一、TGA、TMA在2型糖尿病中出現(xiàn)頻率的觀察（論文文獻(xiàn)綜述）
趙博旭[1]（2021）在《2型糖尿病中醫(yī)證候要素與甲功指標(biāo)相關(guān)分析及血瘀證預(yù)測(cè)模型構(gòu)建》文中研究說(shuō)明目的:1 研究一:探究T2DM患者單一證候要素發(fā)生的影響因素,以及T2DM患者的糖脂代謝指標(biāo)和甲狀腺功能指標(biāo)對(duì)其中醫(yī)證候要素發(fā)生的具體影響;2 研究二:探究T2DM患者的甲狀腺功能指標(biāo)與糖脂代謝指標(biāo)間的相關(guān)性及各指標(biāo)間的具體影響;3 研究三:探究T2DM血瘀證的特異性指標(biāo)信息,嘗試探索其生物學(xué)基礎(chǔ);方法:1 研究一:按照納排標(biāo)準(zhǔn)納入175例T2DM患者并收集其基本信息及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo),對(duì)其單一證候要素及證候要素的組合情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,采用二分類Logistic回歸分析的方法,將各個(gè)單一證候要素作為因變量,將其基礎(chǔ)情況、甲狀腺功能指標(biāo)以及糖脂代謝指標(biāo)作為自變量進(jìn)行回歸分析,并采用逐步回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)篩選建立模型。2 研究二:按照納排標(biāo)準(zhǔn)納入175例T2DM患者并收集其基本信息及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo),對(duì)患者基本情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,并對(duì)T2DM患者的基礎(chǔ)情況、甲狀腺功能指標(biāo)以及糖脂代謝指標(biāo)間進(jìn)行兩兩相關(guān)性分析,后采用一元或多元回歸分析的方法,對(duì)具有相關(guān)性的指標(biāo)進(jìn)行回歸分析,采用逐步回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)篩選建立模型,并通過(guò)檢驗(yàn)方法對(duì)回歸模型進(jìn)行驗(yàn)證。3 研究三:按照納排標(biāo)準(zhǔn)納入175例T2DM患者并收集其基本信息及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo),據(jù)其是否有血瘀證分為血瘀證組與非血瘀證組,通過(guò)相關(guān)性分析從44個(gè)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)中篩選出與T2DM血瘀證具有相關(guān)性的指標(biāo),應(yīng)用神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)多層感知器程序構(gòu)建T2DM血瘀證的預(yù)測(cè)模型,并采用五倍交叉驗(yàn)證方法對(duì)預(yù)測(cè)模型進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果:1 研究一:通過(guò)對(duì)納入的175例T2DM患者的中醫(yī)證候要素以及要素組合情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)如下結(jié)果。T2DM患者的證候要素中陰虛證最為多見(jiàn),證素組合中五證組合最為多見(jiàn),且以虛實(shí)夾雜證為主。對(duì)單一證候要素與基礎(chǔ)情況和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)進(jìn)行二分類回歸分析發(fā)現(xiàn)如下結(jié)果。研究發(fā)現(xiàn)對(duì)于T2DM患者舒張壓為其陰虛證的主要影響因素;BMI為其痰濕證的主要影響因素;年齡為其血瘀證、結(jié)熱證和水濕證的主要影響因素;TGAb為其郁熱證和肝陽(yáng)證的主要影響因素;FT3為其氣虛證的主要影響因素;TRAb為其痰熱證的主要影響因素;TSH為其陽(yáng)虛證的主要影響因素;性別為其血虛證的主要影響因素;病程為其濕濁證的主要影響因素。2 研究二:通過(guò)對(duì)納入的175例T2DM患者的一般資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)如下結(jié)果。研究發(fā)現(xiàn)納入病例中的男性89例,女性86例,年齡在50-59歲之間的人數(shù)最多,且超重的人數(shù)最多。通過(guò)對(duì)T2DM患者中基礎(chǔ)情況和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)間具有相關(guān)性的指標(biāo)間進(jìn)行一元或多元回歸分析得到11個(gè)回歸方程:TT4=7.50918+0.13498×HbA1c;FT3=4.07363+0.03575 × C 肽-0.01579 × 年齡;FT4=0.81761+0.01570 × HbA1c;TSH=1.07612+0.12645× TG+0.24242×LDL;TC=3.78480+0.32175× TSH;TG=10-0.06616+0.04314×TSH+0.05526×C肽;HDL=1.55537-0.02371×C 肽-0.01307×BMI;LDL=2.26751+0.17915×TSH;HbAlC=100.76777+0.12889×FT4;C 肽=-1.87744+0.15922× TGG+0.19312× BMI-0.00453× 病程;INS=100.14207+0.03923×TG+0.03328×BMI。3研究三:通過(guò)應(yīng)用神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)多層感知器程序構(gòu)建T2DM血瘀證的預(yù)測(cè)模型后得到如下結(jié)果。研究最終得到的模型中訓(xùn)練和測(cè)試樣本準(zhǔn)確率分別為72%、70.6%。且T2DM患者血瘀證預(yù)測(cè)模型中,標(biāo)準(zhǔn)化的重要性>50%的自變量指標(biāo)依次是D-D（100.0%）、MPV（59.0%）、C肽（52.3%）。結(jié)論:1 研究一:舒張壓的升高可能會(huì)增加患陰虛證的風(fēng)險(xiǎn);BMI的增長(zhǎng)可能會(huì)增加患痰濕證的風(fēng)險(xiǎn);年齡的增長(zhǎng)可能會(huì)增加患血瘀證、結(jié)熱證和水濕證的風(fēng)險(xiǎn);TGAb陽(yáng)性者可能更易患郁熱證和肝陽(yáng)證;在正常范圍內(nèi)FT3的升高可能會(huì)降低患?xì)馓撟C的風(fēng)險(xiǎn);在正常范圍內(nèi)TRAb>0.3 IU/mL者可能更易患痰熱證;在所研究范圍內(nèi)TSH的升高可能會(huì)降低患陽(yáng)虛證的風(fēng)險(xiǎn);女性可能更易患血虛證;病程的延長(zhǎng)可能會(huì)增加患濕濁證的風(fēng)險(xiǎn)。2 研究二:T2DM病人的年齡、HbAlc、C肽以及TG水平可能會(huì)對(duì)其甲狀腺功能指標(biāo)產(chǎn)生影響;BMI、C肽以及TSH水平可能會(huì)對(duì)其脂代謝指標(biāo)產(chǎn)生影響;病程、BMI、FT4以及TG水平可能會(huì)對(duì)其糖代謝指標(biāo)產(chǎn)生影響。3 研究三:D-D可能為T2DM血瘀證的判別指標(biāo),且D-D、MPV、C肽可能為T2DM血瘀證的生物學(xué)基礎(chǔ)。
于堯[2]（2021）在《2型糖尿病患者電流感覺(jué)閾值測(cè)量結(jié)果（CPT）與舌象的相關(guān)性研究》文中認(rèn)為目的:通過(guò)探討中醫(yī)舌診與2型糖尿?。╰ype 2 diabetes,T2DM）患者電流感覺(jué)閾值測(cè)量（current perception threshold,CPT）結(jié)果的相關(guān)性,為舌診在防治T2DM慢性并發(fā)癥——糖尿病周圍神經(jīng)病變（diabetic peripheral neuropathy,DPN）上提供參考。方法:研究對(duì)象為2020年1月至2021年1月就診于長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院內(nèi)分泌代謝病科符合納入標(biāo)準(zhǔn)的569例2型糖尿病患者。將其CPT結(jié)果按嚴(yán)重程度分為:重度感覺(jué)異常組（A組）,中度感覺(jué)異常組（B組）,輕度感覺(jué)異常組（C組）,無(wú)明顯感覺(jué)異常組（D組）。應(yīng)用上海道生公司生產(chǎn)的便捷式舌診儀（DS01-G）采集、得出舌象特征。采取雙人雙錄入辦法記錄患者舌象特征并進(jìn)行相關(guān)性分析。全部數(shù)據(jù)采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行頻數(shù)統(tǒng)計(jì)、X2檢驗(yàn)及雙因素方差分析法統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:1、各分組患者的證候特征及比率不同:CPT結(jié)果重度感覺(jué)異常組證候多見(jiàn)血瘀絡(luò)脈證（58.5%）,其余三組證候均多見(jiàn)于氣陰兩虛證,分別占33.8%,46.2%及40.0%。2、各組舌象特點(diǎn)各不相同:CPT結(jié)果重度異常組的患者大多數(shù)舌象特點(diǎn)為“強(qiáng)硬青紫舌邊有齒痕,苔剝落色黃”,舌下絡(luò)脈多見(jiàn)于Ⅲ度、Ⅱ度改變;證候多見(jiàn)于血瘀脈絡(luò)證及陰陽(yáng)兩虛證。CPT結(jié)果中度異常組的患者大多數(shù)舌象特點(diǎn)是“紅絳點(diǎn)刺舌,黃白相間燥苔”,舌下絡(luò)脈多見(jiàn)于Ⅱ度、Ⅰ度改變;證候多見(jiàn)于氣陰兩虛證和血瘀脈絡(luò)證。CPT結(jié)果輕度異常組的患者大多數(shù)舌象特點(diǎn)是“紅色裂紋舌,苔剝落色白”,舌下絡(luò)脈瘀滯程度以Ⅰ度為主;證候多見(jiàn)于氣陰兩虛證和陰虛熱盛證。CPT結(jié)果無(wú)明顯異常組患者表現(xiàn)出主要舌象特點(diǎn)為“淡紅瘦舌,黃白相間膩苔”,舌下絡(luò)脈瘀滯程度以0度為主;證候多為氣陰兩虛證及陰虛熱盛證,與CPT結(jié)果輕度異常組患者證候相似。3、統(tǒng)計(jì)得到的雙因素方差分析結(jié)果顯示:CPT結(jié)果異常程度組間因素P<0.05,說(shuō)明各組舌象有差異,CPT結(jié)果不同,舌象特點(diǎn)也不相同;舌象特點(diǎn)區(qū)組間因素P<0.05,說(shuō)明各舌象特點(diǎn)區(qū)組間因素對(duì)舌象比率存在影響。結(jié)論:1、2型糖尿病患者的CPT結(jié)果不同,其舌象表現(xiàn)特點(diǎn)不同,兩者具有相關(guān)性。通過(guò)舌象初步推斷CPT結(jié)果,可以在疾病早期預(yù)防DPN上提供有效的參考。2、通過(guò)總結(jié)各CPT異常組患者的舌象特點(diǎn)得出:DPN的病機(jī)虛實(shí)夾雜,表現(xiàn)為陰津不足、氣虛陽(yáng)損,瘀血貫穿疾病的始終。隨著CPT結(jié)果的異常程度加重,舌下絡(luò)脈等舌象特點(diǎn)的血瘀之象也越發(fā)明顯。對(duì)于CPT結(jié)果重度及中度異常的2型糖尿病患者,在預(yù)防和治療DPN上除應(yīng)用滋陰補(bǔ)陽(yáng)及益氣養(yǎng)陰治法之外,應(yīng)更加重視活血化瘀法的應(yīng)用。
陳芳芳[3]（2021）在《脂肪細(xì)胞來(lái)源外泌體在糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化疾病中的作用及機(jī)制研究》文中研究表明研究背景糖尿病是21世紀(jì)全球最嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一,我國(guó)已成為糖尿病患者總數(shù)最多的國(guó)家。與未患糖尿病的成年人相比,大約75%的2型糖尿病患者死于心血管并發(fā)癥。研究表明,冠心病合并2型糖尿病患者的冠狀動(dòng)脈受累程度高且彌漫病變較多、狹窄程度較重,臨床治療困難明顯增加。經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療（Percutaneous coronary interventions,PCI）是目前用于治療冠心病合并糖尿病的有效手段。但是在PCI日臻完善的今天,糖尿病一直是PCI術(shù)中并發(fā)癥和術(shù)后近、遠(yuǎn)期預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。糖尿病患者PCI術(shù)后支架內(nèi)再狹窄發(fā)生率顯著升高,是嚴(yán)重影響患者預(yù)后的主要因素。支架內(nèi)再狹窄（Int-stentrestenosis,ISR）是涉及多種機(jī)制的復(fù)雜疾病過(guò)程,是惡化2型糖尿病心血管并發(fā)癥患者預(yù)后的核心問(wèn)題。現(xiàn)有觀點(diǎn)認(rèn)為以平滑肌細(xì)胞增殖為核心的血管內(nèi)膜增生是支架內(nèi)再狹窄的主要病理過(guò)程和關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以此為靶點(diǎn)開發(fā)的雷帕霉素、紫杉醇藥物洗脫支架可在一定程度上降低支架內(nèi)再狹窄的發(fā)生率,但存在“晚期追趕現(xiàn)象”,且晚期支架內(nèi)再狹窄發(fā)生率仍高達(dá)10%。由此推測(cè)平滑肌細(xì)胞增殖可能只是血管內(nèi)膜增生的主要中間過(guò)程而非啟動(dòng)因素,而糖尿病導(dǎo)致PCI術(shù)后支架內(nèi)再狹窄發(fā)生率顯著增高的關(guān)鍵機(jī)制也尚未闡明。因此,探索糖尿病條件下血管內(nèi)膜增生的啟動(dòng)環(huán)節(jié),尋找以此為靶點(diǎn)的干預(yù)方法,才能從源頭上阻斷支架內(nèi)再狹窄的發(fā)生發(fā)展。對(duì)于血管結(jié)構(gòu)而言,內(nèi)皮細(xì)胞作為管壁組織與血液中各種病理性刺激的天然屏障,是保護(hù)平滑肌細(xì)胞免受刺激因素干擾的關(guān)鍵,在血管內(nèi)膜增生過(guò)程中可能是先于平滑肌細(xì)胞發(fā)揮作用的核心角色。支架的植入過(guò)程中存在內(nèi)皮細(xì)胞受損,內(nèi)皮細(xì)胞損傷是啟動(dòng)動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)鍵步驟。圍手術(shù)期藥物的規(guī)范應(yīng)用已在最大程度上保護(hù)了內(nèi)皮細(xì)胞的完整性,而平滑肌細(xì)胞仍能不斷受到刺激而增殖。近期關(guān)于內(nèi)皮細(xì)胞在刺激因素下向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)變即內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Endothelial-Mesenchymal Transition,EndMT）的研究給了我們一定的啟示。EndMT 是指在某些特定的生理或病理?xiàng)l件下,內(nèi)皮細(xì)胞失去其自身特異性抗原,而獲得間質(zhì)細(xì)胞抗原,同時(shí)其生物學(xué)特性明顯改變,獲得較強(qiáng)的增殖、遷移、收縮能力。EndMT在冠狀動(dòng)脈和肺動(dòng)脈的發(fā)育過(guò)程中可使內(nèi)皮細(xì)胞向平滑肌細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化,對(duì)心血管系統(tǒng)的正常發(fā)育有至關(guān)重要的作用。EndMT參與了諸多與血管內(nèi)膜增生相關(guān)疾病的發(fā)生過(guò)程,促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化,但未涉及PCI術(shù)后再狹窄防治的研究。因此,EndMT可能是支架內(nèi)再狹窄發(fā)生的關(guān)鍵步驟。近來(lái)研究證實(shí),多種外界刺激因素在內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生EndMT中起重要作用,包括高糖、炎癥、低氧、脂代謝異常、氧化應(yīng)激、機(jī)械牽張力、吸煙等,但是糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化及支架內(nèi)再狹窄的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,涉及上述多種機(jī)制的協(xié)同作用。外泌體（Exosomes）能夠攜帶大量蛋白質(zhì)、核酸及脂質(zhì)成分,整合來(lái)源細(xì)胞的有效刺激信息,有效實(shí)現(xiàn)信號(hào)的級(jí)聯(lián)放大和遠(yuǎn)距離傳輸。Exosomes所攜帶、傳遞的信息成分多與其來(lái)源細(xì)胞/組織密切相關(guān)。糖尿病狀態(tài)下,脂肪細(xì)胞來(lái)源外泌體（Adipocyte-derived exosomes,AdExos）含有脂肪組織炎癥及胰島素抵抗的相關(guān)蛋白及核酸成分,能夠通過(guò)作用于靶細(xì)胞誘發(fā)多種生物學(xué)功能,可能是鏈接胰島素抵抗的脂肪組織與糖尿病動(dòng)脈血管之間的重要橋梁,是整合機(jī)體多種刺激因素,誘發(fā)EndMT的關(guān)鍵載體。Sonic hedgehog（Shh）作為Hedgehog蛋白三種同源形式之一,表達(dá)最廣泛,活性最高,是參與胚胎發(fā)育的關(guān)鍵蛋白。在腫瘤領(lǐng)域的研究發(fā)現(xiàn),Shh具有激活Snail信號(hào)通路促進(jìn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）的作用,而EndMT是EMT的一種特殊類型。進(jìn)一步研究證實(shí),Snail信號(hào)通路亦是調(diào)節(jié)EndMT形成的關(guān)鍵信號(hào)通路。綜上,我們提出研究假說(shuō):糖尿病狀態(tài)下,攜帶Shh的AdExos增多,被內(nèi)皮細(xì)胞攝取,AdExos通過(guò)其表面攜帶的Shh激活Snail依賴的EndMT過(guò)程,導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生表型轉(zhuǎn)換,逐漸向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化,促進(jìn)血管內(nèi)膜增生,最終導(dǎo)致支架內(nèi)再狹窄的發(fā)生。鑒于以上假說(shuō),我們將進(jìn)行體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn),在整體和細(xì)胞水平研究脂肪細(xì)胞來(lái)源外泌體在血管再狹窄中的作用及具體機(jī)制。研究目的1.在整體動(dòng)物水平證實(shí)AdExos通過(guò)其攜帶的Shh促進(jìn)內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,加劇血管內(nèi)膜增生,進(jìn)而影響糖尿病血管再狹窄的發(fā)生;2.從細(xì)胞水平探索AdExos促內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的特性,驗(yàn)證AdExos通過(guò)其攜帶的Shh激活內(nèi)皮細(xì)胞Snail信號(hào)通路并促進(jìn)EndMT,為2型糖尿病PCI術(shù)后支架內(nèi)再狹窄防治提供新的靶點(diǎn)。研究方法1.培養(yǎng)、誘導(dǎo)分化3T3-L1前脂肪細(xì)胞并建立胰島素抵抗模型首先,我們通過(guò)胰島素、3-異丁基-1-甲基,黃嘌呤與地塞米松聯(lián)合誘導(dǎo)的方法將3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化為成熟的脂肪細(xì)胞,再通過(guò)高糖聯(lián)合高胰島素的方法建立胰島素抵抗的脂肪細(xì)胞模型,采用無(wú)exosomes血清培養(yǎng)并收集細(xì)胞上清,獲取對(duì)照組（Control,Ctrl）及胰島素抵抗組（Insulin resistance,IR）脂肪細(xì)胞上清。2.Shh腺病毒轉(zhuǎn)染3T3-L1脂肪細(xì)胞在建立胰島素抵抗模型的基礎(chǔ)上,我們?cè)賹hh干擾及過(guò)表達(dá)的腺病毒轉(zhuǎn)染入成熟脂肪細(xì)胞中,采用無(wú)exosomes血清培養(yǎng)后,收集細(xì)胞上清,獲取胰島素抵抗組、Shh干擾的胰島素抵抗組、Shh過(guò)表達(dá)的胰島素抵抗組及空載體胰島素抵抗組的脂肪細(xì)胞上清。3.AdExos的分離提取及特征鑒定將前文中獲得的多種脂肪細(xì)胞上清通過(guò)超速差速離心法,分離提取上清中的外泌體,由此獲得對(duì)照組外泌體（Ctrl-AdExos）、胰島素抵抗組外泌體（IR-AdExos）、Shh干擾的胰島素抵抗組外泌體（IR-AdExosshh-）、Shh過(guò)表達(dá)的胰島素抵抗組外泌體（IR-AdExosshh+）及空載體胰島素抵抗組外泌體（IR-AdExosvector）;再采用透射電鏡、動(dòng)態(tài)光散射粒度儀、流式細(xì)胞儀及Western blot等方法進(jìn)行AdExos的特征鑒定。4.2型糖尿病血管再狹窄ApoE-/-小鼠模型的構(gòu)建4周齡的雄性ApoE-/-小鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,禁食處理12～14小時(shí),進(jìn)行腹腔糖耐量試驗(yàn)（Intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT）后隨機(jī)分為高脂飲食組和普通飲食組,高脂飲食組予以高脂飼料喂養(yǎng),普通飲食組予以普通生長(zhǎng)繁殖飼料喂養(yǎng);6周后再次進(jìn)行IPGTT試驗(yàn),出現(xiàn)胰島素抵抗的高脂飲食組小鼠給予一次性腹腔注射鏈脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）（劑量標(biāo)準(zhǔn)為75mg/kg）,普通飲食組小鼠給予同等劑量的枸櫞酸鈉緩沖液進(jìn)行腹腔注射;繼續(xù)以原飼料喂養(yǎng)2周后,再次進(jìn)行IPGTT試驗(yàn)和隨機(jī)血糖檢測(cè),如果小鼠的隨機(jī)血糖水平≥11.1mmol/L,且有多飲、多尿、多食等現(xiàn)象,則納入2型糖尿病組。對(duì)2型糖尿病組小鼠和對(duì)照組小鼠通過(guò)植入股動(dòng)脈袖套的方法構(gòu)建血管再狹窄模型。分別給予生理鹽水、IR-AdExos及IR-AdExosshh-經(jīng)尾靜脈注射,最后得到動(dòng)物分組分別為普通飲食再狹窄組（Chow）、普通飲食+IR-AdExos再狹窄組（Chow+IR-AdExos）、普通飲食+IR-AdExosshh-再狹窄組（Chow+IR-AdExosshh）、糖尿病再狹窄組（DM）、糖尿病+IR-AdExos再狹窄組（DM+IR-AdExos）及糖尿病+IR-AdExosshh-再狹窄組（DM+IR-AdExosshh-）。5.小鼠體內(nèi)血管對(duì)AdExos的攝取為了驗(yàn)證小鼠血管能夠攝取AdExos,我們采用PKH26染料標(biāo)記AdExos,經(jīng)尾靜脈注射入再狹窄模型小鼠,制作血管標(biāo)本切片,通過(guò)免疫熒光染色觀察AdExos在體內(nèi)的攝取情況。6.病理組織學(xué)染色觀察血管再狹窄情況對(duì)股動(dòng)脈再狹窄部位組織標(biāo)本切片進(jìn)行Hematoxylin-eosin staining（HE）染色、Verhoeffs Van Gieson彈性纖維染色及免疫組化染色,觀察血管再狹窄情況。7.免疫熒光染色檢測(cè)再狹窄部位EndMT發(fā)生情況通過(guò)進(jìn)行 CD31 和 SM22α、CD31 和 Vimentin、Ve-Cadherin 和 SM22α、Ve-Cadherin和Vimentin免疫熒光共定位染色的方法檢測(cè)血管再狹窄部位EndMT的發(fā)生情況。8.分離提取小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,驗(yàn)證內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)AdExos的攝取為了進(jìn)一步研究AdExos對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響,我們進(jìn)行了體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn),通過(guò)酶消法提取小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,給予PKH26標(biāo)記的AdExos,采用鬼筆環(huán)肽標(biāo)記細(xì)胞骨架蛋白,顯微鏡下觀察內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)AdExos的攝取。9.AdExos刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞中EndMT發(fā)生情況再將所獲取的Ctrl-AdExos、IR-AdExos、IR-AdExosshh-、IR-AdExosshh+、IR-AdExosvector等不同培養(yǎng)條件來(lái)源的AdExos及TGF-β、SHH重組蛋白用以刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,通過(guò)免疫熒光染色及Western blot的方法評(píng)價(jià)內(nèi)皮標(biāo)記物和間質(zhì)標(biāo)記物的表達(dá)變化及EndMT的發(fā)生情況。10.Western blot 檢測(cè)分子機(jī)制方面,取AdExos及重組蛋白刺激孵育后的小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,提取蛋白質(zhì),采用Western blot方法檢測(cè)Shh、內(nèi)皮細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)及信號(hào)通路分子的表達(dá)情況。研究結(jié)果1.建立3T3-L1脂肪細(xì)胞胰島素抵抗模型3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化至成熟脂肪細(xì)胞后,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)較多、較大的脂滴;高糖高胰島素條件培養(yǎng)成熟脂肪細(xì)胞24h后,脂肪細(xì)胞總蛋白中總IRS1表達(dá)量顯著減少,磷酸化Ser307位點(diǎn)的IRS1表達(dá)量顯著增高,Akt的磷酸化水平降低;脂肪細(xì)胞細(xì)胞膜蛋白Glut4表達(dá)減少而細(xì)胞漿蛋白Glut4表達(dá)增加,提示胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下Glut4細(xì)胞膜轉(zhuǎn)位減少;胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下,脂肪細(xì)胞脂質(zhì)沉積增多。上述結(jié)果表明我們成功建立了 3T3-L1脂肪細(xì)胞胰島素抵抗模型。2.AdExos的分離提取及特征鑒定透射電鏡觀察下發(fā)現(xiàn)AdExos呈膜包被的囊泡狀,直徑在30～100nm范圍內(nèi);動(dòng)態(tài)光散射粒度儀結(jié)果表明AdExos直徑范圍分布于30～100nm;Western blot及流式細(xì)胞學(xué)結(jié)果表明AdExos陽(yáng)性表達(dá)CD63、TSG101及CD81,而不表達(dá)GRP94和Calnexin。3.構(gòu)建2型糖尿病血管再狹窄ApoE-/-小鼠模型ApoE-/-小鼠通過(guò)高脂飲食飼養(yǎng)聯(lián)合鏈脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）一次性注射的方法構(gòu)建2型糖尿病模型,糖尿病小鼠隨機(jī)血糖≥11.1 mmol/L,且有多飲、多尿、多食等現(xiàn)象。在此模型的基礎(chǔ)上,通過(guò)股動(dòng)脈袖套植入的方式構(gòu)建再狹窄模型。4.糖尿病脂肪組織來(lái)源外泌體富集Shh分子通過(guò)Western blot方法檢測(cè)對(duì)照組和糖尿病組小鼠脂肪組織來(lái)源外泌體蛋白中Shh分子的表達(dá)情況,結(jié)果表明糖尿病組小鼠脂肪組織來(lái)源外泌體中Shh含量顯著高于對(duì)照組,證明糖尿病脂肪組織來(lái)源外泌體富集Shh分子。5.小鼠體內(nèi)血管對(duì)AdExos的攝取在免疫熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)PKH26標(biāo)記的AdExos呈紅色熒光,分布于小鼠血管范圍內(nèi),證明小鼠血管能夠成功攝取AdExos。6.IR-AdExos通過(guò)攜帶的Shh分子促進(jìn)血管再狹窄高分辨率顯微超聲技術(shù)檢測(cè)股動(dòng)脈收縮期最大流速（Peak systolic velocity,PSV）,HE染色分析血管再狹窄,綜合二者結(jié)果確定血管再狹窄情況。結(jié)果表明,糖尿病組小鼠股動(dòng)脈再狹窄情況與普通飲食組相比明顯加重;與普通飲食組或糖尿病組相比,普通飲食+IR-AdExos組或糖尿病+IR-AdExos組的再狹窄情況進(jìn)一步加重;而Shh蛋白敲減后的IR-AdExos,其促血管再狹窄的能力有所下降,即普通飲食+IR-AdExosshh-組小鼠股動(dòng)脈再狹窄較普通飲食+IR-AdExos組小鼠更輕,糖尿病+IR-AdExosshh-組小鼠股動(dòng)脈再狹窄程度比糖尿病+IR-AdExos組小鼠更輕。7.IR-AdExos通過(guò)攜帶的Shh分子促進(jìn)股動(dòng)脈再狹窄部位EndMT的發(fā)生通過(guò)免疫熒光共定位的方法檢測(cè)血管再狹窄部位發(fā)生EndMT的情況,免疫熒光共定位時(shí),如果內(nèi)皮細(xì)胞同時(shí)表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特征性標(biāo)志物（CD31、Ve-Cadherin）和間充質(zhì)細(xì)胞特征性標(biāo)志物（SM22α、Vimentin）則記為發(fā)生內(nèi)皮細(xì)間質(zhì)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。結(jié)果表明糖尿病狀態(tài)下,內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物減少,間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物增加,提示發(fā)生EndMT;尾靜脈注射IR-AdExos能夠進(jìn)一步促進(jìn)EndMT的發(fā)生,而敲減Shh的IR-AdExos其促EndMT作用減弱,證明IR-AdExos表面的Shh分子是IR-AdExos發(fā)揮促EndMT作用的主要分子靶點(diǎn)。8.成功提取原代小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞能夠攝取AdExos我們采用酶消法成功提取小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,經(jīng)免疫熒光染色證明所提取的內(nèi)皮細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD31,證明小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取成功。將PKH26標(biāo)記的AdExos與小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞共同孵育,顯微鏡下觀察可見(jiàn)細(xì)胞漿內(nèi)有紅色熒光,即為被小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞攝取的AdExos,證明小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞能夠攝取AdExos。9.AdExos促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生EndMT將 Ctrl-AdExos、IR-AdExos、IR-AdExosshh-、IR-AdExosshh+、IR-AdExosvector等不同培養(yǎng)條件來(lái)源的AdExos及TGF-β、SHH重組蛋白刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞后,通過(guò)免疫熒光共定位的方法檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞EndMT的發(fā)生。免疫熒光共定位時(shí),如果內(nèi)皮細(xì)胞同時(shí)表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特征性標(biāo)志物（CD31、Ve-Cadherin）和間充質(zhì)細(xì)胞特征性標(biāo)志物（α-SMA、FAP、FSP-1）則記為發(fā)生內(nèi)皮細(xì)間質(zhì)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。與Ctrl組相比,IR-AdExos組內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生EndMT增多;與IR-AdExos組相比,IR-AdExosshh-組發(fā)生EndMT的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量并無(wú)顯著增加,而IR-AdExosshh+組中發(fā)生EndMT的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量進(jìn)一步增加;TGF-β作為陽(yáng)性對(duì)照,在其刺激下,發(fā)生EndMT的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量顯著增加;SHH重組蛋白刺激組中,發(fā)生EndMT的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量也有顯著增加。上述結(jié)果表明,IR-AdExos能夠促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生EndMT,且該作用是經(jīng)由其攜帶的Shh分子發(fā)揮的。另,TGF-β及SHH也具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生EndMT的作用。10.IR-AdExos促進(jìn)血管再狹窄EndMT的分子機(jī)制與Ctrl組相比,IR-AdExos組內(nèi)皮細(xì)胞中Snail和Slug表達(dá)顯著升高。證明IR-AdExos的促EndMT作用是通過(guò)其表面的Shh作用于下游的Snail和Slug分子發(fā)揮作用。研究結(jié)論1.胰島素抵抗條件下,脂肪細(xì)胞中脂質(zhì)含量增多,脂肪細(xì)胞來(lái)源外泌體富集Shh分子;2.IR-AdExos能夠通過(guò)攜帶的Shh分子,經(jīng)由Shh/Snail/Slug信號(hào)通路促進(jìn)小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生EndMT;3.富集Shh的IR-AdExos能夠明顯促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生間質(zhì)轉(zhuǎn)化,進(jìn)而加劇糖尿病小鼠血管再狹窄的發(fā)生,可能是糖尿病脂肪組織促進(jìn)血管再狹窄的重要機(jī)制之一,IR-AdExos有望成為進(jìn)一步防治糖尿病ISR的新靶點(diǎn)。研究背景糖尿病已成為21世紀(jì)威脅人類生命健康的重大慢性疾病之一。近年來(lái),我國(guó)糖尿病患病率增長(zhǎng)迅速,中國(guó)已成為全球糖尿病患者總數(shù)最多的國(guó)家。心血管疾病是糖尿病患者的主要死亡原因。粥樣斑塊破裂導(dǎo)致的急性冠脈綜合征是糖尿病患者心血管事件的主要原因。但是糖尿病患者冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重、易損斑塊發(fā)生率高的機(jī)制尚未完全闡明。循證醫(yī)學(xué)證據(jù)表明,積極控制血糖可以降低糖尿病患者微血管病變的發(fā)生率,但強(qiáng)化降糖治療能否降低2型糖尿病患者心血管事件的發(fā)生率尚未得到證實(shí)。這提示血糖和胰島素水平僅能反映代謝水平,而不是糖尿病患者冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重、易損斑塊發(fā)生率高的根本原因。因此,亟需深入探討糖尿病患者大血管并發(fā)癥增加的深層次機(jī)制。既往研究發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)常出現(xiàn)病理性新生血管,且在易損斑塊和斑塊易損部位尤為明顯,與斑塊穩(wěn)定性密切相關(guān)。病理性新生血管是動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊形成的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。越來(lái)越多的證據(jù)表明,動(dòng)脈損傷部位病理性新生血管形成與粥樣硬化斑塊引起的急性冠脈綜合癥有關(guān),這些斑塊脆性較大且易發(fā)生破裂,進(jìn)而導(dǎo)致血管阻塞。除了斑塊內(nèi)出血機(jī)制以外,病理性新生血管還通過(guò)白細(xì)胞征募來(lái)促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性。2型糖尿病和動(dòng)脈粥樣硬化同屬慢性炎癥性疾病,在2型糖尿病狀態(tài)下,脂質(zhì)在脂肪細(xì)胞中不斷存儲(chǔ),隨著脂肪細(xì)胞逐漸增大,導(dǎo)致脂肪細(xì)胞功能失調(diào),脂肪因子分泌紊亂,大量促炎因子合成釋放,引發(fā)全身代謝性炎癥反應(yīng)、胰島素抵抗,從而加速斑塊進(jìn)展,促進(jìn)易損斑塊的形成。此外,有研究發(fā)現(xiàn),脂肪細(xì)胞能夠分泌內(nèi)皮特異性絲裂原和促血管生長(zhǎng)因子,參與新生血管的形成。但功能失調(diào)的脂肪組織如何促進(jìn)斑塊內(nèi)新生血管的形成,從而促進(jìn)斑塊發(fā)生發(fā)展的確切機(jī)制至今尚未見(jiàn)報(bào)道。近期,有學(xué)者認(rèn)為外泌體（Exosomes）是脂肪組織與血管間信息傳遞的重要載體。Exosomes是由多種細(xì)胞（如血小板、內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞等）產(chǎn)生的,攜帶大量與其細(xì)胞/組織來(lái)源和功能密切相關(guān)的蛋白質(zhì)、核酸和脂質(zhì)成分。可實(shí)現(xiàn)信號(hào)的級(jí)聯(lián)放大和遠(yuǎn)距離傳輸。在人體內(nèi)所有exosomes中,脂肪細(xì)胞來(lái)源的exosomes（Adipocyte-derived exosomes,AdExos）與糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展及新生血管形成的關(guān)系日益引起人們的關(guān)注。Hulsmans等認(rèn)為,AdExos是將脂肪組織產(chǎn)生的炎癥及氧化應(yīng)激信息傳遞到血管的重要使者,從而引起內(nèi)皮損傷、誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化。但是,AdExos對(duì)于斑塊穩(wěn)定性變化及斑塊內(nèi)病理性新生血管的形成有無(wú)影響尚未見(jiàn)報(bào)道。研究發(fā)現(xiàn)AdExos富含纖粘連蛋白、層粘連蛋白,有利于循環(huán)中的AdExos粘附、遷移、浸潤(rùn)于內(nèi)皮細(xì)胞。糖尿病慢性低度炎癥狀態(tài)下,受損的內(nèi)皮細(xì)胞通透性增加且炎癥因子（IL-6、IL-8）、趨化因子（MCP-1）、粘附因子（VCAM-1、E-selectin）表達(dá)上調(diào),為循環(huán)中的AdExos粘附、浸潤(rùn)創(chuàng)造了良好的條件。此外,AdExos攜帶豐富的促血管生成miRNA,如miR221、miR27b、miR21、miR17～92等。脂肪組織作為內(nèi)分泌器官,是多器官間相互聯(lián)系的紐帶。Hedgehog 蛋白在哺乳動(dòng)物中有 Sonichedgehog（Shh）、Indianhedgehog（Ihh）及Desert hedgehog（Dhh）三種同源形式,其中Shh表達(dá)最廣泛,活性最高。Hedgehog在斑馬魚胚胎發(fā)育中通過(guò)VEGF促進(jìn)主動(dòng)脈生成。Shh缺失的小鼠發(fā)育中的肺缺乏正常血管化的能力。Hedgehog信號(hào)可通過(guò)控制眾多促血管生成因子包括VEGF-a,VEGF-b,VEGF-c及AngII的表達(dá)而調(diào)控新生血管的生成。Hedgehog蛋白促血管生成功能的發(fā)揮是通過(guò)連接到一種12次跨膜受體蛋白--Patched實(shí)現(xiàn)的。在正常情況下,Patched受體與另一種7次跨膜受體蛋白——Smoothened（Smo）相結(jié)合且抑制Smo的作用。當(dāng)Hedgehog蛋白與Patched受體結(jié)合后,解除了對(duì)Smo的抑制作用,進(jìn)而啟動(dòng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。Smo是Hedgehog信號(hào)通路的信息轉(zhuǎn)換器,把細(xì)胞外的Hedgehog蛋白信號(hào)向細(xì)胞內(nèi)傳遞,激活膠質(zhì)瘤相關(guān)原癌基因（Glioma-associated oncogene homolog,Gli）轉(zhuǎn)錄因子。綜上所述,我們提出了如下假說(shuō):糖尿病狀態(tài)下,功能失調(diào)的脂肪組織釋放入循環(huán)血液中的AdExos數(shù)量增多,其通過(guò)其表面的Hedgehog蛋白與內(nèi)皮細(xì)胞上的Patched受體結(jié)合,促進(jìn)病理性新生血管的形成,加速斑塊進(jìn)展及易損斑塊的形成。研究目的1.從細(xì)胞水平分析AdExos促血管生成的特性;2.體外驗(yàn)證AdExos是否通過(guò)啟動(dòng)Hedgehog信號(hào)通路,促進(jìn)新生血管的形成。研究方法1.培養(yǎng)、誘導(dǎo)分化3T3-L1前脂肪細(xì)胞并建立胰島素抵抗模型通過(guò)胰島素、3-異丁基-1-甲基-黃嘌呤與地塞米松聯(lián)合誘導(dǎo)的方法將3T3-LI前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化為成熟的脂肪細(xì)胞。再通過(guò)高糖+高胰島素的方法建立胰島素抵抗的脂肪細(xì)胞模型。采用無(wú)exosomes血清培養(yǎng)并收集細(xì)胞上清,獲取對(duì)照組（Control,Ctrl）及胰島素抵抗組（Insulin resistance,IR）脂肪細(xì)胞上清。2.Shh腺病毒轉(zhuǎn)染3T3-L1脂肪細(xì)胞在建立胰島素抵抗模型的基礎(chǔ)上,我們?cè)賹hh干擾及過(guò)表達(dá)的腺病毒轉(zhuǎn)染入成熟脂肪細(xì)胞中,采用無(wú)exosomes血清培養(yǎng)后,收集細(xì)胞上清,獲取胰島素抵抗組、Shh干擾的胰島素抵抗組、Shh過(guò)表達(dá)的胰島素抵抗組及空載體胰島素抵抗組的脂肪細(xì)胞上清。3.AdExos的分離提取將前文中獲得的多種脂肪細(xì)胞上清通過(guò)超速差速離心法,分離提取上清中的外泌體,由此獲得對(duì)照組外泌體（Ctrl-AdExos）、胰島素抵抗組外泌體（IR-AdExos）、Shh干擾的胰島素抵抗組外泌體（IR-AdExosshh-）、Shh過(guò)表達(dá)的胰島素抵抗組外泌體（IR-AdExosshh+）及空載體胰島素抵抗組外泌體（IR-AdExosvector）。4.分離提取小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,驗(yàn)證內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)AdExos的攝取為了進(jìn)一步研究AdExos對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞血管新生能力的影響,我們進(jìn)行了體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn),通過(guò)酶消法提取小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,給予PKH26標(biāo)記的AdExos,顯微鏡下觀察內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)AdExos的攝取。5.AdExos刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞功能的改變將所獲取的 Ctrl-AdExos、IR-AdExos、IR-AdExosshh-、IR-AdExosshh+、IR-AdExosvector等不同培養(yǎng)條件來(lái)源的AdExos及VEGF、SHH重組蛋白用以刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,通過(guò)PCNA/KI67免疫熒光染色檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞增殖功能,通過(guò)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)遷移功能。6.小管形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)AdExos促血管新生的特性將 Ctrl-AdExos、IR-AdExos、IR-AdExosshh-、IR-AdExosshh+、IR-AdExosvector等不同培養(yǎng)條件來(lái)源的AdExos及VEGF、SHH重組蛋白用以刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,通過(guò)小管形成實(shí)驗(yàn)觀察小管形成的數(shù)量及分支長(zhǎng)度,評(píng)價(jià)AdExos的促血管新生的能力。7.Hedgehog信號(hào)通路在AdExos促血管新生中的作用分子機(jī)制方面,給予Hedgehog蛋白阻斷劑——環(huán)巴胺阻斷Hedgehog信號(hào)通路,通過(guò)小管形成實(shí)驗(yàn)觀察小管形成的數(shù)量及分支長(zhǎng)度,檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞的小管形成功能。給予Hedgehog蛋白阻斷劑——環(huán)巴胺和Gli抑制劑——Gant61刺激孵育,提取小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的蛋白質(zhì),通過(guò)Western blot方法檢測(cè)信號(hào)通路分子的表達(dá)情況。研究結(jié)果1.成功提取原代小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞能夠攝取AdExos我們采用酶消法成功提取小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,經(jīng)免疫熒光染色證明所提取的內(nèi)皮細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD31,證明小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取成功。將PKH26標(biāo)記的AdExos與小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞共同孵育,顯微鏡下觀察可見(jiàn)細(xì)胞漿內(nèi)有紅色熒光,即為被小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞攝取的AdExos,證明小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞能夠攝取AdExos。2.IR-AdExos改變小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移功能用Ctrl-AdExos、IR-AdExos、VEGF及SHH重組蛋白刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞。首先進(jìn)行PCNA和KI67免疫熒光染色,結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,Ctrl-AdExos刺激組的PCNA和KI67的表達(dá)量有所增加,IR-AdExos刺激組的PCNA和KI67的表達(dá)量顯著增加,以VEGF作為促血管新生的陽(yáng)性對(duì)照用以刺激內(nèi)皮細(xì)胞,結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,VEGF刺激組中內(nèi)皮細(xì)胞的PCNA及KI67表達(dá)量均顯著增加。表明IR-AdExos、VEGF能夠顯著增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖功能。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,Ctrl-AdExos刺激組的細(xì)胞遷移率有增加,IR-AdExos細(xì)胞遷移率顯著增加,VEGF刺激組細(xì)胞遷移率明顯增加。表明IR-AdExos、VEGF能夠顯著增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移功能。3.AdExos促進(jìn)小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的小管形成功能用Ctrl-AdExos、IR-AdExos、VEGF及SHH重組蛋白刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞。進(jìn)行小管形成實(shí)驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn):與對(duì)照組相比,Ctrl-AdExos刺激組細(xì)胞小管形成數(shù)量、分支長(zhǎng)度增加,IR-AdExos刺激組細(xì)胞小管形成數(shù)量、分支長(zhǎng)度顯著增加,VEGF陽(yáng)性對(duì)照組內(nèi)皮細(xì)胞小管形成數(shù)量、分支長(zhǎng)度顯著增加。表明IR-AdExos、VEGF能夠明顯增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞的小管形成功能。4.Shh基因干預(yù)的IR-AdExos影響小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移功能用 IR-AdExos、IR-AdExosshh-、IR-AdExosshh+、IR-AdExosvector 等不同培養(yǎng)條件來(lái)源的AdExos及VEGF、SHH重組蛋白刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞。進(jìn)行PCNA和KI67免疫熒光染色,結(jié)果顯示:與IR-AdExos組相比,IR-AdExosshh-組中內(nèi)皮細(xì)胞PCNA、KI67的表達(dá)量有所降低,IR-AdExosshh+組內(nèi)皮細(xì)胞中PCNA、KI67的表達(dá)量顯著增加。表明Shh是IR-AdExos促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖功能的重要分子。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與IR-AdExos組相比,IR-AdExosshh-組中細(xì)胞遷移率降低,IR-AdExosshh+組內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞遷移率顯著增加。表明Shh是IR-AdExos促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移功能的重要分子。5.Shh基因干預(yù)的IR-AdExos影響小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的小管形成功能用 IR-AdExos、IR-AdExosshh-、IR-AdExosshh+、IR-AdExosvector 等不同培養(yǎng)條件來(lái)源的AdExos及VEGF、SHH重組蛋白刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞。進(jìn)行小管形成實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示:與IR-AdExos組相比,IR-AdExosshh-組中內(nèi)皮細(xì)胞小管形成數(shù)量、分支長(zhǎng)度降低,IR-AdExosshh+組內(nèi)皮細(xì)胞小管形成數(shù)量、分支長(zhǎng)度顯著增加。表明Shh是IR-AdExos促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞血管新生的重要分子。6.Hedgehog信號(hào)通路在AdExos促血管新生中的作用給予 Hedgehog 抑制劑環(huán)巴胺和 IR-AdExos、IR-AdExosshh-、IR-AdExosshh+、IR-AdExosvector等不同培養(yǎng)條件來(lái)源的AdExos以及VEGF重組蛋白刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞小管形成功能,結(jié)果表明IR-AdExos+環(huán)巴胺組的小管形成數(shù)量、分支長(zhǎng)度顯著降低,證明Hedgehog是AdExos促血管新生的關(guān)鍵分子。7.AdExos促血管新生信號(hào)通路分子的表達(dá)情況給予Hedgehog抑制劑環(huán)巴胺、Gli抑制劑Gant61及IR-AdExosshh+刺激孵育小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。Western blot結(jié)果顯示:IR-AdExosshh+刺激條件下,小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中Gli表達(dá)量顯著升高;給予環(huán)巴胺和Gant61（Gli抑制劑）后,Gli表達(dá)量顯著降低,證明AdExos通過(guò)Patched/Gli信號(hào)通路促進(jìn)血管新生。研究結(jié)論1.IR-AdExos能夠增強(qiáng)小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和小管形成功能,促進(jìn)血管新生;2.Shh是IR-AdExos促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞功能改變的關(guān)鍵分子;3.IR-AdExos通過(guò)Patched/Gli信號(hào)通路促進(jìn)血管新生。
夏弋欽[4]（2021）在《“二陽(yáng)結(jié)謂之消”理論下的2型糖尿病合并功能性便秘證素學(xué)研究》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理[目的]分析收錄的133名2型糖尿病合并便秘患者的年齡、性別、合并癥,2型糖尿病病程、便秘病程,病性證素分布情況,病位證素分布情況,證素頻數(shù)配比情況,以2型糖尿病合并便秘患者的證素為研究基點(diǎn),分析患者空腹血糖、糖化血紅蛋白,谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶以及脂代謝水平,并記錄患者排便時(shí)間、排便頻率、統(tǒng)計(jì)患者Bristol糞便質(zhì)地、PAC-SYM量表、PAC-QOL量表以此找出2型糖尿病合并功能性便秘的癥狀分布特點(diǎn),為醫(yī)者針對(duì)性的治療2型糖尿病合并功能性的主癥找到一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)依據(jù),并且將證素與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析,為2型糖尿病合并功能性便秘的中醫(yī)證素診斷提供可作為參考的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)數(shù)據(jù)。[方法]（1）從中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院病歷系統(tǒng)中提取267名2018年1月1日至2020年9月20日在廣安門醫(yī)院住院的2型糖尿病伴便秘癥狀的患者,收集患者入院記錄,入院第1-2日血糖譜,胰島功能檢查等其他實(shí)驗(yàn)室結(jié)果。并逐一進(jìn)行電話回訪,并診斷患者是否符合2型糖尿病合并功能性便秘,并進(jìn)行便秘病程、飲食運(yùn)動(dòng)睡眠習(xí)慣、以及Bristol糞便質(zhì)地、PAC-SYM量表、PAC-QOL量表的資料收集,最終入組133位患者。（2）使用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,在數(shù)據(jù)分析過(guò)程中,計(jì)量資料中服從正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）進(jìn)行描述,不服從正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用中位數(shù)進(jìn)行描述;計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)（N）以及百分?jǐn)?shù)（%）進(jìn)行描述。對(duì)于服從正態(tài)分布的計(jì)量資料（如BMI、血糖、糖化血紅蛋白、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇等）采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行比較,對(duì)于不服從正態(tài)分布的數(shù)據(jù),采用兩獨(dú)立樣本W(wǎng)ilcoxon秩和檢驗(yàn)進(jìn)行比較;計(jì)數(shù)資料（如年齡分布、尿糖、中醫(yī)證素等）的比較采用卡方分析（Chi-square test）進(jìn)行檢驗(yàn)。采用SPSS Moduler軟件包對(duì)2型糖尿病合并功能性便秘患者的中醫(yī)證素配比情況進(jìn)行基于關(guān)聯(lián)規(guī)則的數(shù)據(jù)挖掘,并繪制中醫(yī)證素的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度圖。在本研究中,規(guī)定P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。[結(jié)果]1.對(duì)133名患者進(jìn)行基礎(chǔ)信息（年齡、BMI、排便習(xí)慣等）以及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)、中醫(yī)證素等進(jìn)行判定和統(tǒng)計(jì)。在本次橫斷面實(shí)驗(yàn)中男女入組人數(shù)平均,分別為男性（65人,占48.9%）女性（68人,占51.1%）,2型糖尿病合并功能性便秘最密集的年齡人群的60-70歲患者,平均年齡為61.5±11.1歲,說(shuō)明2型糖尿病合并功能性便秘患者以中老年為主。患者BMI整體為25.3±3.3,說(shuō)明2型糖尿病合并功能性便秘患者普遍偏胖,患者2型糖尿病合并癥中以糖尿病周圍神經(jīng)病變、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性酮癥為主,提示2型糖尿病合并功能性便秘患者小血管病變、神經(jīng)病變的合并癥更多。2.在患者排便習(xí)慣記錄中,可見(jiàn)大多數(shù)患者糞便性質(zhì)為條狀便,表面有裂紋（占29.32%）,其次為條狀硬便,表面凹凸（占27.82%）,最后為散在硬塊,成羊屎狀（占23.31%）。對(duì)于排便時(shí)間大多數(shù)患者集中在每次10至15分鐘（占48.87%）或10分鐘以下（占24.81%）;排便頻率大多數(shù)患者集中在3天/次（占45.1 1%）或1-2天/次（36.84%）。3.在患者肝功能中,患者谷丙轉(zhuǎn)氨酶（0-40 mmol/l）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（0-40 mmol/l）均在正常范圍,無(wú)患者出現(xiàn)肝功能異常;男患者的平均空腹血糖為10.9mmol/L;女患者的平均空腹血糖為10.7 mmol/l;男性患者的糖化血紅蛋白均值為8.9%;女性患者的糖化血紅蛋白均值為9.2%?？偰懝檀颊Ｖ禐镃HO<5.2 mmol/l,男患者的總膽固醇均值為4.3±1.3 mmol/l,女患者的總膽固醇均值為5±1.1 mmol/l。甘油三脂正常值為:TG（0.56 mmol/l-1.7 mmol/l）,男患者的甘油三脂均值為1.6±1.2 mmol/l,女性患者的甘油三酯均值為1.9±1.6 mmol/l;高密度脂蛋白（1.04 mmol/l-1.55 mmol/l）男患者的均值為1.1±0.3 mmol/l,女患者的均值為1.2±0.3 mmol/l;低密度脂蛋白（<3.3 mmol/l）男患者的均值為2.7±1.0 mmol/l,女患者的均值為3.1±0.9 mmol/l;游離脂肪酸（0.1-0.9mmol/l）男患者的均值為 0.6±0.3 mmol/l,女患者的均值為 0.6±0.2mmol/l。4.在證素權(quán)重分布方面,男性以陰虛（占比96.9%）、燥（占比67.7%）、腎（占比46.2%）、痰（占比41.5%）、肝（占比36.9%）居多,女性以陰虛（占比97.1%）、燥（占比66.2%）、肝（占比52.9%）、氣虛（占比48.5%）、腎（占比41.2%）居多.并且患者合計(jì)后排名前十的證素為陰虛（占比97.0%）、燥（占比66.9%）、肝（占比45.1%）、腎（占比48.5%）、氣虛（占比48.5%）、痰濕（占比48.5%）、火（占比48.5%）、陽(yáng)虛（占比48.5%）、大腸（占比48.5%）。對(duì)證素進(jìn)行基于關(guān)聯(lián)規(guī)則的數(shù)據(jù)挖掘后發(fā)現(xiàn)有以下證素具有強(qiáng)關(guān)聯(lián)性:燥-陰虛（頻數(shù):86）、肝-陰虛（58）、腎-陰虛（56）、痰-陰虛（51）、氣虛-陰虛（48）、濕-陰虛（40）等等。研究發(fā)現(xiàn)前6名的關(guān)聯(lián)規(guī)則均與陰虛有關(guān)、接下來(lái)多于燥、與氣虛有關(guān)。并且從證素關(guān)聯(lián)強(qiáng)度圖可看出陰虛、氣虛為主要關(guān)聯(lián)的對(duì)象。5.從糖代謝實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)與證素之間的相關(guān)性分析可以看出,在排名前十的證素中,男性患者的空腹血糖值與“氣虛”證素有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）,并且空腹血糖與“氣虛”成負(fù)相關(guān);男性患者的空腹血糖值與“燥”證素有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）,并且空腹血糖與“燥”成正相關(guān);男性患者的空腹血糖值與“陽(yáng)虛”證素有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）,并且空腹血糖與“陽(yáng)虛”成負(fù)相關(guān)。女性患者空腹血糖值與“陰虛”證素有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）,并且空腹血糖與“陰虛”成正相關(guān);女性患者空腹血糖值與“腎”證素有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）,并且空腹血糖與腎成止相關(guān),;女性患者空腹血糖值與“大腸”證素有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）,并且空腹血糖與“大腸”成負(fù)相關(guān);女性患者糖化血紅蛋白與“痰”證素有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）,并且空腹血糖與痰證素成正相關(guān);女性患者糖化血紅蛋白與“大腸”證素有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）,并且空腹血糖與大腸成負(fù)相關(guān)。6.從尿糖結(jié)果看其3分類結(jié)果與證素之間的相關(guān)性可發(fā)現(xiàn),尿糖在2型糖尿病合并功能性便秘患者中的關(guān)聯(lián)性分析參考意義不大,與前五排名的證素僅男性患者與“氣虛”證素有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）,并且差異成負(fù)相關(guān)。7.從患者脂代謝指標(biāo)中可得出結(jié)論:排名前5的證素僅有氣虛、陰虛證素出現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的數(shù)據(jù),其中氣虛證素中,男性患者總膽固醇與氣虛成負(fù)相關(guān),與低密度脂蛋白成負(fù)相關(guān)。陰虛證素中,男性患者低密度脂蛋白與陰虛成正相關(guān)。而排名前五的證素與女性患者的脂代謝水平均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。[結(jié)論]1.2型糖尿病合并功能性便秘患者病性以陰虛、燥為主,氣虛次之,病位主要在肝、腎,大腸為第3病位臟腑,發(fā)病過(guò)程中兼夾痰、濕、火、陽(yáng)虛等證素。2型糖尿病合并功能性便秘是一個(gè)本虛標(biāo)實(shí)的疾病,氣陰兩虛貫穿疾病始終。2.2型糖尿病合并功能性便秘患者從排便習(xí)慣和Bristol糞便質(zhì)地、PAC-SYM量表、PAC-QOL量表結(jié)果看多屬于輕度或中度功能性便秘患者,結(jié)合患者發(fā)病年齡與病程,我們?cè)谶M(jìn)行中醫(yī)的治療時(shí)應(yīng)增強(qiáng)增液行舟、滋陰潤(rùn)燥藥物的使用,同時(shí)兼顧患者氣陰兩虛的基礎(chǔ)病理?xiàng)l件,能改善患者2型糖尿病合并功能性便秘的癥狀,提高患者的生存質(zhì)量。3.2型糖尿病合并功能性便秘患者肝功能情況良好,脂代謝少數(shù)超出正常值的情況,男女患者的空腹血糖值均值均為10 mmol/L以上,并且男女患者的糖化血紅蛋白均值為9%,提示患者平日血糖控制不佳。4.從實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)中得出空腹血糖、糖化血紅蛋白與證素的相關(guān)性較強(qiáng),并且在不同證素與不同性別患者的相關(guān)性也存在差異,男性患者糖代謝指標(biāo)主要與氣虛、燥、陽(yáng)虛有關(guān),女性患者糖代謝指標(biāo)主要與陰虛、腎、大腸、痰有關(guān)。
李婉婉[5]（2021）在《不同糖耐量患者血清nesfatin-1水平的差異》文中研究表明目的:目前關(guān)于nesfatin-1與2型糖尿病的關(guān)系尚不明確,因此本研究觀察血清nesfatin-1在不同糖耐量患者中的差異,探討nesfatin-1在2型糖尿病發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮的作用。方法:選取我院60例新診斷的2型糖尿病患者作為T2DM組,52例健康體檢者作為健康對(duì)照組,60例處于糖耐量異常或者空腹血糖受損者作為糖尿病前期組,對(duì)各組血清nesfatin-1,空腹胰島素和血糖、糖化血紅蛋白、胰島β細(xì)胞分泌指數(shù)以及腰臀比和體重指數(shù)進(jìn)行測(cè)量。結(jié)果:與健康對(duì)照組相比,T2DM組和糖尿病前期組的體重指數(shù)、腰臀比、空腹血糖、糖化血紅蛋白、空腹胰島素升高,HOMA-β降低。與健康對(duì)照組和糖尿病前期組相比,在T2DM組血清nesfatin-1水平降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。通過(guò)Pearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)血清nesfatin-1與體重指數(shù)、腰臀比、空腹胰島素、HOMA-β呈正相關(guān),與空腹血糖呈負(fù)相關(guān)。通過(guò)多重線性回歸分析發(fā)現(xiàn)體重指數(shù)、腰臀比、空腹胰島素、nesfatin-1是空腹血糖的影響因素。結(jié)論:血清nesfatin-1是血糖的影響因素之一,其可能在2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展中具有保護(hù)作用。
石書龍[6]（2020）在《2型糖尿病胰島素抵抗中醫(yī)證型的聚類分析以及絞股藍(lán)皂苷XLIX改善胰島素抵抗的初步研究》文中提出目的:1.探討2型糖尿病胰島素抵抗的中醫(yī)證型分布,結(jié)合相關(guān)臨床指標(biāo),分析不同證型的臨床特點(diǎn),從而為2型糖尿病胰島素抵抗的臨床辨證施治提供客觀的科學(xué)依據(jù)。2.探討絞股藍(lán)皂苷XLIX是否能改善胰島素抵抗以及其可能的作用機(jī)制。方法:1.臨床研究:本研究采用回顧性病例研究的方式收集納入本研究的120例2型糖尿病胰島素抵抗患者的中醫(yī)四診信息以及其臨床資料,包括年齡、病程、體重指數(shù)（BMI）、空腹血糖（FPG）、空腹胰島素（FINS）、甘油三酯（TG）、膽固醇（CHOL）、低密度脂蛋白（LDL）、糖化血紅蛋白（Hb A1c）等指標(biāo),運(yùn)用SPSS軟件建立這120例患者的中醫(yī)四診信息條目數(shù)據(jù)庫(kù),采用系統(tǒng)聚類分析法中的Ward’s method以及Squared Euclidean Distance進(jìn)行聚類分析,根據(jù)所聚類別證候條目的分布情況,由3名主任醫(yī)師組成的中醫(yī)專家組對(duì)聚類分析的初始模型進(jìn)行商討,結(jié)合中醫(yī)學(xué)專業(yè)知識(shí)、證候診斷標(biāo)準(zhǔn)以及臨床實(shí)際情況,最終確定2型糖尿病胰島素抵抗的中醫(yī)證型分類標(biāo)準(zhǔn)。然后,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),通過(guò)具體分析每個(gè)患者的臨床癥狀以及舌脈之表現(xiàn),來(lái)判定其所屬中醫(yī)證型,最后總結(jié)、歸納、分析各證型組的臨床指標(biāo),并進(jìn)行不同證型組之間的指標(biāo)比較,以及探討各證型組中與胰島素抵抗程度呈相關(guān)性的敏感指標(biāo)。2.實(shí)驗(yàn)研究:將SD雄性大鼠隨機(jī)分為三組,即生理鹽水組、脂肪乳組、脂肪乳+絞股藍(lán)皂苷XLIX（Gyp-XLIX）組,通過(guò)靜脈輸注脂肪乳來(lái)建立大鼠胰島素抵抗模型,結(jié)合高胰島素-正葡萄糖鉗夾試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證Gyp-XLIX是否能改善胰島素抵抗,實(shí)驗(yàn)完成后,留取肝臟、肌肉、脂肪組織,并行蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(yàn)（western blotting）、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）等相關(guān)試驗(yàn),來(lái)探討Gyp-XLIX可能的作用機(jī)制。結(jié)果:1.臨床研究:（1）四診信息分布:2型糖尿病胰島素抵抗頻數(shù)分布居前十位的癥狀有:麻木不仁91例（75.83%）,口干渴71例（59.17%）,乏力70例（58.33%）,失眠62例（51.67%）,視物模糊57例（47.50%）,夜尿頻數(shù)48例（40.00%）,關(guān)節(jié)刺痛46例（38.33%）,頭暈43例（35.83%）,胸部悶痛42例（35.00%）,心悸40例（33.33%）;舌象以舌暗紅、苔黃膩多見(jiàn);脈象出現(xiàn)頻率由高到低依次為:弦脈、沉脈、滑脈、數(shù)脈、細(xì)脈、澀脈、緩脈、微脈、弱脈。（2）聚類分析結(jié)果:所聚4類中醫(yī)證型分別為肝胃郁熱證、痰瘀熱結(jié)證、氣陰虧虛證、陰陽(yáng)兩虛證。各證型分布情況為:肝胃郁熱證35例（29.90%）,痰瘀熱結(jié)證55例（47.00%）,氣陰虧虛證17例（14.55%）,陰陽(yáng)兩虛證10例（8.55%）。另外,有3例患者的中醫(yī)辨證無(wú)法納入到上述四種證型之中。（3）不同證型組之間的臨床指標(biāo)比較:（1）從各組病程可以看出,肝胃郁熱證型組病程最短,與其它三型相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;陰陽(yáng)兩虛證型組病程長(zhǎng)于痰瘀熱結(jié)型和氣陰虧虛型,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。（2）在各中醫(yī)證型組中,痰瘀熱結(jié)證型組HOMA-IR值最高,與另外三證型組進(jìn)行比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01或P<0.05）;陰陽(yáng)兩虛證型組HOMA-IR值最低,與氣陰虧虛組相比有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）,但與肝胃郁熱組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。（3）在各中醫(yī)證型組中,痰瘀熱結(jié)證型組BMI、Hb A1c最高,和另外三證型組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。（4）TG、LDL水平按肝胃郁熱、陰陽(yáng)兩虛、氣陰虧虛、痰瘀熱結(jié)組依次升高,而CHOL水平則按陰陽(yáng)兩虛、肝胃郁熱、氣陰虧虛、痰瘀熱結(jié)組依次升高,其中,痰瘀熱結(jié)證型組TG、CHOL、LDL水平最高,明顯高于其它組別,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01或P<0.05）。（5）在肝胃郁熱證型組中,TG、LDL與HOMA-IR呈正相關(guān)（分別r=0.43,P<0.05;r=0.26,P<0.05）。在痰瘀熱結(jié)證型組中,BMI、Hb A1c、TG、CHOL、LDL與HOMA-IR均呈正相關(guān)（分別r=0.45,P<0.05;r=0.31,P<0.05;r=0.52,P<0.05;r=0.38,P<0.05;r=0.43,P<0.05）。在氣陰虧虛和陰陽(yáng)兩虛證型組中,BMI、Hb A1c、TG、CHOL、LDL與HOMA-IR均無(wú)明顯相關(guān)性,P>0.05。2.實(shí)驗(yàn)研究:（1）與生理鹽水輸注組相比,由于脂肪乳的輸注,脂肪乳組和脂肪乳+Gyp-XLIX組中的血漿游離脂肪酸（FFA）含量明顯地升高。（2）相比于生理鹽水輸注,脂肪乳輸注明顯降低了穩(wěn)態(tài)葡萄糖輸注率（SSGIR）（P<0.001）,表明了胰島素抵抗模型的建立,然而相對(duì)于脂肪乳組,脂肪乳+Gyp-XLIX組中的SSGIR明顯地升高（P<0.01）,說(shuō)明Gyp-XLIX能緩解脂肪乳引起的胰島素抵抗。（3）在肝臟和肌肉組織中,Gyp-XLIX能明顯減輕脂肪乳輸注引起的胰島素受體底物1（IRS1）絲氨酸307（Ser307）位點(diǎn)磷酸化表達(dá)的升高,以及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）P85位點(diǎn)和蛋白激酶B（Akt）473位點(diǎn)磷酸化表達(dá)的降低,表明Gyp-XLIX能夠減輕脂肪乳對(duì)胰島素信號(hào)通路的破壞作用。（4）在肝臟和肌肉組織中,Gyp-XLIX能明顯減弱脂肪乳輸注引起的κB抑制蛋白α（IκBα）磷酸化過(guò)表達(dá)及其泛素化降解和核因子κB（NF-κB）核移位,表明Gyp-XLIX降低了脂肪乳激發(fā)的IκBα/NF-κB信號(hào)通路的傳遞活性。（5）脂肪乳的輸注使得肝組織中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）的m RNA表達(dá)明顯地升高,也使得肌肉組織中TNF-α和白介素-1β（IL-1β）的m RNA表達(dá)顯著增加,另外,由于脂肪乳的輸注,肝組織中IL-1β和肌肉組織中IL-6的m RNA表達(dá)相對(duì)于生理鹽水組,也有增加的趨勢(shì),但是沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,然而Gyp-XLIX能夠明顯降低這些炎癥細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)的升高。結(jié)論:1.臨床研究:胰島素抵抗被公認(rèn)為是2型糖尿病的關(guān)鍵病理特征,是引起2型糖尿病發(fā)生和導(dǎo)致其進(jìn)展的重要因素,因此要盡早地針對(duì)胰島素抵抗予以干預(yù)和治療,以防遷延生變。根據(jù)我們的研究,2型糖尿病胰島素抵抗可以劃分為肝胃郁熱、痰瘀熱結(jié)、氣陰虧虛、陰陽(yáng)兩虛這四大證型,不同證型的癥狀表現(xiàn)不一,輕重緩急亦各有差異。其病因病機(jī)演變規(guī)律可以大致歸納為早期氣機(jī)不暢,郁熱不解,繼則釀痰生瘀,留戀不祛,久之戕害元?dú)?耗氣傷陰,終則陰損及陽(yáng),陰陽(yáng)俱虛。我們?cè)谂R床上既要“宏觀辨證”,根據(jù)患者的臨床癥狀,包括舌脈之表現(xiàn),按照傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)基本理論,先確立其相應(yīng)中醫(yī)證型,在此基礎(chǔ)之上,還要“微觀辨證”,基于患者的臨床指標(biāo),再結(jié)合其體質(zhì)、病程、發(fā)病年齡等各方面因素,綜合考慮治療方案的實(shí)施。2.實(shí)驗(yàn)研究:Gyp-XLIX能明顯改善脂肪乳靜脈輸注引起的胰島素抵抗和減輕脂肪乳對(duì)胰島素信號(hào)通路（IRS1/PI3K/Akt）的破壞,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),Gyp-XLIX的這一有益效應(yīng)可能與其能夠減輕脂肪乳引起的肝臟和肌肉組織的局部炎癥反應(yīng)有關(guān)。3.辨證論治是中醫(yī)學(xué)之精髓,通過(guò)臨床部分的研究,我們對(duì)2型糖尿病胰島素抵抗的中醫(yī)證型分類標(biāo)準(zhǔn)作了深入的探討,為其臨床辨證施治提供了科學(xué)依據(jù)。辨病論治是辨證論治的補(bǔ)充和完善,實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)告訴我們,對(duì)于2型糖尿病胰島素抵抗的治療,若能在傳統(tǒng)辨證論治、隨證遣藥基礎(chǔ)之上,適當(dāng)加用一些具有明確改善胰島素抵抗作用的藥物,做到辨證論治與辨病論治相結(jié)合,中西優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),可以在臨床上相得益彰,進(jìn)而大大增加臨床療效。通過(guò)實(shí)驗(yàn)部分的研究,我們初步證實(shí)了Gyp-XLIX作為胰島素抵抗改善藥物的可行性,為全面認(rèn)識(shí)中藥絞股藍(lán)的藥理作用,以及改善胰島素抵抗藥物的開發(fā)提供了新的見(jiàn)解和思路。
馬立新[7]（2020）在《氣陰兩虛Ⅱ型糖尿病患者中醫(yī)綜合護(hù)理干預(yù)研究》文中指出研究目的1.基于中醫(yī)外治理論構(gòu)建氣陰兩虛T2DM中醫(yī)綜合護(hù)理干預(yù)方案,為臨床治療氣陰兩虛T2DM運(yùn)用中醫(yī)綜合護(hù)理方案提供參考。2.通過(guò)臨床隨機(jī)對(duì)照研究,探討氣陰兩虛T2DM中醫(yī)綜合護(hù)理方案的干預(yù)效果,以期應(yīng)用于改善患者的臨床癥狀治療中。研究方法本研究運(yùn)用文獻(xiàn)分析法和專家會(huì)議討論,構(gòu)建氣陰兩虛T2DM中醫(yī)綜合護(hù)理干預(yù)方案,采用隨機(jī)對(duì)照研究方法,將84例氣陰兩虛T2DM患者隨機(jī)分成干預(yù)組和對(duì)照組,對(duì)照組接受常規(guī)護(hù)理包括飲食、運(yùn)動(dòng)、心理護(hù)理、自我監(jiān)測(cè)、用藥指導(dǎo)、糖尿病急癥處理以及糖尿病足的預(yù)防等,干預(yù)組在此基礎(chǔ)上給予4周的中醫(yī)綜合護(hù)理,在干預(yù)前、干預(yù)第1周后、干預(yù)第2周后、干預(yù)第3周后和干預(yù)第4周后采集研究對(duì)象的中醫(yī)證候積分表、糖尿病特異性量表、一般生活質(zhì)量量表數(shù)據(jù)及空腹血糖、餐后2h血糖,采用重復(fù)測(cè)量方差比較兩組患者的中醫(yī)證候積分、血糖和生活質(zhì)量變化情況。研究結(jié)果1.基于中醫(yī)外治理論構(gòu)建了一套針對(duì)氣陰兩虛T2DM患者的中醫(yī)綜合護(hù)理干預(yù)方案。2.兩組研究對(duì)象中醫(yī)證候療效比較:經(jīng)秩和檢驗(yàn)處理,干預(yù)組在倦怠乏力（Z=-2.693,P<0.01）、多食易饑（Z=-2.478,P=0.013）、自汗（Z=-2.204,P=0.027）、盜汗（Z=-2.852,P<0.01）以及口干口渴（Z=-2.506,P=0.012）方面總有效率高于對(duì)照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。3.兩組研究對(duì)象中醫(yī)證候積分比較:兩組研究對(duì)象中醫(yī)證候積分隨著干預(yù)的進(jìn)行,均呈下降趨勢(shì),重復(fù)測(cè)量方差分析結(jié)果顯示,兩組中醫(yī)證候積分的時(shí)間效應(yīng)（F=8.432）、分組效應(yīng)（F=8.705）和交互效應(yīng)（F=5.327）均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。4.兩組研究對(duì)象血糖比較:兩組研究對(duì)象空腹血糖和餐后2h血糖隨著干預(yù)的進(jìn)行,均呈下降趨勢(shì),重復(fù)測(cè)量方差分析結(jié)果顯示,兩組患者空腹血糖、餐后2h血糖的時(shí)間效應(yīng)（F=13.588、F=8.744）、分組效應(yīng)（F=3.921、F=8.082）和交互效應(yīng)（F=6.180、F=2.591）均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。5.兩組研究對(duì)象生活質(zhì)量比較:兩組研究對(duì)象糖尿病特異性生活質(zhì)量評(píng)分隨著干預(yù)的進(jìn)行,呈下降趨勢(shì),該量表得分與生活質(zhì)量呈負(fù)相關(guān),重復(fù)測(cè)量方差分析結(jié)果顯示,兩組患者糖尿病特異性生活質(zhì)量評(píng)分的時(shí)間效應(yīng)（F=28.978）、分組效應(yīng)（F=21.943）和交互效應(yīng)（F=2.341）均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。兩組研究對(duì)象一般生活質(zhì)量評(píng)分隨著干預(yù)的進(jìn)行,無(wú)明顯變化,重復(fù)測(cè)量方差分析結(jié)果顯示,兩組患者一般生活質(zhì)量評(píng)分的時(shí)間效應(yīng)（F=2.690）、分組效應(yīng)（F=0.004）和交互效應(yīng)（F=0.852）均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。研究結(jié)論1.基于中醫(yī)外治理論構(gòu)建了一套針對(duì)氣陰兩虛T2DM的中醫(yī)綜合護(hù)理干預(yù)方案;2.中醫(yī)綜合護(hù)理方案的應(yīng)用可改善氣陰兩虛T2DM患者的癥狀,降低患者血糖,提高患者生活質(zhì)量。
孫瑞茜[8]（2020）在《2型糖尿病清熱益氣治法的傳承及機(jī)制研究》文中研究表明2型糖尿?。═ype 2 diabetes mellitus,T2DM）是以胰島素抵抗和胰島素分泌不足為病理生理基礎(chǔ)的內(nèi)分泌代謝性疾病。由糖尿病引起的各種急、慢性并發(fā)癥嚴(yán)重影響患者的身心健康和生活質(zhì)量。中醫(yī)藥防治糖尿病及其并發(fā)癥有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院內(nèi)分泌重點(diǎn)學(xué)科在治療糖尿病時(shí)重視清熱及益氣治法,取得了良好的臨床療效。本文用數(shù)據(jù)挖掘、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的方法,對(duì)清熱益氣法的用藥規(guī)律及相關(guān)藥物的作用機(jī)制進(jìn)行了探索,為清熱益氣法治療2型糖尿病的臨床應(yīng)用和科學(xué)研究提供數(shù)據(jù)支撐和科學(xué)依據(jù)。目的1通過(guò)數(shù)據(jù)挖掘方法,梳理呂仁和教授及其學(xué)術(shù)傳承人趙進(jìn)喜教授治療2型糖尿病經(jīng)驗(yàn)的學(xué)術(shù)思想和傳承特點(diǎn),總結(jié)清熱益氣治法指導(dǎo)的臨床用藥規(guī)律,發(fā)現(xiàn)清熱益氣法的核心藥物配伍。2基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析,探索清熱益氣代表藥對(duì)黃連、人參治療2型糖尿病的靶點(diǎn)及機(jī)制,為進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究提供思路。3基于2型糖尿病的炎癥學(xué)說(shuō)及腸道菌群致病學(xué)說(shuō),通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),闡明黃連、人參“藥對(duì)”治療2型糖尿病的抗炎機(jī)制。方法1通過(guò)描述性統(tǒng)計(jì)、關(guān)聯(lián)規(guī)則、系統(tǒng)聚類、貝葉斯網(wǎng)絡(luò)及支持向量機(jī)等定量研究方法,總結(jié)呂仁和、趙進(jìn)喜兩位醫(yī)家治療糖尿病的學(xué)術(shù)思想和經(jīng)驗(yàn)傳承特點(diǎn),重點(diǎn)對(duì)清熱益氣治法方藥進(jìn)行研究,挖掘藥物配伍及證治規(guī)律。2通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析方法,使用TCMSP平臺(tái)篩選清熱益氣藥對(duì)黃連、人參的化學(xué)成分,并應(yīng)用STITCH、DrugBank、TTD、GAD和DisGeNET數(shù)據(jù)庫(kù),篩選藥物活性成分及T2DM相關(guān)靶點(diǎn)。采用Cytoscape軟件構(gòu)建靶點(diǎn)蛋白網(wǎng)絡(luò),通過(guò)David數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)靶點(diǎn)進(jìn)行生物學(xué)功能及通路富集分析。3通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),選用自發(fā)性2型糖尿病db/db小鼠隨機(jī)分為模型組、二甲雙胍組、黃連人參組,以同窩db/m小鼠作為空白對(duì)照組。通過(guò)LAL顯色法、蛋白印跡法等技術(shù),對(duì)小鼠血糖、體重、LPS、炎癥因子、NF-κB p65、p-NF-K B p65、TLR4等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。同時(shí)采用16srDNA技術(shù)分析小鼠腸道菌群。最終,從調(diào)節(jié)腸道菌群的角度,明確黃連、人參藥對(duì)抗炎、改善胰島素抵抗的機(jī)制。結(jié)果1①本研究共納入有效病例692例,包括呂仁和診療病例323例,趙進(jìn)喜診療病例369例。其中有男性354例,女性338例。在納入的病案中,出現(xiàn)最多的證候?yàn)閮?nèi)熱證、陰虛證、氣虛證和血瘀證。排名前10位的為口干、乏力、眠差、口苦、麻木、大便干、頭暈、視物模糊、性急易怒,口干、乏力是糖尿病患者中出現(xiàn)次數(shù)最高的癥狀,體現(xiàn)了消渴病“熱傷氣陰”的病機(jī)特點(diǎn)。2糖尿病患者中,以口苦（1.657）,性急易怒（1.599）,耳鳴（1.185）,煩熱（1.061）,苔干（0.972）,胸脅滿悶（0.761）,舌邊濁沫（0.735）為特點(diǎn)的郁熱證最為多見(jiàn)。SMO分析發(fā)現(xiàn)舌下絡(luò)瘀在結(jié)熱證中具有較高的權(quán)重,善太息在氣虛證具有較高權(quán)重,健忘、舌質(zhì)紫暗在濕熱證具有較高權(quán)重,胃痛、瘀斑舌、口臭在郁熱證具有較高的權(quán)重,可能為相關(guān)癥狀的辨證和治療提供了一定的思路。在兩位醫(yī)家的醫(yī)案中,均應(yīng)用了較多的寒性藥物,其次為溫性及平性藥。②根據(jù)關(guān)聯(lián)規(guī)則及聚類分析,在呂仁和醫(yī)案及趙進(jìn)喜醫(yī)案中,發(fā)現(xiàn)香櫞、佛手,烏藥、香附,桃仁、紅花,葛根、丹參,赤芍,白芍等治療糖尿病常用藥對(duì),并在關(guān)聯(lián)規(guī)則分析中,發(fā)現(xiàn)唯一具有關(guān)聯(lián)關(guān)系清熱益氣藥對(duì)黃連、入?yún)ⅲㄖ眯哦?.912）。③通過(guò)樸素貝葉斯分析,可以得到不同藥物在不同證候中應(yīng)用概率,如半夏（0.775）、黃連（0.704）、葛根（0.769）、茯苓（0.577）、知母（0.352）、瓜蔞（0.31）多應(yīng)用在痰熱證中;生地黃（0.462）、玄參（0.385）、北沙參（0.359）、天花粉（0.179）、熟大黃（0.179）、當(dāng)歸（0.179）、丹皮（0.128）多應(yīng)用在結(jié)熱證中;黃芩（0.877）、白芍（0.79）、赤芍（0.525）、柴胡（0.796）、陳皮（0.673）多應(yīng)用在郁熱證中;白術(shù)（0.447）、蒼術(shù)（0.319）、黃柏（0.213）、川牛膝（0.128）、牛膝（0.149）多應(yīng)用在濕熱證中。④通過(guò)貝葉斯及SMO分析,又進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)了癥-藥、證-藥、證-癥之間的內(nèi)在關(guān)聯(lián)。得到證-癥-藥的聯(lián)系。如呂仁和醫(yī)案中陰虛-手足心熱（2.149）-梔子（0.571）,陰虛-盜汗（1.77）-丹皮（0.688）,郁熱證-煩熱（1.061）丹皮（0.667）,趙進(jìn)喜醫(yī)案中郁熱證-口苦（1.657）-黃芩（0.887）,郁熱-耳鳴（1.185）-黃芩（0.886）,陰虛-盜汗（1.77）-生地黃（0.522）,陰虛-手足心熱（2.149）-地骨皮（0.846）等。2通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析,將數(shù)據(jù)挖掘分析得到的清熱益氣藥對(duì)黃連、人參的活性成分和靶點(diǎn)進(jìn)行篩選,得到人參靶點(diǎn)144個(gè),黃連靶點(diǎn)246個(gè),2型糖尿病相關(guān)靶點(diǎn)350個(gè)。匹配得到42個(gè)黃連、人參“藥對(duì)”治療T2DM潛在靶點(diǎn)。黃連、人參“藥對(duì)”的主要活性成分中,槲皮素、小檗堿、山奈酚、花生四烯酸、阿魏酸、豆甾醇等擁有較多的預(yù)測(cè)靶點(diǎn),這些化合物可能是黃連、人參“藥對(duì)”中產(chǎn)生藥理作用的重要化合物。黃連、人參藥對(duì)治療2型糖尿病的核心靶點(diǎn)和藥物代謝、胰島素抵抗、炎癥反應(yīng)相關(guān),并且參與了AMPK信號(hào)通路、NF-κB信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路以及胰高血糖素信號(hào)通路,其中核心靶點(diǎn)TNF、IL1B是NF-κB信號(hào)通路和TNF信號(hào)通路的共同靶點(diǎn)。由此我們推測(cè),黃連、人參藥對(duì)是通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群,糾正因菌群紊亂導(dǎo)致的LPS/NF-κB/炎癥通路激活起到抗炎作用。3①通過(guò)對(duì)小鼠的一般狀況觀察發(fā)現(xiàn),非糖尿病db/m小鼠毛色光亮,行動(dòng)敏捷,體型瘦長(zhǎng),活動(dòng)敏捷,對(duì)外界的刺激反應(yīng)大。而2型糖尿病db/db小鼠形體肥胖,動(dòng)作遲緩,活動(dòng)少,攝食及飲水增多,對(duì)外界刺激反應(yīng)明顯遲鈍。在灌胃的后期,模型組又出現(xiàn)豎毛,體溫偏低的表現(xiàn),且模型組個(gè)別小鼠在最后一周出現(xiàn)了體重驟降。而其他組小鼠體重基本平穩(wěn)的上升。②經(jīng)過(guò)8周黃連人參中藥的灌胃干預(yù)后,小鼠血糖出現(xiàn)了顯著的降低。黃連、人參藥對(duì)可以顯著的降低2型糖尿病小鼠胰腺IL1β的表達(dá),并抑制糖尿病小鼠肝臟NF-κ B p65的磷酸化。③在本次研究中發(fā)現(xiàn),空白對(duì)照組和模型組小鼠腸道微生物共有OTU數(shù)目為543個(gè),占兩組總數(shù)的71%,說(shuō)明糖尿病小鼠的腸道菌群組成和非糖尿病小鼠具有較大的差異,非糖尿病小鼠的腸道微生物豐富度及多樣性均顯著的小于糖尿病小鼠,這與部分既往實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不一致的,而中藥干預(yù)同樣顯著的降低了糖尿病小鼠的腸道微生物豐富度及多樣性。④黃連人參組的Verrucomicrobiae（科）Bacteroides（屬）、Akkermansia（屬）、Lachnoclostridium（屬）、Akkermansiamuciniphila（種）相對(duì)豐度顯著高于模型組。而這些菌群的相對(duì)豐度和血糖值呈顯著負(fù)相關(guān),可能是黃連、人參藥對(duì)調(diào)節(jié)的重要菌群。其中Akkermansiamuciniphila在減少炎癥反應(yīng)方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用,因此可能是黃連、人參藥對(duì)調(diào)節(jié)腸道菌群以降低血糖的關(guān)鍵菌種。結(jié)論1、糖尿病的清熱益氣法是基于對(duì)糖尿病“內(nèi)熱傷陰耗氣”病機(jī)的認(rèn)識(shí)發(fā)展而來(lái),黃連、人參不僅分別是清熱藥和益氣藥的代表藥物,也是治療2型糖尿病的常用藥對(duì),在臨床病案挖掘中發(fā)現(xiàn)其存在明顯的關(guān)聯(lián)關(guān)系,因此可以作為清熱益氣治法的代表藥對(duì)進(jìn)行研究。2.通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析發(fā)現(xiàn),黃連、人參“藥對(duì)”的主要活性成分中,槲皮素、小檗堿、山奈酚、花生四烯酸、阿魏酸、豆甾醇等擁有較多的預(yù)測(cè)靶點(diǎn),可能是黃連、人參“藥對(duì)”中產(chǎn)生藥理作用的重要化合物。黃連、人參藥對(duì)治療2型糖尿病的核心靶點(diǎn)和藥物代謝、胰島素抵抗、炎癥反應(yīng)相關(guān),并且參與了 AMPK信號(hào)通路、NF-κB信號(hào)通路以及胰高血糖素信號(hào)通路。其中炎癥因子相關(guān)靶點(diǎn)TNF、IL1B等富集在NF-κB信號(hào)通路上。3.通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),黃連、人參藥對(duì)可以顯著降低2型糖尿病db/db小鼠血糖,降低小鼠血清中LPS的含量,并抑制胰腺炎癥因子IL1β的表達(dá)及肝臟NF-κB p65的磷酸化。其治療2型糖尿病的抗炎機(jī)制可能與調(diào)節(jié)腸道菌群紊亂、抑制LPS增多導(dǎo)致的NF-κB炎癥因子通路激活有關(guān)。黃連、人參藥對(duì)可以增加2型糖尿病小鼠腸道Verrucomicrobiae（科）、Bacteroides（屬）、Akkermansia（屬）、Lachnoclostridium（屬）、Akkermansia.muciniphila（種）的相對(duì)豐度,這些菌群均和糖尿病小鼠血糖值呈顯著負(fù)相關(guān),可能是黃連、人參藥對(duì)調(diào)節(jié)的重要菌群。其中Akkermansiamuciniphila在減少炎癥反應(yīng)方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用,因此可能是黃連、人參藥對(duì)調(diào)節(jié)腸道菌群以降低血糖的關(guān)鍵菌種。
溫喬[9]（2020）在《基于數(shù)據(jù)挖掘的婁錫恩教授治療2型糖尿病中醫(yī)辨治規(guī)律研究》文中研究指明目的:通過(guò)對(duì)婁錫恩教授治療2型糖尿病的病例進(jìn)行收集、信息整理與數(shù)據(jù)分析,結(jié)合導(dǎo)師的日常教學(xué)內(nèi)容及自己的心得體會(huì),從理論認(rèn)識(shí)、實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)、思辨特點(diǎn)、認(rèn)知方式等方面,探討婁教授治療2型糖尿病的用藥規(guī)律、診療思路及學(xué)術(shù)思想,為臨床中2型糖尿病的診療提供參考。方法:選取婁錫恩教授在2016年1月至2019年1月期間,于北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科門診接診的確診為2型糖尿病,并符合本研究納排標(biāo)準(zhǔn)的病例。將病例所需的基本信息從北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院“醫(yī)院管理系統(tǒng)”調(diào)出后,進(jìn)行病例預(yù)處理,使病例經(jīng)過(guò)篩選、規(guī)范,之后利用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)（V2.5）的“臨床采集系統(tǒng)”、“平臺(tái)管理系統(tǒng)”,建立“婁錫恩教授治療2型糖尿病數(shù)據(jù)庫(kù)”,最后使用該系統(tǒng)的“報(bào)表統(tǒng)計(jì)系統(tǒng)”、“數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)”,基于關(guān)聯(lián)規(guī)則、改進(jìn)的互信息法、復(fù)雜系統(tǒng)熵聚類、無(wú)監(jiān)督的熵層次聚類等高級(jí)數(shù)據(jù)挖掘方法規(guī)則,對(duì)所錄入病例進(jìn)行“基本疾病統(tǒng)計(jì)”、“證候統(tǒng)計(jì)”、“藥物頻次統(tǒng)計(jì)”、藥性“四氣”、“五味”、“歸經(jīng)”等的頻次統(tǒng)計(jì)以及進(jìn)行“核心藥物分析”、“新方分析”等的組方規(guī)律統(tǒng)計(jì)。結(jié)果:本研究共納入病例共203個(gè),涉及患者人數(shù)172人,總就診次數(shù)為672次;男性83人,女性89人;患者總體年齡分布在23-89歲。經(jīng)統(tǒng)計(jì),病例涉及證候37種,藥味261個(gè)。藥物“四氣”以溫性、寒性、平蝕藥物為主,藥物“五味”以甘味、苦味、辛味、酸味為主,藥物“歸經(jīng)”中,依次以歸肝經(jīng)、脾經(jīng)、腎經(jīng)、肺經(jīng)、胃經(jīng)、心經(jīng)的藥物為主;運(yùn)用關(guān)聯(lián)規(guī)則,得出常用藥物組合97組,常用藥物之間的56組關(guān)聯(lián)規(guī)則,并得到核心藥物組合4組,其中最核心組合為“懷牛膝,炒白術(shù),酒萸肉,川芎,山藥,茯苓”;運(yùn)用熵聚類規(guī)則,得到潛在核心藥物組合共34組,潛在新方17個(gè)。結(jié)論:①婁教授治療2型糖尿病患者時(shí)的辨證特色為:辨證多樣,不拘綱目;正邪皆辨,標(biāo)本全面;細(xì)化病位,臟腑同辨;②婁教授的用藥特色為:祛邪扶正,逆者正治;用藥和緩,安全有效;寒熱同調(diào),偏性適中;重用三味,針對(duì)病機(jī);③婁教授遣方時(shí)善用藥對(duì),具體為:川芎-丹參、炒白術(shù)-茯苓、黃芪-山藥、懷牛膝-川牛膝;④婁教授的組方特色可以概括為十二字,即“大法用古,小調(diào)應(yīng)機(jī),微觀辨證”;⑤婁教授治療2型糖尿病的潛在新方最終選出8首,分別為:“丹參、黃芪、炒梔子、山藥”、“防風(fēng)、附子、桂枝、菟絲子、淫羊藿”、“續(xù)斷、澤蘭、茜草、北沙參”、“鉤藤、菊花、夏枯草、石決明”、“淡竹葉、酒萸肉、懷牛膝、金銀花、牡丹皮”、“浮小麥、五味子、烏梅、麻黃根”、“冬瓜皮、茯苓皮、赤小豆、淫羊藿、車前子、巴戟天”、“冬瓜皮、茯苓皮、菟絲子、淫羊藿、巴戟天、肉桂”。
賈麗娜[10]（2020）在《糖尿病類藥—藥多組分晶體設(shè)計(jì)合成及構(gòu)—效關(guān)系研究》文中提出多組分晶體具有較強(qiáng)的設(shè)計(jì)性,能夠有效調(diào)控固體藥物理化性質(zhì),在藥物科學(xué)領(lǐng)域具有重要學(xué)術(shù)意義和應(yīng)用價(jià)值。然而傳統(tǒng)多組分晶體中配體的引入會(huì)導(dǎo)致處方中藥物占比降低,而晶體中分子組裝規(guī)律及構(gòu)-效關(guān)系研究的不充分阻礙了多組分晶體的設(shè)計(jì)與合成。因此本文以改善理化性質(zhì)為導(dǎo)向,結(jié)合多組分晶體的優(yōu)勢(shì)及聯(lián)合用藥理念,以口服降糖藥為研究對(duì)象,制備糖尿病類藥-藥多組分晶體,并從分子層面探究晶體組裝規(guī)律及構(gòu)-效關(guān)系。首先,針對(duì)晶體中分子組裝規(guī)律認(rèn)知不足而影響藥物晶型開發(fā)的問(wèn)題,本文對(duì)僅存在一種晶型的格列喹酮（GQD）進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)分子中磺酰脲基團(tuán)形成S（6）結(jié)構(gòu)是導(dǎo)致GQD晶型唯一的關(guān)鍵原因。繼而采用晶體工程策略進(jìn)行改造,成功獲得八種多組分晶體,使其溶解性能和粉體性質(zhì)同時(shí)得到改善。其次,針對(duì)構(gòu)-效關(guān)系研究不足而阻礙多組分晶體合理化設(shè)計(jì)、合成的問(wèn)題,本文結(jié)合晶體組裝規(guī)律和聯(lián)合用藥理念,將結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單且存在性質(zhì)缺陷的甲苯磺丁脲與二甲雙胍合成藥-藥多組分晶體。構(gòu)-效關(guān)系研究發(fā)現(xiàn),其理化性質(zhì)的改善歸因于晶格中具有屏蔽作用的“三明治”式堆積方式以及分子中氫鍵位點(diǎn)的空余量。針對(duì)磺酰脲類藥物低溶解性、雙胍類高引濕性問(wèn)題,本文結(jié)合前期的構(gòu)-效關(guān)系及臨床聯(lián)合用藥方案,合成格列喹酮-二甲雙胍、格列本脲-二甲雙胍藥-藥多組分晶體,實(shí)現(xiàn)了對(duì)溶解性和引濕性的雙重調(diào)控,進(jìn)一步提高了大鼠體內(nèi)的生物利用度,使格列喹酮的AUC0-t提高了2.2倍,格列本脲提高3.0倍。最后,針對(duì)同樣存在缺陷的噻唑烷二酮類降糖藥,本文基于藥-藥多組分晶體的有益效果,對(duì)吡格列酮提出改進(jìn),實(shí)現(xiàn)了吡格列酮-二甲雙胍的制備及構(gòu)-效關(guān)系的建立,使其在p H 2.0、4.6緩沖液中溶解度分別增加2.0和28.7倍,吸濕量從80%降至21%,相對(duì)生物利用度提高2.4倍。構(gòu)-效關(guān)系研究發(fā)現(xiàn),除具有屏蔽作用的晶體堆積方式及氫鍵位點(diǎn)空余量外,氫鍵強(qiáng)弱將對(duì)性能產(chǎn)生影響。簡(jiǎn)言之,針對(duì)口服降糖藥的高引濕性、低溶解性以及藥物多組分晶體構(gòu)-效關(guān)系研究不充分的問(wèn)題,本文結(jié)合晶體工程理念與聯(lián)合用藥方案,通過(guò)藥物-藥物多組分晶體手段改善了降糖藥理化性能,提高了體內(nèi)生物利用度,并建立了晶體結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)間的構(gòu)-效關(guān)系。
二、TGA、TMA在2型糖尿病中出現(xiàn)頻率的觀察（論文開題報(bào)告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡(jiǎn)單簡(jiǎn)介論文所研究問(wèn)題的基本概念和背景，再而簡(jiǎn)單明了地指出論文所要研究解決的具體問(wèn)題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點(diǎn)或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡(jiǎn)64位RISC處理器存儲(chǔ)管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計(jì)過(guò)程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個(gè)分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲(chǔ)器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁(yè)面大小,采用多級(jí)分層頁(yè)表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級(jí)頁(yè)表轉(zhuǎn)換過(guò)程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲(chǔ)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的一個(gè)重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對(duì)象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對(duì)象從而得到有關(guān)信息。
實(shí)驗(yàn)法：通過(guò)主支變革、控制研究對(duì)象來(lái)發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過(guò)調(diào)查文獻(xiàn)來(lái)獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實(shí)證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實(shí)踐的需要提出設(shè)計(jì)。
定性分析法：對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個(gè)方法需要計(jì)算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過(guò)具體的數(shù)字，使人們對(duì)研究對(duì)象的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運(yùn)用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對(duì)某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會(huì)科學(xué)用來(lái)分析社會(huì)現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個(gè)方面的影響。
模擬法：通過(guò)創(chuàng)設(shè)一個(gè)與原型相似的模型來(lái)間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、TGA、TMA在2型糖尿病中出現(xiàn)頻率的觀察（論文提綱范文）
（1）2型糖尿病中醫(yī)證候要素與甲功指標(biāo)相關(guān)分析及血瘀證預(yù)測(cè)模型構(gòu)建（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符號(hào)說(shuō)明 |
| 第一部分 文獻(xiàn)綜述 |
| 綜述一: 2型糖尿病與甲狀腺疾病相關(guān)性的西醫(yī)研究進(jìn)展 |
| 1 T2DM的流行病學(xué)特點(diǎn) |
| 2 T2DM的發(fā)病機(jī)制 |
| 3 T2DM合并甲狀腺疾病的流行病學(xué)特點(diǎn) |
| 4 T2DM合并甲狀腺疾病的機(jī)制 |
| 5 甲狀腺疾病對(duì)T2DM及其并發(fā)癥的影響 |
| 6 總結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述二: 2型糖尿病與甲狀腺疾病中醫(yī)證候?qū)W研究進(jìn)展 |
| 1 T2DM的中醫(yī)病名 |
| 2 T2DM的病因病機(jī) |
| 3 T2DM的辨證與分型 |
| 4 T2DM的中醫(yī)證型與理化指標(biāo)的關(guān)系 |
| 5 中醫(yī)對(duì)甲狀腺疾病的認(rèn)識(shí) |
| 6 T2DM與甲狀腺疾病的聯(lián)系 |
| 7 總結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 前言 |
| 第二部分 臨床研究 |
| 研究一 2型糖尿病患者證候要素的發(fā)生與其基礎(chǔ)情況及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的關(guān)系 |
| 1 研究資料 |
| 2 研究方法 |
| 3 研究結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 研究二 2型糖尿病患者的糖脂代謝指標(biāo)和甲狀腺功能之間的相關(guān)性研究 |
| 1 研究資料 |
| 2 研究方法 |
| 3 研究結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 研究三 基于神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析技術(shù)的2型糖尿病血瘀證預(yù)測(cè)模型構(gòu)建的研究 |
| 1 研究資料 |
| 2 研究方法 |
| 3 研究結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 結(jié)語(yǔ) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 附錄 |
| 1 2型糖尿病病例報(bào)告表 |
| 2 2型糖尿病中醫(yī)臨床證候積分表 |
| 個(gè)人簡(jiǎn)介 |
（2）2型糖尿病患者電流感覺(jué)閾值測(cè)量結(jié)果（CPT）與舌象的相關(guān)性研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文縮略語(yǔ) |
| 引言 |
| 文獻(xiàn)綜述 |
| 1 中醫(yī)舌診的理論基礎(chǔ) |
| 2 2型糖尿病及糖尿病周圍神經(jīng)病變 |
| 3 2型糖尿病及糖尿病周圍神經(jīng)病變與舌象 |
| 4 現(xiàn)代診斷手段在糖尿病周圍神經(jīng)病變?cè)\斷中的應(yīng)用 |
| 5 電流感覺(jué)閾值測(cè)量在糖尿病周圍神經(jīng)病變?cè)\斷中的意義 |
| 6 問(wèn)題與展望 |
| 臨床研究 |
| 1 研究?jī)?nèi)容 |
| 2 技術(shù)路線 |
| 3 研究方法 |
| 4 研究結(jié)果與分析 |
| 討論 |
| 1 糖尿病周圍神經(jīng)病變?cè)缙谠\斷的重要性 |
| 2 電流感覺(jué)閾值測(cè)量診斷意義分析 |
| 3 研究結(jié)果討論 |
| 結(jié)論 |
| 本文創(chuàng)新點(diǎn) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 在學(xué)期間主要研究成果 |
| 個(gè)人簡(jiǎn)介 |
（3）脂肪細(xì)胞來(lái)源外泌體在糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化疾病中的作用及機(jī)制研究（論文提綱范文）
| 論文Ⅰ 脂肪細(xì)胞來(lái)源外泌體介導(dǎo)的內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在糖尿病血管再狹窄中的作用及機(jī)制研究 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符號(hào)說(shuō)明 |
| 前言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 創(chuàng)新點(diǎn) |
| 限制性 |
| 結(jié)論 |
| 附圖 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 論文Ⅱ 脂肪細(xì)胞來(lái)源外泌體在血管新生中的作用及機(jī)制研究 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符號(hào)說(shuō)明 |
| 前言 |
| 材料與方法 |
| 結(jié)果 |
| 討論 |
| 創(chuàng)新點(diǎn) |
| 限制性 |
| 結(jié)論 |
| 附圖 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文 |
| SCI論文Ⅰ |
| SCI論文Ⅱ |
| SCI論文Ⅲ |
| 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表 |
（4）“二陽(yáng)結(jié)謂之消”理論下的2型糖尿病合并功能性便秘證素學(xué)研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符號(hào)說(shuō)明 |
| 文獻(xiàn)綜述 當(dāng)代2型糖尿病中醫(yī)證素學(xué)研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第一章 前言 |
| 第二章 研究對(duì)象與方法 |
| 2.1 研究對(duì)象 |
| 2.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 2.3 資料收集 |
| 2.4 數(shù)據(jù)處理 |
| 第三章 研究結(jié)果 |
| 3.1 研究對(duì)象的基本情況比較 |
| 3.2 研究對(duì)象的中醫(yī)證素分析 |
| 3.3 研究對(duì)象的排便情況分析 |
| 3.4 研究對(duì)象的癥狀及生存質(zhì)量分析 |
| 3.5 常見(jiàn)中醫(yī)證素與空腹血糖、糖化血紅蛋白的關(guān)聯(lián)分析 |
| 3.6 常見(jiàn)中醫(yī)證素與尿糖的相關(guān)性分析 |
| 3.7 常見(jiàn)中醫(yī)證素與脂代謝的相關(guān)性分析 |
| 第四章 討論 |
| 4.1 研究對(duì)象的基本情況分析 |
| 4.2 研究對(duì)象的證素分布情況分析 |
| 4.3 研究對(duì)象的排便情況分析 |
| 4.4 研究對(duì)象理化指標(biāo)與證素的相關(guān)性分析 |
| 4.5 本研究存在的缺陷與不足 |
| 第五章 結(jié)語(yǔ) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 附錄 |
| 在學(xué)期間主要研究成果 |
（5）不同糖耐量患者血清nesfatin-1水平的差異（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 一、引言(前言) |
| 二、材料與方法 |
| 三、結(jié)果 |
| 四、討論 |
| 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 附錄 A 英中文縮略語(yǔ)對(duì)照表 |
| 附錄 B 已發(fā)表文章 |
| 附錄 C 綜述 Nesfatin-1 的研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
（6）2型糖尿病胰島素抵抗中醫(yī)證型的聚類分析以及絞股藍(lán)皂苷XLIX改善胰島素抵抗的初步研究（論文提綱范文）
| 提要 |
| abstract |
| 臨床研究:2 型糖尿病胰島素抵抗中醫(yī)證型的聚類分析 |
| 引言 |
| 臨床研究 |
| 1 研究?jī)?nèi)容 |
| 1.1 研究對(duì)象 |
| 1.2 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) |
| 1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) |
| 1.5 中醫(yī)證型診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 2 研究方法 |
| 2.1 資料收集 |
| 2.2 聚類分析 |
| 2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 |
| 3 研究結(jié)果 |
| 3.1 一般資料 |
| 3.2 中醫(yī)四診信息統(tǒng)計(jì) |
| 3.3 四診信息聚類分析 |
| 3.4 2型糖尿病胰島素抵抗中醫(yī)證型的分布情況 |
| 3.5 2型糖尿病胰島素抵抗各證型組患者年齡和病程的比較 |
| 3.6 2型糖尿病胰島素抵抗各證型組FPG、FINS、HOMA-IR的比較 |
| 3.7 2型糖尿病胰島素抵抗各證型組BMI、Hb A1c的比較 |
| 3.8 2型糖尿病胰島素抵抗各證型組TG、CHOL、LDL的比較 |
| 3.9 2型糖尿病胰島素抵抗各證型組的BMI、Hb A1c、TG、CHOL、LDL與HOMA-IR的相關(guān)性 |
| 討論 |
| 1 中醫(yī)學(xué)對(duì)2 型糖尿病胰島素抵抗之認(rèn)識(shí) |
| 1.1 病因病機(jī) |
| 1.2 中醫(yī)治療 |
| 1.3 小結(jié) |
| 2 西醫(yī)學(xué)對(duì)2 型糖尿病胰島素抵抗的認(rèn)識(shí) |
| 2.1 胰島素抵抗的病因及發(fā)病機(jī)制 |
| 2.2 胰島素抵抗的治療 |
| 3 2型糖尿病胰島素抵抗證型之確立 |
| 4 2型糖尿病胰島素抵抗證型的相關(guān)分析 |
| 4.1 不同證型所占比之分析 |
| 4.2 不同證型發(fā)病年齡和病程之分析 |
| 4.3 不同證型胰島素抵抗程度輕重之分析 |
| 4.4 不同證型間相關(guān)指標(biāo)變化之分析 |
| 5 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 實(shí)驗(yàn)研究:絞股藍(lán)皂苷XLIX改善脂肪乳誘發(fā)的胰島素抵抗的機(jī)制研究 |
| 引言 |
| 實(shí)驗(yàn)研究 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 實(shí)驗(yàn)器材 |
| 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 |
| 1.3 實(shí)驗(yàn)液體的配制 |
| 1.4 動(dòng)物準(zhǔn)備 |
| 1.5 動(dòng)物造模 |
| 1.6 靜脈用藥方法 |
| 1.7 血漿游離脂肪酸含量測(cè)定 |
| 1.8 實(shí)時(shí)熒光定量PCR |
| 1.9 蛋白免疫印跡 |
| 1.10 統(tǒng)計(jì)分析 |
| 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
| 2.1 動(dòng)物的一般特征 |
| 2.2 Gyp-XLIX緩解了脂肪乳引起的胰島素抵抗 |
| 2.3 Gyp-XLIX減輕了脂肪乳輸注所造成的胰島素信號(hào)通路的破壞 |
| 2.4 Gyp-XLIX抑制了脂肪乳誘導(dǎo)的NFκB活化 |
| 2.5 Gyp-XLIX調(diào)控脂肪乳引起的炎癥基因表達(dá) |
| 2.6 mTOR、JNK、ERK蛋白沒(méi)有參與脂肪乳引起的胰島素抵抗 |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 結(jié)語(yǔ) |
| 綜述 中醫(yī)藥治療 2 型糖尿病胰島素抵抗的研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 致謝 |
| 查新報(bào)告 |
| 發(fā)表論文 |
（7）氣陰兩虛Ⅱ型糖尿病患者中醫(yī)綜合護(hù)理干預(yù)研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 縮略詞表 |
| 1 引言 |
| 第一部分 :氣陰兩虛T2DM患者中醫(yī)綜合護(hù)理干預(yù)方案設(shè)計(jì) |
| 2 T2DM患者氣陰兩虛產(chǎn)生的原因與病機(jī) |
| 2.1 T2DM患者氣陰兩虛產(chǎn)生的原因 |
| 2.1.1 稟賦不足,臟腑虛弱 |
| 2.1.2 飲食不節(jié),化熱傷津 |
| 2.1.3 情志失調(diào),氣郁化火 |
| 2.1.4 勞欲過(guò)度,房勞傷腎 |
| 2.2 氣陰兩虛T2DM的病機(jī) |
| 2.2.1 氣虛 |
| 2.2.2 陰虛 |
| 2.2.3 氣陰兩虛 |
| 2.2.4 久虛害病 |
| 3 T2DM中醫(yī)治療進(jìn)展研究 |
| 3.1 中醫(yī)療法在T2DM患者中應(yīng)用進(jìn)展研究 |
| 3.1.1 養(yǎng)身功法 |
| 3.1.2 針灸療法 |
| 3.1.3 耳穴貼壓 |
| 3.1.4 穴位貼敷 |
| 3.1.5 中醫(yī)食療 |
| 3.1.6 情志療法 |
| 3.2 氣陰兩虛T2DM中醫(yī)治療進(jìn)展研究 |
| 3.2.1 中藥在氣陰兩虛T2DM患者中應(yīng)用進(jìn)展研究 |
| 3.2.2 中醫(yī)療法在氣陰兩虛T2DM患者中應(yīng)用進(jìn)展研究 |
| 4 文獻(xiàn)回顧 |
| 4.1 文獻(xiàn)回顧目的 |
| 4.2 納入標(biāo)準(zhǔn) |
| 4.3 文獻(xiàn)檢索 |
| 4.3.1 文獻(xiàn)來(lái)源 |
| 4.3.2 應(yīng)用檢索 |
| 4.4 結(jié)果 |
| 5 構(gòu)建氣陰兩虛T2DM中醫(yī)綜合護(hù)理干預(yù)方案 |
| 5.1 制定氣陰兩虛T2DM的干預(yù)方案初稿 |
| 5.2 專家小組測(cè)評(píng) |
| 5.2.1 構(gòu)建專家小組 |
| 5.2.2 專家小組會(huì)議 |
| 5.2.3 專家討論結(jié)果 |
| 5.3 編制終稿 |
| 5.4 干預(yù)工具 |
| 6 確定結(jié)局指標(biāo) |
| 6.1 直接指標(biāo) |
| 6.2 間接指標(biāo) |
| 7 研究設(shè)計(jì) |
| 第二部分 :驗(yàn)證中醫(yī)綜合護(hù)理方案在氣陰兩虛T2DM患者中的應(yīng)用效果 |
| 8 研究?jī)?nèi)容 |
| 8.1 研究對(duì)象 |
| 8.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 8.2.1 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 8.2.2 中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 8.2.3 氣陰兩虛證候診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 8.3 納入、排除標(biāo)準(zhǔn) |
| 8.3.1 納入標(biāo)準(zhǔn) |
| 8.3.2 排除標(biāo)準(zhǔn) |
| 8.4 樣本量估計(jì)及分組 |
| 8.5 研究工具 |
| 8.5.1 一般資料及臨床資料調(diào)查表 |
| 8.5.2 氣陰兩虛T2DM中醫(yī)證候判定標(biāo)準(zhǔn) |
| 8.5.3 氣陰兩虛T2DM中醫(yī)證候積分評(píng)價(jià) |
| 8.5.4 糖尿病生活質(zhì)量量表 |
| 8.5.5 評(píng)價(jià)指標(biāo)觀察頻率 |
| 8.6 倫理審查 |
| 8.7 干預(yù)方法 |
| 8.7.1 對(duì)照組 |
| 8.7.2 干預(yù)組 |
| 9 資料收集 |
| 9.1 收集原則 |
| 9.2 收集方法 |
| 9.3 收集步驟 |
| 10 質(zhì)量控制 |
| 10.1 前期設(shè)計(jì)階段 |
| 10.2 實(shí)施干預(yù)過(guò)程 |
| 10.3 資料搜集過(guò)程 |
| 11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 |
| 11.1 統(tǒng)計(jì)方案構(gòu)建 |
| 11.2 具體的統(tǒng)計(jì)方法 |
| 12 結(jié)果 |
| 12.1 兩組研究對(duì)象的一般資料 |
| 12.2 兩組研究對(duì)象的臨床醫(yī)學(xué)資料 |
| 12.3 兩組研究對(duì)象的干預(yù)前后評(píng)價(jià)指標(biāo)比較 |
| 12.4 兩組研究對(duì)象干預(yù)后證候療效的比較 |
| 12.5 兩組研究對(duì)象干預(yù)后中醫(yī)證候積分的比較 |
| 12.5.1 兩組研究對(duì)象干預(yù)后中醫(yī)證候積分的重復(fù)測(cè)量方差分析 |
| 12.5.2 兩組研究對(duì)象干預(yù)后中醫(yī)證候積分的簡(jiǎn)單效應(yīng)分析 |
| 12.6 兩組研究對(duì)象干預(yù)后血糖的比較 |
| 12.6.1 兩組研究對(duì)象干預(yù)后血糖的重復(fù)測(cè)量方差分析 |
| 12.6.2 兩組研究對(duì)象干預(yù)后血糖的簡(jiǎn)單效應(yīng)分析 |
| 12.7 兩組研究對(duì)象干預(yù)后生活質(zhì)量評(píng)分的比較 |
| 12.7.1 兩組研究對(duì)象干預(yù)后生活質(zhì)量評(píng)分的重復(fù)測(cè)量方差分析 |
| 12.7.2 兩組研究對(duì)象干預(yù)后生活質(zhì)量評(píng)分的簡(jiǎn)單效應(yīng)分析 |
| 13 討論 |
| 13.1 中醫(yī)綜合護(hù)理對(duì)氣陰兩虛T2DM患者證候的影響分析 |
| 13.2 中醫(yī)綜合護(hù)理對(duì)氣陰兩虛T2DM患者血糖的影響分析 |
| 13.3 中醫(yī)綜合護(hù)理對(duì)氣陰兩虛T2DM患者生活質(zhì)量的影響分析 |
| 14 研究的結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)、局限及啟示 |
| 14.1 研究的結(jié)論 |
| 14.2 研究的創(chuàng)新點(diǎn) |
| 14.3 研究的局限 |
| 14.3.1 研究對(duì)象住院時(shí)間的限制 |
| 14.3.2 研究本身?xiàng)l件的限制 |
| 14.4 相關(guān)啟示 |
| 14.4.1 對(duì)社區(qū)工作的啟示 |
| 14.4.2 對(duì)研究工作的啟示 |
| 附錄 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 讀研期間科研成果 |
| 致謝 |
（8）2型糖尿病清熱益氣治法的傳承及機(jī)制研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符號(hào)說(shuō)明 |
| 文獻(xiàn)綜述 |
| 綜述一 2型糖尿病清熱益氣治法研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述二 腸道菌群與與2型糖尿病炎癥反應(yīng)機(jī)制研究 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 前言 |
| 研究一 基于數(shù)據(jù)挖掘的清熱益氣法治療2型糖尿病的傳承研究 |
| 1. 研究資料 |
| 2 研究方法 |
| 3 研究結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 研究二 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的黃連、人參“藥對(duì)”治療2型糖尿病作用機(jī)制研究 |
| 1 材料 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 研究三 基于腸道菌群的黃連、人參“藥對(duì)”治療2型糖尿病抗炎機(jī)制研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 相關(guān)性分析 |
| 5 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 結(jié)語(yǔ) |
| 致謝 |
| 附錄 世界中醫(yī)藥學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)糖尿病專業(yè)委員會(huì)糖尿病及其并發(fā)癥本虛標(biāo)實(shí)證候診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 個(gè)人簡(jiǎn)歷 |
（9）基于數(shù)據(jù)挖掘的婁錫恩教授治療2型糖尿病中醫(yī)辨治規(guī)律研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符號(hào)說(shuō)明 |
| 第一部分 綜述 |
| 綜述一 2型糖尿病的中醫(yī)藥治療研究進(jìn)展 |
| 1 中醫(yī)對(duì)2型糖尿病的認(rèn)識(shí) |
| 2 中醫(yī)藥對(duì)2型糖尿病的治療 |
| 3 總結(jié)與展望 |
| 綜述二 數(shù)據(jù)挖掘與中醫(yī)傳承輔助平臺(tái) |
| 1 數(shù)據(jù)挖掘在中醫(yī)藥方面的優(yōu)勢(shì) |
| 2 中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)簡(jiǎn)介 |
| 3 中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)原理 |
| 4 中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)應(yīng)用現(xiàn)狀 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 前言 |
| 第二部分 基于數(shù)據(jù)挖掘的婁錫恩教授治療2型糖尿病中醫(yī)辨治規(guī)律研究 |
| 第一節(jié) 研究對(duì)象 |
| 1 病例來(lái)源 |
| 2 診斷標(biāo)準(zhǔn) |
| 3 納入標(biāo)準(zhǔn) |
| 4 排除標(biāo)準(zhǔn) |
| 第二節(jié) 研究方法 |
| 1 病例收集 |
| 2 病例預(yù)處理 |
| 3 病例處理 |
| 4 數(shù)據(jù)分析 |
| 第三節(jié) 研究結(jié)果 |
| 1 一般資料統(tǒng)計(jì) |
| 2 證候分布統(tǒng)計(jì) |
| 3 藥物信息統(tǒng)計(jì) |
| 4 組方規(guī)律統(tǒng)計(jì) |
| 第四節(jié) 討論 |
| 1 一般資料分析 |
| 2 辨證特色分析 |
| 3 用藥思路分析 |
| 4 配伍組方規(guī)律分析 |
| 5 潛在新方分析 |
| 第五節(jié) 結(jié)論 |
| 結(jié)語(yǔ) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 在學(xué)期間主要研究成果 |
（10）糖尿病類藥—藥多組分晶體設(shè)計(jì)合成及構(gòu)—效關(guān)系研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 緒論 |
| 1.1 晶體工程概述 |
| 1.2 藥物多晶型 |
| 1.3 藥物多組分晶體 |
| 1.3.1 藥物鹽型 |
| 1.3.2 藥物共晶 |
| 1.3.3 藥物溶劑化物 |
| 1.3.4 固體溶液與低共熔物 |
| 1.3.5 藥物-藥物多組分晶體 |
| 1.4 糖尿病藥物國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展 |
| 1.4.1 糖尿病藥物研究現(xiàn)狀 |
| 1.4.2 糖尿病藥物存在的問(wèn)題 |
| 1.5 本課題研究?jī)?nèi)容與章節(jié)安排 |
| 第二章 基于晶體工程的格列喹酮多組分晶體設(shè)計(jì)制備與表征 |
| 2.1 研究背景與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) |
| 2.1.1 研究背景 |
| 2.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) |
| 2.2 實(shí)驗(yàn)部分 |
| 2.2.1 藥品與試劑 |
| 2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器及測(cè)試條件 |
| 2.2.3 多組分晶體的制備 |
| 2.2.4 體外粉末溶出實(shí)驗(yàn) |
| 2.3 結(jié)果與討論 |
| 2.3.1 產(chǎn)物確認(rèn) |
| 2.3.2 晶體結(jié)構(gòu)分析 |
| 2.3.3 Hirshfeld surface分析 |
| 2.3.4 熱分析 |
| 2.3.5 粉體性質(zhì)研究 |
| 2.3.6 體外粉末溶出實(shí)驗(yàn) |
| 2.4 本章小結(jié) |
| 第三章 基于聯(lián)合用藥的磺酰脲類藥-藥多組分晶體構(gòu)-效關(guān)系研究 |
| 3.1 研究背景與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) |
| 3.1.1 研究背景 |
| 3.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) |
| 3.2 實(shí)驗(yàn)部分 |
| 3.2.1 藥品與試劑 |
| 3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器及測(cè)試條件 |
| 3.2.3 藥-藥多組分晶體的制備 |
| 3.2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) |
| 3.2.5 體外粉末溶出實(shí)驗(yàn) |
| 3.3 結(jié)果與討論 |
| 3.3.1 產(chǎn)物確認(rèn) |
| 3.3.2 晶體結(jié)構(gòu)分析 |
| 3.3.3 理化性質(zhì)研究 |
| 3.3.4 構(gòu)-效關(guān)系研究 |
| 3.4 本章小結(jié) |
| 第四章 磺酰脲類藥-藥多組分晶體理化性質(zhì)研究與體內(nèi)外評(píng)價(jià) |
| 4.1 研究背景與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) |
| 4.2 實(shí)驗(yàn)部分 |
| 4.2.1 藥品與試劑 |
| 4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器及測(cè)試條件 |
| 4.2.3 藥-藥多組分晶體的制備 |
| 4.2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) |
| 4.2.5 體外粉末溶出實(shí)驗(yàn) |
| 4.2.6 體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn) |
| 4.3 結(jié)果與討論 |
| 4.3.1 產(chǎn)物確認(rèn) |
| 4.3.2 理化性質(zhì)研究 |
| 4.3.3 體內(nèi)外評(píng)價(jià) |
| 4.4 本章小結(jié) |
| 第五章 噻唑烷二酮類藥-藥多組分晶體構(gòu)-效關(guān)系研究及體內(nèi)外評(píng)價(jià) |
| 5.1 研究背景與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) |
| 5.2 實(shí)驗(yàn)部分 |
| 5.2.1 藥品與試劑 |
| 5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器及測(cè)試條件 |
| 5.2.3 藥-藥多組分晶體的制備 |
| 5.2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) |
| 5.2.5 體外粉末溶出實(shí)驗(yàn) |
| 5.2.6 體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn) |
| 5.3 結(jié)果與討論 |
| 5.3.1 產(chǎn)物確認(rèn) |
| 5.3.2 晶體結(jié)構(gòu)分析 |
| 5.3.3 理化性質(zhì)研究 |
| 5.3.4 構(gòu)-效關(guān)系研究 |
| 5.3.5 體內(nèi)外評(píng)價(jià) |
| 5.4 本章小結(jié) |
| 第六章 結(jié)論與展望 |
| 6.1 結(jié)論 |
| 6.2 創(chuàng)新點(diǎn) |
| 6.3 工作展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 附錄 A 符號(hào)說(shuō)明 |
| 博士期間發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明 |
| 致謝 |
四、TGA、TMA在2型糖尿病中出現(xiàn)頻率的觀察（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]2型糖尿病中醫(yī)證候要素與甲功指標(biāo)相關(guān)分析及血瘀證預(yù)測(cè)模型構(gòu)建[D]. 趙博旭. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2021(08)
- [2]2型糖尿病患者電流感覺(jué)閾值測(cè)量結(jié)果（CPT）與舌象的相關(guān)性研究[D]. 于堯. 長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué), 2021(01)
- [3]脂肪細(xì)胞來(lái)源外泌體在糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化疾病中的作用及機(jī)制研究[D]. 陳芳芳. 山東大學(xué), 2021(10)
- [4]“二陽(yáng)結(jié)謂之消”理論下的2型糖尿病合并功能性便秘證素學(xué)研究[D]. 夏弋欽. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2021(08)
- [5]不同糖耐量患者血清nesfatin-1水平的差異[D]. 李婉婉. 蚌埠醫(yī)學(xué)院, 2021(01)
- [6]2型糖尿病胰島素抵抗中醫(yī)證型的聚類分析以及絞股藍(lán)皂苷XLIX改善胰島素抵抗的初步研究[D]. 石書龍. 山東中醫(yī)藥大學(xué), 2020(01)
- [7]氣陰兩虛Ⅱ型糖尿病患者中醫(yī)綜合護(hù)理干預(yù)研究[D]. 馬立新. 湖州師范學(xué)院, 2020(12)
- [8]2型糖尿病清熱益氣治法的傳承及機(jī)制研究[D]. 孫瑞茜. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2020(04)
- [9]基于數(shù)據(jù)挖掘的婁錫恩教授治療2型糖尿病中醫(yī)辨治規(guī)律研究[D]. 溫喬. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2020(04)
- [10]糖尿病類藥—藥多組分晶體設(shè)計(jì)合成及構(gòu)—效關(guān)系研究[D]. 賈麗娜. 天津大學(xué), 2020(01)
標(biāo)簽：糖尿病論文; 胰島素抵抗論文; 內(nèi)皮細(xì)胞論文; 主動(dòng)脈粥樣硬化論文; 空腹血糖受損論文;