一、轉(zhuǎn)基因小麥商業(yè)化的現(xiàn)狀、問題、影響與發(fā)展趨勢（論文文獻(xiàn)綜述）
馮玉梅[1]（2021）在《TaAFP-Ba/b基因在水稻和小麥中的功能研究》文中指出TaAFPs是AtAFP的同源基因,作為ABA信號途徑的負(fù)調(diào)控因子參與胚的萌發(fā)和種子的休眠等。前期研究發(fā)現(xiàn),TaAFP-B的兩個等位基因TaAFP-Ba和TaAFP-Bb在5′UTR區(qū)域存在差異,其中TaAFP-Bb與TaAFP-Ba相比有4bp的缺失,此結(jié)構(gòu)差異影響了該基因轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)水平和m RNA的穩(wěn)定性。為了進(jìn)一步明確該基因在5′UTR的結(jié)構(gòu)差異對其功能影響的機理,本研究主要采用基因槍轉(zhuǎn)化法和農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法,對TaAFP-Ba/b基因5′UTR區(qū)域的差異片段TaAFP-Ba/b F、啟動子PTaAFP-Ba/b和編碼區(qū)TaAFP-Ba/b S的功能進(jìn)行了深入研究,結(jié)果如下:（1）在普通小麥開花后不同時期的種子中,TaAFP-B轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)量總是TaAFP-Ba基因型>TaAFP-Bb基因型。（2）對5′UTR區(qū)域的差異片段TaAFP-Ba/b F構(gòu)建瞬時表達(dá)載體,其td Tomato ER表達(dá)的熒光強度、GUS基因的表達(dá)量和GUS活性的趨勢均為p ITV1-TaAFP-Ba F>p ITV1-TaAFP-Bb F>p ITV1#1534,說明目的片段對標(biāo)記基因的轉(zhuǎn)錄翻譯產(chǎn)生了影響,且插入片段TaAFP-Ba F可增強基因的表達(dá),而缺失片段TaAFP-Bb F則會減弱基因的表達(dá)。（3）以轉(zhuǎn)基因PTaAFP-Ba/b-GUS水稻的根、莖、葉和蠟熟期種子為研究對象,經(jīng)組織特異性分析發(fā)現(xiàn),啟動子PTaAFP-Ba/b在各組織中都顯著表達(dá),可能是組成型啟動子。GUS活性定量分析表明,GUS活性在轉(zhuǎn)基因PTaAFP-Ba-GUS水稻中總是高于轉(zhuǎn)基因PTaAFP-Bb-GUS水稻,即PTaAFP-Ba的活性高于PTaAFP-Bb。說明TaAFP-B在5′UTR的插入序列影響了啟動子的活性。（4）經(jīng)過dd PCR技術(shù)鑒定,在TaAFP-Ba S、TaAFP-Bb S、TaAFP-Ba S-GFP和TaAFP-Bb S-GFP四種轉(zhuǎn)基因型水稻的幼苗中分別獲得了7、6、3和5個單拷貝株系,分別占各檢測總數(shù)的77.78%、66.67%、75%和55.56%;在各轉(zhuǎn)基因型的單拷貝株系中,TaAFP-B轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)量趨勢均為蠟熟期種子>根>莖>葉;在各組織中,TaAFP-B轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)量總是TaAFP-Ba S/-GFP<TaAFP-Bb S/-GFP;轉(zhuǎn)基因水稻幼葉中融合蛋白GFP的表達(dá)量是TaAFP-Ba S-GFP<TaAFP-Bb S-GFP;轉(zhuǎn)基因TaAFP-Ba S和TaAFP-Bb S水稻的GI值分別為58.47%和65.52%（P=0.0011）;轉(zhuǎn)基因TaAFP-Ba S-GFP和TaAFP-Bb S-GFP水稻的GI值分別為66.11%和69.08%,（P=0.0312）。（5）在轉(zhuǎn)基因TaAFP-Ba S和TaAFP-Bb S小麥中分別檢測到3和4個單拷貝株系,分別占各檢測總數(shù)的50%和44.4%;轉(zhuǎn)基因小麥中,TaAFP-B轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)量趨勢均為蠟熟期種子>根>莖>葉;在各組織中TaAFP-B轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)量總是TaAFP-Ba S<TaAFP-Bb S;轉(zhuǎn)基因TaAFP-Ba S和TaAFP-Bb S小麥的GI值分別為59.79%和42.58%（P=0.0007）。（6）在轉(zhuǎn)基因水稻和小麥中,TaAFP-B轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)量趨勢均為蠟熟期種子>根>莖>葉,且在各組織中TaAFP-Ba S/-GFP<TaAFP-Bb S/-GFP,此結(jié)果趨勢與普通小麥的結(jié)果相反。轉(zhuǎn)基因TaAFP-Ba S/-GFP水稻的GI值低于TaAFP-Bb S/-GFP,但是轉(zhuǎn)基因TaAFP-Ba S小麥的GI值高于TaAFP-Bb S,這可能是由于異源六倍體小麥中單拷貝基因的超表達(dá)導(dǎo)致了其表觀遺傳的沉默。
鄒婉儂[2]（2020）在《基于專利數(shù)據(jù)挖掘的全球生物技術(shù)育種技術(shù)及產(chǎn)業(yè)競爭態(tài)勢分析》文中認(rèn)為2020年,中央一號文件明確提出“加強農(nóng)業(yè)關(guān)鍵核心技術(shù)攻關(guān),部署一批重大科技項目,搶占科技制高點。加強農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研發(fā),大力實施種業(yè)自主創(chuàng)新工程?！鞭r(nóng)業(yè)生物技術(shù)被稱作為未來農(nóng)業(yè)革命性技術(shù),作為常規(guī)育種技術(shù)的重要補充已在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中起到了重要作用,已被農(nóng)業(yè)大國作為核心競爭力,成為制勝種業(yè)市場的新武器。專利信息分析是對專利文獻(xiàn)信息進(jìn)行組合、加工和分析,并結(jié)合統(tǒng)計學(xué)方法和技巧,使信息轉(zhuǎn)化為具有總攬全局及預(yù)測功能的專利競爭情報,可對行業(yè)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的各種發(fā)展趨勢、競爭態(tài)勢進(jìn)行綜合了解,為行業(yè)、地區(qū)及企業(yè)的戰(zhàn)略發(fā)展決策帶來有價值的參考?；诖?本文以技術(shù)創(chuàng)新理論和競爭情報理論為指導(dǎo),注重理論與實際相結(jié)合、宏觀與微觀相結(jié)合、定性研究與定量研究相結(jié)合。在明確世界與我國種業(yè)發(fā)展歷程及發(fā)展現(xiàn)狀的基礎(chǔ)上,通過科技創(chuàng)新指數(shù)等分析指標(biāo),綜合測算世界各國種業(yè)綜合競爭指數(shù),明晰我國種業(yè)在國際上的競爭地位;通過專利數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,從宏觀層面多角度分析全球農(nóng)業(yè)生物技術(shù)發(fā)展動態(tài)并運用專利組合分析等方法對專利數(shù)據(jù)進(jìn)行深入挖掘,測算主要國家農(nóng)業(yè)生物技術(shù)綜合競爭地位,對各國目標(biāo)市場及技術(shù)領(lǐng)域布局進(jìn)行診斷分析;針對熱點競爭領(lǐng)域進(jìn)行專利信息分析,重點梳理基因編輯技術(shù)及其發(fā)展路線,剖析其專利布局與競爭態(tài)勢;再從下游對轉(zhuǎn)基因技術(shù)和基因編輯技術(shù)產(chǎn)業(yè)化情況及競爭態(tài)勢進(jìn)行闡述,針對基因編輯具體產(chǎn)品從下游產(chǎn)品推出上游研發(fā)的知識產(chǎn)權(quán)保護(hù)策略;最后對相關(guān)問題與結(jié)論進(jìn)行討論,為我國農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的發(fā)展戰(zhàn)略的制定提供相關(guān)政策建議,并提出展望。本文得出結(jié)論主要有以下三個方面:（1）通過對當(dāng)前國際種業(yè)發(fā)展態(tài)勢分析來看,隨著經(jīng)濟全球化,市場一體化進(jìn)程的加快,實現(xiàn)了技術(shù)和資源的整合。中國的綜合競爭力指數(shù)排名世界第9位,我國種業(yè)產(chǎn)業(yè)化與市場化程度低,缺乏市場化研發(fā)導(dǎo)向及海外市場的投入是制約我國種業(yè)競爭力提升的重要因素,但也體現(xiàn)出未來我國種業(yè)競爭力提升的潛力巨大。（2）從我國農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研發(fā)態(tài)勢及競爭格局分析結(jié)果來看,全球農(nóng)業(yè)生物技術(shù)發(fā)展主要以美國、中國、日本為主,總體呈顯著增長的態(tài)勢,中國農(nóng)業(yè)生物技術(shù)已擠入世界前列,發(fā)展態(tài)勢迅猛,但仍為專利技術(shù)的輸入國。中國的農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研發(fā)單位以科研院校為主體,企業(yè)的創(chuàng)新能力不強,缺乏全球性專利布局,很大程度上影響了我國農(nóng)業(yè)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)競爭力。（3）從熱點農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研發(fā)及競爭態(tài)勢分析結(jié)果來看,全球轉(zhuǎn)基因技術(shù)研發(fā)呈現(xiàn)下降趨勢,中國的轉(zhuǎn)基因技術(shù)發(fā)展起步較晚但發(fā)展速度快。我國受政策影響,一定程度上阻礙了轉(zhuǎn)基因作物的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程。作為新興熱點領(lǐng)域,基因編輯技術(shù)體系的原始專利均在美國,近年來中國的專利申請增長速度已經(jīng)超過美國,但專利整體質(zhì)量和經(jīng)濟價值相對較低。與美國相比,我國研發(fā)最終成果還停留在模式作物創(chuàng)制,沒有有機整合形成完整化的產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系。
張秀杰[3]（2020）在《轉(zhuǎn)基因水稻檢測方法與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究》文中研究表明轉(zhuǎn)基因水稻的研發(fā)技術(shù)日益成熟,越來越多的轉(zhuǎn)化體獲得不同國家的安全許可或進(jìn)入田間試驗,但作為重要主糧,其產(chǎn)業(yè)化及安全性問題引起社會廣泛關(guān)注,近年來,有關(guān)轉(zhuǎn)基因水稻的突發(fā)事件時有發(fā)生,引起了不必要的貿(mào)易摩擦和民眾恐慌,國內(nèi)外都高度重視轉(zhuǎn)基因水稻的安全評價與監(jiān)管檢測工作。因此,加強轉(zhuǎn)基因水稻檢測方法與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研究,提升監(jiān)管能力水平十分必要。本研究首先針對基于硅基質(zhì)膜柱的基因組DNA提取方法進(jìn)行優(yōu)化,開發(fā)了新型植物種子基因組DNA提取試劑盒,同時對水稻種子研磨粒度與基因組DNA提取質(zhì)量之間關(guān)系進(jìn)行分析,提高基因組DNA質(zhì)量和得率,為下一步PCR檢測提供基礎(chǔ);其次對已發(fā)現(xiàn)的和本研究開發(fā)的水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因,以及反應(yīng)體系與程序進(jìn)行優(yōu)化篩選、深入研究,研制了水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因檢測方法標(biāo)準(zhǔn);再次對轉(zhuǎn)基因水稻的篩選元件進(jìn)行統(tǒng)計分析,建立了轉(zhuǎn)基因水稻篩查檢測方法,構(gòu)建了檢測用陽性標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒;最后成功研制了轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻克螟稻基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),為檢測提供物質(zhì)基礎(chǔ)。這些結(jié)果為我國轉(zhuǎn)基因水稻安全評價與管理、標(biāo)識制度的實施,以及監(jiān)管檢測提供了數(shù)據(jù)基礎(chǔ)和技術(shù)支撐。本研究我們?nèi)〉玫闹饕晒缦?1.研發(fā)了一種新型植物種子DNA提取試劑盒?；诤怂岬腜CR技術(shù)是轉(zhuǎn)基因檢測最穩(wěn)定、可靠、高效的方法,而獲取高質(zhì)量的基因組DNA是保證檢測結(jié)果的重要基礎(chǔ),各生物公司也相繼開發(fā)了多種DNA提取的試劑盒,但在實際應(yīng)用中,存在提取質(zhì)量和得率不高以及成本較高的問題,本研究基于硅基質(zhì)膜柱的方法,通過對過柱緩沖液的pH值和鹽濃度的優(yōu)化,研發(fā)一種植物種子DNA提取試劑盒,與市售業(yè)內(nèi)評價較高的試劑盒相比,在基因組DNA提取質(zhì)量和得率上都有顯著提高,并針對水稻種子研磨粒度對基因組DNA提取效率開展研究,為下一步PCR檢測提供了基礎(chǔ);2.研制了轉(zhuǎn)基因水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因檢測的國家標(biāo)準(zhǔn)。國內(nèi)外相繼建立了多種轉(zhuǎn)基因水稻轉(zhuǎn)化體特異性檢測方法,但由于不同內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因的使用,影響了檢測結(jié)果間的可比性。本研究以國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)、文獻(xiàn)中已發(fā)表的水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因,以及通過本研究篩選的新水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因為對象,設(shè)計引物及探針,比較不同內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因在不同水稻品種中的差異性和檢測的靈敏度,進(jìn)行深入的分析和比較,篩選出具有較好的種間特異性、種內(nèi)一致性、拷貝數(shù)穩(wěn)定,以及靈敏度較高的水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因,并對其PCR擴增檢測相關(guān)的反應(yīng)程序和反應(yīng)體系進(jìn)行優(yōu)化,建立標(biāo)準(zhǔn)化水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因的普通PCR及實時熒光PCR定性檢測方法,進(jìn)一步為我國轉(zhuǎn)基因水稻安全管理、標(biāo)識制度的實施,以及轉(zhuǎn)基因檢測標(biāo)準(zhǔn)化提供技術(shù)支撐;3.建立了轉(zhuǎn)基因水稻篩選檢測方法,構(gòu)建了陽性標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒。在轉(zhuǎn)基因水稻日常檢測中,各檢測機構(gòu)沒有確定統(tǒng)一的檢測參數(shù),時而會出現(xiàn)相同樣品在不同檢測機構(gòu)之間檢測結(jié)果不同的現(xiàn)象,給客戶及政府執(zhí)法帶來了不確定性,也給檢測機構(gòu)帶來了不必要的糾紛。本研究收集、統(tǒng)計了國內(nèi)外報導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因水稻外源元件,并分析這些元件的使用頻率及覆蓋率,進(jìn)一步建立了轉(zhuǎn)基因水稻的篩查檢測方法,同時構(gòu)建了篩查與特定轉(zhuǎn)化體檢測用陽性標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒,為轉(zhuǎn)基因水稻的監(jiān)管檢測提供了統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn);4.研制了轉(zhuǎn)基因水稻克螟稻基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻克螟稻在我國已進(jìn)入生產(chǎn)性試驗研究階段,國內(nèi)外都非常關(guān)注,其檢測方法及檢測標(biāo)準(zhǔn)已相繼發(fā)布,但至今尚未有檢測用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或標(biāo)準(zhǔn)品。本研究以克螟稻為基礎(chǔ)材料,建立了克螟稻數(shù)字PCR檢測方法,提取其基因組DNA,通過均勻性和穩(wěn)定性測試,以數(shù)字PCR方法通過8家實驗室聯(lián)合定值,成功研制了克螟稻基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),填補了國內(nèi)空白,也為水稻的監(jiān)管檢測提供重要的物質(zhì)基礎(chǔ)。
宋亞亞[4]（2020）在《耐草甘膦基因aroAA1501的拆分及功能重建》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理自轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化應(yīng)用以來,耐除草劑一直是轉(zhuǎn)基因作物的主要性狀,2019年耐除草劑轉(zhuǎn)基因作物的種植面積占全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積的46%。轉(zhuǎn)基因耐除草劑作物的大面積種植帶來了巨大的經(jīng)濟和社會效益,但草甘膦抗性雜草的出現(xiàn)也引起了人們對其產(chǎn)生的環(huán)境風(fēng)險的廣泛關(guān)注?；虿鸱旨夹g(shù)培育的轉(zhuǎn)基因作物能夠很好的避免目標(biāo)性狀逃逸到環(huán)境中所帶來的影響,是防控基因飄流和防止耐草甘膦雜草產(chǎn)生的有效措施。為了利用基因拆分技術(shù)培育aroAA1501基因耐草甘膦水稻,本研究通過結(jié)構(gòu)分析法篩選基因的可拆分位點,并通過功能互補試驗獲得基因的可拆分位點,通過原核系統(tǒng)分析比較不同位點拆分后,在intein介導(dǎo)下重新組裝蛋白的草甘膦耐受性及酶動力參數(shù),獲得適宜的可拆分位點,研究結(jié)果為利用基因拆分技術(shù)培育耐草甘膦的轉(zhuǎn)基因水稻提供技術(shù)支撐,同時為利用基因拆分技術(shù)防控基因飄流、預(yù)防耐草甘膦雜草產(chǎn)生提供技術(shù)儲備。具體研究結(jié)果如下:1)生物信息學(xué)分析預(yù)測aroAA1501基因編碼的EPSPS蛋白的一級結(jié)構(gòu)、二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu),根據(jù)蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測出了13個可能拆分的位點。利用PCR的方法將aroAA1501拆分成N端（An）和C端（Ac）兩部分,并通過融合PCR法分別與Ssp DnaE intein的N端（In）和C端（Ic）結(jié)合形成融合基因An-In和Ic-Ac。2)以pETDuet-1載體為基礎(chǔ)載體,構(gòu)建單獨An-In或Ic-Ac、以及同時An-In和Ic-Ac的原核表達(dá)載體,并導(dǎo)入aroA缺陷型菌株ER2799進(jìn)行功能互補試驗。發(fā)現(xiàn)只有同時含有140N-In和Ic-141C、224N-In和Ic-225C、230N-In和Ic-231C以及完整aroAA1501的ER2799重組菌株能在含有20 mM草甘膦MOPs限制性培養(yǎng)生長。RT-PCR結(jié)果顯示在同時含有140N-In和Ic-141C、224N-In和Ic-225C、230N-In和Ic-231C的ER2799重組菌株中不能擴增到完整的aroAA1501基因。上述結(jié)果表明,aroAA1501基因在140/141、224/225和230/231位點拆分后,在intein介導(dǎo)下能重新組裝成完整有功能蛋白,賦予重組ER2799菌株耐受草甘膦的能力。3)將含有不同質(zhì)粒的ER2799重組菌株接種到不同草甘膦濃度的MOPS培養(yǎng)基上,進(jìn)行草甘膦耐受性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)aroAA1501基因在不同位點拆分后重新組裝成的功能蛋白對草甘膦的耐受性存在差異,其中140/141位點拆分后重新組裝蛋白能耐受20 mM的草甘膦,低于完整蛋白的草甘膦耐受性;224/225位點拆分后重新組裝蛋白與完整蛋白對草甘膦的耐受性基本一致,能耐受40 mM的草甘膦,而230/231位點拆分后重新組裝蛋白耐耐受120 mM的草甘膦,比完整蛋白對草甘膦的耐受性提高了2倍。4)熒光定量PCR分析了不同ER2799重組菌株中外源基因的表達(dá)情況。發(fā)現(xiàn)融合基因140N-In、224N-In和230N-In的表達(dá)量高于完整aroAA1501基因;而融合基因Ic-141C、Ic-225C和Ic-231C的表達(dá)量低于aroAA1501基因,其中Ic-231C的表達(dá)量最低,說明不同ER2799重組菌株對草甘膦的耐受性差異不是由于基因表達(dá)差異造成的。5)ELASA酶活測定結(jié)果表明,在140/141和224/225處拆分后,其重新組裝成的功能蛋白的酶活與完整蛋白的基本一致;在230/231處拆分后,其重新組裝成的功能蛋白的酶活比完整蛋白的要高,達(dá)到0.05差異顯著水平。6)分析了來源于不同ER2799重組菌株中EPSP合酶的酶動力相關(guān)參數(shù),發(fā)現(xiàn)230/231位點拆分后重新組裝成的EPSPS的酶活為17.861±0.267,IC50約為10880,Km值為56.8,Ki值為29.4;140/141位點拆分后重新組裝成的EPSPS酶活為5.33±0.533,IC50約為2700,Km值為82.4,Ki值為48.6;224/225位點拆分后重新組裝成的EPSPS酶活為9.27±0.133,IC50約為4770,Km值為125.7,Ki值為79;完整aroAA1501蛋白的酶活為9.29±0.133,IC50約為4600,Km值為122.28,Ki值為85。上述結(jié)果表明230/231位點拆分后重新組裝成的EPSPS的酶活最高,與底物和草甘膦的的結(jié)合能力最強。7)以DT-2300為基礎(chǔ)載體,構(gòu)建了同時含有140N-In和Ic-141C、224N-In和Ic-225C、230N-In和Ic-231C植物表達(dá)載體,通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因水稻,獲得含有完整aro AA1501基因、同時含有140N-In和Ic-141C、224N-In和Ic-225C、230N-In和Ic-231C的轉(zhuǎn)基因植株分別為26、24、21和20株。8)對轉(zhuǎn)基因水稻苗進(jìn)行草甘膦耐受性分析,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)完整aro AA1501基因以及230N-In和Ic-231C的轉(zhuǎn)基因水稻苗可以耐受2000 ppm草甘膦
欒穎[5]（2019）在《轉(zhuǎn)cry1Ab-Ma基因抗蟲玉米對根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和功能多樣性影響的研究》文中研究說明轉(zhuǎn)基因（Genetically Modified,GM）作物自從1996年問世以來,全球商業(yè)化種植的面積在不斷地增加,人們在收獲其帶來的巨大經(jīng)濟收益的同時,也對其安全性問題產(chǎn)生了廣泛的關(guān)注。轉(zhuǎn)基因作物的種植會對當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)多樣性存在潛在的影響,特別是作物的根系分泌物可能會影響土壤功能酶的活性、微生物功能的多樣性以及土壤中細(xì)菌群落的結(jié)構(gòu)等。土壤生態(tài)系統(tǒng)是土壤生物（包括種植的植物以及土壤內(nèi)的動物、微生物）與其周圍環(huán)境構(gòu)成的一個自然綜合體,生物與土壤之間彼此依賴的同時又發(fā)生各種互作,土壤的微生物多樣性可以用來表現(xiàn)土壤生態(tài)系統(tǒng)的健康狀態(tài),微生物的多樣性能夠影響與之相關(guān)的植物多樣性。本研究以轉(zhuǎn)cry1Ab-Ma基因抗蟲玉米CM8101（CM）及其對應(yīng)的非轉(zhuǎn)基因受體玉米鄭58（CMCK）為試驗材料。兩種材料均由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供,試驗場地位于吉林長春的環(huán)境安全研究試驗圃場。本研究分別在2017年和2018年玉米的苗期、花期、成熟期三個生長時期采集了玉米的根際土壤,用于研究轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101的長期種植對土壤的理化性質(zhì)、相關(guān)功能酶的活性、微生物群落的功能多樣性和細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響。主要研究結(jié)果如下:1.轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101對土壤理化性質(zhì)和功能酶活性的影響。本文研究了含水量和pH值兩個基本的土壤理化性質(zhì)指標(biāo),測定了土壤脲酶、磷酸酶和過氧化氫酶三個功能酶的活性。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101和非轉(zhuǎn)基因玉米鄭58在連續(xù)兩年中三個生長時期的土壤含水量、pH值、脲酶、磷酸酶和過氧化氫酶三種功能酶活性均無顯著性差異,這表明轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101的長期種植不會顯著性影響土壤的主要理化性質(zhì)和功能酶活性。2.轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101對根際土壤微生物群落功能多樣性的影響。本文利用Biolog ECO板測定了轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101和非轉(zhuǎn)基因玉米鄭58根際土壤微生物群落的功能多樣性,將Biolog ECO板在25℃的培養(yǎng)箱中暗育7 d,其間每隔24 h在同一時間下用酶標(biāo)儀測定平板的吸光值,結(jié)果表明兩年中轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101與非轉(zhuǎn)基因玉米鄭58的根際土壤微生物碳源利用率、多樣性指數(shù)以及整體代謝活性均無顯著性差異,進(jìn)一步表明轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101種植兩年不會顯著性地影響到根際土壤微生物群落的功能多樣性。3.轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101對根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響。本文通過16S rRNA擴增子測序比較了轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101和非轉(zhuǎn)基因玉米鄭58根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu),研究結(jié)果表明,兩年中轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101與非轉(zhuǎn)基因玉米鄭58的根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)和細(xì)菌群落多樣性均沒有顯著性差異,從而表明根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)不會受轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101種植的影響。綜上所述,通過與非轉(zhuǎn)基因玉米鄭58的比較,轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101的長期種植不會對根際土壤的理化性質(zhì)、功能酶活性、微生物群落功能多樣性和細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)產(chǎn)生顯著性影響。本研究的結(jié)果增加了人們對轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101安全性的認(rèn)識,為該品種今后的商業(yè)化種植提供了可靠的理論依據(jù)。
逯凱歆[6]（2019）在《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)發(fā)展應(yīng)用的倫理問題研究》文中認(rèn)為農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的發(fā)展歷經(jīng)傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)時期的成形階段、初步發(fā)展階段到現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的騰飛時期,生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有越來越重要的作用。傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)時期,生物技術(shù)的應(yīng)用始終以自然規(guī)律為客觀指導(dǎo),遵循人與自然和諧的生態(tài)倫理觀,通過人工栽培與選擇培育出更適于自然環(huán)境的作物。隨著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實踐活動的不斷深入,科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展,現(xiàn)代農(nóng)業(yè)開始依賴技術(shù)、機械以及大量的資源消耗,人類由依附、順從自然轉(zhuǎn)變?yōu)閷ψ匀坏目刂坪婉{馭,使傳統(tǒng)自然倫理觀面臨解構(gòu)、重構(gòu)的危機。人類對自然的不斷索取造成環(huán)境污染、資源匱乏。為了減少人與自然的異化程度,近年來以轉(zhuǎn)基因技術(shù)為核心的現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生物技術(shù)系統(tǒng)受到人們的重視并得以迅猛發(fā)展。轉(zhuǎn)基因技術(shù)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域的應(yīng)用,提升了農(nóng)作物的產(chǎn)出率,有效解決了糧食短缺問題,同時還提高了作物的品質(zhì),滿足了現(xiàn)代人的不同需求。但是,任何科學(xué)技術(shù)都是一把“雙刃劍”,轉(zhuǎn)基因技術(shù)就因其本身的技術(shù)特性,給社會、生態(tài)、人類自身帶來了許多負(fù)面影響。近年來,轉(zhuǎn)基因作物的安全問題日益引起人們的關(guān)注與爭論,農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用對生態(tài)系統(tǒng)和人類社會造成的危害使其從經(jīng)濟問題、社會問題上升到倫理問題。面對農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的生態(tài)倫理、生命倫理、經(jīng)濟倫理困境,在遵循倫理原則的基礎(chǔ)上,從農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因技術(shù)倫理困境產(chǎn)生的原因出發(fā),提出具有建設(shè)性、有效性的解決路徑,使公眾更理性、更科學(xué)的的看待轉(zhuǎn)基因技術(shù),也使農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)向“善”發(fā)展,為人類社會生態(tài)系統(tǒng)提供更加合理的技術(shù)支持。因此,正確認(rèn)識轉(zhuǎn)基因技術(shù)及其帶來的倫理困境成為包含理論與實踐雙重價值的課題。
潘玉[7]（2019）在《溝通“不確定性”：轉(zhuǎn)基因議題的知識建構(gòu)研究》文中認(rèn)為2000年以來,轉(zhuǎn)基因議題逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)槿蛐缘纳鐣沧h題,引發(fā)廣泛關(guān)注。轉(zhuǎn)基因技術(shù)與應(yīng)用迅速發(fā)展的同時,社會各方對轉(zhuǎn)基因的爭論從未終止,科學(xué)的“不確定性”特征突顯。相對于其他公共議題的知識構(gòu)建,科學(xué)議題有其特殊性:一方面,由于科學(xué)議題造成的風(fēng)險與“不確定性”,媒介場域中的各利益相關(guān)者都可能會傳達(dá)有效信息之外的信息,造成科學(xué)認(rèn)知的混亂;另一方面,社會公眾由于知識結(jié)構(gòu)與個人經(jīng)歷的局限,很難直接對某一科學(xué)知識進(jìn)行全面、深入地了解。因而,公眾對于轉(zhuǎn)基因議題的科學(xué)認(rèn)知與理解往往更容易受到媒介場域的影響,媒體在轉(zhuǎn)基因議題的知識建構(gòu)中承擔(dān)重要作用。由此,本研究通過對轉(zhuǎn)基因這一科學(xué)爭議中的“不確定性”進(jìn)行綜合而深入的考察,幫助社會各方更好地理解科學(xué)知識內(nèi)涵,參與科學(xué)決策,從而緩解當(dāng)前日趨矛盾的科學(xué)爭議。媒體通過轉(zhuǎn)基因議題的知識表征,可以更好地發(fā)揮其社會功用,為科學(xué)的“不確定性”溝通提供知識對話空間與傳播平臺,在一定程度上化解與規(guī)避轉(zhuǎn)基因所引發(fā)的科學(xué)風(fēng)險,從而減緩社會公共危機。同時,轉(zhuǎn)基因議題的知識建構(gòu)過程反映出科學(xué)議題的知識表征特征、實踐規(guī)律與協(xié)商機制的轉(zhuǎn)向,研究試圖從理論層面完善與擴展科學(xué)知識傳播內(nèi)涵與理論框架。本研究較全面地論述了媒介與科學(xué)知識建構(gòu)的關(guān)聯(lián)性研究,搭建了媒介建構(gòu)科學(xué)知識、引導(dǎo)科學(xué)理性的闡釋框架,體現(xiàn)了科學(xué)傳播領(lǐng)域的現(xiàn)實關(guān)切與理論關(guān)照,賦予該研究領(lǐng)域一定的創(chuàng)新性。本研究基于知識社會學(xué)視角,圍繞科學(xué)的“不確定性”這一核心話題,就轉(zhuǎn)基因議題的“不確定”語境及其要素研究、“不確定性”呈現(xiàn)內(nèi)容研究、“不確定性”溝通意義研究、“不確定性”管理研究邏輯,探究轉(zhuǎn)基因議題的知識建構(gòu)過程——轉(zhuǎn)基因議題的知識表征、知識實踐、知識爭論與知識共享。研究分為四大部分:第一,轉(zhuǎn)基因議題的“不確定性”語境考察?！安淮_定”語境有哪些要素?呈現(xiàn)出怎樣的語境特征?第二,轉(zhuǎn)基因議題的話語變遷與知識實踐研究?；凇安淮_定性”語境特征,從歷時性維度,研究選擇中美媒體關(guān)于轉(zhuǎn)基因議題的媒體報道為研究文本進(jìn)行梳理與總結(jié),進(jìn)而探討不同社會語境下轉(zhuǎn)基因議題的媒體“注意周期”與空間互動特征;從共時性維度,研究就議題內(nèi)容、消息來源、話語立場與知識屬性四個方面考察轉(zhuǎn)基因議題的媒體框架與知識實踐過程。第三,轉(zhuǎn)基因議題的知識爭論研究。依據(jù)反思沖突、化解沖突、超越?jīng)_突的研究邏輯,探討不同相關(guān)利益主體如何圍繞科學(xué)爭議的“不確定性”展開知識的協(xié)商與對話?媒體在其中扮演什么樣的角色?采用哪些話語修辭策略?科學(xué)與社會之間如何達(dá)成知識對話與共識?第四,轉(zhuǎn)基因議題的知識共享與“不確定性”管理探究。如何反思風(fēng)險社會的轉(zhuǎn)基因科學(xué)知識的生產(chǎn)與傳播?怎樣完善與提升社會公眾對轉(zhuǎn)基因科學(xué)知識的理解?進(jìn)而對我們反思科學(xué)知識傳播的理念與模式有何啟示?研究試圖通過對上述研究問題的探討,考察轉(zhuǎn)基因議題的話語實踐,并基于更宏觀地社會語境,思考科學(xué)與社會之間的互動關(guān)系與影響。研究以轉(zhuǎn)基因這一爭議性科學(xué)議題為研究對象,選擇2000-2018年期間的媒體報道本文進(jìn)行話語分析、對比分析與個案探究。通過闡釋轉(zhuǎn)基因議題的話語建構(gòu)特征反映科學(xué)議題的知識建構(gòu)過程。轉(zhuǎn)基因議題的知識實踐最終目的是為了使社會各相關(guān)利益主體更好地理解科學(xué)知識,并在科學(xué)話語的互動協(xié)商中將專業(yè)的科學(xué)知識進(jìn)行整合,形成日?；?、已被社會接受的“公共知識”,進(jìn)而參與到科學(xué)知識的再生產(chǎn)與“不確定性”管理過程中。因此,在一個日益多元化社會中,不同文化、價值觀之間的爭議與沖突的釋放與調(diào)試需要科學(xué)的對話與理解,完善與提升社會公眾的科學(xué)素養(yǎng)以加強科學(xué)知識理解,搭建基于科學(xué)議題的“知識聯(lián)盟”可實現(xiàn)轉(zhuǎn)基因這一爭議性科學(xué)議題傳播的知識共享與理解,探索和推動多樣化社會討論與科學(xué)對話方式的形成,以消除知識間的差異與不對等,管理爭議性知識建構(gòu)過程中的科學(xué)“不確定性”,進(jìn)而助力科學(xué)決策的制定與完善。
胡貽椿,卓勤,楊曉光[8]（2019）在《轉(zhuǎn)基因食品的現(xiàn)狀與發(fā)展》文中研究表明本文介紹了國內(nèi)外轉(zhuǎn)基因食品分類與特點、全球轉(zhuǎn)基因食品的研發(fā)現(xiàn)狀、我國轉(zhuǎn)基因食品的研究與發(fā)展、30年來轉(zhuǎn)基因食品研發(fā)的重大成果及轉(zhuǎn)基因食品安全性評價等,并對轉(zhuǎn)基因食品的發(fā)展趨勢進(jìn)行了展望。
付健美[9]（2018）在《通過基因差異表達(dá)及蛋白互作研究抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻在不同環(huán)境條件下的非預(yù)期效應(yīng)》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理限制轉(zhuǎn)基因水稻商業(yè)化種植的一個重要因素是其環(huán)境安全問題,其中轉(zhuǎn)基因水稻逃逸出農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)后,能否在自然生態(tài)系統(tǒng)中持續(xù)存在下去甚至進(jìn)一步擴散,是轉(zhuǎn)基因水稻商業(yè)化種植必須解決的環(huán)境安全問題之一?？瓜x轉(zhuǎn)基因水稻在農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中的適合度及轉(zhuǎn)錄組水平上的基因差異表達(dá)已有較多研究和報道,但是對其在自然生態(tài)系統(tǒng)中的適合度及其基因差異表達(dá)、蛋白互作尚未見報道。本研究以商業(yè)化潛力較大的轉(zhuǎn)cry1Ab/c水稻華恢1號（HH1）、轉(zhuǎn)cry1 C*/bar基因水稻TIC-19及其親本水稻明恢63（MH63）為材料,模擬自然生態(tài)系統(tǒng)中的雜草競爭、荒地土壤、鹽堿土壤條件:（1）研究了其在上述不同種植條件的適合度;（2）利用組學(xué)技術(shù)研究轉(zhuǎn)cry1C*/bar基因水稻T1C-19在雜草競爭和荒地土壤條件下的基因差異表達(dá);（3）探索了 HH1表達(dá)的外源蛋白Cry1Ab/c與水稻內(nèi)源蛋白的相互作用、外源Cry1Ab/c蛋白的細(xì)胞膜定位及其與水稻內(nèi)源膜蛋白的相互作用,以及外源Cry1Ab/c蛋白與水稻開花蛋白的互作。本研究結(jié)果可為抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號、TIC-19的商品化種植提供環(huán)境安全方面的科學(xué)依據(jù)。具體結(jié)果如下:1.模擬不同自然條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號和T1C-19的適合度本研究以抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻HH1、T1C-19為研究材料,模擬了其在不同自然條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻HH1和T1C-19的株高、分蘗數(shù)、地上干生物量等營養(yǎng)生長指標(biāo)和單株飽粒數(shù)、單株飽粒重等生殖指標(biāo)以及外源Bt蛋白的表達(dá)量:在模擬農(nóng)田土壤和鹽堿土壤條件下,鹽堿土壤條件的2個外源Bt蛋白的表達(dá)量均較農(nóng)田土壤條件更低。對于轉(zhuǎn)基因水稻HH1,相同土壤條件下的分蘗數(shù)以及生物量等營養(yǎng)生長指標(biāo)和單株飽粒數(shù)、單株飽粒重等生殖指標(biāo)均顯著低于親本水稻MH63,呈現(xiàn)現(xiàn)出顯著的適合度代價,同時這種適合度代價在鹽堿土壤條件更為明顯。對于轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19,其在農(nóng)田土壤條件下的株高、分蘗數(shù)以及生物量等營養(yǎng)生長指標(biāo)和單株飽粒數(shù)、單株飽粒重等生殖生長指標(biāo)均顯著低于親本水稻MH63;鹽堿土壤條件下,T1C-19僅分蘗數(shù)及生物量顯著低于親本水稻MH63,其余營養(yǎng)生長指標(biāo)與親本水稻MH63沒有顯著差異,但是單株飽粒數(shù)、單株飽粒重等生殖生長指標(biāo)顯著高于親本水稻MH63。另外,在農(nóng)田土壤條件和鹽堿土壤條件下,HH1較MH63的抽穗期平均延遲了12d和25d,T1C-19與MH63的抽穗期相似。在模擬無雜草競爭的荒地土壤、雜草競爭的農(nóng)田土壤和雜草競爭的荒地土壤3種脅迫種植條件下,轉(zhuǎn)基因水稻HH1、T1C-19的外源Bt蛋白的表達(dá)量顯著低于無雜草競爭的農(nóng)田土壤條件。對于HH1,在無雜草競爭的農(nóng)田和荒地土壤條件下,除株高外,分蘗數(shù)、葉面積、葉SPAD值以及生物量等營養(yǎng)生長指標(biāo)和單株飽粒數(shù)、單株飽粒重等生殖指標(biāo)均顯著低于親本水稻MH63,呈現(xiàn)出顯著適合度成本。在雜草競爭的農(nóng)田和荒地土壤條件下,HH1的株高、分蘗數(shù)、生物量等營養(yǎng)生長指標(biāo)與MH63沒有顯著差異,但單株飽粒數(shù)、單株飽粒重以及結(jié)實率顯著高于親本水稻MH63。對于T1C-19,在無雜草競爭的農(nóng)田和荒地土壤條件下,分蘗數(shù)、葉面積、葉SPAD值以及生物量等營養(yǎng)生長指標(biāo)和單株飽粒數(shù)、單株飽粒重等生殖能力均顯著低于親本水稻MH63。然而在雜草競爭的農(nóng)田和荒地土壤條件下,T1C-19的株高、分蘗數(shù)、地上部干生物量等營養(yǎng)生長指標(biāo)及單株飽粒數(shù)、單株飽粒重以及結(jié)實率均與親本MH63水稻沒有顯著差異。2.雜草競爭和荒地土壤種植條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19的基因差異表達(dá)以轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19及其親本水稻MH63為研究材料,在模擬無雜草競爭的農(nóng)田和荒地土壤和雜草競爭的農(nóng)田和荒地土壤4種種植條件下,通過測定水稻的轉(zhuǎn)錄組和蛋白組,研究了其基因差異表達(dá):轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果表明:4種種植條件下,與MH63相比,T1C-19總計有3786個差異基因,其中150個為共有差異基因,占整個水稻轉(zhuǎn)錄組的0.4%,分析這些共有差異基因由外源基因插入引起。另外對于T1C-19和MH63,與無雜草競爭的農(nóng)田土壤（對照）相比,無雜草競爭的荒地土壤條件的差異基因數(shù)量分別為1084個和1234個,雜草競爭的農(nóng)田土壤條件的差異基因數(shù)量為963個和1226個,雜草競爭的荒地土壤條件的差異基因數(shù)量為1053個和1505個,總計有2743和2200個,占水稻整個轉(zhuǎn)錄組的8.50%和6.86%,該結(jié)果表明種植條件對水稻的基因表達(dá)有顯著影響,且顯著高于外源基因插入對水稻的基因表達(dá)影響。上述與外源基因插入相關(guān)的150個共有差異基因可以顯著富集到植物的光合作用（Lhb1、Lhcb2、Lhcb3和Lhcb5）、光反應(yīng)的節(jié)律變化（FKF1、PRR）、植物細(xì)胞內(nèi)吞作用及植物細(xì)胞凋亡信號通路中（HSP70）。采用qPCR技術(shù)驗證了顯著富集在這4條通路中的7個共有差異基因在T1C-19和MH63中的mRNA表達(dá)量發(fā)現(xiàn),在上述4種種植條件下T1C-19均較MH63顯著下調(diào),與轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果一致。采用雙分子熒光互補技術(shù)證實了外源Cry1C*蛋白可與該4條通路上的光合天線蛋白Lhb1等6個共有差異基因表達(dá)的內(nèi)源蛋白互作。另外,盡管轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19與親本水稻MH63在3種不同脅迫種植條件下的差異表達(dá)基因數(shù)目和表達(dá)量均有一些差異,卻能顯著富集到相似的功能通路中,推測外源cry1C*/bar基因插入可能并不會顯著改變轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19對脅迫種植條件的適應(yīng)性。蛋白組測序結(jié)果顯示:4種種植條件下,與MH63相比,T1C-19總計有2177個差異蛋白,其中121個為共有差異蛋白,占整個水稻蛋白組的1.7%,分析這些共有差異蛋白由外源基因插入引起。對于T1C-19和MH63,與無雜草競爭的農(nóng)田土壤條件相比,無雜草競爭的荒地土壤條件的差異蛋白數(shù)量分別為411個和300個,雜草競爭的農(nóng)田土壤條件的差異蛋白數(shù)量為662個和430個,雜草競爭和荒地土壤復(fù)合條件下的差異蛋白數(shù)量為309個和375個,總計有1028個和839個,占水稻整個蛋白組的15.52%和11.87%,該結(jié)果表明種植條件對水稻內(nèi)源蛋白的表達(dá)有顯著影響,且遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于外源基因?qū)λ緝?nèi)源蛋白表達(dá)的影響。對這些共有的差異表達(dá)蛋白在生物學(xué)功能分類上進(jìn)行KEGG通路分析,結(jié)果顯示:T1C-19與MH63相比,121個差異表達(dá)蛋白僅顯著富集到葉綠體的核糖體參與的信號通路中。另外,盡管轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19與親本水稻MH63在3種不同脅迫種植條件下的差異表達(dá)蛋白數(shù)目和表達(dá)量均有一些差異,卻能顯著富集到相似的功能通路中,推測外源cry1C*/bar基因插入可能并不會顯著改變轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19對脅迫種植條件的適應(yīng)性。3.抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號外源Cry1Ab/c蛋白與水稻內(nèi)源蛋白互作的研究以轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號為研究材料,用酵母雙雜交技術(shù)篩選到了可能與Cry1Ab/c蛋白互作的抗逆反應(yīng)類、氧化還原反應(yīng)類（主要光合作用）、物質(zhì)代謝類以及其他未知功能的水稻內(nèi)源蛋白60個,并用亞細(xì)胞共定位、雙分子熒光互補、免疫共沉淀技術(shù)驗證了 6個光合作用內(nèi)源蛋白、9個抗逆反應(yīng)內(nèi)源蛋白與外源Cry 1Ab/c蛋白發(fā)生互作的真實性。采用原位免疫組化、免疫熒光、細(xì)胞膜蛋白和細(xì)胞質(zhì)蛋白分離的Western blot技術(shù)以及亞細(xì)胞定位技術(shù),以水稻和煙草葉片為材料,發(fā)現(xiàn)外源Cry1Ab/c蛋白主要定位于細(xì)胞膜內(nèi)膜上,并可以與細(xì)胞膜蛋白V-H+-ATPase和Ca2+-ATPase發(fā)生相互作用。采用酵母雙雜交、亞細(xì)胞共定位、雙分子熒光互補、免疫共沉淀技術(shù)研究了外源Cry1Ab/c蛋白與水稻5個抽穗期主效蛋白的互作,發(fā)現(xiàn)HH1外源Cry1Ab/c蛋白僅與水稻抽穗期核心主效蛋白成花素Hd3a間存在相互作用,且Hd3a的mRNA轉(zhuǎn)錄水平較MH63顯著下調(diào),均可能在轉(zhuǎn)基因水稻HH1抽穗期推遲中起關(guān)鍵作用。
石慧[10]（2018）在《大豆在美國的引種推廣及本土化研究》文中指出大豆是最早起源于中國的栽培作物之一,自古以來,大豆不但是中國古代勞動人民的主要糧食來源和優(yōu)質(zhì)植物蛋白來源,還在農(nóng)作物種植、植物油脂補充、牲畜飼養(yǎng)等多方面都發(fā)揮了重要作用。可以說,歷史上大豆在中國經(jīng)歷了從野生生長到人工栽培、從成為人們的主食到轉(zhuǎn)向副食、從主要向世界出口到依靠從美洲進(jìn)口的歷史變遷,大豆也在此發(fā)展過程中先后通過不同的路徑被廣泛地引種傳播到世界各地,到目前已經(jīng)成為全世界范圍內(nèi)具有多重利用價值的重要作物品種。相比大豆在中國可以追溯千年的悠久發(fā)展歷史,大豆被引入美國則是在近幾個世紀(jì)左右發(fā)生的。18世紀(jì)中期大豆傳入美國后并沒有很快地發(fā)展起來,而是在經(jīng)歷了一個多世紀(jì)的緩慢發(fā)展后,主要作為一種牧草作物開始被廣泛地推廣并發(fā)展起來。進(jìn)入20世紀(jì)以后,隨著新大豆品種的引入、大豆加工技術(shù)進(jìn)步和大豆新用途的不斷被開發(fā)等,美國大豆開始進(jìn)入快速產(chǎn)業(yè)化發(fā)展階段,并于20世紀(jì)50年代超過中國,成為了世界上最大的大豆生產(chǎn)國。此后,美國大豆開始全面產(chǎn)業(yè)化發(fā)展,在不斷滿足美國國內(nèi)大豆加工需求的同時,還積極拓展海外市場進(jìn)行大豆及其制品的對外出口貿(mào)易。雖然20世紀(jì)70年代以后,南美洲國家巴西和阿根廷大豆產(chǎn)業(yè)相繼發(fā)展,對美國大豆的世界市場占有率造成了影響,但美國仍然保持著世界最大大豆生產(chǎn)國和出口國的地位。美國大豆最大的輸送地是歷史上的大豆起源地和主產(chǎn)國中國,隨著20世紀(jì)末期中國大豆進(jìn)口市場的放開,大量美洲大豆開始進(jìn)入并逐漸占領(lǐng)了中國的大豆市場,中美兩國大豆生產(chǎn)和出口的相對優(yōu)勢地位完全發(fā)生了逆轉(zhuǎn)。鑒于歷史時期大豆在美國取得的讓人矚目的發(fā)展成果,把中國原產(chǎn)作物大豆在美國的發(fā)展作為研究切入點,通過歷史文獻(xiàn)法、定量分析法、田野調(diào)查法等研究方法,并在大量一手英文文獻(xiàn)和統(tǒng)計數(shù)據(jù)資料的支撐下,將大豆在美國引種推廣的歷史進(jìn)程進(jìn)行了分期。通過繪制多個相關(guān)的圖和表,對大豆在美國本土化的發(fā)展和動因等問題進(jìn)行了討論,并在中美大豆發(fā)展比較中為中國大豆產(chǎn)業(yè)未來發(fā)展提出建議,研究主體內(nèi)容可以分為以下四個部分。第一部分分析了大豆在美國引種推廣的歷史背景。中國有著豐富的野生大豆資源,經(jīng)過人類不斷地采集和馴化,大豆最早在中國有了栽培品種。此后幾千年的栽培和利用過程中,大豆通過與不同國家間的農(nóng)業(yè)交流互動,曾先后在不同時期被引種種植于亞洲、歐洲、美洲等國家和地區(qū)。大豆在美國的傳入是在地理大發(fā)現(xiàn)與海外貿(mào)易興起的社會背景下發(fā)生的,早期主要通過四條海上路徑分別從不同國家傳入美國。第二部分分別從大豆生產(chǎn)、栽培技術(shù)、加工利用、組織制度四個方面對大豆在美國引種推廣及本土化的具體發(fā)展情況展開追溯。首先,對大豆在美國的發(fā)展歷程進(jìn)行分期。通過對歷史文獻(xiàn)資料和官方統(tǒng)計數(shù)據(jù)的整理,將大豆生產(chǎn)在美國的發(fā)展進(jìn)程大致劃分為:早期引種和緩慢發(fā)展時期、快速發(fā)展時期、波動發(fā)展時期以及穩(wěn)步發(fā)展時期。在四個發(fā)展時期中,因為不同歷史階段的國家政策、技術(shù)水平、社會背景等因素不同,大豆生產(chǎn)分別呈現(xiàn)出不同的特點。總體上看,大豆生產(chǎn)在美國經(jīng)歷了從一種新奇作物發(fā)展成為國家重要經(jīng)濟作物的變遷。其次,從大豆生產(chǎn)技術(shù)的進(jìn)步展現(xiàn)其本土化進(jìn)程。在大豆育種和品種發(fā)展上,美國的大豆品種在美國經(jīng)歷了由少到多的過程,早期世界范圍內(nèi)的引種活動為美國大豆傳統(tǒng)育種和新品種的開發(fā)提供了大量的親本原料,20世紀(jì)末以后則開始轉(zhuǎn)向轉(zhuǎn)基因大豆品種的開發(fā)和種植;在大豆栽培和收獲技術(shù)發(fā)展上,整地、播種、田間管理、收獲和貯藏等都有不同的變化;在大豆病蟲害防治技術(shù)的發(fā)展上,也形成了針對美國大豆病蟲害類型的主要防治手段。再次,從大豆加工利用的變化展現(xiàn)其本土化進(jìn)程。大豆在美國的利用方式,從主要作為牧草作物發(fā)展為主要作為豆粒收獲進(jìn)行加工利用。作為牧草作物期間可當(dāng)作青綠飼料、青貯飼料、干草飼料、放牧或肥田等多種方式利用。而作為大豆加工則主要制成豆油、豆粕和大豆食品等。最后,大豆在美國的本土化發(fā)展還表現(xiàn)在包括政府機構(gòu)和高校、相關(guān)企業(yè)公司和行業(yè)協(xié)會等方面的組織機構(gòu)發(fā)展上。第三部分是對大豆在美國引種推廣及本土化的動因進(jìn)分析和探討。通過對大豆在美國本土化發(fā)展過程的梳理,指出歷史時期內(nèi)美國大豆產(chǎn)業(yè)的興旺發(fā)展并不是只由單一因素導(dǎo)致的,應(yīng)該說大豆在美國的發(fā)展是以自然為前提、以政策為引領(lǐng)、以市場為導(dǎo)向、以技術(shù)為支撐和以合作為依托的多方面因素共同影響而作用的結(jié)果。第四部分通過梳理中國和美國大豆生產(chǎn)地位的轉(zhuǎn)換,以及對相對優(yōu)勢地位轉(zhuǎn)變的動因分析,結(jié)合大豆在美國本土化發(fā)展的成功經(jīng)驗與歷史教訓(xùn),努力從多個方面對中國大豆產(chǎn)業(yè)乃至現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展提出了相關(guān)的對策和建議。通過對大豆在美國引種推廣及本土化進(jìn)程的歷史探究,試圖從多方面分析和總結(jié)大豆在美國本土化和快速產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的動因,為農(nóng)作物的引種推廣及本土化研究帶來啟發(fā),為探索中國特色的大豆發(fā)展之路提供借鑒。
二、轉(zhuǎn)基因小麥商業(yè)化的現(xiàn)狀、問題、影響與發(fā)展趨勢（論文開題報告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實驗法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實踐的需要提出設(shè)計。
定性分析法：對研究對象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認(rèn)識進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會科學(xué)用來分析社會現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、轉(zhuǎn)基因小麥商業(yè)化的現(xiàn)狀、問題、影響與發(fā)展趨勢（論文提綱范文）
（1）TaAFP-Ba/b基因在水稻和小麥中的功能研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 縮略詞表 |
| 1 引言 |
| 1.1 小麥穗發(fā)芽 |
| 1.2 AFP基因 |
| 1.3 植物轉(zhuǎn)基因 |
| 1.4 數(shù)字PCR技術(shù)及其應(yīng)用 |
| 1.5 研究目的和意義 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 實驗材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 酶和試劑 |
| 2.1.3 質(zhì)?；罨?/td> |
| 2.1.4 實驗引物 |
| 2.2 實驗方法 |
| 2.2.1 TaAFP-B基因調(diào)控區(qū)序列的克隆和分析 |
| 2.2.2 小麥葉片的預(yù)處理 |
| 2.2.3 脅迫處理 |
| 2.2.4 載體構(gòu)建 |
| 2.2.5 植物瞬時表達(dá) |
| 2.2.6 水稻、小麥轉(zhuǎn)基因植株的獲得 |
| 2.2.7 轉(zhuǎn)基因植株T_2代的獲得與鑒定分析 |
| 2.2.8 啟動子的組織特異性觀察及活性定量分析 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 穗發(fā)芽抗性不同的小麥中TaAFPs和 TaABI5 基因的表達(dá)特性 |
| 3.2 TaAFP-B基因起始密碼子上游調(diào)控區(qū)序列分析 |
| 3.3 TaAFP-B基因5′UTR區(qū)域差異序列的瞬時表達(dá) |
| 3.3.1 瞬時表達(dá)載體構(gòu)建 |
| 3.3.2 小麥葉片中tdTomatoER和 GUS基因的瞬時表達(dá) |
| 3.3.3 TaAFP-Ba/bF基因的定量活性分析 |
| 3.4 啟動子PTaAFP-Ba/b的組織特異性觀察及其定量活性分析 |
| 3.5 轉(zhuǎn)基因水稻的鑒定 |
| 3.5.1 T_1代轉(zhuǎn)基因水稻的PCR鑒定 |
| 3.5.2 T_1代轉(zhuǎn)基因水稻外源基因的拷貝數(shù)鑒定 |
| 3.5.3 T_2代轉(zhuǎn)基因水稻TaAFP-B轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)分析 |
| 3.5.4 轉(zhuǎn)基因TaAFP-Ba/bS-GFP水稻幼葉中融合蛋白GFP的表達(dá) |
| 3.5.5 轉(zhuǎn)基因水稻在不同脅迫處理下TaAFP-B的表達(dá)變化 |
| 3.5.6 轉(zhuǎn)基因水稻單拷貝株系T_2代表型觀察 |
| 3.6 轉(zhuǎn)基因小麥的鑒定 |
| 3.6.1 T_1代轉(zhuǎn)基因小麥的PCR鑒定 |
| 3.6.2 T_1代轉(zhuǎn)基因小麥外源基因的拷貝數(shù)鑒定 |
| 3.6.3 T_2代轉(zhuǎn)基因小麥TaAFP-B轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)分析 |
| 3.6.4 轉(zhuǎn)基因小麥在不同脅迫處理下TaAFP-B基因的表達(dá)變化 |
| 3.6.5 轉(zhuǎn)基因小麥單拷貝株系T_2代表型觀察 |
| 4 討論 |
| 5 結(jié)論 |
| 致謝 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 作者簡介 |
（2）基于專利數(shù)據(jù)挖掘的全球生物技術(shù)育種技術(shù)及產(chǎn)業(yè)競爭態(tài)勢分析（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 主要符號對照表 |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 研究背景和意義 |
| 1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀 |
| 1.2.1 關(guān)于農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域問題的研究 |
| 1.2.2 關(guān)于專利信息挖掘分析的研究 |
| 1.3 研究內(nèi)容和技術(shù)路線 |
| 1.3.1 研究內(nèi)容 |
| 1.3.2 技術(shù)路線 |
| 1.4 創(chuàng)新點 |
| 第二章 相關(guān)概念與理論 |
| 2.1 相關(guān)概念 |
| 2.1.1 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)相關(guān)概念 |
| 2.1.2 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)專利的基本內(nèi)容 |
| 2.2 相關(guān)理論 |
| 2.2.1 技術(shù)創(chuàng)新理論 |
| 2.2.2 競爭情報理論 |
| 第三章 國際種業(yè)發(fā)展態(tài)勢分析 |
| 3.1 全球種業(yè)發(fā)展格局 |
| 3.1.1 世界種業(yè)發(fā)展歷程及發(fā)展現(xiàn)狀 |
| 3.1.2 我國種業(yè)發(fā)展歷程及發(fā)展現(xiàn)狀 |
| 3.2 基于鉆石理論的主要國家種業(yè)競爭力分析 |
| 3.2.1 種業(yè)國際競爭力指數(shù) |
| 3.2.2 種業(yè)國際競爭力指標(biāo)選取與優(yōu)化 |
| 3.2.3 種業(yè)國際競爭力指數(shù)分析 |
| 第四章 全球農(nóng)業(yè)生物技術(shù)發(fā)展動態(tài) |
| 4.1 基于專利數(shù)據(jù)的全球農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研發(fā)分析 |
| 4.1.1 數(shù)據(jù)來源及數(shù)據(jù)處理方法 |
| 4.1.2 申請趨勢分析 |
| 4.1.3 申請地區(qū)分析 |
| 4.1.4 申請人分析 |
| 4.2 基于其他研發(fā)成果的全球農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究分析 |
| 4.2.1 論文成果 |
| 4.2.2 植物新品種保護(hù) |
| 4.3 全球農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研發(fā)熱點 |
| 4.3.1 重點研發(fā)領(lǐng)域分析 |
| 4.3.2 重點應(yīng)用領(lǐng)域分析 |
| 第五章 全球農(nóng)業(yè)生物技術(shù)競爭格局分析 |
| 5.1 綜合競爭地位分析 |
| 5.1.1 指標(biāo)選取與統(tǒng)計 |
| 5.1.2 主要指標(biāo)分析 |
| 5.2 主要國家在主要目標(biāo)市場專利布局分析 |
| 5.2.1 PCT及三方專利申請情況分析 |
| 5.2.2 主要國家技術(shù)流向比 |
| 5.3 主要領(lǐng)域全球?qū)＠季址治?/td> |
| 第六章 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)熱點領(lǐng)域競爭態(tài)勢分析 |
| 6.1 轉(zhuǎn)基因技術(shù)專利信息分析 |
| 6.1.1 技術(shù)發(fā)展趨勢分析 |
| 6.1.2 各國研發(fā)能力及主要受理地區(qū)分析 |
| 6.1.3 主要申請機構(gòu)競爭能力分析 |
| 6.2 基因編輯技術(shù)及其進(jìn)展 |
| 6.2.1 鋅指核酸酶技術(shù) |
| 6.2.2 TALEN技術(shù) |
| 6.2.3 CRISPR技術(shù) |
| 6.3 植物基因編輯技術(shù)專利布局與的競爭態(tài)勢 |
| 6.3.1 區(qū)域布局分析 |
| 6.3.2 主要專利權(quán)人分析 |
| 第七章 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化及競爭態(tài)勢分析 |
| 7.1 轉(zhuǎn)基因作物的產(chǎn)業(yè)化分析 |
| 7.2 基因編輯作物的產(chǎn)業(yè)化和市場競爭優(yōu)勢分析 |
| 7.2.1 基因編輯作物產(chǎn)業(yè)化現(xiàn)狀 |
| 7.2.2 基因編輯作物產(chǎn)業(yè)化性狀 |
| 7.2.3 基因編輯作物的知識產(chǎn)權(quán)分析 |
| 第八章 結(jié)論、政策建議與展望 |
| 8.1 結(jié)論 |
| 8.2 政策建議 |
| 8.2.1 提高競爭實力 |
| 8.2.2 強化知識產(chǎn)權(quán)布局 |
| 8.2.3 加強原始創(chuàng)新 |
| 8.3 展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 作者簡歷 |
（3）轉(zhuǎn)基因水稻檢測方法與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文縮略詞表 |
| 引言 |
| 第一篇 綜述 |
| 第1章 國內(nèi)外轉(zhuǎn)基因作物研發(fā)與管理現(xiàn)狀 |
| 1.1 國內(nèi)外轉(zhuǎn)基因作物的研發(fā)與應(yīng)用 |
| 1.2 國內(nèi)外轉(zhuǎn)基因生物安全管理現(xiàn)狀 |
| 第2章 轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)研究進(jìn)展 |
| 2.1 基于外源插入核酸的檢測方法 |
| 2.2 基于外源插入基因表達(dá)蛋白的檢測方法 |
| 2.3 轉(zhuǎn)基因檢測新方法 |
| 2.4 轉(zhuǎn)基因檢測關(guān)鍵要素 |
| 第3章 轉(zhuǎn)基因水稻檢測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制 |
| 3.1 轉(zhuǎn)基因檢測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)類型 |
| 3.2 轉(zhuǎn)基因檢測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)量值表達(dá)方式 |
| 第二篇 研究內(nèi)容 |
| 第1章 植物種子DNA提取與純化的研究 |
| 1.1 實驗材料 |
| 1.2 實驗方法 |
| 1.3 實驗結(jié)果 |
| 1.4 討論 |
| 1.5 小結(jié) |
| 第2章 水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因研究 |
| 2.1 實驗材料 |
| 2.2 實驗方法 |
| 2.3 實驗結(jié)果 |
| 2.4 討論 |
| 2.5 小結(jié) |
| 第3章 轉(zhuǎn)基因水稻篩查檢測方法與陽性標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒構(gòu)建 |
| 3.1 實驗材料 |
| 3.2 實驗方法 |
| 3.3 實驗結(jié)果 |
| 3.4 討論 |
| 3.5 小結(jié) |
| 第4章 轉(zhuǎn)基因水稻檢測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制 |
| 4.1 實驗材料 |
| 4.2 實驗方法 |
| 4.3 實驗結(jié)果 |
| 4.4 討論 |
| 4.5 小結(jié) |
| 結(jié)論 |
| 導(dǎo)師簡介 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 作者簡介 |
| 致謝 |
（4）耐草甘膦基因aroAA1501的拆分及功能重建（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 耐草甘膦轉(zhuǎn)基因作物 |
| 1.1.1 草甘膦的作用機制 |
| 1.1.2 耐草甘膦轉(zhuǎn)基因作物的培育途徑 |
| 1.1.3 耐草甘膦轉(zhuǎn)基因作物的應(yīng)用 |
| 1.2 草甘膦抗性雜草 |
| 1.2.1 草甘膦抗性雜草的種類 |
| 1.2.2 草甘膦抗性雜草的產(chǎn)生途徑 |
| 1.3 限控基因飄流的生物學(xué)措施 |
| 1.3.1 葉綠體轉(zhuǎn)化 |
| 1.3.2 轉(zhuǎn)基因弱化技術(shù)(Transgenic mitigation,TM) |
| 1.3.3 選擇性滅殺技術(shù) |
| 1.3.4 基因刪除技術(shù) |
| 1.4 蛋白內(nèi)含肽 |
| 1.4.1 蛋白內(nèi)含肽的分類 |
| 1.4.2 蛋白內(nèi)含肽的剪接機制 |
| 1.4.3 蛋白內(nèi)含肽的應(yīng)用 |
| 1.5 基因拆分技術(shù) |
| 1.6 研究目的及意義 |
| 第二章 材料與方法 |
| 2.1 試驗材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 質(zhì)粒與菌株 |
| 2.1.3 酶和試劑 |
| 2.1.4 主要儀器 |
| 2.1.5 培養(yǎng)基配制 |
| 2.1.6 引物合成和測序 |
| 2.2 試驗方法 |
| 2.2.1 基因拆分及融合基因An-In和 Ic-Ac的克隆 |
| 2.2.2 原核表達(dá)載體的構(gòu)建 |
| 2.2.3 功能互補試驗 |
| 2.2.4 ER2799重組菌株的草甘膦耐受性檢測 |
| 2.2.5 ER2799 重組菌株中外源基因的RT-PCR檢測 |
| 2.2.6 實時熒光定量PCR檢測 |
| 2.2.7 ELISA檢測 |
| 2.2.8 EPSPS酶動力學(xué)分析試驗 |
| 2.2.9 基因拆分后重新組裝方式分析 |
| 2.2.10 水稻轉(zhuǎn)化用植物表達(dá)載體構(gòu)建 |
| 2.2.11 水稻遺傳轉(zhuǎn)化 |
| 2.2.12 轉(zhuǎn)基因水稻PCR檢測 |
| 第三章 實驗結(jié)果 |
| 3.1 耐除草劑基因AROA_(A1501)可拆分位點的確定 |
| 3.1.1 原核表達(dá)載體的構(gòu)建 |
| 3.1.2 ER2799的功能重建 |
| 3.2 ER2799重組菌株的草甘膦耐受性分析 |
| 3.2.1 ER2799重組菌株的草甘膦耐受性 |
| 3.2.2 ER2799重組菌株在不同草甘膦濃度下的生長曲線 |
| 3.3 ER2799重組菌株中外源基因的表達(dá)分析 |
| 3.4 EPSPS酶動力學(xué)分析 |
| 3.4.1 酶活力 |
| 3.4.2草甘膦半數(shù)抑制常數(shù)IC50 |
| 3.4.3 米氏常數(shù)Km |
| 3.4.4 競爭性抑制劑草甘膦的Ki值 |
| 3.5 不同類型轉(zhuǎn)基因水稻的培育 |
| 3.5.1 植物表達(dá)載體的構(gòu)建 |
| 3.5.2 轉(zhuǎn)基因水稻的培育 |
| 3.5.3 轉(zhuǎn)基因水稻的抗性分析 |
| 第四章 討論 |
| 第五章 全文結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 附錄A |
| 個人簡歷 |
（5）轉(zhuǎn)cry1Ab-Ma基因抗蟲玉米對根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和功能多樣性影響的研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 上篇 文獻(xiàn)綜述 |
| 1 轉(zhuǎn)基因作物的發(fā)展現(xiàn)狀及趨勢 |
| 1.1 全球轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化種植現(xiàn)狀 |
| 1.2 全球轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化經(jīng)濟效益現(xiàn)狀 |
| 1.3 全球轉(zhuǎn)基因作物研究現(xiàn)狀 |
| 1.3.1 轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究進(jìn)展 |
| 1.3.2 轉(zhuǎn)基因技術(shù)用于作物改良 |
| 1.3.3 轉(zhuǎn)基因作物的檢測技術(shù) |
| 2 轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米的研發(fā)及進(jìn)展 |
| 3 轉(zhuǎn)基因作物釋放的安全性評價研究進(jìn)展 |
| 3.1 轉(zhuǎn)基因作物釋放的安全性評價內(nèi)容 |
| 3.2 轉(zhuǎn)基因作物釋放對生物多樣性的影響 |
| 3.3 轉(zhuǎn)基因作物釋放對土壤微生物多樣性影響的研究 |
| 4 研究意義 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 下篇 研究內(nèi)容 |
| 第一章 轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101對根際土壤理化性質(zhì)(含水量和pH值)及三種功能酶活性的影響 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 試驗材料 |
| 1.2 供試玉米的種植及土壤采集 |
| 1.3 土壤含水量和pH值的測定 |
| 1.3.1 土壤含水量的測定 |
| 1.3.2 土壤pH值的測定 |
| 1.4 土壤三種功能酶活性的測定 |
| 1.4.1 土壤脲酶活性的測定 |
| 1.4.2 土壤磷酸酶活性的測定 |
| 1.4.3 土壤過氧化氫活性的測定 |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 2.1 土壤理化性質(zhì)的變化(含水量和pH值) |
| 2.2 土壤功能酶活性的變化(脲酶、磷酸酶、過氧化氫酶) |
| 3 討論 |
| 3.1 轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101長期種植對土壤理化性質(zhì)的影響 |
| 3.2 轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101長期種植對土壤功能酶活性的影響 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二章 轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101對根際土壤微生物功能多樣性的影響 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 試驗材料 |
| 1.2 供試玉米的種植及土壤采集 |
| 1.3 土壤微生物群落功能多樣性的測定 |
| 1.3.1 Biolog ECO平板 |
| 1.3.2 根際土壤微生物的提取 |
| 1.3.3 ELISA溫育反應(yīng) |
| 1.3.4 數(shù)據(jù)處理 |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 2.1 AWCD值的變化 |
| 2.2 多樣性指數(shù)的變化 |
| 2.3 6類碳源利用率的變化 |
| 3 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第三章 轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米CM8101對根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 試驗材料 |
| 1.2 供試玉米的種植及土壤采集 |
| 1.3 土壤微生物總DNA的提取 |
| 1.4 16S rRNA測序庫的構(gòu)建 |
| 1.5 數(shù)據(jù)處理和分析 |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 2.1 對土壤細(xì)菌群落分類結(jié)構(gòu)的影響 |
| 2.2 對Alpha多樣性的影響 |
| 2.3 對Beta多樣性的影響 |
| 3 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 全文總結(jié) |
| 附錄 基金項目 |
| 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的研究論文 |
| 致謝 |
（6）農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)發(fā)展應(yīng)用的倫理問題研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 緒論 |
| 第一章 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)產(chǎn)生的倫理背景審視 |
| 第一節(jié) 傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的倫理關(guān)照 |
| 一、傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的形成 |
| 二、傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的倫理意蘊 |
| 第二節(jié) 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生物技術(shù)發(fā)展的倫理凸顯 |
| 一、傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)向現(xiàn)代農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)型 |
| 二、發(fā)展現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的倫理顯現(xiàn) |
| 第二章 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的倫理認(rèn)知 |
| 第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用 |
| 一、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的應(yīng)用現(xiàn)狀 |
| 二、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的生產(chǎn)特性 |
| 三、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的發(fā)展趨勢 |
| 第二節(jié) 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的價值詮釋 |
| 一、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)提升農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力水平 |
| 二、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)加強世界糧食保障水平 |
| 三、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)創(chuàng)新農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展途徑 |
| 第三節(jié) 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的倫理困境 |
| 一、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的生態(tài)倫理困境 |
| 二、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的生命倫理困境 |
| 三、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的經(jīng)濟倫理困境 |
| 第三章 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的倫理解困 |
| 第一節(jié) 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)倫理困境產(chǎn)生的根源 |
| 一、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的生產(chǎn)商業(yè)化 |
| 二、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的科研功利化 |
| 三、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的道德責(zé)任缺失 |
| 第二節(jié) 發(fā)展農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)遵循的倫理原則 |
| 一、生態(tài)倫理原則 |
| 二、風(fēng)險預(yù)防原則 |
| 三、可持續(xù)發(fā)展原則 |
| 第三節(jié) 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)倫理問題的解決路徑 |
| 一、健全農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)管理的法律法規(guī)體系 |
| 二、建構(gòu)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)研發(fā)的倫理責(zé)任機制 |
| 三、加強農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)安全的評估監(jiān)測制度 |
| 四、提高農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)科普的公眾參與能力 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果 |
（7）溝通“不確定性”：轉(zhuǎn)基因議題的知識建構(gòu)研究（論文提綱范文）
| 內(nèi)容摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 緒論:轉(zhuǎn)基因議題的發(fā)展與影響 |
| 第一節(jié) 研究緣起：作為社會公共議題的科學(xué)知識傳播 |
| 一、科學(xué)知識傳播的演變與實踐 |
| 二、“科學(xué)媒體化”：轉(zhuǎn)基因議題的媒體呈現(xiàn) |
| 三、轉(zhuǎn)基因議題帶來的“不確定性”溝通與知識爭論 |
| 第二節(jié) 文獻(xiàn)綜述：轉(zhuǎn)基因議題、溝通“不確定性”與知識傳播 |
| 一、科學(xué)知識傳播中的轉(zhuǎn)基因議題研究 |
| 二、媒體與轉(zhuǎn)基因議題的“不確定性”溝通研究 |
| 三、媒體與科學(xué)家、社會公眾的關(guān)系探討 |
| 四、轉(zhuǎn)基因議題的知識建構(gòu)研究 |
| 第三節(jié) 理論工具：理解科學(xué)的知識社會學(xué)取向 |
| 一、作為知識的轉(zhuǎn)基因議題 |
| 二、科學(xué)知識與社會的互動關(guān)系 |
| 三、語境成為科學(xué)知識傳播的重要變量 |
| 第四節(jié) 研究意義與研究目的 |
| 一、研究意義與價值 |
| 二、研究目的與內(nèi)容 |
| 第五節(jié) 研究方法與設(shè)計 |
| 一、研究方法 |
| 二、研究文本選擇與說明 |
| 第二章 轉(zhuǎn)基因議題的知識表征與“不確定性”語境 |
| 第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因議題的演變邏輯與知識特征 |
| 一、轉(zhuǎn)基因議題的演變邏輯 |
| 二、轉(zhuǎn)基因議題的知識構(gòu)成要素及特征 |
| 第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因議題的多元知識爭論 |
| 一、轉(zhuǎn)基因技術(shù)與產(chǎn)品的安全性問題 |
| 二、轉(zhuǎn)基因的引進(jìn)與商業(yè)化推廣問題 |
| 三、轉(zhuǎn)基因技術(shù)與產(chǎn)品對人類社會生活的影響問題 |
| 第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因議題的“不確定性”語境特征 |
| 一、科學(xué)技術(shù)自身的“不確定性” |
| 二、被媒體建構(gòu)的科學(xué)“不確定性” |
| 三、被各相關(guān)利益主體認(rèn)知的科學(xué)“不確定性” |
| 第三章 轉(zhuǎn)基因議題的知識實踐與“不確定性”呈現(xiàn) |
| 第一節(jié) 中美轉(zhuǎn)基因議題的媒體報道趨勢變化 |
| 一、我國轉(zhuǎn)基因議題的“注意周期” |
| 二、美國轉(zhuǎn)基因議題的“注意周期” |
| 三、中美轉(zhuǎn)基因議題的空間互動 |
| 第二節(jié) 我國轉(zhuǎn)基因議題的媒體框架與知識實踐 |
| 一、議題內(nèi)容與分布：經(jīng)濟與全球化議題占據(jù)主導(dǎo) |
| 二、消息來源：科學(xué)專家成為重要信源 |
| 三、話語立場：先“挺”后“反”的話語實踐 |
| 四、知識屬性：陳述性知識與程序性知識生產(chǎn)呈現(xiàn)不對等特征 |
| 第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因議題的科學(xué)“不確定性”呈現(xiàn) |
| 第四章 轉(zhuǎn)基因議題的知識爭論與“不確定性”溝通 |
| 第一節(jié) 反思沖突：轉(zhuǎn)基因議題的知識生產(chǎn)困境 |
| 一、“挺轉(zhuǎn)”、“反轉(zhuǎn)”之爭背后的沖突性科學(xué)話語 |
| 二、轉(zhuǎn)基因議題的理性沖突與多元對話 |
| 三、沖突性科學(xué)話語開啟“不確定性”溝通的可能性 |
| 第二節(jié) 化解沖突：轉(zhuǎn)基因議題傳播的修辭策略 |
| 一、修辭資源：運用科學(xué)理論與論證依據(jù) |
| 二、修辭工具：引入專業(yè)身份與知識背景 |
| 三、修辭技巧：使用數(shù)據(jù)/實例 |
| 四、修辭手段：訴諸于權(quán)威聲譽 |
| 第三節(jié) 超越?jīng)_突：科學(xué)與媒體的沖突與合作 |
| 一、媒體在轉(zhuǎn)基因議題傳播中的角色功能 |
| 二、科學(xué)家與媒體的互動關(guān)系 |
| 三、科學(xué)家與媒體的知識對話與溝通 |
| 第四節(jié) 轉(zhuǎn)基因議題的科學(xué)“不確定性”溝通 |
| 第五章 轉(zhuǎn)基因議題的知識共享與“不確定性”管理 |
| 第一節(jié) 由“專業(yè)知識”到“公共知識”：轉(zhuǎn)基因議題的知識共享 |
| 一、新的科學(xué)概念與轉(zhuǎn)基因議題的勾連關(guān)系 |
| 二、由“科學(xué)問題”向“社會公共議題”的構(gòu)建 |
| 三、轉(zhuǎn)基因議題的知識協(xié)商與共享 |
| 第二節(jié) 由“知曉”到“理解”：公眾科學(xué)素養(yǎng)的完善與提升 |
| 一、跨越公眾與科學(xué)之間的知識鴻溝 |
| 二、打破公眾與專家之間的專業(yè)壁壘 |
| 三、建立公眾與政府之間的對話關(guān)系 |
| 第三節(jié) “知識聯(lián)盟”：轉(zhuǎn)基因議題的“不確定性”管理 |
| 結(jié)語 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 后記 |
| 作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果 |
（9）通過基因差異表達(dá)及蛋白互作研究抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻在不同環(huán)境條件下的非預(yù)期效應(yīng)（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 文獻(xiàn)綜述 |
| 1 轉(zhuǎn)基因作物的發(fā)展歷史和現(xiàn)狀 |
| 1.1 全球轉(zhuǎn)基因作物商品化現(xiàn)狀 |
| 1.2 我國轉(zhuǎn)基因作物的研究現(xiàn)狀 |
| 2 轉(zhuǎn)Bt(Bacillus thuringiensis)基因抗蟲水稻的研究現(xiàn)狀 |
| 2.1 Bt基因的結(jié)構(gòu)與功能 |
| 2.1.1 Cry毒素蛋白的三維模型(3D-Cry) |
| 2.1.2 Cry毒素蛋白的種類和防治對象 |
| 2.1.3 Cry毒素蛋白的作用模型 |
| 2.2 轉(zhuǎn)Bt抗蟲基因水稻的研究現(xiàn)狀 |
| 2.2.1 第一代抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻的釋放和安全證書的獲得 |
| 2.2.2 新型抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻的發(fā)展 |
| 3 轉(zhuǎn)Bt基因水稻的適合度評估 |
| 3.1 自身雜草化 |
| 3.2 外源基因漂移 |
| 3.3 雜交后代的適合度 |
| 4 轉(zhuǎn)Bt基因水稻的非預(yù)期效應(yīng)研究 |
| 4.1 非預(yù)期效應(yīng)的定義 |
| 4.2 非預(yù)期效應(yīng)產(chǎn)生的可能原因 |
| 4.2.1 轉(zhuǎn)基因植株的構(gòu)建過程 |
| 4.2.2 額外表達(dá)外源蛋白消耗的物質(zhì)與能量 |
| 4.2.3 外源蛋白與親本水稻內(nèi)源蛋白的互作 |
| 5 非預(yù)期效應(yīng)的檢測評價技術(shù) |
| 5.1 定向評價技術(shù)在轉(zhuǎn)基因作物非預(yù)期效應(yīng)檢測中的應(yīng)用 |
| 5.2 “組學(xué)”技術(shù)在轉(zhuǎn)基因作物非預(yù)期效應(yīng)檢測中的應(yīng)用 |
| 5.2.1 轉(zhuǎn)錄組學(xué) |
| 5.2.2 蛋白組學(xué) |
| 5.2.3 代謝組學(xué) |
| 5.2.4 組學(xué)聯(lián)用技術(shù) |
| 5.3 蛋白互作技術(shù)在轉(zhuǎn)基因作物非預(yù)期效應(yīng)檢測中的應(yīng)用前景 |
| 6 本研究的目的與意義 |
| 第二部分 模擬不同自然條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號和T1C-19的適合度 |
| 第1章 鹽堿土壤和農(nóng)田土壤條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號和T1C-19的適合度 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 水稻 |
| 1.2 土壤 |
| 1.3 試驗設(shè)計 |
| 1.4 酶聯(lián)免疫法測定外源Bt蛋白表達(dá)量 |
| 1.5 水稻營養(yǎng)生長和生殖生長的適合度指標(biāo)測定 |
| 1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 外源Bt蛋白表達(dá) |
| 2.1.1 外源Cry1Ab/c蛋白 |
| 2.1.2 外源Cry1C~*抗蟲蛋白表達(dá) |
| 2.2 外源cry1Ab/c基因?qū)λ緺I養(yǎng)和生殖指標(biāo)的影響 |
| 2.2.1 株高 |
| 2.2.2 分蘗數(shù) |
| 2.2.3 劍葉SPAD值 |
| 2.2.4 生物量 |
| 2.2.5 生殖生長指標(biāo) |
| 2.3 外源cry1C~*/bar基因?qū)λ緺I養(yǎng)和生殖生長指標(biāo)的影響 |
| 2.3.1 株高 |
| 2.3.2 分蘗數(shù) |
| 2.3.3 劍葉葉長、葉寬和葉面積 |
| 2.3.4 劍葉SPAD值 |
| 2.3.5 生物量 |
| 2.3.6 生殖生長指標(biāo) |
| 3 討論 |
| 3.1 外源Bt蛋白表達(dá) |
| 3.2 2個土壤條件對轉(zhuǎn)Bt基因水稻營養(yǎng)生長的影響 |
| 3.3 2個土壤條件對轉(zhuǎn)Bt基因水稻生殖生長的影響 |
| 第2章 雜草競爭和荒地土壤種植條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號和T1C-19的適合度 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 供試材料 |
| 1.1.1 水稻 |
| 1.1.2 土壤 |
| 1.2 試驗方法 |
| 1.2.1 試驗設(shè)計 |
| 1.2.2 ELISA測定外源蛋白表達(dá)量 |
| 1.2.3 水稻營養(yǎng)生長和生殖生長的適合度指標(biāo)測定 |
| 1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 外源Bt蛋白表達(dá) |
| 2.1.1 外源Cry1Ab/c蛋白的表達(dá) |
| 2.1.2 外源Cry1C~*蛋白的表達(dá) |
| 2.2 外源cry1Ab/c基因?qū)λ緺I養(yǎng)和生殖生長指標(biāo)的影響 |
| 2.2.1 株高 |
| 2.2.2 分蘗數(shù) |
| 2.2.3 劍葉長、寬和面積 |
| 2.2.4 劍葉SPAD值 |
| 2.2.5 生物量 |
| 2.2.6 生殖生長指標(biāo) |
| 2.3 外源cry1C~*/bar基因?qū)λ緺I養(yǎng)與生殖生長指標(biāo)的影響 |
| 2.3.1 株高 |
| 2.3.2 分蘗數(shù) |
| 2.3.3 劍葉長、寬和葉面積 |
| 2.3.4 劍葉SPAD值 |
| 2.3.5 生物量 |
| 2.3.6 生殖生長指標(biāo) |
| 3 討論 |
| 第三部分 雜草競爭和荒地土壤條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19的基因差異表達(dá) |
| 第3章 雜草競爭和荒地土壤條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19的基因差異表達(dá)-轉(zhuǎn)錄組水平 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 供試材料和種植條件 |
| 1.2 試驗方法 |
| 1.2.1 轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19外源基因轉(zhuǎn)錄水平的檢測 |
| 1.2.2 差異基因的篩選和分析 |
| 1.2.3 RT-QPCR檢測T1C-19和MH63差異基因的表達(dá)量 |
| 1.2.4 雙分子熒光互補技術(shù)驗證外源Cry1Ab/c蛋白與共有差異基因表達(dá)蛋白的互作 |
| 1.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19外源基因轉(zhuǎn)錄水平的檢測 |
| 2.2 外源基因插入對水稻差異基因表達(dá)的影響 |
| 2.2.1 共有差異基因數(shù)目 |
| 2.2.2 共有差異基因表達(dá)量的層次聚類分析 |
| 2.2.3 共有差異基因的GO富集分析 |
| 2.2.4 共有差異基因的KEGG富集分析 |
| 2.3 脅迫種植條件對水稻差異基因表達(dá)的影響 |
| 2.3.1 差異基因數(shù)目 |
| 2.3.2 KEGG功能富集分析 |
| 2.4 定量PCR檢測T1C-19和MH63差異基因的表達(dá)量 |
| 2.5 外源Cry1C~*蛋白與共有差異基因表達(dá)蛋白的互作 |
| 3 討論 |
| 3.1 外源基因?qū)D(zhuǎn)基因水稻轉(zhuǎn)錄組的影響 |
| 3.2 逆境條件對轉(zhuǎn)基因水稻差異基因表達(dá)的影響 |
| 3.3 表型差異與轉(zhuǎn)錄組結(jié)果的相關(guān)性分析 |
| 第4章 雜草競爭和荒地土壤條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19的基因差異表達(dá)-蛋白組水平 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 供試材料和種植條件 |
| 1.2 試驗方法 |
| 1.2.1 轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19外源蛋白表達(dá)水平的檢測 |
| 1.2.2 蛋白提取及質(zhì)量檢測 |
| 1.2.3 差異蛋白的篩選和分析 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19外源Cry1C~*蛋白和Bar蛋白表達(dá)水平的檢測 |
| 2.2 外源基因?qū)λ静町惖鞍妆磉_(dá)的影響 |
| 2.2.1 共有差異蛋白數(shù)目 |
| 2.2.2 共有差異蛋白表達(dá)量的層次聚類分析 |
| 2.2.3 共有差異蛋白GO富集分析 |
| 2.2.4 共有差異蛋白的KEGG富集分析 |
| 2.3 3種脅迫種植條件對水稻差異蛋白表達(dá)的影響 |
| 2.3.1 差異蛋白數(shù)目 |
| 2.3.2 差異蛋白的KEGG富集分析 |
| 3 討論 |
| 3.1 外源基因?qū)D(zhuǎn)基因水稻T1C-19蛋白組的影響 |
| 3.2 逆境條件對轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19蛋白組的影響 |
| 第四部分 抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號外源Cry1Ab/c蛋白與水稻內(nèi)源蛋白互作的研究 |
| 第5章 抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號外源Cry1Ab/c蛋白與水稻內(nèi)源蛋白組的相互作用 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 供試材料及種植條件 |
| 1.1.1 植物材料 |
| 1.1.2 主要試驗菌株、載體及試劑 |
| 1.1.3 所用引物 |
| 1.2 試驗方法 |
| 1.2.1 酵母雙雜初篩與外源Cry1Ab/c蛋白互作的水稻內(nèi)源蛋白 |
| 1.2.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的外源Cry1Ab/c蛋白和內(nèi)源蛋白在煙草細(xì)胞中表達(dá)的瞬時表達(dá)體系構(gòu)建 |
| 1.2.3 外源Cry1Ab/c蛋白與內(nèi)源蛋白的亞細(xì)胞共定位 |
| 1.2.4 外源Cry1Ab/c蛋白與內(nèi)源蛋白的雙分子熒光互補 |
| 1.2.5 外源Cry1Ab/c蛋白與內(nèi)源蛋白免疫共沉淀 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 酵母雙雜初篩與外源Cry1Ab/c蛋白互作的水稻內(nèi)源蛋白 |
| 2.1.1 截斷的Cry1Ab/c誘餌菌株的自激活驗證圖 |
| 2.1.2 Y2H Gold共轉(zhuǎn)化系統(tǒng)對文庫的篩選結(jié)果 |
| 2.1.3 Y2H Gold-Y187雙雜系統(tǒng)對文庫的篩選結(jié)果 |
| 2.1.4 初篩與外源Cry1Ab/c蛋白互作的內(nèi)源蛋白數(shù)目統(tǒng)計結(jié)果 |
| 2.1.5 外源Cry1Ab/c蛋白篩選的互作內(nèi)源蛋白統(tǒng)計結(jié)果 |
| 2.2 外源Cry1Ab/c蛋白與功能明確內(nèi)源蛋白互作真實性的驗證 |
| 2.2.1 外源Cry1Ab/c蛋白與水稻內(nèi)源蛋白的亞細(xì)胞定位 |
| 2.2.2 亞細(xì)胞共定位技術(shù)檢測外源Cry1Ab/c蛋白與水稻內(nèi)源蛋白的互作可能性 |
| 2.2.3 雙分子熒光互補技術(shù)檢測外源Cry1Ab/c蛋白與水稻內(nèi)源蛋白的互作 |
| 2.2.4 免疫共沉淀技術(shù)檢測外源Cry1Ab/c蛋白與水稻內(nèi)源蛋白的互作 |
| 3 討論 |
| 3.1 蛋白互作在轉(zhuǎn)Bt基因水稻非預(yù)期效應(yīng)產(chǎn)生機制探索中的應(yīng)用 |
| 3.2 與光合作用候選蛋白的互作及可能的生物學(xué)功能 |
| 3.3 與抗逆反應(yīng)候選蛋白的互作及可能的生物學(xué)功能 |
| 第6章 常規(guī)栽培條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號外源Cry1Ab/c蛋白的細(xì)胞膜定位及其與水稻內(nèi)源膜蛋白的相互作用 |
| 1 試驗材料和方法 |
| 1.1 供試材料 |
| 1.1.1 植物材料 |
| 1.1.2 主要試驗菌株、載體及試劑 |
| 1.2 試驗方法 |
| 1.2.1 外源Cry1Ab/c蛋白在水稻葉肉細(xì)胞中的定位 |
| 1.2.2 外源Cry1Ab/c蛋白的亞細(xì)胞定位 |
| 1.2.3 Western blot技術(shù)驗證外源Cry1Ab/c蛋白在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜中表達(dá)量 |
| 1.2.4 外源Cry1Ab/c蛋白與水稻細(xì)胞膜蛋白的相互作用 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 外源Cry1Ab/c蛋白的細(xì)胞定位 |
| 2.1.1 水稻葉肉細(xì)胞中的定位 |
| 2.1.2 外源Cry1Ab/c蛋白的亞細(xì)胞定位 |
| 2.1.3 Western blot技術(shù)驗證外源Cry1Ab/c蛋白在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜中表達(dá)量 |
| 2.2 外源Cry1Ab/c蛋白與水稻細(xì)胞膜蛋白的相互作用 |
| 2.2.1 酵母雙雜點對點驗證 |
| 2.2.2 V-H~+-ATPase和Ca~(2+)-ATPase的亞細(xì)胞定位 |
| 2.2.3 雙分子熒光互補 |
| 2.2.4 免疫共沉淀技術(shù) |
| 3 討論 |
| 第7章 鹽堿土壤條件下抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號外源Cry1Ab/c蛋白與水稻開花蛋白的互作 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 供試材料 |
| 1.1.1 植物材料和生長條件 |
| 1.1.2 主要試驗菌株、載體及試劑 |
| 1.2 試驗方法 |
| 1.2.1 HH1外源cry1Ab/c基因轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)水平的檢測 |
| 1.2.2 HH1外源Cry1Ab/c蛋白與5個抽穗期主效蛋白的互作 |
| 1.2.3 外源Cry1Ab/c蛋白與Hd3a主效蛋白互作后Hd3a蛋白表達(dá)水平的檢測 |
| 1.2.4 水稻5個抽穗期主效基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平的檢測 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 HH1外源cry1Ab/c基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)水平的檢測 |
| 2.2 外源Cry1Ab/c蛋白與抽穗期主效蛋白的亞細(xì)胞共定位 |
| 2.3 外源Cry1Ab/c蛋白與5個抽穗期主效蛋白的互作 |
| 2.3.1 酵母雙雜技術(shù)檢測外源Cry1Ab/c蛋白與5個抽穗期主效蛋白互作 |
| 2.3.2 雙分子熒光互補技術(shù)檢測外源蛋白與5個抽穗期主效蛋白互作 |
| 2.3.3 免疫共沉淀技術(shù)檢測外源Cry1Ab/c蛋白與Hd3a主效蛋白互作 |
| 2.4 外源Cry1Ab/c蛋白與Hd3a主效蛋白互作后Hd3a蛋白表達(dá)水平的檢測 |
| 2.5 抽穗期主效基因mRNA表達(dá)量的分析 |
| 3 討論 |
| 全文總結(jié) |
| 創(chuàng)新點 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文 |
| 致謝 |
（10）大豆在美國的引種推廣及本土化研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 緒論 |
| 一、選題依據(jù)和意義 |
| 二、國內(nèi)外研究動態(tài) |
| 三、研究思路與結(jié)構(gòu)安排 |
| 四、研究方法和資料來源 |
| 五、創(chuàng)新及可能存在的不足 |
| 第一章 大豆在美國引種推廣的歷史背景 |
| 第一節(jié) 大豆的起源與傳播 |
| 一、大豆起源于中國 |
| 二、大豆在世界傳播 |
| 第二節(jié) 大豆傳入美國的背景與路徑 |
| 一、大豆傳入前的歷史背景 |
| 二、大豆傳入美國的路徑 |
| 第二章 大豆在美國引種推廣的歷史進(jìn)程 |
| 第一節(jié) 早期引種和緩慢發(fā)展時期(1898年以前) |
| 一、1898年以前的引種 |
| 二、1898年以前的試種 |
| 第二節(jié) 快速發(fā)展時期(1898年-1969年) |
| 一、生產(chǎn)的迅速發(fā)展 |
| 二、主產(chǎn)區(qū)的形成 |
| 第三節(jié) 波動發(fā)展時期(1970年-1995年) |
| 一、生產(chǎn)的起伏波動 |
| 二、主產(chǎn)區(qū)的發(fā)展 |
| 第四節(jié) 穩(wěn)步發(fā)展時期(1996年至今) |
| 一、生產(chǎn)的穩(wěn)步提高 |
| 二、主產(chǎn)區(qū)的現(xiàn)狀 |
| 第三章 大豆在美國生產(chǎn)技術(shù)的本土化 |
| 第一節(jié) 大豆育種與品種資源發(fā)展 |
| 一、1898年以前的大豆品種 |
| 二、品種采集與傳統(tǒng)育種發(fā)展 |
| 三、生物技術(shù)與轉(zhuǎn)基因大豆 |
| 第二節(jié) 大豆栽培與收獲技術(shù)的發(fā)展 |
| 一、整地 |
| 二、播種 |
| 三、田間管理 |
| 四、收獲和貯藏 |
| 第三節(jié) 大豆病蟲害防治技術(shù)的發(fā)展 |
| 一、大豆病害及其防治 |
| 二、大豆蟲害及其防治 |
| 第四章 大豆在美國加工利用的本土化 |
| 第一節(jié) 大豆利用方式的改變 |
| 一、從大豆制品到牧草作物 |
| 二、從牧草作物到粒用大豆 |
| 第二節(jié) 大豆作為牧草作物的利用 |
| 一、青綠飼料 |
| 二、青貯飼料 |
| 三、干草飼料 |
| 四、放牧和肥田 |
| 五、豆粒喂養(yǎng) |
| 第三節(jié) 粒用大豆的加工和利用 |
| 一、大豆加工業(yè)的發(fā)展 |
| 二、豆油的利用 |
| 三、豆粕的利用 |
| 四、大豆食品 |
| 第五章 大豆在美國組織機構(gòu)的本土化 |
| 第一節(jié) 大豆相關(guān)政府機構(gòu)與高校 |
| 一、美國農(nóng)業(yè)部及相關(guān)工作 |
| 二、農(nóng)業(yè)高校及試驗推廣站 |
| 第二節(jié) 大豆相關(guān)企業(yè)公司 |
| 一、產(chǎn)品加工公司 |
| 二、工業(yè)制造公司 |
| 三、作物種子公司 |
| 四、產(chǎn)品貿(mào)易公司 |
| 第三節(jié) 大豆相關(guān)協(xié)會組織 |
| 一、美國大豆協(xié)會 |
| 二、聯(lián)合大豆基金會 |
| 三、美國大豆出口協(xié)會 |
| 第六章 大豆在美國引種推廣及本土化的動因分析 |
| 第一節(jié) 大豆與美國自然條件的相互適應(yīng) |
| 一、大豆的植物生理特征 |
| 二、大豆適宜美國農(nóng)業(yè)環(huán)境 |
| 第二節(jié) 大豆相關(guān)法案的推動 |
| 一、大豆補貼政策 |
| 二、大豆品種保護(hù)政策 |
| 第三節(jié) 大豆產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟利益的驅(qū)動 |
| 一、美國國內(nèi)市場的大豆產(chǎn)業(yè) |
| 二、大豆及其產(chǎn)品的出口貿(mào)易 |
| 第四節(jié) 大豆相關(guān)技術(shù)體系的完善 |
| 一、大豆育種技術(shù)的發(fā)展 |
| 二、大豆種植的機械化 |
| 三、大豆加工技術(shù)的進(jìn)步 |
| 四、大豆運輸系統(tǒng)的健全 |
| 第五節(jié) 大豆相關(guān)組織制度的建設(shè) |
| 一、大豆相關(guān)組織體系的構(gòu)成 |
| 二、大豆相關(guān)組織體系的協(xié)作 |
| 第七章 美國大豆發(fā)展對中國的啟示 |
| 第一節(jié) 中美大豆相對優(yōu)勢地位的轉(zhuǎn)換 |
| 一、中國大豆的歷史優(yōu)勢 |
| 二、中美大豆的現(xiàn)代轉(zhuǎn)變 |
| 第二節(jié) 相對地位轉(zhuǎn)變的原因分析 |
| 一、生產(chǎn)效率因素 |
| 二、產(chǎn)銷體系因素 |
| 三、政策導(dǎo)向因素 |
| 四、消費結(jié)構(gòu)因素 |
| 第三節(jié) 中國大豆發(fā)展的對策與建議 |
| 一、政策上給予關(guān)注和支持 |
| 二、進(jìn)行大豆生產(chǎn)技術(shù)創(chuàng)新 |
| 三、不斷完善大豆產(chǎn)業(yè)鏈發(fā)展 |
| 四、推進(jìn)大豆組織與制度優(yōu)化 |
| 五、發(fā)展特色非轉(zhuǎn)基因大豆 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文目錄 |
| 致謝 |
四、轉(zhuǎn)基因小麥商業(yè)化的現(xiàn)狀、問題、影響與發(fā)展趨勢（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]TaAFP-Ba/b基因在水稻和小麥中的功能研究[D]. 馮玉梅. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué), 2021(01)
- [2]基于專利數(shù)據(jù)挖掘的全球生物技術(shù)育種技術(shù)及產(chǎn)業(yè)競爭態(tài)勢分析[D]. 鄒婉儂. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 2020(01)
- [3]轉(zhuǎn)基因水稻檢測方法與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究[D]. 張秀杰. 吉林大學(xué), 2020(08)
- [4]耐草甘膦基因aroAA1501的拆分及功能重建[D]. 宋亞亞. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 2020(01)
- [5]轉(zhuǎn)cry1Ab-Ma基因抗蟲玉米對根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和功能多樣性影響的研究[D]. 欒穎. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué), 2019(08)
- [6]農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)發(fā)展應(yīng)用的倫理問題研究[D]. 逯凱歆. 太原科技大學(xué), 2019(04)
- [7]溝通“不確定性”：轉(zhuǎn)基因議題的知識建構(gòu)研究[D]. 潘玉. 華東師范大學(xué), 2019(09)
- [8]轉(zhuǎn)基因食品的現(xiàn)狀與發(fā)展[A]. 胡貽椿,卓勤,楊曉光. 達(dá)能營養(yǎng)中心2019年論文匯編：轉(zhuǎn)基因食品與安全, 2019
- [9]通過基因差異表達(dá)及蛋白互作研究抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻在不同環(huán)境條件下的非預(yù)期效應(yīng)[D]. 付健美. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué), 2018
- [10]大豆在美國的引種推廣及本土化研究[D]. 石慧. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué), 2018(02)
標(biāo)簽：轉(zhuǎn)基因水稻論文; 生物技術(shù)論文; 草甘膦論文; 轉(zhuǎn)基因植物論文; 生物技術(shù)專業(yè)論文;