一、水生動物原蟲的實驗室檢驗法（論文文獻綜述）
郭慶祥[1]（2021）在《粘體動物系統(tǒng)發(fā)育地位與內(nèi)寄生適應(yīng)機制研究》文中認為粘體動物（Myxozoa）是形態(tài)簡單、個體微小的專性內(nèi)寄生蟲,宿主范圍廣泛,能寄生魚類、兩棲類、爬行類、鳥類及哺乳類。當(dāng)前,關(guān)于粘體動物的研究主要集中于分類學(xué)、生活史及起源與適應(yīng)性進化,其中,起源與適應(yīng)性進化是研究的重點和熱點。近三十余年來,粘體動物的階元歸屬經(jīng)歷了從原生動物到后生動物,再到兩側(cè)對稱生物以及刺胞動物的過程。但限于技術(shù)手段,目前無法進一步確定粘體動物在刺胞動物內(nèi)部的具體歸屬和進化地位。同時,粘體動物目前已報道超過2,600余種,分布在河流、湖泊、深海、陸地等多種生境中,是生態(tài)適應(yīng)成功的典范。但是,目前粘體動物適應(yīng)內(nèi)寄生過程中的驅(qū)動因素與分子機制尚不清楚。作為生命之樹中較為古老、結(jié)構(gòu)較為簡化的后生動物寄生蟲,探討粘體動物的起源與適應(yīng)性進化問題,對開展后生動物重要生命特征,進化模式、規(guī)律與機制研究有著重要意義。隨著組學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展以及各種粘體動物和刺胞動物組學(xué)數(shù)據(jù)的釋放,粘體動物的起源與適應(yīng)性進化研究擁有了更好的技術(shù)支持與數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。本研究以粘體動物最大的一科——碘泡科（Myxobolidae）中的部分代表物種為研究對象,結(jié)合已發(fā)表粘體動物、刺胞動物資料,運用系統(tǒng)發(fā)育基因組學(xué)、比較蛋白質(zhì)組學(xué)和比較基因組學(xué)技術(shù),對粘體動物在后生動物、刺胞動物中的系統(tǒng)發(fā)育地位、分化時間、特異細胞器刺絲囊對物種適應(yīng)進化貢獻、基因組進化、適應(yīng)性進化分子機制等方面進行研究。主要結(jié)果如下:一、粘體動物系統(tǒng)發(fā)育地位通過對粘體動物、自由生刺胞動物和其他后生動物的主要類群進行廣泛采樣,本研究建立了較為全面的后生動物和刺胞動物系統(tǒng)發(fā)育矩陣。其中,后生動物矩陣包含103個物種,232個直系同源基因（57,930個氨基酸位點）,數(shù)據(jù)丟失率為31.1%;刺胞動物矩陣包含76種后生動物和2種鞭毛蟲外群,146個直系同源基因（51,598個氨基酸位點）,數(shù)據(jù)丟失率為24.8%?；谏鲜鰞蓚€矩陣,使用RAx ML,IQ-TREE以及Phylo Bayes軟件,分別在后生動物和刺胞動物尺度下對粘體動物的系統(tǒng)發(fā)生地位進行了探討。并使用近似無偏檢驗法對17種候選的后生動物和刺胞動物的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系開展了測試。最后,對上述兩個矩陣運用了快速進化位點梯度剔除法來檢測快速位點是否給系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系造成了誤導(dǎo)。結(jié)果表明粘體動物穩(wěn)定地與螅型多足蟲聚為一支,而后再與水母亞門呈姐妹群。AU檢驗顯著地拒絕了大多數(shù)（粘體動物+螅型多足蟲）之外的聚類方式。雖然粘體動物+櫛水母的拓撲結(jié)構(gòu)未能被顯著拒絕,但其P值僅略大于0.05（0.0561）,進化樹中的自展值也極低（0.0000）,因此作者認為該結(jié)構(gòu)并非最優(yōu)?？焖龠M化位點剔除分析表明,在刪除50%的快速進化位點之前,關(guān)鍵節(jié)點都保持了極高的自展值。在刪除超過50%的位點后,關(guān)鍵節(jié)點的自展值才開始出現(xiàn)下降。（（粘體動物+螅型多足蟲）+水母亞門）的拓撲結(jié)構(gòu)得到了確定且穩(wěn)定的支持。該研究結(jié)果克服了堿基替換飽和、長枝吸引等以往分子系統(tǒng)分析中的不足的問題,所構(gòu)建的進化樹更加穩(wěn)定和準(zhǔn)確。二、粘體動物發(fā)生年代分析選取刺胞動物冠部的最大分歧時間（741百萬年前）,水母亞門的最小分歧時間（570百萬年前）,六放珊瑚亞綱的最小分歧時間（540百萬年前）,水螅綱的出現(xiàn)時間（500百萬年前）作為化石校正點,使用懲罰似然法（Penalized likelihood,PL）對粘體動物的分化時間進行估算。結(jié)果顯示,刺胞動物的最后共同祖先起源于拉伸紀（736百萬年前）,水母亞門起源于埃迪卡拉紀（626.6百萬年前）,粘體動物共同祖先發(fā)生于晚寒武紀（492.6百萬年前）。目前,最早的寄生蟲化石發(fā)現(xiàn)于寒武紀,因此本結(jié)果說明粘體動物是比較古老的后生動物寄生蟲之一。三、粘孢子蟲刺絲囊與殼瓣分離提純方法的建立粘體動物的刺絲囊對其生活史的完成至關(guān)重要,是研究表型對適應(yīng)性進化貢獻的理想對象。為了便于后續(xù)實驗的開展,本研究中開發(fā)了一種快速有效的粘體動物孢子的解剖方法,該方法可用于分離碘泡科代表物種——洪湖碘泡蟲（Myxobolus honghuensis）、吳李碘泡蟲（Myxobolus wulii）、吉陶單極蟲（Thelohanellus kitauei）的刺絲囊和殼瓣。該方法主要通過蔗糖密度梯度對粘體動物孢子進行純化,通過超聲破碎進行孢子解離以及Percoll密度梯度離心分離刺絲囊/殼瓣。采用50%-70%-90%Percoll分離液對孢子破碎液進行密度梯度離心,在50%與70%Percoll溶液層之間以及70%Percoll分離液中部可獲得純度接近100%的完整刺絲囊。采用100%的Percoll分離液對孢子破碎液進行離心,在Percoll分離液中部可獲得純度接近100%的完整殼瓣。為進一步了解粘體動物刺絲囊的生物學(xué),評估了溫度、鹽度、多種化合物以及重金屬離子對洪湖碘泡蟲完整孢子和離體刺絲囊釋放情況的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),熱、尿素和氨處理能夠成功地觸發(fā)大多數(shù)孢子和離體刺絲囊的釋放,而Na Cl、乙酸、乙醇、碳酸氫鈉和Ca Cl2則不能。重金屬處理可顯著降低刺絲囊的釋放率。本研究為下游實驗奠定了基礎(chǔ),還為其他寄生類群孢子的解離研究提供了新視角。四、粘體動物綜合蛋白數(shù)據(jù)庫的構(gòu)建開發(fā)了“定制綜合蛋白質(zhì)組參考數(shù)據(jù)庫（customized comprehensive proteomic reference database,CCPRD）”流程,用以提供全面、無污染的蛋白質(zhì)組學(xué)參考數(shù)據(jù)庫。使用洪湖碘泡蟲、吳李碘泡蟲、吉陶單極蟲刺絲囊的蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)評估了CCPRD的有效性。具體來說,本研究將CCPRD的質(zhì)譜鑒定結(jié)果與四個對照數(shù)據(jù)庫的結(jié)果進行了比較:（1）轉(zhuǎn)錄組的六框翻譯（trans＿6＿frame）;（2）轉(zhuǎn)錄組+基因組的六框翻譯（genome+transcriptome＿6＿frame）;（3）將人工的宿主和細菌序列添加到CCPRD（CCPRD＿contam）中而建立的污染物數(shù)據(jù)庫;（4）將通過去污染過程中剔除的序列（包括基因組和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)）回添到CCPRD（CCPRD＿remove）。結(jié)果表明,CCPRD＿contam比CCPRD鑒定出了更多的肽段和蛋白質(zhì),這表明組學(xué)數(shù)據(jù)中確實存在污染,證明了污染剔除的必要性。對于CCPRD＿remove,回添污染去除過程中移除的序列并沒有增加鑒定肽段和蛋白質(zhì)的數(shù)量,這表明本方法沒有過度剔除。CCPRD在肽段和蛋白質(zhì)識別數(shù)量、數(shù)據(jù)庫大小和完整性方面明顯優(yōu)于其他方法。相較傳統(tǒng)數(shù)據(jù)庫,CCPRD能多鑒定出19.1%-43.8%的蛋白質(zhì),并最多可節(jié)省84.6%的數(shù)據(jù)庫容量。此外,本研究分析了各數(shù)據(jù)庫結(jié)果的疏水性指數(shù)與保留時間的擬合程度,發(fā)現(xiàn)CCPRD可以提高鑒定結(jié)果的可靠性。去冗余分析結(jié)果表明,即使去除了冗余,CCPRD特異性肽段的數(shù)量仍超過其他數(shù)據(jù)庫。這進一步證明CCPRD確實提高了數(shù)據(jù)庫整體的性能,而并非僅僅增加了假陽性或者重復(fù)序列的數(shù)量。本研究為下游比較蛋白質(zhì)組學(xué)分析提供了技術(shù)保障,并為其他涉及非模式生物的蛋白質(zhì)組項目提供了借鑒和參考。五、刺絲囊對物種適應(yīng)進化貢獻的定量評估通過分析目前已發(fā)表的刺絲囊蛋白質(zhì)組和111個刺絲囊轉(zhuǎn)錄組/基因組（包括7個新測序的粘體動物轉(zhuǎn)錄組和/或基因組數(shù)據(jù)集）,研究了刺絲囊在刺胞動物適應(yīng)性成功中的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn),刺絲囊組成存在高度異質(zhì)性,且蛋白質(zhì)組相似度與物種親緣關(guān)系之間的不一致,支持了刺絲囊的可塑性適應(yīng)策略,暗示其在刺胞動物適應(yīng)性進化中可能起著重要作用。另外,通過對刺絲囊的五種核心基因進行同源搜索,證明了刺絲囊的自發(fā)性起源,避免了下游分析時外部共生體的干擾。進一步研究了刺胞動物主要類群擴張前后核心集/非伴隨集的進化平衡,發(fā)現(xiàn)了一種“去中心化修飾”的模式:即核心基因只經(jīng)歷了很少的進化事件,大量活躍的進化事件發(fā)生在非核心基因集中,可能是因為刺絲囊祖先原型的出現(xiàn)后,刺胞動物迅速分化,導(dǎo)致始祖刺絲囊未充分進化便擴張為各種形式,該發(fā)現(xiàn)同樣支持刺絲囊在刺胞動物適應(yīng)性進化中的關(guān)鍵作用。最后,刺絲囊蛋白（NEMs）適應(yīng)超量分析以及選擇富集分析發(fā)現(xiàn),在NEMs中,最強的適應(yīng)超量(BUSTED P值<10-5)可達60%(置換檢驗P值<2.2e-16,迭代次數(shù)107),并且NEMs顯著富集了背景蛋白的選擇壓力（在0.05、0.01和0.001置信水平下,P值=0.004658、0.01117、0.007638）。綜上,本研究定量地證明了刺絲囊是包括粘體動物在內(nèi)的刺胞動物成功適應(yīng)性進化的基石,并為今后評估特定表型創(chuàng)新對物種適應(yīng)性進化的貢獻提供了參考。六、洪湖碘泡蟲基因組的馬賽克進化為進一步了解粘體動物適應(yīng)內(nèi)寄生生活的分子機制,本研究分析了感染異育銀鯽咽部的洪湖碘泡蟲（M.honghuensis）的基因組。通過基因組survey及17-mer分析,預(yù)測洪湖碘泡蟲基因組大小為206 Mb。三代測序的基因組最終大小為161 Mb,contig N50為1.3 Mb,預(yù)測到15,433個基因模型。進一步分析顯示,由于基因保留,內(nèi)含子增大,轉(zhuǎn)座子插入等因素,洪湖碘泡蟲擁有目前最大的粘體動物基因組,并且相較其他粘體動物呈現(xiàn)出了較低程度的基因組簡化和緊密。作為對內(nèi)寄生生活方式的適應(yīng),洪湖碘泡蟲基因組中與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的基因大幅丟失,并且擁有最簡單的動物免疫基因組件。此外,為更好地適應(yīng)內(nèi)寄生生活,洪湖碘泡蟲抗逆,侵襲,能量代謝和細胞過程相關(guān)的基因發(fā)生了顯著的擴張與正選擇。作者還發(fā)現(xiàn)洪湖碘泡蟲具有相對保守的中胚層和肌原性組件,以及相對復(fù)雜的Wnt和Hedgehog信號通路。本研究揭示了洪湖碘泡蟲基因組的馬賽克進化模式,即不同的基因組區(qū)域表現(xiàn)出了不同程度發(fā)保守、分化、減弱和增強。洪湖碘泡蟲的基因組非但沒有表現(xiàn)出遺傳退化,反而表現(xiàn)出相當(dāng)數(shù)量的基因創(chuàng)新和擴張(主要涉及到多拷貝基因家族以及相應(yīng)的調(diào)控基因。這些結(jié)果表明,粘體動物不像以前認為的那樣遺傳簡化。至少對于粘體動物來說,轉(zhuǎn)變?yōu)榧纳x的進化過程是由基因組簡化和復(fù)雜化共同驅(qū)動的,并且這兩種進化機制的相對貢獻程度因物種而異。該研究改變或擴展了我們對粘體動物基因組復(fù)雜性和進化的傳統(tǒng)認知,對于深入理解寄生蟲進化這一進化生物學(xué)中的基本問題具有重要意義。綜上,本研究基于系統(tǒng)發(fā)育基因組學(xué)構(gòu)建了刺胞動物物種樹,并分別分析和估算了粘體動物的系統(tǒng)發(fā)育地位與分化時間,為進一步了解粘體動物的起源提供了理論依據(jù)。在此基礎(chǔ)上,從表型（刺絲囊）和分子（洪湖碘泡蟲基因組）兩個角度闡明了粘體動物適應(yīng)性進化的驅(qū)動因素與進化機制,發(fā)現(xiàn)刺絲囊可能是刺胞動物（包括粘體動物）成功適應(yīng)性進化的關(guān)鍵表型;并通過洪湖碘泡蟲與現(xiàn)有粘體動物、刺胞動物的比較基因組學(xué)研究,發(fā)現(xiàn)粘體動物基因組進化反映了丟失冗余基因造成的基因組簡化和強化寄生能力導(dǎo)致的基因組復(fù)雜化之間的動態(tài)權(quán)衡,從而初步解釋了粘體動物內(nèi)寄生適應(yīng)成功的遺傳機制。
尹里程[2]（2021）在《感染條件下草魚細胞自噬的發(fā)生及其抗菌作用和機制的研究》文中研究說明殺魚愛德華氏菌（Edwardsiella piscicida）和嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）分別屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中重要的胞內(nèi)和胞外致病菌,導(dǎo)致養(yǎng)殖生產(chǎn)中重大的經(jīng)濟損失,然而這兩種致病菌與宿主相互作用的分子細胞機制亟待闡明。自噬是維持細胞穩(wěn)態(tài)的重要機制,其在宿主抵御病原體感染中的作用受到愈來愈多的關(guān)注,但自噬是否參與這兩種病原體的感染進程目前尚不清楚。因此,本論文擬探討細胞自噬與這兩種致病菌的互作關(guān)系和相應(yīng)機制,主要內(nèi)容如下:1.殺魚愛德華氏菌誘導(dǎo)自噬發(fā)生。（1）殺魚愛德華氏菌引起草魚原代單核/巨噬細胞（以下簡稱為“單核/巨噬細胞”）及鯉魚上皮細胞系（Epithelioma papulosum cyprini,EPC）中自噬標(biāo)志物微管相關(guān)蛋白輕鏈3（microtubule-associated proteins light chain 3,LC3）形成的“斑點”（LC3 puncta）數(shù)量增加。（2）單核/巨噬細胞中,LC3與紅色熒光標(biāo)記的殺魚愛德華氏菌存在共定位。（3）單核/巨噬細胞中,溶酶體能夠與紅色熒光標(biāo)記的殺魚愛德華氏菌共定位。這些發(fā)現(xiàn)提示殺魚愛德華氏菌誘導(dǎo)了魚類細胞自噬流的發(fā)生,包括自噬小體的形成、細菌隔離和降解等過程。2.殺魚愛德華氏菌引起細胞自噬的機制。（1）單核/巨噬細胞中,胞內(nèi)模式識別受體NOD1與殺魚愛德華氏菌存在共定位。（2）在EPC細胞中,免疫熒光實驗證明NOD1與自噬關(guān)鍵蛋白ATG16L1存在空間位置上的重合,免疫共沉淀（CoIP）實驗證明NOD1與ATG16L1能夠結(jié)合。（3）在EPC細胞中,觀察到NOD1、ATG16L1與殺魚愛德華氏菌三者存在共定位。這些結(jié)果證明了胞內(nèi)模式識別受體NOD1識別殺魚愛德華氏菌并募集自噬關(guān)鍵蛋白ATG16L1而啟動自噬,揭示了殺魚愛德華氏菌誘導(dǎo)自噬的作用和機制,隨后研究殺魚愛德華氏菌是否調(diào)控介導(dǎo)自噬發(fā)生的NOD1途徑。3.殺魚愛德華氏菌抑制NOD1的表達。（1）單核/巨噬細胞中,殺魚愛德華氏菌呈感染復(fù)數(shù)（multiplicity of infection,MOI）及時間依賴地下調(diào)NOD1的蛋白表達。（2）EPC細胞中,殺魚愛德華氏菌下調(diào)NOD1的基因表達。4.殺魚愛德華氏菌抑制NOD1表達的機制。（1）單核/巨噬細胞中,殺魚愛德華氏菌下調(diào)雌激素相關(guān)受體（Estrogen-related receptor-α,ESRRA）的基因表達。（2）EPC細胞或單核/巨噬細胞中,使用ESRRA的反向激動劑kaempferol能夠下調(diào)NOD1的基因及蛋白表達。（3）在EPC中過表達ESRRA能夠部分回復(fù)由殺魚愛德華氏菌下調(diào)的NOD1的基因及蛋白表達。這三個結(jié)果證明殺魚愛德華氏菌可以通過ESRRA途徑負調(diào)控NOD1的表達。（4）殺魚愛德華氏菌及其毒力因子ESCB和EVPC上調(diào)EPC細胞或單核/巨噬細胞中NOD1的泛素化,從而導(dǎo)致其蛋白水平下降。（5）EPC細胞或單核/巨噬細胞中,使用MG-132抑制蛋白酶體降解途徑后能夠回復(fù)由殺魚愛德華氏菌及其毒力因子ESCB和EVPC引起的NOD1下調(diào)。這兩個結(jié)果說明殺魚愛德華氏菌通過其毒力因子ESCB和EVPC調(diào)控NOD1的泛素化并引起NOD1的降解,從而可能破壞自噬途徑。自噬與殺魚愛德華氏菌存在相互作用,促使我們一方面揭示調(diào)控該相互作用的內(nèi)在因子,另一方面探究基于自噬原理的抗菌作用。5.IFN-γ介導(dǎo)自噬與殺魚愛德華氏菌的相互作用。（1）單核/巨噬細胞中,IFN-γ進一步上調(diào)由殺魚愛德華氏菌誘導(dǎo)的LC3-Ⅱ蛋白表達。（2）單核/巨噬細胞中,IFN-γ增加LC3和NOD1與殺魚愛德華氏菌的共定位。這些結(jié)果表明IFN-γ能夠增強自噬與殺魚愛德華氏菌的相互作用。（3）單核/巨噬細胞中,IFN-γ上調(diào)LC3-Ⅱ的蛋白水平和細胞中LC3 puncta的數(shù)量。（4）短時程（8 h）的IFN-γ處理能夠增強單核/巨噬細胞對于殺魚愛德華氏菌的清除能力,而使用3-MA抑制自噬后,該能力顯著下降,但是在使用L-NMMA抑制NO產(chǎn)生后,該能力不受影響。這些結(jié)果說明在短時程（8 h）內(nèi)IFN-γ通過自噬途徑而非產(chǎn)生NO清除殺魚愛德華氏菌。6.Rapamycin介導(dǎo)自噬途徑抵抗殺魚愛德華氏菌感染。（1）Rapamycin上調(diào)單核/巨噬細胞中LC3-Ⅱ蛋白表達。（2）單核/巨噬細胞中,Rapamycin增加LC3與殺魚愛德華氏菌的共定位。（3）Rapamycin能夠增強單核/巨噬細胞對于殺魚愛德華氏菌的清除能力。（4）Rapamycin能夠增加感染殺魚愛德華氏菌草魚的生存率。這些結(jié)果說明rapamycin在殺魚愛德華氏菌感染時起保護作用。這些結(jié)果表明IFN-γ和rapamycin能夠激活自噬,可能具有控制殺魚愛德華氏菌感染的潛能。7.初步探究嗜水氣單胞菌與自噬的相互作用。（1）嗜水氣單胞菌上調(diào)單核/巨噬細胞中LC3-Ⅱ的蛋白水平及LC3 puncta的數(shù)量。（2）嗜水氣單胞菌與LC3存在共定位。（3）Rapamycin增強而3-MA抑制單核/巨噬細胞對于嗜水氣單胞菌的清除能力。綜上所述,本論文首次闡明了自噬與水產(chǎn)致病菌相互作用關(guān)系及相關(guān)機制,鑒定了參與其中的胞內(nèi)模式識別受體和細菌毒力因子,為相關(guān)疫苗開發(fā)和藥物設(shè)計提供了新思路。另外,本論文還證明自噬參與了胞內(nèi)及胞外水產(chǎn)養(yǎng)殖致病菌的清除,提示增強宿主的自噬水平是一條預(yù)防及治療水產(chǎn)病原體感染的有效途徑。
劉志剛[3]（2020）在《患病江豚微生態(tài)變化及遷地背景下江豚保護性研究》文中研究說明長江江豚是生活在長江中下游及鄱陽湖、洞庭湖等沿江大型湖泊的淡水豚類物種。近年來,隨著工農(nóng)業(yè)經(jīng)濟的快速發(fā)展,長江生態(tài)遭受嚴重破壞,長江江豚的棲息地環(huán)境持續(xù)惡化,導(dǎo)致其種群數(shù)量快速下降,由20世紀90年代的2700頭,下降至2017年的1014頭。目前,長江江豚處于極度瀕危狀態(tài)。遷地保護是進行長江江豚保護的重要舉措之一,在江豚保種和科學(xué)研究中發(fā)揮了重要作用。然而,疾病感染和飼養(yǎng)管理技術(shù)欠缺嚴重制約了遷地保護區(qū)江豚的健康生長和種群繁育。近年來,長江江豚疾病頻發(fā),而關(guān)于長江江豚病原學(xué)（細菌和病毒）方面的研究幾乎處于空白,遷地保護區(qū)飼養(yǎng)管理不當(dāng)又時常引起江豚死亡率高和繁殖效率低。因此,有必要對長江江豚感染性疾病和遷地保護區(qū)江豚的飼養(yǎng)管理開展系統(tǒng)性研究,初步了解長江江豚細菌性疾病和病毒性疾病的流行病原,掌握長江江豚主要致病菌的生物學(xué)特性;建立遷地保護區(qū)長江江豚飼養(yǎng)管理和疾病防治的技術(shù)規(guī)范。本研究開展了長江江豚細菌性疾病的病原學(xué)調(diào)查;長江江豚病料樣本的病毒群落研究;長江江豚6種危害較大細菌的生物學(xué)特性研究;遷地保護區(qū)長江江豚的飼養(yǎng)管理與疾病防治研究,研究結(jié)果如下:1長江江豚細菌性疾病流行病學(xué)調(diào)查通過細菌的分離培養(yǎng)、染色鏡檢、理化鑒定、PCR鑒定等,對462份長江江豚呼吸孔、糞便、血液、內(nèi)臟組織、皮膚病灶、腹腔積液、胸腔積液等樣品進行了細菌的分離鑒定,同時使用16S r DNA高通量測序?qū)疾￠L江江豚和健康長江江豚的腸道菌群進行了研究。結(jié)果從462份長江江豚樣本中,獲得655個細菌純培養(yǎng),分離鑒定成功31種細菌,分別為溫和氣單胞菌（Aeromonas sobria）、表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis）、巨大芽孢桿菌（Bacillus megaterium）、微球菌（Micrococcus）、堅強芽孢桿菌（Bacillus firmus）、短小芽孢桿菌（Bacillus pumilus）、變形桿菌（Proteus）、肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）、嗜麥芽窄桿菌（Stenotrophomonas maltophilia）、大腸桿菌（Escherichia coli）、產(chǎn)氣莢膜梭菌（Clostridium perfringens）、乳酸桿菌（Lactobacillus）、鏈球菌（Streptococcus）、銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）、諾卡氏菌（Nocardia）、弧菌（Vibrio）、不動桿菌（Acinetobacter）、魔氏摩根菌（Morganella morganii）、腸球菌（Enterococcus）、幽門螺旋桿菌（Helicobacter pylori）、彎曲桿菌（Campylobacter）、黃桿菌（Flavobacterium）、蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus）、糞腸球菌（Enterococcus faecalis）、志賀樣鄰單胞菌（Plesiomonas shigelloides）、維氏氣單胞菌（Aeromonas veronii）、殺鮭氣單胞菌（Aeromonas salmonicida）、愛德華氏菌（Edwardsiella ictaluri）和丹毒絲菌（Erysipelothrix）,其中產(chǎn)氣莢膜梭菌、弧菌、愛德華菌等11種細菌在長江江豚屬首次發(fā)現(xiàn),大腸桿菌、氣單胞菌、銅綠假單胞菌、葡萄球菌在所有樣品中檢出率相對較高;腸道內(nèi)容物高通量測序,共檢測到菌屬340種,其中15種為潛在致病菌屬,分別為埃希氏菌屬、乳桿菌屬、鏈球菌屬、綠膿桿菌屬、假單胞菌屬、黃桿菌屬、氣單胞菌屬、諾卡氏菌屬、弧菌屬、巴氏桿菌屬、葡萄球菌屬、魔氏摩根菌、腸球菌、幽門螺旋桿菌、彎曲桿菌。2長江江豚主要致病菌生物學(xué)特性研究利用微生物學(xué)、分子生物學(xué)、獸醫(yī)藥理學(xué)和獸醫(yī)病理學(xué)方法對分離自長江江豚的6種主要致病菌（嗜水氣單胞菌、維氏氣單胞菌、殺鮭氣單胞菌、魔氏摩根菌、金黃色葡萄球菌和大腸桿菌）進行了生物學(xué)特性研究。結(jié)果顯示,分離菌株按照常規(guī)方法進行培養(yǎng),均可良好生長,與其他動物源細菌無明顯差異;生化研究和16s r RNA序列測定結(jié)果與各菌最初鑒定結(jié)果表型一致;細菌耐藥性研究結(jié)果顯示,6種菌均存在一定程度的耐藥性,以大腸桿菌的耐藥性最強,金黃色葡萄球菌的最弱,氣單胞菌屬不同菌之間耐藥性存在一定差異;BALB/c小鼠致病性試驗證實,6種菌對小白鼠均有致病性,以維氏氣單胞菌和殺鮭氣單胞菌的致病力最強,金黃色葡萄球菌的致病力最弱,感染小白鼠剖解病理變化存在一定差異,但主要以肺臟瘀血、出血和肝臟瘀血、變性和壞死為主。3長江江豚病毒性疾病研究初探通過病毒宏基因組學(xué)研究方法,對收集自2017-2019年野外患病死亡的長江江豚組織病料（心臟、肝臟、脾臟、腎臟、皮膚等）進行了病毒群落研究和分析。結(jié)果共獲得10600個重疊序列（contigs）,檢測到病毒65個,其中,基于參考序列鑒定出病毒25種,Denovo序列鑒定病毒42種?？扑缴?兩種方法鑒定出的優(yōu)勢病毒為肌尾噬菌體科（Myoviridae）、皰疹病毒科（Herpesviridae）、逆轉(zhuǎn)錄病毒科（Retroviridae）、長尾噬菌體科（Siphoviridae）、線頭病毒科（Nimaviridae）、阿克曼病毒科（Ackermannviridae）、痘病毒科（Poxviridae）、絲狀噬菌體科（Inoviridae）、短尾噬菌體科（Podoviridae）、砂粒病毒科（Arenaviridae）、有尾噬菌體目未分類病毒科（Caudovirales unclassified）。除皰疹病毒外,噬菌體病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、線頭病毒、痘病毒和砂粒病毒等均為首次在長江江豚上發(fā)現(xiàn)。4遷地保護區(qū)長江江豚的飼養(yǎng)管理與疾病防治研究通過臨床大量實踐和數(shù)據(jù)分析,分別對遷地保護區(qū)大水域、圍網(wǎng)環(huán)境下和療養(yǎng)池中生長的長江江豚的飼養(yǎng)管理和疾病防治技術(shù)進行了研究,結(jié)果,總結(jié)制定出遷地保護區(qū)大水域、圍網(wǎng)環(huán)境下和療養(yǎng)池中長江江豚飼養(yǎng)管理的技術(shù)規(guī)范,計算統(tǒng)計出長江江豚血常規(guī)和血液生化的正常閾值,發(fā)現(xiàn)了長江江豚各生理生化指標(biāo)與江豚疾病診斷間的相關(guān)性,建立了長江江豚健康體檢的技術(shù)規(guī)范和健康評價標(biāo)準(zhǔn),基本形成了長江江豚常見疾病診斷與治療的方法技術(shù)體系,其中通過靜脈滴注對患病長江江豚進行治療的技術(shù)在國內(nèi)處于領(lǐng)先水平。綜上所述本研究首次系統(tǒng)闡明了長江江豚細菌性疾病的流行特點;初步探明了長江江豚病料樣本病毒群落的結(jié)構(gòu)和組成,并首次發(fā)現(xiàn)了大量的長江江豚源病毒;揭示了6種常見致病菌的生物學(xué)特性,提供了細菌性疾病藥物治療和疫苗研發(fā)的參考信息;建立了遷地保護區(qū)長江江豚飼養(yǎng)管理和疾病診療的技術(shù)規(guī)范。飼養(yǎng)管理和疾病防控是遷地保護區(qū)長江江豚管理的兩個重要方面,也是當(dāng)前長江江豚保種面臨的主要問題,知己（不斷提高長江江豚的飼養(yǎng)管理和疾病防治水平等）和知彼（掌握長江江豚傳染性疾病的流行特點、病原的生物學(xué)特性、長江江豚生長特性和各個生長階段的飼養(yǎng)管理要點等）,方能有效解決長江江豚在遷地保護過程中疾病防控盲目和飼養(yǎng)管理欠缺的現(xiàn)狀,為長江江豚、中華白海豚等鯨類動物的健康成長和種群繁育提供理論支持。
上官苗苗[4]（2020）在《動物源性食品中硝基咪唑類藥物殘留快速檢測方法研究》文中研究表明硝基咪唑類藥物具有抗原蟲和抗厭氧菌活性,曾被廣泛用于預(yù)防和治療畜禽、水生動物寄生蟲疾病。常見的硝基咪唑類藥物及其代謝物有甲硝唑、地美硝唑、洛硝達唑和羥基甲硝唑等。由于此類藥物存在致癌性、致畸性,對人體健康危害極大,我國于2002年禁止使用該類藥物,規(guī)定動物性食品中不得檢出。因此加強食品中硝基咪唑類藥物及代謝物殘留的檢測能力和監(jiān)測力度具有重要意義。本論文重點研究動物源性食品中甲硝唑、地美硝唑、洛硝達唑、羥基甲硝唑等硝基咪唑類藥物的快速檢測方法及其方法驗證,主要研究內(nèi)容及結(jié)論如下:（1）優(yōu)化和確認高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀的檢測條件。根據(jù)目標(biāo)物的結(jié)構(gòu)特點,優(yōu)化四種硝基咪唑類藥物中每組離子對的兩個關(guān)鍵性參數(shù)—碰撞能量和去簇電壓,確定了四種硝基咪唑類化合物的質(zhì)譜條件。通過對比不同流動相體系的峰形和響應(yīng)值,確認了甲醇（含0.1%甲酸）和水（含0.1%甲酸）組成的流動相體系。（2）通過對比傳統(tǒng)Qu ECh ERS凈化技術(shù)和新型凈化固相萃取小柱對硝基咪唑類藥物的凈化處理效果,確認選擇了固相萃取小柱Oasis Prime HLB作為樣品前處理的凈化劑。（3）優(yōu)化條件下,在豬肉基質(zhì)中四種硝基咪唑類藥物在1.0～25 ng/m L濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)出較好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)≥0.991;在三個水平（0.25,0.5,2.5μg/kg）的加標(biāo)實驗中,回收率范圍和相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為76.7%～105.6%,RSD≤13.9%;84.0%～107.1%,RSD≤4.2%;87.8%～102.0%,RSD≤2.5%。在豬肉基質(zhì)下,加標(biāo)制備樣品的均勻性和穩(wěn)定性良好,檢測方法的靈敏度≥95%,特異性≥85%,假陰性率≤5%,假陽性率≤15%,符合《食品快速檢測方法評價技術(shù)規(guī)范》要求。（4）選擇雞肉、鮮奶、河蝦、蜂蜜四種動物源性食品,驗證該方法在不同基質(zhì)中的適用性。結(jié)果表明,在四種基質(zhì)中,硝基咪唑類藥物在1.0～25 ng/m L濃度范圍內(nèi)均表現(xiàn)出較好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)≥0.990;在三個水平（0.25,0.5,2.5μg/kg）的加標(biāo)實驗中,回收率范圍和相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為為70.6%-112.9%,RSD≤15.4%;76.5%-108.6%,RSD≤9.6%;85.1%-106.1%,RSD≤6.1%,表明該方法具有良好的回收率和精密度。（5）對不同基質(zhì)樣品進行了快速篩查實驗,結(jié)果表明四種硝基咪唑類藥物在雞肉、鮮奶、河蝦、蜂蜜的檢測結(jié)果相對準(zhǔn)確度均≥96%,表明以豬肉為基質(zhì)確定的快速檢驗方法適合禽類、乳制品、水產(chǎn)、蜂產(chǎn)品等動物源性食品的檢測。
吳淑妃[5]（2018）在《海綿生長階段共生微生物群落結(jié)構(gòu)及特征性微生物功能初步研究》文中提出海綿作為最古老、最原始的多細胞生物,含有豐富多樣的共生微生物群落。微生物可占海綿生物量的40-60%。經(jīng)過6億年的協(xié)同進化,共生微生物與海綿形成了復(fù)雜的共生功能體。共生微生物在海綿宿主的生長發(fā)育、新陳代謝過程中扮演重要角色。然而對海綿生活史各階段樣品采集的困難,及缺乏對海綿關(guān)鍵性共生微生物類群的了解,共生微生物在海綿不同發(fā)育階段中功能及其與宿主相互作用方面的研究,未見國內(nèi)外報道。本論文利用16S rDNA基因高通量測序技術(shù)探究“胚胎-幼體-成體”多個生長階段的苔海綿（Tedania sp.）和美麗海綿（Calllyspongia sp.）共生微生物的群落結(jié)構(gòu)及多樣性。結(jié)果表明,海綿共生微生物與海水微生物在豐度上有較大差異。無論苔海綿還是美麗海綿,其共生β-變形菌的豐度均高于海水3倍以上。各個生長階段的海綿均具有較高的微生物多樣性。在苔海綿共生微生物測序獲得的15098個OTU中,13個僅存在于各個生長階段的海綿,而在海水中未檢測出,稱為“海綿特異性微生物”。美麗海綿共生微生物測序獲得的14152個OTU中,存在6個海綿特異性微生物。雖然在門的水平上,幼體海綿與成體海綿的共生微生物群落的組成大致相同,但多樣性和豐度并不一致,并且在不同階段均有獨特的“階段特異性”微生物群落。其中,附著前期的苔海綿幼體共生梭狀芽孢桿菌（Clostridia）和擬桿菌（Bacteroidia）的豐度達5.6%和2%,而在其他階段的豐度均低于1%,甚至未檢測出。與此類似,這兩類菌群在美麗海綿的胚胎期豐度最高,達3.6%和1.6%,附著前期幼體次之,其他階段的豐度均低于1%。而在成體階段,苔海綿和美麗海綿的共生藍細菌（Cyanobacteria）豐度均顯著高于幼體階段和海水,是幼體海綿的2倍以上,海水的10倍以上。在分析階段特異性微生物類群與宿主生長階段相關(guān)性的基礎(chǔ)上,結(jié)合前期課題組已分離的海綿共生微生物菌株,我們分別對幼體海綿和成體海綿的特征微生物的功能進行初步研究。一方面,通過添加不同細菌至海綿幼體生活的水體觀察幼體附著情況。實驗結(jié)果表明,多個添加擬桿菌的實驗組（Bac組）幼體附著率高于正常海水組的幼體附著率。如擬桿菌Bac2組和Bac3組在104 cfu/mL的濃度下的幼體附著率達22%,顯著高于正常海水組的幼體附著率（10%）。添加擬桿菌混合菌的實驗組中,Bac1+2+3組在104cfu/mL的濃度下幼體附著率最高,達48%;Bac1+2組在103cfu/mL的濃度下幼體附著率達28%。兩個組與正常海水組有極顯著差異。根據(jù)實驗結(jié)果,可初步判斷擬桿菌對苔海綿幼體的附著有促進作用。另一方面,藍細菌（Cyanobacteria）在海洋C/N/P循環(huán)中具有重要作用,本研究以多聚磷酸鹽（polyphosphate,polyP）為切入點,通過熒光定量檢測的方法,發(fā)現(xiàn)成體苔海綿中多聚磷酸鹽含量占海綿干重的0.372 ±0.027%,遠高于成體美麗海綿和成體山海綿（0.001-0.005%）。利用共聚焦顯微鏡我們在成體苔海綿的組織中觀察到了大量的多聚磷酸鹽顆粒。進一步比較不同海綿共生藍細菌的豐度,發(fā)現(xiàn)在綱水平上,苔海綿的聚球藻（Synechococcophycideae）含量豐富,而美麗海綿和山海綿的Synechococcophycideae含量幾乎為零。并且我們從海綿共生功能體的總DNA中擴增出了聚球藻目（Synechococcales）的多聚磷酸鹽激酶（ppk）基因,從基因水平上證明與海綿共生的聚球藻能夠合成多聚磷酸鹽。故推測成體苔海綿生長過程中,共生聚球藻合成多聚磷酸鹽作為能量儲備供給宿主。
呂慧[6]（2018）在《公共健康導(dǎo)向下嶺南居住區(qū)景觀設(shè)計與蚊患防控關(guān)聯(lián)研究》文中研究指明近年來隨著城市化的飛速發(fā)展,城市公共健康問題日益凸顯,關(guān)注健康已成為人居環(huán)境研究的重要發(fā)展方向。居住區(qū)景觀與居民生活息息相關(guān),在保障和促進居民公共健康方面發(fā)揮著重要作用。但是與景觀和健康密切相關(guān)的蚊患防控問題尚未得到景觀設(shè)計領(lǐng)域應(yīng)有的重視。一方面蚊蟲能傳播瘧疾、登革熱等多種疾病,每年能致數(shù)億人染病,數(shù)百萬人喪生,嚴重威脅人類健康。我國嶺南地區(qū)氣候溫暖、雨水充沛、植被豐富,蚊蟲活動期長,對居民健康影響更大,蚊患防控的需求也更為迫切。另一方面居住區(qū)景觀中的水景、植物、排水系統(tǒng)等均可為蚊蟲孳生創(chuàng)造有利條件。特別是近年來生態(tài)、低碳、低影響開發(fā)、海綿城市等設(shè)計理念的普及進一步促進了景觀中水體和植物的應(yīng)用,不可否認這對生態(tài)保護與修復(fù)具有重要作用,但也會增加蚊蟲孳生的風(fēng)險。因此從公共健康與城市規(guī)劃學(xué)科交叉角度出發(fā),研究如何進行居住區(qū)景觀設(shè)計可以在實現(xiàn)景觀應(yīng)有功能的基礎(chǔ)上減少蚊蟲的孳生,對保護和促進居民健康具有重要的現(xiàn)實意義,可豐富健康人居環(huán)境理論研究領(lǐng)域內(nèi)容,同時也可為生態(tài)住區(qū)和海綿城市建設(shè)提供一定的參考與借鑒。本文首先分析闡述了在嶺南居住區(qū)景觀設(shè)計中關(guān)注蚊患防控問題的必要性和重要性,繼而通過大量調(diào)查,研究了居住區(qū)景觀構(gòu)成與蚊蟲數(shù)量的相關(guān)性,在此基礎(chǔ)上建立了居住區(qū)景觀的蚊蟲孳生風(fēng)險評價模型,最終構(gòu)建出利于蚊患防控的居住區(qū)景觀規(guī)劃設(shè)計策略體系。主要研究成果如下:（1）對佛山30個典型小區(qū)的景觀設(shè)計現(xiàn)狀和居民主觀蚊情感受進行實地調(diào)查和問卷調(diào)查,并運用SPSS統(tǒng)計軟件對景觀設(shè)計因子與主觀蚊情感受的相關(guān)性分析。調(diào)查結(jié)果顯示30個小區(qū)景觀具有諸多可能導(dǎo)致蚊蟲孳生的特點,如平均綠地率偏高、水景面積占比較高、水深在50cm以下的淺水池數(shù)量比較多、動態(tài)水景循環(huán)系統(tǒng)開啟率低、室外排水系統(tǒng)設(shè)計和植物種類選擇較少考慮蚊蟲防控問題、存在較多植物圍合度高通風(fēng)采光較差的戶外活動空間、兼具驅(qū)滅蚊功能的景觀小品普及率低等。為了防控蚊蟲和節(jié)約成本,很多水景長期干涸閑置難以發(fā)揮應(yīng)有功能,造成土地資源浪費。問卷調(diào)查結(jié)果顯示超過60%的受訪者認為小區(qū)蚊蟲對自己戶外活動影響“非常大”和“比較大”,蚊蟲生態(tài)防控訴求迫切。11個景觀設(shè)計因子中“淺水池面積”、“水景面積比例”、“是否毗鄰城市水系”、“泳池面積”和“草本植物覆蓋率”5個因子與“居民主觀蚊情感受”顯著相關(guān)。（2）對各景觀設(shè)計因子與客觀蚊蟲數(shù)量的相關(guān)性進行實地調(diào)查和實驗。研究結(jié)果表明10種不同類型戶外活動空間內(nèi)的成年蚊密度有顯著差異,同時成年蚊密度與測點風(fēng)速呈顯著負相關(guān)。景觀中不同類型水體的蚊幼陽性率存在顯著差異,陽性率在60%以上的水體為山石窩洞積水、水景蓄水池積水、竹林竹筒積水、淺水池、親水木平臺下結(jié)構(gòu)積水、直排式雨水口積水、閑置泳池積水,蚊幼陰性的水體為動態(tài)水景、正常使用狀態(tài)泳池、湖和有魚生存的深水池、密封的排水明溝和雨水井。相對于直排式雨水口,安裝防蚊閘和存水彎管的雨水口蚊幼陽性率顯著偏低?；铙w植物驅(qū)蚊實驗結(jié)果顯示多株（束）集中放置的馬櫻丹和蚊凈香草在活體狀態(tài)下有較顯著的驅(qū)蚊效果。（3）為了對居住區(qū)景觀的蚊蟲孳生風(fēng)險進行評價,本研究首次提出針對居住區(qū)景觀的蚊蟲孳生風(fēng)險指數(shù)（MBRI）,構(gòu)建了有效而可行的數(shù)學(xué)模型,并完成模型的有效性檢驗和閾值計算。基于前述研究成果篩選出與蚊蟲孳生顯著相關(guān)的景觀因子作為評價指標(biāo),運用層次分析法（AHP）構(gòu)建評價指標(biāo)體系,結(jié)合R語言編程,最終構(gòu)建出數(shù)學(xué)評價模型。利用該模型對8個小區(qū)景觀蚊蟲孳生風(fēng)險進行評價,線性回歸檢驗結(jié)果顯示利用模型計算的結(jié)果與8個小區(qū)居民的主觀蚊情感受評價結(jié)果具有較高的擬合度（R2=0.866）,證明了該模型的有效性和可行性。居住區(qū)景觀的MBRI計算值不宜超過2.2,此時居住區(qū)景觀的蚊蟲孳生風(fēng)險較小。當(dāng)MBRI計算值超過4.1時,則表示該居住區(qū)景觀具有極高的蚊蟲孳生風(fēng)險,應(yīng)當(dāng)予以整改。（4）最終在前面章節(jié)研究成果的基礎(chǔ)上,從引導(dǎo)、實施和評估三個方面構(gòu)建利于蚊患防控的居住區(qū)景觀設(shè)計策略體系。并重點針對實施策略,從居住區(qū)景觀功能與空間布局、水景、室外排水系統(tǒng)、植物景觀和景觀小品五個方面,提出詳細的利于蚊患防控的居住區(qū)景觀規(guī)劃設(shè)計策略和方法。本文主要創(chuàng)新點:探索了公共健康與城市規(guī)劃與設(shè)計交叉領(lǐng)域新的研究視角,提出在居住區(qū)景觀設(shè)計中關(guān)注蚊患防控的必要性和重要性;系統(tǒng)研究了景觀設(shè)計各因子與蚊蟲孳生之間的相關(guān)性;針對居住區(qū)景觀的蚊蟲孳生風(fēng)險建立了有效而可行的量化評價模型;從景觀設(shè)計的角度提出利于蚊患防控的居住區(qū)景觀設(shè)計策略與方法體系。
丁震[7]（2017）在《水體中藻源致嗅物質(zhì)的辨識、分布與處理研究》文中研究指明從本世紀50年代末至今,已有二十多個國家先后報道了水體存在異味的問題并進行了相關(guān)探索研究。近年來,我國各地突發(fā)飲水污染事件頻發(fā),據(jù)調(diào)查其中很多和飲用水中藻類產(chǎn)生的異味相關(guān)。本文以水體中典型藻源嗅味物質(zhì)為研究對象,就嗅味物質(zhì)的檢測方法;在水體中的分布、遷移規(guī)律;與藻類、氣象、環(huán)境條件的相關(guān)性;水廠水處理工藝的去除效率以及電化學(xué)氧化降解方法等方面做了研究和探索。主要內(nèi)容和結(jié)果如下:（一）水中5種典型藻源致嗅物質(zhì)GSM,2-MIB,DMTS,β-cyclocitral和β-ionone的HS-SPME/GC-MS和P&T檢測方法的建立、比對及改進。通過優(yōu)化HS-SPME檢測的前處理方法,選擇DVB/CAR/PDMSS萃取纖維、60℃萃取溫度、30min萃取時間、5min解析時間、25%NaCl濃度。HS-SPME/GC-MS方法的回收率可以達到86%～112%,檢出限小于1.3ng/L,精密度RSD<9.9%,能夠滿足飲用水國標(biāo)中GSM和2-MIB的標(biāo)準(zhǔn)值要求。（二）以太湖為例,深入研究了氣溫、藻種群、藻密度、葉綠素a、氨氮、溶解氧、耗氧量等氣象、環(huán)境因子對北太湖、西太湖和東太湖水體中嗅味物質(zhì)的影響,探討了藻源嗅味物質(zhì)產(chǎn)生和時空變化規(guī)律,分析了環(huán)境因子與藻源嗅味物質(zhì)的相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn),太湖產(chǎn)嗅藻類主要為藍藻門的微囊藻和顫藻;藻類的生長主要受溫度的影響;嗅味物質(zhì)濃度:北太湖>西太湖>東太湖,夏季高于其他季節(jié);嗅味物質(zhì)濃度與藻種屬和數(shù)量密切相關(guān),水中溶解的嗅味物質(zhì)濃度僅占藻細胞內(nèi)濃度的15～220%,底泥中嗅味物質(zhì)濃度遠高于水中;DO濃度與藻密度呈顯著正相關(guān)關(guān)系,監(jiān)測DO的變化可以預(yù)測、預(yù)警藻類繁殖和嗅味物質(zhì)的濃度。（三）調(diào)查了江蘇省4大不同水系的水源和采用不同水處理工藝的水廠各個水處理階段的嗅味物質(zhì)含量。江蘇省水源水中嗅味物質(zhì)濃度:太湖水系>淮河水系>長江水系>沂沭泅水系;各種類型的水處理工藝對GSM和2-MIB的去除效率有明顯差別,03-BAC深度水處理工藝可以較好的去除水中嗅味物質(zhì)。超濾對GSM和2-MIB的去除幾乎沒有影響。各種類型水處理工藝對2-MIB的去除效率均高于GSM;市售包裝飲用水中普遍檢出了GSM、2-MIB、DMTS和β-cyclocitral,提示即使是通過深度處理加工依然不能完全去除水中的嗅味物質(zhì)。（四）制備硼摻雜金剛石（BDD）薄膜電極對水中嗅味物質(zhì)GSM進行降解研究,探討電催化氧化降解GSM的機理。通過正交實驗設(shè)計研究了 BDD電極電流密度、溶液流速、嗅味物質(zhì)初始濃度和溶液pH值對GSM降解的影響,得到最優(yōu)降解實驗方案為:電流密度50 mA/cm2,溶液流速300 mL/min,GSM初始濃度30 ng/L,溶液pH值7.2。在最優(yōu)方案條件下,GSM去除率可達97.16%。實驗表明·OH的強氧化性是降解GSM最主要的因素,降解過程中會生成醛、酮和醇類化合物,最終可以完全礦化為H2O和CO2。
孫實[8]（2016）在《新型抗菌活性氨基酸卟啉光敏劑4I的抗菌活性和細胞毒性的體外研究》文中研究表明研究目的:（1）評價新型氨基酸卟啉光敏劑4I對臨床分離的11種敏感菌株和多重耐藥菌株的抗菌活性,并比較4I介導(dǎo)的a PDT對臨床分離的同一菌種的多重耐藥菌和敏感菌之間的差異;（2）檢測4I對Hacat（永生化表皮細胞）及RAW264.7（單核-巨噬細胞）的細胞毒性,為進一步的體內(nèi)實驗提供基礎(chǔ)。研究方法:（1）抗菌活性實驗依據(jù)臨床藥敏結(jié)果選取所需菌株,挑取新鮮菌落制備菌懸液,設(shè)置a PDT組（4I+菌液+光照）、避光組（4I+菌液+未光照）、陰性對照組（菌液+純水+光照）、空白對照組（培養(yǎng)基+純水+光照）共4組,設(shè)8個濃度梯度,最高濃度為62.5μM,最低濃度為0.49μM。二倍稀釋法將不同濃度光敏劑與菌懸液避光孵育30min后,除避光組外,其余立即行紅色激光照射30min（650nm,6J/cm2）,采用涂板計數(shù)法評定出4I對不同菌株的MIC和MBC值,計算ED50和ED90濃度;并比較4I對臨床分離的同一菌種的多重耐藥菌和敏感菌之間的差異;（2）細胞毒性實驗培養(yǎng)收集Hacat、RAW264.7,96孔板內(nèi)接種,實驗分為aPDT組（4I+培養(yǎng)基+細胞+光照）,避光組（4I+培養(yǎng)基+細胞+未光照）共2組,每組分別設(shè)置對照組（培養(yǎng)基+細胞+光照/未光照）、空白組（培養(yǎng)基+CCK8）以及7個不同濃度梯度的藥物組,最高濃度為62.5μM,最低濃度為0.98μM,貼壁培養(yǎng)24h后,棄掉上清液,加入二倍稀釋法稀釋好的藥液或新培養(yǎng)基,避光孵育30min,孵育后,a PDT組立即照射30min（參數(shù)同抗菌活性實驗）,避光組同等條件下不接受光照避光靜置30min,更換含有CCK-8的培養(yǎng)基100ul/孔（10ul CCK-8:100ul培養(yǎng)基）,酶標(biāo)儀450nm處測量吸光度,記錄結(jié)果。結(jié)果:（1）抗菌活性實驗新型氨基酸卟啉光敏劑4I對臨床篩選出的11種菌種,除奇異變形桿菌、摩根摩根菌外,其余菌株全部有效,抑菌效果與藥物濃度成正比,對革蘭氏陽性菌的殺菌效果優(yōu)于革蘭氏陰性菌（P<0.01）,對于同一菌種的敏感菌和多重耐藥菌抑菌效果未見明顯差異（P>0.05）,抑制50%菌種的全部菌株生長的有效抑菌濃度值（ED50）和抑制90%菌種的全部菌株生長的有效抑菌濃度值（ED90）的相應(yīng)藥物濃度分別為0.822μM（95%CI 0.590-1.065μM）和1.947μM（95%CI 1.434-3.612μM）;單純4I避光組,對細菌生長無抑制作用;單純紅色弱激光650nm,能量密度6J/cm2作用下,對細菌生長無抑制作用。（2）細胞毒性實驗單純給予紅色激光照射,對Hacat有促進細胞生長作用（P<0.001）;對RAW264.7生長沒有影響（P>0.999）。單純給予光敏劑藥物孵育30min,對Hacat有促進生長的作用（P<0.05）,不同濃度組別之間的促生長作用無明顯差異（P>0.05）;較高濃度組62.5μM至15.6μM對RAW264.7有輕度抑制作用（P<0.001）,其余濃度組對生長無影響（P>0.05）。a PDT后,兩種細胞的存活率都明顯降低,不同濃度組殺傷作用之間未見明顯差異（P>0.05）,4I介導(dǎo)的a PDT后Hacat和RAW264.7的細胞毒性IC50濃度值為分別為1.846μM（95%CI0±6.416μM）和7.447μM（95%CI 1.110±20.087μM）。結(jié)論:（1）新型氨基酸卟啉類光敏劑4I具有高效、廣譜的抗菌活性,無細胞毒性,低毒副作用,是一種前景極佳的抗菌光敏劑。（2）4I具有促進細胞生長的作用,因此4I結(jié)合紅色弱激光的光動力抗菌療法具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。
孫強[9]（2015）在《山東省流通環(huán)節(jié)水產(chǎn)品藥物殘留現(xiàn)狀的研究》文中研究表明隨著人們?nèi)罕娚钏降奶岣?人民對食品安全的要求也越來越高,食品安全問題已成為人們關(guān)注和討論的焦點、熱點。水產(chǎn)品作為群眾喜愛的營養(yǎng)豐富的食品,近年來其安全事件卻頻繁發(fā)生,尤其是非法添加藥物的現(xiàn)象屢禁不鮮,這不僅對消費者健康造成了損害,也打擊了相關(guān)行業(yè),制約了相關(guān)水產(chǎn)品進入國際市場。水產(chǎn)品的質(zhì)量檢測為水產(chǎn)品監(jiān)管提供準(zhǔn)確可靠的技術(shù)支撐,也為水產(chǎn)品質(zhì)量安全提供了重要保障。本文通過對山東省流通環(huán)節(jié)不同場所（農(nóng)貿(mào)市場、超市、批發(fā)市場、商店）的水產(chǎn)品抽樣檢測,建立了相關(guān)的藥物殘留的檢驗方法,分析了水產(chǎn)品流通存在的問題并系統(tǒng)的提出了解決方法。研究內(nèi)容及結(jié)果如下:1.參照國標(biāo)、農(nóng)業(yè)部等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)并進行方法學(xué)驗證,優(yōu)化并建立適應(yīng)大批量水產(chǎn)品藥物殘留（硝基呋喃代謝物、氯霉素、孔雀石綠、己烯雌酚）含量測定的檢驗方法。2.通過全省17地市400批流通領(lǐng)域水產(chǎn)品藥物殘留的檢測分析,水產(chǎn)品質(zhì)量整體是安全的,不合格率較低,合格率為93.5%。但還是存在藥物濫用的現(xiàn)象,尤其是非法使用硝基呋喃（不合格率4.8%）、孔雀石綠（不合格率1.2%）,還存在極大的食品安全風(fēng)險。通過匯總的結(jié)果信息開展研判和分析,以便及時發(fā)現(xiàn)流通環(huán)節(jié)水產(chǎn)品的安全風(fēng)險新情況或新趨勢,為監(jiān)管部門制定政策提供可靠有效的數(shù)據(jù)。3.按不同抽樣場所統(tǒng)計,超市合格率最低為89.9%,造成超市不合格率高的原因是由于超市中多寶魚的不合格率高造成的,其他三個場所的合格率差別不大。按照不同種類結(jié)果統(tǒng)計,海水水產(chǎn)品合格率為93.9%淡水水產(chǎn)為93.0%;魚類按不合格率最高的前三類為多寶魚85.7%、鱸魚15.4%、武昌魚12.5%。4.在發(fā)現(xiàn)分析水產(chǎn)品各個環(huán)節(jié)可能帶來的食品風(fēng)險基礎(chǔ)上,通過加強政府監(jiān)管水平、提高檢驗?zāi)芰εc水平、建立水產(chǎn)品可追溯體系、提高企業(yè)的質(zhì)量管理能力建立健全信用評價機制等多方面手段著手解決流通環(huán)節(jié)上水產(chǎn)品的安全風(fēng)險問題。
邵曉冬[10]（2014）在《洛陽地區(qū)豬弓形蟲感染情況調(diào)查及病原分離鑒定》文中指出弓形蟲是一種專性機會性致病的原蟲，能感染并寄生于許多種動物、禽類及水體動物等的細胞內(nèi)，引起人獸共患弓形蟲?。═oxoplasmosis）。弓形蟲感染比較普遍，呈世界范圍內(nèi)流行，人和動物的感染率均很高，且危害比較大。本研究首先采集洛陽地區(qū)豬血清410份，通過ELISA方法調(diào)查豬弓形蟲的感染情況；然后基于弓形蟲特異的200300個拷貝的529bp序列片段，通過PCR方法對洛陽地區(qū)159頭豬的肺門淋巴結(jié)和肺臟進行檢測，并分離鑒定。最后將PCR檢測的陽性組織（17頭豬）采集淋巴結(jié)和肺組織研磨、過濾，通過腹腔接種方式感染小鼠，分離弓形蟲，并通過形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法對蟲株進行分離鑒定。結(jié)果表明，在410份豬血清樣品，弓形蟲抗體陽性的血清154份，抗體陽性率達35.4%；四個地區(qū)中，最高的是伊川縣（38.6%），最低的是嵩縣（33.0%），四個縣區(qū)之間的差異均不顯著（P>0.05）；散養(yǎng)豬弓形蟲抗體陽性率（43.1%）明顯高于規(guī)?；B(yǎng)豬場（27.4%），差異顯著（P<0.05）；母豬、育肥豬和保育豬的分別是50.4%、34.5%、22.2%，三者之間差異顯著（P<0.05）。在159例豬肺門淋巴結(jié)和肺臟樣本中，有17例檢測出弓形蟲DNA，陽性率為10.7%；其中病死豬的陽性率（18.5%）明顯高于屠宰豬（6.7%），隨機挑取3株弓形蟲陽性DNA測序，比對結(jié)果顯示其與RH株的相似性為97%。17份PCR檢測呈弓形蟲陽性的組織（肺門淋巴結(jié)和肺臟）經(jīng)處理后分別接種17組小鼠，有5組小鼠出現(xiàn)疑似急性弓形蟲病的癥狀，抽取腹水鏡檢發(fā)現(xiàn)月牙形弓形蟲，經(jīng)PCR擴增和測序比對，其序列與RH株的相似性達97%。研究結(jié)果表明，洛陽地區(qū)豬弓形蟲的感染普遍，且感染率比較高，該研究結(jié)果將為進一步研究弓形蟲的遺傳學(xué)特點，預(yù)防和控制人和動物的弓形蟲病提供重要參考。
二、水生動物原蟲的實驗室檢驗法（論文開題報告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細分析其設(shè)計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實驗法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認事物間的因果關(guān)系。
文獻研究法：通過調(diào)查文獻來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實踐的需要提出設(shè)計。
定性分析法：對研究對象進行“質(zhì)”的方面的研究，這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認識進一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進行研究。
功能分析法：這是社會科學(xué)用來分析社會現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、水生動物原蟲的實驗室檢驗法（論文提綱范文）
（1）粘體動物系統(tǒng)發(fā)育地位與內(nèi)寄生適應(yīng)機制研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文獻綜述 |
| 1 粘體動物的起源及分類地位 |
| 1.1 粘體動物起源 |
| 1.2 粘體動物的分類地位 |
| 2 粘體動物系統(tǒng)發(fā)育基因組學(xué)研究進展 |
| 2.1 系統(tǒng)發(fā)育基因組學(xué) |
| 2.2 單拷貝核基因基本特征及應(yīng)用 |
| 2.3 粘體動物系統(tǒng)發(fā)育基因組學(xué)展望 |
| 3 粘體動物刺絲囊生物學(xué)研究進展 |
| 3.1 刺絲囊形態(tài)結(jié)構(gòu) |
| 3.2 刺絲囊蛋白組成 |
| 3.3 驅(qū)動刺絲囊釋放的能量來源 |
| 4 粘體動物適應(yīng)性進化研究進展 |
| 4.1 適應(yīng)性進化 |
| 4.2 比較基因組學(xué)在粘體動物適應(yīng)性進化研究中的應(yīng)用 |
| 4.3 碘泡科物種:粘體動物適應(yīng)性進化研究的優(yōu)秀材料 |
| 5 本研究的目的和意義 |
| 第二章 基于單拷貝核基因的粘體動物系統(tǒng)發(fā)育地位分析 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 樣品收集及處理 |
| 2.2 基因組、轉(zhuǎn)錄組二代測序及組裝 |
| 2.3 直系同源基因提取 |
| 2.4 單拷貝基因選擇與數(shù)據(jù)過濾 |
| 2.5 系統(tǒng)發(fā)育分析 |
| 2.6 分歧時間估算 |
| 3 結(jié)果和分析 |
| 3.1 后生動物系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系 |
| 3.2 刺胞動物系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系 |
| 3.3 可變拓撲結(jié)構(gòu)檢驗 |
| 3.4 快速進化位點梯度剔除 |
| 3.5 分歧時間 |
| 4 討論 |
| 第三章 粘孢子蟲刺絲囊與殼瓣分離提純方法的建立 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 樣品收集及處理 |
| 2.2 蔗糖及Percoll密度梯度離心液配制 |
| 2.3 完整孢子的分離及純化 |
| 2.4 孢子解離 |
| 2.5 刺絲囊提取 |
| 2.6 殼瓣提取 |
| 2.7 溫度、鹽度及多種化合物對孢子及離體刺絲囊釋放的影響 |
| 2.8 重金屬離子對孢子及離體刺絲囊釋放的影響 |
| 2.9 透射電鏡 |
| 3 結(jié)果和分析 |
| 3.1 孢子分離純化及解離 |
| 3.2 刺絲囊分離及純化 |
| 3.3 刺絲囊透射電鏡 |
| 3.4 溫度、鹽度、多種化合物及重金屬離子對孢子及離體刺絲囊釋放的影響 |
| 3.5 殼瓣分離及純化 |
| 4 討論 |
| 第四章 粘體動物綜合蛋白數(shù)據(jù)庫的構(gòu)建 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 樣品收集及處理 |
| 2.2 基因組、轉(zhuǎn)錄組二代測序及組裝 |
| 2.3 序列污染剔除 |
| 2.4 粘體動物綜合蛋白數(shù)據(jù)庫及對照數(shù)據(jù)庫的構(gòu)建 |
| 2.5 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜及蛋白組組學(xué)分析 |
| 2.6 數(shù)據(jù)庫評估 |
| 3 結(jié)果和分析 |
| 3.1 粘體動物綜合蛋白數(shù)據(jù)庫及對照數(shù)據(jù)庫特征 |
| 3.2 基于質(zhì)譜鑒定肽段與蛋白數(shù)量的數(shù)據(jù)庫質(zhì)量評估 |
| 3.3 數(shù)據(jù)庫肽段與蛋白交集 |
| 3.4 基于完整度的數(shù)據(jù)庫質(zhì)量評估 |
| 3.5 通過線性擬合保留時間與理論疏水性指數(shù)以驗證肽段有效性 |
| 3.6 數(shù)據(jù)庫特異性肽段結(jié)果驗證 |
| 4 討論 |
| 第五章 刺絲囊對粘體動物/刺胞動物適應(yīng)性進化的貢獻評估 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 樣品收集及處理 |
| 2.2 掃描電鏡 |
| 2.3 基因組、轉(zhuǎn)錄組二代測序及組裝 |
| 2.4 蛋白質(zhì)組參考數(shù)據(jù)庫構(gòu)建 |
| 2.5 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜及蛋白組組學(xué)分析 |
| 2.6 比較蛋白組組學(xué)分析及毒液組學(xué)分析 |
| 2.7 系統(tǒng)發(fā)育分析 |
| 2.8 選擇壓力分析及適應(yīng)定量 |
| 3 結(jié)果和分析 |
| 3.1 比較蛋白質(zhì)組學(xué)及毒液組學(xué) |
| 3.2 刺絲囊核心基因分析 |
| 3.3 刺絲囊核心基因的主要進化事件分析 |
| 3.4 選擇壓力分析及適應(yīng)定量 |
| 4 討論 |
| 4.1 刺絲囊異質(zhì)性及細胞器-物種進化不一致性支持強烈的物種特異適應(yīng) |
| 4.2 刺絲囊的自發(fā)性起源 |
| 4.3 刺絲囊的去中心化進化模式 |
| 4.4 刺絲囊中的高頻適應(yīng) |
| 第六章 洪湖碘泡蟲基因組適應(yīng)性進化研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 樣品收集及處理 |
| 2.2 基因組、轉(zhuǎn)錄組二代測序及組裝 |
| 2.3 基因組大小評估 |
| 2.4 基因組測序及組裝 |
| 2.5 基因組污染剔除 |
| 2.6 基因組注釋 |
| 2.7 基因家族及系統(tǒng)發(fā)育分析 |
| 2.8 正選擇分析 |
| 2.9 基因獲得與缺失分析 |
| 2.10 4DTv分析 |
| 3 結(jié)果和分析 |
| 3.1 基因組組裝與注釋 |
| 3.2 轉(zhuǎn)座及基因組加倍分析 |
| 3.3 系統(tǒng)發(fā)育基因組學(xué) |
| 3.4 基因家族進化 |
| 3.5 精簡的神經(jīng)系統(tǒng)基因 |
| 3.6 先天免疫相關(guān)基因的缺失 |
| 3.7 抗逆、侵襲、能量代謝以及細胞過程的增強 |
| 3.8 保守的中胚層及肌肉發(fā)育元件 |
| 3.9 Wnt與 Hedgehog信號通路分析 |
| 4 討論 |
| 第七章 全文總結(jié)及不足 |
| 1 全文總結(jié) |
| 2 不足 |
| 參考文獻 |
| 附錄 |
| 致謝 |
（2）感染條件下草魚細胞自噬的發(fā)生及其抗菌作用和機制的研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 嗜水氣單胞菌及其在魚類的研究現(xiàn)狀 |
| 1.1.1 嗜水氣單胞菌的病理特征及進程 |
| 1.1.2 嗜水氣單胞菌的毒力因子及其與宿主的互作 |
| 1.1.3 嗜水氣單胞菌的防治 |
| 1.2 殺魚愛德華氏菌及其在魚類的研究現(xiàn)狀 |
| 1.2.1 殺魚愛德華氏菌的病理特征及進程 |
| 1.2.2 殺魚愛德華氏菌的毒力因子及其宿主的互作 |
| 1.2.3 殺魚愛德華氏菌的防治 |
| 1.3 細胞自噬與細菌互作的研究現(xiàn)狀 |
| 1.3.1 自噬簡介 |
| 1.3.2 自噬的形成機制 |
| 1.3.3 單核/巨噬細胞自噬在細菌感染中的作用 |
| 1.3.4 感染條件下魚類自噬的研究 |
| 1.4 本論文的研究意義和研究內(nèi)容 |
| 1.5 本論文的結(jié)構(gòu)組成 |
| 第二章 實驗材料和方法 |
| 2.1 實驗動物、菌株及細胞株 |
| 2.1.1 草魚 |
| 2.1.2 嗜水氣單胞菌 |
| 2.1.3 殺魚愛德華氏菌 |
| 2.1.4 大腸桿菌 |
| 2.1.5 鯉魚上皮細胞株(EPC) |
| 2.2 草魚原代頭腎單核/巨噬細胞的分離和培養(yǎng) |
| 2.3 基因克隆與載體構(gòu)建 |
| 2.3.1 大腸桿菌JM109 感受態(tài)制備及轉(zhuǎn)化 |
| 2.3.2 細胞或組織中總RNA提取 |
| 2.3.3 cDNA模板制備 |
| 2.3.4 殺魚愛德華氏菌基因組提取 |
| 2.3.5 草魚自噬相關(guān)基因克隆 |
| 2.3.6 質(zhì)粒構(gòu)建和轉(zhuǎn)染 |
| 2.4 紅色熒光標(biāo)記的殺魚愛德華氏菌菌株構(gòu)建(RFP-E.piscicida) |
| 2.4.1 殺魚愛德華氏菌感受態(tài)制備 |
| 2.4.2 電轉(zhuǎn)化 |
| 2.5 實時熒光定量PCR(qPCR) |
| 2.6 免疫印跡實驗(Western Blot,WB) |
| 2.7 免疫共沉淀(Co-IP) |
| 2.8 免疫熒光實驗 |
| 2.9 慶大霉素保護實驗 |
| 2.10 一氧化氮(NO)定量測定 |
| 2.11 草魚體內(nèi)藥物注射及殺魚愛德華氏菌攻毒 |
| 2.12 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析 |
| 第三章 殺魚愛德華氏菌誘導(dǎo)細胞自噬及其機制的探究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 實驗材料和方法 |
| 3.2.1 實驗材料 |
| 3.2.2 紅色熒光蛋白標(biāo)記殺魚愛德華氏菌(RFP-E.piscicida) |
| 3.2.3 自噬小體的觀察 |
| 3.2.4 自噬小體與殺魚愛德華氏菌的共定位 |
| 3.2.5 溶酶體與殺魚愛德華氏菌的共定位 |
| 3.2.6 草魚自噬基因ATG16L1 的克隆與生物信息學(xué)分析 |
| 3.2.7 NOD1 和殺魚愛德華氏菌共定位 |
| 3.2.8 在原代細胞和細胞系中NOD1和ATG16L1 的相互作用 |
| 3.2.9 NOD1和ATG16L1 的共定位 |
| 3.2.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析 |
| 3.3 實驗結(jié)果與分析 |
| 3.3.1 殺魚愛德華氏菌引起細胞自噬 |
| 3.3.2 紅色熒光標(biāo)記的殺魚愛德華氏菌與LC3 共定位 |
| 3.3.3 溶酶體與紅色熒光標(biāo)記的殺魚愛德華氏菌共定位 |
| 3.3.4 草魚自噬相關(guān)基因ATG16L1 的克隆與生物信息學(xué)分析 |
| 3.3.5 殺魚愛德華氏菌誘導(dǎo)細胞自噬的機制探究 |
| 3.4 討論 |
| 3.5 本章小結(jié) |
| 第四章 殺魚愛德華氏菌對介導(dǎo)自噬發(fā)生的NOD1 途徑的調(diào)控作用和機制 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 實驗材料和方法 |
| 4.2.1 實驗材料 |
| 4.2.2 草魚ESRRA的基因克隆及生物信息學(xué)分析 |
| 4.2.3 表達質(zhì)粒構(gòu)建和轉(zhuǎn)染 |
| 4.2.4 NOD1、LC3和ATG16L1 蛋白表達量檢測 |
| 4.2.5 NOD1、ESRRA和 ATG16L1 基因表達量檢測 |
| 4.2.6 NOD1 的泛素化檢測 |
| 4.2.7 原代單核巨噬細胞的分離 |
| 4.2.8 細胞的藥物處理 |
| 4.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析 |
| 4.3 實驗結(jié)果和分析 |
| 4.3.1 殺魚愛德華氏菌下調(diào)NOD1 的蛋白表達 |
| 4.3.2 殺魚愛德華氏菌下調(diào)NOD1和ATG16L1 的基因表達 |
| 4.3.3 ESRRA的克隆與生物信息學(xué)分析 |
| 4.3.4 殺魚愛德華氏菌下調(diào)ESRRA的基因表達 |
| 4.3.5 Kaempferol下調(diào)NOD1和ATG16L1 基因和蛋白的表達 |
| 4.3.6 殺魚愛德華氏菌通過ESRRA調(diào)控NOD1和ATG16L1 基因和蛋白的表達 |
| 4.3.7 殺魚愛德華氏菌通過泛素——蛋白酶體途徑調(diào)控NOD1 表達 |
| 4.3.8 殺魚愛德華氏菌毒力因子參與調(diào)控NOD1 泛素化 |
| 4.4 討論 |
| 4.5 本章小結(jié) |
| 第五章 IFN-γ介導(dǎo)自噬與殺魚愛德華氏菌互作的探究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 實驗材料和方法 |
| 5.2.1 實驗材料 |
| 5.2.2 IFN-γ的基因表達 |
| 5.2.3 自噬小體的觀察 |
| 5.2.4 自噬小體與殺魚愛德華氏菌的共定位 |
| 5.2.5 免疫印跡實驗 |
| 5.2.6 NO產(chǎn)量測定 |
| 5.2.7 細胞的藥物處理 |
| 5.2.8 慶大霉素保護實驗 |
| 5.2.9 殺魚愛德華氏菌體內(nèi)攻毒實驗 |
| 5.2.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 |
| 5.3 實驗結(jié)果與分析 |
| 5.3.1 殺魚愛德華氏菌上調(diào)IFN-γ基因表達 |
| 5.3.2 IFN-γ調(diào)控自噬與殺魚愛德華氏菌的互作 |
| 5.3.3 IFN-γ上調(diào)單核/巨噬細胞自噬 |
| 5.3.4 IFN-γ通過自噬途徑清除胞內(nèi)殺魚愛德華氏菌 |
| 5.3.5 短時程內(nèi)IFN-γ清除殺魚愛德華氏菌不依賴于NO產(chǎn)生 |
| 5.4 討論 |
| 5.5 本章小結(jié) |
| 第六章 Rapamycin介導(dǎo)的自噬在殺魚愛德華氏菌感染中的作用 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 實驗材料和方法 |
| 6.2.1 實驗材料 |
| 6.2.2 自噬小體與殺魚愛德華氏菌的共定位 |
| 6.2.3 免疫印跡實驗 |
| 6.2.4 細胞的藥物處理 |
| 6.2.5 慶大霉素保護實驗 |
| 6.2.6 殺魚愛德華氏菌體內(nèi)攻毒實驗 |
| 6.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 |
| 6.3 實驗結(jié)果與分析 |
| 6.3.1 Rapamycin上調(diào)LC3-Ⅱ蛋白的表達。 |
| 6.3.2 Rapamycin調(diào)控自噬與殺魚愛德華氏菌的互作 |
| 6.3.3 Rapamycin促進胞內(nèi)殺魚愛德華氏菌的清除 |
| 6.3.4 Rapamycin能夠提高體內(nèi)感染殺魚愛德華氏菌的草魚的生存率 |
| 6.4 討論 |
| 6.5 本章小結(jié) |
| 第七章 嗜水氣單胞菌與細胞自噬互作的初步研究 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 實驗材料和方法 |
| 7.2.1 實驗材料 |
| 7.2.2 自噬小體與嗜水氣單胞菌的共定位 |
| 7.2.3 免疫印跡實驗 |
| 7.2.4 細胞的藥物處理 |
| 7.2.5 慶大霉素保護實驗 |
| 7.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 |
| 7.3 實驗結(jié)果與分析 |
| 7.3.1 嗜水氣單胞菌上調(diào)草魚原代單核/巨噬細胞的自噬水平 |
| 7.3.2 嗜水氣單胞菌與LC3 共定位 |
| 7.3.3 自噬介導(dǎo)胞內(nèi)嗜水氣單胞菌的清除 |
| 7.4 討論 |
| 7.5 本章小結(jié) |
| 第八章 全文總結(jié)與展望 |
| 8.1 研究總結(jié) |
| 8.2 研究展望 |
| 致謝 |
| 參考文獻 |
| 攻讀博士學(xué)位期間獲得的成果 |
（3）患病江豚微生態(tài)變化及遷地背景下江豚保護性研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 縮略語表(Abbreviation) |
| 第一部分 文獻綜述 |
| 1 長江江豚概況 |
| 1.1 江豚分類 |
| 1.2 江豚的地理分布 |
| 1.3 長江江豚的生活習(xí)性及特征 |
| 1.4 長江江豚現(xiàn)狀 |
| 1.5 長江江豚保護生物學(xué)研究進展 |
| 2 長江江豚遷地保護概述 |
| 2.1 遷地保護 |
| 2.2 江豚遷地保護歷史 |
| 2.3 長江江豚遷地保護現(xiàn)狀 |
| 2.3.1 湖北石首天鵝洲江豚保護區(qū)天鵝洲故道江豚繁育群體 |
| 2.3.2 安徽銅陵淡水豚保護區(qū)夾江江豚繁育群體 |
| 2.3.3 安徽安慶西江遷地保護區(qū)江豚繁育群體 |
| 2.3.4 湖北何王廟/湖南集成垸遷地保護區(qū)江豚繁育群體 |
| 2.3.5 中國科學(xué)院水生生物研究所白鱀豚館人工養(yǎng)殖種群 |
| 2.4 長江江豚遷地保護面臨的問題 |
| 2.4.1 半自然水域長江江豚的繁殖生物學(xué)研究欠缺 |
| 2.4.2 長江江豚疫病防控體系不健全 |
| 2.4.3 人工調(diào)控和生態(tài)補償機制不足 |
| 2.4.4 人為傷害和氣候條件是潛在的致危因素 |
| 3 鯨豚類動物疾病研究進展 |
| 3.1 海洋鯨豚類動物細菌性疾病研究進展 |
| 3.2 海洋鯨豚類動物病毒性疾病研究進展 |
| 3.2.1 鯨豚源麻疹病毒 |
| 3.2.2 鯨類痘病毒 |
| 3.2.3 鯨類乳頭狀瘤病毒 |
| 3.2.4 皰疹病毒/類皰疹病毒 |
| 3.2.5 流感病毒 |
| 3.2.6 其他病毒 |
| 3.3 海洋鯨豚類動物真菌性疾病研究進展 |
| 3.4 海洋鯨豚類動物寄生蟲性疾病研究進展 |
| 4 長江江豚疾病研究概況 |
| 4.1 長江江豚疾病研究現(xiàn)狀 |
| 4.1.1 解剖學(xué)研究 |
| 4.1.2 血液生理學(xué)研究 |
| 4.1.3 飼養(yǎng)管理研究 |
| 4.1.4 疾病相關(guān)研究 |
| 4.2 有關(guān)長江江豚疾病防控的幾點討論 |
| 5 本研究的目的與意義 |
| 第二部分 試驗部分 |
| 第一章 長江江豚細菌性疾病流行病學(xué)調(diào)查 |
| 1 研究背景 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 試驗材料 |
| 2.1.2 主要儀器設(shè)備 |
| 2.1.3 試驗試劑 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 樣品采集 |
| 2.2.2 長江江豚源細菌的分離鑒定 |
| 2.2.3 長江江豚腸道菌群16SrDNA測定 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 長江江豚細菌性樣品采集結(jié)果 |
| 3.2 細菌分離鑒定結(jié)果 |
| 3.2.1 呼吸孔樣本細菌分離鑒定結(jié)果 |
| 3.2.2 糞便樣本細菌分離鑒定結(jié)果 |
| 3.2.3 內(nèi)臟組織細菌分離鑒定結(jié)果 |
| 3.2.4 皮膚病灶細菌分離鑒定結(jié)果 |
| 3.2.5 腹腔積液細菌分離鑒定結(jié)果 |
| 3.2.6 胸腔積液細菌分離鑒定結(jié)果 |
| 3.2.7 血液樣本細菌分離鑒定結(jié)果 |
| 3.3 細菌分離培養(yǎng)形態(tài)及染色鏡檢結(jié)果 |
| 3.4 細菌理化鑒定結(jié)果 |
| 3.5 細菌PCR鑒定結(jié)果 |
| 3.6 長江江豚腸道菌群16SrDNA測定結(jié)果 |
| 3.6.1 測序數(shù)據(jù)處理 |
| 3.6.2 OTU分析和物種注釋 |
| 3.6.3 各樣品細菌多樣性及相關(guān)性分析 |
| 4 分析與討論 |
| 4.1 長江江豚樣品采集方法和處理方法的選擇 |
| 4.2 水生哺乳動物細菌性疾病檢測方法 |
| 4.3 長江江豚細菌性疾病流行情況 |
| 4.4 江豚呼吸道菌群與疾病的相關(guān)性 |
| 4.5 江豚胃腸道菌群與疾病的相關(guān)性 |
| 4.6 長江江豚的主要致病菌 |
| 5 總結(jié) |
| 第二章 長江江豚主要致病菌生物學(xué)特性研究 |
| 1 研究背景 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 試驗材料 |
| 2.1.1 細菌樣本 |
| 2.1.2 試驗動物 |
| 2.1.3 主要儀器設(shè)備 |
| 2.1.4 試驗試劑 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 細菌培養(yǎng)特性觀察 |
| 2.2.2 細菌理化特性鑒定 |
| 2.2.3 PCR擴增和測序 |
| 2.2.4 基因序列分析 |
| 2.2.5 藥物敏感性試驗 |
| 2.2.6 細菌致病性試驗 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 嗜水氣單胞菌YHA-AQ株生物學(xué)特性研究結(jié)果 |
| 3.1.1 嗜水氣單胞菌YHA-AQ株細菌培養(yǎng)特性 |
| 3.1.2 嗜水氣單胞菌YHA-AQ株理化特性鑒定結(jié)果 |
| 3.1.3 嗜水氣單胞菌YHA-AQ株遺傳進化關(guān)系 |
| 3.1.4 嗜水氣單胞菌YHA-AQ株藥物敏感性試驗結(jié)果 |
| 3.1.5 嗜水氣單胞菌YHA-AQ株小鼠致病力試驗 |
| 3.2 維氏氣單胞菌YVA-AQ株生物學(xué)特性研究結(jié)果 |
| 3.2.1 維氏氣單胞菌YVA-AQ株細菌培養(yǎng)特性 |
| 3.2.2 維氏氣單胞菌YVA-AQ株理化特性鑒定結(jié)果 |
| 3.2.3 維氏氣單胞菌YVA-AQ株遺傳進化關(guān)系 |
| 3.2.4 維氏氣單胞菌YVA-AQ株藥物敏感性試驗結(jié)果 |
| 3.2.5 維氏氣單胞菌YVA-AQ株小鼠致病力試驗 |
| 3.3 殺鮭氣單胞菌YSA-AQ株生物學(xué)特性研究結(jié)果 |
| 3.3.1 殺鮭氣單胞菌YSA-AQ株細菌培養(yǎng)特性 |
| 3.3.2 殺鮭氣單胞菌YSA-AQ株理化特性鑒定結(jié)果 |
| 3.3.3 殺鮭氣單胞菌YSA-AQ株遺傳進化關(guān)系 |
| 3.3.4 殺鮭氣單胞菌YSA-AQ株藥物敏感性試驗結(jié)果 |
| 3.3.5 殺鮭氣單胞菌YSA-AQ株小鼠致病力試驗 |
| 3.4 魔氏摩根菌YMM-AQ株生物學(xué)特性研究結(jié)果 |
| 3.4.1 魔氏摩根菌YMM-AQ株細菌培養(yǎng)特性 |
| 3.4.2 魔氏摩根菌YMM-AQ株理化特性鑒定結(jié)果 |
| 3.4.3 魔氏摩根菌YMM-AQ株遺傳進化關(guān)系 |
| 3.4.4 魔氏摩根菌YMM-AQ株藥物敏感性試驗結(jié)果 |
| 3.4.5 魔氏摩根菌YMM-AQ株小鼠致病力試驗 |
| 3.5 大腸桿菌YE-AQ株生物學(xué)特性研究結(jié)果 |
| 3.5.1 大腸桿菌YE-AQ株細菌培養(yǎng)特性 |
| 3.5.2 大腸桿菌YE-AQ株理化特性鑒定結(jié)果 |
| 3.5.3 大腸桿菌YE-AQ株遺傳進化關(guān)系 |
| 3.5.4 大腸桿菌YE-AQ株藥物敏感性試驗結(jié)果 |
| 3.5.5 大腸桿菌YE-AQ株小鼠致病力試驗 |
| 3.6 金黃色葡萄球菌YSS-AQ株生物學(xué)特性研究結(jié)果 |
| 3.6.1 金黃色葡萄球菌YSS-AQ株細菌培養(yǎng)特性 |
| 3.6.2 金黃色葡萄球菌YSS-AQ株理化特性鑒定結(jié)果 |
| 3.6.3 金黃色葡萄球菌YSS-AQ株遺傳進化關(guān)系 |
| 3.6.4 金黃色葡萄球菌YSS-AQ株藥物敏感性試驗結(jié)果 |
| 3.6.5 金黃色葡萄球菌YSS-AQ株小鼠致病力試驗 |
| 4 討論 |
| 4.1 長江江豚常見致病菌的培養(yǎng)特性 |
| 4.2 長江江豚源細菌的鑒定方法 |
| 4.3 長江江豚源細菌的耐藥性 |
| 4.4 長江江豚源細菌的致病性 |
| 5 結(jié)論 |
| 第三章 長江江豚病毒性疾病研究初探 |
| 1 研究背景 |
| 1.1 病毒性疾病對人和動物的危害 |
| 1.2 長江江豚病毒性疾病研究現(xiàn)狀 |
| 1.3 未知病毒檢測方法研究進展 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 病料樣本 |
| 2.1.2 試驗儀器 |
| 2.1.3 試驗試劑耗材 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 試驗流程 |
| 2.2.2 測序數(shù)據(jù)質(zhì)控 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 測序數(shù)據(jù)質(zhì)控 |
| 3.2 去除宿主污染 |
| 3.3 病毒組成分析 |
| 3.4 數(shù)據(jù)組裝 |
| 3.5 病毒序列鑒定 |
| 3.5.1 基于參考序列的鑒定 |
| 3.5.2 Denovo病毒序列鑒定 |
| 3.5.3 基于參考序列鑒定與Denovo序列鑒定的比較 |
| 3.6 病毒豐度 |
| 3.7 基因預(yù)測 |
| 3.8 功能分析 |
| 4 分析與討論 |
| 4.1 高通量測序技術(shù)與未知病毒檢測 |
| 4.2 長江江豚病毒宏基因組學(xué)樣本的處理 |
| 4.3 檢測相關(guān)病毒分析 |
| 5 總結(jié) |
| 第四章 長江江豚的飼養(yǎng)管理與疾病防治研究 |
| 1 研究背景 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 研究對象 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 長江江豚的飼養(yǎng)管理 |
| 2.2.2 長江江豚血液學(xué)研究 |
| 2.2.3 長江江豚健康體檢方法的建立 |
| 2.2.4 長江江豚疾病診斷與治療方法研究 |
| 2.2.5 長江江豚典型病例診治分析 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 長江江豚的飼養(yǎng)管理 |
| 3.1.1 圍網(wǎng)環(huán)境下長江江豚的飼養(yǎng)管理 |
| 3.1.2 遷地保護區(qū)大面積水域長江江豚的飼養(yǎng)管理 |
| 3.1.3 療養(yǎng)池長江江豚的飼養(yǎng)管理 |
| 3.2 長江江豚血液學(xué)研究 |
| 3.2.1 長江江豚血常規(guī)和血液生化指標(biāo)測定方法的建立 |
| 3.2.2 長江江豚正常生理生化指標(biāo)參考范圍的確定 |
| 3.2.3 長江江豚生理生化指標(biāo)與其疾病的相關(guān)性 |
| 3.2.4 長江江豚健康體檢技術(shù)規(guī)范 |
| 3.2.5 長江江豚疾病診斷與治療方法研究 |
| 3.2.6 長江江豚典型病例診治分析 |
| 4 分析與討論 |
| 5 結(jié)論 |
| 全文結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 附錄 博士期間發(fā)表論文 |
| 致謝 |
（4）動物源性食品中硝基咪唑類藥物殘留快速檢測方法研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符號說明 |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 硝基咪唑類藥物概述 |
| 1.1.1 硝基咪唑類藥物定義及作用 |
| 1.1.2 硝基咪唑類藥物的危害及使用現(xiàn)狀 |
| 1.2 硝基咪唑類藥物檢測技術(shù)研究現(xiàn)狀 |
| 1.3 研究目的與意義 |
| 1.4 研究方案 |
| 1.5 預(yù)期目標(biāo) |
| 第二章 硝基咪唑類藥物色譜流動相選擇及質(zhì)譜條件優(yōu)化 |
| 2.1 實驗材料與設(shè)備 |
| 2.1.1 實驗材料 |
| 2.1.2 實驗儀器與設(shè)備 |
| 2.2 實驗方法 |
| 2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 |
| 2.2.2 色譜條件的選擇 |
| 2.2.3 質(zhì)譜條件的選擇 |
| 2.3 結(jié)果與討論 |
| 2.3.1 色譜流動相的選擇及確認 |
| 2.3.2 質(zhì)譜條件的優(yōu)化及確認 |
| 2.4 本章小結(jié) |
| 第三章 不同凈化方式對硝基咪唑類藥物殘留的影響 |
| 3.1 實驗材料與設(shè)備 |
| 3.1.1 實驗材料 |
| 3.1.2 實驗儀器與設(shè)備 |
| 3.2 實驗方法 |
| 3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 |
| 3.2.2 樣品前處理 |
| 3.2.3 樣品凈化液的濃縮和定容 |
| 3.2.4 儀器條件 |
| 3.3 結(jié)果與討論 |
| 3.3.1 不同凈化方式對硝基咪唑類藥物殘留的影響 |
| 3.3.2 回歸方程的驗證 |
| 3.3.3 不同添加水平對硝基咪唑類藥物殘留回收率的影響 |
| 3.4 本章小結(jié) |
| 第四章 快速檢驗方法性能指標(biāo)確認 |
| 4.1 實驗材料與設(shè)備 |
| 4.1.1 實驗材料 |
| 4.1.2 實驗儀器與設(shè)備 |
| 4.2 實驗方法 |
| 4.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 |
| 4.2.2 樣品前處理 |
| 4.2.3 樣品凈化液的濃縮和定容 |
| 4.2.4 儀器條件 |
| 4.2.5 評價用盲樣的制備 |
| 4.2.6 盲樣均勻性和穩(wěn)定性檢查 |
| 4.2.7 樣品測試 |
| 4.2.8 結(jié)果統(tǒng)計方法 |
| 4.3 結(jié)果與討論 |
| 4.3.1 盲樣的均勻性 |
| 4.3.2 盲樣的穩(wěn)定性 |
| 4.3.3 樣品測定結(jié)果分析 |
| 4.4 本章小結(jié) |
| 第五章 動物源性食品中的拓展研究 |
| 5.1 實驗材料與設(shè)備 |
| 5.1.1 實驗材料 |
| 5.1.2 實驗儀器與設(shè)備 |
| 5.2 實驗方法 |
| 5.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 |
| 5.2.2 樣品前處理 |
| 5.2.3 樣品凈化液的濃縮和定容 |
| 5.2.4 儀器條件 |
| 5.2.5 不同基質(zhì)中藥物殘留回歸方程的驗證 |
| 5.2.6 不同基質(zhì)中各種添加水平對硝基咪唑類藥物殘留回收率的影響 |
| 5.2.7 快速檢驗方法的適用范圍研究 |
| 5.3 結(jié)果與討論 |
| 5.3.1 雞肉中藥物殘留驗證試驗 |
| 5.3.2 鮮奶中藥物殘留驗證試驗 |
| 5.3.3 河蝦中藥物殘留驗證試驗 |
| 5.3.4 蜂蜜中藥物殘留驗證試驗 |
| 5.3.5 動物源性食品拓展研究的快速篩查結(jié)果 |
| 5.4 本章小結(jié) |
| 結(jié)論與展望 |
| 結(jié)論 |
| 展望 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
| 作者簡介 |
| 1 作者簡歷 |
| 2 攻讀博士/碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 |
| 3 參與的科研項目及獲獎情況 |
| 4 發(fā)明專利 |
| 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集 |
（5）海綿生長階段共生微生物群落結(jié)構(gòu)及特征性微生物功能初步研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 縮略詞表 |
| 第1章 緒論 |
| 1.1 海綿-微生物共生功能體 |
| 1.1.1 海綿 |
| 1.1.2 海綿-微生物共生功能體 |
| 1.2 海綿共生微生物 |
| 1.2.1 共生微生物的多樣性 |
| 1.2.2 共生微生物的功能 |
| 1.3 研究目的及主要研究內(nèi)容 |
| 第2章 不同生長階段海綿共生微生物結(jié)構(gòu)研究 |
| 2.1 材料與方法 |
| 2.1.1 樣品的采集及前期處理 |
| 2.1.2 DNA提取及純化 |
| 2.1.3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)及16S rDNA基因測序 |
| 2.1.4 高通量數(shù)據(jù)分析 |
| 2.1.5 透射電鏡(TEM)觀察 |
| 2.2 實驗結(jié)果 |
| 2.2.1 不同生長階段苔海綿共生微生物群落結(jié)構(gòu)分析 |
| 2.2.2 不同生長階段美麗海綿共生微生物群落結(jié)構(gòu)分析 |
| 2.3 討論 |
| 第3章 不同細菌對苔海綿幼體附著的影響 |
| 3.1 材料與方法 |
| 3.1.1 不同濃度細菌的制備 |
| 3.1.2 單一菌株的制備 |
| 3.1.3 混合菌的制備 |
| 3.1.4 苔海綿幼體的采集 |
| 3.1.5 細菌的投放及觀察計數(shù) |
| 3.2 實驗結(jié)果 |
| 3.2.1 單一細菌對苔海綿幼體附著影響實驗結(jié)果 |
| 3.2.2 混合菌對苔海綿幼體附著影響實驗結(jié)果 |
| 3.3 討論 |
| 第4章 藍細菌對海綿成體聚磷影響的探究 |
| 4.1 材料與方法 |
| 4.1.1 樣品的采集及前期處理 |
| 4.1.2 海綿多聚磷酸鹽含量檢測 |
| 4.1.3 海綿多聚磷酸鹽顯微觀察 |
| 4.1.4 多聚磷酸鹽激酶基因檢測 |
| 4.2 實驗結(jié)果 |
| 4.2.1 苔海綿、美麗海綿、山海綿高通量測序共生藍細菌豐度比較 |
| 4.2.2 海綿中多聚磷酸鹽含量檢測結(jié)果 |
| 4.2.3 海綿中多聚磷酸鹽顆粒分布顯微觀察結(jié)果 |
| 4.2.4 多聚磷酸鹽激酶基因檢測結(jié)果 |
| 4.3 討論 |
| 第5章 總結(jié)與展望 |
| 5.1 總結(jié) |
| 5.2 本論文創(chuàng)新點 |
| 5.3 不足與展望 |
| 參考文獻 |
| 附錄 |
| 在學(xué)期間發(fā)表的文章 |
| 致謝 |
（6）公共健康導(dǎo)向下嶺南居住區(qū)景觀設(shè)計與蚊患防控關(guān)聯(lián)研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 關(guān)注健康成為人居環(huán)境規(guī)劃設(shè)計領(lǐng)域重要發(fā)展方向 |
| 1.1.2 嶺南地區(qū)蚊蟲嚴重威脅居民健康且面臨防控困境 |
| 1.1.3 當(dāng)今人居環(huán)境建設(shè)重視自然生態(tài)的同時缺少對蚊蟲問題的關(guān)注 |
| 1.2 研究目的和意義 |
| 1.2.1 研究目的 |
| 1.2.2 研究意義 |
| 1.3 研究對象及地域范圍 |
| 1.3.1 研究對象及概念解析 |
| 1.3.2 研究地域范圍 |
| 1.4 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀 |
| 1.4.1 居住區(qū)景觀規(guī)劃設(shè)計領(lǐng)域相關(guān)研究 |
| 1.4.2 蚊患防控領(lǐng)域相關(guān)研究 |
| 1.4.3 景觀規(guī)劃設(shè)計與蚊患防控交叉領(lǐng)域相關(guān)研究 |
| 1.4.4 研究現(xiàn)狀總結(jié)與分析 |
| 1.5 研究內(nèi)容 |
| 1.5.1 研究內(nèi)容和方法 |
| 1.5.2 研究框架 |
| 1.6 本文主要創(chuàng)新點 |
| 1.6.1 研究視角的創(chuàng)新 |
| 1.6.2 研究內(nèi)容的創(chuàng)新 |
| 第二章 嶺南居住區(qū)景觀與蚊患關(guān)聯(lián)研究的理論基礎(chǔ) |
| 2.1 本研究的理論依據(jù)及其指導(dǎo)意義 |
| 2.1.1 人居環(huán)境理論 |
| 2.1.2 健康城市理論 |
| 2.1.3 健康景觀理論 |
| 2.1.4 病媒生物環(huán)境治理理論 |
| 2.2 人居環(huán)境規(guī)劃設(shè)計理論發(fā)展歷程及發(fā)展趨勢 |
| 2.2.1 世界范圍內(nèi)人居環(huán)境規(guī)劃設(shè)計發(fā)展歷程及趨勢 |
| 2.2.2 我國現(xiàn)代居住區(qū)景觀規(guī)劃設(shè)計的發(fā)展歷程及趨勢 |
| 2.2.3 人居環(huán)境規(guī)劃設(shè)計理論的現(xiàn)狀趨勢及特點 |
| 2.3 嶺南居住區(qū)蚊蟲對居民健康的危害及其防控現(xiàn)狀 |
| 2.3.1 蚊蟲對居民健康的影響 |
| 2.3.2 嶺南地區(qū)氣候特點及蚊蟲季節(jié)消長 |
| 2.3.3 嶺南地區(qū)蚊媒疾病及防控困境 |
| 2.4 居住區(qū)景觀規(guī)劃設(shè)計與蚊患防控的關(guān)聯(lián)建構(gòu) |
| 2.4.1 戶外活動空間類型與蚊蟲的關(guān)聯(lián)分析 |
| 2.4.2 水景與蚊蟲的關(guān)聯(lián)分析 |
| 2.4.3 植物與蚊蟲的關(guān)聯(lián)分析 |
| 2.4.4 室外排水系統(tǒng)與蚊蟲的關(guān)聯(lián)分析 |
| 2.4.5 景觀小品與蚊蟲的關(guān)聯(lián)分析 |
| 2.4.6 景觀規(guī)劃設(shè)計與蚊患防控關(guān)聯(lián)建構(gòu) |
| 本章小結(jié) |
| 第三章 居住區(qū)景觀和主觀蚊情感受調(diào)查與相關(guān)分析 |
| 3.1 居住區(qū)景觀規(guī)劃設(shè)計模式與使用現(xiàn)狀調(diào)查 |
| 3.1.1 景觀總體規(guī)劃與戶外活動空間類型 |
| 3.1.2 水景設(shè)計模式與建成后使用現(xiàn)狀 |
| 3.1.3 室外排水系統(tǒng)防蚊結(jié)構(gòu)與使用現(xiàn)狀 |
| 3.1.4 植物配置模式與驅(qū)蚊植物應(yīng)用現(xiàn)狀 |
| 3.1.5 驅(qū)蚊滅蚊景觀小品種類與應(yīng)用現(xiàn)狀 |
| 3.2 居住區(qū)居民主觀蚊情感受調(diào)查與分析 |
| 3.2.1 蚊情感受定義 |
| 3.2.2 調(diào)查與分析方法 |
| 3.2.3 調(diào)查結(jié)果 |
| 3.2.4 討論與結(jié)論 |
| 3.3 佛山30個小區(qū)景觀構(gòu)成因子與居民蚊情感受相關(guān)分析 |
| 3.3.1 研究思路與方法 |
| 3.3.2 數(shù)據(jù)處理與分析 |
| 3.3.3 討論與結(jié)論 |
| 本章小結(jié) |
| 第四章 居住區(qū)景觀因子與客觀蚊蟲數(shù)量相關(guān)性研究 |
| 4.1 戶外活動空間類型與成年蚊密度相關(guān)性實測與分析 |
| 4.1.1 測試方法和數(shù)據(jù)處理方法 |
| 4.1.2 測試小區(qū)景觀特點及測點布置 |
| 4.1.3 測試結(jié)果與分析 |
| 4.1.4 討論與結(jié)論 |
| 4.2 景觀水體類型與蚊幼數(shù)量的相關(guān)性調(diào)查與分析 |
| 4.2.1 調(diào)查的水體類型 |
| 4.2.2 調(diào)研時間與方法 |
| 4.2.3 調(diào)查小區(qū)概況 |
| 4.2.4 居住區(qū)各類水體蚊幼調(diào)查結(jié)果 |
| 4.2.5 討論與結(jié)論 |
| 4.3 室外排水系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與蚊幼數(shù)量的相關(guān)性調(diào)查與分析 |
| 4.3.1 防蚊閘式雨水口 |
| 4.3.2 彎管式雨水口 |
| 4.3.3 排水明溝 |
| 4.3.4 討論與結(jié)論 |
| 4.4 園林植物在活體狀態(tài)下對蚊蟲的驅(qū)避效果研究 |
| 4.4.1 實驗方法 |
| 4.4.2 實驗材料和獲取途徑 |
| 4.4.3 實驗步驟 |
| 4.4.4 結(jié)果與分析 |
| 4.4.5 討論與結(jié)論 |
| 本章小結(jié) |
| 第五章 基于AHP和R語言的居住區(qū)景觀蚊蟲孳生風(fēng)險評價研究 |
| 5.1 蚊蟲孳生風(fēng)險指數(shù)及評價方法 |
| 5.1.1 蚊蟲孳生風(fēng)險指數(shù)(MosquitoBreedingRiskIndex,MBRI) |
| 5.1.2 評價方法——AHP與R語言結(jié)合 |
| 5.2 評價指標(biāo)體系的構(gòu)建 |
| 5.3 評價指標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)化計算 |
| 5.4 評價指標(biāo)賦權(quán) |
| 5.4.1 準(zhǔn)則層因子賦權(quán) |
| 5.4.2 指標(biāo)層因子賦權(quán) |
| 5.5 權(quán)重綜合與評價模型構(gòu)建 |
| 5.6 MBRI評價模型在實際案例中的應(yīng)用 |
| 5.6.1 中海萬錦豪園小區(qū)景觀蚊蟲孳生風(fēng)險評價 |
| 5.6.2 萬科金色家園小區(qū)景觀蚊蟲孳生風(fēng)險評價 |
| 5.6.3 鹿璟村小區(qū)景觀蚊蟲孳生風(fēng)險評價 |
| 5.7 MBRI評價模型的檢驗及閾值計算 |
| 本章小結(jié) |
| 第六章 利于蚊患防控的嶺南居住區(qū)景觀規(guī)劃設(shè)計策略體系構(gòu)建 |
| 6.1 引導(dǎo)策略——增加利于蚊患防控的景觀設(shè)計相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范 |
| 6.2 實施策略——采用利于蚊患防控的居住區(qū)景觀規(guī)劃設(shè)計策略 |
| 6.2.1 利于蚊患防控的嶺南居住區(qū)景觀規(guī)劃與空間布局策略 |
| 6.2.2 利于蚊患防控的嶺南居住區(qū)水景設(shè)計策略 |
| 6.2.3 利于蚊患防控的室外排水系統(tǒng)結(jié)構(gòu)設(shè)計策略 |
| 6.2.4 利于蚊患防控的植物景觀設(shè)計策略 |
| 6.2.5 利于蚊患防控的景觀小品設(shè)計策略 |
| 6.3 評估策略——建立居住區(qū)景觀的蚊蟲孳生風(fēng)險評價機制 |
| 6.3.1 蚊患防控問題應(yīng)得到城市規(guī)劃設(shè)計管理部門的重視 |
| 6.3.2 居住區(qū)景觀設(shè)計階段的蚊蟲孳生風(fēng)險評價 |
| 6.3.3 居住區(qū)景觀使用階段的蚊蟲孳生風(fēng)險評價 |
| 本章小結(jié) |
| 總結(jié)與展望 |
| 本文主要結(jié)論 |
| 對未來研究工作的展望 |
| 參考文獻 |
| 附錄 |
| 附錄一 30個小區(qū)的水景設(shè)計模式調(diào)查結(jié)果 |
| 附錄二 居住區(qū)景觀各類水體蚊幼孳生情況調(diào)查結(jié)果 |
| 附錄三 8個居住小區(qū)景觀調(diào)查與MBRI評價結(jié)果 |
| 攻讀博士學(xué)位期間取得的研究成果 |
| 致謝 |
| 附件 |
（7）水體中藻源致嗅物質(zhì)的辨識、分布與處理研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 主要縮略詞注釋表 |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 藻源致嗅物質(zhì)概述 |
| 1.1.1 藻類次生污染物 |
| 1.1.2 藻源嗅味物質(zhì)的理化性質(zhì) |
| 1.1.3 藻源致嗅物質(zhì)的來源與合成機制 |
| 1.1.4 飲用水標(biāo)準(zhǔn)中的嗅味物質(zhì)指標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)值 |
| 1.1.5 嗅味物質(zhì)造成的飲水污染事件 |
| 1.1.6 藻源致嗅物質(zhì)的健康效應(yīng) |
| 1.2 致嗅物質(zhì)的檢測分析方法研究進展 |
| 1.2.1 感官分析法 |
| 1.2.1.1 嗅味層次分析法 |
| 1.2.1.2 嗅閾值法 |
| 1.2.2 儀器分析法 |
| 1.2.2.1 吹掃捕集 |
| 1.2.2.2 閉環(huán)捕集 |
| 1.2.2.3 開環(huán)捕集 |
| 1.2.2.4 液液萃取 |
| 1.2.2.5 固相萃取 |
| 1.2.2.6 固相微萃取 |
| 1.2.2.7 液相微萃取 |
| 1.2.2.8 液相微萃取 |
| 1.2.3 其他分析方法 |
| 1.2.3.1 Sensory-GC/MS嗅味檢測法 |
| 1.2.3.2 酶聯(lián)免疫法 |
| 1.2.3.3 傳感器分析法 |
| 1.3 影響藻源致嗅物質(zhì)的環(huán)境和生理因子研究進展 |
| 1.4 藻源致嗅物質(zhì)的降解處理研究進展 |
| 1.4.1 吸附法 |
| 1.4.1.1 沸石吸附 |
| 1.4.1.2 活性炭吸附 |
| 1.4.2 化學(xué)氧化法 |
| 1.4.3 生物處理法 |
| 1.4.4 組合處理工藝 |
| 1.5 本課題的研究內(nèi)容和意義 |
| 1.5.1 研究內(nèi)容 |
| 1.5.2 研究意義 |
| 第二章 典型嗅味物質(zhì)檢測方法的建立和優(yōu)化 |
| 2.1 研究材料與方法 |
| 2.1.1 試劑 |
| 2.1.2 儀器與裝置 |
| 2.1.3 頂空固相微萃取操作方法 |
| 2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 |
| 2.2 結(jié)果與討論 |
| 2.2.1 萃取纖維的影響 |
| 2.2.2 萃取溫度的影響 |
| 2.2.3 萃取時間的影響 |
| 2.2.4 解吸時間的影響 |
| 2.2.5 鹽離子濃度的影響 |
| 2.2.6 攪拌的影響 |
| 2.2.7 方法驗證 |
| 2.2.8 采樣容器和樣品保存時間 |
| 2.2.9 固相微萃取裝置的優(yōu)化 |
| 2.2.10 水樣采集過濾條件的優(yōu)化 |
| 2.3 吹掃捕集法比較 |
| 2.3.1 材料與方法 |
| 2.3.2 檢出限 |
| 2.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線 |
| 2.4 小結(jié) |
| 第三章 水體中典型藻源致嗅物質(zhì)時空變化特征及與環(huán)境因子的相關(guān)性 |
| 3.1 研究材料與方法 |
| 3.1.1 試劑材料 |
| 3.1.2 儀器設(shè)備 |
| 3.1.3 實驗方法 |
| 3.1.3.1 pH測定 |
| 3.1.3.2 DO測定 |
| 3.1.3.3 NH_3-N測定 |
| 3.1.3.4 COD_(mn)測定 |
| 3.1.3.5 藻類種群鑒定 |
| 3.2.3.5 Chl-a測定 |
| 3.1.3.6 藻細胞計數(shù) |
| 3.1.3.7 藻細胞內(nèi)嗅味物質(zhì)檢測前處理方法 |
| 3.1.3.8 底泥中嗅味物質(zhì)檢測前處理方法 |
| 3.1.3.9 5種典型藻源致嗅物質(zhì)測定 |
| 3.1.3.10 水樣的采集和保存 |
| 3.1.3.11 統(tǒng)計分析 |
| 3.2 結(jié)果和討論 |
| 3.2.1 太湖藻類種群分布 |
| 3.2.2 氣溫、pH、DO、NH_3-N和COD_(mn)的時空分布 |
| 3.2.3 Chl-a和藻細胞密度的時空分布 |
| 3.2.3.1 藻細胞密度與氣溫的關(guān)系 |
| 3.2.3.2 藻細胞密度與NH_3-N的關(guān)系 |
| 3.2.3.3 藻細胞密度與DO的關(guān)系 |
| 3.2.4 典型藻源嗅味物質(zhì)的時空變化 |
| 3.2.5 藻細胞內(nèi)和溶解態(tài)嗅味物質(zhì)的關(guān)系 |
| 3.2.6 太湖底泥中嗅味物質(zhì)的濃度 |
| 3.2.7 嗅味物質(zhì)與藻類及理化參數(shù)的相關(guān)性分析 |
| 3.3 小結(jié) |
| 第四章 江蘇省不同水體和水處理工藝的水廠及包裝飲用水中嗅味物質(zhì)的分布 |
| 4.1 研究材料與方法 |
| 4.1.1 試劑 |
| 4.1.2 儀器設(shè)備 |
| 4.1.3 樣品采集方法 |
| 4.1.3.1 江蘇省水系分布 |
| 4.1.3.2 水廠采樣點設(shè)置 |
| 4.1.3.3 水廠水處理工藝流程采樣點 |
| 4.1.3.4 檢測指標(biāo)和采樣時間 |
| 4.2 結(jié)果與討論 |
| 4.2.1 不同水源水廠嗅味物質(zhì)分布 |
| 4.2.2 水廠不同水處理階段中嗅味物質(zhì)分布 |
| 4.2.3 市售包裝飲用水中嗅味物質(zhì)濃度 |
| 4.3 小結(jié) |
| 第五章 硼摻雜金剛石薄膜降解嗅味物質(zhì) |
| 5.1 研究材料與方法 |
| 5.1.1 試劑 |
| 5.1.2 儀器裝置 |
| 5.1.3 實驗方法 |
| 5.1.3.1 BDD薄膜的制備 |
| 5.1.3.2 BDD薄膜電極的制備 |
| 5.1.3.3 嗅味物質(zhì)降解實驗 |
| 5.1.3.4 嗅味物質(zhì)檢測 |
| 5.2 結(jié)果與討論 |
| 5.2.0 BDD薄膜表征 |
| 5.2.1 不同降解條件的影響 |
| 5.2.2 BDD膜電極電催化氧化降解GSM的機理 |
| 5.3 小結(jié) |
| 第六章 總結(jié)與展望 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
| 博士期間發(fā)表的論文、項目和獎勵 |
（8）新型抗菌活性氨基酸卟啉光敏劑4I的抗菌活性和細胞毒性的體外研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 縮略語/符號說明 |
| 前言 |
| 研究現(xiàn)狀、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、光敏劑 4I的抗菌活性實驗 |
| 1.1 對象和方法 |
| 1.1.1 實驗器材 |
| 1.1.2 LB細菌培養(yǎng)基的制備 |
| 1.1.3 菌懸液的制備 |
| 1.1.4 光敏劑 4I溶液的配制 |
| 1.1.5 激光器的準(zhǔn)備 |
| 1.1.6 實驗分組 |
| 1.1.7 實驗步驟 |
| 1.1.8 結(jié)果判讀 |
| 1.1.9 統(tǒng)計方法 |
| 1.2 結(jié)果 |
| 1.2.1 光敏劑 4I對不同菌種的藥敏結(jié)果匯總 |
| 1.2.2 光敏劑 4I對同一菌種的敏感菌和耐藥菌藥敏結(jié)果比較 |
| 1.2.3 光敏劑 4I體外抗菌結(jié)果 |
| 1.3 討論 |
| 1.3.1 光動力抗微生物療法的起源 |
| 1.3.2 已知aPDT作用機制 |
| 1.3.3 卟啉類光敏劑及作用機制 |
| 1.3.4 光敏劑 4I抗菌活性 |
| 1.3.5 光敏劑 4I對同一菌種的敏感菌和耐藥菌的抗菌活性 |
| 1.4 小結(jié) |
| 二、光敏劑 4I細胞毒性實驗 |
| 2.1 對象和方法 |
| 2.1.1 實驗器材 |
| 2.1.2 細胞株復(fù)蘇 |
| 2.1.3 細胞培養(yǎng)及傳代 |
| 2.1.4 細胞計數(shù)及細胞懸液配置 |
| 2.1.5 光敏劑 4I溶液的配制 |
| 2.1.6 激光器的準(zhǔn)備 |
| 2.1.7 實驗分組 |
| 2.1.8 實驗步驟 |
| 2.1.9 結(jié)果計算 |
| 2.1.10 統(tǒng)計方法 |
| 2.2 結(jié)果 |
| 2.2.1 光敏劑 4I不同組別細胞存活率 |
| 2.2.2 光敏劑 4I細胞毒性結(jié)果 |
| 2.3 討論 |
| 2.4 小結(jié) |
| 結(jié)論與展望 |
| 參考文獻 |
| 發(fā)表論文和參加科研情況說明 |
| 綜述 光動力抗微生物療法的研究進展 |
| 綜述參考文獻 |
| 致謝 |
| 個人簡歷 |
（9）山東省流通環(huán)節(jié)水產(chǎn)品藥物殘留現(xiàn)狀的研究（論文提綱范文）
| 符號說明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 水產(chǎn)品中常用的違禁藥物簡介 |
| 1.2.1 呋喃類藥物 |
| 1.2.2 氯霉素類 |
| 1.2.3 孔雀石綠 |
| 1.2.4 磺胺類 |
| 1.2.5 己烯雌酚 |
| 1.3 本課題研究的內(nèi)容及研究意義 |
| 1.3.1 研究的內(nèi)容 |
| 1.3.2 研究的意義 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 材料、試劑與儀器 |
| 2.1.1 材料的采集 |
| 2.1.2 實驗試劑、對照品 |
| 2.1.3 儀器與設(shè)備 |
| 2.2 實驗方法 |
| 2.2.1 溶液的配制 |
| 2.2.1.1 對照品溶液的配制 |
| 2.2.1.2 所用溶液的配制 |
| 2.2.2 硝基呋喃代謝產(chǎn)物的檢測方法 |
| 2.2.3 氯霉素的檢測方法 |
| 2.2.4 孔雀石綠的檢測方法 |
| 2.2.5 己烯雌酚的檢測方法 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 硝基呋喃代謝產(chǎn)物的檢測實驗 |
| 3.1.1 樣品前處理條件選擇 |
| 3.1.2 質(zhì)譜條件的優(yōu)化 |
| 3.1.3 流動相的篩選 |
| 3.1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍和檢出限 |
| 3.1.5 回收率和精密度實驗 |
| 3.2 氯霉素的檢測實驗 |
| 3.2.1 樣品前處理條件選擇 |
| 3.2.2 質(zhì)譜條件的優(yōu)化 |
| 3.2.3 流動相的篩選 |
| 3.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍和檢出限 |
| 3.2.5 回收率和精密度實驗 |
| 3.3 孔雀石綠的檢測實驗 |
| 3.3.1 樣品前處理條件選擇 |
| 3.3.2 還原劑濃度的選擇 |
| 3.3.3 色譜條件的選擇 |
| 3.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍和檢出限 |
| 3.3.5 回收率和精密度實驗 |
| 3.4 己烯雌酚的檢測實驗 |
| 3.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍和檢出限 |
| 3.4.2 回收率和精密度實驗 |
| 3.5 實際樣品分析 |
| 3.5.1 檢測結(jié)果的統(tǒng)計 |
| 3.5.2 存在的問題及分析 |
| 3.6 水產(chǎn)品流通存在的食品安全問題分析 |
| 3.6.1 水產(chǎn)品流通的源頭生產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)節(jié) |
| 3.6.2 加工環(huán)節(jié)引入的食品安全風(fēng)險 |
| 3.6.3 批發(fā)零售環(huán)節(jié)的食品安全問題 |
| 3.6.4 物流環(huán)節(jié)的食品安全問題 |
| 4 討論 |
| 4.1 建立健全企業(yè)信用評價機制控制好源頭 |
| 4.2 建立水產(chǎn)品追溯體系管理好流通鏈條 |
| 4.3 加強政府監(jiān)管做好引導(dǎo)工作 |
| 4.4 強化檢驗和認證工作保障質(zhì)量安全 |
| 5 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
（10）洛陽地區(qū)豬弓形蟲感染情況調(diào)查及病原分離鑒定（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 文獻綜述 |
| 1.1 弓形蟲簡介及發(fā)展史 |
| 1.2 弓形蟲的生物學(xué)特性 |
| 1.2.1 病原形態(tài) |
| 1.2.2 生活史 |
| 1.3 弓形蟲病的危害 |
| 1.3.1 流行特點 |
| 1.3.2 臨床癥狀 |
| 1.3.3 病理變化 |
| 1.4 豬弓形蟲感染的診斷 |
| 1.4.1 病原學(xué)診斷技術(shù) |
| 1.4.2 免疫學(xué)檢測 |
| 1.4.3 分子生物學(xué)診斷技術(shù) |
| 1.5 豬弓形蟲病的防治 |
| 第2章 洛陽地區(qū)豬弓形蟲血清流行病學(xué)調(diào)查 |
| 2.1 材料與方法 |
| 2.1.1 主要試劑 |
| 2.1.2 常用儀器設(shè)備 |
| 2.1.3 血樣采集和血清分離 |
| 2.1.4 豬弓形蟲抗體檢測 |
| 2.1.5 結(jié)果判定 |
| 2.2 結(jié)果 |
| 2.3 討論 |
| 2.3.1 洛陽地區(qū)豬弓形蟲感染情況 |
| 2.3.2 洛陽地區(qū)預(yù)防豬弓形蟲感染應(yīng)注意的問題 |
| 第3章 洛陽地區(qū)豬弓形蟲 PCR 檢測 |
| 3.1 材料與方法 |
| 3.1.1 主要試劑和儀器 |
| 3.1.2 樣品組織 DNA 提取 |
| 3.1.3 引物合成 |
| 3.1.4 PCR 擴增 |
| 3.1.5 瓊脂糖凝膠電泳 |
| 3.2 結(jié)果 |
| 3.3 討論 |
| 第4章 洛陽地區(qū)豬弓形蟲的分離鑒定 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 病料 |
| 4.1.2 實驗動物 |
| 4.1.3 主要試劑和耗材 |
| 4.1.4 主要儀器和設(shè)備 |
| 4.1.5 弓形蟲的分離及形態(tài)學(xué)鑒定 |
| 4.1.6 弓形蟲分離株的 PCR 鑒定 |
| 4.2 結(jié)果 |
| 4.2.1 弓形蟲分離及形態(tài)學(xué)鑒定 |
| 4.2.2 弓形蟲特異性基因的 PCR 檢測 |
| 4.3 討論 |
| 第5章 結(jié)論 |
| 參考文獻 |
| 致謝 |
| 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果 |
四、水生動物原蟲的實驗室檢驗法（論文參考文獻）
- [1]粘體動物系統(tǒng)發(fā)育地位與內(nèi)寄生適應(yīng)機制研究[D]. 郭慶祥. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 2021
- [2]感染條件下草魚細胞自噬的發(fā)生及其抗菌作用和機制的研究[D]. 尹里程. 電子科技大學(xué), 2021(01)
- [3]患病江豚微生態(tài)變化及遷地背景下江豚保護性研究[D]. 劉志剛. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 2020
- [4]動物源性食品中硝基咪唑類藥物殘留快速檢測方法研究[D]. 上官苗苗. 浙江工業(yè)大學(xué), 2020(02)
- [5]海綿生長階段共生微生物群落結(jié)構(gòu)及特征性微生物功能初步研究[D]. 吳淑妃. 廈門大學(xué), 2018(07)
- [6]公共健康導(dǎo)向下嶺南居住區(qū)景觀設(shè)計與蚊患防控關(guān)聯(lián)研究[D]. 呂慧. 華南理工大學(xué), 2018(12)
- [7]水體中藻源致嗅物質(zhì)的辨識、分布與處理研究[D]. 丁震. 東南大學(xué), 2017(11)
- [8]新型抗菌活性氨基酸卟啉光敏劑4I的抗菌活性和細胞毒性的體外研究[D]. 孫實. 天津醫(yī)科大學(xué), 2016(03)
- [9]山東省流通環(huán)節(jié)水產(chǎn)品藥物殘留現(xiàn)狀的研究[D]. 孫強. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué), 2015(04)
- [10]洛陽地區(qū)豬弓形蟲感染情況調(diào)查及病原分離鑒定[D]. 邵曉冬. 河南科技大學(xué), 2014(02)