一、金森腦泰注射劑中葛根素在正常和缺血再灌模型大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)研究（論文文獻(xiàn)綜述）
施榮楓[1]（2016）在《利用免疫分析法解析葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠中的藥代動力學(xué)特征》文中研究說明目的1.研究不同劑量的葛根素通過腹腔注射給藥在正常大鼠的血液和主要臟器以及大腦內(nèi)亞器官的組織分布代謝的動態(tài)變化過程。2.研究不同劑量葛根素通過腹腔注射給藥在腦缺血再灌注損傷模型大鼠的血液和主要臟器以及腦內(nèi)損傷部位左右海馬的組織分布代謝的動態(tài)變化過程。3.比較研究不同劑量的葛根素通過腹腔注射給藥在正常大鼠和腦缺血再灌注損傷模型大鼠中的組織分布代謝的異同,以期為臨床用藥提供藥代動力學(xué)的數(shù)據(jù)支持。方法1.三組不同劑量的葛根素在正常大鼠的組織分布藥代動力學(xué)研究：按照高劑量組（80mg/kg）、中劑量組（40mg/kg）、低劑量組（20mg/kg）腹腔注射葛根素,于給藥后第5、15、30、60、90、120、180、240、300、360分鐘麻醉后腹主動脈取血,取血后通過心臟灌洗,取心、肝、脾、肺、腎、海馬、皮層、紋狀體。樣品通過勻漿和離心處理后,利用間接競爭ELISA法檢測樣品中的葛根素的含量。2.三組不同劑量的葛根素在腦缺血再灌注損傷模型（MCAO）大鼠的組織分布藥代動力學(xué)研究：利用線栓法制備MCAO模型大鼠,缺血90min后再灌注的同時按照高劑量組（80mg/kg）、中劑量組（40mg/kg）、低劑量組（20mg/kg）腹腔注射葛根素,于給藥后第5、15、30、60、90、120分鐘后腹主動脈取血,取血后通過心臟灌洗,取心、肝、脾、肺、腎、左側(cè)海馬和右側(cè)海馬。樣品通過勻漿和離心處理后,利用間接競爭ELISA法檢測樣品中的葛根素的含量。結(jié)果1不同劑量的葛根素在正常大鼠中的組織分布代謝特征1.1在血液中的藥代動力學(xué)特征在高、中劑量組中,葛根素在大鼠血液中均出現(xiàn)了兩個吸收峰。低劑量組僅有一個吸收峰。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）。Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。1.2在心臟中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在心臟的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,max和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。1.3在肝臟中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在肝臟的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。1.4在脾臟中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在脾臟的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,MRT均無顯著性差異（P>0.05）,高劑量組與中、低劑量組的Tmax有顯著差異（P<0.05）,高劑量組的Tmax比中劑量組的低劑量組往后延長了15分鐘。1.5在肺臟中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在肺臟的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。1.6在腎臟中的藥代動力學(xué)特征在高劑量組和中劑量組中,葛根素在腎臟中均出現(xiàn)了兩個吸收峰。低劑量組僅有一個吸收峰,在給藥后第15分鐘。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,MRT均無顯著性差異（P>0.05）。高劑量組與中、低劑量組的Tmax有顯著差異（P<0.05）,高劑量組的達(dá)峰時間比中劑量組的低劑量組往前提前了10分鐘。1.7在海馬中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在海馬的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。1.8不同劑量的葛根素在皮層中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在皮層的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。1.9在紋狀體中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在紋狀體的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。2不同劑量的葛根素在腦缺血再灌注損傷模型大鼠中的組織分布藥代動力學(xué)特征2.1在血液中的藥代動力學(xué)特征高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）。Tmax無顯著性差異（P>0.05）。高劑量組和中劑量組的葛根素的MRT無明顯差異（P>0.05）,而在高劑量組和低劑量組,中劑量組和低劑量組之間均有顯著性差異（P<0.05）。2.2在心臟中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在心臟的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。2.3不同劑量的葛根素在肝臟中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在肝臟的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。2.4在脾臟中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在脾臟的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。2.5在肺臟中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在肺臟的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。2.6在腎臟中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在肺臟的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。2.7在左側(cè)海馬中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在海馬的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。2.8在右側(cè)海馬中的藥代動力學(xué)特征三組不同劑量的葛根素在皮層的組織分布代謝過程中均只出現(xiàn)了一個吸收峰,藥-時代謝曲線趨勢基本一致。高、中、低三組不同劑量的Cmax和AUC均有顯著性差異（P<0.05）,Tmax和MRT均無顯著性差異（P>0.05）。結(jié)論1.1葛根素在腦缺血再灌注損傷模型大鼠中的組織分布代謝過程中,在血液和組織器官的達(dá)峰時間均較正常組延長。1.2高劑量組的葛根素在模型組海馬中的分布的量明顯比正常組的高。1.3高劑量和中劑量的葛根素在模型組的海馬中的代謝速度較正常大鼠的快。1.4低劑量的葛根素在模型組損傷部位的海馬比未損傷部位的海馬滯留時間更長,作用時間更長,清除更為緩慢。
姜麗,嚴(yán)小軍,李云,徐國良[2]（2015）在《葛根素體內(nèi)藥代動力學(xué)研究進(jìn)展》文中提出葛根素具有提高免疫力,增強(qiáng)心肌收縮力,降血壓,改善微循環(huán),抗血小板聚集,降血糖等作用,可用于治療冠心病、心肌梗死、高血壓等心血管疾病及突發(fā)性耳聾和糖尿病等癥。因其毒性小、安全范圍廣、療效好,臨床應(yīng)用不斷拓展,已成為生產(chǎn)心腦血管疾病的藥品或保健品的重要原料藥?？紤]到葛根素藥代動力學(xué)研究日漸深入,本文將從樣品前處理,檢測方法,藥物吸收、分布、代謝與排泄（ADME過程）及體內(nèi)過程影響因素等方面較系統(tǒng)地對葛根素近年來的藥代動力學(xué)研究作一綜述,為葛根素制劑工藝及臨床應(yīng)用提供參考。
李鵬躍[3]（2014）在《基于MD-MS技術(shù)研究葛根總黃酮及葛根素靜脈和鼻腔給藥的藥動學(xué)差異》文中認(rèn)為腦中風(fēng)學(xué)名腦卒中,是嚴(yán)重危害人類健康和生命安全的常見難治疾病,具有發(fā)病率高、致殘率高、復(fù)發(fā)率高、死亡率高、預(yù)后差、經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)重的特點,在嚴(yán)重影響患者本人生活質(zhì)量的同時,也給家庭、社會帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。葛根為治療腦中風(fēng)的常用中藥。目前,其主要成份葛根素已有4種相關(guān)靜脈注射制劑上市,在治療缺血性腦血管疾病方面療效確切。葛根素作用機(jī)制與擴(kuò)張腦血管、清除自由基、抗氧化、抑制炎癥反應(yīng)等作用有關(guān)。同時,現(xiàn)代藥理研究亦表明,除葛根素外,葛根總黃酮中其余成分同樣具有腦保護(hù)作用,能夠明顯縮小大腦中動脈栓塞（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型大鼠腦梗死體積、降低腦水腫程度、提高超氧化物歧化酶的活性、降低丙二醛水平,目前已有葛酮通絡(luò)膠囊及愈風(fēng)寧心系列口服制劑上市。然而,上述制劑均存在一定的缺陷。葛根素注射劑自1993年上市以來,臨床不良反應(yīng)時有發(fā)生,嚴(yán)重者甚至導(dǎo)致死亡;而口服制劑存在吸收差、生物利用度低的問題,并且對于中風(fēng)病人而言,吞服困難,給藥順應(yīng)性較差。這些問題均限制了上述制劑在臨床中的應(yīng)用。傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)理論和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究均證明鼻腔給藥是治療腦病的有效途徑。因此,本課題基于“鼻通腦絡(luò)”中醫(yī)理論,在前期研究的基礎(chǔ)上,選擇鼻腔作為給藥途徑,采用微透析取樣技術(shù),對葛根素及自制葛根總黃酮經(jīng)不同途徑給藥后的藥動學(xué)差異進(jìn)行了研究。具體研究內(nèi)容如下:1葛根總黃酮的提取純化工藝研究以葛根素和總黃酮提取率為指標(biāo),通過正交試驗對葛根總黃酮的提取工藝進(jìn)行了研究,最優(yōu)工藝為12倍量水,提取3次,每次1.5h,所得工藝便捷可行,目標(biāo)成分提取率達(dá)到90%以上。對葛根水提液進(jìn)行了醇沉處理,最佳醇沉工藝為提取液濃縮至0.5g藥材/ml,加95%乙醇,調(diào)節(jié)醇濃度為60%,醇沉24h,進(jìn)一步提高了浸膏中目標(biāo)成分的純度。在此基礎(chǔ)上,運用單因素考察法對大孔吸附樹脂純化工藝進(jìn)行了優(yōu)化,最佳樹脂為HPD200A,上樣液濃度為0.25g藥材/ml,大孔樹脂柱徑高比為1:5,上樣量為0.5g藥材/ml樹脂,上樣流速為1ml/min,水洗2BV,水洗流速為0.5ml/min,30%乙醇洗脫4BV,醇洗流速為0.5ml/min。最終產(chǎn)物的出膏率約為10%,葛根素的純度在30%以上,總黃酮的純度在70%以上。對葛根總黃酮的樹脂純化工藝進(jìn)行放大實驗研究,所得提取物純度基本穩(wěn)定,工藝可行。對提取物中各成分進(jìn)行質(zhì)譜分析,初步推斷其中5種主要成分分別為:3’-羥基葛根素、葛根素、葛根素木糖苷、3’-甲氧基葛根素、大豆苷。以Bcl-2 mRNA為指標(biāo)對葛根素及提取物的抗凋亡作用進(jìn)行了比較,實驗結(jié)果顯示,提取物組效果更好,提示提取物中有成份能夠促進(jìn)抗凋亡基因Bcl-2mRNA的高表達(dá),更有助于抑制細(xì)胞在缺氧環(huán)境下的凋亡。2葛根素微透析及HPLC-MS/MS方法的建立體外透析實驗及反滲透實驗顯示,葛根素的探針傳遞率及回收率分別為:63.37%和71.52%,兩者之間存在顯著差異,而不同濃度藥液對探針回收率（或傳遞率）并無影響,通過探針清除率實驗,證實了葛根素與探針膜材料之間不存在吸附;同時研究表明,藥物回收率、傳遞率以及兩者之間的差值會隨著探針外藥液攪拌速度的升高而增加;在灌流液中添加適當(dāng)?shù)奶砑觿┠軌蛴行У奶岣呋厥章?降低傳遞率,同時亦使兩者之間的差異增大;隨著探針膜長的增加,藥物的傳遞率及回收率均有顯著提高,但兩者之間的差值亦隨之而增大。上述結(jié)果提示,如果需要求得體內(nèi)的真實藥物濃度,以探針的在體傳遞率替代在體回收率是不可行的,故采用零凈通量法對探針的在體回收率進(jìn)行了計算。腦探針的定位按照大鼠腦立體定位圖譜結(jié)合腦組織切片,確定嗅球的位置為以前囟為基點,AP:+8mm,ML:±1mm處定位,血液探針沿向心室方向植入頸靜脈,以生理鹽水為灌流液,采用零凈通量法測定探針在血液及嗅球部位的在體回收率,分別為:17.52%,29.13%。建立了透析液中葛根素及內(nèi)標(biāo)柚皮苷的HPLC-MS/MS測定方法。色譜條件為C18色譜柱（Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 column（3.5μm,4.6 × 1Omm,USA））;HPLC條件:甲醇-水,0-8min,24:76,8-15min,60:40;MS/MS條件:離子源:ESI負(fù)離子模式,監(jiān)測離子:415/295（葛根素）,579/271（柚皮苷）。葛根素在0.002-0.111 μg/mL和0.111-8.9 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好?；貧w方程分別為y=0.23816x-0.0001（r=0.998）和y=0.25562x-0.01582（r=0.999）。精密度、穩(wěn)定性均符合要求。定量限以標(biāo)準(zhǔn)曲線最低點計。3葛根素經(jīng)不同途徑給藥大鼠體內(nèi)藥動學(xué)研究以雄性SD大鼠為實驗動物,將血液探針埋植于頸靜脈,腦探針埋植于嗅球部位,葛根素按照7mg/kg的劑量分別靜脈推注、靜脈滴注、鼻腔給藥,微透析取樣,20min收集樣品一次,HPLC-MS/MS檢測透析液中藥物濃度。以Kinetica藥動學(xué)軟件非房室模型處理體內(nèi)數(shù)據(jù)。血藥動力學(xué)結(jié)果顯示:各組的血藥峰濃度Cmax分別為30.89±10.69μg/ml（i.v.）、9.31±3.99μg/ml（i.v.gtt）、3.82±1.03 μg/ml（i.n.）,各組的血藥 AUC0-5h 分別為 1524.63±584.05μg/ml.min（i.v.）、1037.18±501.70 μg/ml·min（i.v.gtt）、623.12±170.86 μg/ml.min（i.n.）,各組的 tmax分別為 20min（i.v.）、100min（i.v.gtt）、68±10.95min（i.n.）,各組的平均滯留時間分別為 44.20±8.97min（i.v.）、87.24±7.84min（i.v.gtt）、140.27±7.86min（i.n.）。與靜脈給藥相比,鼻腔給藥組各參數(shù)均有顯著性差異。嗅球部位藥動學(xué)結(jié)果顯示:各組的藥物峰濃度Cmax分別為0.29±0.07μg/ml（i.v.）、0.0523μg/ml（i.v.gtt）、0.50±0.16μg/ml（i.n.）,各組的嗅球部位 AUC0-5h 分別為 28.44 ±6.89μg/ml·min（i.v.）、8.30±4.85μg/ml·min（i.v.gtt）、86.84±23.50μg/ml.min（i.n.）,各組的 tmax分別為 20min（i.v.）、132±36min（i.v.gtt）、212±30.33 min（i.n.）,各組的平均滯留時間分別為 81.76±11.46min（i.v.）、162.63±19.00min（i.v.gtt）、186.43±6.25min（i.n.）。各組的腦靶向指數(shù)分別為1.87%、0.80%、13.94%。鼻腔給藥雖然血藥濃度較低,但嗅球部位藥物濃度得到了很大的提高,腦靶向性顯著提高。4葛根素經(jīng)不同途徑給藥MCAO模型大鼠體內(nèi)藥動學(xué)研究為了進(jìn)一步模擬葛根素的臨床用藥對象和給藥方式,以雄性SD大鼠為實驗動物,制備大鼠大腦中動脈栓塞模型,對病理狀態(tài)下,葛根素經(jīng)不同途徑給藥后的藥動學(xué)行為進(jìn)行了研究。血藥動力學(xué)結(jié)果表明:各組的血藥峰濃度Cmax為13.84±2.45μg/ml（i.v.gtt）、4.36±1.06μg/ml（i.n.）,各組的血藥 AUC0-5h分別為 1416.68±249.74μg/ml·min（i.v.gtt）、533.48±136.75μg/ml·min（i.n.）,各組的 tmax分別為 100 min（i.v.gtt）、80±31min（i.n.）,各組的平均滯留時間分別為88.85±6.34 min（i.v.gtt）、115.61±13.82min（i.n.）。鼻腔給藥的絕對生物利用度為37.66%,與正常大鼠相比,靜脈滴注時MCAO模型大鼠具有較高的血藥AUC,鼻腔給藥時MCAO模型大鼠血藥AUC與正常大鼠組無顯著性差異。嗅球部位藥動學(xué)結(jié)果表明:各組的藥物峰濃度Cmax為0.19±0.12μg/ml（i.v.gtt）、1.54±0.43μg/ml（i.n.）,各組的嗅球部位的 AUC0-5h 分別為 24.50±16.74μg/ml·min（i.v.gtt）、255.96±87.74μg/ml·min（i.n.）,各組的 tmax 分別為 104±38 min（i.v.gtt）、92±11min（i.n.）,各組的平均滯留時間分別為141.72±12.68 min（i.v.gtt）、136.57±17.12min（i.n.）,各組的腦靶向指數(shù)為1.73%和47.98%。鼻腔給藥組的Cmax、AUC均顯著高于靜脈滴注組,腦靶向系數(shù)更是高達(dá)靜脈滴注組的27倍,充分體現(xiàn)了鼻腔給藥的優(yōu)越性。與正常大鼠相比,靜脈滴注和鼻腔給藥時,MCAO大鼠嗅球部位藥物峰濃度和AUC顯著增加,并且曲線形態(tài)發(fā)生明顯變化,這種現(xiàn)象可能是由于血腦屏障的破壞或腦缺血對嗅黏膜和嗅神經(jīng)的影響所導(dǎo)致的。5葛根總黃酮經(jīng)不同途徑給藥MCAO模型大鼠體內(nèi)藥動學(xué)研究以雄性SD大鼠為實驗動物,制備MCAO模型大鼠,自制葛根提取物按照20mg/kg的劑量分別靜脈滴注、鼻腔給藥,微透析取樣,HPLC-MS/MS檢測透析液中藥物濃度。以Kinetica藥動學(xué)軟件非房室模型處理體內(nèi)數(shù)據(jù)。血藥動力學(xué)結(jié)果表明:各組的血藥峰濃度Cmax為14.96±3.97μg/ml（i.v.gtt）、0.75±0.30μg/ml（i.n.）,各組的血藥 AUC0-5h 分別為 1707.02±457.88μg/ml·min（i.v.gtt）、134.72±37.61μg/ml.min（i.n.）,各組的 tmax 分別為 104±9 min（i.v.gtt）、68±18min（i.n.）,各組的平均滯留時間分別為90.28±15.18 min（i.v.gtt）、139.41±12.11min（i.n.）,鼻腔給藥的絕對生物利用度為7.89%,但藥物在血漿中的MRT顯著長于靜脈滴注組。與葛根素單獨給藥相比,靜脈滴注時兩者血藥AUC并無顯著差異,提示在該藥物濃度下提取物中其余黃酮類成分并未對葛根素的代謝產(chǎn)生影響;但鼻腔給藥時提取物組的血藥AUC顯著降低,僅為葛根素組的25%,這種現(xiàn)象可能是由于提取物中多種成分在透過鼻黏膜時發(fā)生競爭所致。嗅球部位藥動學(xué)結(jié)果表明:各組的藥物峰濃度Cmax為0.060±0.03μg/ml（i.v.gtt）、0.37±0.11μg/ml（i.n.）,嗅球部位的 AUC0-5h分別為 7.38±4.65μg/ml-min（i.v.gtt）、58.60±14.48μg/ml·min（i.n.）,鼻腔給藥組嗅球部位藥物濃度持續(xù)升高,并且下降趨勢不明顯,各組的DTI分別為:0.43%和43.50%。與葛根素單獨給藥相比,靜脈滴注時提取物組嗅球部位AUC僅為葛根素組的30%,這可能是由于透過血腦屏障時黃酮類成分發(fā)生競爭所致,鼻腔給藥也發(fā)生相似的現(xiàn)象。盡管葛根素組和提取物組鼻腔給藥后血液和嗅球部位AUC存在顯著差異,但二者的DTI分別為47.98%和43.50%,較為接近,進(jìn)一步證明了黃酮類成分在經(jīng)鼻轉(zhuǎn)運入腦過程中存在競爭。
宋軼群[4]（2014）在《葛根總黃酮胃腸道粘附漂浮制劑的制備與研究》文中研究表明口服給藥是最安全,方便的給藥方式,但葛根總黃酮由于水溶性和脂溶性均不好,故口服生物利用度不高。本實驗在前期對葛根總黃酮的檢測方法、溶解性、表觀油水分配系數(shù)以及在體腸吸收動力學(xué)及吸收機(jī)制的研究基礎(chǔ)上,研究了葛根總黃酮的Caco-2透膜性,針對葛根總黃酮脂溶性差,在胃和小腸上段吸收較好的特點,采用不同制劑手段,從提高藥物脂溶性、增強(qiáng)透膜性或是延長體內(nèi)吸收部位滯留時間等途徑,促進(jìn)藥物釋放和透膜吸收,提高口服生物利用度,為葛根總黃酮高口服生物利用度制劑的設(shè)計和制備提供重要參考。本文研究了葛根總黃酮的基本理化性質(zhì)；通過Caco-2細(xì)胞透膜性研究了葛根總黃酮的吸收特征；以葛根總黃酮為原料,大豆卵磷脂為基質(zhì)制備了磷脂復(fù)合物,以復(fù)合率和表觀油水分配系數(shù)為指標(biāo),通過正交設(shè)計制備了不同處方的葛根總黃酮磷脂復(fù)合物；以卡波姆934P和HPMC K15M作為組合粘附材料,以十八醇和碳酸氫鈉分別作為密度型漂浮材料和產(chǎn)氣型漂浮材料,以粘附性、漂浮性、Caco-2細(xì)胞透膜性為指標(biāo),通過正交設(shè)計制備了不同處方的葛根總黃酮胃腸道生物粘附漂浮制劑,并通過體內(nèi)研究探索了最優(yōu)處方的口服生物利用度。首先利用紫外分光光度法和高效液相色譜法考察了葛根總黃酮及其主要成分葛根素在水中的溶解度以及葛根素的表觀油水分配系數(shù)log P值隨pH的變化,發(fā)現(xiàn)葛根總黃酮及其主要成分葛根素在水中均有較好的溶解度,且其溶解度均隨pH的增加而增加,這可能與黃酮類的結(jié)構(gòu)有關(guān)。葛根總黃酮的主要有效成分為異黃酮類化合物,黃酮類物質(zhì)含有酚羥基,隨著pH增大,酚羥基解離,溶解度增大。葛根總黃酮中葛根素的表觀油水分配系數(shù)隨pH增加而降低,且在各生理pH下其log P值均小于零,說明其極性大,親脂性弱,透膜吸收存在困難,為胃腸道吸收較差的原因之一,同時在胃和小腸上段吸收較好,因此可以通過制劑手段提高脂溶性,從而促進(jìn)吸收。其次采用Caco-2細(xì)胞模型評價葛根總黃酮中葛根素的吸收機(jī)制,發(fā)現(xiàn)葛根總黃酮中葛根素在透膜吸收過程中有被動擴(kuò)散機(jī)制參與,表現(xiàn)出時間和濃度依賴性,還受到質(zhì)子梯度的影響,AP側(cè)（頂端側(cè)）的質(zhì)子梯度可以明顯促進(jìn)葛根總黃酮中葛根素的吸收。這可能與黃酮類的物質(zhì)結(jié)構(gòu)有關(guān)。黃酮類物質(zhì)含酚羥基,在酸性條件下吸收較好?？梢酝茰y葛根總黃酮在胃內(nèi)和小腸上段吸收優(yōu)于小腸下段,因此可以通過制備胃腸道粘附漂浮制劑,延長葛根總黃酮在胃腸道內(nèi)的滯留時間,從而促進(jìn)吸收。本實驗以復(fù)合率和表觀油水分配系數(shù)為指標(biāo),通過單因素考察以及正交設(shè)計進(jìn)行處方篩選和優(yōu)化,利用葛根總黃酮和大豆卵磷脂制備葛根總黃酮磷脂復(fù)合物,與原料藥相比,在pH6.8時對藥物的表觀油水分配系數(shù)有顯著性提高,在pH3.0時無顯著性差異。本實驗通過單因素考察以及正交設(shè)計,以粘附性、漂浮性和Caco-2細(xì)胞透膜性為指標(biāo)進(jìn)行處方篩選和優(yōu)化,以卡波姆934P和HPMC K15M作為組合粘附材料,利用十八醇和碳酸氫鈉作為組合漂浮材料,制備了不同處方的葛根總黃酮胃腸道生物粘附漂浮顆粒。本文以葛根總黃酮胃腸道生物粘附漂浮制劑為試驗制劑,以葛根總黃酮原料藥為參比制劑,考察了葛根總黃酮胃腸道生物粘附漂浮制劑在SD大鼠體內(nèi)的生物利用度,測定了大鼠血漿中葛根素的血藥濃度-時間曲線和相對生物利用度。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)葛根總黃酮胃腸道生物粘附漂浮顆粒相對于葛根總黃酮原料藥的相對生物利用度為179.4%?？梢娝频玫囊钥ú?34P和HPMC K15M為組合粘附材料,以十八醇和碳酸氫鈉為組合漂浮材料的胃腸道生物粘附漂浮制劑能提高葛根總黃酮的口服生物利用度,有一定的意義。
姜麗[5]（2013）在《基于理化性質(zhì)—藥效—體內(nèi)外吸收評價葛根素和天麻素配伍應(yīng)用的合理性》文中研究指明1研究目的葛根和天麻近年來在中藥內(nèi)服治療頸椎病中應(yīng)用較多,且多配伍使用。二者的主要活性成分分別為葛根素（puerarin, Pur）和天麻素（gastrodin, Gas）。它們都具有改善微循環(huán)、擴(kuò)張冠狀動脈、降血壓、抗氧化等藥理活性。臨床上二者單獨使用常被用于高血壓、突發(fā)性耳聾、椎基底動脈供血不足所致的頸椎病、眩暈等微循環(huán)障礙引起的疾病,兩者的注射液亦常聯(lián)合靜注給藥用于治療上述疾病?；诟鸶睾吞炻樗氐呐R床應(yīng)用,探討其配伍應(yīng)用的合理性及其相互影響十分必要。為此,本研究將從葛根素和天麻素配伍后理化性質(zhì)、抗氧化改善微循環(huán)藥效作用、大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)和Caco-2細(xì)胞中的吸收機(jī)制等多層面,探討葛根素和天麻素配伍應(yīng)用的合理性。2研究內(nèi)容與方法圍繞以上研究目的,本實驗擬從葛根素和天麻素配伍后溶解度和油水分配系數(shù)等理化性質(zhì)、清除自由基和改善微循環(huán)等藥效作用、大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)及在Caco-2細(xì)胞中吸收機(jī)制方面,以二者配伍后溶解度和油水分配系數(shù)、清除二苯代苦味肼基自由基（DPPH自由基）和抗凝血抗血小板聚集率、大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)參數(shù)及Caco-2細(xì)胞模型表觀滲透系數(shù)為指標(biāo),探討葛根素和天麻素配伍應(yīng)用合理性。2.1.葛根素和天麻素配伍理化性質(zhì)研究2.1.1葛根素和天麻素配伍后表觀溶解度采用紫外分光光度法測定葛根素、天麻素單獨及配伍使用后在水中的平衡溶解度。2.1.2葛根素和天麻素配伍后油水分配系數(shù)采用搖瓶-HPLC法測定葛根素、天麻素單獨及配伍使用后在不同pH值正辛醇-磷酸鹽緩沖體系中的油水分配系數(shù)。2.2葛根素和天麻素配伍抗氧化和改善微循環(huán)藥效研究采用二苯代苦味肼基自由基（DPPH自由基）清除率為指標(biāo),考察葛根素和天麻素單獨及配伍使用后體外抗氧化能力;并測定體內(nèi)外活化部分凝血酶原時間（APTT）和ADP誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率,考察葛根素和天麻素單獨及配伍使用后抗凝血作用及抗血小板聚集作用,研究兩者合用后改善微循環(huán)的藥效作用。2.3葛根素和天麻素配伍在大鼠血漿中藥代動力學(xué)研究建立同時測定葛根素、天麻素、天麻苷元和內(nèi)標(biāo)對羥基苯乙醇（Tyr）4種成分在大鼠血漿中藥物濃度的HPLC方法,并應(yīng)用該法研究單獨或合并靜脈注射及灌胃給藥葛根素、天麻素后,兩者在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)過程及相互作用。以Tyr為內(nèi)標(biāo),血漿樣品經(jīng)甲醇沉淀蛋白后,上清液用N2吹干,殘渣用乙腈-0.05%磷酸（20：80）復(fù)溶后,以乙腈-0.05%磷酸水為流動相梯度洗脫,用Agilent ZORBAX SB-Aq C18（4.6×150mm,5μm）色譜柱分離,在250nm波長處測定葛根素,221nm處測定天麻素和內(nèi)標(biāo)。單獨或合并給藥葛根素、天麻素后,檢測大鼠血漿中二者濃度,用WinNonlin5.2.1藥動學(xué)軟件和SPSS17.0軟件分別計算各給藥組藥動學(xué)參數(shù)并進(jìn)行統(tǒng)計分析,比較單獨或合并給藥后葛根素、天麻素藥動學(xué)過程。2.4葛根素和天麻素配伍在Caco-2細(xì)胞中吸收機(jī)制研究采用HPLC（?）（?）測定葛根素、天麻素在Caco-2細(xì)胞模型中轉(zhuǎn)運后的含量,計算其表觀滲透系數(shù),研究二者單獨或合并給藥后在Caco-2細(xì)胞中的跨膜轉(zhuǎn)運特性和吸收機(jī)制,并考察濃度、轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑對葛根素和天麻素吸收的影響。3研究結(jié)果3.1葛根素和天麻素配伍理化性質(zhì)研究3.1.1葛根素和天麻素配伍后平衡溶解度室溫下,葛根素平衡溶解度為162g·L-1,天麻素在水中的平衡溶解度為303.81g·L-1；與不同濃度天麻素配伍后,葛根素溶解度有所變化,加入1.0、1.5g·L-1天麻素后,葛根素平衡溶解度與單獨葛根素組無顯著性差異,而其余濃度組均能顯著提高葛根素平衡濃度,最高者可為原來的5.1倍,且葛根素溶解度的增加與天麻素濃度呈線性關(guān)系,表明一定濃度的天麻素可改善葛根素溶解度。3.1.2葛根素和天麻素配伍后油水分配系數(shù)（1）單用葛根素、天麻素時,測得的Log P均值分別為0.4803、-0.8573,與預(yù)測值接近（用Chem Draw Ultra6.0軟件通過分子結(jié)構(gòu)預(yù)測的Log P值分別為0.4826、-1.0595）。（2）葛根素油水分配系數(shù)①單用組及合用組中葛根素在不同pH磷酸鹽緩沖液為水相的介質(zhì)中l(wèi)og P值均<1,提示葛根素的親水性大于親脂性,且在腸道中不易被吸收；②隨著pH的升高,葛根素P值不斷降低,在pH8.0磷酸鹽緩沖溶液中P值最小,提示葛根素在胃液中脂溶性較大,可能在胃中的吸收要高于小腸；③葛根素與天麻素合用后,油水分配系數(shù)P值較單用組降低,在pH1.2-5.8范圍內(nèi)尤為明顯,說明此時葛根素親水性大大提高,這與本課題前述溶解度研究結(jié)果相一致。（3）天麻素油水分配系數(shù)①單用組及合用組中天麻素在不同pH磷酸鹽緩沖液為水相的介質(zhì)中l(wèi)og P值均為負(fù)數(shù),表明天麻素的親水性很大,這與前述天麻素溶解度結(jié)果吻合。雖然它的油水分配系數(shù)比葛根素小,但因其分子量小,在腸道中吸收仍高于葛根素；②pH對天麻素的油水分配系數(shù)并無影響,推測天麻素在胃腸道中的吸收無部位特異性；⑧天麻素與葛根素合用后,油水分配系數(shù)較單用組并無差異,推測葛根素并不能改變天麻素在腸道中的脂水分配情況。3.2葛根素和天麻素配伍抗氧化和改善微循環(huán)藥效研究3.2.1葛根素和天麻素配伍后抗氧化作用（1）以抗壞血酸（Vc）為陽性對照,其IC50（DPPH自由基清除率為50%時的濃度）為0.024g·L-1,葛根素的IC5o為17.56g·L-1,雖不及Vc,但顯示有一定的抗氧化能力；天麻素在濃度為0.5-200g·L-1濃度范圍內(nèi)DPPH自由基清除率為0-1.86%,未超過50%,故無法計算IC5o,可推斷其IC50值大于200g·L-1。（2）不同濃度葛根素、天麻素單獨或合用后,DPPH自由基清除率結(jié)果表明,葛根素清除率隨濃度增加而增大,天麻素各濃度組間清除率均無顯著性差異（P>0.05）。加入天麻素后,葛根素的清除率與單獨使用葛根素組比較無統(tǒng)計學(xué)差異,即天麻素并無清除DPPH自由基能力,也不能增加葛根素的清除能力,推測各合用組的清除率基本系葛根素產(chǎn)生的作用。3.2.2葛根素和天麻素配伍后改善微循環(huán)作用（1）體外APTT結(jié)果①單用葛根素低、中劑量組無抗凝血作用,高劑量組顯示有抗凝血作用（P<0.01）;中劑量葛根素與中劑量或高劑量天麻素合用后,均具有抗凝血作用（P<0.01）。②單用天麻素低、中劑量組無抗凝血作用,高劑量組顯示有抗凝血作用（P<0.01）；但天麻素低劑量組與高劑量葛根素合用后,有抗凝血作用（P<0.01）;天麻素中劑量組與中劑量或高劑量葛根素合用后,均具有抗凝血作用（P<0.01）。⑧合用組中,高劑量Pur+低劑量Gas組、中劑量Pur+中劑量Gas組、高劑量Pur+中劑量Gas組、中劑量Pur+高劑量Gas組、高劑量Pur+高劑量Gas組均具有抗凝血作用（P<0.01）。④葛根素在20-40g／L、天麻素在150-300g／L劑量范圍內(nèi),其APTT值均隨劑量增加而延長,呈劑量依賴趨勢。（2）體內(nèi)APTT結(jié)果與空白組比較,除葛根素高劑量組外,其它給藥組均有極顯著性差異,說明Pur、 Gas均有抗凝血作用；且二者合用中劑量組的抗凝血作用強(qiáng)于各單用組,與體外APTT的該項結(jié)果一致。（3）抗血小板聚集結(jié)果單用葛根素低、中、高劑量組間或天麻素低、中、高劑量組間均無統(tǒng)計學(xué)差異；但直觀分析可知,其抗血小板聚集能力（以抑制率計）,均隨給藥劑量增加而增大。但與單用中劑量組比較,中劑量葛根素與中劑量天麻素配伍后,其抗血小板聚集抑制率均有提高（P<0.05）。3.3葛根素和天麻素配伍在大鼠血漿中藥代動力學(xué)研究（1）建立HPLC同時測定葛根素、天麻素體內(nèi)含量的方法,結(jié)果表明：葛根素、天麻素分別在0.05～5.98μg/mL禾口0.101～101μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r>0.9960）,其最低定量限分別為0.05、0.101μg/mL,檢測限分別為0.0245、0.0486μg/mL,精密度、穩(wěn)定性RSD均小于12%,樣品提取回收率均可達(dá)80%以上,說明建立的方法準(zhǔn)確可靠、靈敏度高,可較好地應(yīng)用于葛根素、天麻素同時給藥的藥代動力學(xué)研究。（2）葛根素和天麻素聯(lián)合給藥后,大鼠體內(nèi)主要藥代動力學(xué)參數(shù)（AUC、Cmax、T1/2、 Tmax、MRT）與單獨給藥后有顯著性差異（P<0.05）。無論是灌胃還是靜脈注射,清除率（CL）降低,平均滯留時間（MRT）延長,相對生物利用度均有提高,尤以灌胃組顯著,灌胃葛根素合用組為單用組的106倍,灌胃天麻素合用組為單用組的1.5倍。3.4葛根素和天麻素配伍在Caco-2細(xì)胞中吸收機(jī)制研究（1）50μg·mL-1葛根素在Caco-2細(xì)胞的轉(zhuǎn)運無明顯的方向性,且轉(zhuǎn)運速率基本恒定,表明此濃度范圍內(nèi)葛根素的轉(zhuǎn)運為不需要耗能的被動轉(zhuǎn)運過程；100、200μg·mL-1葛根素在Caco-2細(xì)胞的跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運呈現(xiàn)較強(qiáng)的方向性（Papp（BL→AP）/Papp（AP→BL）均大于1.5）,且這種有向性可被維拉帕米和環(huán)孢素抑制,故認(rèn)為葛根素的跨膜轉(zhuǎn)運除被動擴(kuò)散外,還存在著外排泵的作用。（2）100μg·mL-1天麻素在Caco-2細(xì)胞的跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運無明顯的方向性,且轉(zhuǎn)運速率幾乎恒定,提示天麻素的轉(zhuǎn)運為不需要耗能的單純被動轉(zhuǎn)運過程。（3）葛根素和天麻素合用后,葛根素吸收量增加（Papp（AP→BL）由1.285×10-6cm/s增加至1.425×10-6cm/s）,外排量減少（Papp（BL→AP）由4.539×10-6cm/s減少至3.108×10-6cm/s,P<0.05）,外排比率由3.531下降至2.181,減少了38.22%,推測天麻素可發(fā)揮類似于維拉帕米或環(huán)孢素的作用,即天麻素為P-gp或MRP2抑制劑,可促進(jìn)葛根素的跨膜轉(zhuǎn)運,其促進(jìn)程度與維拉帕米接近。4結(jié)論4.1葛根素和天麻素配伍理化性質(zhì)研究（1）室溫下,葛根素在水中的平衡溶解度為1.62g·L-1,天麻素為303.81g·L-1,按2010版藥典規(guī)定,前者屬于微溶范疇,后者屬于易溶范疇。一定濃度的天麻素可改善葛根素溶解度,且葛根素溶解度的增加與天麻素濃度呈線性關(guān)系。（2）葛根素、天麻素單獨測定時Log P均值分別為0.4803、-0.8573,均小于1,表明二者的親水性大于親脂性。葛根素的P值隨著pH的升高而降低,表明葛根素在胃液中脂溶性較大,可能在胃中的吸收要高于小腸,而pH對天麻素的P值并無影響,表明天麻素在胃腸道中的吸收無部位特異性。在一定pH范圍內(nèi),天麻素可使葛根素的親水性提高,但葛根素并不能改變天麻素在腸道中的脂水分配情況。（3）以溶解度和油水分配系數(shù)為測定指標(biāo),從理化性質(zhì)層面解釋葛根素和天麻素配伍應(yīng)用的合理性。4.2葛根素和天麻素配伍抗氧化和改善微循環(huán)藥效研究（1）葛根素具有DPPH自由基清除作用,而天麻素并無此作用,但這并不意味著天麻素?zé)o抗氧化作用,它有可能通過其它途徑（如抑制脂質(zhì)過氧化、增強(qiáng)抗氧化酶活性等）產(chǎn)生作用。（2）以體內(nèi)外APTT、ADP誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率為指標(biāo),葛根素和天麻素一定劑量配伍后,其抗凝血、抗血小板聚集作用增加。（3）從體內(nèi)外抗凝血和抗血小板聚集層面,解釋了葛根素和天麻素配伍應(yīng)用的合理性。4.3葛根素和天麻素配伍在大鼠血漿中藥代動力學(xué)研究（1）葛根素和天麻素合用后,可彼此影響在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)過程,增加吸收,降低清除率,延長平均滯留時間,提高生物利用度。（2）從體內(nèi)藥動學(xué)角度,解釋葛根素和天麻素配伍應(yīng)用的合理性。4.4葛根素和天麻素配伍在Caco-2細(xì)胞中吸收機(jī)制研究（1）低濃度葛根素在Caco-2細(xì)胞的轉(zhuǎn)運無明顯的方向性,為不需要耗能的被動轉(zhuǎn)運過程；隨著濃度升高,葛根素的跨膜轉(zhuǎn)運呈現(xiàn)較強(qiáng)的方向性,且這種有向性可被維拉帕米和環(huán)孢素抑制,表明葛根素除被動擴(kuò)散外,還存在著外排泵的作用,其可能為P-gp和MRP2的底物。天麻素在Caco-2細(xì)胞的跨膜轉(zhuǎn)運無明顯的方向性,為不需要耗能的單純被動擴(kuò)散。（2）天麻素可使葛根素吸收量增加,外排量減少,推測天麻素可發(fā)揮類似于維拉帕米或環(huán)孢素的作用,即天麻素為P-gp或MRP2抑制劑,可促進(jìn)葛根素的跨膜轉(zhuǎn)運,其促進(jìn)程度與維拉帕米接近,而葛根素對天麻素吸收促進(jìn)作用不明顯。（3）天麻素（被動轉(zhuǎn)運）這類吸收良好的藥物,Caco-2細(xì)胞模型是一個研究藥物吸收非常好的模型,而對于像葛根素這類吸收差的藥物,Caco-2細(xì)胞模型只能作為體內(nèi)吸收的一個定性而非定量指標(biāo)。（4）從藥物在體外Caco-2細(xì)胞模型中吸收機(jī)制層面,解釋葛根素和天麻素配伍應(yīng)用的合理性。5創(chuàng)新點（1）基于葛根素和天麻素的臨床應(yīng)用,從兩者配伍后理化性質(zhì)、抗氧化改善微循環(huán)藥效作用、大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)和在Caco-2細(xì)胞模型中的吸收機(jī)制等多層面探討其配伍應(yīng)用的合理性。為葛根素和天麻素在臨床合用上的實踐性提供了一個重要依據(jù),對探索中藥成分的配伍理論有一定實踐意義。（2）基于椎-基底動脈供血不足所致的頸椎病、眩暈中醫(yī)發(fā)病機(jī)制為缺氧、缺血等微循環(huán)障礙,本研究以DPPH自由基清除、體內(nèi)外活化部分凝血活酶時間、ADP誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率為指標(biāo),考察藥物抗氧化及改善微循環(huán)作用,以點帶面,多指標(biāo)驗證了葛根素和天麻素配伍的合理性。（3）首次對葛根素和天麻素在大鼠體內(nèi)藥動學(xué)特征進(jìn)行較深入的探討,并以Caco-2細(xì)胞模型為工具,研究葛根素和天麻素吸收轉(zhuǎn)運機(jī)制及相互影響,從藥代動力學(xué)角度和細(xì)胞層面闡明兩者吸收機(jī)制及配伍應(yīng)用的合理性；從腸吸收角度,研究兩種有效成分的吸收及其相互作用,有助于對中藥復(fù)方成分配伍規(guī)律科學(xué)性的理解。
趙星[6]（2013）在《三七總皂苷配伍葛根總黃酮活血化瘀的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究》文中認(rèn)為血瘀證可引發(fā)冠心病、心絞痛、腦卒中等多種心腦血管疾病,隨著飲食結(jié)構(gòu)的改變和人口老齡化,已成為威脅人類健康的重大疾病,應(yīng)引起人們的廣泛關(guān)注。近年來,中成藥在心腦血管疾病防治中的應(yīng)用越來越受到國際社會的關(guān)注與認(rèn)可,其多成分、多途徑、多靶點協(xié)同的作用特征,使得中藥復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究成為推動深層詮釋中醫(yī)藥科學(xué)內(nèi)涵與中醫(yī)藥理論現(xiàn)代創(chuàng)新的關(guān)鍵步驟。本研究結(jié)合血清藥物化學(xué)、血清藥理學(xué)、代謝組學(xué)、傳統(tǒng)藥動學(xué)-藥效學(xué)模型的研究方法,采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),以血流變學(xué)為藥效學(xué)指標(biāo),進(jìn)行了三七總皂苷配伍葛根總黃酮治療“腎上腺素-冰浴法”致大鼠急性血癌證的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究。研究的主要內(nèi)容與結(jié)果如下:以血流變學(xué)指標(biāo)（200/s、30/s、1/s三個不同切變率下的全血黏度和血漿黏度）變化、心肌細(xì)胞損傷程度、血液粘滯狀態(tài)持續(xù)性為依據(jù),對目前常用的兩種大鼠急性血瘀證模型復(fù)制方法一“高分子右旋糖酐法”和“腎上腺素-冰浴法”進(jìn)行了比較,并選擇“腎上腺素-冰浴法”復(fù)制本研究所需的急性血瘀證模型。采用基于ultra-HPLC-ESI-MS技術(shù)的代謝組學(xué)方法,研究了“腎上腺素-冰浴法”致大鼠急性血瘀證造模前后大鼠尿液代謝物譜的變化規(guī)律,在正、負(fù)兩種離子模式下,共檢測到24個生物標(biāo)志物。利用正離子模式下發(fā)現(xiàn)的15個生物標(biāo)志物的變化趨勢,比較了血瘀證模型復(fù)制后的第1、2、3和5天的大鼠尿液代謝物譜的變化規(guī)律,確定模型的有效持續(xù)時間為3天,為進(jìn)行藥效學(xué)研究時,給藥方案的合理制訂提供了必要的依據(jù)。以葛根素注射液（54 mg/kg）為陽性對照,選擇三七總皂苷13.5、27、54 mg/kg三個劑量與葛根總黃酮27、54、108 mg/kg三個劑量,分別經(jīng)尾靜脈連續(xù)給藥7天后造模,以研究三七總皂苷與葛根總黃酮對大鼠急性血瘀證的干預(yù)作用。從200/s、30/s、1/s三個不同切變率下的全血黏度和血漿黏度的變化規(guī)律評價其藥理活性,確定三七總皂苷和葛根總黃酮的有效劑量分別為27和54 mg/kg。采用基于ultra-HPLC-ESI-MS技術(shù)的代謝組學(xué)方法,研究了“腎上腺素-冰浴法”致大鼠急性血瘀證造模前后大鼠血漿和心臟組織代謝物譜的變化規(guī)律。在正離子模式下,檢測到血漿中的12個和心臟組織中的16個生物標(biāo)志物。通過上述生物標(biāo)志物的變化,從系統(tǒng)水平評價了葛根素54 mg/kg、三七總皂苷27 mg/kg、葛根總黃酮54 mg/kg預(yù)防性給藥一周后造模,急性血瘀證模型大鼠血漿和心臟組織在正離子模式下代謝物譜的變化規(guī)律,揭示了三七總皂苷與葛根總黃酮對大鼠急性血瘀證干預(yù)作用的機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn),三七總皂苷與葛根總黃酮對大鼠急性血瘀證干預(yù)作用的靶點與機(jī)理存在差異,并且除葛根素外,葛根總黃酮中尚存在其他可對抗大鼠急性血瘀證的活性成分。將三七總皂苷27 mg/kg和葛根總黃酮54 mg/kg進(jìn)行配伍,對急性血瘀證模型大鼠治療性給藥一次,以氯化鈉注射液為陰性對照,通過給藥后1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、5.0和6.0 h時血流變學(xué)指標(biāo)的下降率,繪制三七總皂苷配伍葛根總黃酮對急性血瘀證模型大鼠治療作用的藥理效應(yīng)-時間曲線;將急性血瘀證模型大鼠給藥后2.0 h的含藥血清提取物,對急性血淤證模型大鼠治療性給藥一次,以急性血瘀證模型大鼠空白血清提取物為陰性對照,通過給藥后0.5、1.0、1.5、2.0、3.0和4.0 h時血流變學(xué)指標(biāo)的下降率,繪制2.0 h含藥血清提取物對急性血瘀證模型大鼠治療作用的藥理效應(yīng)-時間曲線。二者進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn),藥物進(jìn)入機(jī)體發(fā)生療效的過程存在一定的“時間滯后”效應(yīng)。因此,在進(jìn)行藥效與血藥濃度的擬合時,應(yīng)將藥效-時間曲線沿時間軸進(jìn)行校正?；趗ltra-HPLC-ESI-MS/MS技術(shù),建立了大鼠血漿中3’-羥基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、6”-O-木糖基葛根素、葛根素芹菜糖苷、大豆苷6個主要葛根異黃酮類成分濃度的分析方法,以蘆丁為內(nèi)標(biāo),血漿經(jīng)含0.1%甲酸的甲醇沉淀蛋白處理后進(jìn)樣分析。該方法操作簡便、靈敏度高、專屬性強(qiáng)、分析時間短,符合生物樣品的分析要求。將該方法應(yīng)用于健康大鼠體內(nèi)上述6個葛根異黃酮類成分的藥代動力學(xué)研究后發(fā)現(xiàn),葛根提取物經(jīng)靜脈注射給藥后,6個主要異黃酮類成分的消除半衰期均小于1.5 h,于給藥后8.0h在體內(nèi)基本消除。基于HPLC-ESI-MS技術(shù),以尿液與血漿為例,進(jìn)行了葛根總黃酮在健康大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物研究,推測出葛根主要異黃酮類成分9個代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu),并發(fā)現(xiàn)其在尿液與血漿中具有很好的相關(guān)性。上述關(guān)于葛根6個主要異黃酮成分在大鼠體內(nèi)過程的研究,可填補(bǔ)近年來除葛根素外,其他葛根異黃酮類成分在藥代動力學(xué)研究與代謝產(chǎn)物研究方面的空白,為葛根異黃酮類成分后續(xù)研究的開展奠定基礎(chǔ)?；贖PLC-ESI-MS技術(shù),在正、負(fù)兩種離子模式下,對本研究使用的血塞通注射液與葛根提取物中主要成分進(jìn)行了分離鑒定,共檢測到64個色譜峰。其中,皂苷類成分26個,黃酮類成分38個。采用正離子模式下的選擇離子監(jiān)測模式,結(jié)合葛根主要異黃酮成分在大鼠體內(nèi)代謝產(chǎn)物的研究結(jié)果,對回注用急性血瘀證模型大鼠給藥后2.0 h血清提取物中的藥物相關(guān)成分進(jìn)行了識別,共檢測到63個色譜峰,其歸屬包括藥物原型成分53個,代謝產(chǎn)物10個。從上述成分中選取44個色譜峰作為指標(biāo)成分,采用正離子模式下的選擇反應(yīng)監(jiān)測模式,建立了大鼠血漿中多指標(biāo)成分的不加校正因子的內(nèi)參比分析法,以黃芩苷和地高辛為內(nèi)標(biāo),血漿經(jīng)含0.1%甲酸的乙腈沉淀蛋白處理后進(jìn)樣分析。該方法操作簡便、靈敏度高、專屬性好、符合生物樣品的分析要求。采用該方法于三七總皂苷27 mg/kg配伍葛根總黃酮54 mg/kg經(jīng)尾靜脈給藥后1.0 h、1.5 h、2.0 h、2.5 h、3.0 h、3.5 h、4.0 h、5.0 h和6.0 h九個不同時間點,對急性血瘀證大鼠血漿中上述44個色譜峰以不加校正因子的內(nèi)參比分析法進(jìn)行了分析,為藥效與血藥濃度的擬合提供了準(zhǔn)確可靠的血藥濃度數(shù)據(jù)。在藥效學(xué)檢測指標(biāo)發(fā)生改變的時間區(qū)間內(nèi)（1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、5.0和6.0 h）,將各指標(biāo)成分的血藥濃度數(shù)據(jù)取自然對數(shù)值后,與校正“時滯效應(yīng)”后的藥效學(xué)指標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合,并以得到回歸曲線的斜率為權(quán)重,將不同時間點各指標(biāo)成分濃度的自然對數(shù)值分別進(jìn)行加權(quán)組合,求得各時間點的“組合血藥濃度”,并與校正“時滯效應(yīng)”后該時間點的藥效學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),“組合血藥濃度”與30/s切變率下全血黏度與血漿黏度的下降率存在明顯的全程相關(guān)性,說明采用PK-PD擬合后,以回歸曲線的顯著性系數(shù)作為藥效物質(zhì)基礎(chǔ)評價的定性指標(biāo)、以曲線斜率作為其定量指標(biāo),即對藥效貢獻(xiàn)大?。ò▍f(xié)同與拮抗作用）的綜合評價模式是可行的。三七總皂苷與葛根總黃酮配伍使用時,引起急性血瘀證模型大鼠全血黏度發(fā)生變化的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)可能為包括葛根素、大豆苷、3’-羥基葛根素、三七皂苷R1和人參皂苷Rg1等在內(nèi)的28個化學(xué)成分;引起急性血疲證模型大鼠血漿黏度發(fā)生變化的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)可能為包括3’-羥基葛根素、6”-O-木糖基葛根素、葛根素芹菜糖苷、三七皂苷R1和人參皂苷Rgi等在內(nèi)的34個化學(xué)成分。本研究通過建立“組合血藥濃度”-藥效學(xué)模型,進(jìn)行了三七總皂苷配伍葛根總黃酮對大鼠急性血瘀證干預(yù)作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究,旨在為中藥及其復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的系統(tǒng)研究模式構(gòu)建示范性平臺,解決目前藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究中的瓶頸問題。
王琴[7]（2012）在《梓葛凍干粉針的藥代動力學(xué)及改善血腦屏障通透性的機(jī)制研究》文中研究指明背景：梓葛凍干粉針是依據(jù)古方和現(xiàn)代藥理學(xué)研究,自主研發(fā)的中藥單體復(fù)方新藥,已申請國家發(fā)明專利,主要由梓醇和葛根素配伍而成,用于治療腦缺血及其后遺癥。前期藥理學(xué)實驗表明：梓葛凍干粉針能提高腦神經(jīng)血管單元的耐缺氧能力、保護(hù)神經(jīng)元；抑制氯化鈷誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡；改善局限性永久性腦缺血大鼠腦血流,減輕腦水腫等作用。本課題獲得了重慶市科技攻關(guān)計劃項目（No.CSTC,2010AC5011）;重慶市衛(wèi)生局中醫(yī)藥科技項目（No.2010-2-148）的支持。目的：研究梓葛凍干粉針在正常大鼠以及腦缺血模型大鼠的藥代動力學(xué),考察梓葛凍干粉針在大鼠肝腎分布,探討梓葛凍干粉針對腦缺血模型大鼠血腦屏障通透性的改善作用及其機(jī)理,旨在闡明梓葛凍干粉針的藥代動力學(xué)規(guī)律,并為其新藥創(chuàng)制提供依據(jù)。方法與結(jié)果：1.梓葛凍干粉針在正常大鼠血漿和腦脊液中的藥代動力學(xué)研究建立了HPLC-APCI-MS/MS方法測定大鼠血漿和腦脊液中梓醇的含量,HPLC-ESI-MS/MS方法測定大鼠血漿和腦脊液中葛根素的含量。梓醇的測定采用桃葉珊瑚苷為內(nèi)標(biāo),流動相為甲醇：20mM醋酸銨水溶液（V/V,50：50）,葛根素測定采用染料木素為內(nèi)標(biāo),流動相為0.1%甲酸甲醇：10mM醋酸銨水溶液（V/V,80：20）,流速0.6mL·min-1。運用Agilent6410三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜的多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式檢測,并進(jìn)行了方法學(xué)驗證。結(jié)果顯示,在各生物樣品濃度范圍內(nèi),均呈良好線性（r>0.990）,大鼠血漿、腦脊液中梓醇的最低定量限分別為10ng·mL-1、20ng·mL-1,葛根素的最低定量限均為20ng·mL-1,高、中、低濃度質(zhì)控樣品的日內(nèi)、同間精密度<15%,日內(nèi)、日間準(zhǔn)確度均在±15%范圍內(nèi),待測物和內(nèi)標(biāo)的提取回收率基本一致,說明所建立的方法靈敏,準(zhǔn)確、可靠,符合生物樣品分析測定的要求。應(yīng)用建立的方法,測定尾靜脈注射梓醇凍干粉針、葛根素凍干粉針和梓葛凍干粉針后,大鼠血漿和腦脊液中梓醇和葛根素的含量,數(shù)據(jù)經(jīng)藥動學(xué)軟件DAS2.1處理,獲得了梓醇和葛根素的血漿和腦脊液藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果表明,在梓葛凍干粉針組,梓醇的血漿和腦脊液達(dá)峰濃度（Cmax）分別為23024.4ng·mL-1和415.5ng·mL-1,半衰期（t1/2）為0.369h和1.022h,藥時曲線下面積（AUC（o～5h））為10732.5ng·h·mL-1和395.4ng·h·mL-1,平均滯留時間(MRT（0-∞）為0.437h和1.357h；血漿和腦脊液中葛根素的Cmax分別為56529.4ng·mL-1和899.6ng·mL-1,t1/2為0.311h和0.537h,AUC（0～5h）為17136.3ng·h·mL-1和449.6ng·h·mL-1, MRT（0-∞）為0.273h和0.640h；梓醇和葛根素在腦脊液中的Tmax分別為0.050h和0.080h,梓醇的AUC腦脊液/AUC血漿為4.14%,葛根素的AUC腦脊液/AUC血漿為2.77%。以上數(shù)據(jù)說明,梓葛凍干粉針的藥物成分均可透過正常大鼠血腦屏障,且達(dá)峰迅速,這將為確定梓葛凍干粉針的臨床用藥方案提供實驗依據(jù)。2.梓葛凍干粉針在腦缺血大鼠血漿和腦脊液中的藥代動力學(xué)研究運用以上建立的HPLC-APCI-MS/MS和HPLC-ESI-MS/MS方法對腦缺血模型大鼠體內(nèi)梓葛凍干粉針的藥代動力學(xué)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,梓醇的血漿和腦脊液Cmax分別為17523.2ng·mL-1和592.2ng·mL-1, t1/2為0.455h和0.860h, AUC（0～5h）為7165.1ng·h·mL-1和516.3ng·h·mL-1, MRT（0-∞）為0.451h和1.110h；血漿和腦脊液中葛根素的Cmax分別為632430ng·mL-1和1812.2ng·mL-1, t1/2為0.755h和0.593h, AUC（0～5h）為20059.8ng·h·mL-1和1011.0ng·h·mL-1, MRT（0-∞）為0.273h和0.383h；梓醇和葛根素在腦脊液中的Tmax分別為0.083h和0.050h,梓醇的AUC腦脊液/AUC血漿為8.22%,葛根素的AUC腦脊液/AUC血漿為6.96%。說明梓葛凍干粉針能透過腦缺血模型大鼠血腦屏障,且達(dá)峰迅速,有利于梓葛凍干粉針發(fā)揮治療作用。3.梓葛凍干粉針在腦缺血模型大鼠與正常大鼠的藥代動力學(xué)比較運用單因素方差分析（one-way ANOVA）的LSD-t檢驗進(jìn)行組間比較,分析結(jié)果表明,模型大鼠血漿中梓醇的Cmax和AUC（0～5h）較正常組顯著降低（P<0.05）,腦脊液中梓醇的Cmax較正常組顯著升高（P<0.05）；模型大鼠血漿中葛根素的t1/2較正常組顯著延長（P<0.05）,腦脊液中葛根素的Cmax和AUC（0～5h）較正常組顯著升高（P<0.05）；與正常大鼠相比,梓醇和葛根素在腦缺血模型大鼠的AUC腦脊液/AUC血漿值均顯著性升高（P<0.05）；其它藥代動力學(xué)參數(shù)無顯著差異（P>0.05）。說明在腦缺血病理狀態(tài)下,腦脊液中梓醇的達(dá)峰濃度顯著升高（P<0.05）,葛根素的達(dá)峰濃度和總循環(huán)量顯著升高（P<0.05）,梓醇與葛根素的血腦屏障透過率均顯著升高（P<0.05）,這都有利于梓葛凍干粉針治療腦缺血及其后遺癥。4.梓葛凍干粉針在大鼠肝腎組織的分布建立了測定大鼠肝腎組織中葛根素含量的HPLC-UV方法,最低定量限為0.375μg·mL-1,標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r>0.999）,高、中、低3個濃度下測得日內(nèi)和日間精密度RSD均低于15%,滿足生物樣品分析測定的要求。采用所建立的方法,對尾靜脈注射葛根素凍干粉針和梓葛凍干粉針后大鼠肝腎中葛根素的分布進(jìn)行了比較研究。結(jié)果表明,兩種制劑中葛根素在腎臟的Tmax一致,均為10min,MRT（0-∞）也基本一致,約為0.5h；與葛根素凍干粉針組相比,梓葛凍干粉針組腎臟中葛根素Cmax值顯著性降低（P<0.05）,僅為前者的81.54%,AUC（o～2h）值也顯著性降低（P<0.05）,僅為前者的74.46%。說明梓葛凍干粉針組中葛根素的腎臟分布較葛根素凍干粉針組顯著降低（P<0.05）。在肝臟組織中,梓葛凍干粉針組和葛根素凍干粉針組的Cmax值分別為20.9μg·g-1、23.8μg·g-1, AUC（0～2h）值分別為9.5μg·h·g-1、10.1μg·h·g-1, MRT（0-∞）值分別為1.746h、1.455h,兩組間比較無顯著性差異（P>0.05）。說明葛根素與梓醇配伍后,對葛根素的肝臟分布和消除無明顯影響。以上研究結(jié)果從藥代動力學(xué)方面證明,梓醇可降低葛根素在腎臟中的分布,梓葛凍干粉針的腎臟安全性可能更高。5.梓葛凍干粉針對血腦屏障通透性的影響及其機(jī)制初步研究了梓葛凍干粉針對血腦屏障通透性的影響及其機(jī)制。開顱法制備腦缺血模型,設(shè)正常組、模型組和藥物組,模型組與藥物組分別設(shè)1d、3d、7d三個小組,藥物組靜脈給與梓葛凍干粉針（32.7mg/kg）,模型組給予等體積生理鹽水。分別于連續(xù)給藥1、3、7d后,紫外分光光度法測定大鼠腦組織中伊文思藍(lán)的含量,考察梓葛凍干粉針對血腦屏障通透性的影響；通過免疫熒光和免疫印跡技術(shù)初步考察梓葛凍干粉針對腦微血管緊密連接相關(guān)蛋白Claudin-5、Occludin、ZO-1的分布和表達(dá)的影響。結(jié)果表明,在連續(xù)給藥7d后,模型組與藥物組腦組織中伊文思藍(lán)的含量分別為2.06μg·g-1和0.97μg·g-1,與模型組相比,梓葛凍干粉針能顯著降低腦缺血模型大鼠腦組織中伊文思藍(lán)含量（P<0.05）,說明梓葛凍干粉針改善了模型大鼠的血腦屏障通透性。免疫熒光結(jié)果顯示,與正常組相比,模型組腦血管周圍的Claudin-5.Occludin、ZO-1分布不連續(xù),且隨時間延長,逐漸減少；與模型組相比,隨給藥時間延長,藥物組腦血管周圍Claudin-5、Occludin、ZO-1的分布逐漸連續(xù),豐富。Western blot的檢測結(jié)果表明,與正常組相比,在第3d、7d,模型組的Claudin-5、Occludin、ZO-1表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）；與模型組相比,在第3d和7d時,藥物組的Claudin-5表達(dá)水平顯著升高（P<0.05）,在第3d時,藥物組的Occludin表達(dá)水平顯著升高（P<0.05）,在第7d時,藥物組的ZO-1表達(dá)水平顯著升高（P<0.05）。以上結(jié)果提示,梓葛凍干粉針降低腦缺血模型大鼠血腦屏障通透性的機(jī)制可能與增加腦微血管中緊密連接相關(guān)蛋白Claudin-5、Occludin、 ZO-1的分布和表達(dá)有關(guān)。結(jié)論：1.研究獲得了梓葛凍干粉針在血漿和腦脊液中的藥代動力學(xué)參數(shù),為確定梓葛凍干粉針的臨床用藥方案提供了參考依據(jù)。2.梓葛凍干粉針的藥物成分梓醇和葛根素在腦缺血模型大鼠腦脊液中的分布量顯著高于正常組,顯示梓葛凍干粉針用于治療腦缺血易于透過血腦屏障,制劑合理。3.梓葛凍干粉針中葛根素在腎臟的分布量顯著低于單純葛根素凍干粉針,說明與梓醇配伍后,梓醇降低了葛根素在腎臟的分布,梓葛凍干粉針對腎臟的安全性高于單純葛根素制劑。4.梓葛凍干粉針能顯著降低腦缺血時血腦屏障通透性,其機(jī)理可能與梓葛凍干粉針能增加微血管中緊密連接相關(guān)蛋白Occludin、ZO-1、Claudin的分布和表達(dá)有關(guān)。
邱碧菡[8]（2012）在《黃連解毒湯抗腦缺血有效部位的大孔樹脂組合篩選及其“方證對應(yīng)”的整合PK-PD初步研究》文中進(jìn)行了進(jìn)一步梳理中藥作為連接祖國醫(yī)學(xué)和臨床實踐的橋梁,其藥效物質(zhì)的獲取,不可避免地需要“去偽存真,去粗取精”,因而“分離”是中醫(yī)藥領(lǐng)域的關(guān)鍵技術(shù)。而采用怎樣的工業(yè)化技術(shù),如何合理評價分離的效果,是當(dāng)前面臨的一個重要問題。大孔樹脂吸附是利用一類有機(jī)高聚物吸附劑吸附溶液中有效成分的方法,在中草藥有效成分的提取分離方面較其他分離手段已顯示出其獨特的作用。而采用樹脂組合的方式,突破單一樹脂對復(fù)方某一種（類）成分的選擇性吸附局限,實現(xiàn)多成分的群集最優(yōu)分離,對于探索現(xiàn)代分離技術(shù)對中藥復(fù)雜體系的適宜性,實現(xiàn)中藥復(fù)方的等效分離,具有重大意義。本論文選擇物質(zhì)基礎(chǔ)研究較多、對腦缺血損傷有明確藥理作用的經(jīng)典方——黃連解毒湯為研究對象,在前期研究的基礎(chǔ)上,采用大孔吸附樹脂組合精制的方法獲取其抗腦缺血有效部位,并在“方證對應(yīng)”理論指導(dǎo)下對此有效部位開展了藥動-藥效學(xué)（PK-PD）研究,通過構(gòu)建整合PK-PD模型,評價有效部位的藥動學(xué)與藥效學(xué)相關(guān)性,為黃連解毒湯的臨床合理用藥及劑型改進(jìn)奠定實驗基礎(chǔ)。研究目的:探索黃連解毒湯的大孔樹脂組合精制條件,實現(xiàn)復(fù)方的最優(yōu)分離方法;基于“方證對應(yīng)”機(jī)理,研究黃連解毒湯有效部位中主要成分在腦缺血模型和正常大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)和藥效動力學(xué)差異,為黃連解毒湯的合理用藥和臨床應(yīng)用提供參考。研究內(nèi)容:1)采用大孔吸附樹脂及組合精制黃連解毒湯復(fù)方水提液,獲取各組精制產(chǎn)物;通過細(xì)胞藥效學(xué)篩選,獲得黃連解毒湯抗腦缺血有效部位。2)黃連解毒湯抗腦缺血有效部位中主要成分中小檗堿、巴馬汀、黃芩苷和梔子苷在腦缺血模型和正常大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)和抗自由基氧化藥效動力學(xué)研究。研究方法:1)采用X-5等1 1種不同極性的大孔吸附樹脂及6種組合精制黃連解毒湯復(fù)方水提液,HPLC法測定復(fù)方水提液在不同大孔樹脂及其組合上指標(biāo)成分含量的動態(tài)變化,計算得到吸附-解吸率并繪出吸附-解吸動力學(xué)曲線,從化學(xué)成分轉(zhuǎn)移角度,比較各組精制效果。同時進(jìn)行細(xì)胞藥效學(xué)篩選,比較各組精制產(chǎn)物對缺氧缺糖PC12細(xì)胞的保護(hù)作用,綜合分析獲得黃連解毒湯抗腦缺血有效部位。2)采用電凝法制備腦缺血模型,和假手術(shù)大鼠分別灌胃相同劑量藥物,給藥后分別在規(guī)定的時間取血,置于肝素鈉抗凝的離心管中備用。含藥血漿經(jīng)處理后,建立血漿中小檗堿、巴馬汀、黃芩苷和梔子苷的含量測定方法;同時進(jìn)行抗自由基氧化藥效動力學(xué)研究,測定不同時間點血漿SOD、MDA值。考察不同機(jī)體狀態(tài)對小檗堿、巴馬汀、黃芩苷和梔子苷藥代動力學(xué)及抗氧化藥效動力學(xué)的影響規(guī)律。研究結(jié)果:組合樹脂6（HPD100-AB-8 2:1）精制黃連解毒湯能夠較好地實現(xiàn)等效分離,發(fā)揮原復(fù)方抗腦缺血藥效作用;有效部位中小檗堿、巴馬汀、黃芩苷和梔子苷四種主要成分在腦缺血病理模型與正常機(jī)體內(nèi)表現(xiàn)出一定的差異,主要表現(xiàn)為:模型組吸收效果較假手術(shù)組要好,且吸收更快,達(dá)峰濃度更高。SOD、MDA值同樣出現(xiàn)差異,表明腦缺血造成大鼠體內(nèi)發(fā)生缺氧損傷。大鼠灌胃給藥后,SOD活力出現(xiàn)回升,MDA水平顯著降低,表明黃連解毒湯有效部位能夠改善由于缺血損傷導(dǎo)致的缺氧抵抗。研究結(jié)論:通過大孔樹脂組合精制結(jié)合藥效篩選方式獲取了黃連解毒湯抗腦缺血有效部位,建立了 HPLC同時測定黃連解毒湯中四種指標(biāo)性成分血藥濃度的方法;得出了黃連解毒湯有效部位中主要指標(biāo)成分在腦缺血模型和正常大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)和藥效動力學(xué)差異,為藥代動力學(xué)研究作了新的探索,也為黃連解毒湯的合理用藥和新藥創(chuàng)制提供了依據(jù);同時首次嘗試采用樹脂組合的手段實現(xiàn)多成分的分離,為中藥復(fù)方的等效分離提供了可借鑒的方法。
冉川蓮,段俊國,蹇文淵,李強(qiáng)[9]（2012）在《葛根素藥代動力學(xué)研究進(jìn)展》文中研究指明中藥的作用特點是多成分、多途徑、多靶點,中藥藥代動力學(xué)的研究是中藥研究的關(guān)鍵技術(shù)之一。本文從生物樣品預(yù)處理、樣品測定、葛根素在體內(nèi)的吸收、分布、代謝排泄和藥動學(xué)參數(shù)等方面,較為系統(tǒng)地綜述了近10年來葛根素藥動學(xué)研究概況。
程雪龍[10]（2011）在《中藥藥物代謝動力學(xué)研究現(xiàn)狀及問題分析》文中研究指明中藥藥代動力學(xué)對研究中藥作用及現(xiàn)狀、設(shè)計以及研發(fā)新藥、劑型的改進(jìn)有重要意義。本文對中藥藥代動力學(xué)的研究現(xiàn)狀及問題分析做了綜述。
二、金森腦泰注射劑中葛根素在正常和缺血再灌模型大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)研究（論文開題報告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實驗法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實踐的需要提出設(shè)計。
定性分析法：對研究對象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的研究，這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認(rèn)識進(jìn)一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進(jìn)行研究。
功能分析法：這是社會科學(xué)用來分析社會現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、金森腦泰注射劑中葛根素在正常和缺血再灌模型大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)研究（論文提綱范文）
（1）利用免疫分析法解析葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠中的藥代動力學(xué)特征（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 文獻(xiàn)綜述 |
| 綜述一：葛根素治療腦缺血損傷神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制研究進(jìn)展 |
| 1 拮抗細(xì)胞內(nèi)鈣離子的超載 |
| 2 抑制炎癥反應(yīng) |
| 3 減輕興奮性氨基酸毒性 |
| 4 抑制氧化應(yīng)激反應(yīng) |
| 5 促進(jìn)血管內(nèi)皮生長因子表達(dá) |
| 6 減輕腦水腫 |
| 7 增加腦血流量 |
| 8 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述二：葛根素藥代動力學(xué)研究進(jìn)展 |
| 1 樣品前處理 |
| 1.1 組織樣品預(yù)處理 |
| 1.2 血液樣品的預(yù)處理 |
| 2 樣品檢測 |
| 3 葛根素不同制劑的吸收 |
| 3.1 葛根素體內(nèi)分布 |
| 3.2 葛根素體內(nèi)代謝 |
| 4 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 前言 |
| 第二部分 實驗研究 |
| 實驗一：利用免疫分析法解析葛根素在正常大鼠中的組織代謝分布研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 實驗動物與分組 |
| 1.2 實驗試劑 |
| 1.3 主要儀器耗材 |
| 2 方法 |
| 2.1 試劑配制 |
| 2.2 給藥 |
| 2.3 取材 |
| 2.4 樣品處理 |
| 2.5 樣品檢測 |
| 2.6 數(shù)據(jù)處理 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 葛根素在正常大鼠血液中的代謝情況 |
| 3.2 葛根素在正常大鼠心臟中的代謝情況 |
| 3.3 葛根素在正常大鼠肝臟中的代謝情況 |
| 3.4 葛根素在正常大鼠脾臟中的代謝情況 |
| 3.5 葛根素在正常大鼠肺臟中的代謝情況 |
| 3.6 葛根素在正常大鼠腎臟中的代謝情況 |
| 3.7 葛根素在正常大鼠海馬中的代謝情況 |
| 3.8 葛根素在正常大鼠皮層中的代謝情況 |
| 3.9 葛根素在正常大鼠紋狀體中的代謝情況 |
| 3.10 高劑量組、中劑量組和低劑量組葛根素在血液和組織器官中的曲線下面積AUC(ng·min/ml) |
| 3.11 高劑量組、中劑量組和低劑量組的葛根素在血液和組織中的達(dá)峰濃度Cmax(ng/ml) |
| 4 討論 |
| 4.1 不同劑量的葛根素在血液中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.2 不同劑量的葛根素在心臟中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.3 不同劑量的葛根素在肝臟中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.4 不同劑量的葛根素在脾臟中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.5 不同劑量的葛根素在肺臟中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.6 不同劑量的葛根素在腎臟中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.7 不同劑量的葛根素在海馬中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.8 不同劑量的葛根素在皮層中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.9 不同劑量的葛根素在紋狀體中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.10 不同劑量的葛根素在不同臟器之間的組織分布 |
| 實驗二：葛根素在腦缺血再灌注損傷模型大鼠中的組織分布藥代動力學(xué)研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 實驗動物與分組 |
| 1.2 實驗試劑 |
| 1.3 主要儀器耗材 |
| 2 方法 |
| 2.1 試劑配制 |
| 2.2 MCAO模型制備與給藥 |
| 2.3 取材 |
| 2.4 樣品處理 |
| 2.5 樣品檢測 |
| 2.6 數(shù)據(jù)處理 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 葛根素在MCAO模型大鼠血液中的代謝 |
| 3.2 葛根素在MCAO模型大鼠心臟中的代謝 |
| 3.3 葛根素在MCAO模型大鼠肝臟中的代謝 |
| 3.4 葛根素在MCAO模型大鼠脾臟中的代謝 |
| 3.5 葛根素在MCAO模型大鼠肺臟中的代謝 |
| 3.6 葛根素在MCAO模型大鼠腎臟中的代謝 |
| 3.7 葛根素在MCAO模型大鼠左側(cè)海馬中的代謝 |
| 3.8 葛根素在MCAO模型大鼠右側(cè)海馬中的代謝 |
| 3.9 高劑量組、中劑量組和低劑量組的葛根素在MCAO模型大鼠血液和組織器官的曲線下面積AUC(ng-min/ml) |
| 3.10 高劑量組、中劑量組和低劑量組的葛根素在MCAO模型大鼠血液和組織器官的達(dá)峰濃度Cmax(ng/ml) |
| 4 討論 |
| 4.1 不同劑量的葛根素在血液中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.2 不同劑量的葛根素在心臟中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.3 不同劑量的葛根素在肝臟中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.4 不同劑量的葛根素在脾臟中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.5 不同劑量的葛根素在肺臟中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.6 不同劑量的葛根素在腎臟中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.7 不同劑量的葛根素在左側(cè)海馬中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.8 不同劑量的葛根素在右側(cè)海馬中的藥代動力學(xué)特征 |
| 4.9 不同劑量的葛根素在組織分布中的藥代動力學(xué)特征 |
| 實驗三：葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠中的組織分布藥代動力學(xué)比較 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 不同劑量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠血液中的藥代動力學(xué)特征差異 |
| 3.2 不同劑量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠心臟中的藥代動力學(xué)特征差異 |
| 3.3 不同劑量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠肝臟中的藥代動力學(xué)特征差異 |
| 3.4 不同劑量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠脾臟中的藥代動力學(xué)特征差異 |
| 3.5 不同劑量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠肺臟中的藥代動力學(xué)特征差異 |
| 3.6 不同劑量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠腎臟中的藥代動力學(xué)特征差異 |
| 3.7 比較不同劑量的葛根素在正常大鼠的海馬和MCAO模型大鼠左側(cè)海馬、右側(cè)海馬中的藥代動力學(xué)特征差異 |
| 4 討論 |
| 5 小結(jié) |
| 結(jié)語 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附錄 |
| 致謝 |
| 在學(xué)期間主要研究成果 |
| 個人簡歷 |
（2）葛根素體內(nèi)藥代動力學(xué)研究進(jìn)展（論文提綱范文）
| 1生物樣品前處理 |
| 2檢測方法 |
| 3體內(nèi)過程 |
| 4葛根素藥動學(xué)影響因素 |
| 5研究展望 |
（3）基于MD-MS技術(shù)研究葛根總黃酮及葛根素靜脈和鼻腔給藥的藥動學(xué)差異（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 文獻(xiàn)綜述 |
| 前言 |
| 第一章 葛根的提取純化工藝研究及其對Bcl-2 mRNA表達(dá)的影響 |
| 第一節(jié) 葛根提取工藝研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第二節(jié) 葛根純化工藝研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第三節(jié) 葛根純化放大工藝研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第四節(jié) 葛根提取物的化學(xué)成分分析 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第五節(jié) 葛根素及葛根提取物對Bcl-2 mRNA表達(dá)的影響 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第二章 微透析及HPLC-MS/MS方法建立 |
| 第一節(jié) 微透析探針回收率體外實驗研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第二節(jié) 微透析探針在體回收率研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第三節(jié) HPLC-MS/MS方法學(xué)的建立 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第三章 葛根素不同途徑給藥大鼠血液及嗅球部位藥動學(xué)研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第四章 葛根素不同途徑給藥MCAO模型大鼠血液及嗅球部位藥動學(xué)研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第五章 葛根總黃酮不同途徑給藥MCAO模型大鼠血液及嗅球部位葛根素藥動學(xué)研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第六章 葛根素鼻腔給藥入腦機(jī)理研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 全文總結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個人簡歷 |
（4）葛根總黃酮胃腸道粘附漂浮制劑的制備與研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文縮略語表 |
| 前言 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 文獻(xiàn)綜述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第一章 葛根總黃酮基本理化性質(zhì)考察 |
| 1. 儀器、試劑 |
| 2. 實驗方法 |
| 3. 實驗結(jié)果 |
| 4. 討論與小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二章 葛根總黃酮Caco-2細(xì)胞透膜性 |
| 1. 儀器與試劑 |
| 2. 實驗方法 |
| 2.1 Caco-2細(xì)胞模型的建立 |
| 2.2 葛根總黃酮透膜實驗 |
| 3. 實驗結(jié)果 |
| 4. 討論與小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第三章 葛根總黃酮磷脂復(fù)合物的制備 |
| 1. 儀器、試藥 |
| 2. 實驗方法 |
| 3. 實驗結(jié)果 |
| 4. 討論與小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第四章 葛根總黃酮胃腸道粘附漂浮制劑的制備 |
| 1. 儀器、試藥 |
| 2. 實驗方法 |
| 3. 實驗結(jié)果 |
| 4. 討論和小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第五章 葛根總黃酮胃腸道生物粘附漂浮制劑的大鼠體內(nèi)生物利用度考察 |
| 1. 儀器、試藥、實驗動物 |
| 2. 實驗方法 |
| 3. 實驗結(jié)果 |
| 4. 討論與小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 全文總結(jié) |
| 作者簡介 |
| 致謝 |
| 附錄A |
（5）基于理化性質(zhì)—藥效—體內(nèi)外吸收評價葛根素和天麻素配伍應(yīng)用的合理性（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 技術(shù)路線 |
| 文獻(xiàn)綜述 |
| 第一篇葛根素與天麻素配伍臨床應(yīng)用概述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二篇 中藥復(fù)方藥代動力學(xué)的研究思路方法簡述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第三篇 葛根素藥代動力學(xué)研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第四篇 天麻素藥代動力學(xué)研究進(jìn)展 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第五篇 Caco-2單層細(xì)胞模型用于預(yù)測藥物的轉(zhuǎn)運研究 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 實驗部分 |
| 第一章 葛根素和天麻素配伍理化性質(zhì)研究 |
| 第一節(jié) 葛根素和天麻素平衡溶解度測定 |
| 1 儀器與材料 |
| 2 方法 |
| 2.1 葛根素及天麻素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 |
| 2.2 葛根素及天麻素平衡溶解度的測定 |
| 2.3 天麻素對葛根素平衡溶解度的影響 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 葛根素、天麻素標(biāo)準(zhǔn)曲線 |
| 3.2 葛根素、天麻素平衡溶解度測定 |
| 3.3 天麻素對葛根素溶解度的影響 |
| 4 小結(jié)與討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二節(jié) 葛根素、天麻素及二者配伍后油水分配系數(shù)測定 |
| 1 儀器與材料 |
| 2 方法 |
| 2.1 葛根素、天麻素含量測定方法的建立與確證 |
| 2.2 葛根素、天麻素油水分配系數(shù)的測定 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 方法學(xué)考察 |
| 3.2 葛根素、天麻素油水分配系數(shù) |
| 4 小結(jié)與討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二章 葛根素和天麻素配伍抗氧化和改善微循環(huán)藥效研究 |
| 第一節(jié) 葛根素和天麻素配伍體外DPPH自由基清除作用 |
| 1 儀器與材料 |
| 2 方法 |
| 2.1 DPPH自由基溶液線性范圍考察 |
| 2.2 DPPH自由基溶液穩(wěn)定性的考察 |
| 2.3 樣品清除DPPH自由基反應(yīng)時間的考察 |
| 2.4 各成分IC_(50)測定 |
| 2.5 不同濃度葛根素和天麻素DPPH自由基清除率相互影響 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 DPPH自由基溶液線性范圍考察 |
| 3.2 DPPH自由基溶液穩(wěn)定性考察 |
| 3.3 樣品與DPPH自由基反應(yīng)時間選擇 |
| 3.4 單獨葛根素、天麻素DPPH自由基清除率測定結(jié)果 |
| 3.5 葛根素和天麻素DPPH自由基清除率相互影響 |
| 4 小結(jié)與討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二節(jié) 葛根素和天麻素配伍改善微循環(huán)作用 |
| 1 儀器與材料 |
| 2 方法 |
| 2.1 抗凝血實驗 |
| 2.2 抗血小板聚集實驗 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 體內(nèi)外抗凝藥效結(jié)果 |
| 3.2 葛根素、天麻素單用或合用體內(nèi)抗血小板聚集測定 |
| 4 小結(jié)與討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第三章 葛根素和天麻素配伍在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)及相互作用 |
| 1 儀器與材料 |
| 2 方法 |
| 2.1 色譜條件 |
| 2.2 對照品及內(nèi)標(biāo)溶液的配制 |
| 2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品及質(zhì)控樣品的制備 |
| 2.4 血漿樣品的前處理 |
| 2.5 檢測 |
| 2.6 藥動學(xué)實驗 |
| 2.7 數(shù)據(jù)處理 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 方法學(xué)驗證 |
| 3.2 平均血藥濃度-時間曲線和藥動學(xué)參數(shù) |
| 4 小結(jié)與討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第四章 基于Caco-2細(xì)胞模型研究葛根素和天麻素吸收轉(zhuǎn)運機(jī)制及兩者相互作用 |
| 1 儀器與材料 |
| 2 方法 |
| 2.1 不同藥液組的配制 |
| 2.2 細(xì)胞模型的建立 |
| 2.3 藥物的跨膜雙向轉(zhuǎn)運試驗 |
| 2.4 細(xì)胞樣品中葛根素和天麻素的HPLC分析 |
| 2.5 數(shù)據(jù)分析 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 葛根素和天麻素的色譜學(xué)分析方法考察 |
| 3.2 藥物在Caco-2單層細(xì)胞模型轉(zhuǎn)運吸收結(jié)果 |
| 4 小結(jié)與討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第五章 全文總結(jié)與討論 |
| 致謝 |
| 個人簡歷 |
| 讀博期間發(fā)表論文 |
（6）三七總皂苷配伍葛根總黃酮活血化瘀的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究思路與方法 |
| 1.1.1 血清藥理學(xué)和血清藥物化學(xué) |
| 1.1.2 代謝組學(xué) |
| 1.1.3 藥動學(xué)-藥效學(xué)模型 |
| 1.2 血瘀證與活血化瘀中藥的研究現(xiàn)狀與展望 |
| 1.2.1 血瘀證與血流變學(xué) |
| 1.2.2 活血化瘀中藥注射液的研究概況 |
| 1.3 立題依據(jù)與研究思路 |
| 第二章 大鼠急性血瘀證模型與其尿液代謝物譜的研究 |
| 儀器 |
| 藥品與試劑 |
| 實驗動物 |
| 2.1 模型的篩選 |
| 2.1.1 溶液的制備 |
| 2.1.2 分組與造模 |
| 2.1.3 生物樣品的采集 |
| 2.1.4 血流變學(xué)的測定 |
| 2.1.5 病理切片的制備 |
| 2.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 |
| 2.1.7 實驗結(jié)果 |
| 2.2 模型大鼠尿液代謝物譜的變化規(guī)律研究 |
| 2.2.1 生物樣品的采集與預(yù)處理 |
| 2.2.2 色譜條件與質(zhì)譜條件 |
| 2.2.3 方法學(xué)驗證 |
| 2.2.4 數(shù)據(jù)處理 |
| 2.2.5 實驗結(jié)果 |
| 2.3 討論 |
| 第三章 三七總皂苷與葛根總黃酮對大鼠急性血瘀證干預(yù)作用的研究 |
| 儀器 |
| 藥品與試劑 |
| 動物 |
| 3.1 三七總皂苷與葛根總黃酮對模型大鼠血流變學(xué)改變的干預(yù)作用 |
| 3.1.1 溶液的制備 |
| 3.1.2 分組與給藥 |
| 3.1.3 生物樣品的采集 |
| 3.1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 |
| 3.1.5 實驗結(jié)果 |
| 3.2 三七總皂苷與葛根總黃酮對模型大鼠血漿與心臟代謝物譜改變的干預(yù)作用 |
| 3.2.1 生物樣品的預(yù)處理 |
| 3.2.2 色譜條件與質(zhì)譜條件 |
| 3.2.3 方法學(xué)驗證 |
| 3.2.4 數(shù)據(jù)處理 |
| 3.2.5 實驗結(jié)果 |
| 3.3 討論 |
| 第四章 三七總皂苷配伍葛根總黃酮治療大鼠急性血瘀證的藥效動力學(xué)研究 |
| 儀器 |
| 藥品與試劑 |
| 動物 |
| 4.1 三七總皂苷配伍葛根總黃酮治療大鼠急性血瘀證的效應(yīng)—時間關(guān)系研究 |
| 4.1.1 溶液的制備 |
| 4.1.2 分組與給藥 |
| 4.1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 |
| 4.1.4 實驗結(jié)果 |
| 4.2 大鼠含藥血清治療急性血瘀證的效應(yīng)-時間關(guān)系研究 |
| 4.2.1 血清樣品的采集與預(yù)處理 |
| 4.2.2 分組與回注 |
| 4.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 |
| 4.2.4 實驗結(jié)果 |
| 4.3 討論 |
| 第五章 葛根主要異黃酮類成分在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)與代謝產(chǎn)物研究 |
| 儀器 |
| 試劑 |
| 藥品 |
| 實驗動物 |
| 5.1 葛根中6個異黃酮類成分在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究 |
| 5.1.1 溶液的制備 |
| 5.1.2 血漿樣品的預(yù)處理 |
| 5.1.3 色譜條件與質(zhì)譜條件 |
| 5.1.4 方法學(xué)驗證 |
| 5.1.5 給藥方案與生物樣品的采集 |
| 5.1.6 實際樣品分析與數(shù)據(jù)處理 |
| 5.1.7 實驗結(jié)果 |
| 5.2 葛根異黃酮類成分在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物研究 |
| 5.2.1 溶液的制備 |
| 5.2.2 給藥方案與生物樣品的采集 |
| 5.2.3 生物樣品的預(yù)處理 |
| 5.2.4 色譜條件與質(zhì)譜條件 |
| 5.2.5 實驗結(jié)果 |
| 5.3 討論 |
| 第六章 三七總皂苷配伍葛根總黃酮治療大鼠急性血瘀證的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究 |
| 儀器 |
| 藥品與試劑 |
| 6.1 三七總皂苷與葛根總黃酮中主要化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定 |
| 6.1.1 溶液的制備 |
| 6.1.2 色譜條件與質(zhì)譜條件 |
| 6.1.3 實驗結(jié)果 |
| 6.2 大鼠含藥血清中主要化學(xué)分成分的結(jié)構(gòu)鑒定 |
| 6.2.1 血清樣品的采集與預(yù)處理 |
| 6.2.2 色譜條件與質(zhì)譜條件 |
| 6.2.3 實驗結(jié)果 |
| 6.3 模型大鼠血漿中指標(biāo)成分的濃度測定 |
| 6.3.1 溶液的制備 |
| 6.3.2 血漿樣品的預(yù)處理 |
| 6.3.3 色譜條件與質(zhì)譜條件 |
| 6.3.4 方法學(xué)驗證 |
| 6.3.5 給藥方案與生物樣品的采集 |
| 6.3.6 實際樣品分析與數(shù)據(jù)處理 |
| 6.3.7 實驗結(jié)果 |
| 6.4 基于組合藥動學(xué)探索三七總皂苷配伍葛根總黃酮活血化瘀的藥效物質(zhì)基礎(chǔ) |
| 6.4.1 藥效-時間曲線與血藥濃度-時間曲線的擬合 |
| 6.4.2 基于組合藥代動力學(xué)-藥效學(xué)模型的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)評價與驗證 |
| 6.5 討論 |
| 第七章 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個人簡介 |
| 附件 |
| 學(xué)位論文自愿預(yù)先檢測申請表 |
（7）梓葛凍干粉針的藥代動力學(xué)及改善血腦屏障通透性的機(jī)制研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英漢縮略語名詞對照 |
| 前言 |
| 第一章 梓葛凍干粉針的藥代動力學(xué)研究 |
| 第一節(jié) 梓葛凍干粉針在正常大鼠的藥代動力學(xué)研究 |
| 1. 實驗材料 |
| 2. 實驗方法 |
| 3. 實驗結(jié)果 |
| 4. 結(jié)論 |
| 第二節(jié) 梓葛凍干粉針在腦缺血模型大鼠的藥代動力學(xué)研究 |
| 1. 實驗材料 |
| 2. 實驗方法 |
| 3. 實驗結(jié)果 |
| 4. 結(jié)論 |
| 第三節(jié) 梓葛凍干粉針在正常和模型大鼠的藥代動力學(xué)比較 |
| 1. 數(shù)據(jù)處理 |
| 2. 實驗結(jié)果 |
| 3. 結(jié)論 |
| 第四節(jié) 梓葛凍干粉針中葛根素在大鼠肝腎的分布研究 |
| 1. 實驗材料 |
| 2. 實驗方法 |
| 3. 實驗結(jié)果 |
| 4. 結(jié)論 |
| 第五節(jié) 本章小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二章 梓葛凍干粉針對血腦屏障的影響及其機(jī)制研究 |
| 第一節(jié) 梓葛凍干粉針對血腦屏障通透性的影響 |
| 1. 實驗材料 |
| 2. 實驗方法 |
| 3. 實驗結(jié)果 |
| 4. 結(jié)論 |
| 第二節(jié) 梓葛凍干粉針對腦微血管緊密連接相關(guān)蛋白OCCLUDIN、CLAUDIN-5和ZO-1表達(dá)的影響 |
| 1. 實驗材料 |
| 2. 實驗方法 |
| 3. 實驗結(jié)果 |
| 4. 結(jié)論 |
| 第三節(jié) 本章小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 全文總結(jié) |
| 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 創(chuàng)新點及意義 |
| 思考與展望 |
| 文獻(xiàn)綜述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 博士學(xué)位期間科研工作匯報 |
（8）黃連解毒湯抗腦缺血有效部位的大孔樹脂組合篩選及其“方證對應(yīng)”的整合PK-PD初步研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 綜述 |
| (一) 文獻(xiàn)綜述 |
| 1 大孔樹脂在中藥分離精制領(lǐng)域的應(yīng)用 |
| 1.1 大孔樹脂性能概述 |
| 1.2 大孔樹脂對多種中藥成分的分離精制 |
| 2 黃連解毒湯治療腦血管疾病的藥效學(xué)研究進(jìn)展 |
| 2.1 改善腦血流量,縮小梗塞范圍 |
| 2.2 抗氧化、消除自由基 |
| 2.3 抗炎、降低細(xì)胞因子、抑制免疫反應(yīng) |
| 2.4 腦神經(jīng)保護(hù)、抗腦缺血 |
| 2.5 對蛋白表達(dá)的影響 |
| 3 黃連解毒湯藥動學(xué)研究進(jìn)展 |
| 3.1 正常機(jī)體的藥動學(xué)研究 |
| 3.2 病理模型機(jī)體的藥動學(xué)研究 |
| 4 PK/PD模型在中藥研究中的應(yīng)用 |
| 4.1 中藥單成分提取物研究 |
| 4.2 中藥材及復(fù)方研究 |
| 4.3 聯(lián)合用藥研究 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第二部分 黃連解毒湯抗腦缺血有效部位的篩選 |
| (一) 11種大孔樹脂精制黃連解毒湯的研究 |
| 1 儀器、試劑和試藥 |
| 2 大孔樹脂對黃連解毒湯的精制 |
| 2.1 復(fù)方上樣液的制備 |
| 2.2 樹脂的選擇 |
| 2.3 靜態(tài)吸附實驗 |
| 2.4 靜態(tài)解吸實驗 |
| 2.5 樣品液的測定 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 靜態(tài)吸附實驗結(jié)果 |
| 3.2 靜態(tài)解吸實驗結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附圖 |
| (二) 6種大孔樹脂組合精制黃連解毒湯的研究 |
| 1 儀器、試劑和試藥 |
| 2 大孔樹脂組合對黃連解毒湯的精制 |
| 2.1 復(fù)方上樣液的制備 |
| 2.2 樹脂的選擇及組合設(shè)計 |
| 2.3 靜態(tài)吸附實驗 |
| 2.4 靜態(tài)解吸實驗 |
| 2.5 樣品液的測定 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 靜態(tài)吸附實驗結(jié)果 |
| 3.2 靜態(tài)解吸實驗結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 附圖 |
| (三) 不同樹脂及其組合精制黃連解毒湯后的藥效學(xué)比較 |
| 1 儀器與試藥 |
| 2 各組大孔樹脂及組合精制產(chǎn)物的活性比較[4] |
| 2.1 藥液的制備 |
| 2.2 實驗方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| (四) 組合樹脂6 (HPD100-AB-8 2:1)精制工藝研究 |
| 1 儀器與試劑 |
| 2 方法與結(jié)果 |
| 2.1 組合樹脂吸附工藝參數(shù)的優(yōu)化 |
| 2.2 組合樹脂洗脫工藝參數(shù)的優(yōu)化[1] |
| 3 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第三部分 黃連解毒湯抗腦缺血有效部位的藥動腐效學(xué)研究 |
| (一) 血漿中有效部位主成分檢測的方法學(xué)考察 |
| 1 儀器與試藥 |
| 1.1 儀器 |
| 1.2 藥物及試劑 |
| 1.3 實驗動物 |
| 2 實驗方法 |
| 2.1 色譜條件 |
| 2.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制 |
| 2.3 血漿樣品的處理 |
| 3 方法學(xué)建立與考證 |
| 3.1 線性范圍及檢測限 |
| 3.2 回收率 |
| 3.3 精密度 |
| 3.4 專屬性 |
| 3.5 穩(wěn)定性 |
| 4 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| (二) 黃連解毒湯有效部位中主要成分在腦缺血模型大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)研究 |
| 1 儀器與試藥 |
| 2 實驗方法 |
| 2.1 動物分組及病理模型的制備 |
| 2.2 灌胃藥液的配制 |
| 2.3 血漿樣品的采集 |
| 2.4 血漿樣品的處理 |
| 2.5 數(shù)據(jù)處理 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 3.1 小檗堿在模型組和假手術(shù)組大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)比較 |
| 3.2 巴馬汀在模型組和假手術(shù)組大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)比較 |
| 3.3 黃芩苷在模型組和假手術(shù)組大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)比較 |
| 3.4 梔子苷在模型組和假手術(shù)組大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)比較 |
| 4 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| (三) 黃連解毒湯有效部位抗自由基氧化藥效動力學(xué)研究 |
| 1 儀器與試藥 |
| 2 實驗方法 |
| 3 實驗結(jié)果 |
| 3.1 SOD活力測定結(jié)果 |
| 3.2 MDA含量測定結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| (四) 有效部位在腦缺血大鼠體內(nèi)的多效應(yīng)成分整合藥代動力學(xué)與抗自由基藥效動力學(xué)的相關(guān)性 |
| 1 整合藥動學(xué)模型的建立 |
| 2 PKPD擬合 |
| 3 討論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 第四部分 展望 |
| (一) 思考與展望 |
| 在讀期間發(fā)表文章及科研情況 |
| 發(fā)表文章 |
| 參與課題 |
| 致謝 |
（9）葛根素藥代動力學(xué)研究進(jìn)展（論文提綱范文）
| 1 樣品處理 |
| 1.1 血漿樣品處理方法 |
| 1.2 組織樣品處理方法 |
| 2 檢測方法 |
| 3 體內(nèi)過程 |
| 3.1 吸收 |
| 3.2 分布 |
| 3.3 代謝 |
| 3.4 排泄 |
| 4 藥代動力學(xué)特點 |
| 5 討論 |
（10）中藥藥物代謝動力學(xué)研究現(xiàn)狀及問題分析（論文提綱范文）
| 1 研究現(xiàn)狀 |
| 1.1 生物效應(yīng)法 |
| 1.2 血藥濃度測定法 |
| 2 問題分析 |
| 2.1 藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不明確, 難以選擇觀測成分 |
| 2.2 缺少多成分的藥代參數(shù)綜合評價方法 |
| 2.3 多種成分間的相互作用規(guī)律以及復(fù)方配伍作用的規(guī)律的探討 |
| 2.4 如何利用中藥藥代學(xué)研究的結(jié)論來指導(dǎo)臨床合理用藥 |
| 3 小結(jié) |
四、金森腦泰注射劑中葛根素在正常和缺血再灌模型大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)研究（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]利用免疫分析法解析葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠中的藥代動力學(xué)特征[D]. 施榮楓. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2016(08)
- [2]葛根素體內(nèi)藥代動力學(xué)研究進(jìn)展[J]. 姜麗,嚴(yán)小軍,李云,徐國良. 江西中醫(yī)藥, 2015(08)
- [3]基于MD-MS技術(shù)研究葛根總黃酮及葛根素靜脈和鼻腔給藥的藥動學(xué)差異[D]. 李鵬躍. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2014(04)
- [4]葛根總黃酮胃腸道粘附漂浮制劑的制備與研究[D]. 宋軼群. 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院, 2014(01)
- [5]基于理化性質(zhì)—藥效—體內(nèi)外吸收評價葛根素和天麻素配伍應(yīng)用的合理性[D]. 姜麗. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2013(08)
- [6]三七總皂苷配伍葛根總黃酮活血化瘀的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究[D]. 趙星. 沈陽藥科大學(xué), 2013(01)
- [7]梓葛凍干粉針的藥代動力學(xué)及改善血腦屏障通透性的機(jī)制研究[D]. 王琴. 西南大學(xué), 2012(11)
- [8]黃連解毒湯抗腦缺血有效部位的大孔樹脂組合篩選及其“方證對應(yīng)”的整合PK-PD初步研究[D]. 邱碧菡. 南京中醫(yī)藥大學(xué), 2012(05)
- [9]葛根素藥代動力學(xué)研究進(jìn)展[J]. 冉川蓮,段俊國,蹇文淵,李強(qiáng). 中藥藥理與臨床, 2012(01)
- [10]中藥藥物代謝動力學(xué)研究現(xiàn)狀及問題分析[J]. 程雪龍. 黑龍江醫(yī)藥, 2011(05)
標(biāo)簽：葛根論文; 藥代動力學(xué)論文; 總黃酮論文; 缺血再灌注損傷論文; 腦缺血論文;