一、雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定（論文文獻(xiàn)綜述）
許普之[1]（2020）在《腎型傳染性支氣管炎病毒致雞痛風(fēng)的多組學(xué)研究》文中研究說明由腎型傳染性支氣管炎病毒（Nephropathogenic infectious bronchitis virus,NIBV）感染引起的雞痛風(fēng)給全球養(yǎng)雞業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。為了研究腎型傳染性支氣管炎病毒感染造成雞痛風(fēng)的發(fā)病機(jī)制,選用240羽海蘭褐蛋雞并隨機(jī)分成攻毒組和對照組,每組設(shè)置3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)40羽。于試驗(yàn)第0天（28日齡）攻毒組按雞胚半數(shù)致死量測定結(jié)果（105 ELD50/0.2mL）人工滴鼻攻毒,0.2mL/羽;對照組滴鼻無菌生理鹽水,0.2mL/羽。觀察記錄雞的臨床癥狀,于試驗(yàn)第10天從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取4羽雞進(jìn)行采樣,然后分別使用RNA-Seq和GC-TOF/MS檢測了雞腎臟轉(zhuǎn)錄組學(xué)和代謝組學(xué)圖譜,以及利用16S rRNA-seq分析雞盲腸微生物組成的變化,進(jìn)一步對這三種表型數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析。試驗(yàn)結(jié)果如下:（1）對照組雞正常;攻毒組雞腎臟腫大,色蒼白,輸尿管增粗且有白色粘液;腎小管上皮細(xì)胞脫落,腎小管結(jié)構(gòu)喪失,以及間質(zhì)擴(kuò)張和大量的炎性細(xì)胞浸潤。（2）攻毒組肝臟、脾、法氏囊、腎、回腸、空腸均檢測到NIBV病毒,其中空腸中病毒載量最低,腎臟中最高;對照組雞各組織則均未檢測到病毒。（3）與對照組相比,腎臟代謝組學(xué)分析共檢出160個(gè)差異代謝物,通路富集分析顯示NIBV感染顯著改變了雞腎臟氨基酸代謝,糖代謝以及嘌呤代謝。（4）與對照組相比,腎臟轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析共檢出2868個(gè)差異表達(dá)基因,包括1521個(gè)上調(diào)基因和1347個(gè)下調(diào)基因。KEGG通路富集分析顯示“細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用”是最具代表性的上調(diào)基因富集通路,“過氧化物酶體”是下調(diào)基因富集最顯著的通路。其中“Toll樣受體信號(hào)通路”,“NOD樣受體信號(hào)通路”和“RIG-I樣受體信號(hào)通路”是顯著富集的參與先天免疫的模式識(shí)別受體信號(hào)通路。（5）與對照組相比,16S rRNA-seq分析結(jié)果顯示NIBV感染改變了攻毒組雞盲腸的微生物結(jié)構(gòu)組成,并降低了微生物的多樣性。LEfSe分析篩選出7個(gè)組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的用于區(qū)分NIBV感染的潛在生物標(biāo)志物（LDA Score>4）,即與對照組相比,攻毒組中變形菌門（Proteobacteria,P=0.037）的相對豐度顯著上升;擬桿菌科（Bacteroidaceae,P=0.037）,擬桿菌屬（Bacteroides,P=0.037）,Bacteroides vulgatus（P=0.016）,乳桿菌目（Lactobacillales,P=0.037）乳桿菌科（Lactobacillaceae,P=0.025）,乳桿菌屬（Lactobacillus,P=0.025）的相對豐度顯著下降。結(jié)論:NIBV病毒可以在雞的肝臟、脾、法氏囊、腎,回腸和空腸組織中進(jìn)行復(fù)制。NIBV感染顯著下調(diào)過氧化物酶體的作用,并顯著激活先天免疫系統(tǒng)中的模式識(shí)別受體信號(hào)通路,從而激活免疫應(yīng)答,促進(jìn)腎臟的炎癥及損傷,最終導(dǎo)致腎臟尿酸排泄障礙。嘌呤代謝發(fā)生改變并顯示出尿酸合成增加的趨勢。此外,NIBV感染能夠引起的盲腸菌群結(jié)構(gòu)的改變并降低微生物的多樣性。本研究為進(jìn)一步揭示NIBV感染致雞痛風(fēng)的發(fā)病分子機(jī)制提供了新的理論依據(jù)。
沈元朝[2]（2019）在《雞傳染性支氣管炎人工模型及病癥觀察》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理雞傳染性支氣管炎（Avian infectious bronchitis disease,IB）是一種由雞傳染性支氣管炎病毒（Avian infectious bronchitis virus,IBV）引起的急性、高傳染性的病毒性疾病。該疾病臨床上一般以呼吸道癥狀為主,還可導(dǎo)致蛋雞的產(chǎn)蛋數(shù)量與質(zhì)量下降,部分毒株還會(huì)導(dǎo)致腎臟、腸道等組織的損傷。目前,IBV在世界上眾多國家與地區(qū)流行,在國內(nèi),該病毒主要的流行株為腎型,M41血清型是其中之一。本研究中選用的IBVJS株與M41型的S1基因同源性達(dá)到了 99.2%,兩者之間可能存在親緣關(guān)系。因此,選用IBV JS毒株建立雞傳染性支氣管炎的人工感染模型將為國內(nèi)雞傳染性支氣管炎的致病機(jī)理研究提供有力的理論依據(jù)。1.雞傳染性支氣管炎人工感染模型攻毒途徑及劑量篩選:選用IBVJS為攻毒毒株,10日齡SPF雛雞為試驗(yàn)動(dòng)物,隨機(jī)平均分為7組,分別為氣管高、中、低劑量組、胸肌高、中、低劑量組和空白對照組,每組10只;采用喉頭氣管接種和胸肌注射兩種攻毒途徑,以濃度106EID50/mL,通過0.2 mL/只、0.1 mL/只、0.05 mL/只3個(gè)攻毒劑量進(jìn)行人工模型的建立。攻毒后144h內(nèi),早晚各一次對各組試驗(yàn)雞的精神、采食、飲水、糞便、呼吸等臨床表現(xiàn)進(jìn)行觀察,記錄病死率,對死亡雞剖檢觀察病變。并于攻毒后120 h各組雞泄殖腔棉拭子進(jìn)行IBV的PCR測定。結(jié)果顯示,空白對照組雞在精神、采食、飲水、運(yùn)動(dòng)、呼吸和排泄等方面均正常;感染模型組雛雞于攻毒24 h后陸續(xù)出現(xiàn)體溫上升癥狀,攻毒72 h后相繼出現(xiàn)精神沉郁、食欲減退至廢絕、羽毛松亂、伸頸張口呼吸并伴有啰音、喉頭有黏液、白色或水樣拉稀等IB典型臨床癥狀;病死剖檢可見喉頭氣管環(huán)出血,管腔中有黃色或黃褐色栓塞物,部分雛雞出現(xiàn)腎臟腫脹等典型病變;其中0.2 mL/只喉頭氣管接種組,發(fā)病率為100%,死亡率為20%,且PCR檢測IBV 陽性率最高,為感染動(dòng)物的最佳感染模型。2.雞傳染性支氣管炎人工模型病癥的觀察:取15日齡SPF雛雞70只平均隨機(jī)分為攻毒模型組和空白對照組,依據(jù)上述結(jié)果,采用106EID50/mL,0.2mL/只喉頭氣管攻毒。于攻毒后24 h起,在全面觀察臨床癥狀的基礎(chǔ)上,各組每48 h撲殺7只雛雞,進(jìn)行病理學(xué)、臟器組織病理學(xué)、免疫組化各組織內(nèi)病毒含量、血清生化及炎性因子的熒光定量PCR檢測。結(jié)果顯示:攻毒組雛雞在攻毒后24 h至264 h內(nèi)均有體溫升高,典型臨床癥狀和喉頭氣管黏膜腫脹、出血等典型病變于攻毒72 h后開始逐漸出現(xiàn)。其中喉頭氣管環(huán)出血最早出現(xiàn)于攻毒72 h后,而氣管黏液栓塞物在攻毒120 h最為明顯;其他臟器組織病變?nèi)绺?、腎、肺、脾、十二指腸等在72 h后隨時(shí)間的推移先后出現(xiàn)充血、出血、細(xì)胞變性及壞死等漸進(jìn)性病變,且與各組織內(nèi)的IBV含量、IL-1、IL-6、iNOS、IFN-α、IFN-γ等因子的mRNA表達(dá)量呈現(xiàn)一定的相關(guān)性。本研究建立了雞傳染性支氣管炎的人工感染模型,并對模型從病理學(xué)的角度進(jìn)行了較為深入的探究,為雞傳染性支氣管炎的中獸醫(yī)學(xué)辯證分型提供了科學(xué)有效的數(shù)據(jù),為研發(fā)療效好、毒副作用低的中獸藥奠定了基礎(chǔ)。
夏道倫[3]（2019）在《養(yǎng)雞場雞腎型傳染性支氣管炎的科學(xué)防控》文中指出雞腎型傳染性支氣管炎是雞傳染性支氣管炎的一種病理性表現(xiàn)形式。自上世紀(jì)90年代以來,雞腎型傳染性支氣管炎在我國的一些養(yǎng)雞場中相繼暴發(fā),且流行較廣泛,尤其是近年來,雞腎型傳染性支氣管炎在我國的養(yǎng)雞場（尤其是肉雞養(yǎng)殖場）中呈現(xiàn)大面積
李浩然,李哲,孟凡生,劉世霞[4]（2018）在《山東地區(qū)雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定及防治》文中認(rèn)為山東臨沂地區(qū)某雞場25日齡雞群發(fā)病,臨床表現(xiàn)為氣管啰音、咳嗽、打噴嚏,剖檢腎臟有大量尿酸鹽沉積,疑似感染雞腎型傳染性支氣管炎。為了探究發(fā)病雞群的病因,試驗(yàn)選取120只該場疑似雞腎型傳染性氣管炎病毒致死的病死雞,進(jìn)行剖檢,取腎、肺和氣管等組織器官經(jīng)過無菌處理后,分離得到若干株病毒,通過臨床檢查、病毒分離、血凝試驗(yàn)、雞胚傳代試驗(yàn)等方法鑒定。試驗(yàn)表明,所得結(jié)果與雞腎型傳染性支氣管病毒的臨床特征和特性基本一致,說明引起該雞群發(fā)病的病原為雞腎型傳染性支氣管炎病毒。
周海生[5]（2017）在《2001～2016年間華東地區(qū)IBV分子流行病學(xué)、致病性及S1蛋白的天然免疫應(yīng)答研究》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理傳染性支氣管炎（Infectious bronchitis,IB）是由傳染性支氣管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）引起雞的一種急性、高度接觸性傳染病,主要引起雞群呼吸道與腎臟疾病,是影響?zhàn)B禽業(yè)重要的病毒性病原之一。雖然IBV疫苗廣泛使用,但I(xiàn)B仍然頻繁爆發(fā),特別是以引起腎臟損傷的腎型IBV分離報(bào)道較多,給我國養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。由于IBV血清型眾多,且各血清型間交叉保護(hù)作用較低,同時(shí)IBV很容易發(fā)生基因突變和同源重組,導(dǎo)致新基因型甚至新血清型不斷出現(xiàn),這給養(yǎng)禽業(yè)IB的防控帶來巨大的困難。提示我們在防控IB中對病毒進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測,并對新型病毒或變異株的流行病學(xué)特點(diǎn)進(jìn)行分析,從而為制定IB有效的免疫防控策略提供重要的理論依據(jù)。目前IBV臨床分型包括呼吸型、腎型、生殖道型和腺胃型等,其中腎型IBV是近年來我國主要的IB病變型。腎型IBV主要引起雞腎臟腫大,尿酸鹽沉積,進(jìn)而引起雞群死亡率增加。病毒S蛋白在IBV的血清學(xué)分型、基因分型、病毒組織嗜性及致病性中發(fā)揮了決定性的作用,而S蛋白中中和抗原位點(diǎn)、受體結(jié)合區(qū)域都是位于S1亞基上。因此,研究IBVS1蛋白與宿主之間相互作用,可以為病毒組織嗜性與致病性方面的機(jī)理提供一定參考。本研究主要內(nèi)容包括以下4個(gè)部分。1、2001～2016年間華東地區(qū)IBV分子流行病學(xué)分析2010～2016年間,本研究共從華東地區(qū)疑似IB發(fā)病雞群分離到IBV 36株,其中從肉雞分離毒株35株,從蛋雞分離毒株1株。在所有分離株中,我們發(fā)現(xiàn)1例IB與H9亞型AIV混合感染。對36株IBV S1基因序列進(jìn)行測定,發(fā)現(xiàn)S1基因長度存在4種:1620/540（28 株）、1617/539（4 株）、1611/537（3 株）及 1638/546（1 株）。S 蛋白裂解位點(diǎn)存在 5種:HRRRR（25 株）、RRFRR（6 株）、RRSRR（3 株）、RRLRR（1 株）及 HRRKR（1株）。序列比對顯示本研究分離的36株IBV之間的S1基因核苷酸序列同源性在65.2%～99.9%,分離株與參考株之間S1基因核苷酸序列同源性在65.0%～99.9%。S1基因分型結(jié)果表明,36株IBV可劃分為七個(gè)基因型:QX型（26株）、Mass型（3株）、4/91型（3 株）、tl/CH/LDT3/03 型（1 株）、TW-Ⅰ型（1 株）、TC07-2 型（1 株）和新發(fā)現(xiàn)的 New-Ⅰ型（1株）。結(jié)合GenBank中2001～2016年中國分離的396株IBV毒株S1基因序列,S1基因分型結(jié)果顯示,2001～2016年間我國流行的432株IBV可以分為13個(gè)基因型,包括QX（321 株）、tl/CH/LDT3/03（25 株）、TW-I（20 株）、4/91（18 株）、Mass（18 株）、CK/CH/LSC/99I（7 株）、TC07-2（4 株）、TW-II（2 株）、Ck/CH/LDL/97I（1 株）、Arkansas（1株）、Vis S（1株）、及新鑒定的基因分支New-Ⅰ（8株）與New-Ⅱ（3株）。值得注意的是,屬于美國相關(guān)基因分支的ck/CH/LSD/110712已在我國出現(xiàn)。重組分析顯示,新出現(xiàn)的New-Ⅰ基因型IBV S1基因來源于4/91與tl/CH/LDT3/03型毒株之間的重組,基因分支New-Ⅱ病毒S1基因來源于tl/CH/LDT3/03型與QX型毒株重組。研究結(jié)果表明我國華東地區(qū)2001～2016年間流行的IBV基因型眾多,基因重組導(dǎo)致IBV新的基因型或變異株出現(xiàn)。本研究為今后IBV疫苗的研發(fā)和IB的防控提供一些參考。2、2001～2016年間我國IBV基因組序列重組分析為了解我國IBV分離株基因組重組特點(diǎn),特別是疫苗株基因參與IBV基因重組情況,本研究對分離株 CK/CH/2010/JT-1、CK/CH/2014/FJ14 及 CK/CH/2014/QL1403 全基因組序列進(jìn)行測定,同時(shí)收集2001～2016年間分離于我國的55株全基因組序列,并與參考株進(jìn)行了序列重組分析。序列分析顯示分離株CK/CH/2010/JT-1與CK/CH/2014/QL1403基因組中共鑒定出4個(gè)重組事件,分別位于CK/CH/2010/JT-1基因組24709-365、17160-19811、21136-21770片段及CK/CH/2014/QL1403基因組20395-24840片段。進(jìn)一步對基因組序列重組來源分析顯示 CK/CH/2010/JT-1 來源于 QX、CK/CH/LSC/99I、tl/CH/LDT3/03 及 4/91基因型IBV重組,CK/CH/2014/QL1403來源于QX與TC07-2型毒株重組,而CK/CH/2014/FJ14是一株典型的QX型IBV。應(yīng)用RDP4對我國2001～2016年間分離的55株IBV基因組序列進(jìn)行重組分析,結(jié)果顯示我國2001～2016年間流行的55株IBV中有52株IBV基因組存在重組事件,其中25個(gè)IBV分離株基因組中發(fā)現(xiàn)有疫苗型（Mass,tl/CH/LDT3/03及4/91型等）病毒基因組片段的重組,這一結(jié)果在SimPlot分析中進(jìn)一步得到確認(rèn)。根據(jù)生物信息學(xué)分析結(jié)果,證明流行于我國的IBV基因組序列存在許多基因重組事件,而且疫苗毒株基因頻繁參與了 IBV基因重組,導(dǎo)致IBV新的基因型或變異株出現(xiàn),提示在防控IB時(shí)注意合理使用IBV疫苗。3、我國IBV分離株致病性分析及交叉保護(hù)研究為了探究分離株 CK/CH/2010/JT-1、CK/CH/2014/FJ14 及 CK/CH/2014/QL1403 致病特點(diǎn)及不同毒株間抗原關(guān)系,本研究對分離株進(jìn)行動(dòng)物攻毒、交叉中和及交叉保護(hù)實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物攻毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示CK/CH/2010/JT-1與CK/CH/2014/FJ14可引起雛雞嚴(yán)重的呼吸道癥狀、腎臟病變及高死亡率（43.75%與50%）,而CK/CH/2014/QL1403不引起雛雞產(chǎn)生明顯的臨床癥狀與病理變化。中和實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明現(xiàn)有抗H120與4/91疫苗株雞多抗血清不能有效中和 IBV 分離株 CK/CH/2010/JT-1 與 CK/CH/2014/FJ14,而抗 QX 型毒株 CK/CH/2014/FJ14雞多抗血清能夠有效中和TC07-2型IBV CK/CH/2014/QL1403。交叉保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明CK/CH/2014/QL1403免疫雛雞后能為雞群提供有效保護(hù)來抵抗QX型毒株CK/CH/2014/FJ14 攻擊。本研究結(jié)果顯示 CK/CH/2010/JT-1 與 CK/CH/2014/FJ14 屬于 IBV強(qiáng)毒株,且目前常用H120與4/91疫苗株不能有效防控該毒株,而CK/CH/2014/QL1403是一株天然弱毒株,而且可以作為疫苗候選株來防控QX型IBV。4、IBV S1蛋白的天然免疫應(yīng)答研究為了探究IBV S1蛋白引起雞胚腎細(xì)胞（Chickenembryokidneycell,CEKC）天然免疫應(yīng)答反應(yīng),特別是腎型與呼吸型毒株S1蛋白引起CEKC天然免疫應(yīng)答差異,本研究成功構(gòu)建了腎型毒株CK/CH/2010/JT1、CK/CH/2014/FJ14與呼吸型IBVM41株S1基因真核表達(dá)載體,通過轉(zhuǎn)染CEKC研究其在細(xì)胞中的天然免疫應(yīng)答。結(jié)果表明IBV S1基因在CEKC中成功獲得了瞬時(shí)表達(dá),而且S1蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞漿中。在mRNA水平上,轉(zhuǎn)染后12 h,IBV 腎型毒株 CK/CH/2010/JT1、CK/CH/2014/FJ14 S1 蛋白引起 TLR3、MDA5 的表達(dá)明顯高于呼吸型M41;轉(zhuǎn)染后24h,腎型毒株CK/CH/2010/JT1、CK/CH/2014/FJ14 S1蛋白引起TLR3、MDA5、IFN-β及IL-6的表達(dá)顯著高于呼吸型M41。在蛋白水平上,S1蛋白在 CEKC 中瞬時(shí)表達(dá)后 24h,腎型毒株 CK/CH/2010/JT1、CK/CH/2014/FJ14 引起 TLR3、IFN-β及IL-6的表達(dá)顯著高于經(jīng)典株M41。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染CEKC 24 h時(shí),使用配體poly（I:C）和LPS刺激后,IBV不同致病性毒株S1蛋白引起腎細(xì)胞天然免疫沒有產(chǎn)生進(jìn)一步放大作用。本研究結(jié)果表明腎型與呼吸型毒株S1蛋白引起CEKC天然免疫應(yīng)答中TLR3、MDA5、IFN-β及IL-6的表達(dá)存在差異,暗示IBV對腎臟致病性差異可能與毒株S1蛋白引起腎細(xì)胞天然免疫中TLR3、MDA5、IFN-β及IL-6表達(dá)差異相關(guān)。
陳盛星[6]（2017）在《5株IBV地方分離株臨床優(yōu)勢毒株的篩選》文中研究指明雞傳染性支氣管炎（Infectious bronchitis,IB）是一種在雞群傳播較快的呼吸道疾病,導(dǎo)致產(chǎn)蛋雞群生長性能和雞蛋品質(zhì)下降等情況。該病病原——雞傳染性支氣管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）的套疊式復(fù)制方式使得其基因型、血清型眾多且仍處于不斷增加的趨勢。這就意味著,商品化疫苗株常常無法對地方性流行的IB提供有效的免疫保護(hù)。因此,根據(jù)地方流行毒株來篩選疫苗株或疫苗候選株,成為地方范圍內(nèi)防控IB的重要方向。本研究通過對某地區(qū)流行的5株IBV毒株進(jìn)行血清交叉中和試驗(yàn)以及S1基因測序與對比分析,對該地區(qū)流行毒株進(jìn)行血清分型和基因分型,并篩選出優(yōu)勢毒株,對研制區(qū)域性IB疫苗具有重要的參考價(jià)值。方法:本實(shí)驗(yàn)首先用18～20胚齡的氣管環(huán)組織作為培養(yǎng)系統(tǒng),對5株IBV地方分離株（JHL毒株、XPX毒株、SM毒株、ZDZ毒株、DJ毒株）進(jìn)行氣管環(huán)半數(shù)感染量（TOC-ID50）的測定;其次,制備出各個(gè)毒株的陽性血清,采用固定病毒-稀釋血清的方法,在氣管環(huán)組織培養(yǎng)物上進(jìn)行血清交叉中和試驗(yàn),用于血清分型;再次,對此5株IBV毒株S1基因進(jìn)行序列測定與分析比較,用于基因分型;最后根據(jù)分型結(jié)果篩選出優(yōu)勢毒株,并通過動(dòng)物回歸試驗(yàn)進(jìn)行免疫保護(hù)效果的驗(yàn)證。結(jié)果:（1）JHL、XPX、SM、ZDZ、DJ 毒株的 TOC-ID50 分別為1 0-6/ml、10-6.71/ml、10-5.10/ml、10-5.5/ml、10-5.72/ml;（2）血清交叉中和試驗(yàn)結(jié)果顯示,JHL與XPX、SM、DJ、ZDZ毒株的抗原相關(guān)系數(shù)分別是 26%、55%、50%、34%,XPX 與 SM、DJ、ZDZ 毒株的抗原相關(guān)系數(shù)分別是42%、68%、38%,SM與DJ、ZDZ毒株的抗原相關(guān)系數(shù)分別是45%、47%,DJ與ZDZ毒株的抗原相關(guān)系數(shù)是52%;5個(gè)毒株之間的抗原相關(guān)系數(shù)范圍在26%至68%,最高為DJ與XPX的68%,但沒有高于80%,結(jié)果表明5個(gè)毒株存在著抗原相關(guān)性,屬于相同血清型的不同亞型。（3）S1基因測序分析及基因分型結(jié)果顯示,5個(gè)IBV毒株的S1基因序列均存在不同程度的堿基突變和缺失,經(jīng)過建樹分析可知,JHL毒株、XPX毒株及DJ毒株屬于QX型毒株;SM分離株屬于4/91分群中的毒株;ZDZ分離株屬于Mass型分離株。（4）優(yōu)勢毒株篩選和動(dòng)物回歸試驗(yàn)結(jié)果顯示,通過幾個(gè)毒株間血清型和基因型相互關(guān)系的對比,選擇DJ這個(gè)毒株來免疫動(dòng)物進(jìn)行攻毒保護(hù)試驗(yàn);未免疫組雞群在攻毒后出現(xiàn)精神沉郁,剖檢腎臟出現(xiàn)尿酸鹽沉積,免疫組攻毒后未出現(xiàn)明顯臨床癥狀與病變。血凝抑制（HI）試驗(yàn)結(jié)果顯示,免疫組雞只攻毒后第2周血清效價(jià)在3.4log2～3.9log2之間,第2～5周其血清效價(jià)逐步上升,第5周血清效價(jià)在5.7log2～6.5log2之間。未免疫組雞只在攻毒4周后的血清效價(jià)在3.6log2～4.4log2之間,此后有開始上升的趨勢。相比于未免疫組,免疫組雞只在攻毒后的血清抗體產(chǎn)生時(shí)間較早,且效價(jià)較高,結(jié)果表明,使用DJ毒株進(jìn)行免疫接種可以對其它4個(gè)分離株起到較好的臨床保護(hù)作用。結(jié)論:JHL、XPX、SM、ZDZ及DJ 5株分離株均為同種血清型不同亞型;JHL毒株、XPX毒株及DJ毒株這三個(gè)分離株基因型為QX型;SM毒株與4/91型;ZDZ毒株為Mass型;DJ毒株為本實(shí)驗(yàn)中的優(yōu)勢毒株。
丁小梅[7]（2013）在《雞腎型傳染性支氣管炎的診斷及治療》文中提出為了促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展,養(yǎng)殖戶對于家雞各種疾病的預(yù)防和治療顯得尤為重要。尤其是傳染性疾病,一旦大面積爆發(fā),對于養(yǎng)殖戶的損失將是無法預(yù)計(jì)且不可估量的。在眾多的疾病中,雞腎型傳染性支氣管炎是一種高度接觸性的疾病,對于家雞的危害尤為嚴(yán)重。雞腎型傳染性支氣管炎,是一種由傳染性支氣管炎病毒引發(fā)的急性、高度接觸性傳染病。主要的發(fā)病群體為家雞,偶見于鵪鶉等飛禽。雞腎型傳染
李曉峰,鄭振宇,楊紅瑞,許保疆,張怡磊,商艷紅[8]（2012）在《雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定》文中指出2012年3月,新鄭市某蛋雞場發(fā)生了1例疑似腎型傳染性支氣管炎病,取剖檢病雞的氣管和肺臟組織經(jīng)過無菌處理,分離到1株病毒。為確定該病毒,應(yīng)用病毒分離、血凝試驗(yàn)、雞胚矮小化試驗(yàn)、干擾新城疫病毒復(fù)制試驗(yàn)、瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)、RT-PCR鑒定和動(dòng)物回歸試驗(yàn)方法鑒定,結(jié)果均符合雞腎型傳染性支氣管病毒的生理特性。通過檢查結(jié)果結(jié)合臨床、剖檢癥狀,確認(rèn)該病毒就是雞腎傳染性支氣管炎病毒。
黃中利[9]（2011）在《禽喘康顆粒沖劑對傳染性支氣管炎病毒作用機(jī)理的研究》文中認(rèn)為雞傳染性支氣管炎（avian infectious bronchitis,IB）是由雞傳染性支氣管炎病毒（avian infectious bronchitis virus,IBV）引起的一種急性、高度接觸性傳染病。該病主要侵害雞的呼吸系統(tǒng)、泌尿生殖系統(tǒng)和消化系統(tǒng)等，是嚴(yán)重危害我國養(yǎng)禽業(yè)的烈性傳染病之一。IBV是冠狀病毒科的代表種，屬RNA病毒，由于RNA不穩(wěn)定易降解又缺乏作為單鏈RNA的互補(bǔ)鏈，IBV的RNA聚合酶缺乏校對機(jī)制，使得每一輪復(fù)制過程中都有可能誘發(fā)變異，IBV的血清型已達(dá)26種之多，不同血清型之間僅有部分或完全沒有交叉免疫保護(hù)。中草藥可直接作用于機(jī)體的免疫器官，提高機(jī)體免疫功能，激發(fā)機(jī)體自身的抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化作用，起到“扶正”作用；同時(shí)藥物所含的生物堿、蒽醌類化合物、有機(jī)酸等成分具有抗菌、抑菌、抗毒素及抗病毒作用，殺滅病原微生物或抑制病原微生物活性，降低對機(jī)體的危害，達(dá)到“祛邪”目的。禽喘康顆粒沖劑是由金銀花、大青葉、苦杏仁等組成的純中藥制劑，具有清熱解毒，止咳、化痰、平喘之功效，主要用于由病毒或細(xì)菌感染引起的呼吸系統(tǒng)疾病。本研究分別采用雞胚中和試驗(yàn)、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)、免疫器官指數(shù)試驗(yàn)和動(dòng)物攻毒保護(hù)試驗(yàn)，研究了禽喘康顆粒沖劑對雞傳染性支氣管炎病毒的作用機(jī)理。結(jié)果表明，禽喘康顆粒沖劑抑制IBV-M41（1:10）感染雞胚的有效時(shí)間為10min，保護(hù)率為83.33%，抑制效果無明顯時(shí)效性；0.1%病毒靈溶液對M41（1:10、1:100）活性無抑制作用。禽喘康顆粒沖劑對M41原液、1:10倍、1:100倍稀釋接種雞胚的保護(hù)率分別為50%、90%和100%，與病毒對照組差異極顯著（P<0.01），M41原液組與1:10倍稀釋組、1:100倍稀釋組差異極顯著（P<0.01），M411:10倍稀釋組與1:100倍稀釋組差異不顯著（P>0.05）；0.1％病毒靈對M41原液、1:10倍稀釋組、1:100倍稀釋組感染率均為100%，與禽喘康差異極顯著（P<0.01）。禽喘康顆粒沖劑在M411:1倍稀釋組、1:10倍稀釋組、1:100倍稀釋組侏儒胚加蜷曲胚的比率較病毒靈組分別低20個(gè)、26.67個(gè)、20個(gè)百分點(diǎn)，1:10倍稀釋組、1:100倍稀釋組間差異極顯著（P<0.01）。雛雞免疫第7d、14d、21d，禽喘康顆粒沖劑組與藥物對照組抗體效價(jià)均較疫苗對照組低，但差異均不顯著（P>0.05）；免疫第28d，試驗(yàn)組較左旋咪唑組和疫苗對照組高0.93個(gè)和0.01個(gè)滴度，前者差異顯著（P<0.05）；左旋咪唑?qū)φ战M抗體效價(jià)除免疫第7d高于試驗(yàn)組外，其它均低于試驗(yàn)組，且28d達(dá)顯著差異（P<0.01）；試驗(yàn)組抗體效價(jià)始終低于疫苗對照組，免疫第7d差異顯著（P<0.05）。禽喘康顆粒沖劑與左旋米唑均能顯著提T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能，提高抗病能力（P<0.05）；禽喘康顆粒沖劑組法氏囊指數(shù)低于空白對照組，但差異不顯著（P>0.05），而脾臟指數(shù)顯著高于空白對照組（P<0.05）；胸腺指數(shù)高于對照組，但差異不顯著（P>0.05）。禽喘康顆粒沖劑對呼吸型IB的臨床預(yù)防效果優(yōu)于治療效果。預(yù)防組的保護(hù)率為93.3%，極顯著高于感染不治療組的46.4%；禽喘康顆粒沖劑高劑量、中劑量、低劑量治療組的治愈率分別為84.6%、83.3%、78.6%，比雞清瘟散組分別高15.4個(gè)、14.1個(gè)、9.4個(gè)百分點(diǎn)，均具顯著差異（P<0.01）。試驗(yàn)用藥組發(fā)病率明顯低于攻毒對照組（P<0.01）。人工感染腎型IB的試驗(yàn)結(jié)果表明，禽喘康顆粒沖劑預(yù)防（I、II）組的發(fā)病率分別比攻毒對照組低46.14%和50.06%，差異極顯著（P<0.01）；治療（I、II）組的死亡率分別比攻毒對照組低82.66%和86.96%，且差異極顯著（P<0.01）；治愈率均達(dá)80%以上。
譚興智[10]（2011）在《雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離與鑒定》文中認(rèn)為自兩個(gè)雞場發(fā)病雞群分離到兩個(gè)腎型IBV毒株,分別命名為F1、F2株,并對其培養(yǎng)特性、理化特性、血凝性、致病性、免疫學(xué)特性以及對新城疫病毒的干擾性等方面進(jìn)行研究。結(jié)果表明,兩個(gè)毒株均能導(dǎo)致雞胚感染,引起雞胚出血、萎縮、絨毛尿囊膜增厚;IBV分離株對乙醚敏感,對酸堿有一定的耐性,屬有囊膜病毒,該病毒不耐熱,56℃ 30min即能滅活;分離株均能抑制雞新城疫病毒B株在雞胚中繁殖;分離株回歸42日齡雛雞后從第3天開始發(fā)病,發(fā)病率為100%,病死率為20%～30%。此外,用本病毒制備的油乳劑滅活苗,基本上可抵抗該毒株的攻擊。
二、雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定（論文開題報(bào)告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點(diǎn)或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲(chǔ)管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲(chǔ)器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級(jí)分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級(jí)頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲(chǔ)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實(shí)驗(yàn)法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。
定性分析法：對研究對象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會(huì)科學(xué)用來分析社會(huì)現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定（論文提綱范文）
（1）腎型傳染性支氣管炎病毒致雞痛風(fēng)的多組學(xué)研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 縮略詞表 |
| 前言 |
| 第一章 文獻(xiàn)綜述 |
| 1 雞痛風(fēng)發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展 |
| 1.1 雞痛風(fēng)簡介 |
| 1.2 雞痛風(fēng)的致病因素 |
| 1.2.1 雞痛風(fēng)的非傳染性致病因素 |
| 1.2.2 雞痛風(fēng)的傳染性致病因素 |
| 1.3 雞痛風(fēng)發(fā)病機(jī)制研究 |
| 1.4 雞痛風(fēng)的病理學(xué)變化及診斷 |
| 1.5 雞痛風(fēng)的預(yù)防及治療 |
| 2 傳染性支氣管炎病毒研究進(jìn)展 |
| 2.1 IBV病原學(xué) |
| 2.2 IBV的流行病學(xué)調(diào)查 |
| 2.3 IBV的病理學(xué)研究 |
| 2.4 IBV的致病性研究 |
| 2.5 IBV的檢測及診斷 |
| 3 多組學(xué)技術(shù)及其應(yīng)用 |
| 3.1 轉(zhuǎn)錄組學(xué)及其應(yīng)用 |
| 3.2 代謝組學(xué)及其應(yīng)用 |
| 3.3 腸道微生物組學(xué)及其應(yīng)用 |
| 4 本研究目的與意義 |
| 第二章 試驗(yàn)研究 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 試驗(yàn)材料 |
| 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組 |
| 1.1.2 主要儀器 |
| 1.1.3 主要試劑 |
| 1.1.4 試劑、培養(yǎng)基的制備 |
| 1.2 試驗(yàn)方法 |
| 1.2.1 樣品采集 |
| 1.2.2 組織病理學(xué)檢查及血清尿酸檢測 |
| 1.2.3 各組織中病毒載量的測定 |
| 1.2.4 腎臟代謝組檢測 |
| 1.2.5 腎臟轉(zhuǎn)錄組測序 |
| 1.2.6 16S rRNA測序分析 |
| 2 試驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.1 臨床病理變化及血清尿酸檢測 |
| 2.2 各組織中病毒載量測定 |
| 2.3 NIBV感染狀態(tài)下腎臟代謝組學(xué)特征 |
| 2.3.1 腎臟代謝組主成分分析(PCA) |
| 2.3.2 腎臟代謝組正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA) |
| 2.3.3 腎臟差異代謝物分析 |
| 2.3.4 腎臟差異代謝物的代謝通路分析 |
| 2.4 NIBV感染對腎臟基因轉(zhuǎn)錄水平的影響 |
| 2.4.1 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量整體分析 |
| 2.4.2 轉(zhuǎn)錄組測序重復(fù)相關(guān)性評(píng)估 |
| 2.4.3 差異表達(dá)基因分析 |
| 2.4.4 GO功能富集分析 |
| 2.4.5 差異基因KEGG富集分析 |
| 2.5 NIBV感染狀態(tài)下雞盲腸菌群的影響 |
| 2.5.1 16S rRNA測序數(shù)據(jù)處理與質(zhì)控統(tǒng)計(jì) |
| 2.5.2 OTU分析和物種注釋 |
| 2.5.3 Alpha多樣性分析 |
| 2.5.4 Beta多樣性分析 |
| 2.6 相關(guān)性分析 |
| 3 討論 |
| 3.1 NIBV感染對模式識(shí)別受體信號(hào)通路的影響 |
| 3.2 NIBV感染對過氧化物酶體的影響 |
| 3.3 NIBV感染對機(jī)體代謝水平的影響 |
| 3.4 差異表達(dá)基因與差異代謝物的相關(guān)性分析 |
| 3.5 NIBV感染對盲腸菌群的影響 |
| 全文總結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文 |
（2）雞傳染性支氣管炎人工模型及病癥觀察（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符號(hào)說明 |
| 第一章 文獻(xiàn)綜述 |
| 前言 |
| 1 雞傳染性支氣管炎的研究現(xiàn)狀 |
| 1.1 IBV病原學(xué) |
| 1.2 IBV流行病學(xué) |
| 1.3 IB的臨床分型 |
| 1.4 IB診斷方法 |
| 1.5 防治措施 |
| 2 雞傳染性支氣管炎人工感染模型研究進(jìn)展 |
| 3 研究目的與意義 |
| 第二章 雞傳染性支氣管炎人工模型建立與病癥觀察 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 儀器與試劑 |
| 1.3 病毒復(fù)壯 |
| 1.4 人工造模攻毒途徑及劑量篩選 |
| 1.5 人工模型病癥的觀察 |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 2.1 人工造模攻毒途徑及劑量篩選結(jié)果 |
| 2.2 人工模型病癥的觀察結(jié)果 |
| 2.3 模型病癥的組織病理切片觀察 |
| 2.4 免疫組化結(jié)果 |
| 2.5 血清生化結(jié)果 |
| 2.6 熒光定量PCR檢測組織中炎性因子結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 3.1 臨床癥狀和剖檢病變討論 |
| 3.2 組織病理及免疫組化切片結(jié)果討論 |
| 3.3 血清生化結(jié)果討論 |
| 3.4 組織中炎性因子結(jié)果討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 全文總結(jié) |
| 致謝 |
（3）養(yǎng)雞場雞腎型傳染性支氣管炎的科學(xué)防控（論文提綱范文）
| 1 病原 |
| 2 流行特點(diǎn) |
| 3 臨床癥狀 |
| 4 病理變化及其診斷 |
| 5 科學(xué)免疫防控 |
| 5.1 免疫疫苗的選擇 |
| 5.2 使用疫苗免疫的注意事項(xiàng) |
| 5.3 使用疫苗的免疫程序制定 |
（4）山東地區(qū)雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定及防治（論文提綱范文）
| 1 山東臨沂地區(qū)禽病流行情況 |
| 2 材料 |
| 2.1 試驗(yàn)動(dòng)物 |
| 2.1.1 發(fā)病雞只 |
| 2.1.2 SPF雞胚 |
| 2.2 試驗(yàn)主要儀器及藥品 |
| 2.2.1 試驗(yàn)儀器 |
| 2.2.2 試驗(yàn)藥品 |
| 3 方法 |
| 3.1 臨床診斷與剖檢 |
| 3.2 病料采集處理 |
| 3.3 雞胚傳代 |
| 3.4 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn) |
| 3.4.1 樣本要求 |
| 3.4.2 RNA提取 |
| 3.4.3 反轉(zhuǎn)錄 |
| 3.4.4 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) |
| 3.4.5 核酸電泳 |
| 4 結(jié)果 |
| 4.1 臨床及剖檢觀察 |
| 4.2 雞胚傳代 |
| 4.3 PCR |
| 5 防治 |
| 5.1 預(yù)防 |
| 5.2 治療 |
| 6 總結(jié)和討論 |
（5）2001～2016年間華東地區(qū)IBV分子流行病學(xué)、致病性及S1蛋白的天然免疫應(yīng)答研究（論文提綱范文）
| 摘要 ABSTRACT 中英對照縮略詞 第一部分 文獻(xiàn)綜述 |
| 綜述一 傳染性支氣管炎病毒研究進(jìn)展 |
| 1 病原學(xué) |
| 1.1 發(fā)現(xiàn)、命名與分類 |
| 1.2 生物學(xué)特性 |
| 1.3 基因組結(jié)構(gòu)與主要功能蛋白 |
| 1.4 生活周期 |
| 1.5 致病機(jī)理 |
| 1.6 毒株分型 |
| 2 流行病學(xué) |
| 2.1 自然宿主 |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)室宿主 |
| 2.3 傳播方式 |
| 3 臨床癥狀及病理變化 |
| 3.1 呼吸道 |
| 3.2 腎臟 |
| 3.3 生殖道 |
| 3.4 消化道 |
| 3.5 其它 |
| 4 診斷 |
| 4.1 病原的分離鑒定 |
| 4.2 血清學(xué)診斷技術(shù) |
| 4.3 分子生物學(xué)檢測技術(shù) |
| 5 防治 |
| 5.1 免疫預(yù)防 |
| 5.2 治療 |
| 綜述二 傳染性支管炎病毒在世界范圍內(nèi)流行現(xiàn)狀 |
| 1 亞洲國家IBV流行現(xiàn)狀 |
| 2 歐洲國家IBV流行現(xiàn)狀 |
| 3 非洲國家IBV流行現(xiàn)狀 |
| 4 北美洲國家IBV流行現(xiàn)狀 |
| 5 南美洲國家IBV流行現(xiàn)狀 |
| 6 大洋洲國家IBV流行現(xiàn)狀 |
| 綜述三 禽冠狀病毒纖突蛋白研究進(jìn)展 |
| 1 禽冠狀病毒S蛋白概述 |
| 1.1 結(jié)構(gòu)特點(diǎn) |
| 1.2 序列多樣性 |
| 1.3 其它禽類冠狀病毒S蛋白 |
| 2 禽冠狀病毒S蛋白功能 |
| 2.1 組織吸附中的作用 |
| 2.2 細(xì)胞親和性中的作用 |
| 2.3 體內(nèi)組織嗜性與致病性中的作用 |
| 3 病毒吸附中宿主影響因素 |
| 3.1 唾液酸 |
| 3.2 蛋白受體 |
| 3.3 凝集素 |
| 3.4 硫酸肝素 |
| 3.5 宿主蛋白酶 |
| 4 禽冠狀病毒S蛋白引起宿主天然免疫反應(yīng) |
| 參考文獻(xiàn) 第二部分 研究內(nèi)容 |
| 第一章 2001～2016年間華東地區(qū)傳染性支氣管炎病毒分子流行病學(xué)分析 |
| 1 材料 |
| 1.1 生物材料 |
| 1.2 試劑與載體 |
| 1.3 主要試劑溶液配制 |
| 1.4 主要儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 引物設(shè)計(jì) |
| 2.2 病毒增殖 |
| 2.3 病毒總RNA提取 |
| 2.4 S1基因擴(kuò)增與序列測定 |
| 2.5 S1基因序列分析 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 病毒分離結(jié)果 |
| 3.2 分離株S1蛋白長度與裂解位點(diǎn)的多樣性 |
| 3.3 分離株S1基因分型的多樣性 |
| 3.4 新分支New-Ⅰ與New-Ⅱ基因型IBV S1基因的來源 |
| 4 討論 |
| 第二章 2001～2016年間我國傳染性支氣管炎病毒基因組序列重組分析 |
| 1 材料 |
| 1.1 生物材料 |
| 1.2 試劑與載體 |
| 1.3 主要試劑溶液配制 |
| 1.4 主要儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 分離株全序列擴(kuò)增引物設(shè)計(jì) |
| 2.2 分離株全基因組序列RT-PCR |
| 2.3 病毒基因組5'與3'端序列擴(kuò)增 |
| 2.4 分離株基因組序列測定與分析 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 分離株基因組結(jié)構(gòu) |
| 3.2 分離株CK/CH/2010/JT-1基因組的重組來源 |
| 3.3 分離株CK/CH/2014/QL1403基因組的重組來源 |
| 3.4 我國2001～2016年間IBV基因組重組現(xiàn)象普遍 |
| 4 討論 |
| 第三章 我國雞傳染性支氣管炎病毒分離株致病性分析及交叉保護(hù)研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 生物材料 |
| 1.2 主要試劑 |
| 1.3 主要儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 病毒擴(kuò)增 |
| 2.2 SPF雞致病性實(shí)驗(yàn) |
| 2.3 病毒中和實(shí)驗(yàn) |
| 2.4 交叉保護(hù)實(shí)驗(yàn) |
| 2.5 雞IBV血清抗體ELISA |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 IBV分離株致病性 |
| 3.2 交叉中和實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 3.3 天然弱毒CK/CH/2014/QL1403對QX型IBV交叉保護(hù)實(shí)驗(yàn) |
| 4 討論 |
| 第四章 傳染性支氣管炎病毒S1蛋白的天然免疫應(yīng)答研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 生物材料 |
| 1.2 試劑與載體 |
| 1.3 主要試劑溶液配制 |
| 1.4 主要儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 引物設(shè)計(jì) |
| 2.2 真核表達(dá)載體的構(gòu)建 |
| 2.3 CEKC的制備 |
| 2.4 CEKC的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染 |
| 2.5 共聚焦顯微鏡熒光分析 |
| 2.6 Western-blot |
| 2.7 熒光定量PCR方法檢測相關(guān)因子 |
| 2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 S1基因RT-PCR擴(kuò)增結(jié)果 |
| 3.2 重組質(zhì)粒酶切鑒定 |
| 3.3 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染CEKC后S1蛋白的表達(dá) |
| 3.4 IBV S1蛋白引起CEKC天然免疫相關(guān)因子表達(dá)差異 |
| 3.5 配體刺激后IBV S1蛋白引起CEKC天然免疫相關(guān)因子表達(dá)差異 |
| 4 討論 |
| 參考文獻(xiàn) 全文總結(jié) 致謝 攻讀博士期間所獲成果 |
（6）5株IBV地方分離株臨床優(yōu)勢毒株的篩選（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文縮略詞對照表 |
| 第一章 綜述 |
| 1 雞傳染性支氣管炎研究概況 |
| 2 雞傳染性支氣管炎病原學(xué) |
| 2.1 分類地位 |
| 2.2 形態(tài)學(xué)特征 |
| 2.3 理化特征和生物學(xué)特征 |
| 2.4 培養(yǎng)特性 |
| 3 雞傳染性支氣管炎病毒的基因組與編碼蛋白 |
| 3.1 基因組 |
| 3.2 編碼蛋白 |
| 4 雞傳染性支氣管炎病毒的分型 |
| 4.1 免疫型 |
| 4.2 臨床分型 |
| 4.3 血清型 |
| 4.4 基因分型 |
| 5 雞傳染性支氣管炎病毒疫苗分類 |
| 5.1 滅活疫苗 |
| 5.2 活疫苗 |
| 5.3 基因工程疫苗 |
| 5.4 DNA疫苗 |
| 6 本研究的目的與意義 |
| 第二章 5株雞傳染性支氣管炎病毒的血清分型 |
| 1 材料 |
| 1.1 毒株與SPF種蛋 |
| 1.2 主要試劑 |
| 1.3 主要試驗(yàn)儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 病毒增殖 |
| 2.2 病毒陽性血清的制備 |
| 2.3 氣管環(huán)組織培養(yǎng) |
| 2.4 TOC-ID50測定 |
| 2.5 血清交叉中和試驗(yàn) |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 各毒株TOC-ID_(50)檢測結(jié)果 |
| 3.2 血清交叉中和試驗(yàn)結(jié)果 |
| 3.3 血清交叉中和相關(guān)稀釋 |
| 4 討論 |
| 第三章 5株雞傳染性支氣管炎病毒的基因分型 |
| 1 材料 |
| 1.1 毒株與SPF種蛋 |
| 1.2 主要試劑 |
| 1.3 主要儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 引物設(shè)計(jì)與合成 |
| 2.2 病毒RNA提取 |
| 2.3 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng) |
| 2.4 PCR反應(yīng)、測序及序列分析 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 雞傳染性支氣管炎病毒S1基因擴(kuò)增與測序結(jié)果 |
| 3.2 雞傳染性支氣管炎病毒S1基因序列分析結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 第四章 優(yōu)勢毒株篩選與動(dòng)物實(shí)驗(yàn) |
| 1 材料 |
| 1.1 SPF種蛋與公雞 |
| 1.2 主要試劑 |
| 1.3 主要儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 優(yōu)勢毒株的選擇 |
| 2.2 動(dòng)物驗(yàn)證試驗(yàn) |
| 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與處理 |
| 2.2.2 紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)(HA) |
| 2.2.3 血凝抑制試驗(yàn)(HI) |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 臨床癥狀與病理變化 |
| 3.2 抗體效價(jià)測定結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 第五章 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 1. S1基因測序結(jié)果 |
| 致謝 |
（7）雞腎型傳染性支氣管炎的診斷及治療（論文提綱范文）
| 1 病原 |
| 2 臨床癥狀與診斷 |
| 3 病原的分離和鑒定 |
| 4 治療方法 |
| 5 預(yù)防方法 |
| 6 小結(jié) |
（8）雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定（論文提綱范文）
| 1 材料與方法 |
| 1.1 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn) |
| 1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 |
| 1.3 試驗(yàn)主要儀器及藥品 |
| 1.4 操作過程和方法 |
| 1.4.1 病毒分離 |
| 1.4.2 血凝特性試驗(yàn) |
| 1.4.3 雞胚矮小化試驗(yàn) |
| 1.4.4 雞新城疫干擾試驗(yàn) |
| 1.4.5 瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn) |
| 1.4.6 RT-PCR試驗(yàn) |
| 1.4.7 動(dòng)物回歸試驗(yàn) |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 2.1 病毒分離 |
| 2.2 血凝試驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.3 雞胚矮小化試驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.4 雞新城疫干擾試驗(yàn) |
| 2.5 瓊脂凝膠沉淀試驗(yàn) |
| 2.6 RT-PCR試驗(yàn) |
| 2.7 動(dòng)物回歸試驗(yàn) |
| 3 討論 |
（9）禽喘康顆粒沖劑對傳染性支氣管炎病毒作用機(jī)理的研究（論文提綱范文）
| 縮略詞 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 一 引言 |
| 1 雞傳染性支氣管炎的研究進(jìn)展 |
| 1.1 雞傳染性支氣管炎概述 |
| 1.2 IBV 病原學(xué)研究的新進(jìn)展 |
| 1.3 IBV 致病的分子機(jī)理研究 |
| 1.4 IBV 感染的免疫機(jī)理研究 |
| 1.5 IBV 的易感性 |
| 1.6 IB 的臨床癥狀 |
| 1.7 IB 的病理變化研究 |
| 1.8 病理組織學(xué)變化 |
| 1.9 IBV 的診斷技術(shù)研究 |
| 1.10 IB 的防治措施研究 |
| 2 中草藥防治雞傳染性支氣管炎研究綜述 |
| 2.1 中草藥防治疾病的作用機(jī)理 |
| 2.2 中藥對 IB 防治效果的研究 |
| 2.3 中獸藥研究及臨床應(yīng)用存在的問題 |
| 2.4. 抗病毒作用 |
| 2.5 抗炎作用 |
| 2.6 誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生 |
| 2.7 抗腫瘤作用 |
| 2.8 抗氧化作用 |
| 2.9 其他作用 |
| 2.10 中藥對 IB 防治效果的研究 |
| 2.11 中獸藥研究及臨床應(yīng)用存在的問題 |
| 3 禽喘康顆粒沖劑概述 |
| 二 禽喘康顆粒沖劑對 IBV 活性影響的研究 |
| 1 試驗(yàn)材料 |
| 2 試驗(yàn)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 分析與討論 |
| 5 小結(jié) |
| 三 禽喘康顆粒沖劑對雞免疫功能影響的研究 |
| 1 試驗(yàn)材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 分析與討論 |
| 4 小結(jié) |
| 四 禽喘康顆粒沖劑對人工感染雞傳染性支氣管炎病毒防治效果的研究 |
| 1 試驗(yàn)材料 |
| 2 試驗(yàn)方法 |
| 3 效果判定 |
| 4 試驗(yàn)結(jié)果 |
| 5 分析與討論 |
| 6 小結(jié) |
| 五 禽喘康顆粒沖劑防治雞腎型傳染性支氣管炎的研究 |
| 1 材料與方法 |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 3 討論與小結(jié) |
| 4 小結(jié) |
| 六 結(jié)論 |
| 七 參考文獻(xiàn) |
| 八 致謝 |
| 個(gè)人簡介 |
（10）雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離與鑒定（論文提綱范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 毒株 |
| 1.1.2 病料 |
| 1.1.3 雞胚 |
| 1.1.4 化學(xué)試劑 |
| 1.1.5 試驗(yàn)設(shè)備 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 病毒的分離 |
| 1.2.2 雞胚的培養(yǎng)特性 |
| 1.2.3 病毒的理化特性鑒定 |
| 1.2.3. 1 乙醚敏感性試驗(yàn) |
| 1.2.3. 2 p H3.0及p H11.0穩(wěn)定試驗(yàn) |
| 1.2.3. 3 熱穩(wěn)定試驗(yàn) |
| 1.2.4 血清學(xué)試驗(yàn) |
| 1.2.4. 1 瓊擴(kuò)試驗(yàn)(AGP) |
| 1.2.4. 3 血凝抑制試驗(yàn)(HI) |
| 1.2.5 IBV對NDV的干擾試驗(yàn) |
| 1.2.6 病毒感染力的測定 |
| 1.2.7動(dòng)物回歸試驗(yàn) |
| 1.2.8 免疫攻毒保護(hù)試驗(yàn) |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1病毒的分離 |
| 2.2雞胚的培養(yǎng)特性 |
| 2.3 病毒理化特性的鑒定 |
| 2.3.1 乙醚敏感試驗(yàn) |
| 2.3.2 p H3.0和pH11.0耐受性試驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.3.3 熱穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.4 血清學(xué)試驗(yàn) |
| 2.4.1 AGP試驗(yàn) |
| 2.4.2 HA試驗(yàn) |
| 2.4.3 HI試驗(yàn) |
| 2.5 IBV對NDV的干擾試驗(yàn) |
| 2.6 病毒感染力的測定 |
| 2.7動(dòng)物回歸試驗(yàn) |
| 2.8免疫攻毒保護(hù)試驗(yàn) |
| 3 結(jié)論 |
四、雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]腎型傳染性支氣管炎病毒致雞痛風(fēng)的多組學(xué)研究[D]. 許普之. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué), 2020(07)
- [2]雞傳染性支氣管炎人工模型及病癥觀察[D]. 沈元朝. 揚(yáng)州大學(xué), 2019(02)
- [3]養(yǎng)雞場雞腎型傳染性支氣管炎的科學(xué)防控[J]. 夏道倫. 養(yǎng)禽與禽病防治, 2019(05)
- [4]山東地區(qū)雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定及防治[J]. 李浩然,李哲,孟凡生,劉世霞. 家禽科學(xué), 2018(09)
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- [7]雞腎型傳染性支氣管炎的診斷及治療[J]. 丁小梅. 當(dāng)代畜牧, 2013(20)
- [8]雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定[J]. 李曉峰,鄭振宇,楊紅瑞,許保疆,張怡磊,商艷紅. 當(dāng)代畜牧, 2012(11)
- [9]禽喘康顆粒沖劑對傳染性支氣管炎病毒作用機(jī)理的研究[D]. 黃中利. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué), 2011(07)
- [10]雞腎型傳染性支氣管炎病毒的分離與鑒定[J]. 譚興智. 家禽科學(xué), 2011(07)
標(biāo)簽：雞傳染性支氣管炎論文; 血清蛋白論文; 支氣管炎論文; 基因合成論文; 疫苗事件論文;