一、灰霉病菌對(duì)黃瓜番茄及其它植物的致病性初探（論文文獻(xiàn)綜述）
何永林[1]（2021）在《假茄科雷爾氏菌對(duì)瓜類(lèi)作物的致病性以及南瓜響應(yīng)病菌侵染的轉(zhuǎn)錄組和代謝組分析》文中提出青枯菌復(fù)合種（Ralstonia solanacearum species complex,RSSC）具有豐富的寄主多樣性,其中假茄科雷爾氏菌（R.pseudosolanacearum）分布范圍最廣,引起的植物青枯病往往造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。近年來(lái),葫蘆科作物青枯病在我國(guó)少數(shù)區(qū)域有逐步發(fā)生嚴(yán)重的趨勢(shì),但關(guān)于不同寄主來(lái)源青枯菌菌株對(duì)葫蘆科植物及其他科植物的致病性情況不清楚,葫蘆科植物抵抗不同致病性菌株侵染的機(jī)理尚不明確,難以制定有效的防治葫蘆科作物青枯病的措施。為此,本研究在前期研究工作已明確南瓜、絲瓜和苦瓜等葫蘆科作物均可發(fā)生青枯病的基礎(chǔ)上,以22株不同寄主來(lái)源的假茄科雷爾氏菌菌株為研究材料,測(cè)定其對(duì)南瓜、絲瓜和苦瓜的致病性,并鑒定其生理小種類(lèi)型,從中篩選出對(duì)南瓜具有致病性差異的菌株,對(duì)接種后南瓜植株防御相關(guān)的生理生化性狀以及轉(zhuǎn)錄組和代謝組進(jìn)行分析,以期揭示南瓜對(duì)不同致病性菌株侵染的抗性機(jī)理。主要研究結(jié)果如下:1、測(cè)定不同寄主來(lái)源的22株菌株對(duì)南瓜、絲瓜和苦瓜的致病性結(jié)果發(fā)現(xiàn),源自葫蘆科的菌株（Cq01、Bg07、Tg03）以及四季豆的菌株（Kb01）對(duì)這三種瓜具有強(qiáng)致病力,源自煙草、花生和辣椒上的5株菌株具有弱致病力,但大部分源自非葫蘆科的菌株對(duì)三種瓜無(wú)致病性。以青枯菌模式菌株GMI1000（生理小種1號(hào)）灌根接種8種植物為參照,測(cè)定16株代表菌株的生理小種,發(fā)現(xiàn)這些菌株均為生理小種1號(hào)。采用傷根灌菌和注射菌液的方法將5株菌株不同濃度的菌液接種到南瓜植株上,篩選出對(duì)南瓜具有強(qiáng)致病力的菌株Cq01和無(wú)致病性菌株GMI1000;兩者接種南瓜1 d后,南瓜根系內(nèi)部均檢測(cè)到病菌;南瓜接種Cq01菌株5 d的植株發(fā)病率為30.56%,接種7 d后的植株發(fā)病率高達(dá)77.78%,而接種GMI1000菌株的南瓜植株一直未發(fā)病。2、Cq01和GMI1000菌株均能誘發(fā)南瓜產(chǎn)生活性氧和過(guò)敏性壞死反應(yīng),前者誘導(dǎo)程度更為強(qiáng)烈;Cq01菌株在侵染早期到發(fā)病中期均能顯著提高南瓜植株的苯丙氨酸解氨酶（PAL）、過(guò)氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和多酚氧化酶（PPO）的酶活性,并能促進(jìn)丙二醛（MAD）產(chǎn)生;GMI1000菌株也能顯著增強(qiáng)南瓜植株的POD活性,但顯著低于Cq01處理;GMI1000菌株只能在侵染早期增強(qiáng)南瓜植株的PAL、SOD和PPO的活性,不能促進(jìn)MAD的產(chǎn)生。結(jié)果表明,南瓜接種病原菌后,植株體內(nèi)的PAL、POD、SOD和PPO酶活性以及MAD含量與接種病菌的毒力強(qiáng)弱有關(guān)。3、南瓜響應(yīng)Cq01和GMI1000菌株侵染的轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),Cq01菌株接種的南瓜植株有146個(gè)差異基因,上調(diào)110個(gè)。差異基因的GO注釋主要富集在乙烯激活信號(hào)通路、茉莉酸介導(dǎo)的信號(hào)通路、細(xì)菌防御反應(yīng)、水楊酸響應(yīng)和果膠分解代謝過(guò)程等方面;KEGG注釋主要富集在與植物細(xì)胞壁降解相關(guān)的果膠裂解酶,與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的鈣結(jié)合蛋白和乙烯反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子,與抗病相關(guān)的RPM1互作蛋白4、MYB轉(zhuǎn)錄因子和EREBP轉(zhuǎn)錄因子以及與氨基酸合成相關(guān)的乙酰鳥(niǎo)氨酸脫乙酰酶。GMI100菌株接種的南瓜植株有53個(gè)差異基因,上調(diào)49個(gè)。差異基因的GO注釋主要富集在硝酸鹽同化、寡肽運(yùn)輸、硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)和植物型細(xì)胞壁組織等方面;KEGG注釋主要富集在病程蛋白相關(guān)蛋白,與苯丙烷生物合成相關(guān)的肉桂醇脫氫酶和β-葡萄糖苷酶,與抗氧化相關(guān)的谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶和谷胱甘肽,與能量代謝相關(guān)的果糖-1,6-二磷酸酶,與氮素代謝相關(guān)的硝酸鹽/亞硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體等。分別選取Cq01和GMI1000與寄主互作途徑的8個(gè)基因進(jìn)行q RT-PCR驗(yàn)證,結(jié)果與轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果基本一致。4、南瓜響應(yīng)Cq01和GMI1000菌株侵染的代謝組分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),接種Cq01菌株的南瓜植株有3個(gè)上調(diào)差異代謝物（鳥(niǎo)氨酸、蘇糖酸和D-赤酮酸內(nèi)酯）;接種GMI1000菌株的南瓜植株有3個(gè)差異代謝物,上調(diào)1個(gè)（葡萄糖酸）,下調(diào)2個(gè)（1,3-丙二胺和棉子糖）。南瓜響應(yīng)Cq01和GMI1000菌株侵染的轉(zhuǎn)錄組和代謝組關(guān)聯(lián)分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),南瓜響應(yīng)Cq01菌株侵染的最密切的代謝途徑是精氨酸生物合成途徑,南瓜響應(yīng)GMI1000菌株侵染最密切的代謝途徑是戊糖磷酸途徑。綜上所述,源自葫蘆科的菌株和少數(shù)非葫蘆科的菌株對(duì)瓜類(lèi)作物具有致病性,而大部分源自非葫蘆科的菌株則表現(xiàn)無(wú)致病性;Cq01菌株侵染南瓜植株誘導(dǎo)防御相關(guān)的生理生化反應(yīng)比GMI1000菌株侵染南瓜誘導(dǎo)的反應(yīng)更為強(qiáng)烈;據(jù)南瓜響應(yīng)Cq01和GMI1000菌株侵染的轉(zhuǎn)錄組和代謝組關(guān)聯(lián)分析結(jié)果推測(cè),南瓜受到Cq01菌株侵染后,植株體內(nèi)經(jīng)過(guò)精氨酸生物合成途徑產(chǎn)生對(duì)植株自身有毒性作用的鳥(niǎo)氨酸代謝物,降低植株對(duì)青枯病的抗性,從而導(dǎo)致植株發(fā)病。GMI1000菌株可誘導(dǎo)南瓜植株體內(nèi)增強(qiáng)戊糖磷酸途徑產(chǎn)生抗病物質(zhì),抑制病菌在植株體內(nèi)擴(kuò)展,使植株免受病菌為害。
李秀環(huán)[2]（2021）在《黃瓜靶斑病菌對(duì)吡唑醚菌酯的抗性監(jiān)測(cè)及兩種新型殺菌劑的抗性分子機(jī)制研究》文中研究指明由Corynespora cassiicola在黃瓜上引起的黃瓜靶斑病已成為重要的全球性病害,對(duì)黃瓜的生產(chǎn)和品質(zhì)造成巨大影響。就目前條件來(lái)講,化學(xué)防治依然是控制靶斑病發(fā)生和發(fā)展的重要手段,但由于該病原菌易變異、破壞性強(qiáng),給有效防治該病害帶來(lái)了困難,多項(xiàng)研究報(bào)道表明C.cassiicola抗藥性問(wèn)題日益嚴(yán)重。因此,不斷監(jiān)測(cè)抗藥性的發(fā)展和引進(jìn)新藥劑勢(shì)在必行。florylpicoxamid是一種新型吡啶酰胺類(lèi)的第二代殺菌劑,作用于呼吸電子傳遞鏈復(fù)合物III細(xì)胞色素bc1的Qi位點(diǎn),對(duì)抗普通殺菌劑的菌株有優(yōu)異的活性;氯氟醚菌唑是一種新型異丙醇三唑類(lèi)殺菌劑,具有優(yōu)異的內(nèi)吸傳導(dǎo)性和延緩抗藥性的特點(diǎn),目前關(guān)于兩種新型藥劑的抗性風(fēng)險(xiǎn)和抗性機(jī)制尚未見(jiàn)系統(tǒng)研究報(bào)道。本研究系統(tǒng)監(jiān)測(cè)了我國(guó)不同地區(qū)黃瓜靶斑病菌對(duì)吡唑醚菌酯的敏感性;系統(tǒng)評(píng)估和分析了黃瓜靶斑病菌對(duì)florylpicoxamid和氯氟醚菌唑的抗性風(fēng)險(xiǎn)及抗性分子機(jī)制,通過(guò)測(cè)定氯氟醚菌唑的傳導(dǎo)活性和藥劑復(fù)配的方式初步評(píng)估了氯氟醚菌唑在黃瓜靶斑病菌抗藥性治理的應(yīng)用潛力。主要結(jié)果如下:1.不同地區(qū)162株黃瓜靶斑病菌對(duì)吡唑醚菌酯均已產(chǎn)生了高水平抗性,EC50分布范圍為1.67-97.88μg/m L,平均值為8.21μg/m L;通過(guò)室內(nèi)適合度如生長(zhǎng)速率、孢子萌發(fā)率、產(chǎn)孢量、致病力等方面對(duì)比發(fā)現(xiàn),抗吡唑醚菌酯菌株與敏感菌株相當(dāng)或者顯著高于敏感菌株,表明Qo Is抗性菌株生存適合度優(yōu)異;離體葉片防效試表明吡唑醚菌酯對(duì)抗性突變體的防效顯著低于敏感菌株的防效;吡唑醚菌酯與肟菌酯存在交互抗性,而與氟吡菌酰胺、咪鮮胺和戊唑醇不存在交互抗性。進(jìn)一步通過(guò)測(cè)序分析發(fā)現(xiàn),所有供試黃瓜靶斑菌株Cyt b蛋白均含有G143A點(diǎn)突變。分子對(duì)接結(jié)果顯示,G143A點(diǎn)突變導(dǎo)致吡唑醚菌酯與靶點(diǎn)的結(jié)合模式發(fā)生改變,周?chē)鷧⑴c識(shí)別的氨基酸殘基數(shù)量減少,疏水相互作用減弱,其與活性中心的結(jié)合能力降低最終導(dǎo)致抗藥性的產(chǎn)生。在此基礎(chǔ)上,建立了針對(duì)黃瓜靶斑病菌Cyt b蛋白G143A點(diǎn)突變的LAMP檢測(cè)方法特異性和靈敏度高（比傳統(tǒng)PCR高10倍）,且反應(yīng)時(shí)間僅需要1 h,因此可用于田間高通量樣品的檢測(cè)。2.來(lái)源于我國(guó)不同地區(qū)的92株黃瓜靶斑病菌對(duì)florylpicoxamid的EC50值范圍為0.001-1.37μg/m L。平均EC50值為0.35μg/m L,可用于黃瓜靶斑病菌對(duì)florylpicoxamid的敏感基線以用于后續(xù)的田間抗性監(jiān)測(cè)。在室內(nèi)通過(guò)藥劑馴化獲得7株抗性菌株,抗性倍數(shù)在157.53～922.34倍之間,經(jīng)過(guò)10次轉(zhuǎn)代表明抗性水平穩(wěn)定。通過(guò)室內(nèi)適合度測(cè)定表明多數(shù)抗florylpicoxamid菌株的生存適合度優(yōu)異。離體葉片試驗(yàn)顯示,30μg/m L florylpicoxamid處理對(duì)兩株敏感菌株的防效為86.94%和94.18%,而對(duì)4株抗性突變體的防效顯著下降,防效為43.32%～78.90%。florylpicoxamid與吡唑醚菌酯、氟吡菌酰胺、丙森鋅和咪鮮胺均無(wú)交互抗性。綜合突變體獲得的難易程度以及生存適合度,結(jié)合藥劑及C.cassiicola的固有抗性風(fēng)險(xiǎn),推測(cè)C.cassiicola對(duì)florylpicoxamid存在高等抗性風(fēng)險(xiǎn)。3.進(jìn)一步通過(guò)測(cè)序分析發(fā)現(xiàn),獲得的所有抗florylpicoxamid的C.cassiicola突變體均在Cc Cty b第110位核苷酸發(fā)生C→T的點(diǎn)突變,導(dǎo)致第37位氨基酸發(fā)生A37V點(diǎn)突變;分子對(duì)接結(jié)果顯示,在突變之前florylpicoxamid吡啶環(huán)部分可以結(jié)合在Ala37附近,形成較好的形狀匹配,分子對(duì)接結(jié)合能為-3.51 kcal/mol;而當(dāng)Ala37突變?yōu)閂al之后,由于側(cè)鏈的體積明顯增大,導(dǎo)致florylpicoxamid的吡啶環(huán)部分構(gòu)象發(fā)生翻轉(zhuǎn),變?yōu)槌騎yr16,使其與蛋白的親和力降低,分子對(duì)接結(jié)合能為-3.28 kcal/mol,表明Cyt b蛋白A37V的點(diǎn)突變確實(shí)能夠?qū)е曼S瓜靶斑病菌對(duì)florylpicoxamid抗性的產(chǎn)生。進(jìn)一步針對(duì)A37V建立了LAMP及AS-PCR分子檢測(cè)方法,可用于田間黃瓜靶斑病菌對(duì)florylpicoxamid的抗性群體的監(jiān)測(cè)。4.氯氟醚菌唑?qū).cassiicola孢子芽管的伸長(zhǎng)稍優(yōu)于菌絲生長(zhǎng)的活性,但是對(duì)孢子萌發(fā)活性極低。通過(guò)離體葉片表明氯氟醚菌唑在黃瓜葉片和黃瓜植株向頂?shù)膫鲗?dǎo)活性優(yōu)異,跨層防效高達(dá)89.20%。102株不同地區(qū)的黃瓜靶斑病菌對(duì)氯氟醚菌唑的敏感性頻率分布為單峰分布,EC50值范圍為0.15-14.77μg/m L,平均EC50值為4.77μg/m L,該數(shù)值可作為C.cassiicola對(duì)氯氟醚菌唑的敏感基線,以用于未來(lái)田間抗性監(jiān)測(cè)。5.通過(guò)室內(nèi)藥劑馴化和紫外誘導(dǎo)兩種不同方法分別獲得對(duì)氯氟醚菌唑的抗性突變體,進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和抗性機(jī)制分析,獲得的皆為低抗菌株,經(jīng)轉(zhuǎn)代發(fā)現(xiàn)抗性水平相對(duì)穩(wěn)定。綜合室內(nèi)生物學(xué)性狀結(jié)果表明突變體的適合度較低。交互抗藥性分析,氯氟醚菌唑與吡唑醚菌酯、氟吡菌酰胺、咪鮮胺、苯醚甲環(huán)唑和代森錳鋅均不具交互抗性。經(jīng)過(guò)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)獲得突變體與敏感菌株的靶基因序列無(wú)差別。通過(guò)熒光定量PCR發(fā)現(xiàn),突變體的Cc CYP51A和Cc CYP51B的表達(dá)量顯著上調(diào),而Cc CYP51C的表達(dá)量變化不明顯。通過(guò)分子對(duì)接技術(shù)分析了氯氟醚菌唑與黃瓜靶斑病菌中的CYP51A、CYP51B和CYP51C蛋白的結(jié)合能力,結(jié)果表明,氯氟醚菌唑可以結(jié)合在Cc CYP51蛋白底物血紅素附近的活性位點(diǎn),其與Cc CYP51A及Cc CYP51B蛋白的結(jié)合能力相對(duì)較強(qiáng),結(jié)合能分別為-9.80kcal/mol和-9.89 kcal/mol,綜合藥劑誘導(dǎo)表達(dá)量的結(jié)果推測(cè):Cc CYP51A和Cc CYP51B可能氯氟醚菌唑的主要結(jié)合靶標(biāo)。6.為延緩抗藥性的產(chǎn)生,將氯氟醚菌唑分別與SDHI類(lèi)殺菌劑吡唑萘菌胺和咪唑類(lèi)殺菌劑咪鮮胺按照10%～90%的混用比例進(jìn)行活性篩選,最佳配比分別為1:1和7:3。并經(jīng)過(guò)室內(nèi)對(duì)二元復(fù)合物的敏感性測(cè)定,皆表現(xiàn)為增效作用。盆栽試驗(yàn)表明同等劑量下二元復(fù)合物（Mef:Iso=1:1）處理的防效中保護(hù)作用顯著高于單劑氯氟醚菌唑的處理;治療作用顯著高于單劑吡唑萘菌胺的處理。離體葉片試驗(yàn)表明二元復(fù)合物（Mef&Pro=7:3）在150和200μg/m L的防效顯著高于兩單劑防效,二元復(fù)合物（Mef&Pro=7:3）100μg/m L的劑量處理下,防效達(dá)77.97%,依然稍高于兩單劑（150μg/m L）的處理防效,兩種復(fù)配藥劑可進(jìn)一步進(jìn)行田間應(yīng)用評(píng)價(jià),以確定是否開(kāi)發(fā)用于目前黃瓜靶斑病菌的抗性治理。
任怡璇[3]（2021）在《黨參灰霉病拮抗細(xì)菌的篩選及對(duì)黨參促生作用的研究》文中認(rèn)為黨參（Codonopsis pilosula（Franch.）Nannf）是常用的藥用植物,具有很高的藥用價(jià)值,在我國(guó)多個(gè)省份均有大面積種植。近年來(lái),人工種植黨參的面積不斷增加,但由于管理方法與制度不規(guī)范等因素,黨參受到多種病原菌的侵害,病害日益嚴(yán)重,對(duì)種植產(chǎn)業(yè)化產(chǎn)生了非常不利的影響。黨參灰霉?。⊿eptoria codonopsidis Ziling.）是由葡萄孢屬（Botrytis）真菌引起的真菌性病害,嚴(yán)重制約了黨參種植產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。目前黨參灰霉病的防治主要依靠化學(xué)殺菌劑和一些簡(jiǎn)單的農(nóng)業(yè)措施,但是,隨著化學(xué)藥品的長(zhǎng)期大量使用,不但使灰霉病病原菌對(duì)很多化學(xué)藥品產(chǎn)生了不同程度的抗性,而且對(duì)環(huán)境造成了嚴(yán)重污染,進(jìn)而危害了人畜健康。因此,開(kāi)發(fā)具有安全、綠色等特點(diǎn)的生物防控劑對(duì)黨參灰霉病防治具有重要意義。本研究通過(guò)對(duì)甘肅省黨參主栽區(qū)安定區(qū)、岷縣和渭源縣黨參灰霉病發(fā)病情況的調(diào)查,探究了品種、產(chǎn)地、齡期和耕作制度等對(duì)黨參灰霉病發(fā)病的影響,分析了病原菌種類(lèi),并從黨參根際土壤和組織中篩選了對(duì)黨參灰霉病病原菌有較強(qiáng)抑制作用又具有促生活性的細(xì)菌菌株,經(jīng)發(fā)酵條件優(yōu)化后測(cè)定了菌株的防治和促生效果。主要研究結(jié)果如下:（1）黨參品種、產(chǎn)地、齡期和耕作制度均會(huì)影響灰霉病發(fā)病程度,其中,渭黨1號(hào)對(duì)灰霉病病原菌的抗性最好;岷縣灰霉病發(fā)病程度最輕;齡期越大,黨參灰霉病發(fā)病程度越嚴(yán)重;輪作有益于減輕灰霉病的發(fā)生程度。分子生物學(xué)鑒定進(jìn)一步證明黨參灰霉病的病原菌為灰葡萄孢（Botrytis cinerea）。（2）利用稀釋涂布法和組織勻漿法從3個(gè)地區(qū)的黨參根際土壤和根、莖、葉中共分離純化到61株細(xì)菌菌株。以灰葡萄孢（B.cinerea）為靶標(biāo),采用平板對(duì)峙法初篩到對(duì)黨參灰霉病病原菌具有較強(qiáng)拮抗作用（抑制率>50%）的細(xì)菌15株,進(jìn)一步利用菌絲生長(zhǎng)速率法對(duì)這15株細(xì)菌進(jìn)行復(fù)篩,其中6株細(xì)菌（抑制率>50%）的無(wú)菌發(fā)酵濾液對(duì)灰霉病病原菌菌絲有抑制作用,可使菌絲畸形,其中抑制率最高的為NSW3-1,可達(dá)86.88%,其次是菌株GJW2-1,抑制率為85.76%。（3）促生活性測(cè)定發(fā)現(xiàn),6株細(xì)菌均具有產(chǎn)IAA、鐵載體和纖維素酶的能力,但菌株GJW2-1產(chǎn)IAA和鐵載體活性最強(qiáng)。結(jié)合抑菌和促生活性的大小,枯草芽孢桿菌NSW3-1（Bacillus subtilis）和萎縮芽孢桿菌GJW2-1（Bacillus atrophaeus）可作為進(jìn)一步篩選黨參灰霉病綠色防控劑的候選菌株。（4）通過(guò)響應(yīng)面法對(duì)2株拮抗促生細(xì)菌進(jìn)行發(fā)酵條件優(yōu)化后得到了枯草芽孢桿菌NSW3-1和萎縮芽孢桿菌GJW2-1的最佳發(fā)酵條件,分別為:接種量1.2%,裝液量50 m L/100 m L,培養(yǎng)溫度30℃,時(shí)間36 h,此時(shí)的活菌數(shù)最高,為282×106cfu/m L。接種量1.3%,裝液量50 m L/100 m L,培養(yǎng)溫度30℃,時(shí)間36 h,此時(shí)的活菌數(shù)最高,為358.2×106 cfu/m L。（5）室內(nèi)預(yù)防和治療盆栽試驗(yàn)表明,枯草芽孢桿菌NSW3-1的低濃度和高濃度活菌發(fā)酵液在黨參灰霉病預(yù)防和治療試驗(yàn)中,防治效果均優(yōu)于萎縮芽孢桿菌GJW2-1。當(dāng)2株菌活菌發(fā)酵液濃度為1?106 cfu/m L時(shí),治療效果優(yōu)于預(yù)防效果,而高濃度活菌發(fā)酵液1?107 cfu/m L和1?108 cfu/m L的預(yù)防效果優(yōu)于治療效果。（6）室內(nèi)促生盆栽試驗(yàn)表明,2株菌對(duì)黨參均具有促生作用,使用灌根的方法將1?108 cfu/m L的活菌發(fā)酵液用于盆栽時(shí)的促生效果更好。細(xì)菌NSW3-1的活菌發(fā)酵液對(duì)黨參株高和根長(zhǎng)的促生作用更強(qiáng),而GJW2-1的活菌發(fā)酵液則可以明顯增加黨參的鮮、干重,因此,GJW2-1對(duì)黨參的促生作用強(qiáng)于NSW3-1。綜上,室內(nèi)防效盆栽試驗(yàn)和促生盆栽試驗(yàn)為2株細(xì)菌在田間的施用奠定了基礎(chǔ)。
吳冰越[4]（2021）在《3株放線菌的抑菌活性及其對(duì)黃瓜枯萎病的防治效果》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理枯萎病是黃瓜上最嚴(yán)重的病害之一,每年都會(huì)造成黃瓜的大幅減產(chǎn)甚至絕收。目前針對(duì)黃瓜枯萎病主要采用化學(xué)防治的方法,但過(guò)量使用化學(xué)藥劑不僅導(dǎo)致環(huán)境污染、危害人類(lèi)健康,還易造成病原菌抗藥性、農(nóng)藥殘留和有害生物再猖獗等“3R”問(wèn)題。因此,尋求新的高效生物農(nóng)藥替代化學(xué)農(nóng)藥成了當(dāng)前研究的熱點(diǎn)?？股氐闹饕獊?lái)源為自然界中的放線菌,其代謝產(chǎn)物在植物病害防治中具有巨大的應(yīng)用潛力。本文以3株放線菌為對(duì)象,經(jīng)種類(lèi)鑒定、抑菌譜測(cè)定、拮抗活性穩(wěn)定性測(cè)定、土壤定殖試驗(yàn)及田間防效測(cè)定等,明確了這幾株放線菌的生防潛力及對(duì)黃瓜枯萎病的防治作用,結(jié)果如下:1.3株放線菌2F、2F8和2F-1對(duì)草莓灰霉病菌、黃瓜枯萎病菌、番茄枯萎病菌、小麥赤霉病菌和玉米彎孢葉斑病菌都有較好的抑制效果,對(duì)黃瓜枯萎病菌的孢子萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)抑制作用明顯。其中,2F-1菌株發(fā)酵濾液對(duì)黃瓜枯萎病菌孢子萌發(fā)抑制率達(dá)100%;濃度為30%的2F菌株發(fā)酵濾液對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制效果為99.7%。將3種菌株的發(fā)酵濾液進(jìn)行混配,2F:2F-1等比混合抑菌效果最好,抑菌帶寬為最大為8.9 mm。拮抗穩(wěn)定性測(cè)定結(jié)果表明,3種放線菌的發(fā)酵濾液在室溫儲(chǔ)存時(shí)抑菌活性都會(huì)出現(xiàn)快速下降,且以2F8的發(fā)酵濾液下降最為明顯,至第7 d時(shí)活性已完全喪失;在超過(guò)37℃條件下處理1 h,發(fā)酵濾液抑菌活性下降,當(dāng)溫度超過(guò)80℃時(shí),發(fā)酵濾液完全失活;發(fā)酵濾液在強(qiáng)酸強(qiáng)堿條件下不穩(wěn)定,抑菌活性下降,但其對(duì)紫外光穩(wěn)定。透明圈法則表明,3種放線菌都能產(chǎn)生蛋白酶和β-葡聚糖酶,均不能產(chǎn)生嗜鐵素和纖維素酶,而2F菌株和2F8菌株還能產(chǎn)生少量幾丁質(zhì)酶。2.3種放線菌的孢子液和發(fā)酵菌液對(duì)黃瓜種子萌發(fā)和胚根伸長(zhǎng)均無(wú)顯著影響,但2F和2F-1發(fā)酵菌液可促進(jìn)黃瓜胚芽的伸長(zhǎng),而2F8發(fā)酵液卻對(duì)黃瓜胚芽伸長(zhǎng)有抑制作用。在黃瓜苗期用發(fā)酵菌液進(jìn)行灌根,處理組黃瓜的生長(zhǎng)指標(biāo)、物質(zhì)積累量和光合色素含量均顯著高于對(duì)照,有明顯的促生作用。3種放線菌還對(duì)黃瓜體內(nèi)防御酶活性具有誘導(dǎo)作用,其中2F-1發(fā)酵液處理后黃瓜防御酶活性提升最為明顯。且放線菌處理后,黃瓜體內(nèi)胼胝質(zhì)、總酚、可溶性糖和木質(zhì)素等抗性相關(guān)物質(zhì)的含量亦有不同程度的提高。3.菌株2F和2F-1在黃瓜根區(qū)、根際和根表均有很強(qiáng)的定殖能力,在初始菌量107 cfu/g土壤的基礎(chǔ)上,處理后28 d活菌數(shù)仍達(dá)105cfu/g 土壤,而在葉片上定殖能力較弱。用放線菌2F和2F-1的復(fù)配發(fā)酵液進(jìn)行預(yù)防和治療處理,對(duì)黃瓜枯萎病均有一定防效,且以預(yù)防效果好于治療效果,防效分別為48.98%和34.01%。
閻昱韜[5]（2021）在《多主棒孢SdhB亞基異核體突變對(duì)啶酰菌胺抗性的影響》文中研究指明黃瓜棒孢葉斑病是由多主棒孢（Corynespora cassiicola）引起的黃瓜上的主要病害之一,其發(fā)生呈現(xiàn)逐年加重的趨勢(shì),目前主要應(yīng)用化學(xué)殺菌劑對(duì)其進(jìn)行防治,但由于不科學(xué)的用藥習(xí)慣,導(dǎo)致該病菌已對(duì)多種殺菌劑產(chǎn)生不同水平的抗性。多主棒孢對(duì)琥珀酸脫氫酶抑制劑類(lèi)（SDHIs）殺菌劑的抗藥性已經(jīng)被不斷報(bào)道,但關(guān)于多主棒孢對(duì)SDHIs殺菌劑抗藥性進(jìn)化中,異核突變對(duì)抗性的影響及抗性演化歷程并不十分清楚,對(duì)該內(nèi)容的研究,有利于明確SDHIs殺菌劑抗性的變化機(jī)制。本研究以啶酰菌胺為靶標(biāo)藥劑,通過(guò)同源置換獲得3種異核突變體,研究了多主棒孢SdhB-H278Y、SdhB-H278R和SdhB-I280V這3種異核抗性突變體對(duì)啶酰菌胺抗性的影響,并比較了3種異核抗性突變體田間適合度的變化,初探SdhB-H278Y異核抗性突變體田間種群頻率演變規(guī)律,同時(shí)建立了AS real-time PCR檢測(cè)技術(shù),以檢測(cè)田間多主棒孢SdhB-H278Y突變體分布頻率,為田間異核突變體的檢測(cè)提供技術(shù)儲(chǔ)備。主要結(jié)果如下:1.明確了對(duì)啶酰菌胺不同抗性類(lèi)型的多主棒孢生物學(xué)特性?？剐暂^高的SdhB-H278Y和H278R突變體適合度較低,而中抗菌株SdhD-D95E突變體適合度較高。本文選取山東、遼寧、北京等不同地區(qū)24株對(duì)啶酰菌胺具有不同抗性類(lèi)型的多主棒孢,明確了SdhB-H278Y及SdhB-H278R突變體對(duì)啶酰菌胺與氟吡菌酰胺之間存在負(fù)交互抗性;所有抗性突變體的抗藥性均能穩(wěn)定遺傳;SdhD-D95E突變體在離體黃瓜葉片上的致病力最強(qiáng);最適碳源是麥芽糖,氮源種類(lèi)則對(duì)突變體的生長(zhǎng)影響不顯著;最適生長(zhǎng)溫度范圍為25～30℃,其中SdhD-D95E突變體在高于30℃條件下菌絲生長(zhǎng)速率大于其他突變體;耐熱性研究中,抗性突變體經(jīng)65℃高溫處理45 min后無(wú)法存活,同時(shí)發(fā)現(xiàn),60℃條件下突變體能正常生長(zhǎng),而敏感菌株不能生長(zhǎng);經(jīng)各質(zhì)量濃度Na Cl處理,SdhD-D95E突變體菌絲生長(zhǎng)速率快于其他抗性類(lèi)型的突變體,而SdhB-H278Y突變體慢于其他突變體;葡萄糖對(duì)SdhB-H278R突變體的生長(zhǎng)較為重要。2.驗(yàn)證了多主棒孢SdhB亞基異核抗性突變體具有啶酰菌胺抗性,與其純合抗性突變體的抗性水平一致。本研究基于同源重組技術(shù)構(gòu)建異核抗性突變體,獲得了SdhB-H278Y異核抗性突變體Y23和Y115、SdhB-H278R異核抗性突變體R6和R53、SdhB-I280V異核抗性突變體V21和V23。明確了多主棒孢SdhB亞基異核抗性突變體對(duì)SDHIs殺菌劑的敏感性和純合抗性突變體無(wú)顯著差異,且其在短期內(nèi)可穩(wěn)定遺傳;各異核抗性突變體的致病性未發(fā)生變化;SdhB-H278Y異核抗性突變體Y23的菌絲生長(zhǎng)速率為0.83 cm/d,低于親本敏感菌株的0.89 cm/d;產(chǎn)孢量為4.00～12.00×104個(gè)/m L,低于親本敏感菌株的19.75×104個(gè)/m L;SdhB-H278Y異核抗性突變體Y23和Y115的孢子萌發(fā)率分別為60.67%和57.00%,高于親本敏感菌株的52.00%,但低于純合抗性突變體的73.67%;Y23的田間競(jìng)爭(zhēng)力弱于親本敏感菌株,說(shuō)明SdhB-H278Y突變可能導(dǎo)致多主棒孢田間競(jìng)爭(zhēng)劣勢(shì)。3.建立了檢測(cè)多主棒孢SdhB-H278Y點(diǎn)突變的AS real-time PCR檢測(cè)體系。本研究引物對(duì)B-H278Y-F3c/B-Y278-R3e通過(guò)普通AS-PCR擴(kuò)增不同抗性突變的多主棒孢,驗(yàn)證其特異性較強(qiáng),僅對(duì)SdhB-H278Y突變體有擴(kuò)增條帶,而對(duì)其他供試菌株無(wú)擴(kuò)增條帶。在靈敏度測(cè)定試驗(yàn)中,AS real-time PCR的靈敏度為3.6 pg/μL-1,是普通AS-PCR的10倍。建立的AS real-time PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線ΔCT值與相對(duì)模板濃度的對(duì)數(shù)有較好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.9929,采用抗性-敏感不同比例混合DNA對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果表明,該檢測(cè)體系能較為準(zhǔn)確的檢測(cè)混合DNA中SdhB-H278Y突變的比例,同時(shí)試驗(yàn)值和預(yù)期值呈線性相關(guān)（R2=0.999）。本研究經(jīng)過(guò)同源重組轉(zhuǎn)化獲得了多主棒孢SdhB亞基異核抗性突變體Y23、Y115、R6、R53、V21、V23,明確了其對(duì)啶酰菌胺的抗性,并分析了其生物學(xué)特性及田間競(jìng)爭(zhēng)力,推測(cè)多主棒孢的抗性演變方向,可以為多主棒孢的田間防治和抗性治理提供理論依據(jù)。
張曉夢(mèng)[6]（2021）在《復(fù)合生防菌對(duì)洋蔥根腐病害的防治與機(jī)理研究》文中研究表明洋蔥莖基腐病也叫洋蔥根腐病,是由鐮刀菌引起的一種土傳病害,在洋蔥生長(zhǎng)的各個(gè)階段和貯藏期間都會(huì)發(fā)病,嚴(yán)重影響了洋蔥產(chǎn)量。為選擇綠色有效的方法防治洋蔥病害,本研究以洋蔥層出鐮刀菌為防治對(duì)象,分離篩選出對(duì)層出鐮刀菌有較強(qiáng)拮抗作用的解淀粉芽孢桿菌和棘孢木霉;通過(guò)研究?jī)删甑淖罴寻l(fā)酵條件,利用其代謝產(chǎn)物進(jìn)行離體試驗(yàn)、盆栽試驗(yàn)等,進(jìn)一步確定了兩菌株及其復(fù)合菌對(duì)洋蔥層出鐮刀菌的防治效果,并對(duì)兩菌株在洋蔥根際的定殖和對(duì)洋蔥的促生及抗性誘導(dǎo)進(jìn)行了初步探索,為復(fù)合生防菌在田間施用提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.從甘肅省嘉峪關(guān)洋蔥種植基地采集的發(fā)病洋蔥鱗莖上分離出致病菌層出鐮刀菌（Fusarium proliferatum）,以層出鐮刀菌為防治對(duì)象,從土壤中篩選出了細(xì)菌XG和真菌M2,且兩菌株具有兼容性,對(duì)層出鐮刀菌的抑制率分別為65%和84.6%;兩菌株發(fā)酵混合濾液對(duì)其孢子萌發(fā)的抑制率為96.15%;采用平板定性試驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)菌株XG和M2均含有蛋白酶、纖維素酶、幾丁質(zhì)酶、嗜鐵素、葡聚糖酶、IAA等多種次級(jí)代謝產(chǎn)物,并具有溶磷和降低p H的性能;通過(guò)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定兩株拮抗菌分別為解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）和棘孢木霉（Trichoderma asperellum）。2.分別以菌株XG和M2的生物量及對(duì)層出鐮刀菌的抑菌率為指標(biāo),選擇菌株XG和M2的發(fā)酵最適培養(yǎng)基,采用響應(yīng)面分析和單因素試驗(yàn)相結(jié)合的方法,優(yōu)化菌株發(fā)酵培養(yǎng)基的添加量和發(fā)酵條件。結(jié)果表明:菌株XG和M2的最適發(fā)酵培養(yǎng)基均為YMC培養(yǎng)基,即酵母粉2%,蔗糖2%,玉米蛋白粉2%;菌株XG最佳發(fā)酵條件為培養(yǎng)基初始p H6.5、發(fā)酵溫度32℃、轉(zhuǎn)速180 r/min、接種量5%,發(fā)酵時(shí)間72 h;菌株M2最佳發(fā)酵條件為培養(yǎng)基初始p H7.0、發(fā)酵溫度26℃、轉(zhuǎn)速180 r/min、接種量3%,發(fā)酵時(shí)間為7 d。經(jīng)過(guò)培養(yǎng)基及發(fā)酵條件優(yōu)化后,在離體試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)先噴施復(fù)合菌XG+M2的濾液再接種層出鐮刀病菌對(duì)洋蔥根腐病的防治效果最佳,達(dá)72.5%。3.利用基因工程技術(shù)構(gòu)建了帶有GFP標(biāo)記的菌株XG,得到菌株XG-p GFP,帶有RFP標(biāo)記的菌株M2,得到菌株M2-RFP,分別通過(guò)生長(zhǎng)曲線法和生物量法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)野生型菌XG和轉(zhuǎn)化子X(jué)G-p GFP的生長(zhǎng)速率基本一致;野生型菌M2和轉(zhuǎn)化子M2-RFP的產(chǎn)孢量和抑菌效果無(wú)明顯差異;將標(biāo)記菌株XG-p GFP和M2-RFP接種洋蔥植株根際后,發(fā)現(xiàn)兩菌株均可以定殖在洋蔥根系。4.通過(guò)種子發(fā)芽試驗(yàn)研究了菌株XG、M2和復(fù)合菌XG+M2對(duì)洋蔥種子生長(zhǎng)的影響,發(fā)現(xiàn)復(fù)合菌XG+M2稀釋100倍的發(fā)酵濾液,對(duì)洋蔥種子的促進(jìn)作用最強(qiáng),根長(zhǎng)、莖長(zhǎng)、鮮重、干重分別增加了103.73%、166.14%、57.21%、67.22%;盆栽試驗(yàn)表明,復(fù)合菌XG+M2對(duì)洋蔥根腐病有較好的防治作用,能夠促進(jìn)洋蔥植株生長(zhǎng);酶活測(cè)定表明復(fù)合菌株處理后洋蔥植株根活力、葉綠素含量及POD、PPO、PAL的酶活力均有明顯的提高;利用熒光定量法檢測(cè)了與洋蔥植株相關(guān)的蛋白基因,經(jīng)復(fù)合菌XG+M2處理洋蔥植株后,除Ac LOX1蛋白基因的表達(dá)量顯著下調(diào)外,Ac PR1、Ac PAL1、Ac EIN3蛋白基因的表達(dá)量均顯著上調(diào)。
冀俊[7]（2021）在《草莓灰霉病菌（Botrytis cinerea）對(duì)五種殺菌劑的抗性檢測(cè)及增效組合物的篩選》文中認(rèn)為由灰葡萄孢（Botrytis cinerea Pers）引起的灰霉病是危害草莓生產(chǎn)最重要的病害,該病菌具有極高的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)。目前灰霉病的防治主要依賴于通過(guò)殺菌劑開(kāi)展化學(xué)防治,這就使得灰霉病菌對(duì)殺菌劑的抗藥性監(jiān)測(cè)及治理研究具有重要的實(shí)際意義。苯并咪唑類(lèi)殺菌劑（如多菌靈、乙霉威）、二甲酰亞胺類(lèi)殺菌劑（如腐霉利）是使用多年的防治草莓灰霉病的傳統(tǒng)藥劑,氟啶胺和咯菌腈屬于結(jié)構(gòu)新穎的新型殺菌劑。本研究就草莓灰霉病對(duì)上述五種常用殺菌劑的抗藥性進(jìn)行了檢測(cè),在此基礎(chǔ)上開(kāi)展了基于現(xiàn)代呼吸抑制劑吡唑醚菌酯和啶酰菌胺的復(fù)配篩選,以為草莓灰霉病的抗藥性治理提供技術(shù)支持,主要獲得了如下結(jié)果:（1）2018年從遼寧、河北、北京、新疆、四川和安徽6個(gè)草莓主產(chǎn)省區(qū)共分離獲得251株灰霉病菌單孢菌株。分別以5μg·m L-1、1μg·m L-1和5μg·m L-1為區(qū)分劑量,檢測(cè)了草莓灰霉病菌對(duì)多菌靈（Carbendazim,Car）、腐霉利（Procymidon,Pro）和乙霉威（Diethofencarb,Die）的抗藥性現(xiàn)狀。結(jié)果表明,灰霉病菌群體（n=251）對(duì)上述3種藥劑的抗藥性頻率分別為67.33%、45.02%和64.94%?？顾幮灶l率在地區(qū)間存在明顯的差異,其中對(duì)多菌靈的抗性頻率:北京（96.55%）>四川（75.00%）>河北（74.47%）>遼寧（69.57%）>安徽（59.26%）>新疆（31.58%）;對(duì)腐霉利的抗性頻率:安徽（55.56%）>河北（55.32%）>四川（50.00%）=北京（50.00%）>遼寧（34.78%）>新疆（33.33%）;對(duì)乙霉威的抗性頻率:新疆（77.19%）>四川（75.00%）>河北（65.96%）>遼寧（65.22%）>安徽（55.56%）>北京（53.45%）;（2）灰霉病菌群體（n=251）對(duì)上述3種藥劑共有8種敏感性類(lèi)型:Car SPro SDie R（S:敏感,R:抗性）、Car SPro RDie R、Car SPro SDie S、Car SPro RDie S、Car RPro SDie R、Car RPro SDie S、Car RPro RDie R和Car RPro RDie R。其中,對(duì)3種藥劑全部敏感的菌株（CarSProSDieS）僅有3株,頻率為1.2%;對(duì)3種藥劑全部表現(xiàn)抗藥性的菌株（Car RPro RDie R）占17.53%,說(shuō)明供試草莓灰霉病菌已經(jīng)出現(xiàn)了較嚴(yán)重的多重抗藥性問(wèn)題?；颐共【鷮?duì)這3種殺菌劑的抗藥性類(lèi)型也存在地區(qū)差異,其中新疆地區(qū)具有8種類(lèi)型,安徽省類(lèi)型最少,只有4種。Car RPro RDie R和Car RPro SDie R兩種類(lèi)型的菌株在6個(gè)省區(qū)均有發(fā)現(xiàn);（3）采用敏感性基線EC50值5倍濃度處理抑制率法測(cè)定了灰霉病菌群體（n=251）對(duì)氟啶胺和咯菌腈的抗藥性,結(jié)果只有河北省保定市的BD1菌株對(duì)咯菌腈產(chǎn)生了抗藥性,頻率為0.4%,未檢測(cè)到氟啶胺抗藥性菌株;（4）以多菌靈、乙霉威和腐霉利的三抗菌株（Car RPro RDie R）DCKX1對(duì)象,利用現(xiàn)代呼吸抑制劑啶酰菌胺與吡唑醚菌酯進(jìn)行了組合物的篩選,結(jié)果二者以質(zhì)量比4∶1、3∶1、2∶1和1∶1混配時(shí)均對(duì)灰葡萄孢表現(xiàn)出協(xié)同增效作用,其中以2∶1的增效作用最為明顯,增效系數(shù)為3.64。該2∶1組合物對(duì)灰霉病表現(xiàn)出優(yōu)良的防效,可以通過(guò)與氟啶胺或咯菌腈的輪換使用,用于延緩及治理草莓灰霉病的抗藥性。
許萌杏[8]（2020）在《番茄青枯病生防菌JX-1的篩選及作用機(jī)制研究》文中提出由茄科雷爾氏菌引起的番茄青枯病是一種重要的土傳病害,嚴(yán)重影響番茄種植區(qū)的產(chǎn)量和種植面積。目前市場(chǎng)上對(duì)番茄青枯病的防治沒(méi)有高效的化學(xué)農(nóng)藥,而生物防治對(duì)環(huán)境影響小及不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)而日益受到人們的關(guān)注,逐漸成為研究的熱點(diǎn)。本研究從廣西不同地區(qū)采集不同農(nóng)作物根圍土樣,分離得到一株防治番茄青枯病的生防菌,并對(duì)其防病機(jī)理進(jìn)行初步研究。主要結(jié)果如下:（1）從廣西不同地區(qū)采集的土壤樣品中分離到2929株菌株。采用平板拮抗法進(jìn)行篩選得到對(duì)茄科雷爾氏菌有拮抗活性的菌株146株,對(duì)菌株進(jìn)行復(fù)篩得到7株具有較強(qiáng)抑菌活性的菌株。采用盆栽生測(cè)法從7株細(xì)菌中篩選得到對(duì)番茄青枯病防效較好的JX-1菌株。該菌株在使用濃度為1×108cfu/m L時(shí),室內(nèi)盆栽防治效果為80.89%,田間防效為55.03%。通過(guò)形態(tài)學(xué)、生理生化、16S r DNA和gyr B基因鑒定,將JX-1菌株鑒定為Burkholderia cepacia。另外,該菌抑菌譜較廣,對(duì)多種植物病原真菌如:苦瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum）、香蕉煤紋病菌（Deightoniella torulosa）、高粱莖點(diǎn)霉菌（Phoma sorghina）、瓜腐霉病菌（Pythium aphanidermatum）、棉花立枯病菌（Rhizoctonia solani）、姜白絹病菌（Sclerotium rolfsii）和柑橘擬莖點(diǎn)霉菌（Phomopsis citri）具有拮抗效果,其抑菌直徑分別為:6.57 mm、9.67 mm、7.00 mm、6.50 mm、7.93 mm、5.50 mm、11.50 mm;菌株JX-1對(duì)植物病原細(xì)菌如:番茄細(xì)菌性疹斑病菌（Pseudomonas syringae pv.tomato）和胡蘿卜軟腐病菌（Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum）則沒(méi)有抑菌活性。（2）菌株JX-1可產(chǎn)生多種抑菌次生代謝產(chǎn)物如蛋白酶、嗜鐵素,但不產(chǎn)氫氰酸。PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),菌株JX-1含有硝吡咯菌素（Pyrrolnitrin）和藤黃綠膿菌素（Pyoluteorin）相關(guān)合成基因prn C和plt C基因,但沒(méi)有2,4-二乙?；g苯三酚（2,4-DAPG）相關(guān)合成基因。（3）通過(guò)構(gòu)建菌株JX-1的隨機(jī)突變體庫(kù),篩選得到2株顯著影響菌株JX-1拮抗能力的突變體。其中突變體M645可提高對(duì)茄科雷爾氏菌的拮抗活性,抑菌圈直徑為15.50 mm,大于野生型JX-1的13.17 mm;而突變體M1710則完全喪失對(duì)茄科雷爾氏菌的拮抗作用。對(duì)突變體的分析表明,突變體M645中Tn5破壞了gnt R基因,而突變體M1710中Tn5破壞了pks/nrps基因。室內(nèi)盆栽試驗(yàn)表明,突變體M645菌株的防治效果顯著大于野生型JX-1,而突變體M1710菌株的防治效果顯著低于野生型JX-1。遺傳學(xué)試驗(yàn)進(jìn)一步表明,互補(bǔ)gnt R基因可以使突變體的拮抗效果恢復(fù)至野生型水平;而過(guò)表達(dá)gnt R基因后菌株JX-1完全喪失對(duì)青枯菌的拮抗效果。綜上所述,JX-1菌株是一株對(duì)番茄青枯病菌具有較好抑菌活性,同時(shí)產(chǎn)生多種次生代謝產(chǎn)物和適用于防治番茄青枯病的生防菌。
叢韞喆[9]（2020）在《生防菌混合發(fā)酵液對(duì)植物土傳病害防治、土壤性質(zhì)微生物區(qū)系和采后果實(shí)品質(zhì)的影響》文中研究表明長(zhǎng)期過(guò)量使用化肥、農(nóng)藥和連茬耕作,造成了土壤退化、板結(jié),土壤肥力下降、生產(chǎn)力降低,土壤微生物區(qū)系發(fā)生改變,病原微生物增加,土傳病害發(fā)病嚴(yán)重,從而導(dǎo)致惡性循環(huán),最終使作物品質(zhì)下降,農(nóng)藥殘留增加,藥害肥害嚴(yán)重,嚴(yán)重阻礙農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展,威脅到國(guó)家糧食安全。目前,對(duì)土傳病害的防治措施包括物理防治、化學(xué)防治和生物防治。物理防治包括換土、暴曬消毒等措施,因其工程量大,實(shí)際應(yīng)用效果不理想;化學(xué)防治手段會(huì)導(dǎo)致病原菌抗藥性增加,對(duì)土壤和水體造成污染;生物防治主要利用生防微生物進(jìn)行防治,而現(xiàn)在單一生防菌防病譜狹窄,防治效果不穩(wěn)定。利用多種生防微生物防治可在土壤中植入大量的有益微生物,可以競(jìng)爭(zhēng)、抑制病原菌,減輕病原壓力,誘導(dǎo)植物抗性,促進(jìn)植物生長(zhǎng),從而達(dá)到防治土傳病害的效果。黑根霉（Rhizopus nigricans）和擬康氏木霉（Trichodermapseudokoningii）是本實(shí)驗(yàn)室從土壤傳播疾病嚴(yán)重地區(qū)的植物根際土壤中分離得到的具有生物防治活性的兩種絲狀真菌。本文以黑根霉和擬康氏木霉混合發(fā)酵液為基礎(chǔ),研究了混合發(fā)酵工藝,通過(guò)混合發(fā)酵化學(xué)成分的分析,發(fā)現(xiàn)該工藝增加了抗菌物質(zhì),增加了增加系統(tǒng)抗性的物質(zhì),增加了促進(jìn)植物生長(zhǎng)的物質(zhì),對(duì)土傳病害防治效果顯著,改良了土壤理化生性狀和微生物區(qū)系,并且采前用該制劑處理農(nóng)作物,還提高了采后儲(chǔ)藏期果實(shí)品質(zhì)。1.混合發(fā)酵液對(duì)植物土傳病害的防治效果抑菌實(shí)驗(yàn)表明混合發(fā)酵液對(duì)多種植物土傳病原菌具有抑制作用。混合發(fā)酵液對(duì)尖孢鐮刀菌的抑制率達(dá)61.12%,孢子萌發(fā)實(shí)驗(yàn)與發(fā)酵液抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,混合發(fā)酵液抑菌率達(dá)到92.83%。確立了混合發(fā)酵工藝,最優(yōu)組合為豆粕70 g/L,磷酸二氫鉀0.4g/L,可溶性淀粉30 g/L。黑根霉與擬康氏木霉接種比例為1:1、1:4、1:9,接種量2%;混合發(fā)酵溫度為28℃;發(fā)酵時(shí)間12 d;初始pH為6.5。黑根霉和擬康氏木霉混合比例為1:4的發(fā)酵液對(duì)鏈格孢的抑制效果最好,達(dá)到66.73%的水平,對(duì)灰葡萄孢的抑制效果達(dá)到84.87%的水平。田間實(shí)驗(yàn)中混合微生物制劑對(duì)黃瓜枯萎病和番茄灰霉病的相對(duì)防治效果達(dá)到85%以上,并且植物株高、各時(shí)期葉片數(shù)與莖粗均高于對(duì)照組。證明混合發(fā)酵液處理具有抗病促生的作用。SOD、POD、PAL等抗性相關(guān)酶活均有不同程度的提升。混合發(fā)酵比單獨(dú)發(fā)酵產(chǎn)物變化明顯,其中抗菌物質(zhì)如酚類(lèi)和芳香族化合物如水楊酸甲酯等含量顯著增加,誘導(dǎo)植物抗性的寡糖類(lèi)物質(zhì)含量上升。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果初步表明了混合發(fā)酵液的抑菌促生機(jī)制。2.混合發(fā)酵液對(duì)土壤理化生性狀和土壤微生物區(qū)系的影響土壤是農(nóng)作物生長(zhǎng)的基質(zhì),是支撐農(nóng)作物生長(zhǎng)的根本資源。土壤中存在大量的微生物,土壤-微生物-植物構(gòu)成了一個(gè)微生態(tài)系統(tǒng),與植物病害特別是土傳病害密切相關(guān)。土壤是否健康是決定植物健康狀況的重要因素之一,不健康的土壤生態(tài)極易導(dǎo)致植物土傳病害的發(fā)生。經(jīng)混合發(fā)酵液處理后,土壤理化性質(zhì)差異明顯。兩年實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,土壤孔隙度、田間持水量、有機(jī)質(zhì)含量、總氮、速效磷及速效鉀顯著升高,而土壤容重、pH值、銨態(tài)氮、硝態(tài)氮降低。土壤有機(jī)質(zhì)、總氮、速效磷和速效鉀的含量與混合發(fā)酵液施用量成正相關(guān)。處理后,土壤結(jié)構(gòu)性變好,有機(jī)質(zhì)含量增加,土壤熟化程度增加,養(yǎng)分含量增加。施用混合發(fā)酵液后,土壤脲酶、轉(zhuǎn)化酶及過(guò)氧化氫酶的的活性都有較大的提高,促進(jìn)了土壤微生物的繁殖和增強(qiáng)了相關(guān)酶的活性。施用混合發(fā)酵液后對(duì)土壤微生物的多樣性產(chǎn)生了較為明顯的提升。真菌方面,綱水平上的優(yōu)勢(shì)種群糞殼菌綱、銀耳綱和散囊菌綱,處理后糞殼菌綱相對(duì)含量減少,而銀耳綱和散囊菌綱相對(duì)含量增加。在屬水平上,常見(jiàn)病原菌分布較多的赤霉菌屬和鐮刀 菌屬在處理過(guò)后的土壤中相對(duì)含量下降明顯。在種水平上,幾種病原菌如立枯絲核菌、腐皮鐮刀菌和尖孢鐮刀菌的相對(duì)含量都有明顯的減少。在細(xì)菌方面,在綱水平上酸桿菌綱相對(duì)含量減少,變形菌綱、放線菌綱和梭菌綱相對(duì)含量增加。科水平上黃色單胞菌科,產(chǎn)堿菌科相對(duì)含量增加顯著。在種水平上,幾種有益細(xì)菌如根瘤菌、慢生根瘤菌和硝化細(xì)菌的相對(duì)含量都有明顯的增加。證明混合發(fā)酵液對(duì)于土壤內(nèi)植物病原真菌的生長(zhǎng)繁殖產(chǎn)生了抑制作用,調(diào)節(jié)土壤微生物區(qū)系,使其更利于植物生長(zhǎng)。3.混合發(fā)酵液采前處理對(duì)獼猴桃果實(shí)采后品質(zhì)和保鮮的影響果實(shí)的采后品質(zhì)與植物的健康程度息息相關(guān),只有健康作物才能夠產(chǎn)出高品質(zhì)的果實(shí)。對(duì)植物病害的防治最終目的就是讓農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量和品質(zhì)得到提升。因此,對(duì)采后品質(zhì)的研究能夠反映農(nóng)藝措施在實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用中的有效性?；旌习l(fā)酵液處理后,獼猴桃潰瘍病的相對(duì)防效達(dá)到68.11%;葉片光和效率提高11.58%,防御相關(guān)酶SOD、POD、PAL活性具有不同程度的顯著提高。在采后獼猴桃實(shí)驗(yàn)中,與對(duì)照組相比,混合發(fā)酵液處理后單果重平均增加27.69%,果實(shí)硬度提高2.15倍,SSC提高34.40%,可滴定酸含量提升,乙烯產(chǎn)量和呼吸速率下降,相關(guān)防御酶活性提升。采后實(shí)驗(yàn)表明,處理組果實(shí)失水率顯著下降,采后病害發(fā)病率顯著降低,防病效果達(dá)到72.2%。獼猴桃果實(shí)轉(zhuǎn)錄組實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在采后果實(shí)抗病性方面,與抗氧化抗逆,生長(zhǎng)素的運(yùn)輸有關(guān)的類(lèi)黃酮合成途徑中相關(guān)酶的轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)最為顯著,生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素和水楊酸等植物激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平同樣提升顯著,多種抗病蛋白基因表達(dá)水平上調(diào),有效提高了果實(shí)抗病能力。在果實(shí)抑制成熟方面,混合發(fā)酵液處理后生長(zhǎng)素相關(guān)基因（AUX/IAA）上調(diào)表達(dá)及其顯著;顯著促進(jìn)了果實(shí)中丙氨酸解氨酶（PAL）過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPX）基因的表達(dá)。同時(shí)抑制了貯藏后期獼猴桃果實(shí)中多聚半乳糖醛酸酶（PG）、果膠酯酶、β-葡萄糖苷酶、β-1,3-葡聚糖酶和多聚半乳糖醛酸酶等多個(gè)細(xì)胞壁水解酶基因的表達(dá)。果實(shí)成熟相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子RIN4、CNR6表達(dá)量顯著降低;乙烯合成相關(guān)途徑中,兩個(gè)最重要的限速酶ACS3和ACO表達(dá)量極顯著下調(diào),乙烯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的負(fù)調(diào)控因子CTR1、EIN3和EIN4表達(dá)量極顯著上調(diào)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明了混合發(fā)酵液采前處理可以通過(guò)抑制細(xì)胞壁降解過(guò)程和乙烯合成轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的相關(guān)基因表達(dá),從而達(dá)到延緩獼猴桃果實(shí)成熟的結(jié)果。代謝組學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,采后果實(shí)植物激素含量發(fā)生改變,生長(zhǎng)素、水楊酸含量上升,脫落酸含量下降,多種氨基酸、維生素和類(lèi)黃酮物質(zhì)含量上升。這些結(jié)果在基因水平證明混合發(fā)酵液促進(jìn)了果實(shí)的發(fā)育,提升果實(shí)品質(zhì),延長(zhǎng)果實(shí)保鮮期。綜上所述,黑根霉和擬康氏木霉混合發(fā)酵液可以提升土壤理化生性狀,改善土壤微生物區(qū)系,有效抑制植物病原微生物生長(zhǎng),從而達(dá)到防治土傳病害的目的。對(duì)獼猴桃的采后實(shí)驗(yàn)表明,混合發(fā)酵液采前處理有效提高了采后果實(shí)品質(zhì),延長(zhǎng)果實(shí)儲(chǔ)藏時(shí)間。本研究提供了一種防治植物病害,抗逆增產(chǎn)的生物防治新思路,對(duì)國(guó)家農(nóng)藥化肥增效減施策略和可持續(xù)農(nóng)業(yè)的發(fā)展具有重大意義。
戴卓男,苗晗,李寶聚,石延霞,薄凱亮,董邵云,顧興芳,張圣平[10]（2020）在《黃瓜抗灰霉病育種研究進(jìn)展》文中研究指明黃瓜灰霉病由半知菌亞門(mén)葡萄孢屬灰葡萄孢菌引起,是為害黃瓜生產(chǎn)的重要病害之一。本文對(duì)黃瓜灰霉病的病原菌、發(fā)病規(guī)律、致病機(jī)理及黃瓜抗病機(jī)制、抗病育種等方面進(jìn)行了系統(tǒng)綜述,并對(duì)下一步工作進(jìn)行了展望,以期為黃瓜抗灰霉病育種提供參考。
二、灰霉病菌對(duì)黃瓜番茄及其它植物的致病性初探（論文開(kāi)題報(bào)告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡(jiǎn)單簡(jiǎn)介論文所研究問(wèn)題的基本概念和背景，再而簡(jiǎn)單明了地指出論文所要研究解決的具體問(wèn)題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點(diǎn)或解決方法。
寫(xiě)法范例：
本文主要提出一款精簡(jiǎn)64位RISC處理器存儲(chǔ)管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過(guò)程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲(chǔ)器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁(yè)面大小,采用多級(jí)分層頁(yè)表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級(jí)頁(yè)表轉(zhuǎn)換過(guò)程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲(chǔ)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對(duì)象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對(duì)象從而得到有關(guān)信息。
實(shí)驗(yàn)法：通過(guò)主支變革、控制研究對(duì)象來(lái)發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過(guò)調(diào)查文獻(xiàn)來(lái)獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。
定性分析法：對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過(guò)具體的數(shù)字，使人們對(duì)研究對(duì)象的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對(duì)某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會(huì)科學(xué)用來(lái)分析社會(huì)現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。
模擬法：通過(guò)創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來(lái)間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、灰霉病菌對(duì)黃瓜番茄及其它植物的致病性初探（論文提綱范文）
（1）假茄科雷爾氏菌對(duì)瓜類(lèi)作物的致病性以及南瓜響應(yīng)病菌侵染的轉(zhuǎn)錄組和代謝組分析（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 前言 |
| 1.1 植物青枯菌的寄主范圍 |
| 1.2 葫蘆科植物青枯病的研究概述 |
| 1.3 病菌與植物寄主互作的機(jī)制概述 |
| 1.4 轉(zhuǎn)錄組學(xué)在植物抗病機(jī)制研究中的應(yīng)用 |
| 1.5 代謝組學(xué)在植物抗病機(jī)制研究中的應(yīng)用 |
| 1.6 轉(zhuǎn)錄組學(xué)和代謝組學(xué)關(guān)聯(lián)分析在植物抗病研究中的應(yīng)用 |
| 1.7 本研究的目的意義 |
| 1.8 本研究的技術(shù)路線 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 供試菌株 |
| 2.1.2 供試培養(yǎng)基 |
| 2.1.3 主要試劑盒 |
| 2.1.4 供試作物 |
| 2.1.5 主要試驗(yàn)儀器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 不同寄主來(lái)源青枯菌菌株對(duì)瓜類(lèi)作物的致病性測(cè)定 |
| 2.2.2 Cq01 和GMI1000 菌株侵染對(duì)南瓜防御相關(guān)生理生化反應(yīng)影響的測(cè)定 |
| 2.2.3 南瓜響應(yīng)Cq01 和GMI1000 菌株侵染的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析 |
| 2.2.4 南瓜響應(yīng)Cq01 和GMI1000 菌株侵染的代謝組分差異分析 |
| 2.2.5 數(shù)據(jù)處理方法 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 青枯菌對(duì)瓜類(lèi)作物的致病性 |
| 3.1.1 不同寄主來(lái)源菌株對(duì)3 種瓜類(lèi)作物的致病性 |
| 3.1.2 菌株所屬的生理小種類(lèi)型 |
| 3.1.3 對(duì)南瓜具有無(wú)致病性和強(qiáng)致病力的菌株 |
| 3.1.4 Cq01 和GMI1000 菌株在南瓜根系的侵入菌量 |
| 3.2 Cq01 和GMI1000 菌株對(duì)南瓜防御相關(guān)的生理生化特性的影響 |
| 3.2.1 H_2O_2的變化 |
| 3.2.2 過(guò)敏性壞死細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果 |
| 3.2.3 Cq01和GMI1000 菌株對(duì)南瓜植株MAD含量的影響 |
| 3.2.4 Cq01和GMI1000 菌株對(duì)南瓜植株P(guān)AL酶活性的影響 |
| 3.2.5 Cq01和GMI1000 菌株對(duì)南瓜植株P(guān)OD酶活性的影響 |
| 3.2.6 Cq01和GMI1000 菌株對(duì)南瓜植株SOD酶活性的影響 |
| 3.2.7 Cq01和GMI1000 菌株對(duì)南瓜植株P(guān)PO酶活性的影響 |
| 3.2.8 Cq01和GMI1000 菌株對(duì)南瓜植株CAT酶活性的影響 |
| 3.3 南瓜響應(yīng)Cq01 和GMI1000 菌株侵染的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析 |
| 3.3.1 RNA質(zhì)量檢測(cè)分析 |
| 3.3.2 測(cè)序數(shù)據(jù)和組裝結(jié)果分析 |
| 3.3.3 基因表達(dá)分析 |
| 3.3.4 差異表達(dá)基因篩選 |
| 3.3.5 差異表達(dá)基因GO注釋 |
| 3.3.6 差異表達(dá)基因KEGG注釋 |
| 3.3.7 qRT-PCR驗(yàn)證差異表達(dá)基因 |
| 3.4 南瓜響應(yīng)Cq01 和GMI1000 菌株侵染的代謝組分析 |
| 3.4.1 主成分分析 |
| 3.4.2 正交偏最小二乘法-判別分析 |
| 3.4.3 差異代謝物的篩選 |
| 3.4.4 差異代謝物的KEGG注釋 |
| 3.4.5 轉(zhuǎn)錄組和代謝組關(guān)聯(lián)分析 |
| 4 討論與結(jié)論 |
| 4.1 討論 |
| 4.1.1 青枯菌對(duì)瓜類(lèi)作物的致病性及其生理小種 |
| 4.1.2 Cq01 和GMI1000 菌株對(duì)南瓜生理生化特性的影響 |
| 4.1.3 南瓜響應(yīng)Cq01 和GMI1000 菌株侵染的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析 |
| 4.1.4 南瓜響應(yīng)Cq01 和GMI1000 菌株侵染的代謝組分析 |
| 4.1.5 南瓜響應(yīng)Cq01 和GMI1000 菌株侵染的轉(zhuǎn)錄組和代謝組關(guān)聯(lián)分析 |
| 4.2 結(jié)論 |
| 4.3 創(chuàng)新點(diǎn) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 |
（2）黃瓜靶斑病菌對(duì)吡唑醚菌酯的抗性監(jiān)測(cè)及兩種新型殺菌劑的抗性分子機(jī)制研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 黃瓜靶斑病的發(fā)生與為害特點(diǎn) |
| 1.1.1 黃瓜靶斑病在國(guó)內(nèi)外發(fā)生與為害情況 |
| 1.1.2 黃瓜靶斑病的病害癥狀與病原生物學(xué) |
| 1.1.3 黃瓜靶斑病的發(fā)生規(guī)律 |
| 1.2 黃瓜靶斑病的防治現(xiàn)狀 |
| 1.2.1 農(nóng)業(yè)防治 |
| 1.2.2 選育抗性品種 |
| 1.2.3 生物防治 |
| 1.2.4 化學(xué)防治 |
| 1.3 防治黃瓜靶斑病的藥劑及抗性狀況 |
| 1.3.1 QoIs類(lèi)殺菌劑 |
| 1.3.1.1 作用機(jī)制 |
| 1.3.1.2 抗性機(jī)制 |
| 1.3.2 QiIs類(lèi)殺菌劑 |
| 1.3.3 SDHIs類(lèi)殺菌劑 |
| 1.3.3.1 作用機(jī)制 |
| 1.3.3.2 抗性機(jī)制 |
| 1.3.4 DMIs殺菌劑 |
| 1.3.4.1 作用機(jī)制 |
| 1.3.4.2 抗性機(jī)制 |
| 1.3.4.3 氯氟醚菌唑 |
| 1.3.5 黃瓜靶斑病菌的抗藥性現(xiàn)狀 |
| 1.4 殺菌劑抗性研究方法 |
| 1.4.1 病原生物對(duì)殺菌劑抗性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法 |
| 1.4.2 殺菌劑抗性分子機(jī)制研究方法 |
| 1.4.2.1 分子對(duì)接 |
| 1.4.2.2 遺傳轉(zhuǎn)化驗(yàn)證 |
| 1.4.2.3 異源表達(dá) |
| 1.5 本研究的目的與意義 |
| 第二章 黃瓜靶斑病菌對(duì)吡唑醚菌酯的抗性監(jiān)測(cè)及抗性分子機(jī)制 |
| 2.1 供試材料 |
| 2.1.1 供試菌株 |
| 2.1.2 供試藥劑及培養(yǎng)基 |
| 2.1.3 藥劑敏感性測(cè)定 |
| 2.1.4 抗藥穩(wěn)定性 |
| 2.1.5 溫度敏感性測(cè)定 |
| 2.1.6 菌絲生長(zhǎng)速率法 |
| 2.1.7 產(chǎn)孢量測(cè)定 |
| 2.1.8 孢子萌發(fā)測(cè)定 |
| 2.1.9 致病力測(cè)定及突變體防效 |
| 2.1.10 交互抗藥性測(cè)定 |
| 2.1.11 黃瓜靶斑病菌的DNA的提取 |
| 2.1.12 分子對(duì)接試驗(yàn) |
| 2.1.13 CcCytbG143A點(diǎn)突變的LAMP分子檢測(cè)體系的建立 |
| 2.2 結(jié)果與分析 |
| 2.2.1 黃瓜靶斑病菌對(duì)吡唑醚菌酯的敏感性 |
| 2.2.2 抗藥性穩(wěn)定性及抗性水平 |
| 2.2.3 黃瓜靶斑病菌的溫度敏感性 |
| 2.2.4 黃瓜靶斑病菌的產(chǎn)孢、孢子萌發(fā)及致病力 |
| 2.2.5 交互抗藥性分析 |
| 2.2.6 突變體的防效 |
| 2.2.7 CcCytb序列分析 |
| 2.2.8 分子對(duì)接驗(yàn)證CcCytb與吡唑醚菌酯抗性的關(guān)系 |
| 2.2.8.1 模型評(píng)價(jià) |
| 2.2.8.2 吡唑醚菌酯與CcCytb蛋白及其突變體G143A的相互作用 |
| 2.2.9 黃瓜靶斑病菌G143A點(diǎn)突變的LAMP分子檢測(cè)體系 |
| 2.2.9.1 LAMP反應(yīng)體系的優(yōu)化 |
| 2.2.9.2 LAMP的靈敏度 |
| 2.2.9.3 LAMP的特異性 |
| 2.3 小結(jié) |
| 第三章 黃瓜靶斑病菌對(duì)florylpicoxamid的抗性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和抗性分子機(jī)制 |
| 3.1 材料與方法 |
| 3.1.1 供試藥劑及培養(yǎng)基 |
| 3.1.2 供試菌株 |
| 3.1.3 藥劑敏感性測(cè)定 |
| 3.1.4 抗藥性突變體的篩選 |
| 3.1.5 抗藥穩(wěn)定性 |
| 3.1.6 溫度敏感性 |
| 3.1.7 產(chǎn)孢量測(cè)定 |
| 3.1.8 孢子萌發(fā)測(cè)定 |
| 3.1.9 致病力測(cè)定及突變體防效 |
| 3.1.10 交互抗藥性測(cè)定 |
| 3.1.11 黃瓜靶斑病菌的DNA提取 |
| 3.1.12 CcCytb A37V點(diǎn)突變與florylpicoxamid的分子對(duì)接 |
| 3.1.13 CcCytb A37V點(diǎn)突變的AS-PCR檢測(cè)體系的建立 |
| 3.1.14 CcCytb A37V點(diǎn)突變的LAMP分子檢測(cè)體系的建立 |
| 3.2 結(jié)果 |
| 3.2.1 黃瓜靶斑病菌對(duì)florylpicoxamid的敏感基線 |
| 3.2.2 黃瓜靶斑病菌對(duì)florylpicoxamid的抗性突變體的獲得及穩(wěn)定性 |
| 3.2.3 抗性突變體的溫度敏感性 |
| 3.2.4 抗性突變體的生存適合度 |
| 3.2.5 florylpicoxamid對(duì)抗性突變體的防效 |
| 3.2.6 交互抗性分析 |
| 3.2.7 黃瓜靶斑病菌抗感菌株中Cytb基因序列分析 |
| 3.2.8 A37V分子對(duì)接驗(yàn)證 |
| 3.2.8.1 模型評(píng)價(jià) |
| 3.2.8.2 florylpicoxamid與 CcCytb蛋白及其突變體A37V的相互作用 |
| 3.2.9 黃瓜靶斑病菌A37V的 AS-PCR檢測(cè)結(jié)果 |
| 3.2.10 黃瓜靶斑病菌A37V的 LAMP分子檢測(cè)體系 |
| 3.2.10.1 LAMP反應(yīng)體系的優(yōu)化 |
| 3.2.10.2 LAMP的靈敏度 |
| 3.2.10.3 LAMP的特異性 |
| 3.3 小結(jié) |
| 第四章 氯氟醚菌唑?qū)S瓜靶斑病菌的作用活性初探 |
| 4.1 材料與方法 |
| 4.1.1 供試菌株 |
| 4.1.2 供試培養(yǎng)基 |
| 4.1.3 供試作物與品種 |
| 4.1.4 供試藥劑 |
| 4.1.5 氯氟醚菌唑?qū)Σ煌l(fā)育階段的抑制活性 |
| 4.1.6 氯氟醚菌唑在黃瓜上的傳導(dǎo)活性 |
| 4.2 結(jié)果與分析 |
| 4.2.1 氯氟醚菌唑?qū)S瓜靶斑病菌的抑菌活性 |
| 4.2.2 氯氟醚菌唑?qū)S瓜靶斑病菌的孢子及芽管微觀形態(tài)的影響 |
| 4.2.3 黃瓜靶斑病菌對(duì)氯氟醚菌唑的敏感基線 |
| 4.2.4 氯氟醚菌唑的傳導(dǎo)性 |
| 4.2.4.1 氯氟醚菌唑在黃瓜葉片上的傳導(dǎo)活性 |
| 4.2.4.2 氯氟醚菌唑在黃瓜植株上的傳導(dǎo)活性 |
| 4.3 小結(jié) |
| 第五章 黃瓜靶斑病菌對(duì)氯氟醚菌唑的抗性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及機(jī)制分析 |
| 5.1 材料與方法 |
| 5.1.1 供試菌株 |
| 5.1.2 供試培養(yǎng)基 |
| 5.1.3 供試藥劑 |
| 5.1.4 抗性突變體的誘導(dǎo) |
| 5.1.5 突變體的生物學(xué)性狀測(cè)定 |
| 5.1.6 交互抗藥性測(cè)定 |
| 5.1.7 抗藥性機(jī)制研究 |
| 5.1.7.1 菌株DNA的提取 |
| 5.1.7.2 PCR擴(kuò)增黃瓜靶斑病菌靶標(biāo)部分序列 |
| 5.1.7.3 RNA的提取及反轉(zhuǎn)錄 |
| 5.1.7.4 CYP51 基因表達(dá)量測(cè)定 |
| 5.1.8 分子對(duì)接模擬氯氟醚菌唑?qū)c CYp51 分子識(shí)別 |
| 5.2 結(jié)果與分析 |
| 5.2.1 黃瓜靶斑病菌對(duì)氯氟醚菌唑的抗性突變體的獲得 |
| 5.2.1.1 藥劑馴化 |
| 5.2.1.2 紫外誘導(dǎo) |
| 5.2.2 藥劑馴化獲得抗性突變體的生物學(xué)性狀研究 |
| 5.2.2.1 突變體抗藥穩(wěn)定性及抗性水平 |
| 5.2.2.2 突變體抗的適合度 |
| 5.2.3 紫外誘導(dǎo)獲得抗性突變體的生物學(xué)性狀研究 |
| 5.2.3.1 突變體抗藥穩(wěn)定性及抗性水平 |
| 5.2.3.2 適合度 |
| 5.2.4 交互抗藥性 |
| 5.2.5 靶蛋白編碼基因CYP51A、CYP51B和 CYP51C的序列分析 |
| 5.2.6 CYP51A、CYP51B和 CYP51C的表達(dá)量 |
| 5.2.7 氯氟醚菌唑與CcCYP51 蛋白的相互作用 |
| 5.2.7.1 模型評(píng)價(jià) |
| 5.2.7.2 分子對(duì)接 |
| 5.3 小結(jié) |
| 第六章 氯氟醚菌唑的復(fù)配藥劑篩選及其對(duì)黃瓜靶斑病菌的防效 |
| 6.1 材料與方法 |
| 6.1.1 供試菌株 |
| 6.1.2 供試培養(yǎng)基 |
| 6.1.3 供試藥劑 |
| 6.1.4 藥劑的復(fù)配與最佳比例篩選 |
| 6.1.5 藥劑對(duì)黃瓜靶斑病的保護(hù)和治療防效 |
| 6.1.6 離體葉片防效測(cè)定 |
| 6.2 結(jié)果與分析 |
| 6.2.1 氯氟醚菌唑與吡唑萘菌胺的最佳配比篩選 |
| 6.2.2 黃瓜靶斑病菌對(duì)二元復(fù)合物(Mef&Iso=1:1)的敏感性測(cè)定 |
| 6.2.3 氯氟醚菌唑與咪鮮胺混用的最佳配比篩選 |
| 6.2.4 黃瓜靶斑病菌對(duì)二元復(fù)合物(Mef &Pro=7:3)的敏感性測(cè)定 |
| 6.3 小結(jié) |
| 第七章 討論與結(jié)論 |
| 7.1 討論 |
| 7.1.1 黃瓜靶斑病菌對(duì)吡唑醚菌酯的抗性 |
| 7.1.2 黃瓜靶斑病菌對(duì)florylpicoxamid的抗性 |
| 7.1.3 黃瓜靶斑病菌對(duì)氯氟醚菌唑的抗性風(fēng)險(xiǎn)及機(jī)制 |
| 7.1.4 氯氟醚菌唑的應(yīng)用潛力 |
| 7.2 結(jié)論 |
| 創(chuàng)新之處 |
| 展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況 |
（3）黨參灰霉病拮抗細(xì)菌的篩選及對(duì)黨參促生作用的研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 灰霉病及其防治 |
| 1.1.1 農(nóng)業(yè)防治 |
| 1.1.2 化學(xué)防治 |
| 1.1.3 生物防治 |
| 1.2 生防細(xì)菌抗病作用的研究進(jìn)展 |
| 1.2.1 生防細(xì)菌的防治效果 |
| 1.2.2 生防細(xì)菌的抑菌機(jī)制 |
| 1.3 生防細(xì)菌促生作用的研究進(jìn)展 |
| 1.3.1 生防細(xì)菌的促生效果 |
| 1.3.2 生防細(xì)菌的促生機(jī)理 |
| 1.4 黨參灰霉病研究進(jìn)展 |
| 1.5 研究的目的及意義 |
| 1.6 技術(shù)路線 |
| 2 不同因素對(duì)黨參灰霉病發(fā)生的影響及病原菌的鑒定 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料與方法 |
| 2.2.1 黨參灰霉病田間發(fā)病調(diào)查 |
| 2.2.2 病原菌的分離與純化 |
| 2.2.3 病原菌致病性測(cè)定 |
| 2.2.4 病原菌鑒定 |
| 2.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 |
| 2.3 結(jié)果與分析 |
| 2.3.1 黨參灰霉病田間發(fā)病調(diào)查 |
| 2.3.2 病原菌分離及致病性測(cè)定 |
| 2.3.3 病原菌的形態(tài)鑒定 |
| 2.3.4 病原菌的分子鑒定 |
| 2.4 討論與小結(jié) |
| 2.4.1 討論 |
| 2.4.2 小結(jié) |
| 3 拮抗促生細(xì)菌的分離、篩選與鑒定 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料與方法 |
| 3.2.1 供試樣品 |
| 3.2.2 拮抗細(xì)菌的分離與純化 |
| 3.2.3 拮抗細(xì)菌的篩選 |
| 3.2.4 拮抗細(xì)菌促生活性測(cè)定 |
| 3.2.5 拮抗促生細(xì)菌的鑒定 |
| 3.2.6 離體葉片防效測(cè)定 |
| 3.2.7 數(shù)據(jù)處理與分析 |
| 3.3 結(jié)果與分析 |
| 3.3.1 拮抗細(xì)菌的初篩 |
| 3.3.2 拮抗細(xì)菌的復(fù)篩 |
| 3.3.3 拮抗細(xì)菌對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響 |
| 3.3.4 拮抗細(xì)菌的促生活性測(cè)定 |
| 3.3.5 拮抗促生細(xì)菌的鑒定 |
| 3.3.6 拮抗細(xì)菌對(duì)黨參灰霉病的防效測(cè)定 |
| 3.4 討論與小結(jié) |
| 3.4.1 討論 |
| 3.4.2 小結(jié) |
| 4 生防細(xì)菌NSW3-1和GJW2-1 的發(fā)酵條件優(yōu)化 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料與方法 |
| 4.2.1 試驗(yàn)材料 |
| 4.2.2 方法 |
| 4.3 結(jié)果與分析 |
| 4.3.1 最佳基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選 |
| 4.3.2 單因素試驗(yàn) |
| 4.3.3 響應(yīng)面結(jié)果分析 |
| 4.3.4 最優(yōu)結(jié)果預(yù)測(cè)及試驗(yàn)驗(yàn)證 |
| 4.3.5 優(yōu)化后的促生活性 |
| 4.3.6 優(yōu)化后的拮抗活性 |
| 4.4 討論與小結(jié) |
| 4.4.1 討論 |
| 4.4.2 小結(jié) |
| 5 NSW3-1和GJW2-1 防治黨參灰霉病及對(duì)黨參的促生作用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料與方法 |
| 5.2.1 試驗(yàn)材料 |
| 5.2.2 試驗(yàn)方法 |
| 5.3 結(jié)果與分析 |
| 5.3.1 拮抗促生細(xì)菌室內(nèi)盆栽防治效果 |
| 5.3.2 拮抗促生細(xì)菌室內(nèi)盆栽促生效果 |
| 5.4 討論與小結(jié) |
| 5.4.1 討論 |
| 5.4.2 小結(jié) |
| 6 總結(jié)與展望 |
| 6.1 主要結(jié)論 |
| 6.2 問(wèn)題與展望 |
| 6.2.1 問(wèn)題分析 |
| 6.2.2 前景展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個(gè)人簡(jiǎn)歷、在校期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果 |
（4）3株放線菌的抑菌活性及其對(duì)黃瓜枯萎病的防治效果（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 黃瓜枯萎病研究現(xiàn)狀 |
| 1.1.1 黃瓜枯萎病的發(fā)生現(xiàn)狀 |
| 1.1.2 黃瓜枯萎病的癥狀 |
| 1.1.3 黃瓜枯萎病病原物 |
| 1.1.4 黃瓜枯萎病的防治現(xiàn)狀 |
| 1.2 生防放線菌的研究現(xiàn)狀 |
| 1.2.1 放線菌的種類(lèi) |
| 1.2.2 放線菌抗生物質(zhì)的種類(lèi) |
| 1.2.3 放線菌的生防機(jī)制 |
| 1.2.4 放線菌的應(yīng)用現(xiàn)狀 |
| 1.3 本研究的目的與意義 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 供試材料 |
| 2.1.1 供試菌株與質(zhì)粒 |
| 2.1.2 供試培養(yǎng)基 |
| 2.1.3 供試試劑 |
| 2.2 拮抗放線菌的分子生物學(xué)鑒定 |
| 2.2.1 DNA的提取 |
| 2.2.2 片段擴(kuò)增 |
| 2.2.3 載體連接和測(cè)序 |
| 2.3 拮抗放線菌的抑菌能力測(cè)定 |
| 2.3.1 放線菌的抗菌譜測(cè)定 |
| 2.3.2 放線菌發(fā)酵濾液對(duì)黃瓜枯萎病菌孢子萌發(fā)的測(cè)定 |
| 2.3.3 放線菌發(fā)濾酵液對(duì)黃瓜枯萎病菌絲生長(zhǎng)的測(cè)定 |
| 2.3.4 放線菌發(fā)酵液及其復(fù)配對(duì)黃瓜枯萎病菌的抑菌作用測(cè)定 |
| 2.3.5 放線菌產(chǎn)胞外酶及嗜鐵素能力測(cè)定 |
| 2.4 放線菌發(fā)酵液活性物質(zhì)穩(wěn)定性研究 |
| 2.4.1 發(fā)酵濾液的儲(chǔ)存穩(wěn)定性測(cè)定 |
| 2.4.2 發(fā)酵濾液的熱穩(wěn)定性測(cè)定 |
| 2.4.3 發(fā)酵濾液的酸堿穩(wěn)定性測(cè)定 |
| 2.4.4 發(fā)酵濾液的紫外光穩(wěn)定性測(cè)定 |
| 2.5 不同放線菌對(duì)黃瓜生長(zhǎng)發(fā)育的影響 |
| 2.5.1 不同濃度放線菌孢子液處理后黃瓜種子萌發(fā)率的測(cè)定 |
| 2.5.2 放線菌發(fā)酵液處理后黃瓜種子萌發(fā)的測(cè)定 |
| 2.5.3 放線菌發(fā)酵液處理后黃瓜苗期形態(tài)指標(biāo)的測(cè)定 |
| 2.5.4 放線菌發(fā)酵液處理后黃瓜苗期物質(zhì)積累量的測(cè)定 |
| 2.5.5 放線菌發(fā)酵液處理后黃瓜苗期光合色素含量的測(cè)定 |
| 2.6 放線菌發(fā)酵液處理后黃瓜體內(nèi)防御酶活性的測(cè)定 |
| 2.7 放線菌發(fā)酵液處理后黃瓜體內(nèi)抗性物質(zhì)含量的測(cè)定 |
| 2.8 拮抗放線菌的定殖 |
| 2.8.1 菌株的標(biāo)記 |
| 2.8.2 放線菌在土壤中的定殖能力測(cè)定 |
| 2.9 放線菌發(fā)酵液對(duì)黃瓜枯萎病的盆栽防效測(cè)定 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 拮抗放線菌的分子生物學(xué)鑒定 |
| 3.2 拮抗放線菌的抑菌機(jī)制 |
| 3.2.1 放線菌的抗菌譜 |
| 3.2.2 放線菌發(fā)酵液對(duì)黃瓜枯萎病菌孢子萌發(fā)的影響 |
| 3.2.3 放線菌發(fā)酵液對(duì)黃瓜枯萎病菌絲生長(zhǎng)的影響 |
| 3.2.4 放線菌發(fā)酵液及其復(fù)配對(duì)黃瓜枯萎病菌的抑菌作用 |
| 3.2.5 放線菌產(chǎn)胞外酶及嗜鐵素能力 |
| 3.3 放線菌發(fā)酵液活性物質(zhì)穩(wěn)定性研究 |
| 3.3.1 發(fā)酵濾液的儲(chǔ)存穩(wěn)定性 |
| 3.3.2 發(fā)酵濾液的熱穩(wěn)定性 |
| 3.3.3 發(fā)酵濾液的酸堿穩(wěn)定性 |
| 3.3.4 發(fā)酵濾液的紫外穩(wěn)定性 |
| 3.4 不同放線菌對(duì)黃瓜的生長(zhǎng)發(fā)育的影響 |
| 3.4.1 不同濃度放線菌孢子液對(duì)黃瓜種子萌發(fā)率的影響 |
| 3.4.2 放線菌發(fā)酵液對(duì)黃瓜種子萌發(fā)的影響 |
| 3.4.3 放線菌發(fā)酵液對(duì)黃瓜苗期形態(tài)指標(biāo)的影響 |
| 3.4.4 放線菌發(fā)酵液對(duì)黃瓜苗期物質(zhì)積累量的影響 |
| 3.4.5 放線菌發(fā)酵液對(duì)黃瓜苗期光合色素含量的影響 |
| 3.5 放線菌對(duì)黃瓜體內(nèi)防御酶活性的影響 |
| 3.6 生防菌對(duì)黃瓜體內(nèi)抗性物質(zhì)含量的影響 |
| 3.7 拮抗放線菌的定殖 |
| 3.7.1 菌株的標(biāo)記 |
| 3.7.2 放線菌在土壤中的定殖能力 |
| 3.8 放線菌對(duì)黃瓜枯萎病的盆栽防效 |
| 4 討論 |
| 4.1 放線菌的分類(lèi)依據(jù) |
| 4.2 發(fā)酵條件的優(yōu)化 |
| 4.3 代謝產(chǎn)物活性 |
| 4.4 誘導(dǎo)植株防御酶活性變化 |
| 4.5 誘導(dǎo)植株抗性物質(zhì)含量變化 |
| 5 全文總結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果 |
| 致謝 |
（5）多主棒孢SdhB亞基異核體突變對(duì)啶酰菌胺抗性的影響（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 主要符號(hào)對(duì)照表 |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 黃瓜棒孢葉斑病的研究概況 |
| 1.1.1 黃瓜棒孢葉斑病的危害癥狀 |
| 1.1.2 黃瓜棒孢葉斑病病原菌特征 |
| 1.2 黃瓜棒孢葉斑病的防治 |
| 1.2.1 農(nóng)業(yè)與生態(tài)防治 |
| 1.2.2 生物防治 |
| 1.2.3 化學(xué)防治 |
| 1.3 SDHIs殺菌劑抗性研究進(jìn)展 |
| 1.3.1 SDHIs殺菌劑作用機(jī)理 |
| 1.3.2 多主棒孢對(duì)SDHIs殺菌劑抗藥性研究進(jìn)展 |
| 1.4 真菌異核體的研究概述 |
| 1.4.1 真菌異核體的發(fā)生概況 |
| 1.4.2 真菌異核體的適合度研究 |
| 1.5 研究目的及意義 |
| 1.6 技術(shù)路線 |
| 第二章 對(duì)啶酰菌胺不同抗性類(lèi)型多主棒孢的生物學(xué)特性 |
| 2.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.1.1 供試菌株 |
| 2.1.2 供試試劑 |
| 2.1.3 供試培養(yǎng)基 |
| 2.1.4 主要儀器及設(shè)備 |
| 2.2 試驗(yàn)方法 |
| 2.2.1 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株對(duì)SDHIs殺菌劑的敏感性測(cè)定 |
| 2.2.2 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株遺傳穩(wěn)定性測(cè)定 |
| 2.2.3 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株致病性測(cè)定 |
| 2.2.4 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株最適碳、氮源測(cè)定 |
| 2.2.5 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株最適生長(zhǎng)溫度測(cè)定 |
| 2.2.6 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株菌絲耐高溫性測(cè)定 |
| 2.2.7 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株對(duì)滲透壓的敏感性測(cè)定 |
| 2.3 試驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.3.1 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株對(duì)SDHIs殺菌劑的敏感性 |
| 2.3.2 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株的遺傳穩(wěn)定性 |
| 2.3.3 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株的致病性 |
| 2.3.4 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株的最適碳、氮源 |
| 2.3.5 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株的最適生長(zhǎng)溫度 |
| 2.3.6 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株菌絲的耐高溫性 |
| 2.3.7 不同抗性類(lèi)型多主棒孢突變菌株對(duì)滲透壓的敏感性 |
| 2.4 小結(jié) |
| 2.5 討論 |
| 第三章 多主棒孢SdhB亞基異核抗性突變與啶酰菌胺抗性關(guān)系的研究 |
| 3.1 試驗(yàn)材料 |
| 3.1.1 供試菌株 |
| 3.1.2 供試試劑 |
| 3.1.3 供試儀器 |
| 3.1.4 供試引物 |
| 3.2 試驗(yàn)方法 |
| 3.2.1 同源重組載體的構(gòu)建 |
| 3.2.2 多主棒孢原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)化 |
| 3.2.3 異核突變體的驗(yàn)證 |
| 3.2.4 轉(zhuǎn)化子表型分析 |
| 3.2.5 SdhB-H278Y異核突變體田間競(jìng)爭(zhēng)力初探 |
| 3.3 試驗(yàn)結(jié)果 |
| 3.3.1 同源重組載體的構(gòu)建 |
| 3.3.2 多主棒孢原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)化 |
| 3.3.3 異核突變體的驗(yàn)證 |
| 3.3.4 轉(zhuǎn)化子表型分析 |
| 3.3.5 SdhB-H278Y異核突變體田間競(jìng)爭(zhēng)力初探 |
| 3.4 小結(jié) |
| 3.5 討論 |
| 第四章 多主棒孢SdhB-H278Y抗性突變位點(diǎn)檢測(cè)體系的建立 |
| 4.1 試驗(yàn)材料 |
| 4.1.1 供試菌株 |
| 4.1.2 供試試劑與培養(yǎng)基 |
| 4.1.3 供試儀器 |
| 4.2 試驗(yàn)方法 |
| 4.2.1 檢測(cè)體系引物的設(shè)計(jì) |
| 4.2.2 引物的篩選及優(yōu)化 |
| 4.2.3 靈敏度的檢測(cè) |
| 4.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 |
| 4.3 試驗(yàn)結(jié)果 |
| 4.3.1 檢測(cè)體系引物的篩選及優(yōu)化 |
| 4.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 |
| 4.4 小結(jié) |
| 4.5 討論 |
| 第五章 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 A |
| 致謝 |
| 作者簡(jiǎn)歷 |
（6）復(fù)合生防菌對(duì)洋蔥根腐病害的防治與機(jī)理研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 緒論 |
| 1.1 洋蔥概述 |
| 1.2 洋蔥病害的種類(lèi)及綜合防治現(xiàn)狀 |
| 1.2.1 洋蔥主要病害 |
| 1.2.2 洋蔥主要病害的綜合防治現(xiàn)狀 |
| 1.3 洋蔥根腐病的研究進(jìn)展 |
| 1.3.1 洋蔥根腐病的發(fā)病情況 |
| 1.3.2 洋蔥根腐病病原菌的致病危害 |
| 1.4 生防菌的研究現(xiàn)狀 |
| 1.4.1 生防細(xì)菌在植物病害中的應(yīng)用及生防機(jī)制 |
| 1.4.2 木霉在植物病害中的應(yīng)用及生防機(jī)制 |
| 1.4.3 復(fù)合生防菌在植物病害中的應(yīng)用 |
| 1.4.4 生防菌的定殖 |
| 1.5 本研究的目的與意義 |
| 2 病原菌、生防菌的分離鑒定及復(fù)合菌的確定 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 土樣的采集 |
| 2.1.2 供試病原真菌 |
| 2.1.3 主要儀器 |
| 2.1.4 主要藥品及試劑 |
| 2.1.5 培養(yǎng)基 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 病原菌的分離鑒定 |
| 2.2.2 拮抗菌的篩選 |
| 2.2.3 菌株XG和M2 對(duì)洋蔥層出鐮刀菌孢子萌發(fā)的影響 |
| 2.2.4 菌株XG和M2 抑菌譜的測(cè)定 |
| 2.2.5 菌株XG和M2 理化性質(zhì)的測(cè)定 |
| 2.2.6 菌種鑒定 |
| 2.3 結(jié)果與分析 |
| 2.3.1 病原菌的分離 |
| 2.3.2 病原菌的致病性檢測(cè) |
| 2.3.3 病原菌的形態(tài)鑒定 |
| 2.3.4 病原菌的分子鑒定 |
| 2.3.5 生防菌的分離 |
| 2.3.6 菌株XG和M2 對(duì)洋蔥層出鐮刀菌孢子萌發(fā)的影響 |
| 2.3.7 抑菌譜測(cè)定 |
| 2.3.8 菌株的理化性質(zhì)測(cè)定 |
| 2.3.9 菌種鑒定 |
| 2.4 討論與小結(jié) |
| 3 培養(yǎng)基發(fā)酵條件的優(yōu)化及對(duì)洋蔥根腐病的防治效果 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 供試菌株 |
| 3.1.2 供試植物 |
| 3.1.3 主要試劑 |
| 3.1.4 培養(yǎng)基 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 培養(yǎng)基的選擇 |
| 3.2.2 生物量的測(cè)定 |
| 3.2.3 抑菌活性測(cè)定 |
| 3.2.4 菌株XG生長(zhǎng)曲線的測(cè)定及種子液的培養(yǎng) |
| 3.2.5 菌株XG和M2 培養(yǎng)基添加量的響應(yīng)面優(yōu)化 |
| 3.2.6 菌株XG和M2 的發(fā)酵條件優(yōu)化 |
| 3.2.7 菌株XG和M2 代謝產(chǎn)物對(duì)層出鐮刀菌的抑菌效果 |
| 3.2.8 菌株XG和M2 對(duì)洋蔥鱗莖的防治效果評(píng)價(jià) |
| 3.3 結(jié)果與分析 |
| 3.3.1 培養(yǎng)基的確定 |
| 3.3.2 菌株XG和M2 發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化 |
| 3.3.3 菌株XG和M2 發(fā)酵濾液對(duì)洋蔥層出鐮刀菌的抑制效果 |
| 3.3.4 菌株XG和M2 對(duì)洋蔥鱗莖防治效果的評(píng)價(jià) |
| 3.4 小結(jié)與討論 |
| 4 解淀粉芽孢桿菌XG和棘孢木霉M2 在洋蔥植株根系的定殖 |
| 4.1 試驗(yàn)材料 |
| 4.1.1 供試菌株及質(zhì)粒 |
| 4.1.2 供試抗生素 |
| 4.1.3 主要試劑 |
| 4.1.4 供試培養(yǎng)基 |
| 4.1.5 主要儀器 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的菌株 M2 轉(zhuǎn)化 |
| 4.2.2 菌株M2 轉(zhuǎn)化子的生物學(xué)特性測(cè)定 |
| 4.2.3 菌株XG對(duì)抗生素的敏感性 |
| 4.2.4 pGFP質(zhì)粒的提取 |
| 4.2.5 菌株XG的轉(zhuǎn)化 |
| 4.2.6 野生型菌株 XG 和轉(zhuǎn)化子 XG-pGFP 生長(zhǎng)速率的測(cè)定 |
| 4.2.7 菌株XG—pGFP和 M2—RFP在洋蔥植株根際的定殖動(dòng)態(tài)測(cè)定 |
| 4.3 結(jié)果與分析 |
| 4.3.1 菌株M2 對(duì)潮霉素B的敏感性 |
| 4.3.2 抑制根癌農(nóng)桿菌AGL-1 生長(zhǎng)的頭孢霉素濃度 |
| 4.3.3 菌株XG對(duì)抗生素的敏感性 |
| 4.3.4 pHB-RFP和 pGFP質(zhì)粒的提取 |
| 4.3.5 轉(zhuǎn)化子的熒光蛋白檢測(cè) |
| 4.3.6 野生型菌株 XG 和轉(zhuǎn)化子 XG-pGFP 生長(zhǎng)速率的測(cè)定 |
| 4.3.7 菌株M2 轉(zhuǎn)化子的生物學(xué)特性 |
| 4.3.8 菌株XG—pGFP和 M2—RFP在洋蔥植株根際的定殖動(dòng)態(tài) |
| 4.4 小結(jié)與討論 |
| 5 復(fù)合菌對(duì)洋蔥植株的促生誘導(dǎo)作用 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 供試菌株 |
| 5.1.2 供試植物 |
| 5.1.3 主要試劑 |
| 5.1.4 供試培養(yǎng)基 |
| 5.1.5 主要儀器 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 生防菌濾液對(duì)洋蔥種子的影響 |
| 5.2.2 菌株對(duì)洋蔥植株的影響 |
| 5.2.3 菌株對(duì)洋蔥植株葉綠素含量的影響 |
| 5.2.4 菌株對(duì)洋蔥植株根活力的影響 |
| 5.2.5 菌株對(duì)洋蔥植株相關(guān)抗性酶活的影響 |
| 5.2.6 PR蛋白基因表達(dá)量的變化 |
| 5.3 結(jié)果與分析 |
| 5.3.1 生防菌濾液對(duì)洋蔥種子的影響 |
| 5.3.2 菌株對(duì)洋蔥植株生長(zhǎng)的影響 |
| 5.3.3 菌株對(duì)洋蔥植株葉綠素含量的影響 |
| 5.3.4 菌株對(duì)洋蔥植株根活力的影響 |
| 5.3.5 菌株對(duì)洋蔥植株抗性相關(guān)酶活的影響 |
| 5.3.6 洋蔥根系蛋白基因表達(dá)量的變化 |
| 5.4 小結(jié)與討論 |
| 6 結(jié)論與展望 |
| 致謝 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 攻讀學(xué)位期間的研究成果 |
（7）草莓灰霉病菌（Botrytis cinerea）對(duì)五種殺菌劑的抗性檢測(cè)及增效組合物的篩選（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 文獻(xiàn)綜述 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 草莓灰霉病概述 |
| 1.2.1 草莓灰霉病菌 |
| 1.2.2 草莓灰霉病菌的代謝和致病 |
| 1.2.3 草莓灰霉病發(fā)生規(guī)律 |
| 1.2.4 灰霉病發(fā)生的影響因素 |
| 1.3 草莓灰霉病菌的化學(xué)防治 |
| 1.3.1 苯并咪唑類(lèi)殺菌劑 |
| 1.3.2 二甲酰亞胺類(lèi)殺菌劑 |
| 1.3.3 苯吡咯類(lèi)殺菌劑 |
| 1.3.4 吡啶胺類(lèi)殺菌劑 |
| 1.3.5 甲氧基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑 |
| 1.3.6 啶酰菌胺 |
| 1.4 研究目的和意義 |
| 2 草莓灰霉病菌對(duì)五種常用殺菌劑的抗性檢測(cè) |
| 2.1 材料與方法 |
| 2.1.1 供試菌株 |
| 2.1.2 菌株的分離純化及保存 |
| 2.1.3 供試培養(yǎng)基 |
| 2.1.4 供試藥劑 |
| 2.1.5 對(duì)多菌靈、腐霉利和乙霉威的抗藥性檢測(cè) |
| 2.1.5.1 含藥培養(yǎng)基的制備 |
| 2.1.5.2 抗藥性的檢測(cè) |
| 2.1.6 對(duì)氟啶胺和咯菌腈的敏感性測(cè)定 |
| 2.2 結(jié)果與分析 |
| 2.2.1 對(duì)多菌靈、腐霉利和乙霉威的抗藥性頻率 |
| 2.2.1.1 遼寧省灰霉病菌株對(duì)多菌靈、腐霉利和乙霉威的抗藥性頻率 |
| 2.2.1.2 河北省灰霉病菌株對(duì)多菌靈、腐霉利和乙霉威的抗藥性頻率 |
| 2.2.1.3 北京市灰霉病菌株對(duì)多菌靈、腐霉利和乙霉威抗藥性頻率 |
| 2.2.1.4 新疆自治區(qū)灰霉病菌株對(duì)多菌靈、腐霉利和乙霉威的抗藥性頻率 |
| 2.2.1.5 安徽省灰霉病菌對(duì)多菌靈、腐霉利和乙霉威的抗藥性頻率 |
| 2.2.1.6 四川省灰霉病菌株對(duì)多菌靈、腐霉利和乙霉威的抗藥性頻率 |
| 2.2.1.7 抗性頻率測(cè)定結(jié)果分析 |
| 2.2.2 對(duì)多菌靈、腐霉利和乙霉威的多重抗藥性 |
| 2.2.3 對(duì)氟啶胺和咯菌腈的抗藥性 |
| 2.2.3.1 遼寧省灰霉菌株對(duì)氟啶胺和咯菌腈的抗藥性 |
| 2.2.3.2 河北省灰霉菌株對(duì)氟啶胺和咯菌腈的抗藥性 |
| 2.2.3.3 北京市灰霉菌株對(duì)氟啶胺和咯菌腈的抗藥性 |
| 2.2.3.4 新疆自治區(qū)灰霉菌株對(duì)氟啶胺和咯菌腈的抗藥性 |
| 2.2.3.5 安徽省灰霉菌株對(duì)氟啶胺和咯菌腈的抗藥性 |
| 2.2.3.6 四川省灰霉菌株對(duì)氟啶胺和咯菌腈的抗藥性 |
| 2.2.3.7 對(duì)氟啶胺和咯菌腈的抗藥性檢測(cè)結(jié)果分析 |
| 2.3 討論 |
| 3 防治草莓灰霉病的“吡唑醚菌酯+啶酰菌胺”組合物研發(fā) |
| 3.1 材料與方法 |
| 3.1.1 供試菌株 |
| 3.1.2 啶酰菌胺-吡唑醚菌酯對(duì)草莓灰霉病菌的室內(nèi)聯(lián)合毒力測(cè)定 |
| 3.1.3 啶酰菌胺-吡唑醚菌酯組合物對(duì)草莓灰霉病菌的田間防效測(cè)定 |
| 3.1.3.1 組合物水分散粒劑的制備 |
| 3.1.3.2 組合物防病田間試驗(yàn) |
| 3.2 試驗(yàn)結(jié)果 |
| 3.2.1 啶酰菌胺-吡唑醚菌酯對(duì)草莓灰霉病菌的協(xié)同作用 |
| 3.2.2 啶酰菌胺-吡唑醚菌酯組合物對(duì)草莓灰霉病的田間防效 |
| 3.3 結(jié)論與討論 |
| 4 全文總結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
（8）番茄青枯病生防菌JX-1的篩選及作用機(jī)制研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 縮略詞表 |
| 1 前言 |
| 1.1 番茄青枯病的研究進(jìn)展 |
| 1.1.1 茄科雷爾氏菌的分類(lèi) |
| 1.1.2 茄科雷爾氏菌的致病機(jī)理 |
| 1.1.3 番茄青枯病的防治 |
| 1.2 伯克氏菌研究現(xiàn)狀 |
| 1.3 GntR家族轉(zhuǎn)錄因子的相關(guān)研究 |
| 1.4 pks/nrps的相關(guān)研究 |
| 1.5 本研究的目的與意義 |
| 1.6 研究的技術(shù)路線 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 試驗(yàn)材料 |
| 2.1.2 主要試驗(yàn)試劑 |
| 2.1.3 培養(yǎng)基 |
| 2.1.4 主要試驗(yàn)儀器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 菌株的篩選 |
| 2.2.2 生防細(xì)菌的生理生化鑒定 |
| 2.2.3 細(xì)菌16S rDNA的克隆與分析 |
| 2.2.4 菌株JX-1 安全性及致病性測(cè)定 |
| 2.2.5 菌株JX-1 抑菌譜測(cè)定 |
| 2.2.6 菌株JX-1 對(duì)番茄青枯病的大田防治效果 |
| 2.2.7 菌株JX-1 基因組測(cè)序及其注釋 |
| 2.2.8 菌株JX-1 生防相關(guān)性狀的檢測(cè) |
| 2.2.9 影響菌株JX-1 生防功能突變體的篩選 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 生防細(xì)菌的分離與鑒定 |
| 3.1.1 生防細(xì)菌的分離 |
| 3.1.2 候選生防細(xì)菌的室內(nèi)生測(cè) |
| 3.1.3 菌株JX-1 的鑒定 |
| 3.2 菌株JX-1 安全性測(cè)定 |
| 3.3 菌株JX-1 抑菌譜測(cè)定 |
| 3.4 菌株JX-1 田間應(yīng)用效果測(cè)定 |
| 3.5 菌株JX-1 基因組特征及次生代謝產(chǎn)物預(yù)測(cè)分析 |
| 3.5.1 菌株JX-1 基因組特征 |
| 3.5.2 菌株JX-1 次生代謝物分析 |
| 3.6 菌株JX-1 拮抗特性檢測(cè) |
| 3.6.1 代謝分泌物及生物性能 |
| 3.6.2 抗生素相關(guān)基因檢測(cè) |
| 3.7 影響菌株JX-1 拮抗作用相關(guān)突變體的篩選 |
| 3.7.1 突變體篩選結(jié)果 |
| 3.7.2 野生型菌株JX-1 和突變體的生長(zhǎng)曲線 |
| 3.7.3 野生型菌株JX-1 及突變體的室內(nèi)防效 |
| 3.7.4 Tn5 側(cè)翼序列的獲得 |
| 3.7.5 Tn5 側(cè)翼序列測(cè)序結(jié)果與分析 |
| 3.7.6 PCR擴(kuò)增gnt R目的片段 |
| 3.7.7 互補(bǔ)載體構(gòu)建 |
| 3.7.8 互補(bǔ)菌株的獲得 |
| 3.7.9 互補(bǔ)菌株生物活性測(cè)定 |
| 4 討論與結(jié)論 |
| 4.1 討論 |
| 4.1.1 生防細(xì)菌的分離、篩選 |
| 4.1.2 生防菌株JX-1 的鑒定 |
| 4.1.3 菌株JX-1 的田間應(yīng)用效果 |
| 4.1.4 生防菌株JX-1 的抑菌機(jī)制 |
| 4.2 結(jié)論 |
| 4.3 創(chuàng)新點(diǎn) |
| 4.4 后續(xù)研究設(shè)想 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況 |
（9）生防菌混合發(fā)酵液對(duì)植物土傳病害防治、土壤性質(zhì)微生物區(qū)系和采后果實(shí)品質(zhì)的影響（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 縮寫(xiě)符號(hào) |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 植物土傳病害的危害 |
| 1.2 土傳病害的治理方法 |
| 1.2.1 生物防治土傳病害的優(yōu)點(diǎn)與不足 |
| 1.2.2 生防微生物混合防治土傳病害的研究現(xiàn)狀 |
| 1.2.3 生防微生物混合發(fā)酵工藝 |
| 1.3 生防菌防治土傳病害機(jī)理 |
| 1.4 土壤微生物多樣性 |
| 1.4.1 土壤微生物多樣性與土傳病害的關(guān)系 |
| 1.4.2 外來(lái)微生物對(duì)土壤微生物區(qū)系影響 |
| 1.5 果實(shí)采后品質(zhì) |
| 1.6 獼猴桃的采后生理 |
| 1.6.1 呼吸作用 |
| 1.6.2 品質(zhì)變化 |
| 1.6.3 激素變化 |
| 1.6.4 果實(shí)采后成熟過(guò)程中相關(guān)基因的調(diào)控 |
| 1.7 本研究的目的和意義 |
| 第二章 生防菌混合發(fā)酵工藝優(yōu)化及其發(fā)酵液對(duì)土傳病原菌的防效及機(jī)制 |
| 2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器 |
| 2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種 |
| 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 |
| 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 2.2.1 菌種的保藏與活化 |
| 2.2.2 對(duì)峙實(shí)驗(yàn) |
| 2.2.3 發(fā)酵液抑菌試驗(yàn) |
| 2.2.4 孢子萌發(fā)與菌絲生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) |
| 2.2.5 混合發(fā)酵工藝優(yōu)化 |
| 2.2.6 盆栽實(shí)驗(yàn) |
| 2.2.7 混合發(fā)酵液對(duì)黃瓜葉片膜電解質(zhì)外滲和光化學(xué)效率的影響 |
| 2.2.8 葉片抗病相關(guān)酶活測(cè)定 |
| 2.2.9 混合發(fā)酵液有效成分初探 |
| 2.2.10 數(shù)據(jù)整理和統(tǒng)計(jì) |
| 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.3.1 對(duì)峙實(shí)驗(yàn)測(cè)定生防菌對(duì)病原微生物的抑制效果 |
| 2.3.2 體外抑菌實(shí)驗(yàn)測(cè)定混合發(fā)酵液對(duì)病原菌尖孢鐮刀菌的抑制效果 |
| 2.3.3 混合發(fā)酵工藝優(yōu)化 |
| 2.3.4 不同接種比例混合發(fā)酵液對(duì)不同病原菌的抑制效果 |
| 2.3.5 盆栽實(shí)驗(yàn)測(cè)定混合發(fā)酵液防病效果 |
| 2.3.6 混合發(fā)酵液對(duì)黃瓜葉片膜電解質(zhì)外滲和光化學(xué)效率的影響 |
| 2.3.7 混合發(fā)酵液對(duì)抗病相關(guān)酶活的影響 |
| 2.3.8 HPLC法測(cè)定混合發(fā)酵液物質(zhì)變化 |
| 2.3.9 代謝譜測(cè)定混合發(fā)酵液的物質(zhì)變化 |
| 2.4 討論 |
| 第三章 生防菌混合發(fā)酵液對(duì)土壤理化生性狀及土壤微生物區(qū)系的影響 |
| 3.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器 |
| 3.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種 |
| 3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 |
| 3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 3.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 3.2.1 田間實(shí)驗(yàn) |
| 3.2.2 土壤理化性質(zhì)測(cè)定 |
| 3.2.3 土壤相關(guān)酶活測(cè)定 |
| 3.2.4 土壤微生物多樣性檢測(cè) |
| 3.2.5 統(tǒng)計(jì)方法 |
| 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 3.3.1 混合發(fā)酵液對(duì)土壤理化性質(zhì)與土壤酶活性的影響 |
| 3.3.2 混合發(fā)酵液發(fā)酵液對(duì)土壤真菌多樣性的影響 |
| 3.3.3 混合發(fā)酵液對(duì)土壤細(xì)菌多樣性的影響 |
| 3.4 討論 |
| 第四章 生防菌混合發(fā)酵液對(duì)田間植物病害的防治效果 |
| 4.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器 |
| 4.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種 |
| 4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 |
| 4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 4.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 4.2.1 實(shí)驗(yàn)地點(diǎn) |
| 4.2.2 混合發(fā)酵液的制備 |
| 4.2.3 黃瓜枯萎病田間實(shí)驗(yàn) |
| 4.2.4 番茄灰霉病田間實(shí)驗(yàn) |
| 4.2.5 獼猴桃潰瘍病生物防治效果評(píng)價(jià) |
| 4.2.6 光合效率和抗氧化酶活性 |
| 4.2.7 數(shù)據(jù)整理和統(tǒng)計(jì) |
| 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 4.3.1 田間實(shí)驗(yàn)測(cè)定混合發(fā)酵液對(duì)黃瓜枯萎病防病效果 |
| 4.3.2 混合發(fā)酵液對(duì)抗病相關(guān)酶活的影響 |
| 4.3.3 田間實(shí)驗(yàn)測(cè)定混合發(fā)酵液對(duì)番茄灰霉病的防病效果 |
| 4.3.4 混合發(fā)酵液獼猴桃潰瘍病的生物防治作用 |
| 4.3.5 混合發(fā)酵液對(duì)葉片的光合作用速率和抗氧化酶活性的影響 |
| 4.4 討論 |
| 第五章 混合發(fā)酵液對(duì)采后果實(shí)品質(zhì)和保鮮的效應(yīng)與機(jī)理 |
| 5.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器 |
| 5.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種 |
| 5.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 |
| 5.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 |
| 5.2 實(shí)驗(yàn)方法 |
| 5.2.1 實(shí)驗(yàn)地點(diǎn) |
| 5.2.2 混合發(fā)酵液的制備 |
| 5.2.3 實(shí)驗(yàn)方案 |
| 5.2.4 獼猴桃采后實(shí)驗(yàn) |
| 5.2.5 轉(zhuǎn)錄組分析 |
| 5.2.6 熒光定量PCR驗(yàn)證 |
| 5.2.7 代謝組學(xué)分析 |
| 5.2.8 統(tǒng)計(jì)分析 |
| 5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 5.3.1 混合發(fā)酵液對(duì)采后獼猴桃果實(shí)生理生化指標(biāo)的影響 |
| 5.3.2 混合發(fā)酵液對(duì)獼猴桃采后病害的影響 |
| 5.3.3 混合發(fā)酵液對(duì)獼猴桃果皮轉(zhuǎn)錄組的影響 |
| 5.3.4 RT-qPCR驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù) |
| 5.3.5 代謝譜測(cè)定混合發(fā)酵液對(duì)采后獼猴桃果肉代謝物的影響 |
| 5.4 討論 |
| 第六章 總論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 |
| 參與項(xiàng)目 |
| 附件 |
（10）黃瓜抗灰霉病育種研究進(jìn)展（論文提綱范文）
| 1 黃瓜灰霉病病原菌概況 |
| 1.1 病原菌 |
| 1.2 遺傳多樣性 |
| 1.3 發(fā)病條件及癥狀 |
| 2 灰霉病菌致病機(jī)理 |
| 2.1 侵入寄主表皮 |
| 2.2 殺死植物細(xì)胞 |
| 2.2.1 產(chǎn)生毒素 |
| 2.2.2 誘導(dǎo)細(xì)胞程序性死亡 |
| 2.2.3 分解寄主細(xì)胞 |
| 2.3 形成孢子 |
| 2.4 灰霉病菌致病過(guò)程的相關(guān)基因 |
| 2.4.1 與灰霉病菌發(fā)育有關(guān)的基因 |
| 2.4.2 灰霉病菌致病性相關(guān)基因 |
| 3 黃瓜抗灰霉病分子機(jī)制 |
| 3.1 PTI信號(hào)的產(chǎn)生 |
| 3.2 PTI信號(hào)的識(shí)別 |
| 3.3 PTI信號(hào)的傳導(dǎo) |
| 3.4 PTI信號(hào)激發(fā)的免疫反應(yīng) |
| 3.5 植物激素調(diào)節(jié) |
| 4 黃瓜抗灰霉病育種 |
| 4.1 灰霉病抗性鑒定 |
| 4.2 黃瓜抗病資源的評(píng)價(jià)和篩選 |
| 4.3 遺傳規(guī)律和分子標(biāo)記 |
| 4.4 抗病基因 |
| 5 展望 |
四、灰霉病菌對(duì)黃瓜番茄及其它植物的致病性初探（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]假茄科雷爾氏菌對(duì)瓜類(lèi)作物的致病性以及南瓜響應(yīng)病菌侵染的轉(zhuǎn)錄組和代謝組分析[D]. 何永林. 廣西大學(xué), 2021(12)
- [2]黃瓜靶斑病菌對(duì)吡唑醚菌酯的抗性監(jiān)測(cè)及兩種新型殺菌劑的抗性分子機(jī)制研究[D]. 李秀環(huán). 山東農(nóng)業(yè)大學(xué), 2021(01)
- [3]黨參灰霉病拮抗細(xì)菌的篩選及對(duì)黨參促生作用的研究[D]. 任怡璇. 西北師范大學(xué), 2021(12)
- [4]3株放線菌的抑菌活性及其對(duì)黃瓜枯萎病的防治效果[D]. 吳冰越. 揚(yáng)州大學(xué), 2021
- [5]多主棒孢SdhB亞基異核體突變對(duì)啶酰菌胺抗性的影響[D]. 閻昱韜. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 2021
- [6]復(fù)合生防菌對(duì)洋蔥根腐病害的防治與機(jī)理研究[D]. 張曉夢(mèng). 蘭州交通大學(xué), 2021(02)
- [7]草莓灰霉病菌（Botrytis cinerea）對(duì)五種殺菌劑的抗性檢測(cè)及增效組合物的篩選[D]. 冀俊. 浙江農(nóng)林大學(xué), 2021(07)
- [8]番茄青枯病生防菌JX-1的篩選及作用機(jī)制研究[D]. 許萌杏. 廣西大學(xué), 2020(07)
- [9]生防菌混合發(fā)酵液對(duì)植物土傳病害防治、土壤性質(zhì)微生物區(qū)系和采后果實(shí)品質(zhì)的影響[D]. 叢韞喆. 山東大學(xué), 2020(01)
- [10]黃瓜抗灰霉病育種研究進(jìn)展[J]. 戴卓男,苗晗,李寶聚,石延霞,薄凱亮,董邵云,顧興芳,張圣平. 中國(guó)蔬菜, 2020(07)
標(biāo)簽：灰霉病論文; 抗藥性論文; 基因合成論文; 土壤結(jié)構(gòu)論文; 土壤改良論文;