāng)魔芋粉加入量為0.7%,最佳接種量為1%,最佳增殖時(shí)間60 h時(shí),固定化菌體的β-甘露聚糖酶酶活最高,為838.96±25.79 U/mL,利用該條件下制備的菌球進(jìn)行發(fā)酵32h,可以使酶活達(dá)到962.37±15.61 U/mL。并且該菌體可以重復(fù)使用6次,酶活不變。由于β-甘露聚糖酶對染料具有脫色作用,所以為了探討染料的可用范圍及能力,本文選擇32種染料進(jìn)行試驗(yàn),包括菁系,蒽醌類,偶氮類,三芳甲烷類,三芳甲基類和雜環(huán)類染料。結(jié)果顯示,β-甘露聚糖酶對于三芳甲烷類染料具有較強(qiáng)的脫色能力,其中染料苯胺藍(lán)、水溶苯胺藍(lán)的脫色率在24 h時(shí)可達(dá)到70%以上;孔雀石綠在12 h時(shí)就可達(dá)到49.14%,24 h后可達(dá)到83.02%;苯酚紅在脫色反應(yīng)24 h后可以達(dá)到95.97%?？傊?本研究通過對試驗(yàn)菌株的誘變選育和固定化方法及條件的優(yōu)化,提高了菌種生產(chǎn)β-甘露聚糖酶的能力,并探討了酶活變化的分子原理,及對染料脫色的可能性。這為該菌株進(jìn)一步應(yīng)用于生產(chǎn)奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
王雅君,陳力力,廖杰瓊,姚開波,叢美娟,廖靜[9]（2013）在《微生物物理誘變育種方法的研究進(jìn)展》文中指出微生物育種是近年來研究的熱點(diǎn),在現(xiàn)代食品工業(yè)及發(fā)酵工業(yè)中誘變育種是一個(gè)重要途徑。在了解傳統(tǒng)物理誘變育種的基礎(chǔ)上,列舉了一系列新的誘變手段,如離子注入、微波、激光、超高壓、空間等新的誘變因素及誘變劑的出現(xiàn),為物理誘變技術(shù)增加了很多亮點(diǎn),進(jìn)一步提高了誘變育種的效率和成功率。
李海偉[10]（2011）在《飛秒激光誘變達(dá)托霉素高產(chǎn)菌株技術(shù)及其機(jī)理的研究》文中研究說明達(dá)托霉素（Daptomycin）是首個(gè)獲準(zhǔn)上市的環(huán)脂肽類抗生素,是一類抗革蘭氏陽性菌的新型抗生素,具有在體外抗絕大多數(shù)的臨床革蘭陽性菌的作用,主要用于耐藥菌,如耐萬古霉素的腸球菌（VRE）,耐甲氧西林的金葡菌（MRSA）等。目前達(dá)托霉素的生產(chǎn)主要采用玫瑰孢鏈霉菌（Streptomyces roseosporus）生物發(fā)酵法生產(chǎn),現(xiàn)階段成本較高,產(chǎn)量較低。因此通過人工誘變得到穩(wěn)定高產(chǎn)的菌株,對于其工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)具有很重要的意義。本文以玫瑰孢鏈霉菌為研究對象,以飛秒激光誘變?yōu)閷?shí)驗(yàn)手段,圍繞如何提高達(dá)托霉素的產(chǎn)量和質(zhì)量,對生產(chǎn)菌種的選育、發(fā)酵工藝等方面進(jìn)行了系統(tǒng)研究,同時(shí)對誘變機(jī)理進(jìn)行了初步的探討,獲得了如下結(jié)果：以玫瑰孢鏈霉菌原始菌株NRRL11375為出發(fā)菌,經(jīng)飛秒激光誘變處理（激光誘變參數(shù)：輸出功率5mW-30mW和輻照時(shí)間5-25s）,并選用藤黃八疊球菌作為抗性篩選菌,最終選育出一株達(dá)托霉素高產(chǎn)突變株JG-25-50,該菌7.5L生物發(fā)酵反應(yīng)器達(dá)托霉素產(chǎn)量達(dá)到371.40mg/L,比出發(fā)菌株提高了18.3%。且菌株JG-25-50的遺傳性能穩(wěn)定。同時(shí),本文還探討了飛秒激光誘變玫瑰孢鏈霉菌的機(jī)理,結(jié)合飛秒激光光束脈沖持續(xù)時(shí)間短、瞬時(shí)功率大、聚焦尺寸小的特點(diǎn)較系統(tǒng)的討論了激光照射微生物時(shí)發(fā)生的一系列機(jī)理變化：多光子吸收、形成等離子體、產(chǎn)生生物活性氧、DNA損傷自身修復(fù)等。最后,根據(jù)目前的研究情況,對本領(lǐng)域進(jìn)行了展望并就飛秒激光誘變微生物技術(shù)及其機(jī)理的研究發(fā)展提出了建議。
二、激光誘變微生物技術(shù)的研究進(jìn)展（論文開題報(bào)告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點(diǎn)或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實(shí)驗(yàn)法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。
定性分析法：對研究對象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認(rèn)識進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會科學(xué)用來分析社會現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、激光誘變微生物技術(shù)的研究進(jìn)展（論文提綱范文）
（1）利用氦氖激光誘變提高枯草芽孢桿菌纖溶酶活力的研究（論文提綱范文）
| 0 引言 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 樣品采集 |
| 1.2 培養(yǎng)基 |
| 1.3 試劑 |
| 1.4 儀器與設(shè)備 |
| 1.5 對菌株進(jìn)行氦氖激光誘變處理 |
| 1.5.1 He-Ne激光誘變處理 |
| 1.5.2 突變株的篩選 |
| 1.6 纖溶酶粗酶液制備方法及纖溶酶活力的測定 |
| 1.6.1 尿激酶標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 |
| 1.6.2 粗制血纖維蛋白的制備 |
| 1.6.3 纖溶酶活力測定 |
| 1.7 突變菌株的形態(tài)觀察 |
| 1.7.1 突變株菌落形態(tài)和細(xì)胞形態(tài)觀察 |
| 1.7.2 高產(chǎn)突變體的遺傳穩(wěn)定性分析 |
| 1.8 纖溶酶粗酶液酶學(xué)性質(zhì)研究 |
| 1.8.1 纖溶酶溶解纖維蛋白的方式 |
| 1.8.2 纖溶酶降解纖維蛋白的過程分析 |
| 1.8.3 纖溶酶粗酶液體外溶栓實(shí)驗(yàn) |
| 1.8.4纖溶酶粗酶液體外抗凝實(shí)驗(yàn) |
| 1.8.5 纖溶酶粗酶液體外溶血試驗(yàn) |
| 1.8.6 統(tǒng)計(jì)軟件及方法 |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 2.1 氦氖激光誘變條件的確定 |
| 2.2 突變株菌落形態(tài)和細(xì)胞形態(tài)觀察 |
| 2.3 突變株遺傳穩(wěn)定性分析 |
| 2.4 纖溶酶粗酶液酶學(xué)性質(zhì)研究 |
| 2.4.1 尿激酶標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 |
| 2.4.2 纖維蛋白被纖溶酶粗酶液溶解的作用方式 |
| 2.4.3 纖溶酶粗酶液降解纖維蛋白的過程分析 |
| 2.4.4 纖溶酶粗酶液體外溶栓 |
| 2.4.5 纖溶酶粗酶液體外抗凝試驗(yàn) |
| 2.4.6 纖溶酶粗酶液體外溶血試驗(yàn) |
| 3 討論 |
| 4 結(jié)論 |
（2）產(chǎn)脂肪酶菌種的誘變篩選及其發(fā)酵工藝的研究（論文提綱范文）
| 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 脂肪酶 |
| 1.1.1 脂肪酶簡介 |
| 1.1.2 脂肪酶的來源 |
| 1.1.2.1 脂肪酶的生產(chǎn)方法 |
| 1.1.2.2 微生物發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶 |
| 1.1.2.3 根霉脂肪酶的分離提取 |
| 1.1.3 脂肪酶的性質(zhì) |
| 1.1.3.1 脂肪酶的鏈長特異性 |
| 1.1.3.2 脂肪酶的位置特異性 |
| 1.1.4 脂肪酶的應(yīng)用 |
| 1.1.4.1 脂肪酶在化工領(lǐng)域的應(yīng)用 |
| 1.1.4.2 脂肪酶在食品方面的應(yīng)用 |
| 1.1.4.3 脂肪酶在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用 |
| 1.1.4.4 脂肪酶在生物柴油中的應(yīng)用 |
| 1.1.4.5 脂肪酶在洗滌劑工業(yè)中的應(yīng)用 |
| 1.2 少根根霉簡介 |
| 1.3 菌株篩選 |
| 1.3.1 脂肪酶產(chǎn)生菌的篩選 |
| 1.3.2 誘變育種 |
| 1.3.2.1 化學(xué)誘變劑誘變 |
| 1.3.2.2 紫外誘變 |
| 1.3.2.3 激光誘變 |
| 1.3.2.4 微波誘變 |
| 1.3.2.5 常壓室溫等離子體誘變 |
| 1.4 本文的研究思路及內(nèi)容 |
| 第二章 少根根霉菌株的誘變篩選 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法 |
| 2.2.1 試驗(yàn)菌株與保藏 |
| 2.2.2 培養(yǎng)基 |
| 2.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 |
| 2.3 試驗(yàn)方法 |
| 2.3.1 菌種傳代 |
| 2.3.2 孢子懸液的制備 |
| 2.3.3 種子培養(yǎng)基的制備 |
| 2.3.4 誘變篩菌方法 |
| 2.3.4.1 紫外+LiCl誘變 |
| 2.3.4.2 硫酸二乙酯(DES)誘變 |
| 2.3.5 誘變致死率計(jì)算 |
| 2.3.6 菌種篩選 |
| 2.3.6.1 初篩 |
| 2.3.6.2 復(fù)篩 |
| 2.3.7 酶活測定方法 |
| 2.3.8 生物量測定方法 |
| 2.4 結(jié)果與討論 |
| 2.4.1 原始菌株發(fā)酵酶活測定 |
| 2.4.2 菌株的篩選 |
| 2.4.2.1 孢子萌發(fā)狀態(tài) |
| 2.4.2.2 紫外+LiCl誘變致死率及最佳照射時(shí)長選擇 |
| 2.4.2.3 DES誘變致死率及最佳誘變濃度的選取 |
| 2.4.2.4 紫外+LiCl誘變篩菌結(jié)果 |
| 2.4.2.5 DES誘變結(jié)果 |
| 2.4.2.6 遺傳穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) |
| 2.5 本章小結(jié) |
| 第三章 少根根霉產(chǎn)脂肪酶發(fā)酵工藝優(yōu)化 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料與方法 |
| 3.2.1 實(shí)驗(yàn)菌株與保藏 |
| 3.2.2 實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基 |
| 3.2.3 孢子懸液的制備 |
| 3.2.4 種子培養(yǎng)基的制備 |
| 3.2.5 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 |
| 3.2.6 酶活測定方法 |
| 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 |
| 3.3.1 接種量及菌體發(fā)酵形態(tài)的確定 |
| 3.3.1.1 發(fā)酵形式的確定 |
| 3.3.1.2 接種量的確定 |
| 3.3.2 誘導(dǎo)油對產(chǎn)酶的影響 |
| 3.3.3 氮源對產(chǎn)酶的影響 |
| 3.3.3.1 有機(jī)氮源的選擇與優(yōu)化 |
| 3.3.3.2 胰蛋白胨添加量優(yōu)化 |
| 3.3.3.3 無機(jī)氮源的選擇與優(yōu)化 |
| 3.3.3.4 不同硫酸銨添加量發(fā)酵對比 |
| 3.3.4 碳源對產(chǎn)酶的影響 |
| 3.3.4.1 不同葡萄糖濃度發(fā)酵對比 |
| 3.3.4.2 不同葡萄糖濃度生物量對比 |
| 3.3.5 不同鹽離子對酶活的影響 |
| 3.3.6 培養(yǎng)基pH值對酶活的影響 |
| 3.3.7 搖床轉(zhuǎn)速對酶活的影響 |
| 3.4 本章小結(jié) |
| 第四章 脂肪酶的制備及性質(zhì)研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 實(shí)驗(yàn)材料及方法 |
| 4.2.1. 實(shí)驗(yàn)材料 |
| 4.2.1.1 實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基 |
| 4.2.1.2 孢子懸液的制備 |
| 4.2.1.3 種子培養(yǎng)基的制備 |
| 4.2.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 |
| 4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 4.2.2.1 發(fā)酵液的預(yù)處理 |
| 4.2.2.2 冷丙酮沉淀 |
| 4.2.2.3 脂肪酶的熱穩(wěn)定性 |
| 4.2.2.4 脂肪酶的pH穩(wěn)定性 |
| 4.2.2.5 脂肪酶的最適反應(yīng)溫度 |
| 4.2.2.6 脂肪酶的最適反應(yīng)pH |
| 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 |
| 4.3.1 脂肪酶的分離 |
| 4.3.2 熱穩(wěn)定性 |
| 4.3.3 pH穩(wěn)定性 |
| 4.3.4 酶的最適反應(yīng)溫度 |
| 4.3.5 酶的最適反應(yīng)pH |
| 4.4 本章小結(jié) |
| 第五章 結(jié)論 |
| 第六章 問題與建議 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 附錄一 實(shí)驗(yàn)所用試劑列表 |
| 附錄二 實(shí)驗(yàn)常用儀器器材列表 |
| 致謝 |
| 研究成果及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 |
| 作者及導(dǎo)師簡介 |
| 附件 |
（3）脈沖強(qiáng)光對果膠酶生產(chǎn)菌黑曲霉的誘變研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 微生物誘變育種方法 |
| 1.1.1 化學(xué)誘變育種 |
| 1.1.2 物理誘變育種 |
| 1.1.3 復(fù)合誘變 |
| 1.1.4 生物誘變育種 |
| 1.2 脈沖強(qiáng)光技術(shù) |
| 1.2.1 脈沖強(qiáng)光 |
| 1.2.2 脈沖強(qiáng)光誘變育種 |
| 1.3 黑曲霉及其產(chǎn)果膠酶概述 |
| 1.3.1 黑曲霉 |
| 1.3.2 果膠酶 |
| 1.3.3 果膠酶的應(yīng)用 |
| 1.4 本課題的研究內(nèi)容與意義 |
| 1.4.1 研究內(nèi)容 |
| 1.4.2 研究意義 |
| 第二章 脈沖強(qiáng)光誘變條件的確定及突變株選育 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料與儀器 |
| 2.2.1 試驗(yàn)菌株 |
| 2.2.2 材料與試劑 |
| 2.2.3 儀器與設(shè)備 |
| 2.2.4 培養(yǎng)基 |
| 2.2.5 試驗(yàn)溶液 |
| 2.3 測定方法 |
| 2.3.1 菌落計(jì)數(shù) |
| 2.3.2 DNS法測定酶活 |
| 2.4 試驗(yàn)方法 |
| 2.4.1 菌株的活化 |
| 2.4.2 孢子液的制備 |
| 2.4.3 最適濃度的確定 |
| 2.4.4 脈沖強(qiáng)光誘變處理 |
| 2.4.5 紫外誘變處理 |
| 2.4.6 高產(chǎn)果膠酶突變菌株的篩選 |
| 2.4.7 遺傳穩(wěn)定性的測定 |
| 2.5 結(jié)果分析 |
| 2.5.1脈沖強(qiáng)光誘變單因素實(shí)驗(yàn) |
| 2.5.2 脈沖強(qiáng)光誘變響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì) |
| 2.5.3 突變株的誘變選育 |
| 2.5.4 遺傳穩(wěn)定性研究 |
| 2.6 本章小結(jié)與討論 |
| 第三章 高產(chǎn)突變株的性能研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料與儀器 |
| 3.2.1 材料與試劑 |
| 3.2.2 儀器與設(shè)備 |
| 3.3 試驗(yàn)方法 |
| 3.3.1 突變株生長曲線測定 |
| 3.3.2 突變株益生性能的測定 |
| 3.4 結(jié)果分析 |
| 3.4.1 生長曲線的繪制 |
| 3.4.2 突變株益生性能的研究 |
| 3.5 本章小結(jié)與討論 |
| 第四章 果膠酶酶學(xué)性質(zhì)研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料與試劑 |
| 4.2.1 材料與試劑 |
| 4.2.2 儀器與設(shè)備 |
| 4.3 試驗(yàn)方法 |
| 4.3.1 酶的分離純化 |
| 4.3.2 果膠酶酶學(xué)性質(zhì) |
| 4.4 結(jié)果分析 |
| 4.4.1 硫酸銨分級沉淀?xiàng)l件的確定 |
| 4.4.2 DEAE Sepharose Fast Flow(DEAE-FF)層析結(jié)果 |
| 4.4.3 Superdex G-75 層析結(jié)果 |
| 4.4.4 果膠酶純度及分子量確定 |
| 4.4.5 果膠酶的酶學(xué)性質(zhì) |
| 4.5 本章小結(jié)與討論 |
| 第五章 脈沖強(qiáng)光誘變機(jī)理的初步研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料與儀器 |
| 5.2.1 材料與試劑 |
| 5.2.2 儀器與設(shè)備 |
| 5.3 試驗(yàn)方法 |
| 5.3.1 RAPD分析 |
| 5.3.2 SDS-PAGE分析 |
| 5.4 結(jié)果分析 |
| 5.4.1 基因組DNA提取 |
| 5.4.2 RAPD-PCR結(jié)果 |
| 5.4.3 SDS-PAGE蛋白分析 |
| 5.5 本章小結(jié)與討論 |
| 第六章 結(jié)論與展望 |
| 6.1 結(jié)論 |
| 6.2 展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位論文期間發(fā)表論文 |
（4）高性能氧化亞鐵硫桿菌菌株的誘變與培育（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 緒論 |
| 1.1 煙氣脫硫技術(shù)的研究進(jìn)展 |
| 1.1.1 濕法煙氣脫硫技術(shù) |
| 1.1.2 半干半濕法脫硫技術(shù) |
| 1.1.3 干法煙氣脫硫技術(shù) |
| 1.1.4 生物法煙氣脫硫技術(shù) |
| 1.2 微生菌種物育種技術(shù) |
| 1.2.1 化學(xué)誘變 |
| 1.2.2 物理誘變 |
| 1.2.3 新型誘變技術(shù)——等離子體誘變育種 |
| 1.3 選題依據(jù)與研究背景 |
| 1.3.1 選題依據(jù) |
| 1.3.2 研究內(nèi)容 |
| 2 氧化亞鐵硫桿菌的分離鑒定及理化性質(zhì)研究 |
| 2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與藥品 |
| 2.1.1 主要試劑與儀器 |
| 2.1.2 培養(yǎng)基的配置 |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 2.2.1 富集純化 |
| 2.2.2 分離鑒定 |
| 2.2.3 革蘭氏染色 |
| 2.2.4 CTAB法提取細(xì)菌DNA |
| 2.2.5 16S rDNA序列分析 |
| 2.2.6 pH、溫度、接種量的選擇 |
| 2.2.7 Fe~(2+)氧化率測定方法 |
| 2.3 結(jié)果與分析 |
| 2.3.1 菌體的分離及鑒定 |
| 2.3.2 細(xì)菌細(xì)胞形態(tài)觀察 |
| 2.3.3 理化性質(zhì)研究 |
| 2.4 本章小結(jié) |
| 3 低溫等離子體誘變育種研究 |
| 3.1 實(shí)驗(yàn)儀器與藥品 |
| 3.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 3.3 結(jié)果與分析 |
| 3.3.1 最佳誘變條件的選擇 |
| 3.3.2 誘變后正突變菌的篩選 |
| 3.4 本章小結(jié) |
| 4 誘變菌株的耐高溫試驗(yàn) |
| 4.1 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 4.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 4.3 結(jié)果與分析 |
| 4.3.1 38℃培養(yǎng)條件下Y-2 菌株結(jié)果分析 |
| 4.3.2 35℃、38℃、42℃培養(yǎng)條件下Y-2 菌株結(jié)果對比分析 |
| 4.4 本章小結(jié) |
| 5 探究氧化亞鐵硫桿菌脫除SO_2 的條件 |
| 5.1 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 5.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 5.3 結(jié)果與分析 |
| 5.3.1 氣體流量對脫硫率的影響 |
| 5.3.2 初始Fe~(3+)濃度對脫硫率的影響 |
| 5.3.3 初始Fe~(2+)濃度對脫硫率的影響 |
| 5.3.4 氧化亞鐵硫桿菌與Fe~(2+)的協(xié)調(diào)氧化作用 |
| 5.4 本章小結(jié) |
| 6 結(jié)論與展望 |
| 6.1 結(jié)論 |
| 6.2 展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文清單 |
| 致謝 |
（5）放線菌ZZ-9耐藥性菌株篩選及涂抹劑研制（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Summary |
| 第一章 文獻(xiàn)綜述 |
| 1 蘋果樹腐爛病研究進(jìn)展 |
| 1.1 蘋果樹腐爛病發(fā)生、分布與危害 |
| 1.2 蘋果樹腐爛病侵染循環(huán) |
| 1.3 蘋果樹腐爛病的防治 |
| 2 放線菌防治植物病害研究進(jìn)展 |
| 2.1 放線菌作用機(jī)制 |
| 2.2 放線菌在植物病害防治中的應(yīng)用 |
| 3 微生物誘變選育技術(shù)概述 |
| 3.1 物理誘變 |
| 3.2 化學(xué)誘變 |
| 3.3 生物誘變 |
| 3.4 復(fù)合誘變 |
| 4 放線菌生防制劑的研究現(xiàn)狀 |
| 4.1 放線菌代謝產(chǎn)物制劑 |
| 4.2 放線菌活菌制劑 |
| 5 研究的目的及意義 |
| 6 技術(shù)路線 |
| 第二章 放線菌ZZ-9耐藥菌株的微波誘變選育 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 2.1 甲基硫菌靈對出發(fā)菌株孢子致死濃度的測定 |
| 2.2 微波誘變劑量的測定 |
| 2.3 耐藥菌株的篩選 |
| 2.4 耐藥菌株的傳代穩(wěn)定性測定 |
| 2.5 耐藥性菌株與甲基硫菌靈協(xié)同作用離體枝條測定 |
| 3 結(jié)論與討論 |
| 第三章 放線菌ZZ-9生防制劑工藝優(yōu)化 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 2.1 放線菌ZZ-9生防制劑表面活性劑的篩選 |
| 2.2 放線菌ZZ-9生防制劑紫外保護(hù)劑的篩選 |
| 2.3 放線菌ZZ-9生防制劑滲透劑的篩選 |
| 2.4 放線菌ZZ-9生防制劑防腐劑的篩選 |
| 2.5 放線菌ZZ-9生防制劑載體的篩選 |
| 2.6 ZZ-9生防制劑最佳助劑條件響應(yīng)面優(yōu)化 |
| 3 結(jié)論與討論 |
| 第四章 放線菌ZZ-9涂抹劑防效評價(jià)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 2.1 放線菌ZZ-9涂抹劑防效評價(jià) |
| 2.2 放線菌ZZ-9涂抹劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)測定 |
| 3 結(jié)論與討論 |
| 第五章 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn) |
| 1 主要結(jié)論 |
| 2 創(chuàng)新點(diǎn) |
| 3 有待進(jìn)一步研究的問題 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 導(dǎo)師簡介 |
| 個(gè)人簡介 |
（6）微生物誘變育種概況及激光在微生物誘變中的應(yīng)用（論文提綱范文）
| 1 微生物的誘變方法 |
| 1.1 化學(xué)誘變 |
| 1.2 物理誘變 |
| 1.3 生物法誘變 |
| 1.3.1 原生質(zhì)體融合法 |
| 1.3.2 基因工程育種法 |
| 2 微生物誘變方法的選擇 |
| 2.1 激光誘變在藻類育種中的應(yīng)用 |
| 2.2 激光誘變在其他領(lǐng)域中的應(yīng)用 |
| 3 展望 |
（7）激光誘變適于制備生物柴油的小球藻的研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 課題背景及意義 |
| 1.2 生物能源介紹 |
| 1.3 微藻制備生物柴油的優(yōu)勢和存在問題 |
| 1.4 小球藻的分類和生物學(xué)特性 |
| 1.4.1 小球藻中油脂合成的關(guān)鍵酶 |
| 1.4.2 小球藻中油脂合成的關(guān)鍵基因 |
| 1.5 微藻誘變方法 |
| 1.5.1 生物法誘變 |
| 1.5.2 化學(xué)誘變 |
| 1.5.3 物理誘變 |
| 1.6 激光器的介紹 |
| 1.6.1 氦氖激光器 |
| 1.6.2 倍頻YAG激光(Nd：YAG)激光 |
| 1.6.3 半導(dǎo)體激光 |
| 1.7 本文研究意義和主要研究內(nèi)容 |
| 1.7.1 研究意義 |
| 1.7.2 研究內(nèi)容 |
| 第二章 三種激光誘變對9號小球藻油脂積累的影響 |
| 引言 |
| 2.1 材料與方法 |
| 2.1.1 儀器 |
| 2.1.2 藻種 |
| 2.1.3 藻種的培養(yǎng) |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 2.2.1 培養(yǎng)條件 |
| 2.2.2 激光誘變方法 |
| 2.2.3 生長曲線 |
| 2.2.4 藻細(xì)胞的收集 |
| 2.2.5 測定油脂方法 |
| 2.2.6 乙酰輔酶α羧化酶活力的測定 |
| 2.2.7 硝酸還原酶活力的測定 |
| 2.2.8 分離傳代 |
| 2.3 結(jié)果與分析 |
| 2.3.1 細(xì)胞密度與OD的關(guān)系 |
| 2.3.2 不同激光處理時(shí)間梯度對9號小球藻油脂產(chǎn)量的影響 |
| 2.3.3 不同激光處理時(shí)間梯度對9號小球藻NR和ACCase活力的影響 |
| 2.3.4 篩選高產(chǎn)油脂突變藻株進(jìn)行繼代培養(yǎng) |
| 本章小結(jié) |
| 第三章 三種激光誘變對31號小球藻油脂積累的影響 |
| 3.1 材料與方法 |
| 3.1.1 儀器 |
| 3.1.2 藻種 |
| 3.1.3 藻種的培養(yǎng) |
| 3.2 方法 |
| 3.3 結(jié)果與分析 |
| 3.3.1 細(xì)胞密度與OD的關(guān)系 |
| 3.3.2 不同激光處理時(shí)間梯度對31號小球藻生物量的影響 |
| 3.3.3 不同激光處理時(shí)間梯度對31號小球藻NR和ACCase活力的影響 |
| 3.3.4 篩選高產(chǎn)油脂藻株進(jìn)行繼代培養(yǎng) |
| 本章小結(jié) |
| 第四章 三種激光誘變對海水小球藻油脂積累的影響 |
| 引言 海水小球藻概括 |
| 4.1 材料與方法 |
| 4.1.1 儀器 |
| 4.1.2 藻種 |
| 4.1.3 藻種的培養(yǎng) |
| 4.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 4.3 結(jié)果與分析 |
| 4.3.1 細(xì)胞密度與OD的關(guān)系 |
| 4.3.2 不同激光處理時(shí)間梯度對海水小球藻總脂含量的影響 |
| 4.3.3 不同激光處理時(shí)間梯度對海水小球藻NR和ACCase活力的影響 |
| 4.3.5 篩選高產(chǎn)油脂藻株進(jìn)行繼代培養(yǎng) |
| 本章小結(jié) |
| 第五章 高產(chǎn)油脂突變藻株的繼代培養(yǎng) |
| 5.1 9號小球藻高產(chǎn)油脂藻株的繼代培養(yǎng) |
| 5.1.1 9號小球藻高產(chǎn)油脂藻株的繼代培養(yǎng)油脂產(chǎn)率結(jié)果 |
| 5.1.2 9號小球藻高產(chǎn)油脂藻株的繼代培養(yǎng)酶活力的測定 |
| 5.2 31號小球藻高產(chǎn)油脂藻株的繼代培養(yǎng) |
| 5.2.1 31號小球藻高產(chǎn)油脂藻株的繼代培養(yǎng)油脂產(chǎn)率結(jié)果 |
| 5.2.2 31號小球藻高產(chǎn)油脂藻株的繼代培養(yǎng)酶活力的測定 |
| 5.3 海水小球藻高產(chǎn)油脂藻株的繼代培養(yǎng) |
| 5.3.1 海水小球藻高產(chǎn)油脂藻株的繼代培養(yǎng)油脂產(chǎn)率結(jié)果 |
| 5.3.2 海水小球藻高產(chǎn)油脂藻株的繼代培養(yǎng)酶活力的測定 |
| 本章小結(jié) |
| 第六章 激光誘變高產(chǎn)小球藻藻株油脂合成相關(guān)基因的表達(dá)模式分析 |
| 引言 |
| 6.1 引物設(shè)計(jì) |
| 6.1.1 引物設(shè)計(jì) |
| 6.1.2 RNA的提取 |
| 6.2 結(jié)果與分析 |
| 6.2.1 引物檢測結(jié)果 |
| 6.2.2 RT-PCR結(jié)果 |
| 6.2.3 9號小球藻相對基因表達(dá)量 |
| 6.2.4 31號小球藻相對基因表達(dá)量 |
| 6.2.5 海水小球藻相對基因表達(dá)量 |
| 6.3 討論 |
| 第七章 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 在讀期間公開發(fā)表的論文 |
| 致謝 |
（8）β-甘露聚糖酶高產(chǎn)菌株的選育及其固定化細(xì)胞產(chǎn)酶條件優(yōu)化（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第1章 緒論 |
| 1.1 β-甘露聚糖酶的分布 |
| 1.2 菌株遺傳改造 |
| 1.3 微生物發(fā)酵生產(chǎn)β-甘露聚糖酶的過程優(yōu)化 |
| 1.4 固定化技術(shù) |
| 1.5 β-甘露聚糖酶的應(yīng)用 |
| 1.5.1 食品醫(yī)藥中的應(yīng)用 |
| 1.5.2 飼料業(yè)中的應(yīng)用 |
| 1.5.3 造紙工業(yè)中的應(yīng)用 |
| 1.5.4 在紡織業(yè)中的應(yīng)用 |
| 1.5.5 石油工業(yè)中的應(yīng)用 |
| 1.6 本研究的目的及意義 |
| 1.6.1 本研究的背景、思路及目的 |
| 1.6.2 本研究的意義 |
| 1.7 本研究的主要技術(shù)路線 |
| 1.8 課題資助名稱 |
| 第2章 材料與方法 |
| 2.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.1.1 供試菌株及質(zhì)粒載體 |
| 2.1.2 培養(yǎng)基 |
| 2.1.3 PCR擴(kuò)增引物 |
| 2.1.4 主要生化試劑及緩沖液配制方法 |
| 2.1.5 主要儀器設(shè)備 |
| 2.2 試驗(yàn)方法 |
| 2.2.1 菌株生長曲線的繪制 |
| 2.2.2 β-甘露聚糖酶酶活力的測定 |
| 2.2.3 菌株的誘變處理 |
| 2.2.4 β-甘露聚糖酶高產(chǎn)突變株培養(yǎng)條件優(yōu)化 |
| 2.2.5 突變菌株的甘露聚糖酶序列測定 |
| 2.2.6 高產(chǎn)突變株固定化方法的確定 |
| 2.2.7 高產(chǎn)突變株最佳固定化方法的優(yōu)化 |
| 2.2.8 高產(chǎn)突變株固定化菌體發(fā)酵條件的確定 |
| 2.2.9 固定化菌體的分批重復(fù)發(fā)酵 |
| 2.2.10 β-甘露聚糖酶粗酶液對染料的脫色效果評價(jià) |
| 2.2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 |
| 第3章 結(jié)果與分析 |
| 3.1 菌株HDYM-04生長曲線的繪制 |
| 3.2 繪制甘露糖標(biāo)準(zhǔn)曲線 |
| 3.3 菌株誘變處理 |
| 3.3.1 紫外線誘變 |
| 3.3.2 氦氖激光誘變 |
| 3.3.3 亞硝基胍誘變 |
| 3.3.4 高產(chǎn)突變株遺傳穩(wěn)定性分析 |
| 3.4 高產(chǎn)突變株G2-3培養(yǎng)條件優(yōu)化 |
| 3.4.1 最佳培養(yǎng)條件的單因素試驗(yàn) |
| 3.4.2 正交試驗(yàn) |
| 3.4.3 驗(yàn)證試驗(yàn) |
| 3.5 高產(chǎn)或低產(chǎn)β-甘露聚糖酶突變株基因序列分析 |
| 3.5.1 β-甘露聚糖酶基因片段的擴(kuò)增 |
| 3.5.2 β-甘露聚糖酶基因測序結(jié)果分析 |
| 3.6 高產(chǎn)突變株G2-3菌體固定化方法的確定 |
| 3.7 最佳固定化方法的優(yōu)化 |
| 3.7.1 菌體濃度(即菌膠比)對固定化菌體產(chǎn)β-甘露聚糖酶的影響 |
| 3.7.2 聚乙烯醇濃度對固定化菌體產(chǎn)β-甘露聚糖酶的影響 |
| 3.8 固定化菌體發(fā)酵條件的確定 |
| 3.8.1 最佳魔芋粉加入量的確定 |
| 3.8.2 最佳接種量的確定 |
| 3.8.3 最佳增殖時(shí)間的確定 |
| 3.8.4 最佳發(fā)酵時(shí)間的確定 |
| 3.9 固定化菌體的分批重復(fù)發(fā)酵次數(shù)的確定 |
| 3.10 β-甘露聚糖酶對染料的脫色效果 |
| 第4章 討論 |
| 4.1 各種誘變技術(shù)對菌株產(chǎn)β-甘露聚糖酶的影響 |
| 4.2 高產(chǎn)或低產(chǎn)突變株序列分析 |
| 4.3 固定化技術(shù)應(yīng)用在β-甘露聚糖酶的生產(chǎn)上的可行性 |
| 4.4 β-甘露聚糖酶對染料的脫色效果 |
| 第5章 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 |
（10）飛秒激光誘變達(dá)托霉素高產(chǎn)菌株技術(shù)及其機(jī)理的研究（論文提綱范文）
| 致謝 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一章 文獻(xiàn)綜述 |
| 1.1 達(dá)托霉素的概述 |
| 1.1.1 達(dá)托霉素的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和理化性質(zhì) |
| 1.1.2 達(dá)托霉素的生產(chǎn)菌種 |
| 1.1.3 達(dá)托霉素的抗菌機(jī)理 |
| 1.1.4 達(dá)托霉素生物合成 |
| 1.2 玫瑰孢鏈霉菌的誘變育種 |
| 1.2.1 激光誘變 |
| 1.2.2 紫外誘變 |
| 1.2.3 NTG誘變 |
| 1.2.4 復(fù)合誘變 |
| 1.2.5 誘變菌種篩選 |
| 1.3 達(dá)托霉素的發(fā)酵工藝 |
| 1.4 本文研究內(nèi)容 |
| 第二章 飛秒激光誘變達(dá)托霉素高產(chǎn)菌株實(shí)驗(yàn) |
| 2.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器 |
| 2.1.1 菌種 |
| 2.1.2 培養(yǎng)基 |
| 2.1.3 實(shí)驗(yàn)所用主要試劑 |
| 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 2.2.1 菌種活化方法 |
| 2.2.2 孢子懸液制備方法 |
| 2.2.3 飛秒激光誘變達(dá)托霉素高產(chǎn)菌株實(shí)驗(yàn) |
| 2.2.4 誘變后高產(chǎn)菌篩選實(shí)驗(yàn) |
| 2.2.5 發(fā)酵培養(yǎng) |
| 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.3.1 飛秒激光誘變參數(shù)的選擇 |
| 2.3.2 飛秒激光誘變篩選結(jié)果 |
| 2.3.3 達(dá)托霉素產(chǎn)量測定 |
| 第三章 飛秒激光誘變達(dá)托霉素高產(chǎn)菌株機(jī)理分析 |
| 3.1 激光生物學(xué)效應(yīng)機(jī)制的物理解釋 |
| 3.2 飛秒激光光束特點(diǎn)及其誘變優(yōu)勢 |
| 3.2.1 飛秒激光光束特點(diǎn)概述 |
| 3.2.2 飛秒激光誘變微生物技術(shù)優(yōu)勢 |
| 3.3 飛秒激光誘變達(dá)托霉素高產(chǎn)菌株機(jī)理研究 |
| 3.4 飛秒激光誘變達(dá)托霉素高產(chǎn)菌株機(jī)理研究展望 |
| 第四章 結(jié)論與展望 |
| 4.1 結(jié)論 |
| 4.2 展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 作者簡歷 |
| 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集 |
四、激光誘變微生物技術(shù)的研究進(jìn)展（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]利用氦氖激光誘變提高枯草芽孢桿菌纖溶酶活力的研究[J]. 孫瑩,王海曼,宋剛,葛菁萍. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào), 2020(35)
- [2]產(chǎn)脂肪酶菌種的誘變篩選及其發(fā)酵工藝的研究[D]. 朱洪霞. 北京化工大學(xué), 2020(02)
- [3]脈沖強(qiáng)光對果膠酶生產(chǎn)菌黑曲霉的誘變研究[D]. 葛新宇. 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué), 2020(08)
- [4]高性能氧化亞鐵硫桿菌菌株的誘變與培育[D]. 李先艷. 西安工程大學(xué), 2019(02)
- [5]放線菌ZZ-9耐藥性菌株篩選及涂抹劑研制[D]. 陳大為. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué), 2018(09)
- [6]微生物誘變育種概況及激光在微生物誘變中的應(yīng)用[J]. 高宏正,李國強(qiáng),鄧素貞,孫海風(fēng),沈義成,張瑞豪,陳國強(qiáng),劉幫會,周士坦,孟春曉,高政權(quán). 黑龍江畜牧獸醫(yī), 2015(09)
- [7]激光誘變適于制備生物柴油的小球藻的研究[D]. 高宏正. 山東理工大學(xué), 2015(04)
- [8]β-甘露聚糖酶高產(chǎn)菌株的選育及其固定化細(xì)胞產(chǎn)酶條件優(yōu)化[D]. 周曉杭. 黑龍江大學(xué), 2014(04)
- [9]微生物物理誘變育種方法的研究進(jìn)展[J]. 王雅君,陳力力,廖杰瓊,姚開波,叢美娟,廖靜. 農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊), 2013(03)
- [10]飛秒激光誘變達(dá)托霉素高產(chǎn)菌株技術(shù)及其機(jī)理的研究[D]. 李海偉. 北京交通大學(xué), 2011(10)
標(biāo)簽：脂肪酶論文; 微生物發(fā)酵論文; 突變理論論文; 微生物論文; 誘變育種論文;