一、腦積水患者腦室穿刺的腦脊液細(xì)胞學(xué)改變初步觀察（論文文獻(xiàn)綜述）
林愛清[1]（2021）在《結(jié)核性腦膜炎長(zhǎng)期不良預(yù)后和耐藥的風(fēng)險(xiǎn)因素及其早期診斷方法的探討》文中研究表明背景:結(jié)核性腦膜炎（Tuberculous meningitis,TBM）是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病,表現(xiàn)為結(jié)核性炎癥、腦水腫、腦積水等引發(fā)的腦膜刺激癥和發(fā)熱、頭痛等結(jié)核中毒癥狀群,具有致死率和致殘率高等特點(diǎn)。薈萃分析顯示,TBM的死亡風(fēng)險(xiǎn)為24.7%,成人晚期艾滋?。℉IV）患者中死亡率超過50%,幸存者神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥風(fēng)險(xiǎn)高達(dá)51%。近年來因?yàn)槿丝诹鲃?dòng)、HIV發(fā)病率增加及耐藥性結(jié)核病例增加等因素影響,結(jié)核性腦膜炎發(fā)病率呈升高趨勢(shì),因?yàn)槠渑R床表現(xiàn)不典型,早期診斷困難,誤診率高,重癥患者致死率和致殘率仍處于較高水平。早期診斷,聯(lián)合應(yīng)用易透過血腦屏障的抗結(jié)核藥物,積極有效的處理顱內(nèi)高壓,以減少后遺癥和防止復(fù)發(fā),是TBM的主要治療原則。臨床上,多數(shù)TBM患者起病緩慢,偶見急性起病,正確診斷取決于對(duì)結(jié)核性腦膜炎病理生理過程和特點(diǎn)的充分認(rèn)識(shí),對(duì)其臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室和影像學(xué)檢查的正確評(píng)價(jià),以及對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)以外結(jié)核病灶的取證。因?yàn)閬喤R床感染的廣泛存在,結(jié)核菌素試驗(yàn)對(duì)成年人診斷意義不大,腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)、葡萄糖水平、氯化物水平和蛋白質(zhì)水平等通常與其他腦膜炎相似。此外不合理或不恰當(dāng)?shù)闹委熓够颊吲R床表現(xiàn)和腦脊液改變不典型,從而增加了診斷難度。考慮到TBM的診斷方法尚不完善,TBM早期診斷需要新的技術(shù)或方法。TBM診斷困難的主要原因是癥狀和體征的非特異性,而作為重要診斷標(biāo)本的腦脊液中結(jié)核菌數(shù)量非常少,難以早期鑒別診斷。發(fā)熱、頭痛、嘔吐、精神狀態(tài)改變和腦膜刺激征是TBM患者最常見的初始癥狀,但這些癥狀在多種疾病中可以出現(xiàn),缺乏疾病特異性。WHO推薦四聯(lián)方案治療TBM,但治療TBM的抗結(jié)核藥物透過血-腦脊液屏障能力不同和殺死MTB的能力存在差異,患者個(gè)體化的腦膜炎炎癥反應(yīng)及重癥患者比如腦積水、腦結(jié)核瘤等病變的壓迫效應(yīng)同樣存在明顯差異,所以TBM的預(yù)后個(gè)體間差異很大,需要深入了解TBM的病理生理學(xué)、臨床特征等因素。4歲以下兒童、老年人群及艾滋病人等免疫力低下者是TBM的易感人群,多項(xiàng)研究對(duì)兒童TBM、HIV合并TBM、老年TBM臨床特征進(jìn)行了深入研究,在改善相應(yīng)類型TBM診斷水平和治療策略的方面發(fā)揮了積極作用。盡管TBM通常被認(rèn)為是HIV患者的機(jī)會(huì)性感染,但在免疫功能正常的HIV陰性個(gè)體中也可以觀察到TBM發(fā)病。國(guó)外研究顯示,皮質(zhì)類固醇的長(zhǎng)期大量應(yīng)用、肝膽臟器疾病等是TBM的常見因素,但部分患者沒有合并基礎(chǔ)疾病,也會(huì)患TBM。中青年人群是TBM患者的重要組成部分,但目前較少見對(duì)該群體TBM患者臨床特征及長(zhǎng)期預(yù)后影響因素的報(bào)道。耐藥性的出現(xiàn)對(duì)全世界結(jié)核病的控制提出了緊迫的挑戰(zhàn),2018年,全球估計(jì)有500000例結(jié)核病病例（在1000萬(wàn)例結(jié)核病病例中）對(duì)利福平耐藥,利福平是一線抗結(jié)核治療的關(guān)鍵藥物之一,一旦耐藥,就需要應(yīng)用昂貴的二線抗結(jié)核藥物,耐藥患者治療時(shí)間延長(zhǎng),治療時(shí)出現(xiàn)的毒副反應(yīng)增加,平均治療成功率只有56%。盡管近年來在開發(fā)抗TB的簡(jiǎn)化預(yù)防方案方面取得了顯著進(jìn)展,但由于目前沒有檢測(cè)潛伏性結(jié)核感染（LTBI）的方法來確定感染菌株的藥物敏感性,因此抗TB感染的預(yù)防性治療變得復(fù)雜。2016年至2017年,在30個(gè)耐多藥結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家中,有6個(gè)國(guó)家報(bào)告的耐多藥結(jié)核病病例數(shù)增加了 30%以上。2018年全世界估計(jì)有48.4萬(wàn)例耐多藥/利福平耐藥結(jié)核病（MDR/RR-TB）的發(fā)病病例。2019年,全球3.3%的新發(fā)結(jié)核病病例和17.7%的先前治療病例是MDR-TB,在中國(guó),7.1%的新病例和23%的先前治療病例屬于MDR-TB,超過了全球平均水平。一些研究表明,最近耐多藥結(jié)核病菌株和廣泛耐藥菌株的傳播已變得越來越嚴(yán)重,傳播模式占主導(dǎo)地位,不僅僅是抗生素使用不當(dāng)引起耐藥性的出現(xiàn),這突出了 DR-TB防治的重要性。正如來自不同國(guó)家的研究人員的共識(shí),控制DR-TB的流行對(duì)全球結(jié)核病控制和公共衛(wèi)生起著至關(guān)重要的作用。國(guó)外研究顯示,2017年耐多藥結(jié)核病的平均成本為7141美元,幾乎是藥物敏感結(jié)核病的6倍,給患者和醫(yī)務(wù)工作者造成了巨大的損失。隨著結(jié)核病治療從標(biāo)準(zhǔn)化治療轉(zhuǎn)向個(gè)體化治療,有關(guān)人群耐藥模式的信息變得越來越重要。在我國(guó)結(jié)核病高發(fā)的背景下,重視結(jié)核桿菌的耐藥特點(diǎn),為臨床合理用藥提供決策依據(jù)是非常重要的。隨著耐藥及耐多藥結(jié)核病的流行,耐藥性TBM患者逐漸增多,嚴(yán)重影響了結(jié)核性腦膜炎患者的預(yù)后。在耐藥性結(jié)核性腦膜炎患者的治療中,早期診斷、經(jīng)驗(yàn)性治療、調(diào)整治療方案對(duì)患者的預(yù)后尤為重要,發(fā)現(xiàn)耐藥TBM患者的早期臨床特征,可能為耐藥結(jié)核性腦膜炎的診斷和及時(shí)治療提供依據(jù)。目前TBM診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是腦脊液中檢測(cè)到MTB,但是腦脊液涂片抗酸染色的陽(yáng)性率僅為10%,而腦脊液MTB培養(yǎng)耗費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng),通常需要2周以上時(shí)間,而且培養(yǎng)的陽(yáng)性率只有20%～30%,對(duì)于臨床的早期診斷價(jià)值有限。近年來出現(xiàn)了多種新的結(jié)核病的診斷技術(shù),其中分子診斷技術(shù)是近幾年的重要突破,其代表即Xpert MTB/RIF方法。但無論是傳統(tǒng)的腦脊液MTB培養(yǎng)法還是新的Xpert MTB/RIF檢測(cè)法,其診斷結(jié)核性腦膜炎的敏感度仍然很低。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,高通量測(cè)序（High-throughput sequencing）已經(jīng)成功應(yīng)用于腫瘤、糖尿病、產(chǎn)前診斷、臨床病原體檢測(cè)等領(lǐng)域,二代測(cè)序（next-generation sequencing,NGS）是一種新興的高通量測(cè)序方法,可以快速的對(duì)DNA或RNA樣本的堿基進(jìn)行測(cè)序,該技術(shù)目前已被報(bào)道用于細(xì)菌、真菌和病毒等多種病原體的診斷,尤其是該技術(shù)已被報(bào)道用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的診斷,然而,該技術(shù)對(duì)于TBM的診斷價(jià)值尚未明確。目的:第一部分:探討中青年TBM患者的臨床特點(diǎn)及影響其長(zhǎng)期不良預(yù)后的風(fēng)險(xiǎn)因素。第二部分:探討耐藥TBM患者的臨床特征及分析產(chǎn)生耐藥的危險(xiǎn)因素。第三部分:評(píng)價(jià)二代測(cè)序技術(shù)對(duì)于TBM患者的早期診斷價(jià)值。方法;第一部分:收集山東省胸科醫(yī)院2009年1月至2013年12月間住院治療的中青年TBM患者資料進(jìn)行回顧性分析,記錄患者的臨床資料,分析其隨訪5年時(shí)功能預(yù)后。首先根據(jù)預(yù)后對(duì)臨床資料進(jìn)行卡方檢驗(yàn)或t檢驗(yàn),對(duì)其中有統(tǒng)計(jì)意義（P<0.05）的變量賦值（連續(xù)變量或定義變量）,然后經(jīng)單因素與多因素logistic回歸分析影響患者長(zhǎng)期不良預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。第二部分:收集2009年1月至2016年12月期間住院治療的培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)核性腦膜炎患者資料進(jìn)行回顧性研究,收集患者的臨床、實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)和人口統(tǒng)計(jì)學(xué)特征。為了確定耐藥結(jié)核性腦膜炎的臨床特征并找到可能導(dǎo)致耐藥的危險(xiǎn)因素,我們采用了單變量比較和多變量邏輯回歸分析。第三部分:前瞻性納入2018年2月至2018年8月于山東省胸科醫(yī)院就診的臨床懷疑結(jié)核性腦膜炎的患者共50例,并跟蹤隨訪其診療結(jié)局。送檢腦脊液標(biāo)本均進(jìn)行二代測(cè)序,測(cè)序所得原始序列與病原微生物數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行對(duì)比得到最終結(jié)果。二代測(cè)序結(jié)果以檢測(cè)到結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群唯一比對(duì)序列為陽(yáng)性,未檢測(cè)到唯一比對(duì)序列為陰性。以符合腦脊液結(jié)核菌培養(yǎng)陽(yáng)性、涂片陽(yáng)性、Xpert MTB/RIF檢測(cè)陽(yáng)性及結(jié)核分枝桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性等4項(xiàng)中至少1項(xiàng)即為確診結(jié)核性腦膜炎患者;臨床可疑結(jié)核性腦膜炎且抗結(jié)核治療有效為臨床診斷患者;有其他病原學(xué)依據(jù)或臨床排除結(jié)核性腦膜炎者為非結(jié)核性腦膜炎患者。分析二代測(cè)序在結(jié)核性腦膜炎早期診斷中的敏感性和特異度。結(jié)果:第一部分:本研究共篩選600例患者,其中男339例,女261例,平均年齡（36±19）歲;預(yù)后不良率42.17%（253/600例）。單因素分析顯示不同預(yù)后患者年齡（t=-3.723,P<0.05）、分期（Z=-4.789,P=0.000）、意識(shí)改變（χ2=10.198,P=0.001）、認(rèn)知功能障礙（χ2=7.813,P=0.000）、顱神經(jīng)麻痹（χ2=5.911,P=0.041）、外周神經(jīng)功能異常（χ2=14.179,P=0.017）、腦膜刺激征（χ2=6.951,P=0.008）、腦脊液蛋白含量（Z=-4.835,P=0.015）、腦積水（χ2=11.564,P=0.001）、腦梗死（χ2=7.142,P=0.017）、耐藥結(jié)核（χ2=0.217,P=0.004）存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。多因素logistic 回歸分析顯示患者年齡[OR1.059,95%CI1.025,1.087),P=0.000]、意識(shí)改變[OR=3.545,95%CI（1.069,10.685）,P=0.037]、MRCⅢ期[OR=23.985,95%CI（3.878,40.129）,P=0.000]、腦積水[OR=2.917,95%CI（1.049,8.613）,P=0.023]、腦梗死[OR=3.178,95%CI（0.981,8.173）,P=0.019]、耐藥結(jié)核[OR=l1.672,95%CI（1.681,30.112）,P=0.001]與是導(dǎo)致預(yù)后不良的風(fēng)險(xiǎn)因素。第二部分:本研究共篩選164例結(jié)核菌培養(yǎng)陽(yáng)性患者,其中耐藥結(jié)核性腦膜炎41例（25%）。耐藥結(jié)核性腦膜炎比藥物敏感結(jié)核性腦膜炎有更高的死亡率（46.3%vs 8.9%,P<0.001）。住院時(shí)間（OR 1.059,95%CI 1.025,1087）、嘔吐（OR 3.545,95%CI 1.069,10.685）、腦脊液 ADA（OR 3.178,95%CI 0.981,8.173）、腦脊液中性粒細(xì)胞學(xué)占優(yōu)勢(shì)（OR 11.672,95%CI 1.681,30.112）、既往結(jié)核病史（OR 23.985,95%CI 3.878,40.129）、合并其他臟器結(jié)核（OR 8.161,95%CI 1.235,11.269）、年齡（OR 5.471,95%CI 1.051,8.954）、性別（OR 5.471,95%CI 1.051,8.954）、腦壓（OR2.917,95%CI 1.049,8.613）為耐藥結(jié)核性腦膜炎的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。第三部分:確診為結(jié)核性腦膜炎患者22例中Xpert MTB/RIF檢測(cè)陽(yáng)性13例,培養(yǎng)陽(yáng)性6例,結(jié)核核酸PCR檢測(cè)陽(yáng)性5例,臨床診斷為結(jié)核性腦膜炎患者12例,非結(jié)核性腦膜炎患者16例。在確診及臨床診斷患者中,二代測(cè)序技術(shù)檢測(cè)到結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群系列20例,敏感度為58.8%（20/34）,特異度為100%（16/16）。在確診患者中,二代測(cè)序的敏感度為63.6%（14/22）;在同步進(jìn)行結(jié)核分枝菌培養(yǎng)、Xpert MTB/RIF檢測(cè)與二代測(cè)序的50例標(biāo)本中,以臨床診斷為標(biāo)準(zhǔn),3種方法的特異度均為100%（16/16）;傳統(tǒng)方法、Xpert MTB/RIF檢測(cè)及二代測(cè)序的敏感度分別為29.4%（10/34）、38.2（13/24）和58.8（20/34）,傳統(tǒng)檢測(cè)方法與二代測(cè)序敏感度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（McNemar檢驗(yàn):χ2=8.333、P=0.013）,Xpert MTB/RIF 檢測(cè)及二代測(cè)序比較（χ2=8.333、P=0.065）,差異性無顯著性。傳統(tǒng)方法與二代測(cè)序聯(lián)合檢測(cè)的敏感度高達(dá)82.4%（28/34）。結(jié)論:第一部分:年齡、MRC Ⅲ期、意識(shí)改變、腦積水、腦梗死、耐藥結(jié)核是結(jié)核性腦膜炎長(zhǎng)期不良預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。第二部分:耐藥結(jié)核性腦膜炎比藥物敏感性結(jié)核性腦膜炎的死亡風(fēng)險(xiǎn)更高,預(yù)后更差,男性、未婚、住院時(shí)間、嘔吐、腦脊液ADA、腦脊液中性粒細(xì)胞數(shù)占優(yōu)勢(shì)、既往結(jié)核病史、合并其他臟器結(jié)核為耐藥結(jié)核性腦膜炎的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。第三部分:二代測(cè)序技術(shù)能夠較快速地檢測(cè)腦脊液中的結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群,且其敏感性和特異度均較顯著,可作為結(jié)核性腦膜炎的早期診斷指標(biāo)。二代測(cè)序聯(lián)合傳統(tǒng)檢測(cè)方法可提高檢出率。
楊少波,趙杰[2]（2020）在《分流手術(shù)治療肺癌軟腦脊膜癌病長(zhǎng)期療效觀察與文獻(xiàn)回顧》文中提出目的觀察分流手術(shù)治療肺癌軟腦脊膜癌病的長(zhǎng)期療效。方法回顧性分析2012—2020年間中南大學(xué)湘雅醫(yī)院神經(jīng)外科實(shí)施分流手術(shù)的13例肺癌軟腦脊膜癌病患者的臨床與隨訪資料,對(duì)其臨床表現(xiàn)、分流手術(shù)后效果、分流手術(shù)并發(fā)癥、生存時(shí)間進(jìn)行分析。結(jié)果 13例患者中男5例、女8例,平均年齡50.8歲（34～64歲）。所有患者術(shù)前腰椎穿刺測(cè)壓>250 mmH2O且均存在顱高壓相關(guān)的頭痛,實(shí)施分流手術(shù)后所有患者頭痛迅速明顯緩解,其中3例住院期間腰椎穿刺測(cè)壓證實(shí)顱內(nèi)壓下降至100 mmH2O以下。隨訪1～15個(gè)月,9例死亡,4例存活;期間1例發(fā)生腹腔積液,1例發(fā)生心房端堵管。結(jié)論肺癌軟腦脊膜癌病患者的顱高壓癥狀可以通過分流手術(shù)長(zhǎng)期有效緩解,且其腦脊液性狀可能并不增加分流管功能障礙的發(fā)生概率。該類患者預(yù)后不良,其治療仍需進(jìn)一步研究與探索。
韓偉杰[3]（2020）在《Krause入路切除松果體區(qū)病變術(shù)后小腦損傷的相關(guān)因素臨床分析》文中提出目的回顧性分析26例經(jīng)Krause入路進(jìn)行手術(shù)的松果體區(qū)病變患者的臨床數(shù)據(jù)資料,研究經(jīng)Krause入路松果體區(qū)腫瘤切除術(shù)后發(fā)生小腦損傷的危險(xiǎn)因素,為松果體區(qū)腫瘤手術(shù)入路選擇和術(shù)后小腦損傷的預(yù)防提供依據(jù)。方法收集2012年9月至2019年9月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科經(jīng)Krause入路切除治療的26例松果體區(qū)病變患者相關(guān)資料,應(yīng)用單因素分析年齡、性別、手術(shù)時(shí)長(zhǎng)、入路方式、病理類型、腦積水、切除程度、直竇角度、病變大小、矢狀位病變距直竇延長(zhǎng)線最大距離（上、下）、軸位病變距中線最大距離、病變深部距硬膜距離、病變淺部距硬膜距離、直竇延長(zhǎng)線與胼胝體的高低關(guān)系、病變與頂蓋的前后關(guān)系、病變質(zhì)地、術(shù)前是否腦室外引流、術(shù)中是否腦室穿刺等因素是否與術(shù)后小腦損傷有關(guān),多因素Logistic回歸分析術(shù)后小腦損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。結(jié)果單因素分析表明手術(shù)時(shí)長(zhǎng)（P=0.023）、直竇角度（P=0.002）和矢狀位病變距直竇延長(zhǎng)線下方距離（0.039）與術(shù)后小腦損傷有關(guān)。多因素logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)直竇角度（P=0.005）是預(yù)測(cè)松果體區(qū)病變經(jīng)Krause入路術(shù)后小腦損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。性別、年齡、入路方式、病理、腦積水、切除程度、病變最大直徑、矢狀位距直竇延長(zhǎng)線上方距離、軸位距直竇延長(zhǎng)線最大距離、病變深部距硬膜距離、病變淺部距硬膜距離、直竇延長(zhǎng)線與胼胝體高低關(guān)系、病變與頂蓋前后關(guān)系、病變質(zhì)地、術(shù)前是否腦室引流、術(shù)中是否腦室穿刺與術(shù)后小腦損傷無關(guān)（P>0.05）。結(jié)論1.Krause入路切除松果體區(qū)病變時(shí),手術(shù)時(shí)長(zhǎng)和矢狀位病變距直竇延長(zhǎng)線下方距離與小腦損傷有關(guān),直竇角度為術(shù)后小腦損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。2.術(shù)前對(duì)直竇角度進(jìn)行評(píng)估能夠預(yù)測(cè)術(shù)后發(fā)生小腦損傷的風(fēng)險(xiǎn),對(duì)于直竇角度越大的患者,經(jīng)Krause入路切除松果體區(qū)病變時(shí)術(shù)后小腦損傷的可能性就越高,可以選擇其他入路進(jìn)行手術(shù)。3.手術(shù)時(shí)間過長(zhǎng)及矢狀位病變距直竇延長(zhǎng)線下方距離過大,術(shù)后可能發(fā)生小腦損傷,術(shù)后應(yīng)密切關(guān)注小腦損傷的可能。
馬春華[4]（2020）在《肺腺癌腦（膜）轉(zhuǎn)移患者腦脊液基因檢測(cè)臨床研究》文中指出背景:肺腺癌腦（膜）轉(zhuǎn)移患者預(yù)后較差,伴有表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）突變的肺腺癌腦（膜）患者可以從EGFR酪氨酸激酶抑制劑（TKIs）治療中明顯獲益。因此,明確腦轉(zhuǎn)移瘤的分子特征對(duì)于制定治療方案非常重要,但目前有關(guān)肺腺癌腦（膜）轉(zhuǎn)移患者腦轉(zhuǎn)移瘤和腦脊液的分子特征研究數(shù)據(jù)仍然非常有限。目的:本課題主要是對(duì)肺腺癌腦（膜）轉(zhuǎn)移患者行腦脊液基因檢測(cè)的臨床資料進(jìn)行分析,探討腦脊液基因檢測(cè)的臨床價(jià)值。（1）明確肺腺癌腦轉(zhuǎn)移腦脊液的分子特征;（2）明確肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移腦脊液的分子特征及臨床指導(dǎo)意義;（3）明確肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移腦脊液ctDNA變化的臨床意義。對(duì)象和方法:（1）對(duì)比分析5例肺腺癌腦轉(zhuǎn)移患者的腦轉(zhuǎn)移瘤組織、CSF循環(huán)腫瘤DNA、血漿ctDNA和CTCs 4份標(biāo)本的二代測(cè)序（NGS）結(jié)果;對(duì)比分析11例肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移患者與10例肺腺癌腦轉(zhuǎn)移患者的CSF循環(huán)腫瘤DNA、血漿ctDNA和CTCs 3份標(biāo)本的二代測(cè)序結(jié)果。（2）收集20例肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移患者的臨床資料,應(yīng)用NGS法對(duì)肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移患者的腦脊液ctDNA和外周血ctDNA雙標(biāo)本進(jìn)行基因檢測(cè)并對(duì)比分析檢測(cè)結(jié)果,亞組分析初診的肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移和復(fù)診的腦膜轉(zhuǎn)移腦脊液ctDNA和外周血ctDNA的分子特征,應(yīng)用檢測(cè)結(jié)果指導(dǎo)臨床制定治療方案,通過療效評(píng)價(jià)對(duì)基因檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。（3）收集8例肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移患者在接受EGFR-TKIs分子靶向藥物治療過程中的CSF標(biāo)本,進(jìn)行CSF常規(guī)、生化檢查、細(xì)胞學(xué)檢查、腫瘤標(biāo)志物檢查、NGS法基因檢測(cè),對(duì)腦脊液檢查指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果:（1）共21例肺腺癌腦（膜）轉(zhuǎn)移患者進(jìn)入本研究,10例為肺腺癌腦實(shí)質(zhì)轉(zhuǎn)移患者,11例為肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移患者。（1）5例肺腺癌腦轉(zhuǎn)移患者的CSF和腦轉(zhuǎn)移瘤組織基因檢測(cè)結(jié)果提示EGFR、TP53基因突變狀態(tài)一致,腦脊液ctDNA具有獨(dú)特的基因譜。（2）21例肺腺癌腦（膜）轉(zhuǎn)移患者腦脊液ctDNA、血漿ctDNA和CTCs 3份標(biāo)本的基因突變檢出率分別為95.24%、66.67%、39.09%,腦脊液標(biāo)本EGFR基因突變檢測(cè)陽(yáng)性率明顯高于外周血ctDNA、CTCs（P<0.05）。（3）、腦膜轉(zhuǎn)移患者腦脊液標(biāo)本EGFR基因檢測(cè)陽(yáng)性率明顯高于腦實(shí)質(zhì)轉(zhuǎn)移患者（81.82%Vs 30%）,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.008）。（2）共20例肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移患者進(jìn)入本研究,初診的腦膜轉(zhuǎn)移患者4例（20.0%）,復(fù)診的肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移患者16例（80.0%）。（1）20例患者接受腦脊液和血液標(biāo)本基因檢測(cè),EGFR基因經(jīng)典突變檢出率分別為45.0%、20.0%,非經(jīng)典突變和復(fù)合突變的檢測(cè)率分別為45.0%、10.0%。腦脊液和血液基因檢測(cè)的EGFR基因陽(yáng)性率的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.001）。（2）16例復(fù)治的腦膜轉(zhuǎn)移中,7例患者根據(jù)腦脊液和血液基因檢測(cè)結(jié)果調(diào)整靶向藥物,客觀緩解率（ORR）:85.71%,疾病控制率（DCR）:100%。（3）4例初診腦膜轉(zhuǎn)移患者中,3例EGFR陽(yáng)性患者接受EGFR-TKIs治療,ORR為75.0%,DCR為75.0%。（3）收集8例肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移患者,全組病例用藥前后腦脊液細(xì)胞學(xué)、常規(guī)、生化、腦脊液CEA檢查結(jié)果均無明顯差異。用藥前后腦脊液基因檢測(cè)EGFR突變?yōu)橄嗤稽c(diǎn),均未發(fā)現(xiàn)耐藥突變,但檢測(cè)豐度明顯低于首次檢測(cè)的豐度,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.016）。結(jié)論:（1）腦脊液ctDNA具有更高的檢測(cè)敏感性和存在獨(dú)特的驅(qū)動(dòng)基因突變譜,腦脊液ctDNA可以更好地代表顱內(nèi)病變的分子特征,尤其針對(duì)腦膜轉(zhuǎn)移患者。（2）肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移患者腦脊液標(biāo)本較外周血標(biāo)本具有更高的EGFR基因突變陽(yáng)性率,腦脊液標(biāo)本檢測(cè)出更高比例的EGFR基因非經(jīng)典突變,可能提示了在接受EGFR-TKIs治療過程中出現(xiàn)臨床癥狀進(jìn)展的腦膜轉(zhuǎn)移患者的腦脊液具有獨(dú)特的分子特征,患者病情進(jìn)展不能簡(jiǎn)單的用耐藥基因來解釋,可能與EGFR基因非經(jīng)典突變導(dǎo)致了對(duì)藥物不敏感有關(guān),而有一些非經(jīng)典突變的臨床意義尚待進(jìn)一步研究探討。（3）腦脊液CEA值和突變基因的豐度在治療過程中會(huì)出現(xiàn)降低,但會(huì)維持在一定的水平,這可能是患者病情緩慢進(jìn)展的原因之一,而不僅僅是因?yàn)槟退幬稽c(diǎn)的出現(xiàn)。腦脊液基因檢測(cè)可能被用于動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)腦膜轉(zhuǎn)移的腫瘤負(fù)荷情況,對(duì)接受EGFR-TKIs治療的療效和預(yù)后評(píng)估有一定的指示作用。
董軍成[5]（2020）在《前循環(huán)顱內(nèi)破裂動(dòng)脈瘤栓塞術(shù)后應(yīng)用腰大池引流的拔管時(shí)機(jī)探討》文中研究說明背景:顱內(nèi)動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血（aSAH）是神經(jīng)外科及神經(jīng)介入科常見的急危重癥之一。SAH后再出血以及蛛網(wǎng)膜下腔中血性腦脊液（CSF）所引發(fā)腦血管痙攣（CVS）[1]、腦水腫、遲發(fā)性缺血性神經(jīng)功能損害（DIND）[2]、分流依賴性腦積水（SDHC）[3]等一系列嚴(yán)重并發(fā)癥,使aSAH病死率達(dá)30%～50%[4-6]。最新研究顯示相比開顱夾閉,血管內(nèi)栓塞能明顯降低致殘致死率[7,8],使越來越多的aSAH患者選擇血管內(nèi)栓塞治療。雖然血管內(nèi)動(dòng)脈瘤栓塞術(shù)能及時(shí)地控制動(dòng)脈瘤破裂再出血,但是蛛網(wǎng)膜下腔的積血不能隨介入手術(shù)所清除。目前很多研究顯示,腰大池置管引流術(shù)（LD）能夠及時(shí)有效的引流蛛網(wǎng)膜下腔的血性腦脊液,對(duì)于置換血性腦脊液、降低顱內(nèi)壓及減少SAH并發(fā)癥、改善預(yù)后等方面具有重要的臨床意義[11-14]。但是,LD有許多相關(guān)并發(fā)癥急需進(jìn)一步探討和預(yù)防[15-17]。其中LD相關(guān)CSF感染的發(fā)病率文獻(xiàn)報(bào)道1%-18%[18-20],以其高發(fā)病率及高病死率引起廣泛關(guān)注。近年來很多中心進(jìn)行了置管感染相關(guān)因素方面的探索,譬如手術(shù)操作與導(dǎo)管相關(guān)感染關(guān)系、置管時(shí)間長(zhǎng)短與感染風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系、每日留取標(biāo)本化驗(yàn)是否增加感染風(fēng)險(xiǎn)、預(yù)防性使用抗生素能否降低CSF感染率等[20-22]。其中,很多研究提示引流管留置時(shí)間過長(zhǎng)是導(dǎo)致置管引流發(fā)生CSF感染的重要危險(xiǎn)因素[20,23,24]?；仡櫦韧墨I(xiàn),對(duì)于aSAH病人,腰大池持續(xù)引流后的拔管時(shí)機(jī)、持續(xù)引流時(shí)間沒有明確的標(biāo)準(zhǔn),這對(duì)LD相關(guān)CSF感染的預(yù)防和管理提出了重大挑戰(zhàn)。因此,很有必要對(duì)aSAH術(shù)后放置腰大池引流管的拔管時(shí)機(jī)進(jìn)行進(jìn)一步探究。目的:回顧性分析連續(xù)一段時(shí)期內(nèi)前循環(huán)顱內(nèi)破裂動(dòng)脈瘤栓塞術(shù)后應(yīng)用LD的病例資料,探討aSAH栓塞術(shù)后LD合適的拔管時(shí)機(jī),分析LD的拔管時(shí)機(jī)與CSF感染、臨床預(yù)后的關(guān)系。同時(shí),也對(duì)意外脫管、堵管的病例給出是否再次進(jìn)行LD治療的建議。方法:搜集河南大學(xué)淮河臨床學(xué)院神經(jīng)外科和鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)介入科2017年1月1日至2019年7月31日前循環(huán)顱內(nèi)破裂動(dòng)脈瘤栓塞術(shù)后應(yīng)用腰大池引流術(shù)的首次SAH病例,病種涉及頸內(nèi)動(dòng)脈顱內(nèi)段動(dòng)脈瘤、前交通動(dòng)脈瘤、大腦中動(dòng)脈M1段及其分叉部動(dòng)脈瘤。所有病例在動(dòng)脈瘤血管介入栓塞治療后放置LD。收集所有入組病例年齡、性別、LD持續(xù)時(shí)間、拔管前腦脊液中RBC計(jì)數(shù)、CSF感染時(shí)LD持續(xù)時(shí)間、拔管后發(fā)生腦梗死、腦積水情況以及出院后6月m RS評(píng)分。應(yīng)用IBM SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以百分?jǐn)?shù)、中位數(shù)（下四分位數(shù),上四分位數(shù)）及均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示,組間比較采用單因素方差分析、獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)、多樣本Kruskal-Wallis檢驗(yàn),變量相互關(guān)系采用線性回歸分析,以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.共收集病例332例,男性128例,女性204例,男性:女性≈1:1.6;年齡34～80歲,平均（59.11±10.76）歲,Hunt-Hess分級(jí)Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)、Ⅳ級(jí)分別為190例、97例、45例;其中,LD術(shù)后CSF感染36例,總感染發(fā)生率10.84%。2.36例CSF感染患者的感染時(shí)間主要集中在置管后第6～9天,占72.2%;在CSF感染的后續(xù)治療中,不拔除引流管的病例與拔除引流管后連續(xù)腰穿、拔除引流管后重新放置LD的病例6個(gè)月預(yù)后經(jīng)獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn),P值分別為0.046、0.044,<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,結(jié)合各組m RS評(píng)分,提示不拔除引流管的預(yù)后與拔除引流管后連續(xù)腰穿、拔除引流管后重新放置LD的預(yù)后要差;拔除引流管后連續(xù)腰穿與拔除引流管后重新放置LD的病例相比,P=1.000>0.05,說明這兩組病例的處理方式對(duì)預(yù)后無明顯差別。3.線性相關(guān)分析表明,296例無CSF感染患者拔管時(shí)CSF常規(guī)中RBC計(jì)數(shù)與6個(gè)月隨訪m RS評(píng)分具有線性回歸關(guān)系,提示腦脊液中RBC計(jì)數(shù)在很大程度上影響了m RS評(píng)分。因此,我們可以依據(jù)拔管時(shí)腦脊液中RBC計(jì)數(shù)對(duì)SAH患者放置腰大池引流管的效果進(jìn)行分析,選擇最合適的RBC計(jì)數(shù)范圍進(jìn)行拔管。4.經(jīng)Kruskal-Wallis檢驗(yàn),173例Hunt-HessⅡ級(jí)無CSF感染患者的預(yù)后H值為7.748,P=0.257>0.05,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明對(duì)于Hunt-HessⅡ級(jí)的aSAH來說,不同CSF中RBC計(jì)數(shù)的預(yù)后無明顯差別。5.對(duì)87例Hunt-Hess III級(jí)無CSF感染患者的預(yù)后進(jìn)行非參數(shù)檢驗(yàn),顯示拔管時(shí)CSF中RBC計(jì)數(shù)3000～5999/mm3組與6000～9999/mm3組的預(yù)后t值為3.610,P=0.005<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示3000～5999/mm3組與6000～9999/mm3組的預(yù)后有差異,說明Hunt-Hess III級(jí)患者的拔管時(shí)機(jī)為CSF中RBC計(jì)數(shù)<6000/mm3。6.對(duì)36例Hunt-Hess IV級(jí)無CSF感染患者的預(yù)后進(jìn)行非參數(shù)檢驗(yàn),結(jié)果提示拔管時(shí)CSF中RBC計(jì)數(shù)3000～5999/mm3組與6000～9999/mm3組的預(yù)后H值為4.333,P=0.037<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示3000～5999/mm3組與6000～9999/mm3組的預(yù)后有差異,說明Hunt-Hess IV級(jí)患者的拔管時(shí)機(jī)為CSF中RBC計(jì)數(shù)<6000/mm3。7.在296例無CSF感染的患者中,DIND有18例,發(fā)病率6.08%,拔管時(shí)CSF中RBC計(jì)數(shù)<6000/mm3有10例,RBC計(jì)數(shù)≥6000/mm3有8例,經(jīng)χ2檢驗(yàn)χ2值4.993,P=0.025<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,認(rèn)為CSF中RBC計(jì)數(shù)<6000/mm3與RBC計(jì)數(shù)≥6000/mm3的DIND發(fā)病率不同,結(jié)合各自的組內(nèi)發(fā)病比例（10/218<8/60）,提示拔管時(shí)CSF中RBC計(jì)數(shù)<6000/mm3能降低DIND的發(fā)病率。8.在296例無CSF感染的患者中,發(fā)生SDHC共有30例,發(fā)病率10.14%,拔管時(shí)CSF中RBC計(jì)數(shù)<6000/mm3有16例,RBC計(jì)數(shù)≥6000/mm3有14例,經(jīng)χ2檢驗(yàn)χ2值10.591,P=0.001<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,認(rèn)為CSF中RBC計(jì)數(shù)<6000/mm3與RBC計(jì)數(shù)≥6000/mm3的SDHC發(fā)病率不同,結(jié)合各自的組內(nèi)發(fā)病比例（16/212<14/54）,提示拔管時(shí)CSF中RBC計(jì)數(shù)<6000/mm3能降低SDHC的發(fā)病率。結(jié)論:1.對(duì)于Hunt-Hess II級(jí)的aSAH患者,LD的放置對(duì)預(yù)后可能沒有影響,不建議進(jìn)行LD,以減少LD相關(guān)感染等并發(fā)癥。2.對(duì)于Hunt-Hess III級(jí)和Hunt-Hess IV級(jí)的aSAH患者,放置LD有利于良好的預(yù)后,拔管時(shí)機(jī)為CSF中RBC計(jì)數(shù)<6000/mm3,以減少留管時(shí)間,這對(duì)預(yù)防留置引流管所引發(fā)的CSF感染可能是有益的。3.對(duì)于aSAH患者,拔管時(shí)CSF中RBC計(jì)數(shù)<6000/mm3能降低DIND及SDHC的發(fā)病率。4.對(duì)于CSF感染的病例,我們的建議是直接拔除引流管,重新放置新的腰大池引流管或連續(xù)腰椎穿刺置換感染CSF,并使用敏感抗菌藥物。
張歡[6]（2020）在《腦室腹腔分流術(shù)前腦脊液參數(shù)異常、術(shù)后體溫變化與術(shù)后顱內(nèi)感染的相關(guān)性研究》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理腦積水是指由于腦脊液產(chǎn)生、吸收失衡和（或）腦脊液循環(huán)受阻,引起腦脊液循環(huán)動(dòng)力學(xué)異常,導(dǎo)致腦脊液在腦室、蛛網(wǎng)膜下腔異常積聚,使其部分或全部異常擴(kuò)大者[1]。腦積水在普通人群中發(fā)病率達(dá)1%～1.5%,且隨人口數(shù)量的增長(zhǎng)而遞增[2]。腦積水是神經(jīng)外科常見的疾病,其發(fā)病年齡范圍廣泛,從新生兒到成人均可發(fā)病。根據(jù)病因,可分為原發(fā)性和繼發(fā)性腦積水。繼發(fā)性腦積水多見于顱腦外傷、出血、腫瘤、感染等[3]。腦積水患者臨床表現(xiàn)為顱高壓的癥狀,如頭痛、嘔吐、視乳頭水腫、復(fù)視、眩暈等,或出現(xiàn)步態(tài)不穩(wěn)、癡呆、尿失禁“三聯(lián)癥”,或顱內(nèi)原發(fā)病治療后意識(shí)好轉(zhuǎn)的患者逐漸又出現(xiàn)意識(shí)障礙加重。腦室腹腔分流術(shù)是當(dāng)前治療腦積水最常用且有效的方法[4-6]。腦積水患者盡早行分流手術(shù)有更好的預(yù)后[7]。因此,早期治療具有積極意義。然而,術(shù)后感染是腦室腹腔分流術(shù)失敗的重要因素,尤其是術(shù)后近期失敗的最主要原因。術(shù)前顱內(nèi)感染是腦室腹腔分流術(shù)的絕對(duì)禁忌癥[8]。但是對(duì)于顱內(nèi)感染尤其是隱匿性的顱內(nèi)感染的診斷通常比較困難。臨床上以腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)作為顱內(nèi)感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn),但是腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率低,時(shí)間長(zhǎng),臨床上很多腦積水患者亟需手術(shù)治療,往往不能通過腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果指導(dǎo)手術(shù)。對(duì)于絕大多數(shù)腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)陰性的患者,需通過腦脊液中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、氯、葡萄糖及蛋白指標(biāo)并結(jié)合臨床癥狀（發(fā)熱）及體征（腦膜刺激征）進(jìn)行綜合判斷是否為顱內(nèi)感染。因此,顱內(nèi)感染的臨床診斷困難重重,并無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),存在假陰性假陽(yáng)性等問題[9,10]。神經(jīng)外科手術(shù)術(shù)后發(fā)熱癥狀較為常見,是診斷顱內(nèi)感染的診斷至關(guān)重要的指標(biāo),目前腦室腹腔分流術(shù)后體溫變化與術(shù)后顱內(nèi)感染的相關(guān)性研究鮮見報(bào)道。大部分腦積水患者都處于亟需手術(shù)改善癥狀的階段,而是否存在顱內(nèi)感染直接影響患者的治療方案及預(yù)后。在實(shí)際臨床工作中,許多患者腦脊液中白細(xì)胞、氯、葡萄糖及蛋白指標(biāo)并不在正常范圍內(nèi),但因病情需要,仍然行腦室腹腔分流手術(shù),術(shù)后并未出現(xiàn)顱內(nèi)感染而拔除分流管。因此,本研究目的旨在探索腦室腹腔分流術(shù)前腦脊液中白細(xì)胞、氯化物、葡萄糖及蛋白質(zhì)異常與術(shù)后顱內(nèi)感染的相關(guān)性以及探索腦室腹腔分流術(shù)后發(fā)熱癥狀與術(shù)后感染的關(guān)系,為腦脊液異常的腦積水患者指導(dǎo)合適的手術(shù)時(shí)機(jī),對(duì)腦室腹腔分流術(shù)后出現(xiàn)顱內(nèi)感染的早期診斷與及時(shí)抗感染治療提供一定的指導(dǎo)作用。第一章 腦積水與細(xì)菌性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的概述目的概述腦積水與細(xì)菌性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染。方法經(jīng)過文獻(xiàn)調(diào)研,對(duì)腦積水與細(xì)菌性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染進(jìn)行概述。結(jié)果文獻(xiàn)綜述主要從以下幾個(gè)方面展開論述,包括腦積水的分類、臨床表現(xiàn)、診斷、鑒別診斷及治療方法;細(xì)菌性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的流行病學(xué)特點(diǎn)、病因、病原學(xué)分布、臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查、診斷及治療。結(jié)論腦積水是神經(jīng)外科的常見病,盡早手術(shù)治療可改善患者的預(yù)后;細(xì)菌性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的診斷并無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),對(duì)于確診或可疑的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者應(yīng)盡早抗感染治療。第二章 腦室腹腔分流術(shù)前腦脊液參數(shù)異常與術(shù)后顱內(nèi)感染的相關(guān)性研究目的研究腦室腹腔分流術(shù)前腦脊液中白細(xì)胞、氯化物、葡萄糖及蛋白質(zhì)異常與術(shù)后感染的相關(guān)性。方法對(duì)南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院2010年至2018年行腦室腹腔分流術(shù)的272例患者進(jìn)行回顧性隊(duì)列研究。根據(jù)術(shù)后是否感染,分為感染組和非感染組,分析比較兩組患者年齡、性別、原發(fā)病、術(shù)前腦脊液中白細(xì)胞、氯、葡萄糖和蛋白質(zhì)指標(biāo)與術(shù)后感染的相關(guān)性。結(jié)果共納入272例患者,術(shù)后6月內(nèi)出現(xiàn)感染25例（9.19%）,其余247例（90.81%）未感染?；颊叩妄g（OR=1.019,P=0.063,95%CI:0.999-1.039）和術(shù)前腦脊液中低葡萄糖水平（OR=2.185,P=0.035,95%CI:1.055～4.522）是腦室腹腔分流術(shù)后感染的危險(xiǎn)因素。進(jìn)一步通過受試者特征曲線（ROC）分析發(fā)現(xiàn)以上兩種因素綜合后的曲線下的面積為0.688（95%CI:0.578-0.798）。腦室腹腔分流術(shù)后感染與性別、原發(fā)病、術(shù)前腦脊液中白細(xì)胞、氯和蛋白質(zhì)水平方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)系。結(jié)論低齡腦積水患者手術(shù)治療應(yīng)格外注意無菌操作,避免術(shù)后感染。腦室腹腔分流術(shù)后感染與腦脊液中白細(xì)胞、氯化物、蛋白質(zhì)水平異常無關(guān),與腦脊液中葡萄糖水平有關(guān),應(yīng)待葡萄糖水平正常后再行分流手術(shù)。第三章 腦室腹腔分流術(shù)后體溫變化與術(shù)后顱內(nèi)感染的相關(guān)性研究目的觀察腦室腹腔分流術(shù)后患者體溫的變化趨勢(shì),探討其與術(shù)后感染的相關(guān)性。方法選擇南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院神經(jīng)外科自2015年1月至2018年12月行腦室腹腔分流術(shù)的272例患者,根據(jù)患者術(shù)后是否發(fā)生顱內(nèi)感染分為感染組與未感染組。根據(jù)術(shù)后出現(xiàn)顱內(nèi)感染的時(shí)間將感染患者分為早期感染組和延遲感染組,比較2組患者術(shù)后當(dāng)天、術(shù)后第1、3、5、7天的體溫及發(fā)熱情況。結(jié)果272例患者中發(fā)生顱內(nèi)感染25例（9.19%）（早期感染21例,延遲感染4例）,未感染247例（90.81%）。與未感染組比較,感染組患者術(shù)后第3、5、7天發(fā)熱率較高,體溫較高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。早期感染組與延遲感染組患者術(shù)后當(dāng)天,術(shù)后第1、3、5、7天發(fā)熱率及體溫差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論腦室腹腔分流術(shù)后患者發(fā)熱率較高,體溫下降較快,自第3天起仍有發(fā)熱則與術(shù)后感染關(guān)系密切,對(duì)術(shù)后感染具有一定的預(yù)測(cè)意義,應(yīng)提早考慮抗感染治療。
趙躍[7]（2020）在《基于癌性腦膜炎腦脊液二代測(cè)序的相關(guān)研究》文中研究說明癌性腦膜炎（Neoplastic meningitis,NM）又稱腦膜癌?。∕eningeal carcinomatosis,MC）是指各種惡性腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移至軟腦脊膜、蛛網(wǎng)膜下腔、腦脊液和蛛網(wǎng)膜引起的疾病。約發(fā)生于5%～8%的癌癥患者中。2018年全球癌癥報(bào)告指出,全球范圍內(nèi)將會(huì)有1810萬(wàn)癌癥新發(fā)病例和960萬(wàn)癌癥死亡病例,接近一半的癌癥新發(fā)和超過一半的癌癥死亡病例發(fā)生在亞洲地區(qū)。自從2010年以來,癌癥成為中國(guó)死亡的最主要原因。根據(jù)國(guó)家癌癥中心發(fā)布的中國(guó)最新癌癥報(bào)告統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,肺癌位居我國(guó)惡性腫瘤發(fā)病第1位。肺癌最常見的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移部位之一是腦部,3%～5%的非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者會(huì)發(fā)生癌性腦膜炎。然而,目前的NM診斷主要基于臨床癥狀和體征,加上腦脊液（cerebrospinal fluid,CSF）細(xì)胞學(xué)檢查和/或神經(jīng)影像學(xué)檢查。腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查仍是目前診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。但是在根據(jù)臨床表現(xiàn)和神經(jīng)影像學(xué)檢查結(jié)果確診的疑似NM患者中,25～30%的患者不能用腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查確診。雖然腦脊液細(xì)胞學(xué)找到腫瘤細(xì)胞的陽(yáng)性率會(huì)隨著腰椎穿刺次數(shù)的增加而增加,但由于腫瘤細(xì)胞與室管膜細(xì)胞的相似性,多次穿刺帶來的血液污染,中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染致淋巴瘤細(xì)胞的鑒別困難,標(biāo)本中腫瘤細(xì)胞少,標(biāo)本制備不充分等均導(dǎo)致假陰性率仍然較高。頭顱增強(qiáng)磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）和/或頭顱增強(qiáng)計(jì)算機(jī)斷層掃描（computed tomography,CT）是評(píng)估可疑NM患者的首選技術(shù),但仍有30%的假陰性結(jié)果發(fā)生。因此,評(píng)價(jià)一種新的NM診斷方法,特別是對(duì)CSF細(xì)胞學(xué)結(jié)果持續(xù)陰性和/或神經(jīng)影像學(xué)檢查結(jié)果持續(xù)陰性的NM患者,是非常重要的。液體活檢作為一種新興的癌癥檢查技術(shù),與傳統(tǒng)的組織活檢相比,具有無創(chuàng)性、敏感性、克服腫瘤異質(zhì)性、提供全面檢測(cè)信息和實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)等眾多優(yōu)點(diǎn)。由于癌性腦膜炎腦膜病灶難以獲取,對(duì)原發(fā)惡性腫瘤繼發(fā)腦膜轉(zhuǎn)移機(jī)制及耐藥機(jī)制知之甚少,現(xiàn)在越來越多的研究去探索利用血漿和腦脊液,來追蹤惡性腫瘤細(xì)胞的基因改變。血漿循環(huán)腫瘤DNA（circulating tumor,ctDNA）的檢測(cè)已廣泛應(yīng)用于液體活檢,然而由于血腦屏障的存在只有少數(shù)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤ctDNA釋放到血漿中,因而無法代表來源于中樞神經(jīng)系統(tǒng)病灶的ctDNA,基于腦脊液與癌性腦膜炎的病灶組織、腫瘤細(xì)胞直接接觸,腦脊液很顯然可作為癌性腦膜炎液體活檢樣本的潛在來源,從而對(duì)癌性腦膜炎的原發(fā)灶及轉(zhuǎn)移灶進(jìn)行基因組水平的分析。許多研究已表明在中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤及繼發(fā)于惡性腫瘤腦膜轉(zhuǎn)移患者的腦脊液中含有可檢測(cè)到的ctDNA。然而,這些研究只包括單一腫瘤類型或單一原發(fā)性腫瘤類型。鑒于NM是由轉(zhuǎn)移性腫瘤累及到腦膜,可在各種實(shí)體瘤中觀察到,對(duì)繼發(fā)于不同類型癌癥的癌性腦膜炎患者的腦脊液進(jìn)行ctDNA突變分析并描繪基因圖譜十分重要。非小細(xì)胞肺癌患者中有3%～5%的患者發(fā)生癌性腦膜炎,尤其是表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor,EGFR）突變陽(yáng)性的患者中有9.4%的患者發(fā)生癌性腦膜炎。EGFR陽(yáng)性的患者易于發(fā)生癌性腦膜炎的原因之一主要為新的分子靶向藥物治療提高了肺癌患者的生存率。研究表明一些繼發(fā)于NSCLC的癌性腦膜炎患者能夠從EGFR酪氨酸激酶抑制劑（Tyrosine kinase inhibitor,TKI）治療中獲益,并獲得長(zhǎng)期臨床緩解。也有研究表明EGFR TKI靶向治療被認(rèn)為是NM患者良好生存的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子,但其基因狀態(tài)是基于原發(fā)癌組織而不是CSF,原發(fā)性腫瘤和中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移性腫瘤之間的異質(zhì)性突出了對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤進(jìn)行腦脊液ctDNA測(cè)序的重要性,以幫助臨床醫(yī)生做出最終治療決定。多項(xiàng)研究結(jié)果表明在EGFR基因突變的NSCLC患者中EGFR TKI治療反應(yīng)率可高達(dá)70%～80%。但是由于血腦屏障限制外周EGFR TKI有效進(jìn)入腦脊液,減弱了EGFR TKI治療腦膜轉(zhuǎn)移的療效。每天標(biāo)準(zhǔn)劑量的EGFR TKI治療背景下的CSF濃度不足以達(dá)到治療癌性腦膜炎的效果。因此需要評(píng)價(jià)癌性腦膜炎確診后EGFR TKI治療的選擇,開始EGFR TKI治療,加量原EGFR TKI治療及更換另一種EGFR TKI治療對(duì)NM患者的臨床療效及對(duì)生存期的影響。因此,本研究旨在利用二代測(cè)序（next-generation sequencing,NGS）技術(shù),探討腦脊液ctDNA在繼發(fā)于不同類型癌癥的癌性腦膜炎患者中作為液體活檢的價(jià)值,分析NM患者腦脊液ctDNA樣本的癌癥相關(guān)基因突變及其惡性腫瘤細(xì)胞發(fā)生腦膜轉(zhuǎn)移潛在的可能機(jī)制。評(píng)估不同EGFR TKI治療方案對(duì)CSF EGFR陽(yáng)性的肺癌相關(guān)癌性腦膜炎患者的臨床療效及預(yù)后意義。第一部分評(píng)估二代測(cè)序檢測(cè)腦脊液ctDNA在癌性腦膜炎診斷中的價(jià)值目的:癌性腦膜炎是最嚴(yán)重的腦轉(zhuǎn)移形式,其發(fā)病率和致死率很高。目前,NM的診斷通常是根據(jù)患者的臨床癥狀和體征,CSF細(xì)胞學(xué)和/或神經(jīng)影像學(xué)（頭顱增強(qiáng)MRI和/或CT）檢查結(jié)果來確定。然而,腦脊液細(xì)胞學(xué)和/或神經(jīng)影像學(xué)檢查結(jié)果的假陰性往往導(dǎo)致癌性腦膜炎的漏診。本研究旨在評(píng)估二代測(cè)序檢測(cè)腦脊液ctDNA在NM診斷中的價(jià)值。方法:從2014年10月至2017年9月共有35例確診的NM患者接受腰椎穿刺術(shù)留取腦脊液樣本,行腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查及腦脊液ctDNA提取并進(jìn)行二代測(cè)序檢測(cè)癌癥相關(guān)基因突變,并接受顱腦增強(qiáng)MRI和/或顱腦增強(qiáng)CT檢查。比較腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查,腦脊液ctDNA檢測(cè)和影像學(xué)檢查診斷癌性腦膜炎的敏感性。結(jié)果:繼發(fā)于肺癌的患者最常見（26/35,74%）,隨后為繼發(fā)于胃癌2例（2/35,6%）,繼發(fā)于乳腺癌2例（2/35,6%）,繼發(fā)于前列腺癌1例（1/35,3%）,繼發(fā)于腮腺癌1例（1/35,3%）,淋巴瘤1例（1/35,3%）,未明確原發(fā)腫瘤2例（2/35,6%）。25份（25/35;71%）腦脊液樣本腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查呈陽(yáng)性而35份（35/35;100%）腦脊液樣本均檢出ctDNA且NGS檢測(cè)出癌癥相關(guān)基因突變。35例癌性腦膜炎患者均行顱腦增強(qiáng)MRI和/或顱腦增強(qiáng)CT掃描,22例NM患者神經(jīng)影像學(xué)表現(xiàn)（22/35;63%）與典型NM患者的影像學(xué)表現(xiàn)一致。與腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查和腦脊液ctDNA相比,神經(jīng)影像學(xué)的敏感性分別為88%（95%可信區(qū)間[95%CI],75-100）（P=22/25）和63%（95%CI,47-79）（P=22/35）。與腦脊液ctDNA相比,腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查的敏感性為71%（95%CI,56-86）（P=25/35）。結(jié)論:腦脊液ctDNA檢查的敏感性高于腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查和神經(jīng)影像學(xué)檢查,100%的NM患者在腦脊液中提取到ctDNA并檢測(cè)到腫瘤相關(guān)基因突變。利用腦脊液ctDNA作為液體活檢技術(shù),對(duì)NM的診斷很有幫助,尤其是對(duì)CSF細(xì)胞學(xué)檢查和/或神經(jīng)影像學(xué)檢查結(jié)果持續(xù)陰性的病例。第二部分應(yīng)用二代測(cè)序技術(shù)檢測(cè)癌性腦膜炎患者CSF ctDNA中的基因突變目的:本研究的目的是分析癌性腦膜炎患者CSF ctDNA中的癌癥相關(guān)基因突變和拷貝數(shù)變異及原發(fā)惡性腫瘤細(xì)胞發(fā)生腦膜轉(zhuǎn)移潛在的可能機(jī)制。方法:將來自58名繼發(fā)于不同類型癌癥的癌性腦膜炎患者的62份腦脊液樣本進(jìn)行ctDNA的提取及二代測(cè)序分析。利用DAVID（Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery）軟件對(duì)突變基因進(jìn)行生物信息分析。結(jié)果:本研究共納入來自58名癌性腦膜炎患者的62份腦脊液樣本的二代測(cè)序結(jié)果。男性27例（46.6%）,女性31例（53.4%）。繼發(fā)于肺癌的患者最常見,共42例（72.4%）,繼發(fā)于胃癌4例（6.9%）,繼發(fā)于乳腺癌3例（5.2%）,未明確原發(fā)腫瘤3例（5.2%）,繼發(fā)于直腸癌2例（3.4%）,繼發(fā)于前列腺癌1例（1.7%）,繼發(fā)于腮腺癌1例（1.7%）,繼發(fā)于淋巴瘤1例（1.7%）,繼發(fā)于膠質(zhì)母細(xì)胞瘤1例（1.7%）。來源于58名NM患者的62份CSF中,30份（48.4%）腦脊液樣本來自28名接受鞘內(nèi)化療和系統(tǒng)性治療（全身放療和/或化療和/或分子靶向治療）的NM患者;11份（17.7%）腦脊液樣本來自11名接受鞘內(nèi)化療未接受系統(tǒng)性治療的NM患者;12份（19.4%）腦脊液樣本來自12名接受系統(tǒng)治療未接受鞘內(nèi)化療的NM患者。其余9份腦脊液樣本來自9名未接受任何抗癌治療的NM患者。62份腦脊液標(biāo)本均提取出來ctDNA并進(jìn)行二代測(cè)序分析,所有的CSF ctDNA樣本均找到癌癥相關(guān)基因突變。最常見的突變基因?yàn)門P53（54/62,87.10%）,其次依次為EGFR（44/62,70.97%）,PTEN（39/62,62.90%）,CDKN2A（32/62,51.61%）,APC（27/62,43.55%）,TET2（27/62,43.55%）,GNAQ（18/62,29.03%）,NOTCH1（17/62,27.42%）,VHL（17/62,27.42%）,FLT3（16/62,25.81%）,PTCH1（15/62,24.19%）,BRCA2（13/62,20.97%）,KDR（10/62,16.13%）,KIT（9/62,14.52%）,MLH1（9/62,14.52%）,ATM（8/62,12.90%）,CBL（8/62,12.90%）,和DNMT3A（7/62,11.29%）。利用GO（Gene Ontology）功能注釋和KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomics）通路富集分析,KEGG通路富集分析結(jié)果顯示高頻突變基因主要富集到了PI3K-Akt信號(hào)通路。NM患者腦脊液ctDNA樣本中也了大量的拷貝數(shù)變異（copy number variation,CNV）,最常見的CNV為CDKN2A拷貝數(shù)缺失。接受鞘內(nèi)化療和系統(tǒng)治療組的腦脊液樣本獨(dú)特突變基因最多,GO分析結(jié)果富集到了ERK1/2信號(hào)通路。結(jié)論:本研究在所有腦脊液ctDNA樣本中均發(fā)現(xiàn)了癌癥相關(guān)基因突變,這些突變基因可能通過PI3K-Akt信號(hào)途徑影響腦膜轉(zhuǎn)移。第三部分EGFR TKI治療對(duì)CSF EGFR陽(yáng)性的肺癌相關(guān)癌性腦膜炎患者的臨床療效及預(yù)后意義目的:本研究目的是評(píng)價(jià)EGFR TKI治療對(duì)CSF EGFR陽(yáng)性的肺癌相關(guān)癌性腦膜炎患者的臨床療效及預(yù)后意義。方法:我們回顧性分析了2014年10月至2020年2月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院確診的44例CSF EGFR突變陽(yáng)性的肺癌相關(guān)癌性腦膜炎患者的病歷資料,并進(jìn)行隨訪觀察。結(jié)果:44例CSF EGFR陽(yáng)性的肺癌相關(guān)癌性腦膜炎患者中,17例（38.6%）為男性,27例（61.4%）為女性。年齡跨度自32歲至74歲,平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差為57±9歲。所有患者均經(jīng)腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查中發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞確診為癌性腦膜炎。27例（61.4%）ECOG體力狀況評(píng)分（PS）≥3。確診肺癌到確診癌性腦膜炎的時(shí)間中位數(shù)為14.0個(gè)月（0-87.3個(gè)月）。以中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀首發(fā)的患者為11例（25.0%）。CSF ctDNA濃度中位數(shù)為3.1 ng/ul（0.144～30.6 ng/ul）。NM確診后接受EGFR TKI治療的患者臨床緩解率高于未接受EGFR TKI治療的患者（73.3%vs.21.4%,P=0.001）。NM確診后開始EGFR TKI治療,加量原EGFR TKI治療及更換另一種EGFR TKI治療的患者臨床緩解率高于不使用EGFR TKI治療和繼續(xù)原EGFR TKI治療患者的臨床緩解率（77.8%vs.23.5%,P<0.001）。NM確診后,接受奧希替尼治療和未接受奧希替尼治療患者的臨床緩解率分別為75.0%和41.7%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.026）。44例CSF EGFR陽(yáng)性的肺癌相關(guān)NM患者確診后的中位生存時(shí)間（overall survival,OS）為16.0個(gè)月（95%CI,2.0–30.0個(gè)月）。ECOG PS為1-2的患者中位OS長(zhǎng)于ECOG PS為3-4的患者（32.6 vs.10.6個(gè)月,P<0.001）。NM確診前使用EGFR TKI治療的NM患者的中位OS長(zhǎng)于NM確診前未使用EGFR TKI治療的NM患者（32.6 vs.12.8個(gè)月,P=0.032）。NM確診后使用EGFR TKI治療的NM患者的中位OS長(zhǎng)于NM確診后未使用EGFR TKI治療的NM患者（31.4 vs.5.4個(gè)月,P<0.001）。NM確診后開始EGFR TKI治療,加量原EGFR TKI治療及更換另一種EGFRTKI治療的患者中位OS長(zhǎng)于不使用EGFR TKI治療和繼續(xù)原EGFR TKI治療的患者（29.6 vs.8.9個(gè)月,P=0.001）。NM確診后,接受奧希替尼治療的患者中位OS長(zhǎng)于未接受奧希替尼治療的患者（32.6 vs.11.1個(gè)月,P=0.004）。Kaplan-Meier單因素結(jié)果分析顯示ECOG評(píng)分、癌性腦膜炎診斷前后是否應(yīng)用EGFR TKI治療、癌性腦膜炎診斷后EGFR TKI的選擇及癌性腦膜炎診斷后是否應(yīng)用奧希替尼治療與患者的預(yù)后相關(guān)。多因素分析表明,在繼發(fā)于肺癌且CSF EGFR陽(yáng)性的NM患者中,NM確診后開始EGFR TKI治療和加量原EGFR TKI治療及更換另一種EGFR TKI治療是延長(zhǎng)生存期的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素。結(jié)論:1.CSF EGFR陽(yáng)性的肺癌相關(guān)NM患者確診后,與未接受EGFR TKI治療的患者相比,接受EGFR TKI治療的患者臨床緩解率更高,中位生存時(shí)間更長(zhǎng)。2.CSF EGFR陽(yáng)性的肺癌相關(guān)NM患者確診后,與不使用EGFR TKI治療和繼續(xù)原EGFR TKI治療的患者相比,開始EGFR TKI治療,加量原EGFR TKI治療及更換另一種EGFR TKI治療的患者臨床緩解率更高,中位生存時(shí)間更長(zhǎng)。3.CSF EGFR陽(yáng)性的肺癌相關(guān)NM患者確診后,與未接受奧希替尼治療的患者相比,接受奧希替尼治療的患者臨床緩解率更高,中位生存時(shí)間更長(zhǎng)。4.開始EGFR TKI治療,加量原EGFR TKI治療及更換另一種EGFR TKI治療是延長(zhǎng)生存期的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素。
趙陽(yáng)[8]（2020）在《兒童腦腫瘤循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)的構(gòu)建及初步臨床應(yīng)用》文中指出背景:兒童腦腫瘤在兒童實(shí)體瘤中發(fā)病率最高,早期癥狀隱匿,病情發(fā)展迅速,當(dāng)出現(xiàn)明顯的臨床癥狀時(shí),往往病情已達(dá)中晚期。臨床中的影像學(xué)檢查可能會(huì)因出血、炎癥等因素而影響到閱片的準(zhǔn)確判斷。此外,臨床常規(guī)血清學(xué)檢測(cè)缺乏兒童腦腫瘤特異性的標(biāo)記物,這些限制了腦腫瘤患兒病情的診斷和療效評(píng)估,導(dǎo)致無法及時(shí)調(diào)整治療方案,進(jìn)而延誤診療。因此,在臨床中尋找更合適的檢測(cè)手段來判斷和評(píng)估腦腫瘤患兒的病情,已逐漸成為提高兒童腦腫瘤診療水平的重要方向。目的:本研究是基于表皮生長(zhǎng)因子受體（Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR）和膠質(zhì)原纖維酸性蛋白（Glial Fibrillary Acidic Protein,GFAP）抗體免疫脂質(zhì)磁球技術(shù)與免疫熒光鑒定技術(shù),構(gòu)建免疫磁球/免疫熒光為核心的兒童腦腫瘤循環(huán)腫瘤細(xì)胞（Circulating Tumor Cell,CTC）分離鑒定系統(tǒng),用于對(duì)兒童腦腫瘤患者外周血和腦脊液中的CTC進(jìn)行高效的捕獲與鑒定。通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、臨床驗(yàn)證和基因檢測(cè)等方法,評(píng)估該系統(tǒng)的穩(wěn)定性、安全性和有效性,并驗(yàn)證通過該分離鑒定系統(tǒng)獲得的細(xì)胞為循環(huán)腫瘤細(xì)胞。方法:通過反向蒸發(fā)法制備EGFR免疫脂質(zhì)磁球（EGFR Magnetic liposome,EG-ML）和GFAP免疫脂質(zhì)磁球（GFAP Magnetic liposome,G-ML）,然后用粒徑電位分析儀、蛋白電泳儀、原子力顯微鏡、紫外分光光度儀、磁性能分析儀、X射線衍射儀等對(duì)其分子結(jié)構(gòu)和結(jié)晶性能進(jìn)行表征和研究,建立一套兒童腦腫瘤CTC分離鑒定系統(tǒng),對(duì)此進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、臨床驗(yàn)證和基因檢測(cè),并做出相應(yīng)的評(píng)估。通過EG-ML、G-ML磁分選獲得的細(xì)胞分別提取DNA和RNA,然后進(jìn)行熒光定量PCR、RNA-seq、Sanger測(cè)序和全基因外顯子測(cè)序（Whole Exome Sequencing,WES）,并結(jié)合實(shí)體腫瘤標(biāo)本中明確的突變基因,分析CTC中的突變基因表達(dá)和RNA表達(dá)差異情況,進(jìn)而驗(yàn)證循環(huán)腫瘤細(xì)胞。對(duì)患兒進(jìn)行隨訪,探究CTC捕獲量與生存時(shí)間的關(guān)系。結(jié)果:（1）免疫脂質(zhì)磁球的制備和表征。成功制備了EG-ML和G-ML兩種免疫脂質(zhì)磁球。制備的EG-ML和G-ML的粒徑約為122nm,電位為30m V,其在水溶液中穩(wěn)定,分散均勻,呈單分散分布,不易團(tuán)聚。免疫脂質(zhì)磁球表面抗體純度較高,磁滯回曲線閉合,具有超順磁性,飽和磁化強(qiáng)度為32.0 Am2/Kg,具有磁性顆粒的結(jié)晶性能。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表明,EG-ML和G-ML的細(xì)胞毒性較低,生物相容性較好,能夠很好的達(dá)到臨床使用的要求。（2）兒童腦腫瘤CTC新型分離鑒定系統(tǒng)的構(gòu)建及研究。通過對(duì)構(gòu)建分離鑒定過程的試劑用量和反應(yīng)條件等各項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行逐步優(yōu)化,初步構(gòu)建出一套CTC檢測(cè)系統(tǒng)。然后用免疫熒光法來鑒定細(xì)胞,即用DAPI確定是完整細(xì)胞,CD45-PE排除白細(xì)胞,EGFR-FITC和GFAP-FITC初步擬定是循環(huán)腫瘤細(xì)胞。此外,進(jìn)行的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,兩種磁球?qū)和X腫瘤細(xì)胞均有較高的捕獲能力,兩者依次捕獲的回收率可達(dá)到95%。（3）臨床驗(yàn)證表明,EG-ML和G-ML可有效地捕獲腦腫瘤患兒外周血和腦脊液中的CTC,染色效果清晰可辨。臨床數(shù)據(jù)分析可得:無論是在腦腫瘤患兒的腦脊液中還是在其血液中,CTC數(shù)量與腫瘤的WHO分級(jí)、患兒年齡均無顯著相關(guān)性。（4）對(duì)患兒進(jìn)行隨訪,死亡的患兒有15例,1年生存率為82%。結(jié)果顯示,年齡、性別和WHO分級(jí)與生存時(shí)間沒有顯著性差異。而腦脊液中CTC數(shù)量與生存時(shí)間有顯著相關(guān)性,CTC數(shù)量越多,生存時(shí)間越短,預(yù)后越差。（5）本研究共篩選出CTC中的RNA表達(dá)有顯著性差異的有2551個(gè),其中上調(diào)表達(dá)的1238個(gè),下調(diào)表達(dá)的有1313個(gè)。（6）部分髓母細(xì)胞瘤患兒（Group 3）的血液和腦脊液CTC中的NPR3基因表達(dá)水平高表達(dá),其對(duì)應(yīng)的腫瘤標(biāo)本組織腫瘤細(xì)胞的NPR3免疫組化呈陽(yáng)性,兩者結(jié)果一致。（7）部分彌漫性內(nèi)源性橋腦膠質(zhì)瘤患兒進(jìn)行Sanger測(cè)序,在腦脊液和組織中均檢測(cè)到H3K27M突變,提示基因檢測(cè)在腦脊液標(biāo)本中可能更有效,有特異性遺傳改變的患者需要進(jìn)行CTC單細(xì)胞測(cè)序。（8）本研究對(duì)一例腦腫瘤患兒血液中分選出的CTC和組織進(jìn)行全外顯子組測(cè)序（WES）,結(jié)果顯示均發(fā)生了KMT2A和TMPRSS2突變,這又一次說明了自制的免疫脂質(zhì)磁球分選的細(xì)胞是腦腫瘤細(xì)胞。腫瘤突變負(fù)荷（Tumor Mutation Burden,TMB）低于平均TMB,對(duì)免疫治療響應(yīng)不大。結(jié)論:本研究選用細(xì)胞毒性低、生物相容性高的脂質(zhì)材料DOPC作為磁性微球的基質(zhì),利用GHDC表面的氨基與GFAP、EGFR抗體結(jié)合,制備出G-ML和EG-ML,其性質(zhì)穩(wěn)定,表面抗體含量可控,具有磁性顆粒的結(jié)晶性能,可與兒童腦腫瘤細(xì)胞反應(yīng)形成抗原抗體特異性結(jié)合,捕獲效率較高。由此形成了一套高效精準(zhǔn)的兒童腦腫瘤CTC檢測(cè)體系。該體系具有無創(chuàng)、便捷、動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)的優(yōu)點(diǎn)。與基因檢測(cè)相結(jié)合,對(duì)兒童腦腫瘤的早期篩查與診斷、療效檢測(cè)和預(yù)后評(píng)估都具有重要的臨床參考價(jià)值。
張莉[9]（2020）在《42例結(jié)核性腦膜炎臨床特征及預(yù)后影響因素分析》文中提出目的:通過分析結(jié)核性腦膜炎患者的臨床癥狀及體征、實(shí)驗(yàn)室檢查、影像學(xué)檢查,探討結(jié)核性腦膜炎的臨床特征及預(yù)后影響因素,指導(dǎo)其臨床診治。方法:收集2016年1月至2018年12月于安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院初診為結(jié)核性腦膜炎的42例患者的臨床資料（包括患者基本情況、臨床癥狀及體征、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果、影像學(xué)檢查結(jié)果、出院時(shí)轉(zhuǎn)歸情況）。根據(jù)改良蘭金量表（Modified Rankin Score,m RS）評(píng)估,將出院時(shí)轉(zhuǎn)歸情況分為預(yù)后良好及預(yù)后不良兩組,m RS評(píng)分0?2分為預(yù)后良好,m RS評(píng)分3?6分為預(yù)后不良。對(duì)上述臨床資料進(jìn)行回顧性分析,計(jì)量資料組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn);多因素分析采用Logistic回歸分析法。（統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。結(jié)果:1. 本研究共納入42例患者,其中男性25例,女性17例,平均年齡45.93±19.58歲;預(yù)后不良13例,預(yù)后良好29例;3例死亡病例,病死率為7.14%。2. 結(jié)核性腦膜炎常見臨床癥狀為發(fā)熱（95.24%）,頭痛（78.57%）,惡心嘔吐（54.76%）;臨床體征為腦膜刺激癥（71.43%）,意識(shí)障礙（61.90%）,外周神經(jīng)功能障礙（54.76%）。3. 腦脊液檢查中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、蛋白、糖、氯化物含量異常者分別占100%（38/38）,95.24%（40/42）,78.57%（33/42）,90.48%（38/42）。39例行頭顱影像學(xué)檢查,常見表現(xiàn)為腦膜炎改變（46.15%）,急性期腦梗塞（10.26%）,顱內(nèi)出血（7.69%）。4. 單因素分析得出英國(guó)醫(yī)學(xué)研究理事會(huì)（Medical Research Council,MRC）疾病分期（χ2=25.537,P=0.000）,意識(shí)障礙（χ2=4.118,P=0.042）,顱神經(jīng)麻痹（χ2=6.740,P=0.009）,外周神經(jīng)功能障礙（χ2=10.714,P=0.001）,癲癇發(fā)作（χ2=6.389,P=0.011）,外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)（t=2.265,P=0.029）,中性粒細(xì)胞比值（t=2.286,P=0.028）,C-反應(yīng)蛋白（t=2.846,P=0.007）,腦脊液蛋白含量（t=3.846,P=0.000）,腦積水（χ2=4.685,P=0.030）及結(jié)核瘤形成（χ2=4.685,P=0.030）在不同預(yù)后組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5. 多因素分析顯示外周神經(jīng)功能障礙[OR=12.969,95%CI（1.080,155.678）,P=0.043],顱神經(jīng)麻痹[OR=13.339,95%CI（1.238,143.663）,P=0.033]及腦脊液蛋白含量升高[OR=6.006,95%CI（1.131,31.894）,P=0.035]為結(jié)核性腦膜炎預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。結(jié)論:結(jié)核性腦膜炎臨床癥狀及體征具有多樣性,部分患者缺乏典型臨床表現(xiàn),腦脊液檢查及頭顱影像學(xué)是其診斷的重要手段。結(jié)核性腦膜炎預(yù)后影響因素復(fù)雜,外周神經(jīng)功能障礙、顱神經(jīng)麻痹及腦脊液蛋白含量升高為結(jié)核性腦膜炎預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,在臨床診療中應(yīng)注意觀察。
王芳[10]（2020）在《腦脊液宏基因組測(cè)序技術(shù)在新型隱球菌性腦膜炎中的應(yīng)用分析》文中研究指明背景隱球菌性腦膜炎（Cryptococcal meningitis,CM）具有發(fā)病率和死亡率高的特點(diǎn)。傳統(tǒng)檢測(cè)方法有培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)和檢測(cè)靈敏度不足的缺點(diǎn)。根據(jù)最新報(bào)告表明,宏基因組測(cè)序技術(shù)（metagenomic next-generation sequencing,mNGS）作為一種新興檢測(cè)方法,在疾病早期診斷與鑒別診斷過程中存在特定的優(yōu)勢(shì),可與結(jié)核性腦膜炎、李斯特菌腦炎、布氏桿菌腦脊髓膜炎等疾病相鑒別。目的分析隱球菌性腦膜腦炎/腦膜炎患者的臨床特點(diǎn)及診療策略,評(píng)價(jià)宏基因組測(cè)序技術(shù)與傳統(tǒng)檢測(cè)方法從腦脊液中檢測(cè)潛在致病微生物來診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system,CNS）隱球菌感染的應(yīng)用價(jià)值優(yōu)勢(shì)。我們旨在確定使用宏基因組測(cè)序技術(shù)（mNGS）作為新的方法診斷新型隱球菌性腦膜炎的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積。方法回顧性分析于2017年2月20日至2019年9月20日在河南省人民醫(yī)院住院患者臨床診斷為隱球菌性腦膜腦炎/腦膜炎的臨床資料。收集包括詳細(xì)病史、一般資料、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血培養(yǎng)等外周血檢驗(yàn)及腦脊液常規(guī)、生化、細(xì)胞學(xué)、隱球菌莢膜抗原測(cè)定、墨汁染色、腦脊液培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)室及頭顱MRI等影像學(xué)結(jié)果。此外,還將患者的腦脊液用宏基因組測(cè)序技術(shù)BGISEQ-100測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行病原檢測(cè)分析。結(jié)果本研究共納入14例患者,年齡25-77歲,平均年齡48.86±14.894歲（N=14）,其中男性10例,女性4例。既往體健者（特指無糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑應(yīng)用史）4例,1例曾接受器官移植,1例曾行右腎切除術(shù),2例患有糖尿病,9例長(zhǎng)期應(yīng)用皮質(zhì)醇激素和/或免疫抑制劑,合并顱神經(jīng)損害者6例,7例患者在疾病階段出現(xiàn)不同程度的意識(shí)障礙。首發(fā)癥狀為頭痛11例,發(fā)熱9例,伴惡心、嘔吐8例,腦膜刺激征陽(yáng)性者8例,影像學(xué)檢查異常者11例,10例患者出現(xiàn)疾病本身及治療過程中較嚴(yán)重的相關(guān)并發(fā)癥,其中2例因并發(fā)腦積水行腦室引流術(shù),預(yù)后差。14例患者中,血培養(yǎng)陽(yáng)性者1例,G-M試驗(yàn)結(jié)果異常者2例,腰椎穿刺顱內(nèi)壓增高者9例,超過300mmH2O者7例,其中3例因嚴(yán)重顱高壓行腰大池置管引流術(shù),腦脊液真菌培養(yǎng)陽(yáng)性8例,墨汁染色陽(yáng)性8例,隱球菌莢膜抗原測(cè)定陽(yáng)性12例。mNGS檢測(cè)發(fā)現(xiàn)隱球菌DNA者9例,檢出序列數(shù)1-97979,基因覆蓋度0.0004%-11%。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)相較于傳統(tǒng)檢測(cè)方法,mNGS測(cè)序應(yīng)用于不明原因腦膜腦炎/腦膜炎的早期診斷的靈敏度、特異度及ROC曲線下面積分別是75%,50%,0.625。結(jié)論目前,我們認(rèn)為腦脊液隱球菌莢膜抗原檢測(cè)陽(yáng)性率最高,mNGS次之,墨汁染色和培養(yǎng)最差。研究結(jié)果表明,mNGS作為隱球菌性腦膜腦炎/腦膜炎早期診斷的補(bǔ)充手段可提高CM診斷時(shí)效性,反復(fù)送檢陽(yáng)性率可能更高。此外,mNGS還能進(jìn)行菌種亞型鑒定,發(fā)現(xiàn)新的病原體,合并或排除其他病原體的感染,有助于CM的診治方案選擇及并發(fā)癥管理。
二、腦積水患者腦室穿刺的腦脊液細(xì)胞學(xué)改變初步觀察（論文開題報(bào)告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡(jiǎn)單簡(jiǎn)介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡(jiǎn)單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點(diǎn)或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡(jiǎn)64位RISC處理器存儲(chǔ)管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲(chǔ)器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁(yè)面大小,采用多級(jí)分層頁(yè)表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級(jí)頁(yè)表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲(chǔ)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對(duì)象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對(duì)象從而得到有關(guān)信息。
實(shí)驗(yàn)法：通過主支變革、控制研究對(duì)象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。
定性分析法：對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對(duì)研究對(duì)象的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對(duì)某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會(huì)科學(xué)用來分析社會(huì)現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、腦積水患者腦室穿刺的腦脊液細(xì)胞學(xué)改變初步觀察（論文提綱范文）
（1）結(jié)核性腦膜炎長(zhǎng)期不良預(yù)后和耐藥的風(fēng)險(xiǎn)因素及其早期診斷方法的探討（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 縮略語(yǔ)/符號(hào)說明 |
| 第一部分: 中青年結(jié)核性腦膜炎患者的臨床特征及其長(zhǎng)期預(yù)后影響因素 |
| 1 前言 |
| 2 資料與方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4. 討論 |
| 5. 結(jié)論 |
| 6. 參考文獻(xiàn) |
| 7. 附圖表 |
| 第二部分: 培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)核性腦膜炎患者的臨床特征及耐藥危險(xiǎn)因素分析 |
| 1. 引言 |
| 2. 資料與方法 |
| 3. 結(jié)果 |
| 4. 討論 |
| 5. 結(jié)論 |
| 6. 參考文獻(xiàn) |
| 7. 附圖表 |
| 第三部分: 二代測(cè)序技術(shù)在結(jié)核性腦膜炎中的早期診斷價(jià)值 |
| 1. 引言 |
| 2. 資料與方法 |
| 3. 結(jié)果 |
| 4. 討論 |
| 5. 結(jié)論 |
| 6. 參考文獻(xiàn) |
| 7. 附圖表 |
| 致謝 |
| 攻讀博士期間發(fā)表的論文 |
| 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表 |
| 英文文章Ⅰ(已發(fā)表) |
| 英文文章Ⅱ(已發(fā)表) |
（3）Krause入路切除松果體區(qū)病變術(shù)后小腦損傷的相關(guān)因素臨床分析（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 1.資料與方法 |
| 1.1 一般資料 |
| 1.2 數(shù)據(jù)收集 |
| 1.3 手術(shù)方法 |
| 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 |
| 2.結(jié)果 |
| 2.1 一般情況及病變特征 |
| 2.2 手術(shù)結(jié)果 |
| 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果 |
| 3.討論 |
| 3.1 年齡、性別與小腦損傷 |
| 3.2 病變大小與小腦損傷 |
| 3.3 切除程度與小腦損傷 |
| 3.4 病變生長(zhǎng)方向與小腦損傷 |
| 3.5 手術(shù)時(shí)長(zhǎng)與小腦損傷 |
| 3.6 直竇角度與小腦損傷 |
| 3.7 直竇延長(zhǎng)線同胼胝體關(guān)系與小腦損傷 |
| 3.8 病變與頂蓋的位置關(guān)系與小腦損傷 |
| 3.9 入路與小腦損傷 |
| 3.10 病理、病變質(zhì)地與小腦損傷 |
| 3.11 腦積水與小腦損傷 |
| 4.結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 :26例松果體病變患者信息一覽表 |
| 綜述 松果體區(qū)腫瘤治療研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 個(gè)人簡(jiǎn)歷及在校期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 |
| 致謝 |
（4）肺腺癌腦（膜）轉(zhuǎn)移患者腦脊液基因檢測(cè)臨床研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 縮略語(yǔ)/符號(hào)說明 |
| 前言 |
| 研究現(xiàn)狀、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、肺腺癌腦轉(zhuǎn)移瘤腦脊液分子特征的臨床研究 |
| 1.1 對(duì)象和方法 |
| 1.1.1 研究對(duì)象 |
| 1.1.2 研究方法 |
| 1.1.3 數(shù)據(jù)分析 |
| 1.2 結(jié)果 |
| 1.2.1 腦脊液和腦轉(zhuǎn)移瘤組織標(biāo)本基因檢測(cè)結(jié)果 |
| 1.2.2 腦脊液和血液標(biāo)本基因檢測(cè)結(jié)果 |
| 1.2.3 腦膜轉(zhuǎn)移和腦實(shí)質(zhì)轉(zhuǎn)移腦脊液基因檢測(cè)結(jié)果 |
| 1.3 討論 |
| 1.3.1 肺腺癌腦轉(zhuǎn)移的概述 |
| 1.3.2 腦轉(zhuǎn)移瘤組織、腦脊液和血液基因檢測(cè)的關(guān)系 |
| 1.3.3 腦實(shí)質(zhì)轉(zhuǎn)移和腦膜轉(zhuǎn)移腦脊液基因檢測(cè)的關(guān)系 |
| 1.4 小結(jié) |
| 二、肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移腦脊液分子特征的臨床研究 |
| 2.1 對(duì)象和方法 |
| 2.1.1 研究對(duì)象 |
| 2.1.2 研究方法 |
| 2.1.3 療效評(píng)價(jià) |
| 2.1.4 數(shù)據(jù)分析 |
| 2.2 結(jié)果 |
| 2.2.1 腦脊液和血液標(biāo)本基因檢測(cè)結(jié)果 |
| 2.2.2 基因檢測(cè)指導(dǎo)臨床治療的結(jié)果 |
| 2.3 討論 |
| 2.3.1 肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移的概述 |
| 2.3.2 腦脊液和血液標(biāo)本基因檢測(cè)的關(guān)系 |
| 2.3.3 腦脊液基因檢測(cè)指導(dǎo)臨床治療的意義 |
| 2.4 小結(jié) |
| 三、肺腺癌腦膜轉(zhuǎn)移腦脊液ctDNA變化的臨床研究 |
| 3.1 對(duì)象和方法 |
| 3.1.1 研究對(duì)象 |
| 3.1.2 研究方法 |
| 3.1.3 數(shù)據(jù)分析 |
| 3.2 結(jié)果 |
| 3.3 討論 |
| 3.4 小結(jié) |
| 全文結(jié)論 |
| 論文創(chuàng)新點(diǎn) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 綜述 肺腺癌中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移腦脊液檢測(cè)的研究進(jìn)展 |
| 綜述參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡(jiǎn)歷 |
（5）前循環(huán)顱內(nèi)破裂動(dòng)脈瘤栓塞術(shù)后應(yīng)用腰大池引流的拔管時(shí)機(jī)探討（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文縮略詞對(duì)照表 |
| 前言 |
| 1 臨床資料與方法 |
| 1.1 臨床資料 |
| 1.1.1 研究對(duì)象 |
| 1.1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) |
| 1.1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 治療方法 |
| 1.2.2 觀察指標(biāo)及標(biāo)準(zhǔn) |
| 1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 一般資料結(jié)果 |
| 2.2 36例CSF感染患者的感染時(shí)間 |
| 2.3 36例CSF感染患者的治療方式 |
| 2.4 CSF中紅細(xì)胞計(jì)數(shù) |
| 2.5 296 例無CSF感染患者拔管時(shí)RBC計(jì)數(shù)與MRS評(píng)分 |
| 2.6 173例HUNT-HESS Ⅱ級(jí)無CSF感染患者的預(yù)后 |
| 2.7 87例HUNT-HESS III級(jí)無CSF感染患者的預(yù)后 |
| 2.8 36例HUNT-HESS IV級(jí)無CSF感染患者的預(yù)后 |
| 2.9 并發(fā)癥DIND及SDHC |
| 3 討論 |
| 4 結(jié)論與展望 |
| 4.1 結(jié)論 |
| 4.2 展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述 腰大池引流相關(guān)腦脊液感染的診斷及預(yù)防進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附表 |
| 致謝 |
（6）腦室腹腔分流術(shù)前腦脊液參數(shù)異常、術(shù)后體溫變化與術(shù)后顱內(nèi)感染的相關(guān)性研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 腦積水與細(xì)菌性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的概述 |
| 1.1 腦積水 |
| 1.2 細(xì)菌性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染 |
| 1.3 本章小結(jié) |
| 第二章 腦室腹腔分流術(shù)前腦脊液指標(biāo)異常與術(shù)后顱內(nèi)感染的相關(guān)性研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 資料與方法 |
| 2.3 結(jié)果及分析 |
| 2.4 討論 |
| 第三章 腦室腹腔分流術(shù)后體溫變化與術(shù)后顱內(nèi)感染的相關(guān)性研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 資料與方法 |
| 3.3 結(jié)果及分析 |
| 3.4 討論 |
| 全文小結(jié)及展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 縮寫詞簡(jiǎn)表 |
| 碩士研宄生期間發(fā)表論文情況 |
| 致謝 |
（7）基于癌性腦膜炎腦脊液二代測(cè)序的相關(guān)研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文縮寫 |
| 引言 |
| 第一部分 評(píng)估二代測(cè)序檢測(cè)腦脊液ctDNA在癌性腦膜炎診斷中的價(jià)值 |
| 前言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 附圖 |
| 附表 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二部分 應(yīng)用二代測(cè)序技術(shù)檢測(cè)癌性腦膜炎患者CSF ctDNA中的基因突變 |
| 前言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 附圖 |
| 附表 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第三部分 EGFR TKI治療對(duì)CSF EGFR陽(yáng)性的肺癌相關(guān)癌性腦膜炎患者的臨床療效及預(yù)后意義 |
| 前言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 附圖 |
| 附表 |
| 討論 |
| 小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 結(jié)論 |
| 綜述 腦脊液ctDNA檢測(cè)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤臨床應(yīng)用中的進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡(jiǎn)歷 |
（8）兒童腦腫瘤循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)的構(gòu)建及初步臨床應(yīng)用（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文縮略詞 |
| 本課題的技術(shù)路線圖 |
| 第一章 前言 |
| 1.1 兒童腦腫瘤的研究現(xiàn)狀 |
| 1.2 循環(huán)腫瘤細(xì)胞分選及單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用 |
| 1.2.1 循環(huán)腫瘤細(xì)胞分選 |
| 1.2.1.1 腫瘤液體活檢技術(shù) |
| 1.2.1.2 Cell Search循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)與分析系統(tǒng)簡(jiǎn)介 |
| 1.2.1.3 CTC檢測(cè)在腫瘤治療中的應(yīng)用價(jià)值 |
| 1.2.2 基因檢測(cè)技術(shù) |
| 1.3 兒童腦腫瘤CTC的研究現(xiàn)狀 |
| 第二章 免疫脂質(zhì)磁球的制備和表征 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)部分 |
| 2.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑 |
| 2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 2.2.3 EGFR和 GFAP免疫脂質(zhì)磁球的制備 |
| 2.2.4 免疫脂質(zhì)磁球的表征 |
| 2.2.4.1 粒徑電位分析 |
| 2.2.4.2 EG-ML和 G-ML的蛋白電泳分析 |
| 2.2.4.3 原子力顯微鏡(Atomic Force Microscope,AFM)觀察 |
| 2.2.4.4 紫外吸收光譜分析 |
| 2.2.4.5 磁性能分析 |
| 2.2.4.6 X射線衍射分析 |
| 2.2.5 細(xì)胞培養(yǎng)及免疫脂質(zhì)磁球的細(xì)胞毒性分析 |
| 2.2.5.1 細(xì)胞培養(yǎng) |
| 2.2.5.2 EG-ML和 G-ML的細(xì)胞毒性分析 |
| 2.3 結(jié)果 |
| 2.3.1 EG-ML、G-ML的粒徑電位分析 |
| 2.3.2 EG-ML與 G-ML的凝膠電泳分析 |
| 2.3.3 EG-ML、G-ML的 AFM分析 |
| 2.3.4 免疫脂質(zhì)磁球的紫外分析 |
| 2.3.5 免疫脂質(zhì)磁球的磁性能分析 |
| 2.3.6 免疫脂質(zhì)磁球結(jié)晶性能分析 |
| 2.3.7 EG-ML和 G-ML的細(xì)胞毒性分析 |
| 2.4 討論 |
| 2.5 本章小結(jié) |
| 第三章 腦腫瘤循環(huán)腫瘤細(xì)胞分離鑒定系統(tǒng)的構(gòu)建及評(píng)價(jià) |
| 3.1 引言 |
| 3.2 實(shí)驗(yàn)部分 |
| 3.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑 |
| 3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 3.2.3 分離鑒定系統(tǒng)中試劑用量及反應(yīng)條件的研究 |
| 3.2.3.1 抗體與免疫脂質(zhì)磁球用量研究 |
| 3.2.3.2 免疫脂質(zhì)磁球與細(xì)胞的孵育結(jié)合 |
| 3.2.3.3 染色液A的制備 |
| 3.2.3.4 染色液的用量、順序及時(shí)間研究 |
| 3.2.3.5 體系PBS的用量 |
| 3.2.3.6 離心轉(zhuǎn)速的研究 |
| 3.2.4 細(xì)胞培養(yǎng) |
| 3.2.5 免疫熒光鑒定 |
| 3.2.6 普魯士藍(lán)反應(yīng) |
| 3.2.7 原子力顯微鏡的應(yīng)用 |
| 3.2.8 免疫脂質(zhì)磁球與U251 的相互作用的共聚焦顯微觀察 |
| 3.2.9 免疫脂質(zhì)磁球?qū)251 細(xì)胞捕獲效率的實(shí)驗(yàn) |
| 3.2.10 腦腫瘤皮下荷瘤裸鼠外周血CTC的分離鑒定 |
| 3.3 結(jié)果 |
| 3.3.1 分離鑒定系統(tǒng)中試劑用量及反應(yīng)條件的研究 |
| 3.3.1.1 抗體與免疫脂質(zhì)磁球用量研究 |
| 3.3.1.2 免疫脂質(zhì)磁球與細(xì)胞的孵育結(jié)合 |
| 3.3.1.3 染色液A的制備 |
| 3.3.1.4 染色液的用量、順序及時(shí)間研究 |
| 3.3.1.5 體系PBS的用量 |
| 3.3.1.6 離心轉(zhuǎn)速的研究 |
| 3.3.2 免疫熒光鑒定結(jié)果 |
| 3.3.3 普魯士藍(lán)反應(yīng) |
| 3.3.4 原子力顯微鏡觀察 |
| 3.3.5 免疫脂質(zhì)磁球與U251 細(xì)胞的相互作用研究 |
| 3.3.6 免疫脂質(zhì)磁球?qū)251 細(xì)胞分離的效果評(píng)價(jià) |
| 3.3.7 對(duì)腦腫瘤皮下荷瘤裸鼠外周血CTC分離鑒定 |
| 3.4 討論 |
| 3.5 本章小結(jié) |
| 第四章 腦腫瘤CTC分離鑒定系統(tǒng)的臨床應(yīng)用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 研究對(duì)象 |
| 4.2.1.1 腦腫瘤患兒的臨床入組標(biāo)準(zhǔn) |
| 4.2.1.2 腦部非腫瘤病變患兒入組標(biāo)準(zhǔn) |
| 4.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑及材料 |
| 4.2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備與儀器 |
| 4.2.4 腦腫瘤臨床樣本驗(yàn)證方法 |
| 4.2.4.1 免疫脂質(zhì)磁球?qū)δX腫瘤臨床血樣和腦脊液中CTC的分離鑒定 |
| 4.2.4.2 臨床初步驗(yàn)證 |
| 4.3 結(jié)果 |
| 4.3.1 EG-ML和 G-ML對(duì)腦腫瘤臨床血樣和腦脊液的檢測(cè)效果 |
| 4.3.2 臨床初步驗(yàn)證 |
| 4.4 討論 |
| 4.5 本章小結(jié) |
| 第五章 腦腫瘤CTC檢測(cè)系統(tǒng)評(píng)估 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料和方法 |
| 5.2.1 研究對(duì)象 |
| 5.2.1.1 腦腫瘤患兒的臨床入組標(biāo)準(zhǔn) |
| 5.2.1.2 腦部非腫瘤病變患者入組標(biāo)準(zhǔn) |
| 5.2.2 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑 |
| 5.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 5.2.4 檢測(cè)方法 |
| 5.2.5 免疫脂質(zhì)磁球?qū)δMCTC的回收率實(shí)驗(yàn) |
| 5.2.6 腦腫瘤皮下荷瘤裸鼠外周血CTC的分離鑒定 |
| 5.2.7 臨床檢測(cè) |
| 5.2.8 影像學(xué)分析 |
| 5.2.9 統(tǒng)計(jì)分析 |
| 5.3 結(jié)果 |
| 5.3.1 細(xì)胞回收實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 |
| 5.3.2 對(duì)腦腫瘤皮下荷瘤裸鼠外周血中CTC分離鑒定 |
| 5.3.3 CTC檢測(cè)在兒童腦腫瘤中的初步臨床應(yīng)用 |
| 5.4 討論 |
| 5.5 結(jié)論 |
| 第六章 兒童腦腫瘤臨床研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料和方法 |
| 6.2.1 研究對(duì)象 |
| 6.2.1.1 腦部腫瘤患者臨床入組標(biāo)準(zhǔn) |
| 6.2.1.2 腦部非腫瘤病變患者入組標(biāo)準(zhǔn) |
| 6.2.2 腦腫瘤臨床指標(biāo)研究 |
| 6.2.2.1 臨床資料收集 |
| 6.2.2.2 影像學(xué)分析 |
| 6.2.2.3 臨床病理 |
| 6.2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 |
| 6.3 結(jié)果 |
| 6.3.1 臨床基本資料 |
| 6.3.2 影像學(xué)結(jié)果分析 |
| 6.3.3 病理結(jié)果 |
| 6.3.4 生存率分析 |
| 6.3.4.1 總體生存率 |
| 6.3.4.2 性別、年齡對(duì)生存時(shí)間的影響 |
| 6.3.4.3 WHO分級(jí)對(duì)生存時(shí)間的影響 |
| 6.3.5 腦脊液中CTC數(shù)量與生存時(shí)間的研究 |
| 6.4 討論 |
| 6.5 本章小結(jié) |
| 第七章 腦腫瘤基因檢測(cè) |
| 7.1 引言 |
| 7.2 材料和方法 |
| 7.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑及材料 |
| 7.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備與儀器 |
| 7.2.3 RNA測(cè)序 |
| 7.2.3.1 RNA提取 |
| 7.2.3.2 RNA質(zhì)量的驗(yàn)證 |
| 7.2.3.3 文庫(kù)構(gòu)建及上機(jī)測(cè)序 |
| 7.2.4 熒光定量PCR、Sanger測(cè)序與全外顯子測(cè)序 |
| 7.2.4.1 DNA提取 |
| 7.2.4.2 熒光定量PCR |
| 7.2.4.3 Sanger測(cè)序 |
| 7.2.4.4 全外顯子測(cè)序 |
| 7.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 |
| 7.3 結(jié)果 |
| 7.3.1 RNA測(cè)序結(jié)果分析 |
| 7.3.1.1 RNA質(zhì)量 |
| 7.3.1.2 差異表達(dá)基因篩選 |
| 7.3.1.3 差異基因分析 |
| 7.3.1.4 GO分析 |
| 7.3.1.5 KEGG通路分析 |
| 7.3.2 qPCR檢測(cè)結(jié)果 |
| 7.3.3 Sanger測(cè)序結(jié)果 |
| 7.3.4 全外顯子測(cè)序檢測(cè)結(jié)果 |
| 7.3.4.1 基因檢測(cè)結(jié)果 |
| 7.3.4.2 免疫治療藥物療效評(píng)估 |
| 7.4 討論 |
| 7.5 本章小結(jié) |
| 第八章 論文總結(jié)與展望 |
| 8.1 論文總結(jié) |
| 8.2 研究展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 科研成果 |
| 一.攻讀博士學(xué)位期間主持的科研項(xiàng)目和人才計(jì)劃項(xiàng)目 |
| 二.攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 |
（9）42例結(jié)核性腦膜炎臨床特征及預(yù)后影響因素分析（論文提綱范文）
| 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 資料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 致謝 |
| 綜述 結(jié)核性腦膜炎的研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
（10）腦脊液宏基因組測(cè)序技術(shù)在新型隱球菌性腦膜炎中的應(yīng)用分析（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 附圖 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述:宏基因組測(cè)序技術(shù)在隱球菌中的研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況 |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡(jiǎn)歷 |
四、腦積水患者腦室穿刺的腦脊液細(xì)胞學(xué)改變初步觀察（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]結(jié)核性腦膜炎長(zhǎng)期不良預(yù)后和耐藥的風(fēng)險(xiǎn)因素及其早期診斷方法的探討[D]. 林愛清. 山東大學(xué), 2021(11)
- [2]分流手術(shù)治療肺癌軟腦脊膜癌病長(zhǎng)期療效觀察與文獻(xiàn)回顧[J]. 楊少波,趙杰. 中華轉(zhuǎn)移性腫瘤雜志, 2020(03)
- [3]Krause入路切除松果體區(qū)病變術(shù)后小腦損傷的相關(guān)因素臨床分析[D]. 韓偉杰. 鄭州大學(xué), 2020(02)
- [4]肺腺癌腦（膜）轉(zhuǎn)移患者腦脊液基因檢測(cè)臨床研究[D]. 馬春華. 天津醫(yī)科大學(xué), 2020(06)
- [5]前循環(huán)顱內(nèi)破裂動(dòng)脈瘤栓塞術(shù)后應(yīng)用腰大池引流的拔管時(shí)機(jī)探討[D]. 董軍成. 河南大學(xué), 2020(02)
- [6]腦室腹腔分流術(shù)前腦脊液參數(shù)異常、術(shù)后體溫變化與術(shù)后顱內(nèi)感染的相關(guān)性研究[D]. 張歡. 南方醫(yī)科大學(xué), 2020(01)
- [7]基于癌性腦膜炎腦脊液二代測(cè)序的相關(guān)研究[D]. 趙躍. 河北醫(yī)科大學(xué), 2020(01)
- [8]兒童腦腫瘤循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)的構(gòu)建及初步臨床應(yīng)用[D]. 趙陽(yáng). 上海交通大學(xué), 2020
- [9]42例結(jié)核性腦膜炎臨床特征及預(yù)后影響因素分析[D]. 張莉. 安徽醫(yī)科大學(xué), 2020(02)
- [10]腦脊液宏基因組測(cè)序技術(shù)在新型隱球菌性腦膜炎中的應(yīng)用分析[D]. 王芳. 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院, 2020(12)
標(biāo)簽：腦脊液論文; 結(jié)核性腦膜炎論文; 腦膜炎論文; 腦脊液循環(huán)論文; 兒童腦積水論文;