一、急性腦梗塞溶栓治療的IL-1β、IL-6、TNF-α動態(tài)變化研究（論文文獻綜述）
侯坤[1]（2021）在《IL-4誘導(dǎo)小膠質(zhì)細胞向M2表型極化對缺血性卒中的影響及其機制研究》文中研究說明背景和目的:小膠質(zhì)細胞是神經(jīng)系統(tǒng)的固有免疫細胞,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)多種疾病的發(fā)生、發(fā)展中扮演重要的角色。缺血性腦卒中發(fā)生后,受缺血部位微環(huán)境的動態(tài)變化的影響,小膠質(zhì)細胞的不同極化表型對損傷的發(fā)展和神經(jīng)恢復(fù)的結(jié)局是至關(guān)重要的。既往研究發(fā)現(xiàn),人為將M1型小膠質(zhì)細胞誘導(dǎo)成M2型小膠質(zhì)細胞細胞,可減輕短暫性腦缺血小鼠模型的梗死面積并促進神經(jīng)功能恢復(fù)。小膠質(zhì)細胞具有不同的極化表型,可以解釋小膠質(zhì)細胞在同一疾病的作用雙重性。因此,有目的地抑制小膠質(zhì)細胞由M2型向M1型極化,或誘導(dǎo)M1型向M2型極化,或降低M1型/M2型的比值,是缺血性腦卒中治療的重要研究方向之一。IL-4主要由活化的T細胞產(chǎn)生,對體內(nèi)多種免疫細胞均有調(diào)節(jié)作用。IL-4可刺激巨噬細胞和小膠質(zhì)細胞向抗炎表型轉(zhuǎn)化,從而抑制炎癥進展,促進組織修復(fù)并發(fā)揮神經(jīng)保護作用。目前,IL-4已應(yīng)用于腦出血、脊髓損傷、癲癇、阿爾茲海默病等諸多神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究。本研究擬探討IL-4在缺血性卒中的治療價值。方法:1、構(gòu)建大鼠腦缺血再灌注（transient middle cerebral artery occlusion,t MCAO）模型,分假手術(shù)組與模型組,ELISA法檢測大鼠外周血TNF-α、IFN-γ、IL-4、TGF-β和BDNF等炎癥因子的變化。免疫熒光檢測大鼠小膠質(zhì)細胞極化表型的變化。取腦梗死患者和健康成人對照的外周血,ELISA法檢測上述炎癥因子的變化。2、構(gòu)建大鼠t MCAO模型,分為假手術(shù)組、模型組、IL-4組和IL-4+AS1517499組。3天后予神經(jīng)功能評分。取大鼠外周血,檢測炎癥因子的變化。處死大鼠,TTC染色,計算梗死容積,免疫熒光檢測大鼠小膠質(zhì)細胞極化表型的變化,TUNEL染色檢測缺血半暗帶組織細胞凋亡,Nissl染色法檢測缺血半暗帶神經(jīng)元損傷。3、培養(yǎng)HAPI小膠質(zhì)細胞系,對小膠質(zhì)細胞進行氧糖剝奪（oxygen glucose deprivation,OGD）處理,分為Control組、OGD組、OGD+IL-4組、OGD+IL-4+AS1517499組。ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清中IL-1β,IL-2,TNF-α,IL-10,TGF-β,BDNF等炎癥因子的變化。Western blot檢測JAK1、p-JAK1、STAT6、p-STAT6的表達水平變化。免疫熒光染色,檢測小膠質(zhì)細胞系極化表型的變化。熒光微球法檢測小膠質(zhì)細胞內(nèi)吞能力的變化。4、培養(yǎng)RN-C神經(jīng)元細胞系,建立神經(jīng)元OGD培養(yǎng)模型,與預(yù)處理后的小膠質(zhì)細胞共培養(yǎng),分為Control組,OGD組,IL-4組,IL-4+AS1517499組。流式細胞術(shù)評價RN-C的凋亡,Western blot法檢測RN-C凋亡相關(guān)蛋白的表達。5、統(tǒng)計分析使用Graph Pad Prism9進行。連續(xù)變量以“均數(shù)±標準差”表示,兩組間比較采用t檢驗,多組間比較采用單因素方差分析。神經(jīng)功能評估采用非參數(shù)檢驗（Kruskal-Wallis檢驗）,多組間比較采取Dunn’s多組比較,P<0.05被認為有統(tǒng)計學差異。結(jié)果:1、與健康對照相比,腦梗塞患者血液中IFN-γ、TNF-α、TGF-β、BDNF和IL-4均明顯升高,其中IFN-γ、TNF-α、BDNF和IL-4梗塞后第一天升高最明顯,梗塞后第三天開始下降,但仍明顯高于健康對照。2、相較于假手術(shù)組,模型組大鼠外周血中IFN-γ、TNF-α和IL-4水平均上升,BDNF水平下降。給予IL-4后,IL-1β,IL-2,TNF-α水平下降,IL-10,TGF-β,BDNF水平上升,聯(lián)合給予IL-4+AS1517499后,IL-1β,IL-2,TNF-α水平上升,IL-10,TGF-β,BDNF水平下降。3、與假手術(shù)組相比,模型組缺血半暗帶中小膠質(zhì)細胞活化增加,M1與M2表型均增加。給予IL-4后,M2表型小膠質(zhì)細胞增多,給予IL-4+AS1517499后,M2表型小膠質(zhì)細胞減少。4、相較于假手術(shù)組,各模型組均出現(xiàn)明顯的腦梗死。與模型組相比,給予IL-4后,腦梗死容積減少,聯(lián)合給予IL-4+AS1517499后,大鼠腦腦梗死容積增加。5、TUNEL染色法檢測細胞凋亡,與假手術(shù)組相比,模型組缺血半暗帶細胞凋亡明顯增加,給予IL-4后,細胞凋亡顯著減少,同時給予IL-4+AS1517499后,凋亡明顯增加。尼氏染色法檢測神經(jīng)元修復(fù)情況,與假手術(shù)組相比,模型組神經(jīng)元尼氏小體明顯減少,給予IL-4后尼氏小體增加,給予IL-4+AS1517499后,尼氏小體減少。6、與正常組和OGD組相比,給予IL-4后,CD163表達上升,給予IL-4+AS1517499后,CD163表達下降。與正常組和OGD組相比,給予IL-4后,小膠質(zhì)細胞JAK1磷酸化（p-JAK1）增加、STAT6磷酸化（p-STAT6）增加,給予STAT6磷酸化抑制劑AS1517499后,JAK1磷酸化水平無變化,STAT6磷酸化水平降低。與正常組和OGD組相比,給予IL-4后,IL-1β、IL-2、TNF-α表達顯著下調(diào),IL-10,TGF-β,BDNF表達顯著上升。給予IL-4+AS1517499后,IL-1β、IL-2、TNF-α表達上升,IL-10,TGF-β,BDNF表達下降。7、與正常組和OGD組相比,給予IL-4后,小膠質(zhì)細胞的內(nèi)吞能力增加,給予AS1517499后,內(nèi)吞作用降低。8、在小膠質(zhì)細胞、神經(jīng)元共培養(yǎng)模型中,與Control組相比,OGD組RN-C細胞明顯增加,IL-4處理后,RN-C的凋亡明顯減少,凋亡蛋白表達下調(diào),與IL-4組相比,IL-4+AS1517499組凋亡增加,凋亡蛋白表達增加。結(jié)論:1、IL-4通過JAK1-p JAK1-STAT6-p STAT6信號通路促進小膠質(zhì)細胞向M2表型極化。2、IL-4促進小膠質(zhì)細胞向M2表型極化,對缺血性卒中大鼠發(fā)揮神經(jīng)保護作用。3、給予IL-4后,小膠質(zhì)細胞分泌的促炎因子（IL-1β,IL-2,TNF-α）下降,抗炎因子（IL-10,TGF-β,BDNF）上升,吞噬能力增強,進而減少神經(jīng)元凋亡與損傷,發(fā)揮神經(jīng)保護作用。
賈貝貝[2]（2020）在《基于NF-κB信號通路研究清達顆粒抑制腦缺血再灌注大鼠局部炎癥反應(yīng)的作用機制》文中研究指明目的本文通過構(gòu)建大鼠大腦中動脈閉塞模型（Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO）模擬缺血性腦卒中來研究清達顆粒（QingDa granule,QDG）對大鼠腦缺血再灌注損傷（Cerebral Ischemia Reperfusion Injury,CIRI）后局部炎癥反應(yīng)的影響,從NF-κB信號通路探討清達顆粒對CIRI后的保護機制。以期進一步闡明清達顆粒治療缺血性腦卒中的作用機制,為臨床應(yīng)用清達顆粒治療缺血性腦卒中提供進一步的實驗依據(jù)。方法取體重在250280 g的雄性SD大鼠,采用硅膠線栓制備大鼠MCAO模型,缺血1.5 h后拔出線栓行再灌注,假手術(shù)組（SHAM）不插入線栓。在術(shù)后24 h隨機選擇3只造模組大鼠進行新鮮組織取材,用TTC染色法對組織進行染色觀察,同時對其余術(shù)后大鼠行核磁共振成像法（MRI）觀察模型是否成功。然后將成功的模型隨機分為模型組、清達顆粒0.8 g/kg.d組、清達顆粒1.6 g/kg.d組,分別標示為MCAO組、MCAO+QDG-L組、MCAO+QDG-H組。除清達顆粒干預(yù)組給予清達顆粒干預(yù)外,其余組別給予等量的生理鹽水,均經(jīng)灌胃途徑給藥。干預(yù)期間,每日測評各組大鼠的體重和神經(jīng)行為學變化。7天后,對各組大鼠用4%多聚甲醛經(jīng)左心室灌注后收集腦組織,每組8只。采用HE染色法觀察各組大鼠患側(cè)皮質(zhì)區(qū)的病理變化,GFAP標記星形膠質(zhì)細胞法觀察各組大鼠患側(cè)皮質(zhì)區(qū)的星形膠質(zhì)細胞的表達,IHC檢測各組大鼠患側(cè)皮質(zhì)區(qū)局部炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表達量和NF-κB的上游基因IκB、IKK的表達,IF檢測各組大鼠患側(cè)皮質(zhì)區(qū)NF-κB核移位情況。結(jié)果1.體重測量結(jié)果顯示,與SHAM相比較,術(shù)后24 h各手術(shù)組大鼠體重明顯下降,從術(shù)后第4 d時,清達顆粒干預(yù)組體重降幅開始趨緩,直至術(shù)后第7 d,與MCAO組大鼠相比較,清達顆粒干預(yù)組體重降幅明顯縮小。2.神經(jīng)行為學評分顯示,腦缺血再灌注24 h時（干預(yù)前）,與SHAM相比較,手術(shù)組神經(jīng)行為學評分顯著升高,清達顆粒干預(yù)7d后,大鼠神經(jīng)行為學評分均下降。3.腦組織HE染色結(jié)果顯示,SHAM組腦組織無水腫,神經(jīng)細胞排列整齊,形態(tài)完整,胞漿染色均勻,無細胞壞死現(xiàn)象;MCAO組患側(cè)皮質(zhì)區(qū)出現(xiàn)細胞排列雜亂、間質(zhì)水腫、間質(zhì)疏松化,神經(jīng)元細胞數(shù)目減少、細胞核固縮、碎裂溶解,大量炎癥細胞浸潤;清達顆粒干預(yù)后,大鼠患側(cè)皮質(zhì)區(qū)病理性改變有所改善,清達顆粒高、低劑量組效果未見明顯差異。4.用GFAP標記星形膠質(zhì)細胞結(jié)果發(fā)現(xiàn),CIRI 7 d后,與SHAM組比較,MCAO組大鼠患側(cè)皮質(zhì)區(qū)GFAP明顯激活,數(shù)量增多,而清達顆粒干預(yù)后,抑制了GFAP的激活,星形膠質(zhì)細胞數(shù)量顯著減少,且清達顆粒高劑量組比低劑量組效果更好。5.IHC結(jié)果顯示,與SHAM組相比較,MCAO組大鼠患側(cè)皮質(zhì)區(qū)IL-1β、IL-6、TNF-α表達明顯增高,給予清達顆粒干預(yù)后下調(diào)了大鼠患側(cè)皮質(zhì)區(qū)炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表達,清達顆粒高、低劑量組效果未見明顯差異。6.IHC結(jié)果顯示,與SHAM組相比較,MCAO組大鼠患側(cè)皮質(zhì)區(qū)IKK、IκB磷酸化表達增多,給予清達顆粒干預(yù)后患側(cè)皮質(zhì)區(qū)IKK、IκB的磷酸化表達減少;而SHAM組、MCAO組、QDG-L和QDG-H四組相比較,總IκB蛋白表達無差異。7.IF結(jié)果揭示,與SHAM組相比較,MCAO組大鼠患側(cè)皮質(zhì)區(qū)NF-κB p65被激活,入核數(shù)量明顯增多,清達顆粒干預(yù)后可抑制NF-κB p65的入核反應(yīng),入核數(shù)量顯著減少,且清達顆粒高劑量組抑制效果比低劑量組抑制效果更明顯。結(jié)論1.清達顆粒能夠阻止CIRI后體重的減輕,促進體重的恢復(fù)。2.清達顆粒有效改善CIRI后神經(jīng)功能缺損。3.清達顆粒改善CIRI后患側(cè)皮質(zhì)區(qū)病理損傷。4.清達顆粒抑制CIRI后患側(cè)皮質(zhì)區(qū)GFAP激活,減輕炎癥損傷,且高劑量組更有效。5.清達顆?？赏ㄟ^下調(diào)CIRI后患側(cè)皮質(zhì)區(qū)IL-1β、IL-6、TNF-α的表達,減輕炎癥損傷。6.清達顆?？赏ㄟ^抑制NF-κB信號通路中IκB,IKK磷酸化,減少NF-κB的入核轉(zhuǎn)錄,減輕腦CIRI后炎癥損傷。
杜忠劍[3]（2019）在《醒腦開竅針刺法聯(lián)合阿替普酶溶栓治療急性腦梗死患者的臨床研究》文中指出目的:通過觀察急性腦梗死患者的NIHSS評分、長谷川智能量表（HDS）評分、日常生活能力評定量表（Barthel指數(shù)）、炎癥因子指標以及并發(fā)癥發(fā)生情況,評價醒腦開竅針刺法聯(lián)合阿替普酶溶栓治療急性腦梗死患者的療效和安全性。方法:選取2016年9月至2018年9月在廣西中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院就診的64例急性缺血性腦卒中患者,隨機分為觀察組和對照組各32例。對照組按照指南給予注射用阿替普酶,按患者靜脈推注;而后45 mL加入到體重計算,0.9mg/kg體重（最大劑量為90mg）,總劑量的10%先靜脈推入,剩余劑量在隨后60 min內(nèi)靜脈滴注,1次/d,只給予1次。觀察組在對照組治療的基礎(chǔ)上介入醒腦開竅針刺法,1次/d。兩組均連續(xù)治療4周。觀察兩組的臨床療效,比較兩組的神經(jīng)功能缺損情況、認知功能、日常生活能力評定、相關(guān)炎癥因子以及常見并發(fā)癥發(fā)生情況。結(jié)果:兩組患者在NIHSS評分,HDS評分,Barthel指數(shù),炎性因子白細胞介素IL-6、IL-8、IL-12、IL-16和腫瘤壞死因子a,出現(xiàn)梗死后出血、吸入性肺炎、低蛋白血癥、使用抗焦慮藥物患者例數(shù)方面對比,觀察組療效優(yōu)于對照組（P<0.05）,差異有統(tǒng)計意義。結(jié)論:醒腦開竅針刺法聯(lián)合阿替普酶治療急性腦梗死具有較好的臨床療效,可改善患者臨床癥狀,提高患者生活質(zhì)量,改善炎癥因子水平,減少梗死后不良反應(yīng),并且具有良好的安全性。
劉姝伶[4]（2019）在《基于小膠質(zhì)細胞表型變化的清開靈對腦缺血大鼠的抗炎作用機制研究》文中研究指明缺血性中風是因栓塞或者血栓引起的大腦中血管阻塞。缺血性中風發(fā)生后的炎癥反應(yīng)會加重繼發(fā)的神經(jīng)元損傷,不利于大腦功能的恢復(fù)。小膠質(zhì)細胞是大腦中的常駐免疫效應(yīng)細胞,在生理情況下持續(xù)監(jiān)測大腦中的微環(huán)境。一旦局部缺血發(fā)生以后,小膠質(zhì)細胞被迅速激活,激活后的小膠質(zhì)細胞按照分泌因子和表面標記物的不同被定義為激活型小膠質(zhì)細胞（M1型）和選擇性激活型小膠質(zhì)細胞（M2型）,其中M1型小膠質(zhì)細胞主要發(fā)揮促炎和神經(jīng)毒性作用,M2型小膠質(zhì)細胞主要發(fā)揮抗炎和神經(jīng)保護作用。小膠質(zhì)細胞參與腦缺血后炎癥反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸,其表型轉(zhuǎn)換與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。目前,清開靈注射液在缺血性中風后抗炎作用的潛在機制尚未被徹底闡明。本課題基于小膠質(zhì)細胞表型變化探究清開靈注射液對腦缺血大鼠的抗炎作用機制,為研究中藥制劑提供實驗依據(jù)。目的（1）證明清開靈注射液對MCAO大鼠的腦保護作用及抗炎作用。（2）基于小膠質(zhì)細胞表型變化探究清開靈注射液對MCAO大鼠的抗炎作用機制。方法（1）健康雄性清潔級Sprague-Dawley大鼠,體重210-230g,隨機分為三組,分別為:假手術(shù)組、模型組（0.9ml/100g）、清開靈組（0.9ml/100g）。模型組和清開靈組用線栓法制備大腦中動脈阻塞（MCAO）模型,假手術(shù)組暴露并分離血管,但不插入線栓。清開靈組在MCAO同時腹腔注射用2倍生理鹽水稀釋后的清開靈注射液,缺血后4小時第二次給藥。從第二天開始,每天給藥2次,中間間隔12小時。假手術(shù)組和模型組腹腔注射等體積的生理鹽水。在MCAO后24小時采用Bederson神經(jīng)功能評分評定大鼠神經(jīng)功能缺損情況,用TTC染色法測定大鼠腦梗死體積,用HE染色法觀察大鼠大腦缺血灶周圍組織病理形態(tài)變化。通過酶聯(lián)免疫吸附法（Elisa）檢測大鼠腦組織中促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表達水平,用Western blot法檢測NF-κB通路p-p65/p65和p-IkBa的變化,觀察缺血性中風后清開靈注射液對NF-κB信號通路的作用以及對促炎細胞因子的影響。（2）健康雄性清潔級Sprague-Dawley大鼠,體重210-230g,隨機分為三組,分別為:假手術(shù)組、模型組（0.9ml/100g）、清開靈組（0.9ml/100g）。模型組和清開靈組制備MCAO模型,假手術(shù)組暴露并分離血管,但不插入線栓。清開靈組在MCAO同時腹腔注射用2倍生理鹽水稀釋的清開靈注射液,缺血后4小時第二次給藥,從第二天起每天給藥2次,中間間隔12小時。假手術(shù)組和模型組腹腔注射等體積的生理鹽水。在MCAO后24小時通過雙重免疫熒光染色法觀察M1型小膠質(zhì)細胞標記物CD16和M2型小膠質(zhì)細胞標記物CD206的表達。利用Q-PCR進一步檢測M1型小膠質(zhì)細胞特異性蛋白CD16、CD32、iNOS以及M2型小膠質(zhì)細胞特異性蛋白CD206、TGF-β的mRNA的表達,通過觀察小膠質(zhì)細胞表型變化探究清開靈注射液對腦缺血大鼠的抗炎作用機制。結(jié)果（1）神經(jīng)功能評分:假手術(shù)組大鼠無神經(jīng)功能損傷,模型組和清開靈組大部分大鼠出現(xiàn)左側(cè)偏癱,身體向左側(cè)打轉(zhuǎn),懸尾時左側(cè)前肢不能完全伸直,內(nèi)收并貼近胸壁。與假手術(shù)組相比,模型組大鼠神經(jīng)功能評分顯著升高（P<0.01）;給予清開靈注射液治療后,與模型組相比,大鼠神經(jīng)功能評分顯著降低（P<0.01）,神經(jīng)功能有一定程度的恢復(fù)。（2）TTC染色:假手術(shù)組大鼠腦組織呈現(xiàn)均勻的玫瑰紅色;與假手術(shù)組相比,模型組大鼠腦組織呈現(xiàn)明顯的白色缺血灶（P<0.01）;給予清開靈注射液治療后,與模型組相比,清開靈組大鼠的腦梗死體積顯著減小（P<0.01）。（3）HE染色:假手術(shù)組大鼠腦組織結(jié)構(gòu)完整,神經(jīng)元細胞排列整齊有序,胞漿豐富,淡染,胞核大,核仁清晰。膠質(zhì)細胞結(jié)構(gòu)完整,排列整齊。模型組大鼠腦組織可見大片梗死灶,神經(jīng)細胞大片消失,數(shù)量減少,排列紊亂,梗死灶周圍膠質(zhì)細胞明顯增生,壞死邊緣狹窄,中性粒細胞大量浸潤。清開靈組大鼠腦梗死區(qū)面積顯著減少,神經(jīng)元數(shù)目減少程度低,輕度變性,膠質(zhì)細胞增生不明顯,邊緣區(qū)增寬。（4）對NF-κB通路以及促炎因子的影響:大鼠大腦中動脈阻塞后,與假手術(shù)組相比,模型組促炎因子TNF-α（P<0.01）、IL-1β（P<0.01）、IL-6（P<0.01）的表達明顯升高;給藥后,與模型組相比,清開靈注射液可以抑制三種促炎因子TNF-α（P<0.01）、IL-1β（P<0.05）、IL-6（P<0.05）的表達,此外清開靈注射液降低了p-p65/p65的比值（P<0.05）,抑制了p-IkBa（P<0.05）的表達。證明清開靈注射液能夠抑制NF-κB通路的激活,抑制促炎因子的分泌,抗缺血后炎癥。（5）雙重免疫熒光染色及Q-PCR:雙重免疫熒光染色結(jié)果顯示清開靈注射液抑制MCAO后M1型小膠質(zhì)細胞的標記物CD16（P<0.01）的表達,升高M2型小膠質(zhì)細胞標記物CD206（P<0.01）的表達。Q-PCR結(jié)果顯示清開靈注射液能夠降低M1型小膠質(zhì)細胞蛋白標記物CD16、CD32、iNOS的mRNA表達,升高M2型小膠質(zhì)細胞蛋白標記物CD206、TGF-β的mRNA表達。結(jié)論（1）清開靈注射液可以減少MCAO大鼠腦梗死體積,降低大鼠神經(jīng)功能評分,改善大鼠腦組織的病理損害,清開靈注射液能夠抑制NF-κB通路的激活,減少促炎細胞因子的分泌,抑制缺血再灌注損傷大鼠的炎癥反應(yīng),發(fā)揮腦保護作用。（2）清開靈注射液可以抑制M1型小膠質(zhì)細胞標記物CD16的表達,促進M2型小膠質(zhì)細胞標記物CD206的表達,降低M1型小膠質(zhì)細胞特異性蛋白CD16、CD32、iNOS的mRNA的表達,上調(diào)M2型小膠質(zhì)細胞特異性蛋白CD206、TGF-β的mRNA的表達,促進小膠質(zhì)細胞向有益的表型M2型轉(zhuǎn)換。清開靈注射液能夠通過調(diào)控小膠質(zhì)細胞表型發(fā)揮抗炎作用。其對小膠質(zhì)細胞表型的調(diào)控可能與抑制NF-κB通路激活,降低促炎因子分泌有關(guān)。
張巖[5]（2019）在《利拉魯肽對腦缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響》文中指出目的本課題通過用不同劑量的利拉魯肽對腦缺血再灌注大鼠模型進行干預(yù),觀察缺血再灌注后大鼠腦組織炎性因子在不同時間點的表達變化,探討利拉魯肽對腦缺血再灌注后炎癥反應(yīng)的影響,為利拉魯肽在臨床應(yīng)用提供動物實驗的研究數(shù)據(jù)和理論基礎(chǔ)。方法選擇72只健康的雄性大鼠,體重在180-220g范圍內(nèi),隨機將大鼠分為假手術(shù)組,模型組,利拉魯肽小劑量干預(yù)組,利拉魯肽大劑量干預(yù)組。大鼠大腦中動脈閉塞2h后再灌注模型用傳統(tǒng)的Lona線栓法制作,于再灌注6h,12h,24h,7d四個時間點應(yīng)用Zeal Longa神經(jīng)學評分法分別對大鼠進行評分;大鼠腦梗死灶體積用TTC染色法測定,神經(jīng)元變性壞死用HE染色法觀測,TNF-α,IL-6含量用免疫組織化學法檢測,TNF-α,IL-6表達變化用原位雜交法測定。結(jié)果神經(jīng)功能缺損的評分結(jié)果:假手術(shù)組神經(jīng)功能缺損評分為0分,其余四組大鼠經(jīng)神經(jīng)功能評分評定后,都存在不同程度神經(jīng)功能缺損（P<0.01）。其中出現(xiàn)神經(jīng)功能評分損害較嚴重的是模型組大鼠,利拉魯肽大,小劑量干預(yù)組在12h,24h,7d時間點神經(jīng)功能缺損評分較模型組降低有顯著差異（P<0.05）;不同劑量利拉魯肽干預(yù)組大鼠7d這個時間點神經(jīng)功能缺損評分降低相互比較后亦有顯著差異（P<0.05）。通過TTC染色檢測大鼠腦梗死體積結(jié)果:假手術(shù)組的大鼠并無腦梗死出現(xiàn),其它四組大鼠的腦梗死體積均出現(xiàn)明顯增高（P<0.01）;利拉魯肽干預(yù)組大鼠與模型組大鼠相比較,利拉魯肽干預(yù)組大鼠24h、7d兩個時間點腦梗死體積降低（P<0.05）,不同劑量利拉魯肽干預(yù)組大鼠比較,24h、7d兩個時間點腦梗死體積降低有顯著差異（P<0.05）。HE染色結(jié)果:在光鏡下觀察,大鼠腦缺血再灌注6h后就能見到神經(jīng)細胞的細胞核固縮,細胞形態(tài)的改變,但是神經(jīng)元周圍并未見到明顯水腫;而再灌注24h,7d后腦細胞損害效應(yīng)已經(jīng)明顯增加,光鏡下觀察,可見大量深染的神經(jīng)元細胞核固縮、致密,大部分神經(jīng)細胞結(jié)構(gòu)消失,而且神經(jīng)元周圍水腫明顯。通過免疫組織化學檢測TNF-α表達結(jié)果:各組大鼠腦缺血再灌注損傷后腦組織TNF-α陽性表達明顯增高,與假手術(shù)組大鼠相比較有顯著差異（P<0.01）;利拉魯肽小劑量干預(yù)組大鼠與模型組大鼠比較,利拉魯肽小劑量干預(yù)組大鼠在腦缺血再灌注損傷12h、24h兩個時間點TNF-α的陽性表達明顯降低并有明顯差異（P<0.01）;與模型組比較利拉魯肽大劑量組大鼠腦缺血再灌注損傷12h-7d時TNF-α陽性表達明顯降低,與模型組比較有明顯差異（P<0.01）,利拉魯肽不同劑量組大鼠24h、7d兩個時間點TNF-α的陽性表達相互比較有顯著差異（P<0.01）。IL-6免疫組化測定結(jié)果:各組大鼠腦缺血再灌注損傷后腦組織IL-6陽性表達與假手術(shù)組大鼠比較,均有顯著差異（P<0.01）;利拉魯肽干預(yù)組與模型組比較,利拉魯肽干預(yù)組大鼠,腦缺血再灌注損傷12h、24h,7d三個時間點IL-6的陽性表達明顯降低,有顯著差異性（P<0.01）;應(yīng)用不同劑量利拉魯肽組相互比較,大鼠腦缺血再灌注損傷24h、7d兩個時間點腦組織IL-6陽性表達亦有明顯差異（P<0.01）.通過原位雜交的方法檢測大鼠腦缺血再灌注損傷后TNF-αmRNA表達結(jié)果:利拉魯肽小劑量組大鼠與模型組比較,小劑量組大鼠腦組織腦缺血再灌注損傷12h、24h,7d三個時間點TNF-αmRNA陽性表達降低,兩組比較有明顯差異（P<0.01）;利拉魯肽大劑量組與模型組大鼠比較,利拉魯肽大劑量組大鼠腦缺血再灌注損傷6h,12h,24h、7d四個時間點大鼠腦組織TNF-αmRNA陽性表達明顯降低,有顯著差異性（P<0.01）;與利拉魯肽小劑量組比較利拉魯肽大劑量組24h、7d兩個時間點TNF-αmRNA陽性表達降低有顯著差異（P<0.01）。組內(nèi)比較在24h時間點,三組陽性表達有明顯差異（P<0.01）。通過原位雜交的方法檢測大鼠腦缺血再灌注損傷IL-6 mRNA表達結(jié)果:利拉魯肽小劑量組大鼠與模型組相比較,利拉魯肽小劑量組大鼠在腦缺血再灌注損傷12h,24h,7d三個時間點IL-6 mRNA表達明顯降低,兩組比較有明顯差異性（P<0.01）;大劑量利拉魯肽組與模型組比較,大劑量利拉魯肽組在大鼠腦缺血再灌注損傷6h、12h、24h,7d四個時間點IL-6 mRNA表達明顯降低,兩組比較有明顯差異（P<0.01）;大劑量利拉魯肽組與小劑量利拉魯肽組比較,利拉魯肽大劑量組大鼠腦組織腦缺血再灌注損傷12h、24h,7d三個時間點IL-6 mRNA陽性表達明顯降低,兩組比較有顯著差異（P<0.01）,組內(nèi)比較,三組在大鼠腦缺血再灌注損傷24h時,IL-6 mRNA陽性表達具有顯著差異（P<0.01）。結(jié)論此研究證明了利拉魯肽可以對大鼠腦缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)機制發(fā)生影響,應(yīng)用利拉魯肽干預(yù)后,腦缺血大鼠的腦組織TNF-α、IL-6表達在再灌注后各個時間點表達均有所降低,而且神經(jīng)功能評分改善,腦梗死體積較不干預(yù)組降低,且大劑量干預(yù)組效果更加顯著。并且這些結(jié)果都被驗證有統(tǒng)計學意義。
王珀[6]（2019）在《PI3K抑制劑ZSTK474對小鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究》文中提出背景:炎癥、免疫反應(yīng)在腦缺血/再灌注損傷過程中發(fā)揮著重要作用,調(diào)節(jié)腦缺血/再灌注損傷后的炎癥、免疫反應(yīng),可改善缺血后一系列反應(yīng),從而起到腦保護作用。其中,小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞作為神經(jīng)系統(tǒng)的固有免疫細胞,是最具有調(diào)控潛力的靶點。在受損的中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）,如腦缺血/再灌注損傷狀態(tài)下,小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞可以可逆地改變他們的表型向“有害的”或“有益的”狀態(tài)轉(zhuǎn)變,從而調(diào)控炎癥反應(yīng),發(fā)揮腦保護作用。ZSTK474是I類PI3K抑制劑,是正進行I期臨床試驗的抗腫瘤藥物,且無明顯毒副作用。目前已證實,該藥物在膠原性關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性硬化動物模型中發(fā)揮抗炎和免疫調(diào)節(jié)的作用。我們假設(shè)ZSTK474可以通調(diào)控制炎癥、免疫反應(yīng),改善腦缺血/再灌注損傷的預(yù)后。方法:實驗中所用動物為6-8周C57/BL6雄性小鼠,我們將小鼠隨機分為三組:假手術(shù)組、對照組以及ZSTK474治療組。本實驗中采取Longa改良線栓法誘導(dǎo)小鼠大腦中動脈缺血/再灌注模型,缺血時間為60分鐘,后輕輕將線栓拔出5mm以實現(xiàn)大腦中動脈再灌注。ZSTK474治療組于造模后6小時開始灌胃給藥,給藥劑量為200mg/kg,1天1次,連續(xù)給藥3天后觀察腦損傷程度;假手術(shù)組及對照組給予等劑量PBS緩沖液灌胃。在造模后24小時,48小時和72小時對各組進行行為學功能評分;缺血/再灌注后72小時評價各組腦梗死體積以及進行組織病理染色觀察炎性細胞浸潤,并采用免疫熒光法觀察小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞標記物Iba1、星形膠質(zhì)細胞標記物GFAP、“有益的”小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞標記物CD16/32、“有害的”小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞標記物CD206的表達情況;RT-PCR檢測“有害的”表型標記物CD32、CD16、CD86 mRNA表達;“有益的”表型標記物CD206、Arg1、YM-1 mRNA表達;RT-PCR檢測造模后24小時,48小時和72小時的炎性細胞因子白介素1β,白介素6,腫瘤壞死因子α,白介素10和轉(zhuǎn)化生長因子β的基因的表達水平;用酶聯(lián)免疫吸附試驗驗證造模后48小時的這些炎性細胞因子的蛋白表達水平。通過蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測AKT、p-AKT、p70S6K和p-p70S6k的表達。最終運用Tukey檢驗和Mann–Whitney U檢驗對各組數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,比較各組差異。結(jié)果:與對照組比較,ZSTK474治療組明顯改善了缺血/再灌注損傷小鼠的神經(jīng)功能評分,減少了腦梗死面積,減輕了缺血灶炎性細胞的浸潤;ZSTK474治療組與對照組比較,抑制缺血半暗帶小膠質(zhì)細胞、星形膠質(zhì)細胞的增殖,同時調(diào)控小膠質(zhì)/巨噬細胞的分化使其保持在“有益的”表型,改變了腦內(nèi)的炎癥微環(huán)境,抑制炎性細胞因子的分泌,促進抗炎性細胞因子的產(chǎn)生,減輕中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷。我們研究發(fā)現(xiàn)ZSTK474治療組p-AKT及其下游產(chǎn)物p-p70S6K的表達較對照組減低。結(jié)論:腦缺血/再灌注損傷小鼠模型中,ZSTK474可以抑制小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞的增殖,調(diào)控小膠質(zhì)/巨噬細胞的分化,進而抑制促炎細胞因子分泌、促進抗炎細胞因子產(chǎn)生,通過調(diào)節(jié)腦缺血/再灌注損傷誘發(fā)的炎癥、免疫反應(yīng),發(fā)揮腦保護作用。這種腦保護作用,可能與ZSTK474調(diào)控PI3K/AKT/mTORC1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)。ZSTK474在MCAO小鼠腦缺血/再灌注損傷模型中發(fā)揮腦保護作用,具有治療缺血性卒中的潛力,為治療缺血性卒中提供了新的治療策略。
白舒霞[7]（2013）在《近期感染急性腦梗死中醫(yī)證型探討及其與炎性反應(yīng)因子的研究》文中研究說明研究目的：①通過對近期感染急性腦梗死患者的中醫(yī)證候進行橫斷面調(diào)查,探討近期感染急性腦梗死的中醫(yī)證候分布,為尋找近期感染急性腦梗死的中醫(yī)證侯變化規(guī)律，制定防范措施提供依據(jù)。②在近期感染急性腦梗死疾病中，炎性反應(yīng)因子相互調(diào)控，參與了腦梗死病急性期的血液循環(huán)、血管的病理變化過程。我們假定炎性反應(yīng)還參與了近期感染急性腦梗死患者的中醫(yī)證候的形成。調(diào)查近期感染急性腦梗死患者的炎性反應(yīng)因子與其中醫(yī)證候的相關(guān)性，從而探討近期感染急性腦梗死患者中醫(yī)證候形成的生物學基礎(chǔ)，從而為證候研究的客觀化提供理論依據(jù)。研究方法：①理論探討:回顧腦梗塞（中風）現(xiàn)代醫(yī)學研究和中醫(yī)證候研究概況,中風中醫(yī)證候分布及演變規(guī)律，并探討中風中醫(yī)證候與相關(guān)的因素的研究進展。②確定急性腦梗塞中西醫(yī)診療標準，研究對象的納入和排除標準，采取橫斷面調(diào)查的方式,確定研究對象為92例近期感染急性腦梗死患者，采集92例患者的一般情況、階段信息、中醫(yī)四診信息實驗室檢測結(jié)果等資料。由嚴格培訓(xùn)的專業(yè)人員,對研究對象集中進行統(tǒng)一的證候評價，將結(jié)果錄入數(shù)據(jù)庫。③按中風病辨證診斷標準，將92例近期感染急性腦梗死患者分類，即將收集的病例分為風、火、痰、瘀、氣虛、陰虛六型。④采集全部病例的血液標本；每例病例抽取空腹靜脈血6ml，用促凝管收集、立即派專人送往實驗室，離心3000r∕min分離血清，放入-80℃的冰箱保存，最后進行統(tǒng)一檢測，所有過程均嚴格執(zhí)行無菌操作，采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法（ELISA）檢測血清IL-1β、TGF-β、sICAM-l、sEPCR、MMP-9的含量，實驗過程在湖北中醫(yī)藥大學曇華林校區(qū)實驗室完成測定，所有操作均按說明書要求進行。將所檢測的結(jié)果集中收集錄入數(shù)據(jù)庫。統(tǒng)計分析將采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件進行計算，不同組的計量資料采用x±s進行統(tǒng)計描述，采用t檢驗比較組間差異。P<0.05認為差別有統(tǒng)計學意義。計數(shù)資料使用頻數(shù)表（構(gòu)成比）進行統(tǒng)計描述。炎性反應(yīng)因子與證候要素的相關(guān)性采用相關(guān)性檢驗的方法。結(jié)果：①92例研究對象總體上以氣虛證、痰證、火證出現(xiàn)頻率最高。經(jīng)分析,結(jié)合各證候要素在近期感染急性腦梗死患者中所占比例（氣虛證53.3%、痰證45.7%、火證42.4%）,可見,近期感染急性腦梗死患者主要證候表現(xiàn)均為氣虛證、痰證、火熱證。②研究對象中表現(xiàn)為一證獨見和二證并見的比例最高，分別是42.4%、35.9%。一證獨見的患者中,以“氣虛”、“痰”和“火熱”型最多，分別占33.3%、28.2%、25.6%；二證并見的,以“痰+氣虛”型最多，是42.4%,其次是“火熱+氣虛”型和“風+火熱”型，分別占18.2%，12.1%。③炎性反應(yīng)因子IL-1β含量在火證中明顯高于非火熱證型，經(jīng)t檢驗P<0.05，差別有統(tǒng)計學意義，并且IL-1β含量在氣虛證組明顯高于非氣虛證組，經(jīng)t檢驗P<0.05，差別有統(tǒng)計學意義；相關(guān)性分析結(jié)果，火證、氣虛證與IL-1β水平相關(guān)，P<0.01，有統(tǒng)計學意義；④炎性反應(yīng)因子TGF-β含量在痰證中高于非痰證，經(jīng)t檢驗P<0.05，差別有統(tǒng)計學意義，相關(guān)性分析結(jié)果，痰證與TGF-β水平正相關(guān)，P<0.01，瘀證與TGF-β水平負相關(guān)，P<0.01有統(tǒng)計學意義。⑤炎性反應(yīng)因子sICAM-1含量在瘀證中明顯高于非瘀證型，經(jīng)t檢P<0.05，差別有統(tǒng)計學意義，sICAM-1含量在痰證中高于非痰證，經(jīng)t檢驗P<0.05，差別有統(tǒng)計學意義；相關(guān)性分析結(jié)果，瘀證、痰證與sICAM-1水平正相關(guān)，P<0.01，有統(tǒng)計學意義；⑥炎性反應(yīng)因子MMP-9、sEPCR含量在血瘀證明顯高于非血瘀證，經(jīng)t檢驗P<0.05，差別有統(tǒng)計學意義，相關(guān)性分析結(jié)果，瘀證與MMP-9、sEPCR水平正相關(guān)P<0.01，有統(tǒng)計學意義。結(jié)論：①近期感染急性腦梗死的患者以氣虛、痰、火為主要證候表現(xiàn),證候要素的組合較為簡單,多表現(xiàn)為氣虛、痰、火的單獨出現(xiàn)或幾個證型相互組合；②近期感染急性腦梗死的患者血液中細胞白介素-1β（IL-lβ）的含量變化與火證、氣虛證之間有明顯的相關(guān)性，可能成為判定火證、氣虛證的指標之一；③近期感染急性腦梗死的患者血液中轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）的含量變化與痰證有相關(guān)性，與瘀證負相關(guān)，可能成為判定痰證和瘀證的指標之一；④近期感染急性腦梗死的患者血液中可溶性細胞粘附因子-1（sICAM-1）的含量變化與瘀血證、痰證有明顯的相關(guān)性，可能成為判定瘀血證、痰證的指標之一。⑤近期感染急性腦梗死的患者血液中可容性細胞蛋白C（sEPCR）、金屬蛋白酶9（MMP-9）的含量變化與瘀血證有明顯的相關(guān)性，可能成為判定瘀血證指標之一。
孫琳琳[8]（2013）在《電針對腦缺血再灌注模型大鼠炎性反應(yīng)相關(guān)信號的影響及機制研究》文中進行了進一步梳理研究背景：中風具有高發(fā)病率、高致殘率、高復(fù)發(fā)率,僅中國每年便新增150-200萬病例,其中,缺血性腦中風為最常見中風類型,占全部中風的60-80%。越來越多研究表明,炎癥過程參與中風后損傷級聯(lián)反應(yīng),可能是造成腦缺血后再灌注損傷的主要原因。早期溶栓、抗凝治療為循證醫(yī)學確認的有效治療方法,但存在嚴格的時間窗限制,在長期恢復(fù)過程中效果不顯著。大量臨床資料和實驗研究表明,針刺為治療缺血性腦中風的有效手段,急性期、恢復(fù)期、后遺癥及康復(fù)期均有顯著效果。研究目的：本課題通過觀察針刺干預(yù)腦缺血再灌注模型大鼠后,中樞損傷局部、對側(cè)腦組織和外周血中應(yīng)激-損傷-修復(fù)信號鏈中關(guān)鍵信號的動態(tài)變化,從信號傳導(dǎo)鏈、病程發(fā)展過程、機體功能整體調(diào)控的綜合角度,探討針刺治療腦缺血再灌注后炎癥損傷的機制,用現(xiàn)代生物醫(yī)學研究手段,闡明針灸對損傷-應(yīng)激與損傷-修復(fù)相關(guān)疾病過程的作用機制,為臨床治療方案提供確切的實驗室依據(jù)。研究方法：1、將大鼠按隨機數(shù)字表分成空白對照組、假手術(shù)組和模型對照組,每組10只動物。對造模后動物進行神經(jīng)功能評分,采用TTC染色觀察大腦梗死情況,HE染色觀察腦組織形態(tài)學變化。2、將大鼠按隨機數(shù)字表分成空白對照組（10只動物）、假手術(shù)組（10只動物）和造模組,造模成功（根據(jù)神經(jīng)功能評分）的大鼠根據(jù)隨機數(shù)字表又分為模型對照組、尼莫地平組、針刺治療組（百會透刺印堂配伍人中穴）,共4組,每組又分為12h、24h、48h.72h.96h.144h6個時程,每個時程10只動物。取外周血清,ELISA（?）去檢測炎性反應(yīng)相關(guān)應(yīng)激信號-ACTH,內(nèi)源性危險信號-Hsp70,啟動和調(diào)節(jié)信號-IL-6,IL-1β,損傷效應(yīng)信號-TNFα的含量；取腦組織,冰凍切片,免疫組化檢測患側(cè)與健側(cè)腦組織中炎性反應(yīng)相關(guān)信號：啟動和調(diào)節(jié)信號-IL-6、IL-1β,損傷效應(yīng)信號-TNFα,MMP-9,局部炎癥損傷相關(guān)粘附、趨化因子-ICAM-1,MCP-1,以及修復(fù)信號-TGFβ的表達。3、將大鼠按隨機數(shù)字表分成空白對照組（10只動物）和造模組,造模成功（根據(jù)神經(jīng)功能評分）的大鼠根據(jù)隨機數(shù)字表又分為模型對照組、針刺治療1組（百會透刺印堂配伍人中穴）、針刺治療2組（百會配伍患側(cè)足三里穴）,共4組,每組又分為12h、24h、48h、72h、96h、144h6個時程,每個時程10只動物。取取腦組織,冰凍切片免疫組化檢測患側(cè)組織中IL-6,TNFα,MCP-1,TGFβ的表達。研究結(jié)果：1、模型評價：TTC染色發(fā)現(xiàn)缺血局部腦組織出現(xiàn)典型染色缺失,呈現(xiàn)白色,與大腦中動脈支配區(qū)域相符,視交叉前后梗死灶比較穩(wěn)定。HE染色鏡下觀察發(fā)現(xiàn),梗死中心區(qū)染色變淺,細胞數(shù)目減少,細胞核固縮,核仁變小,形態(tài)不規(guī)則；問質(zhì)水腫；內(nèi)皮細胞腫脹；可以見到大量網(wǎng)格狀空泡。2、針刺對血清中炎性反應(yīng)相關(guān)信號的影響：腦缺血再灌注模型大鼠血清中炎性反應(yīng)相關(guān)信號ACTH,IL-1β,IL=6,TNF α,Hsp70,在損傷發(fā)展過程中呈現(xiàn)典型雙峰曲線模式,且各信號變化趨勢相似。ACTH在12h到達第一峰峰值,在48h達第二.峰峰值；IL-1β, IL-6, TNFα, Hsp70均在24h到達第一峰峰值,在72-96h達第二峰峰值。假手術(shù)組ACTH,IL-6,TNFα,Hsp70呈現(xiàn)相似雙峰表達趨勢,IL-1β僅72h高于生理水平。給予百會透刺印堂配伍人中電針治療后,可顯著下調(diào)外周血請中炎性反應(yīng)信號ACTH,IL-1β,IL-6,TNF α, Hsp70的第一峰表達水平；顯著下調(diào)ACTH,IL-1β,TNFα的第二峰表達水平;上調(diào)1L-6的第二峰表達水平。3、針刺對腦組織中炎性反應(yīng)相關(guān)信號的影響：腦缺血再灌注模型大鼠患側(cè)腦組織中炎性反應(yīng)相關(guān)信號IL-6,IL-1β,MMP-9, ICAM-1,MCP-1,TGFβ,在損傷發(fā)展過程中呈現(xiàn)典型雙峰曲線模式；均在12-24h到達第一峰峰值;IL-6在96h時到達第二峰峰值；IL-1β,MMP-9在48h即到達第二峰峰值；ICAM-1,MCP-1,TGFβ在72h到達第二峰峰值；TNFα第一峰于第二峰融合,12h開始持續(xù)增高,24h到達峰值,保持較高水平至72h。假手術(shù)組呈現(xiàn)相似表達趨勢。腦缺血再灌注模型大鼠健側(cè)腦組織中炎性反應(yīng)相關(guān)信號均呈現(xiàn)典型雙峰信號IL-6,IL-1β,TNFα,ICAM-1,MCP-1,TGFβ在12-24h到達第一峰峰值；IL-6在96h時到達第二峰峰值；IL-1β自48h持續(xù)增高,144h時到達最高值；TNFα在48h到達第一峰峰值；ICAM-1,MCP-1,TGFβ在72h到達第二峰峰值；MMP-9在48h達到第一峰峰值,自72h持續(xù)增高,144h到達最高值。假手術(shù)組呈現(xiàn)相似表達趨勢。模型大鼠給予百會透刺印堂配伍人中電針治療后,對雙側(cè)腦組織中炎性反應(yīng)相關(guān)信號的影響是：對患側(cè)腦組織中IL-6,IL-1β,TNFα,MMP-9,MCP-1,TGFβ的表達水平均有全程下調(diào)作用；對健側(cè)腦組織中IL-6,MMP-9,MCP-1,TGFβ的表達水平均有全程下調(diào)作用；對健側(cè)腦組織中IL-6,MMP-9損傷急性期（48h）的表達水平有上調(diào)作用；而針刺治療組ICAM-1的表達在患側(cè)腦組織中72h前呈增高趨勢,在健側(cè)腦組織中48h前呈增高趨勢。針刺治療后,患側(cè)腦組織中IL-6,ICAM-1第二峰的表達提前出現(xiàn)；健側(cè)腦組織中,IL-6,IL-1β,MMP-9,ICAM-1,MCP-1,TGFβ第二峰的表達提前出現(xiàn)。4、針刺不同穴組對患側(cè)腦組織中炎性反應(yīng)相關(guān)信號的影響：百會穴配伍足三里穴電針治療,對比選取百會透刺印堂配伍人中穴,能夠顯著下調(diào)模型大鼠患側(cè)腦組織中炎性反應(yīng)相關(guān)信號：IL-6,TNFα,MCP-1,TGFβ的全程表達水平和第一峰、第二峰的峰值；IL-6,TGFβ第二峰的表達提前。研究結(jié)論：1、血管內(nèi)栓阻斷線法腦缺血再灌注大鼠模型,造成大腦中動脈供血區(qū)域的梗塞并產(chǎn)生功能障礙,且具有一定的穩(wěn)定性；腦缺血再灌注損傷啟動了機體局部與整體,包括外周血清、雙側(cè)腦組織中炎性／免疫相關(guān)的應(yīng)激-損傷-修復(fù)信號鏈；模型復(fù)制成功。2、電針百會透刺印堂配伍人中穴對機體應(yīng)激-損傷-修復(fù)信號鏈發(fā)揮網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)作用,整體影響了外周血清、雙側(cè)腦組織中炎性反應(yīng)相關(guān)應(yīng)激信號、內(nèi)源性危險信號、啟動和調(diào)節(jié)信號、損傷效應(yīng)信號、聯(lián)絡(luò)信號、修復(fù)信號的表達；電針可能通過抑制機體過度應(yīng)激、減輕炎性損傷過程、促進細胞間聯(lián)系、提前啟動修復(fù)功能、調(diào)動健側(cè)腦組織進行調(diào)節(jié)代償減輕缺血再灌注損傷。3、百會配伍足三里穴對比百會透刺印堂配伍人中穴,能夠更好調(diào)節(jié)機體對炎癥應(yīng)激、損傷的反應(yīng),減輕炎性反應(yīng)及炎癥損傷,更早啟動修復(fù)功能；提示頭部穴位、肢體穴位聯(lián)合運用干預(yù)炎癥損傷的效應(yīng)優(yōu)于單純頭部取穴。
郭海蘭[9]（2010）在《雙翅目昆蟲誘發(fā)荷斯坦奶牛產(chǎn)生社會性聚集行為機制與危害的研究》文中研究表明為了研究雙翅目昆蟲在荷期坦奶牛集中飼養(yǎng)中產(chǎn)生的危害,從行為、神經(jīng)內(nèi)分泌和免疫機制等方面研究其產(chǎn)生危害的機制。實驗共分為四個部分:第一部分雙翅目昆蟲的分類鑒定、季節(jié)消長和囂張期一日動態(tài)研究,從2009年的4～10月每月選取6～15d,作為一個實驗期,共七個實驗期。在內(nèi)蒙古旭日牧場每天8次在不同的時間點記錄奶牛場環(huán)境溫度、濕度,同時,在此時間點通過定點、定人的方法采集雙翅目昆蟲。結(jié)果:奶牛場雙翅目昆蟲各月的種類與數(shù)目不同,主要包括蠅和蚊兩大類,但主要是由蠅類組成,而蠅類主要包括家蠅和廄螫蠅兩種。7月、8月、9月是雙翅目活動的數(shù)量高峰即囂張期,囂張期一天的主要活動時間為8:00～17:00時,家蠅的數(shù)量高峰也出現(xiàn)在7～9月份,而廄螫蠅數(shù)量高峰則出現(xiàn)在9月份。第二部分雙翅目昆蟲的活動誘發(fā)奶牛產(chǎn)生社會性聚集行為,實驗與觀察昆蟲的實驗期同步,按照奶牛產(chǎn)奶量、乳脂率、乳蛋白率,氣質(zhì)類型相似的原則,每月選擇（二胎約4歲）泌乳前期、中期和后期健康荷斯坦奶牛各4頭,共12頭實驗?zāi)膛?。采用肉眼目測與攝像機跟蹤攝像相結(jié)合的方法對侵襲奶牛的雙翅目昆蟲數(shù)目和奶牛的護身行為進行觀察。結(jié)果:7月、8月、9月是雙翅目昆蟲侵襲奶牛最為嚴重的時期,其侵襲奶牛雙翅目昆蟲的數(shù)量（只/20min）顯著高于6月、10月（P<0.05）,極顯著高于5月（P<0.01）;侵襲奶牛的家蠅的數(shù)量高峰在6月、7月、8月,其中7月家蠅的數(shù)量顯著高于6月（P<0.05）,與8月無顯著差異（P>0.05）;而侵襲奶牛的廄螫蠅的數(shù)量高峰出現(xiàn)在9月份,9月份廄螫蠅的數(shù)量顯著高于8月和10月（P<0.05）。奶牛受到雙翅目昆蟲的侵襲時,首先從行為上發(fā)生改變,不斷擺尾、扇耳、顫動皮膚、甩頭、抬腿來躲避雙翅目昆蟲的侵襲,隨著昆蟲密度的增大,奶牛的護身行為頻率也不斷增大。其中,擺尾是動物躲避雙翅昆蟲的侵襲頻率最高的護身行為。9月下旬,當奶牛向陽體側(cè)廄螫蠅的數(shù)量達到25只/min時,奶牛產(chǎn)生社會性聚集行為來共同對抗廄螫蠅的侵害,奶牛聚集行為發(fā)生頻率、聚集行為持續(xù)時間與侵襲奶牛體側(cè)廄螫蠅的數(shù)量正相關(guān)。第三部分雙翅目昆蟲的活動對奶牛生產(chǎn)性能的影響,實驗設(shè)計同第二部分。每個實驗期結(jié)束時采集奶樣進行分析,結(jié)果表明,9月份是奶牛受廄螫蠅侵害最為嚴重的時期。各月的平均奶產(chǎn)量、乳脂率顯著下降（P<0.05）,同時,牛奶中體細胞數(shù)量顯著升高（P<0.05）。第四部分雙翅目昆蟲的活動對奶牛神經(jīng)內(nèi)分泌和免疫機能的影響,實驗設(shè)計同第二部分,每個實驗期結(jié)束時采血并進行分析。結(jié)果:9月份,雙翅目昆蟲誘發(fā)奶牛產(chǎn)生聚集行為時,心率對其應(yīng)答是心動過緩;各月的直腸溫度無顯著差異（P>0.05）;各月血清中的ALD、CK、LDH、GPT含量均無顯著差異（P>0.05）;γ-GT的含量5月顯著高于6月、7月、9月和10月（P<0.05）,CPK的含量9月顯著高于5月、6月和10月（P<0.05）。9月份,奶牛血清中的NE和EPI含量與7月份無顯著差異（P>0.05）,但顯著高于其它各月（P<0.05）;CRH含量9月份顯著高于10月（P<0.05）;ACTH含量9月份與除5月以外的其它各月相比差異不顯著（P>0.05）;COR含量9月份最低,與其它各月相比差異顯著（P<0.05）; TRH、T4含量各月之間無差異（P>0.05）;T3含量9月份極顯著低于7月份（P<0.01）,與7月、8月份相比差異不顯著（P>0.05）; TSH濃度9月份顯著低于10月份（P<0.05）; PRL含量9月份顯著低于6月份（P<0.05）,與7月、8月份相比無顯著差異（P>0.05）;GH含量9月份顯著低于7月份（P<0.05）,與8、9月份相比無顯著差異（P >0.05）;INS含量各月之間差異不顯著（P >0.05）。奶牛血清中IL -1β濃度9月顯著高于5月（P<0.05）;IL-2濃度各月之間沒有顯著差異（P>0.05）;IL-6濃度9月顯著高于10月,與5月相比無顯著差異（P<0.05）;IL-8濃度9月份最高,顯著高于8月以外的其它各月（P<0.05）;TNF-α濃度9月份顯著高于其它各月（P<0.05）。CD3+T%含量9月份顯著低于除10月以外的其它各月（P<0.05）;CD4+%含量也是9月份最低,顯著低于6月、7月份（P<0.05）;CD8+T%含量9月份顯著低于7月（P<0.05）,與8月無顯著差異（P>0.05）,但顯著高于6月、10月份（P<0.05）;CD21+B%含量9月份顯著高于7月、8月份（P<0.05）,但與6月、10月份相比無顯著差異（P>0.05）。CD4+/CD8+T比值7月、9月最高。9月份雙翅目昆蟲中的廄螫蠅誘發(fā)奶牛產(chǎn)生社會性聚集行為時,奶牛的產(chǎn)奶量和乳脂率分別比產(chǎn)奶量最高的6月份下降了33%,1.69%,而體細胞總數(shù)則升高到66萬個/ml,同時,神經(jīng)內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)發(fā)生改變來對抗應(yīng)激,奶牛能量的分配已從生產(chǎn)轉(zhuǎn)向生存與生產(chǎn)并存。此時,奶牛產(chǎn)生的應(yīng)激屬于惡性應(yīng)激,不僅影響奶牛的福利,也影響牛奶的安全。
洪銀珠[10]（2007）在《針刺對實驗性高血脂合并腦缺血大鼠炎癥反應(yīng)及神經(jīng)保護機制的影響》文中提出研究目的腦血管病是臨床常見病,其發(fā)病率高、預(yù)后較差,已成為中老年人第一位致殘原因和前三位致死原因,嚴重威脅著人類健康。其發(fā)病率高、預(yù)后較差,給人們的生活和國家經(jīng)濟帶來極大負面影響。近年來,對其發(fā)病機制的研究成為現(xiàn)代醫(yī)學研究的熱點之一。大量研究資料表明,高脂血癥是腦卒中、心臟猝死、心肌梗死和冠心病重要而獨立的危險因素,所以醫(yī)學界非常重視對高脂血癥的研究,有效地調(diào)節(jié)血脂水平就可預(yù)防腦血管疾病的發(fā)生。因此尋找適當有效的早期防治措施是針灸臨床與實驗研究的重要課題之一。研究方法本實驗以高脂飼料喂養(yǎng)大鼠,造成大鼠高脂血癥,再對大鼠施以大腦中動脈FeCl3刺激血栓性閉塞法,造成高血脂合并局灶性腦缺血模型,觀察大鼠血脂四項、腦缺血炎癥反應(yīng)相關(guān)指標的表達以及電針豐隆、三陰交,針刺百會、人中穴對各項指標的影響。（1）應(yīng)用生化法觀察高血脂大鼠腦缺血后血脂四項變化及針刺的影響;（2）應(yīng)用神經(jīng)行為學指標觀察腦缺血后神經(jīng)癥狀的改變情況;應(yīng)用HE染色法觀察缺血側(cè)腦組織神經(jīng)元缺血壞死情況及針刺的作用;（3）采用ELISA法觀察針刺前后大鼠大腦勻漿TNF-α、IL-1β、IL-6含量的變化;（4）采用免疫組化方法觀察針刺前后大鼠缺血區(qū)ICAM-1、VCAM-1表達的變化;（5）采用ELISA法觀察針刺前后大鼠大腦勻漿NGF、BDNF、bFGF含量的變化;（6）采用ELISA法觀察針刺前后大鼠大腦勻漿NSE含量的變化。結(jié)果1.經(jīng)典高脂配方飼料喂養(yǎng)高血脂模型大鼠CHO、LDL-C、TG有顯著升高,說明本實驗高血脂造模成功。HE染色結(jié)果可見,腦缺血損傷大鼠海馬區(qū)大量神經(jīng)元變性壞死,排列紊亂,各組有不同程度的神經(jīng)元脫失現(xiàn)象等病理改變。這種變化以高血脂合并腦缺血模型組最為嚴重。大鼠神經(jīng)行為癥狀評分結(jié)合HE染色,說明本實驗局灶性腦缺血實驗?zāi)Ｐ统晒Αａ槾棠軠p輕神經(jīng)元的變性脫失現(xiàn)象。2.針刺可降低CHO、LDL-C,升高HDL-C的含量,針刺可以有效地調(diào)節(jié)高脂血癥血脂水平。3.電針可降低高血脂合并腦缺血的CHO、LDL-C、TG含量,提高HDL-C含量。高血脂合并腦缺血治療Ⅰ組的療效更為顯著,說明預(yù)防性針刺治療高血脂更能顯著降低血液中的CHO、LDL-C含量,提高HDL-C的含量,改善血液循環(huán),有利于中風患者的康復(fù)。4.缺血損傷發(fā)生后,模型大鼠大腦勻漿中TNF-α、IL-1β、IL-6表達水平顯著升高。電針一方面可降低腦缺血大鼠大腦勻漿中TNF-α、IL-1β表達水平,另一方面提高IL-6表達水平,抑制炎癥反應(yīng)從而起到腦保護作用。治療Ⅰ組的效果顯著優(yōu)于治療Ⅱ組,表明提前對高脂血癥干預(yù)治療可有效地預(yù)防和減輕腦缺血損傷程度。5.缺血損傷發(fā)生后,模型大鼠大腦織缺血區(qū)的ICAM-1、VCAM-1陽性表達總面積及積分光密度顯著升高。電針有效得降低腦缺血大鼠腦組織缺血區(qū)的ICAM-1、VCAM-1陽性表達總面積及積分光密度水平,從而抑制炎癥的發(fā)生與發(fā)展,減輕腦缺血損傷。尤其治療Ⅰ組的效果顯著優(yōu)于治療Ⅱ組,表明提前對高脂血癥干預(yù)治療可有效地預(yù)防和減輕腦缺血損傷程度。6.高血脂模型大鼠和高血脂合并腦缺血模型大鼠大腦勻漿BDNF、NGF、BFGF含量比正常對照組顯著下降,不利于對神經(jīng)元修復(fù)作用。腦缺血后大鼠大腦勻漿中BDNF、NGF、BFGF含量顯著升高,對損傷神經(jīng)元具有保護作用。針刺可以顯著提高BDNF、NGF、BFGF表達,對損傷神經(jīng)元具有修復(fù)作用。治療Ⅰ組的效果顯著優(yōu)于治療Ⅱ組,表明提前對高脂血癥干預(yù)治療可有效地預(yù)防和減輕腦缺血損傷程度。7.腦缺血后大鼠大腦勻漿中NSE含量顯著升高。電針可降低腦缺血大鼠大腦勻漿中NSE含量,對神經(jīng)元具有保護作用。治療Ⅰ組的NSE含量顯著低于治療Ⅱ組,表明提前對高脂血癥干預(yù)治療可有效地預(yù)防和減輕腦缺血損傷程度。結(jié)論針刺治療高血脂可以降低血脂水平,提高高密度脂蛋白的含量,改善血液循環(huán);并通過提高BDNF、NGF、BFGF及IL-6的表達,降低NSE、TNF-α、IL-1β及ICAM-1、VCAM-1的過度表達,從而預(yù)防和減輕腦缺血狀態(tài)神經(jīng)元損傷,促進神經(jīng)元再生,抑制炎癥反應(yīng),對腦缺血損傷起到保護作用。
二、急性腦梗塞溶栓治療的IL-1β、IL-6、TNF-α動態(tài)變化研究（論文開題報告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準備的觀點或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細分析其設(shè)計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實驗法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認事物間的因果關(guān)系。
文獻研究法：通過調(diào)查文獻來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學理論和實踐的需要提出設(shè)計。
定性分析法：對研究對象進行“質(zhì)”的方面的研究，這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認識進一步精確化。
跨學科研究法：運用多學科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進行研究。
功能分析法：這是社會科學用來分析社會現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、急性腦梗塞溶栓治療的IL-1β、IL-6、TNF-α動態(tài)變化研究（論文提綱范文）
（1）IL-4誘導(dǎo)小膠質(zhì)細胞向M2表型極化對缺血性卒中的影響及其機制研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 第1章 緒論 |
| 1.1 缺血性腦卒中的疾病負擔與臨床治療現(xiàn)狀 |
| 1.2 缺血性腦卒中的損傷機制 |
| 1.2.1 細胞興奮毒性 |
| 1.2.2 氧化應(yīng)激和硝化應(yīng)激損傷 |
| 1.2.3 炎癥反應(yīng) |
| 1.2.4 細胞凋亡 |
| 1.2.5 細胞自噬 |
| 1.3 小膠質(zhì)細胞廣泛參與神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展 |
| 1.3.1 阿爾茲海默病 |
| 1.3.2 帕金森病 |
| 1.3.3 癲癇 |
| 1.3.4 脊髓損傷 |
| 1.4 小膠質(zhì)細胞在缺血性腦卒中的研究現(xiàn)狀 |
| 1.4.1 缺血性卒中時小膠質(zhì)細胞上表達的受體和通道蛋白 |
| 1.4.2 缺血性卒中后與小膠質(zhì)細胞相關(guān)性神經(jīng)損傷的酶類 |
| 1.4.3 靶向小膠質(zhì)細胞的療法在缺血性卒中治療中的應(yīng)用 |
| 1.4.4 小膠質(zhì)細胞活動的在體實時呈像 |
| 1.5 IL-4/STAT6信號通路對小膠質(zhì)細胞的作用 |
| 1.5.1 JAK/STAT信號通路 |
| 1.5.2 小膠質(zhì)細胞中的IL-4/STAT6信號通路介導(dǎo)神經(jīng)功能恢復(fù) |
| 第2章 腦梗塞可導(dǎo)致小膠質(zhì)細胞極化表型和炎癥因子的改變 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料與方法 |
| 2.2.1 實驗材料 |
| 2.2.2 實驗方法 |
| 2.2.3 統(tǒng)計分析 |
| 2.3 實驗結(jié)果 |
| 2.3.1 缺血性腦卒中患者血液中小膠質(zhì)細胞相關(guān)炎癥因子變化 |
| 2.3.2 缺血性腦卒中大鼠血液中小膠質(zhì)細胞相關(guān)炎癥因子變化 |
| 2.3.3 免疫熒光檢測缺血半暗帶小膠質(zhì)細胞極化情況 |
| 2.4 小結(jié) |
| 第3章 IL-4對急性腦梗塞大鼠的神經(jīng)保護作用 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料與方法 |
| 3.2.1 實驗材料 |
| 3.2.2 實驗方法 |
| 3.2.3 統(tǒng)計分析 |
| 3.3 實驗結(jié)果 |
| 3.3.1 IL-4對大鼠tMCAO后神經(jīng)功能缺損的影響 |
| 3.3.2 IL-4對大鼠腦梗死容積的影響 |
| 3.3.3 IL-4對大鼠血液中炎癥因子的影響 |
| 3.3.4 IL-4對大鼠缺血半暗帶區(qū)小膠質(zhì)細胞極化表型的影響 |
| 3.3.5 IL-4對大鼠缺血半暗帶區(qū)細胞凋亡的影響 |
| 3.3.6 IL-4對大鼠缺血半暗帶區(qū)皮層神經(jīng)元的影響 |
| 3.4 小結(jié) |
| 第4章 IL-4誘導(dǎo)小膠質(zhì)細胞向M2表型極化并發(fā)揮神經(jīng)保護作用的機制 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料與方法 |
| 4.2.1 實驗材料 |
| 4.2.2 實驗方法 |
| 4.2.3 統(tǒng)計分析 |
| 4.3 實驗結(jié)果 |
| 4.3.1 IL-4對小膠質(zhì)細胞炎癥因子分泌的影響 |
| 4.3.2 IL-4促進小膠質(zhì)細胞向M2表型極化的分子通路 |
| 4.3.3 IL-4對小膠質(zhì)細胞極化表型的影響 |
| 4.3.4 IL-4對小膠質(zhì)細胞內(nèi)吞能力的影響 |
| 4.3.5 IL-4處理的小膠質(zhì)細胞對OGD處理的神經(jīng)元凋亡的影響 |
| 4.3.6 IL-4處理的小膠質(zhì)細胞對OGD處理的神經(jīng)元線粒體膜電位的影響 |
| 4.3.7 IL-4處理的小膠質(zhì)細胞對OGD處理的神經(jīng)元調(diào)亡蛋白表達的影響 |
| 4.4 小結(jié) |
| 第5章 討論 |
| 第6章 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 作者簡介及科研成果 |
| 致謝 |
（2）基于NF-κB信號通路研究清達顆粒抑制腦缺血再灌注大鼠局部炎癥反應(yīng)的作用機制（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文縮略詞表 |
| 引言 |
| 實驗材料與方法 |
| 1 實驗動物 |
| 2 實驗藥物、試劑及儀器 |
| 2.1 實驗藥物 |
| 2.2 主要實驗器械和耗材 |
| 2.3 實驗試劑及溶液 |
| 2.4 實驗儀器 |
| 3 實驗方法 |
| 3.1 藥物制備 |
| 3.2 MCAO大鼠模型構(gòu)建 |
| 3.3 MCAO大鼠模型成功的判定 |
| 3.3.1 神經(jīng)行為學評分 |
| 3.3.2 TTC染色 |
| 3.3.3 小動物核磁共振成像 |
| 3.4 動物分組和用藥 |
| 3.5 樣本采集 |
| 3.6 檢測方法及指標 |
| 3.6.1 石蠟包埋組織 |
| 3.6.2 石蠟組織切片 |
| 3.6.3 HE染色 |
| 3.6.4 免疫組化染色 |
| 3.6.4.1 GFAP 染色條件 |
| 3.6.4.2 TNF-α、IL-1β、IL-6染色條件 |
| 3.6.4.3 p-IKK、IκB、p-IκB染色條件 |
| 3.6.5 免疫熒光染色NF-κB p65熒光標記條件 |
| 4 統(tǒng)計學處理 |
| 實驗結(jié)果 |
| 1 MCAO 模型的驗證 |
| 2 清達顆粒對CIRI大鼠體重的影響 |
| 3 清達顆粒對CIRI大鼠神經(jīng)功能評分的影響 |
| 4 清達顆粒對CIRI大鼠腦組織病理形態(tài)的影響 |
| 5 清達顆粒對CIRI大鼠腦組織星形膠質(zhì)細胞的影響 |
| 6 清達顆粒對CIRI大鼠腦組織炎癥因子表達的影響 |
| 7 清達顆粒對CIRI大鼠腦組織中NF-κB信號通路的影響 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 文獻綜述 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
| 作者簡歷 |
（3）醒腦開竅針刺法聯(lián)合阿替普酶溶栓治療急性腦梗死患者的臨床研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一部分 文獻研究 |
| 1 傳統(tǒng)醫(yī)學對腦梗死的認識 |
| 2 現(xiàn)代醫(yī)學對腦梗死的認識 |
| 3 炎癥因子與急性腦梗死的關(guān)系 |
| 第二部分 臨床研究 |
| 1 病例來源 |
| 2 病例選擇標準 |
| 2.1 診斷標準 |
| 2.2 納入標準 |
| 2.3 排除標準 |
| 2.4 剔除標準和脫落病例 |
| 3 研究方法 |
| 4 觀察指標 |
| 5 統(tǒng)計分析處理 |
| 6 研究結(jié)果 |
| 第三部分 討論 |
| 1 概述 |
| 2 病機理論上的創(chuàng)新 |
| 3 選穴上的創(chuàng)新 |
| 4 針刺運用手法上的改革 |
| 5 針刺治療缺血性腦卒中的機理 |
| 6 研究結(jié)果分析 |
| 第四部分 結(jié)論問題展望 |
| 結(jié)論 |
| 問題 |
| 展望 |
| 參考文獻 |
| 針灸治療急性腦卒中的研究進展 |
| 1 針灸療法治療急性腦卒中功能障礙研究概況 |
| 1.1 針灸對急性腦卒中病患神經(jīng)功能缺損的恢復(fù)改善 |
| 1.2 針灸對急性腦卒中病患語言功能障礙的改善 |
| 1.3 針灸對急性腦卒中病患睡眠障礙的改善 |
| 1.4 針灸對急性腦卒中病患吞咽功能障礙的改善 |
| 1.5 針灸對急性腦卒中病患抑郁癥狀的改善 |
| 2 治療急性腦卒中的常見針灸方式 |
| 2.1 單純性針灸治療 |
| 2.2 電針治療 |
| 2.3 溫針灸法 |
| 2.4 多種針法結(jié)合 |
| 3 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 附錄 |
| 中英文縮略詞表 |
| 致謝 |
| 個人簡歷 |
（4）基于小膠質(zhì)細胞表型變化的清開靈對腦缺血大鼠的抗炎作用機制研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符號說明 |
| 第一部分 文獻綜述 |
| 綜述一 中醫(yī)藥治療缺血性中風的進展 |
| 1 中醫(yī)對中風病因病機的認識 |
| 2 中醫(yī)藥治療缺血性中風的相關(guān)研究 |
| 3 結(jié)語 |
| 參考文獻 |
| 綜述二 小膠質(zhì)細胞在缺血性中風后作用研究 |
| 1 小膠質(zhì)細胞極化及其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的功能 |
| 2 不同表型小膠質(zhì)細胞對缺血性中風進程的影響 |
| 3 小膠質(zhì)細胞的表型調(diào)控 |
| 4 展望 |
| 參考文獻 |
| 前言 |
| 第二部分 實驗研究 |
| 實驗一 清開靈對 MCAO 大鼠的腦保護作用和抗炎作用 |
| 1 實驗材料 |
| 2 實驗方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 5 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 實驗二 清開靈對MCAO大鼠小膠質(zhì)細胞表型變化的影響 |
| 1 實驗材料 |
| 2 實驗方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 5 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 結(jié)語 |
| 不足與展望 |
| 致謝 |
| 在校期間主要研究成果 |
| 個人簡歷 |
（5）利拉魯肽對腦缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 縮略語/符號說明 |
| 前言 |
| 研究現(xiàn)狀、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 對象和方法 |
| 1.1 研究對象 |
| 1.1.1 藥品及試劑 |
| 1.1.2 實驗動物 |
| 1.1.3 實驗室試劑配制方法 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.2.1 實驗動物分組 |
| 1.2.2 大鼠大腦中動脈閉塞(MCAO)缺血再灌注模型制作 |
| 1.2.3 腦組織切片制備 |
| 1.2.4 神經(jīng)功能評分 |
| 1.2.5 腦梗死體積測定 |
| 1.2.6 HE染色 |
| 1.2.7 TNF-αSP三步法免疫組化測定 |
| 1.2.8 IL-6 免疫組化測定 |
| 1.2.9 原位雜交測定TNF-α,IL-6 mRNA陽性表達 |
| 1.2.10 資料分析及統(tǒng)計學處理 |
| 結(jié)果 |
| 2.1 神經(jīng)功能評分 |
| 2.2 腦梗死體積測定 |
| 2.3 HE染色結(jié)果觀察 |
| 2.4 免疫組化法檢測TNF-α,IL-6 陽性表達 |
| 2.4.1 空白對照片 |
| 2.4.2 SP三步法測定TNF-α陽性表達 |
| 2.4.3 免疫組化法測定IL-6 陽性表達 |
| 2.4.4 原位雜交法測定TNF-α mRNA表達 |
| 2.4.5 原位雜交法測定IL-6 mRNA表達 |
| 討論 |
| 3.1 TNF-α與腦缺血再灌注損傷 |
| 3.2 IL-6 與腦缺血再灌注損傷 |
| 3.3 利拉魯肽與TNF-α及 IL-6 表達的研究 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 發(fā)表論文和參加科研情況說明 |
| 綜述 |
| 綜述參考文獻 |
| 致謝 |
| 個人簡歷 |
（6）PI3K抑制劑ZSTK474對小鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 縮略語/符號說明 |
| 前言 |
| 研究現(xiàn)狀、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 1 對象和方法 |
| 1.1 實驗材料 |
| 1.1.1 實驗對象 |
| 1.1.2 實驗材料 |
| 1.2 實驗儀器 |
| 1.3 實驗方法 |
| 1.3.1 實驗動物分組 |
| 1.3.2 藥品的制備 |
| 1.3.3 實驗動物給藥方法 |
| 1.3.4 MCAO建模 |
| 1.3.5 Zea Longa方法評估MCAO模型 |
| 1.3.6 MCAO模型的排除標準 |
| 1.3.7 神經(jīng)功能評估 |
| 1.3.8 TTC染色 |
| 1.3.9 組織、形態(tài)學 |
| 1.3.10 腦組織免疫熒光染色 |
| 1.3.11 實時定量PCR |
| 1.3.12 酶聯(lián)免疫吸附試驗 |
| 1.3.13 蛋白印記檢測 |
| 1.4 統(tǒng)計學分析 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 ZSTK474給藥劑量的評估 |
| 2.2 ZSTK474在小鼠腦缺血/再灌注損傷模型中發(fā)揮腦保護作用 |
| 2.2.1 ZSTK474改善神經(jīng)功能評分 |
| 2.2.2 ZSTK474降低缺血/再灌注損傷小鼠的腦梗死面積 |
| 2.2.3 ZSTK474對缺血/再灌注損傷腦組織的病理改變 |
| 2.3 ZSTK474對膠質(zhì)細胞的影響 |
| 2.3.1 ZSTK474對缺血半暗帶小膠質(zhì)細胞的影響 |
| 2.3.2 ZSTK474對缺血半暗帶星形膠質(zhì)細胞的影響 |
| 2.3.3 ZSTK474降低缺血半暗帶Iba-1 陽性細胞的蛋白表達 |
| 2.3.4 ZSTK474對小膠質(zhì)細胞表型的影響 |
| 2.4 ZSTK474對炎癥因子的影響 |
| 2.5 ZSTK474對PI3K/ATK/mTOR通路及下游產(chǎn)物的影響 |
| 3 討論 |
| 3.1 實驗動物及模型的選擇 |
| 3.2 實驗藥物的選擇 |
| 3.3 ZSTK474在腦缺血/再灌注損傷小鼠模型中發(fā)揮腦保護作用 |
| 3.3.1 ZSTK474改善腦缺血/再灌注損傷小鼠的預(yù)后 |
| 3.3.2 ZSTK474抑制小膠質(zhì)細胞增殖、分化 |
| 3.3.3 ZSTK474介導(dǎo)小膠質(zhì)細胞極化 |
| 3.3.4 ZSTK474調(diào)控炎癥因子 |
| 3.4 ZSTK474在缺血/再灌注損傷小鼠模型發(fā)揮腦保護作用的機制 |
| 3.5 ZSTK474在缺血/再灌注損傷小鼠模型中發(fā)揮腦保護作用的意義 |
| 4 小結(jié) |
| 全文結(jié)論 |
| 論文創(chuàng)新點 |
| 參考文獻 |
| 發(fā)表論文和參加科研情況說明 |
| 綜述 腦卒中的免疫機制研究 |
| 綜述參考文獻 |
| 致謝 |
| 個人簡歷 |
（7）近期感染急性腦梗死中醫(yī)證型探討及其與炎性反應(yīng)因子的研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文縮略詞 |
| 前言 |
| 一、理論研究 |
| 1. 腦梗死現(xiàn)代研究 |
| 1.1 腦梗死危險因素及干預(yù)措施 |
| 1.2 腦梗死病理生理 |
| 2. 中風病中醫(yī)證候分布及動態(tài)演變研究概況 |
| 2.1 中風證候概念的研究 |
| 2.2 中風證候規(guī)律研究 |
| 2.3 中風病的證候演變 |
| 3. 中風證候與相關(guān)因素的研究 |
| 4、參考文獻 |
| 二、急性腦梗死臨床證型研究 |
| 1、研究對象 |
| 2、觀測指標 |
| 3、研究方法 |
| 4、結(jié)果 |
| 5、討論 |
| 6、參考文獻 |
| 三 急性腦梗死中醫(yī)證型與炎性反應(yīng)因子的研究 |
| 1 研究對象 |
| 2 觀測指標 |
| 3 檢測方法 |
| 4 結(jié)果 |
| 5 討論 |
| 6 參考文獻 |
| 結(jié)語 |
| 附錄 綜述 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
（8）電針對腦缺血再灌注模型大鼠炎性反應(yīng)相關(guān)信號的影響及機制研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文縮略詞表 |
| 文獻綜述 |
| 綜述一 缺血性腦中風的現(xiàn)代研究進展 |
| 1 引言 |
| 2 缺血性腦中風的臨床流行病學調(diào)查 |
| 3 缺血性腦中風的分型及臨床表現(xiàn) |
| 4 缺血性腦中風病理損傷機制研究 |
| 5 缺血性腦中風的治療 |
| 6 小結(jié) |
| 參考文獻 |
| 綜述二 中風的中醫(yī)學認識 |
| 1 引言 |
| 2 中醫(yī)對中風病名的認識 |
| 3 中醫(yī)對中風病因病機的認識 |
| 4 中醫(yī)對中風的治療 |
| 5 相關(guān)流行病學研究 |
| 6 小結(jié) |
| 參考文獻 |
| 綜述三 缺血性腦中風的針灸治療研究進展 |
| 1 引言 |
| 2 針灸治療中風的古代文獻描述 |
| 3 針灸治療缺血性腦中風的臨床研究 |
| 4 針灸治療缺血性中風相關(guān)規(guī)律研究 |
| 5 小結(jié) |
| 參考文獻 |
| 前言 |
| 實驗研究 |
| 實驗一 線栓法腦缺血再灌注大鼠模型的建立 |
| 1 實驗材料 |
| 2 實驗方法 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 4 小結(jié) |
| 參考文獻 |
| 實驗二 電針對腦缺血再灌注模型大鼠血清中炎癥反應(yīng)相關(guān)信號的影響 |
| 1 實驗材料 |
| 2 實驗方法 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 4 小結(jié) |
| 實驗三 電針對腦缺血再灌注模型大鼠腦組織中炎癥反應(yīng)相關(guān)信號的影響 |
| 1 實驗材料 |
| 2 實驗方法 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 4 小結(jié) |
| 實驗四 針刺不同穴組對腦缺血再灌注模型大鼠炎癥反應(yīng)相關(guān)信號的影響 |
| 1 實驗材料 |
| 2 實驗方法 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 4 小結(jié) |
| 討論 |
| 1 動物和模型的選擇 |
| 2 造模評價染色組織學方法的選擇 |
| 3 陽性對照藥物的選擇 |
| 4 針刺穴位的選擇 |
| 5 電針對缺血性中風炎性反應(yīng)的影響 |
| 6 針刺不同穴組對中風炎性反應(yīng)的影響 |
| 參考文獻 |
| 結(jié)論 |
| 致謝 |
| 個人簡歷 |
（9）雙翅目昆蟲誘發(fā)荷斯坦奶牛產(chǎn)生社會性聚集行為機制與危害的研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文獻綜述 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 應(yīng)激 |
| 1.2.1 應(yīng)激、應(yīng)激原與惡性應(yīng)激 |
| 1.2.2 動物應(yīng)激模型 |
| 1.2.3 從應(yīng)激到惡性應(yīng)激 |
| 1.2.4 亞臨床應(yīng)激的概念及作用 |
| 1.2.5 應(yīng)激的種類 |
| 1.3 國內(nèi)外雙翅目昆蟲對畜牧業(yè)危害的研究進展 |
| 1.3.1 雙翅目昆蟲的基本介紹 |
| 1.3.2 雙翅目昆蟲的危害 |
| 1.3.3 雙翅目昆蟲作為應(yīng)激原對畜牧業(yè)危害的國內(nèi)外研究進展 |
| 1.4 昆蟲應(yīng)激與動物行為 |
| 1.4.1 昆蟲的應(yīng)激與動物的行為模式 |
| 1.4.2 動物的護身行為 |
| 1.4.3 動物社會性聚集行為 |
| 1.5 應(yīng)激與神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò) |
| 1.5.1 應(yīng)激與植物性神經(jīng)系統(tǒng)（SNS） |
| 1.5.2 應(yīng)激與下丘腦-垂體神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng) |
| 1.5.3 應(yīng)激與免疫 |
| 1.5.4 應(yīng)激發(fā)生時，神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)的相互作用 |
| 1.6 論文研究的立題依據(jù)和目的 |
| 1.6.1 論文的立題依據(jù) |
| 1.6.2 論文的目的 |
| 1.7 論文研究的思路與技術(shù)路線 |
| 1.7.1 論文主要研究的內(nèi)容 |
| 1.7.2 研究的主要思路和技術(shù)路線 |
| 2 奶牛場雙翅目昆蟲分類鑒定、季節(jié)消長和囂張期一日動態(tài)數(shù)量研究 |
| 2.1 實驗?zāi)康?/td> |
| 2.2 實驗時間和地點 |
| 2.3 實驗方法 |
| 2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理 |
| 2.5 實驗結(jié)果與分析 |
| 2.6 討論與小結(jié) |
| 3 雙翅目昆蟲的活動誘發(fā)奶牛產(chǎn)生社會性聚集行為的研究 |
| 3.1 實驗?zāi)康?/td> |
| 3.2 實驗時間地點與材料 |
| 3.3 實驗方法 |
| 3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理 |
| 3.5 實驗結(jié)果與分析 |
| 3.6 討論與小結(jié) |
| 4 雙翅目昆蟲的活動對奶牛生產(chǎn)性能的影響 |
| 4.1 實驗?zāi)康?/td> |
| 4.2 實驗時間地點與材料 |
| 4.3 實驗方法 |
| 4.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理 |
| 4.5 結(jié)果與分析 |
| 4.6 討論與小結(jié) |
| 5 雙翅目昆蟲的活動對奶牛神經(jīng)內(nèi)分泌和免疫機能的影響 |
| 5.1 雙翅目昆蟲的活動對奶牛植物性神經(jīng)系統(tǒng)的影響 |
| 5.1.1 雙翅目昆蟲的活動對奶牛心率的影響 |
| 5.1.2 雙翅目昆蟲的活動對奶牛直腸溫度的影響 |
| 5.1.3 雙翅目昆蟲的活動對奶牛外分泌酶的影響 |
| 5.1.4 雙翅目昆蟲的活動對SNS 軸中NE 和 EPI 的影響 |
| 5.2 雙翅目昆蟲的活動對奶牛下丘腦－垂體內(nèi)分泌神經(jīng)系統(tǒng)的影響 |
| 5.2.1 雙翅目昆蟲的活動對HPA 軸的影響 |
| 5.2.2 雙翅目昆蟲的活動對HPT 軸的影響 |
| 5.2.3 雙翅目昆蟲的活動對GH PRL 和INS 的影響 |
| 5.3 雙翅目昆蟲的活動對免疫功能的影響 |
| 5.3.1 雙翅目昆蟲的活動對細胞因子影響 |
| 5.3.2 雙翅目昆蟲的活動對外周血免疫功能的影響 |
| 6 論文的總體討論與結(jié)論 |
| 6.1 論文的總體討論 |
| 6.2 論文的總體結(jié)論 |
| 6.3 本論文的創(chuàng)新點 |
| 6.4 有待于進一步解決的問題 |
| 致謝 |
| 參考文獻 |
| 作者簡介 |
（10）針刺對實驗性高血脂合并腦缺血大鼠炎癥反應(yīng)及神經(jīng)保護機制的影響（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文縮略詞表 |
| 第一部分 文獻綜述 |
| 綜述一 中醫(yī)對高脂血癥的認識及研究進展 |
| 綜述二 針灸治療缺血性中風機理研究進展 |
| 綜述三 腦缺血損傷的炎癥機制及神經(jīng)保護機制的研究進展 |
| 第二部分 實驗研究 |
| 實驗一 高血脂合并腦缺血大鼠模型的建立 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 實驗二 針刺對實驗性高血脂大鼠血脂四項的影響 |
| 材料和方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 實驗三 針刺對高血脂合并腦缺血大鼠血脂四項的影響 |
| 材料和方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 實驗四 針刺對高血脂合并腦缺血大鼠神經(jīng)行為及HE 染色的影響 |
| 材料和方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 實驗五 針刺對高血脂合并腦缺血大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α的影響 |
| 材料和方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 實驗六 針刺對高血脂合并腦缺血大鼠ICAM-1、VCAM-1 的影響 |
| 材料和方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 實驗七 針刺對高血脂合并腦缺血大鼠NGF、BDNF、bFGF 的影響 |
| 材料和方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 實驗八 針刺對高血脂合并腦缺血大鼠NSE 的影響 |
| 材料和方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 結(jié)論 |
| 綜合討論 |
| 1.高血脂合并腦缺血模型的建立 |
| 2. 針刺對高血脂模型大鼠血脂四項的影響 |
| 3. 針刺對高血脂合并腦缺血大鼠血脂四項的影響 |
| 4. 針刺對高血脂合并腦缺血大鼠神經(jīng)癥狀及 HE 染色的影響 |
| 5. 針刺對高血脂合并腦缺血大鼠腦組織勻漿 TNF-α、IL-1、IL-6 含量的影響 |
| 6.針刺對高血脂合并腦缺血大鼠大腦缺血區(qū) ICAM-1、VCAM-1 表達的影響 |
| 7.針刺對高血脂合并腦缺血大鼠腦組織勻漿 BDNF、NGF、BFGF 含量的影響 |
| 8. 針刺對高血脂合并腦缺血大鼠腦組織勻漿 NSE 含量的影響 |
| 致謝 |
| 個人簡歷 |
| 附圖 |
四、急性腦梗塞溶栓治療的IL-1β、IL-6、TNF-α動態(tài)變化研究（論文參考文獻）
- [1]IL-4誘導(dǎo)小膠質(zhì)細胞向M2表型極化對缺血性卒中的影響及其機制研究[D]. 侯坤. 吉林大學, 2021(01)
- [2]基于NF-κB信號通路研究清達顆粒抑制腦缺血再灌注大鼠局部炎癥反應(yīng)的作用機制[D]. 賈貝貝. 福建中醫(yī)藥大學, 2020(08)
- [3]醒腦開竅針刺法聯(lián)合阿替普酶溶栓治療急性腦梗死患者的臨床研究[D]. 杜忠劍. 廣西中醫(yī)藥大學, 2019(03)
- [4]基于小膠質(zhì)細胞表型變化的清開靈對腦缺血大鼠的抗炎作用機制研究[D]. 劉姝伶. 北京中醫(yī)藥大學, 2019(04)
- [5]利拉魯肽對腦缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響[D]. 張巖. 天津醫(yī)科大學, 2019(02)
- [6]PI3K抑制劑ZSTK474對小鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究[D]. 王珀. 天津醫(yī)科大學, 2019(02)
- [7]近期感染急性腦梗死中醫(yī)證型探討及其與炎性反應(yīng)因子的研究[D]. 白舒霞. 湖北中醫(yī)藥大學, 2013(08)
- [8]電針對腦缺血再灌注模型大鼠炎性反應(yīng)相關(guān)信號的影響及機制研究[D]. 孫琳琳. 北京中醫(yī)藥大學, 2013(08)
- [9]雙翅目昆蟲誘發(fā)荷斯坦奶牛產(chǎn)生社會性聚集行為機制與危害的研究[D]. 郭海蘭. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學, 2010(10)
- [10]針刺對實驗性高血脂合并腦缺血大鼠炎癥反應(yīng)及神經(jīng)保護機制的影響[D]. 洪銀珠. 北京中醫(yī)藥大學, 2007(02)
標簽：il-6論文; 小膠質(zhì)細胞論文; 腦缺血論文; 腦組織論文; 腦梗死論文;