一、AB-8樹脂分離提取復(fù)葉耳蕨中總黃酮含量的測定（論文文獻(xiàn)綜述）
吳飄[1]（2021）在《采收期和遮蔭對有柄石韋藥材質(zhì)量的影響研究》文中研究指明有柄石韋（Pyrrosia petiolosa）為水龍骨科石韋屬植物,以干燥葉入藥,有利尿通淋、清肺止咳等功效,是“結(jié)石通片”和“復(fù)方石韋片”等中成藥的主要原料,黃酮類和酚類等物質(zhì)是其主要活性成分,其藥理作用包括抗炎利尿、抗氧化、護腎和鎮(zhèn)咳祛痰等。前期調(diào)研表明,采收期和光照是影響石韋藥材質(zhì)量的重要因素,但與之相關(guān)的研究甚少。因此,本文以有柄石韋為研究對象,比較不同月份有柄石韋的總黃酮、總酚、綠原酸和新綠原酸的含量及抗氧化活性差異;同時模擬有柄石韋生境進行不同遮蔭處理,研究遮蔭對有柄石韋生長和藥材質(zhì)量的影響,研究結(jié)果為有柄石韋的人工栽培、合理利用及保障藥材質(zhì)量穩(wěn)定提供依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:（1）有柄石韋的活性成分含量和抗氧化活性具有明顯的季節(jié)性變化特點。研究表明有柄石韋的總黃酮、總酚和綠原酸均是從冬季12月開始增加至次年春季3月～4月達(dá)到最高值,夏季7月緩慢下降至秋季11月的活性成分含量最低。3月的總黃酮含量最高,高達(dá)161.78 mg/g;4月的總酚含量最高,為61.31 mg/g;4月的的綠原酸含量較高,高達(dá)14.99 mg/g;7月的新綠原酸含量較高,為4.79 mg/g。春季采收有柄石韋的活性成分含量最高,但春季是有柄石韋葉片萌發(fā)旺盛期,夏季采收的有柄石韋的活性成分含量和抗氧化能力比秋冬季高。因此,綜合考慮藥材產(chǎn)量和質(zhì)量,建議將夏季作為有柄石韋的最佳采收季節(jié)。（2）有柄石韋不同部位的活性成分含量和抗氧化活性存在顯著差異。本研究中,營養(yǎng)葉和孢子葉的活性成分含量遠(yuǎn)高于葉柄,其中營養(yǎng)葉的綠原酸和新綠原酸含量最高,其次是孢子葉,葉柄最低。同月份的營養(yǎng)葉和孢子葉的綠原酸含量最高相差2.82 mg/g,且營養(yǎng)葉醇提物的抗氧化能力較強。因此,建議將營養(yǎng)葉作為主要采收部位。（3）有柄石韋對弱光具有較強的適應(yīng)能力,但適宜的強光照能促進葉片生長。研究表明,不同遮蔭下有柄石韋的Fv/Fm值變化小,葉綠素含量和凈光合速率無顯著性差異,表明有柄石韋適應(yīng)的光照范圍較廣。輕度遮蔭（50%透光率）環(huán)境比重度遮蔭（10%透光率）環(huán)境更適合有柄石韋的生長,當(dāng)植株從重度遮蔭環(huán)境移至輕度遮蔭時,植株生長指標(biāo)有所增加,當(dāng)植株從輕度遮蔭移至重度遮蔭時,葉片生長受到抑制。（4）輕度遮蔭有利于有柄石韋總黃酮成分的積累和提取物抗氧化活性的增強。輕度遮蔭有柄石韋的總黃酮含量和抗氧化活性均高于重度遮蔭。當(dāng)植株從輕度遮蔭環(huán)境轉(zhuǎn)移至重度遮蔭環(huán)境時,有柄石韋的總黃酮含量降低,抗氧化活性減弱;反之增加。因此,輕度遮蔭環(huán)境更適合栽培有柄石韋。
艾克山·吾拉木[2]（2020）在《黑果枸杞總黃酮分離純化及其降脂、抗肝癌活性初步研究》文中研究指明目的:采用響應(yīng)面法分離純化黑果枸杞總黃酮,建立HLP模型考察其降脂活性并初步研究黑果枸杞總黃酮體外對肝癌的抑制作用。方法:1)通過靜態(tài)和動態(tài)吸附試驗,分別以上樣濃度、上樣體積、上樣pH、洗脫液濃度、洗脫液體積和洗脫流速為考察因素,黑果枸杞總黃酮純化后含量為考察指標(biāo)進行單因素考察,在此基礎(chǔ)上選擇三因素三水平Box-Behnken實驗設(shè)計篩選黑果枸杞總黃酮純化工藝參數(shù)并進行驗證。2)將90只SD大鼠采用高脂飼料灌飼方式建立SD大鼠HLP模型。選取造模成功的SD大鼠60只,隨機分為6組（n=10）,分別為正常對照組、HLP模型組、辛伐他汀組（3.3 mg/kg）以及黑果枸杞總黃酮提取物高劑量組（100 mg/kg）、中劑量組（50 mg/kg）和低劑量組（25 mg/kg）。連續(xù)灌胃給藥4周,正常組喂養(yǎng)普通大鼠飼料,其余組喂養(yǎng)高脂飼料,給藥結(jié)束后,采用酶標(biāo)儀檢測血清和肝組織液中甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）和低密度脂蛋白（LDL-C）的濃度,血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的濃度、分析SD大鼠試驗前后的體重變化率和肝指數(shù)變化并觀察SD大鼠肝臟病變情況。3)采用MTT法檢測不同濃度黑果枸杞總黃酮純化物對正常肝細(xì)胞LO-2的存活率和對人肝癌細(xì)胞HepG-2的抑制率來確定最佳給藥時間和濃度,用已確定的三種濃度總黃酮純化物（25、50和100μg/mL）和20μg/mL順鉑給藥48 h,再利用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡和周期的變化情況以及用ELISA法檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)酶的活性。結(jié)果:1)在總黃酮提取液濃度4 mg/mL、pH4.0、按5 BV進行上樣,再用3 VB的80%乙醇在2 mL/min流速下采用NKA-9型大孔樹脂進行洗脫,黑果枸杞總黃酮含量為43.19%。2)與HLP模型組相比,黑果枸杞總黃酮提取物高、中劑量組SD大鼠的血清和肝組織中TG、TC和LDL-C值明顯降低,HDL-C值則升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）;與HLP模型組比較,黑果枸杞總黃酮提取物高、中劑量組中SD大鼠體重增重率和肝指數(shù)顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;與HLP模型組比較,SD大鼠各劑量組血清中SOD和GSH-Px的濃度均有升高,MDA濃度則降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。3)MTT結(jié)果顯示,隨著給藥時間的推移和濃度的增高,正常肝細(xì)胞LO-2的存活率逐漸降低。在低濃度（Con.≤100μg/mL）時藥物對LO-2細(xì)胞毒性很少,細(xì)胞存活較完整;HepG-2肝癌細(xì)胞的抑制率隨著給藥時間和濃度的增加而增高。在高濃度時,HepG-2細(xì)胞出現(xiàn)大規(guī)模變形和凋亡。隨著藥物濃度的提高,HepG-2細(xì)胞周期中G0/G1期細(xì)胞比例逐漸降低,S期中則依次增高,HepG-2細(xì)胞凋亡率也增大,最高凋亡率可高達(dá)78.8%,與凋亡相關(guān)的Bax和Caspase-3酶活性升高,Bcl-2酶活性則降低。結(jié)論:1)通過響應(yīng)面法考察出來的黑果枸杞總黃酮純化工藝參數(shù)準(zhǔn)確、可靠,此工藝制備得到的3批樣品,含量基本穩(wěn)定,平均值為43.19%,RSD值為1.12%,適用于工業(yè)化生產(chǎn)。2)黑果枸杞總黃酮提取物能有效調(diào)節(jié)機體脂質(zhì)代謝及提高機體抗氧化能力,對預(yù)防并治療高脂血癥有一定的應(yīng)用價值。3)黑果枸杞總黃酮純化物對HepG-2肝癌細(xì)胞的增殖有抑制作用,抑制率可高達(dá)98.27%。同時可能通過上調(diào)Bax和Caspase-3酶活性,下調(diào)Bcl-2酶活性來誘導(dǎo)HepG-2肝癌細(xì)胞的凋亡。黑果枸杞總黃酮純化物誘導(dǎo)HepG-2肝癌細(xì)胞周期阻滯于S期,進而使細(xì)胞停止分裂。
羅潔瑩[3]（2019）在《超聲波微波協(xié)同提取金柚幼果黃酮及其抗氧化機理》文中研究說明金柚幼果包括生理落果和人工疏果,年產(chǎn)量大而利用率低,金柚幼果中含有多種活性物質(zhì)包括類黃酮等,其含量遠(yuǎn)高于成熟的果實,且幼果的收集與加工相對容易,是金柚深加工原料的不二之選。因此,本研究采用超聲-微波協(xié)同技術(shù)對金柚幼果黃酮類化合物的提取工藝進行優(yōu)化,通過微波、超聲等9個方法對總黃酮得率、細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)、黃酮成分、抗氧化能力的影響進行分析,同時,采用AB-8大孔樹脂法對最優(yōu)條件下的黃酮組分進行LCMS分析,并以AAPH誘導(dǎo)紅細(xì)胞溶血模型探究其抗氧化能力及其機理。結(jié)果表明:（1）最優(yōu)的超聲-微波協(xié)同提取金柚幼果黃酮工藝條件:微波功率為410W,超聲波功率為420W,液料比為11:1,提取時間為42min,通過驗證得此工藝條件下總黃酮的得率達(dá)68.57%,與預(yù)測值70.03%接近。（2）超聲-微波協(xié)同技術(shù)能有效提高總黃酮得率。而這與輔助提取方法對細(xì)胞空間結(jié)構(gòu)的形成有直接關(guān)系,實驗發(fā)現(xiàn)不同輔助提取方法均使原本呈平面結(jié)構(gòu)的柚子粉發(fā)生不同程度的變化,其中溫度、時間、功率、處理方法均為影響空間結(jié)構(gòu)形成的重要因素。另外黃酮類物質(zhì)的成分在不同輔助提取方法中也不盡相同,且總黃酮得率與黃酮類物質(zhì)的種數(shù)沒有直接關(guān)系;所有的處理組中均發(fā)現(xiàn)2’’-O-乙?；?3’-O-甲基蘆丁和柚皮苷兩種黃酮類化合物。根據(jù)黃酮類化合物在不同處理組的分布進行聚類分析,發(fā)現(xiàn)超聲-微波協(xié)同技術(shù)對黃酮類物質(zhì)提取的明顯區(qū)別于超聲或微波單獨處理,且M400+U400-40處理組差異更為顯著。（3）以化學(xué)抗氧化法和AAPH誘導(dǎo)紅細(xì)胞溶血模型考察提取物的抗氧化活性,證實所有的處理組均表現(xiàn)出卓越的ABTS、DPPH的自由基清除能力,以及一定程度的Fe離子的還原能力。各處理組的提取物均能抑制由AAPH誘導(dǎo)的紅細(xì)胞溶血,且同一處理組的化學(xué)抗氧化能力與細(xì)胞抗氧化能力呈正相關(guān)關(guān)系。（4）AB-8大孔樹脂純化后得到CF黃酮組分,經(jīng)LCMS分析其由柚皮苷、2’’-O-乙酰基-3’-O-甲基蘆丁和5,7,8,3’-四羥基-3,4’-二甲氧基黃酮組成。經(jīng)過CF預(yù)處理后,AAPH誘導(dǎo)的紅細(xì)胞溶血受到抑制,并呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性。具體表現(xiàn)為MDA的生成量和LDH的溢出量均減少,說明細(xì)胞膜的完整性得到保護;GSH、GSSG和H2O2的含量與正常組無顯著性差異,SOD和GSH-Px的活性顯著性降低,說明紅細(xì)胞未處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。由此推斷CF是通過直接清除自由基,從而抑制AAPH引起的紅細(xì)胞溶血。
張敏,李志英[4]（2017）在《不同中藥總黃酮含量測定方法的選擇研究》文中研究指明微波輔助提取十種中藥中的總黃酮,以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品,用五種不同的測定方法探討不同中草藥中總黃酮的含量,研究黃酮結(jié)構(gòu)和測定方法之間的關(guān)系.結(jié)果表明:直接測定法更適合甘草、銀杏葉和陳皮;NaNO2-Al（NO3）3法更適合于山楂和黃芪;差示分光光度法更適合于野菊花、山楂、葛根和連翹;AlCl3法更適合于陳皮;熒光光度法除山楂外,其它中草藥測定均佳.根據(jù)總黃酮含量的測定方法的原理探討不同中藥中黃酮類物質(zhì)的結(jié)構(gòu).
劉一杰,薛永常[5]（2016）在《植物黃酮類化合物的研究進展》文中指出植物黃酮類化合物作為一類具有較高藥用價值的化合物,一直是國內(nèi)外生物類和醫(yī)藥類研究的熱門課題。隨著研究的不斷進展,黃酮類化合物的藥用價值及其構(gòu)效關(guān)系也不斷被發(fā)掘,越來越多的黃酮類化合物藥物制劑也相繼投入臨床應(yīng)用。綜述了近年來植物黃酮類化合物的研究進展,對其種類結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、藥理活性及分離提純與鑒定作了較為系統(tǒng)的闡述。針對生產(chǎn)工藝中存在的主要問題,提出了相應(yīng)的解決方法。展望了其在醫(yī)藥衛(wèi)生方面的應(yīng)用前景。
李輝敏[6]（2015）在《聚酰胺純化刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮的研究》文中指出目的研究聚酰胺樹脂純化刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮的工藝條件。方法以總黃酮的吸附率、純化率為評價指標(biāo),考察聚酰胺樹脂對刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮的吸附和洗脫條件。結(jié)果所得最佳純化工藝:上樣液p H值為5,上樣溶液黃酮質(zhì)量濃度調(diào)節(jié)為2.0 mg/ml,以70%乙醇為洗脫劑,洗脫流速為2.0 BV/h。結(jié)論聚酰胺樹脂能有效富集、純化刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮。
張義平,胡月萍,鄔亞華,孫維君,周許峰,曹俊,王麗麗,殷嫦嫦[7]（2015）在《復(fù)葉耳蕨渣總黃酮轉(zhuǎn)化提取與DPPH自由基清除活性的研究》文中進行了進一步梳理研究復(fù)葉耳蕨渣的土壤真菌發(fā)酵轉(zhuǎn)化提取其總黃酮和清除DPPH自由基活性。復(fù)葉耳蕨渣直篩發(fā)酵用優(yōu)勢菌株;通過單因素和正交實驗L9（34）優(yōu)化總黃酮提取,DPPH法評價轉(zhuǎn)化前后總黃酮抗氧化活性。研究得到優(yōu)勢菌株F2發(fā)酵復(fù)葉耳蕨渣后黃酮得率為（0.893%±0.035%）,較未發(fā)酵時總黃酮得率提高了27.0%,差異顯著。F2發(fā)酵復(fù)葉耳蕨渣在最佳提取條件（料液比1∶30（g/m L）,乙醇濃度70%,時間40min）下總黃酮產(chǎn)量較發(fā)酵前提高了30.6%。復(fù)葉耳蕨渣F2發(fā)酵前后總黃酮均表現(xiàn)出優(yōu)于VE的清除DDPH自由基能力,但發(fā)酵前后總黃酮清除DPPH自由基能力無顯著性差異。土壤真菌F2固體發(fā)酵增加了復(fù)葉耳蕨渣總黃酮的提取,復(fù)葉耳蕨渣黃酮提取物表現(xiàn)出比VE更強的清除DPPH自由基能力,作為一種天然抗氧劑具有良好的應(yīng)用前景。
余輝攀[8]（2014）在《萊菔化學(xué)成分和牡丹花提取物制備工藝及質(zhì)量控制方法研究》文中研究指明本論文主要分為兩個部分,第一部分為萊菔化學(xué)成分的分離與鑒定,第二部分為牡丹花瓣的提取工藝研究。研究目的白蘿卜,為十字花科萊蕨屬（Raphanus）植物蘿卜（PRaphanus sativus L.）的鮮根,在我國已有悠久的食用歷史?，F(xiàn)代藥理研究表明白蘿卜具有抗癌,抗氧化,和治療胃腸道疾病等作用。然而因為萊菔的化學(xué)成分報道較少,尤其是其精油成分未見有相關(guān)報道,導(dǎo)致其發(fā)揮藥效作用的化學(xué)成分不明確。因此本文研究了白蘿卜的化學(xué)成分,希望明確其藥效物質(zhì),以期對蘿卜的研究開發(fā)提供依據(jù)。牡丹（Paeonia suffruticosa Andrews）屬毛茛科芍藥屬植物,又名“富貴花”,是我國特產(chǎn)的重要觀賞植物和藥用植物。牡丹根皮是其常用中藥丹皮的來源。牡丹花目前主要作為觀賞的花卉,享譽古今中外,被尊為“花中之王和國花”?！皣档ぁ背司哂杏^賞價值以外,作為具有潛在的尚未開發(fā)的經(jīng)濟價值。最近（2013年12月）鳳丹牡丹花已經(jīng)被國家批準(zhǔn)為食品新原料（新資源食品）,同一時間,國家領(lǐng)導(dǎo)人到菏澤牡丹產(chǎn)業(yè)園視察,進一步提升了牡丹知名度。我們研究鳳丹牡丹花提取物的制備工藝,以期為（1）可作為普通食品的新原料;（2）可作為保健食品原料;（3）可作為美容化妝品原料;（4）可作為痛經(jīng)治療藥進一步研究,提供開發(fā)依據(jù)。研究方法和結(jié)果采用水回流提取萊菔鮮根化學(xué)成分,運用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜、半制備液相色譜等分離方法,從萊菔的鮮根中共分離出9個化合物,鑒定了 7個化合物。石油醚部位經(jīng)硅膠柱層析,用石油醚-乙酸乙酯溶劑系統(tǒng)洗脫,分離3個化合物,化合物1為熊果酸（20mg）,化合物2 β-谷甾醇（30mg）。乙酸乙酯部位經(jīng)硅膠柱層析,二氯甲烷-甲醇梯度洗脫分離得到化合物3小檗堿（20mg）。正丁醇部位經(jīng)硅膠柱層析,二氯甲烷-甲醇梯度洗脫,半制備液相,凝膠柱色譜分離得到5個化合物,解出3個化合物,分別為化合物3小檗堿（8g）,化合物4胡蘿卜苷（20mg）,化合物5正丁基-果糖苷（20mg）。其中化合物小檗堿,熊果酸,正丁基-果糖苷,細(xì)辛脂素都是首次從該屬當(dāng)中分出來,胡蘿卜苷,β-谷甾醇是首次從該植物中分出。其中小檗堿的含量很高,從80kg蘿卜中分出10g左右,已經(jīng)純化的有8g左右。采用水蒸氣蒸餾法提取萊菔鮮根精油化學(xué)成分,GC/MS分離定性,面積歸一化法定量,經(jīng)計算機檢索和人工推測共鑒定出42種化合物。白蘿卜精油中含有醇、醛、酯、酮、酸及含氮化合物和烷烴類化合物,精油主要含有1 1,14,17-二十碳三烯酸甲酯,二甲基三硫,棕櫚酸,亞麻酸乙酯,二甲基四硫醚。牡丹花的醇提取工藝主要以提取物中的總黃酮和花青素為指標(biāo),進行工藝考察?？傸S酮測定方法選用了 AlC13-CH300K-絡(luò)合法和保健品測定法兩種方法來比較,花青素測定的方法選擇了對照品法和PH色差法來比較。先單因素實驗考察,再結(jié)合34的正交試驗來優(yōu)化提取工藝。最終以總黃酮為指標(biāo)的提取工藝為A3B12D2,以花青素為指標(biāo)的提取工藝為A2B1C3D2,并以此提取工藝分別測定了四個品種的牡丹花花瓣的總黃酮和花青素含量,依次為淡紅色鳳丹牡丹的總黃酮含量為1.33%,花青素含量為0.154%;紅色鳳丹牡丹的總黃酮含量為2.12%,花青素含量為0.174%;紫色色鳳丹牡丹的總黃酮含量為2.02%,花青素含量為0.778%;黃色鳳丹牡丹的總黃酮含量為1.68%,花青素含量為0.083%。精油的提取工藝以精油的香味為感官指標(biāo)和浸膏率為精確指標(biāo)來研究精油的工藝,先單因素實驗考察,再結(jié)合正交試驗來優(yōu)化該工藝,最終確定了精油提取工藝為以水為溶劑,A1B2C3的提取工藝。精油的純化工藝考察了生物學(xué)方法,物理學(xué)方法,有機溶劑方法來比較,最終選擇了有機溶劑法,并比較了幾種有機溶劑,最終選擇了水蒸氣蒸餾法來純化精油,考察了萃取溶劑、液料比、萃取時間三個因素,并通過正交試驗來優(yōu)化該工藝最終確定精油的純法工藝為A1B2C2,用精油的最佳提取和純化工藝制得了鮮花和鮮花提取液的精油,并通過GC-MS分析鑒定了其精油成分。鮮花32g中,精油含量為0.45%,41g牡丹花的水提取液中的精油含量為0.256%,牡丹花精油都為淡白色,具有濃郁的香味,密度<1g/ml。制得的精油分別通過GC-MS測定精油成分,從牡丹鮮花精油中分離出27種成分,共檢出其中22種化合物;從牡丹花提取液中分離出24種成分,共檢出19種成分。牡丹鮮花中含有萜烯類、酯類、酮類、酸及豐富的烴類化合物。牡丹花提取液中含有萜烯類、酯類及豐富的烴類化合物。兩者鑒定出的化合物基本上相同,鮮花中鑒定出4-苯基-4,4a,5,6,7,8-六氫-2（3H）-萘酮和杜鵑酮,從牡丹花提取液中鑒定出油酸乙酯。研究了溫度、光照、氧化劑和還原劑、金屬離子對牡丹花提取物穩(wěn)定性的影響,結(jié)果表明牡丹花提取物在4℃相對較穩(wěn)定,25℃最不穩(wěn)定,40℃相對穩(wěn)定,光照對牡丹花提取物穩(wěn)定性影響較低。氧化劑過氧化氫和還原劑亞硫酸鈉對牡丹花提取物穩(wěn)定性影響大,然后是空氣。金屬離子Na+、K+、Mg2+在兩天內(nèi)對牡丹花提取物穩(wěn)定,Fe3+ Mg2+ Cu2+對牡丹花提取物很不穩(wěn)定。3天以后吸光度都逐漸變大。按照2010版藥典的方法測定了 4個品種牡丹花灰分和水分,并且初步制定了牡丹花提取物的質(zhì)量控制方法。研究結(jié)論從蘿卜中分出9個化合物鑒定出7個化合物,其中化合物小檗堿,熊果酸,正丁基-果糖苷是首次從該屬當(dāng)中分出來,胡蘿卜苷,β-谷甾醇是首次從該植物中分出,首次用GC-MS分析了萊菔精油的成分。研究建立了牡丹花瓣的總黃酮和花青素提取工藝和測定方法,為開發(fā)利用牡丹花奠定了基礎(chǔ)。建立了牡丹花矢車菊素-3-0-葡萄糖苷的含量測定方法。建立了牡丹花精油的提取和純化工藝,測了牡丹花和牡丹提取物的灰分和水分含量。用GC-MS分析了鳳丹牡丹花和提取物精油成分。初步建立了牡丹花提取物的質(zhì)量控制方法。
李輝敏[9]（2014）在《刺頭復(fù)葉耳蕨的藥學(xué)及其抗腫瘤作用機制研究》文中進行了進一步梳理刺頭復(fù)葉耳蕨（Arachniodes exilis Ching）是鱗毛蕨科復(fù)葉耳蕨屬植物,在我國主要分布于長江流域以南地區(qū)及山東、河南等省,民間習(xí)用其根莖入藥。目前,國內(nèi)外對其所含化學(xué)成分和生物活性的研究報道很少,本研究對刺頭復(fù)葉耳蕨進行了生藥學(xué)、總黃酮部位提取純化工藝、抗腫瘤作用等研究,并初步制定了刺頭復(fù)葉耳蕨藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),為規(guī)范其使用及進一步研究刺頭復(fù)葉耳蕨的生物活性、開發(fā)其藥用價值提供了基礎(chǔ)。在生藥學(xué)研究中,分別從基源、性狀、顯微特征方面對刺頭復(fù)葉耳蕨進行了系統(tǒng)的鑒別研究,并對其進行了化學(xué)成份系統(tǒng)預(yù)試及紫外吸收特征考察等研究。從顯微鑒別結(jié)果分析,刺頭復(fù)葉耳蕨葉柄橫切面的組織結(jié)構(gòu)特殊,從葉柄橫切面可觀察到分體中樞為5,維管組織有限外韌型,其中三個分體中樞環(huán)列,2個分體中樞較大,形態(tài)各異,在其木質(zhì)部形成明顯具拖尾的喇叭形,對于刺頭復(fù)葉耳蕨的鑒定有較好的科學(xué)意義；化學(xué)成份系統(tǒng)預(yù)試結(jié)果表明,刺頭復(fù)葉耳蕨中含有黃酮類化合物、酚性化合物、萜類、還原糖等化學(xué)成份,不含有皂苷和生物堿；在單一紫外譜線組法鑒別中草藥的基礎(chǔ)上,利用刺頭復(fù)葉耳蕨不同極性溶劑萃取部位的紫外掃描譜線相結(jié)合來表達(dá)其特征。本研究采用超聲波輔助乙醇提取法對刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮提取工藝進行研究,在單因素試驗基礎(chǔ)上進行了提取條件正交試驗；并采用聚酰胺樹脂純化法,建立了其總黃酮的純化工藝。所得最佳提取工藝為：溶劑為60%乙醇,料液比為1：20,超聲波輔助提取3次,每次提取30min。所得最佳純化工藝為：上樣液濃度為2.0mg/ml,上樣液pH值為5,以70%乙醇為洗脫劑,洗脫速度為2.0BV/h。本研究對刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮進行了體外抗腫瘤活性的研究。結(jié)果表明其可抑制人肝癌HepG2及肺癌A549細(xì)胞的增殖,其活性優(yōu)于刺頭復(fù)葉耳蕨總提取物,其中對人肝癌HepG2細(xì)胞的抑制率最高。在此基礎(chǔ)上,以人肝癌HepG2細(xì)胞為模型,采用Hoechst33258熒光染色法和Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡等方法來進一步研究刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮體外抗腫瘤作用。結(jié)果表明其可通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡從而對HepG2細(xì)胞的生長增殖產(chǎn)生抑制作用。同時,采用流式細(xì)胞術(shù)、免疫印跡實驗等方法對其誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡的機制進行了探討,結(jié)果顯示其能引起細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）的異常升高,線粒體內(nèi)膜電位（MMP）的顯著降低,細(xì)胞色素C （cytochrome c）的大量釋放,抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)顯著下調(diào)、促凋亡蛋白Bax表達(dá)顯著上調(diào),cleaved caspase-9、-3蛋白表達(dá)水平明顯升高,PARP蛋白的表達(dá)水平明顯降低,MAPK信號傳導(dǎo)通路JNK、 P38MAPK發(fā)生磷酸化激活；ROS捕獲劑NAC、特異性P38抑制劑SB203580、特異性JNK抑制劑SP600125均能顯著逆轉(zhuǎn)復(fù)葉耳蕨總黃酮誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)分子事件。結(jié)果表明刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡的過程中,過多生成的ROS氧化應(yīng)激激活JNK和P38MAPK激酶通路,繼而活化caspases級聯(lián)并調(diào)控Bcl-2家族,共同促進細(xì)胞凋亡的發(fā)生。在體內(nèi)抗腫瘤活性的研究中,應(yīng)用HepG2細(xì)胞裸小鼠異位移植瘤模型,通過測定抑瘤率及檢測相關(guān)生化指標(biāo)等方法進一步確認(rèn)了刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮的抗腫瘤作用。進一步通過HE染色,免疫組化、免疫印跡實驗等方法了解其作用機制,結(jié)果顯示刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮抗腫瘤作用可能與其誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤組織血管生成有關(guān)。在以上研究基礎(chǔ)上,初步建立了刺頭復(fù)葉耳蕨藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。對該藥材性狀、鑒別方法、總黃酮含量測定及浸出物等項目進行了規(guī)定。
蔡晶[10]（2012）在《山核桃蒲黃酮類化合物的提取、純化、抗氧化性及鑒別》文中進行了進一步梳理本研究以山核桃蒲為原料，采用超聲波輔助提取其中總黃酮，然后以大孔吸附樹脂對其進行純化，并對得到的總黃酮提取物進行抗氧化性研究，運用HPLC/Q-TOF-MS方法對純化后的總黃酮提取物進行分析。研究結(jié)果如下：（1）采用超聲波輔助提取山核桃蒲總黃酮，以總黃酮得率、純度為考察指標(biāo)，在超聲波功率250W的條件下，對料液比、超聲提取時間、提取溫度和乙醇水溶液的濃度4個因素進行單因素試驗。在單因素試驗的基礎(chǔ)上，選擇對總黃酮得率、純度的影響顯著的3個試驗因素，進行二次通用旋轉(zhuǎn)試驗，得到超聲波輔助提取總黃酮的最佳工藝條件：料液比1:12、溫度72℃、提取時間52min。此條件下總黃酮得率2.19%，純度可達(dá)到16.62%。（2）以最佳工藝條件大量提取山核桃蒲總黃酮，以回收率、純度為考察指標(biāo)，通過4種不同型號的樹脂對山核桃蒲總黃酮靜態(tài)、動態(tài)吸附解吸試驗，確定D101為山核桃蒲總黃酮分離純化的適宜大孔樹脂。 D101型樹脂最佳工藝條件為：上樣液濃度應(yīng)小于9.9mg/mL，上柱總黃酮量與干樹脂之比為1:8，用5BV的70%乙醇水溶液洗脫。山核桃蒲總黃酮回收率在70%以上，純度可達(dá)67%以上。（3）純化后的山核桃蒲總黃酮提取物和VC對DPPH自由基、羥基自由基、超氧陰離子的清除效果以及還原力都與其濃度呈正相關(guān)。山核桃蒲總黃酮提取物對DPPH自由基、羥基自由基的清除效果以及還原力均低于VC，兩者之間的差距隨著濃度的增加而增大。在低濃度時，總黃酮提取物對超氧陰離子的清除能力略強于VC，之后隨著濃度的增加，VC清除能力大于總黃酮提取物。總黃酮提取物對DPPH自由基的IC50為0.039mg/m L，維生素C的IC50為0.035mg/mL?？傸S酮提取物對羥基自由基的IC50為0.309m g/mL，維生素C的IC50為0.172mg/mL?？傸S酮提取物對超氧陰離子的IC50為0.113mg/mL，維生素C的IC50為0.110mg/mL。（4）對純化后的山核桃蒲總黃酮提取物，根據(jù)HPLC/Q-TOF-MS方法對分離出的主要峰進行分析，采用正離子模式，由一級質(zhì)譜得到化合物的準(zhǔn)確分子量，借助masslynx軟件計算出其元素組成。依據(jù)二級質(zhì)譜中的碎片信息，并參考相關(guān)文獻(xiàn)中的數(shù)據(jù)，確定7個主要化合物分別為5-羥基-6，7-二甲氧基黃烷酮、大黃素甲醚、大黃酚、5-羥基-4’，7-二甲氧基黃烷酮、喬松酮、喬松素、7-羥基-2’，4’-二甲氧基黃烷酮。其中，大黃素甲醚和大黃酚屬于蒽醌類，其余5種皆為黃酮。
二、AB-8樹脂分離提取復(fù)葉耳蕨中總黃酮含量的測定（論文開題報告）
（1）論文研究背景及目的
此處內(nèi)容要求：
首先簡單簡介論文所研究問題的基本概念和背景，再而簡單明了地指出論文所要研究解決的具體問題，并提出你的論文準(zhǔn)備的觀點或解決方法。
寫法范例：
本文主要提出一款精簡64位RISC處理器存儲管理單元結(jié)構(gòu)并詳細(xì)分析其設(shè)計過程。在該MMU結(jié)構(gòu)中,TLB采用叁個分離的TLB,TLB采用基于內(nèi)容查找的相聯(lián)存儲器并行查找,支持粗粒度為64KB和細(xì)粒度為4KB兩種頁面大小,采用多級分層頁表結(jié)構(gòu)映射地址空間,并詳細(xì)論述了四級頁表轉(zhuǎn)換過程,TLB結(jié)構(gòu)組織等。該MMU結(jié)構(gòu)將作為該處理器存儲系統(tǒng)實現(xiàn)的一個重要組成部分。
（2）本文研究方法
調(diào)查法：該方法是有目的、有系統(tǒng)的搜集有關(guān)研究對象的具體信息。
觀察法：用自己的感官和輔助工具直接觀察研究對象從而得到有關(guān)信息。
實驗法：通過主支變革、控制研究對象來發(fā)現(xiàn)與確認(rèn)事物間的因果關(guān)系。
文獻(xiàn)研究法：通過調(diào)查文獻(xiàn)來獲得資料，從而全面的、正確的了解掌握研究方法。
實證研究法：依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)理論和實踐的需要提出設(shè)計。
定性分析法：對研究對象進行“質(zhì)”的方面的研究，這個方法需要計算的數(shù)據(jù)較少。
定量分析法：通過具體的數(shù)字，使人們對研究對象的認(rèn)識進一步精確化。
跨學(xué)科研究法：運用多學(xué)科的理論、方法和成果從整體上對某一課題進行研究。
功能分析法：這是社會科學(xué)用來分析社會現(xiàn)象的一種方法，從某一功能出發(fā)研究多個方面的影響。
模擬法：通過創(chuàng)設(shè)一個與原型相似的模型來間接研究原型某種特性的一種形容方法。
三、AB-8樹脂分離提取復(fù)葉耳蕨中總黃酮含量的測定（論文提綱范文）
（1）采收期和遮蔭對有柄石韋藥材質(zhì)量的影響研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 前言 |
| 1.1 藥用蕨類植物概述 |
| 1.1.1 藥用蕨類植物的資源及利用情況 |
| 1.1.2 藥用蕨類植物的化學(xué)成分及藥理活性 |
| 1.1.3 藥用蕨類植物的繁育與栽培 |
| 1.1.4 遮蔭對藥用蕨類植物的影響 |
| 1.1.5 藥用蕨類植物藥材質(zhì)量與采收期的關(guān)系 |
| 1.2 石韋屬植物研究進展 |
| 1.2.1 石韋屬植物簡介 |
| 1.2.2 石韋屬植物的活性成分與藥理作用 |
| 1.2.3 有柄石韋藥材質(zhì)量的影響因素研究 |
| 1.3 研究目的與意義 |
| 1.4 技術(shù)路線 |
| 2 材料與方法 |
| 2.1 材料與試劑 |
| 2.1.1 試驗材料 |
| 2.1.2 試驗儀器 |
| 2.1.3 主要試劑 |
| 2.2 試驗設(shè)計 |
| 2.2.1 采集樣品的研究設(shè)計 |
| 2.2.2 遮蔭試驗研究設(shè)計 |
| 2.3 試驗方法 |
| 2.3.1 有柄石韋生長指標(biāo)的測定 |
| 2.3.2 有柄石韋光合特性的測定 |
| 2.3.3 有柄石韋樣品提取物的制備 |
| 2.3.4 總黃酮含量的測定 |
| 2.3.5 總酚含量的測定 |
| 2.3.6 綠原酸和新綠原酸含量的測定 |
| 2.3.7 抗氧化活性測定 |
| 2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 |
| 3 結(jié)果與分析 |
| 3.1 采收期對有柄石韋活性成分含量的影響 |
| 3.1.1 提取物得率 |
| 3.1.2 總黃酮含量 |
| 3.1.3 總酚含量 |
| 3.1.4 綠原酸和新綠原酸 |
| 3.2 采收期對有柄石韋抗氧化活性的影響 |
| 3.2.1 DPPH自由基清除能力 |
| 3.2.2 ABTS自由基清除能力 |
| 3.2.3 總抗氧化能力 |
| 3.2.4 不同采收期有柄石韋活性成分與抗氧化活性的相關(guān)性 |
| 3.2.5 不同采收期有柄石韋活性成分與氣候因子的相關(guān)性 |
| 3.3 遮蔭對有柄石韋生長的影響 |
| 3.3.1 生長速率 |
| 3.3.2 農(nóng)藝性狀 |
| 3.4 遮蔭對有柄石韋光合特性的影響 |
| 3.4.1 葉片葉綠素含量 |
| 3.4.2 葉片光合參數(shù) |
| 3.4.3 葉綠素?zé)晒鈪?shù) |
| 3.5 遮蔭對有柄石韋活性成分含量的影響 |
| 3.5.1 提取物得率 |
| 3.5.2 總黃酮含量 |
| 3.5.3 總酚含量 |
| 3.5.4 綠原酸和新綠原酸含量 |
| 3.6 遮蔭對有柄石韋抗氧化活性的影響 |
| 3.6.1 DPPH自由基清除能力 |
| 3.6.2 ABTS自由基清除能力 |
| 3.6.3 總抗氧化能力 |
| 3.6.4 遮蔭下有柄石韋活性成分與抗氧化活性的相關(guān)性 |
| 4 討論 |
| 4.1 有柄石韋活性成分含量及其抗氧化活性的季節(jié)性變化 |
| 4.2 遮蔭對有柄石韋生長和光合特性的影響 |
| 4.3 遮蔭對有柄石韋活性成分含量的影響 |
| 4.4 綜合分析 |
| 5 結(jié)論與展望 |
| 5.1 結(jié)論 |
| 5.2 研究創(chuàng)新點 |
| 5.3 展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀學(xué)位期間科研、學(xué)術(shù)活動和論文發(fā)表情況 |
（2）黑果枸杞總黃酮分離純化及其降脂、抗肝癌活性初步研究（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究內(nèi)容與方法 |
| 1.Box-Behnken設(shè)計響應(yīng)面法優(yōu)化黑果枸杞總黃酮純化工藝 |
| 1.1 儀器與材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 結(jié)果 |
| 1.4 討論 |
| 2.黑果枸杞中總黃酮的降脂活性研究 |
| 2.1 儀器與試藥 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 結(jié)果 |
| 2.4 討論 |
| 3.黑果枸杞總黃酮的體外抗肝癌作用研究 |
| 3.1 儀器與試劑 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 結(jié)果 |
| 3.4 討論 |
| 小結(jié) |
| 致謝 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文 |
| 導(dǎo)師評閱表 |
（3）超聲波微波協(xié)同提取金柚幼果黃酮及其抗氧化機理（論文提綱范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 金柚幼果概況 |
| 1.1.1 金柚的簡介 |
| 1.1.2 金柚幼果的產(chǎn)生與利用情況 |
| 1.1.3 金柚幼果的研究現(xiàn)狀 |
| 1.2 黃酮概述 |
| 1.2.1 黃酮類物質(zhì)的提取技術(shù) |
| 1.2.2 柚黃酮功效的研究進展 |
| 1.3 黃酮類物質(zhì)的抗氧化活性 |
| 1.3.1 黃酮類物質(zhì)抗氧化活性機理 |
| 1.3.2 抗氧化活性評價方法 |
| 1.3.3 抗氧化活性的應(yīng)用 |
| 1.4 研究意義與內(nèi)容 |
| 1.5 研究思路 |
| 1.6 創(chuàng)新點 |
| 2 超聲-微波協(xié)同提取金柚幼果黃酮工藝優(yōu)化 |
| 2.1 材料與設(shè)備 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 主要試劑 |
| 2.1.3 主要儀器 |
| 2.2 實驗方法 |
| 2.2.1 提取工藝 |
| 2.2.2 橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 |
| 2.2.3 樣品的測定 |
| 2.2.4 單因素試驗 |
| 2.2.5 響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝 |
| 2.2.6 總黃酮得率的計算 |
| 2.2.7 數(shù)據(jù)分析 |
| 2.3 結(jié)果與分析 |
| 2.3.1 橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 |
| 2.3.2 單因素試驗 |
| 2.3.3 響應(yīng)面試驗優(yōu)化提取工藝 |
| 2.4 本章小結(jié) |
| 3 輔助提取方法的差異與其抗氧化活性初探 |
| 3.1 材料與設(shè)備 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 主要試劑 |
| 3.1.3 主要儀器 |
| 3.2 實驗方法 |
| 3.2.1 不同輔助提取方法的參數(shù)設(shè)置 |
| 3.2.2 總黃酮的測定 |
| 3.2.3 掃描電鏡分析 |
| 3.2.4 液相色譜-質(zhì)譜法分析黃酮類化合物的成分 |
| 3.2.5 不同輔助提取方法黃酮類物質(zhì)對抗氧化活性的影響 |
| 3.2.6 紅細(xì)胞溶血率的測定 |
| 3.2.7 數(shù)據(jù)分析 |
| 3.3 實驗結(jié)果 |
| 3.3.1 輔助提取方法對總黃酮得率的影響 |
| 3.3.2 輔助提取方法對提取金柚幼果總黃酮作用分析 |
| 3.3.3 不同輔助提取方法對黃酮類化合物的分析 |
| 3.3.4 不同處理方法所得黃酮類化合物成分差異分析 |
| 3.3.5 不同處理方法聚類分析結(jié)果 |
| 3.4 不同提取方法對自由基清除能力 |
| 3.5 不同處理組紅細(xì)胞溶血的保護作用 |
| 3.6 本章小結(jié) |
| 4 金柚幼果黃酮類提取物的抗氧化機理探究 |
| 4.1 材料與設(shè)備 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 主要試劑 |
| 4.1.3 主要儀器 |
| 4.2 實驗方法 |
| 4.2.1 分離純化 |
| 4.2.2 液相色譜-質(zhì)譜法分析黃酮類化合物的成分 |
| 4.2.3 紅細(xì)胞溶血率的測定 |
| 4.2.4 抗氧化機理的研究 |
| 4.2.5 數(shù)據(jù)分析 |
| 4.3 實驗結(jié)果 |
| 4.3.1 分離純化結(jié)果 |
| 4.3.2 CF的黃酮類化合物的分析 |
| 4.3.3 CF對紅細(xì)胞溶血的保護作用 |
| 4.3.4 CF對脂質(zhì)過氧化的抑制作用和對細(xì)胞膜的保護作用的驗證 |
| 4.3.5 CF對非酶促抗氧化體系的影響 |
| 4.3.6 CF對酶促抗氧化體系的影響 |
| 4.3.7 CF抑制紅細(xì)胞溶血機理推測 |
| 4.4 本章小結(jié) |
| 5 結(jié)論與展望 |
| 5.1 結(jié)論 |
| 5.2 展望 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果 |
| 附件 |
（4）不同中藥總黃酮含量測定方法的選擇研究（論文提綱范文）
| 1 材料與方法 |
| 1.1 試劑與材料 |
| 1.2 實驗方法 |
| 1.2.1 中草藥樣品總黃酮的提取方法 |
| 1.2.2 測定的方法 |
| 2 結(jié)果與討論 |
| 2.1 直接測定法結(jié)果分析 |
| 2.2 Na NO2-Al (NO3) 3-Na OH顯色法測定結(jié)果分析 |
| 2.3 Al Cl3顯色法的測定結(jié)果分析 |
| 2.4 示差分光光度法測定結(jié)果分析 |
| 2.5 熒光分光光度法測定測定結(jié)果分析 |
| 3 結(jié)論 |
（5）植物黃酮類化合物的研究進展（論文提綱范文）
| 1 黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)類型和理化性質(zhì) |
| 1.1 黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)類型 |
| 1.2 黃酮類化合物的理化性質(zhì) |
| 2 黃酮類化合物的藥理學(xué)活性 |
| 2.1 抗菌、抗病毒活性 |
| 2.2 抗癌、抗腫瘤活性 |
| 2.3 抗氧化自由基活性 |
| 2.4 抗心腦血管疾病活性 |
| 2.5 抗骨質(zhì)疏松活性 |
| 2.6 抗輻射活性 |
| 3 黃酮類化合物的分離提純與鑒定 |
| 3.1 提取方法 |
| 3.1.1 溶劑提取法 |
| 3.1.2 超聲輔助提取法 |
| 3.1.3 超臨界流體萃取法 |
| 3.1.4酶解法 |
| 3.1.5 其他方法 |
| 3.2 純化方法 |
| 3.2.1 柱層析法 |
| 3.2.2 高速逆流色譜法 |
| 3.2.3 膜分離法 |
| 3.3 鑒定方法 |
| 3.3.1 化學(xué)方法 |
| 3.3.2 物理方法 |
| 4 生產(chǎn)工藝中存在的主要問題及解決方法 |
| 4.1 化學(xué)合成法 |
| 4.2 生物轉(zhuǎn)化法 |
| 5 展望 |
（7）復(fù)葉耳蕨渣總黃酮轉(zhuǎn)化提取與DPPH自由基清除活性的研究（論文提綱范文）
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料與儀器 |
| 1.2 實驗方法 |
| 1.2.1 土壤真菌分離和純化培養(yǎng) |
| 1.2.2 單克隆真菌發(fā)酵復(fù)葉耳蕨渣 |
| 1.2.3 不同土壤真菌復(fù)葉耳蕨渣發(fā)酵前后總黃酮的提取 |
| 1.2.4 總黃酮的得率測定 |
| 1.2.5 單因素實驗 |
| 1.2.6 正交實驗設(shè)計 |
| 1.2.7 DPPH自由基清除測定 |
| 2 結(jié)果與分析 |
| 2.1 復(fù)葉耳蕨渣篩選土壤真菌生長形態(tài) |
| 2.2 不同土壤真菌復(fù)葉耳蕨渣發(fā)酵前后總黃酮得率 |
| 2.3 發(fā)酵時間對總黃酮得率的影響 |
| 2.4 p H對F2發(fā)酵前后藥渣總黃酮得率的影響 |
| 2.5 料液比對F2發(fā)酵前后復(fù)葉耳蕨渣總黃酮得率的影響 |
| 2.6 乙醇濃度對F2發(fā)酵前后渣總黃酮得率的影響 |
| 2.7 超聲時間對F2發(fā)酵前后渣總黃酮得率的影響 |
| 2.8 復(fù)葉耳蕨渣F2發(fā)酵前后總黃酮提取正交優(yōu)化 |
| 2.9 復(fù)葉耳蕨渣F2發(fā)酵前后總黃酮提取驗證實驗 |
| 2.1 0 復(fù)葉耳蕨渣F2發(fā)酵前后總黃酮對DPPH自由基的清除效果 |
| 3 結(jié)論 |
（8）萊菔化學(xué)成分和牡丹花提取物制備工藝及質(zhì)量控制方法研究（論文提綱范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| ABBREVIATION |
| 第一章 文獻(xiàn)綜述 |
| 1 萊菔的植物學(xué)研究 |
| 1.1 基原 |
| 1.2 原植物形態(tài) |
| 2 萊菔的中醫(yī)藥論述 |
| 3 萊菔的食療論述 |
| 4 萊菔的化學(xué)成分研究 |
| 4.1 天然有機硫化合物 |
| 4.2 酚酸類成分 |
| 4.3 微量元素 |
| 4.4 其他成分 |
| 5 萊菔的藥理活性研究 |
| 5.1 抗癌作用的研究 |
| 5.2 抗氧化活性研究 |
| 6 小結(jié)與討論 |
| 前言 |
| 第二章 萊菔化學(xué)成分分離與鑒定 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第三章 萊菔鮮根精油成分GC-MS分析 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 萊菔精油的提取 |
| 1.2.2 GC-MS色譜分析條件 |
| 2 結(jié)果 |
| 3 討論 |
| 第四章 牡丹花的文獻(xiàn)綜述 |
| 1 牡丹花的化學(xué)成分研究進展 |
| 1.1 黃酮類成分 |
| 1.2 揮發(fā)油 |
| 1.3 營養(yǎng)成分 |
| 2 中藥總黃酮的提取方法研究進展 |
| 2.1 有機溶劑提取法 |
| 2.2 超聲波提取法 |
| 2.3 微波輔助提取 |
| 2.4 酶法提取總黃酮 |
| 2.5 其他方法 |
| 3 中藥總黃酮測定方法的研究進展 |
| 3.1 金屬離子絡(luò)合法 |
| 3.1.1 黃酮-Al(NO_3)-NaNO_2-NaOH絡(luò)合法 |
| 3.1.2 黃酮-AlCl_3絡(luò)合法 |
| 3.2 高效液相色譜法 |
| 3.3 熒光分光光度法 |
| 3.4 毛細(xì)管電泳法 |
| 3.5 薄層掃描法 |
| 3.6 其他方法 |
| 3.7 小結(jié)與討論 |
| 4 牡丹花的綜合利用價值與前景 |
| 4.1 牡丹花的綜合利用價值 |
| 4.1.1 藥用價值 |
| 4.1.2 食用價值 |
| 4.1.3 觀賞價值 |
| 4.2 牡丹花的開發(fā)利用前景 |
| 4.2.1 牡丹花精油 |
| 4.2.2 牡丹花茶 |
| 4.2.3 牡丹花酒 |
| 4.2.4 牡丹花飲料 |
| 4.2.5 牡丹花糕點 |
| 5 小結(jié)與討論 |
| 第五章 牡丹花瓣的醇提取工藝研究 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 AlCl3-CH3OOK-絡(luò)合法測定總黃酮含量方法的建立 |
| 1.2.2 保健食品中總黃酮的方法測定 |
| 1.2.3 對照品法測定花青素含量 |
| 1.2.4 PH示差法測定花青素含量 |
| 1.2.5 單因素實驗 |
| 1.2.6 總黃酮和花青素的提取工藝正交試驗 |
| 1.2.7 牡丹花花瓣中的矢車菊素-3-O-葡萄糖苷的含量測定 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 AlCl3-CH3OOK-絡(luò)合法測定總黃酮含量方法結(jié)果分析 |
| 2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 |
| 2.1.2 精密度的測定 |
| 2.1.3 穩(wěn)定性的測定 |
| 2.1.4 重復(fù)性的測定 |
| 2.1.5 加樣回收率 |
| 2.2 保健食品中總黃酮的方法測定結(jié)果分析 |
| 2.2.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 |
| 2.3 對照品法測定花青素含量 |
| 2.3.1 檢測波長的確定 |
| 2.3.2 回歸方程的建立 |
| 2.3.3 精密度的測定 |
| 2.3.4 穩(wěn)定性的測定 |
| 2.3.5 重復(fù)性的測定 |
| 2.3.6 加樣回收率 |
| 2.4 PH示差法測定花青素含量結(jié)果分析 |
| 2.4.1 平衡時間的確定 |
| 2.5 單因素實驗 |
| 2.5.1 提取方法的選擇 |
| 2.5.2 提取溶媒的選擇 |
| 2.5.3 提取時間的選擇 |
| 2.5.4 料液比的選擇 |
| 2.5.5 超聲頻率的選擇 |
| 2.6 總黃酮和花青素的提取工藝正交試驗結(jié)果分析 |
| 2.6.1 以總黃酮為指標(biāo)各個因素結(jié)果 |
| 2.6.2 總黃酮提取工藝的選擇 |
| 2.6.3 以花青素為指標(biāo)的測定結(jié)果 |
| 2.6.4 花青素提取工藝的選擇 |
| 2.7 牡丹花花瓣的提取工藝驗證 |
| 2.8 牡丹花瓣總黃酮和花青素含量的測定 |
| 2.9 牡丹花花瓣中的矢車菊素-3-O-葡萄糖苷的含量測定結(jié)果分析 |
| 2.9.1 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗 |
| 2.9.2 線性關(guān)系考察 |
| 2.9.3 精密度試驗 |
| 2.9.4 穩(wěn)定性試驗 |
| 2.9.5 重復(fù)性試驗 |
| 2.9.6 加樣回收率的測定 |
| 2.9.7 矢車菊素-3-O-葡萄糖苷含量的測定 |
| 3 討論 |
| 第六章 牡丹花精油的工藝研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 牡丹花精油提取工藝單因素實驗 |
| 1.2.2 正交試驗設(shè)計優(yōu)化提取工藝 |
| 1.2.3 牡丹花精油產(chǎn)品的純化工藝研究 |
| 1.2.4 精油純化正交試驗 |
| 1.2.5 GC-MS分析牡丹花鮮花和提取液的精油成分 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 牡丹花精油提取工藝單因素實驗 |
| 2.1.1 提取溶劑的考察 |
| 2.1.2 粉碎時間的考察 |
| 2.1.3 液料比的考察 |
| 2.1.4 超時時間的考察 |
| 2.2 正交試驗結(jié)果分析 |
| 2.2.1 正交試驗優(yōu)選牡丹花精油提取工藝 |
| 2.3 牡丹花精油的純化工藝研究 |
| 2.3.1 生物學(xué)方法 |
| 2.3.2 物理學(xué)方法 |
| 2.3.3 有機溶劑方法 |
| 2.3.4 有機溶劑法精油純化正交試驗結(jié)果 |
| 2.3.5 GC-MS分析牡丹花鮮花和提取液的精油成分 |
| 3 討論 |
| 第七章 牡丹花提取物穩(wěn)定性研究及牡丹花灰分和水分測定 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 牡丹花提取物穩(wěn)定性研究 |
| 1.2.2 牡丹花灰分和水分的測定 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 牡丹花提取物穩(wěn)定性研究 |
| 2.1.1 溫度對牡丹花提取物穩(wěn)定性的影響 |
| 2.1.2 光照對牡丹花提取物的穩(wěn)定性影響 |
| 2.1.3 空氣、氧化劑和還原劑對牡丹花提取物穩(wěn)定性影響 |
| 2.1.4 金屬離子對牡丹花提取物穩(wěn)定性的影響 |
| 2.2 牡丹花灰分和水分的測定 |
| 2.2.1 牡丹花原料灰分測定 |
| 2.2.2 四種品種的灰分測定結(jié)果 |
| 2.3 牡丹花水分的測定 |
| 3 討論 |
| 第八章 牡丹花提取物的質(zhì)量控制方法研究 |
| 1 材料與方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 結(jié)果 |
| 2.1 牡丹花提取物質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究 |
| 2.1.1 性狀 |
| 2.1.2 水分檢查 |
| 2.1.3 灰分檢查 |
| 2.1.4 總黃酮和花青素的方法檢查 |
| 2.1.5 矢車菊素-3-葡萄糖苷的HPLC含量測方法 |
| 2.1.6 貯藏 |
| 3 結(jié)果 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個人簡歷 |
| 附圖 |
（9）刺頭復(fù)葉耳蕨的藥學(xué)及其抗腫瘤作用機制研究（論文提綱范文）
| 英文縮略語詞匯表 |
| 中文摘耍 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 刺頭復(fù)葉耳蕨生藥學(xué)研究 |
| 第一節(jié) 刺頭復(fù)葉耳蕨生藥鑒定學(xué)研究 |
| 1 材料與儀器 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 刺頭復(fù)葉耳蕨基源鑒定 |
| 2.2 刺頭復(fù)葉耳蕨性狀鑒定 |
| 2.3 刺頭復(fù)葉耳蕨顯微鑒定 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 基源鑒定 |
| 3.2 性狀鑒定 |
| 3.3 顯微鑒別 |
| 4 結(jié)論 |
| 第二節(jié) 刺頭復(fù)葉耳蕨化學(xué)成份系統(tǒng)預(yù)試 |
| 1 材料與儀器 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 樣品準(zhǔn)備 |
| 2.2 試管濾紙片預(yù)試法 |
| 2.3 薄層色譜(TLC)鑒別成份類別 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 化學(xué)成分預(yù)試結(jié)果 |
| 3.2 TLC實驗結(jié)果 |
| 4 結(jié)論 |
| 第三節(jié) 刺頭復(fù)葉耳蕨的紫外-可見吸收光譜特征研究 |
| 1 材料與儀器 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 樣品溶液的制備 |
| 2.2 紫外-可見吸收光譜范圍的考察 |
| 2.3 穩(wěn)定性考察 |
| 2.4 重復(fù)性考察 |
| 2.5 樣品測定 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 紫外-可見吸收光譜范圍 |
| 3.2 穩(wěn)定性 |
| 3.3 重復(fù)性 |
| 3.4 刺頭復(fù)葉耳蕨不同提取部位的測定 |
| 4 結(jié)論 |
| 第二部分 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮的提取及純化條件優(yōu)化 |
| 第一節(jié) 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮含量測定方法的建立 |
| 1 材料及儀器 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 儀器 |
| 2 測定方法及方法學(xué)考察 |
| 2.1 對照品溶液的制備 |
| 2.2 供試品溶液的制備 |
| 2.3 測定波長的選取 |
| 2.4 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 |
| 2.5 精密度實驗 |
| 2.6 穩(wěn)定性實驗 |
| 2.7 重復(fù)性實驗 |
| 2.8 加樣回收率實驗 |
| 2.9 刺頭復(fù)葉耳蕨樣品中總黃酮的含量測定 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 測定波長的選擇 |
| 3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 |
| 3.3 精密度 |
| 3.4 顯色穩(wěn)定性 |
| 3.5 重復(fù)性 |
| 3.6 回收率 |
| 3.7 含量測定 |
| 4 結(jié)論 |
| 第二節(jié) 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮提取工藝的優(yōu)化 |
| 1 材料及儀器 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 單因素試驗 |
| 2.2 正交實驗 |
| 2.3 驗證實驗 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 乙醇濃度對總黃酮得率的影響 |
| 3.2 提取次數(shù)對總黃酮得率的影響 |
| 3.3 提取時間對總黃酮得率的影響 |
| 3.4 固液比對總黃酮得率的影響 |
| 3.5 超聲功率對總黃酮得率的影響 |
| 3.6 正交實驗結(jié)果 |
| 3.7 驗證試驗結(jié)果 |
| 4 討論 |
| 第三節(jié) 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮純化工藝的優(yōu)化 |
| 1 材料及儀器 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 刺頭復(fù)葉耳蕨總提取物溶液的制備 |
| 2.2 聚酰胺的預(yù)處理 |
| 2.3 清洗終點及洗脫終點的判斷 |
| 2.4 聚酰胺純化條件的選擇 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 上樣液pH值選擇 |
| 3.2 上樣液濃度選擇 |
| 3.3 洗脫溶劑選擇 |
| 3.4 泄露曲線的考察 |
| 3.5 洗脫流速選擇 |
| 3.6 工藝驗證試驗 |
| 4 結(jié)論 |
| 第三部分 刺頭復(fù)葉耳蕨抗腫瘤活性的研究 |
| 第一節(jié) 刺頭復(fù)葉耳蕨總提取物與總黃酮體外抗腫瘤活性的比較 |
| 1 材料及儀器 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 樣品的配制 |
| 2.2 細(xì)胞培養(yǎng) |
| 2.3 藥物干擾細(xì)胞生長及形態(tài)觀察 |
| 2.4 CCK-8法檢測藥物對細(xì)胞的抑制率 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 細(xì)胞生長及形態(tài)學(xué)觀察 |
| 3.2 CCK-8法細(xì)胞增殖活力檢測 |
| 4 討論 |
| 第二節(jié) 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮體外抗肝癌活性的研究 |
| 1 材料與儀器 |
| 1.1 試劑 |
| 1.2 儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 細(xì)胞培養(yǎng) |
| 2.2 樣品溶液的配制 |
| 2.3 細(xì)胞增殖活力檢測 |
| 2.4 流式細(xì)胞儀Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡 |
| 2.5 Hoechst33258熒光染色法觀察細(xì)胞凋亡形態(tài) |
| 2.6 活性氧自由基的測定 |
| 2.7 流式細(xì)胞儀檢測線粒體膜電位 |
| 2.8 免疫印跡法檢測凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá) |
| 2.9 統(tǒng)計學(xué)方法 |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮對細(xì)胞增殖活力的影響 |
| 3.2 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮對細(xì)胞凋亡的影響 |
| 3.3 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮對細(xì)胞內(nèi)ROS的影響 |
| 3.4 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮對細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位的影響 |
| 3.5 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮對凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響 |
| 4 討論 |
| 第三節(jié) 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮對肝癌HepG2移植瘤裸鼠的體內(nèi)抗腫瘤作用 |
| 1 材料及儀器 |
| 1.1 藥品和試劑 |
| 1.2 實驗動物 |
| 1.3 主要儀器 |
| 2 方法 |
| 2.1 樣品配制 |
| 2.2 動物腫瘤模型的制備 |
| 2.3 分組給藥 |
| 2.4 評價指標(biāo) |
| 2.5 相關(guān)病理檢測 |
| 2.6 Western Blotting檢測腫瘤組織中部分凋亡相關(guān)蛋白表達(dá) |
| 3 結(jié)果 |
| 3.1 實驗動物一般狀況的觀察 |
| 3.2 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮抑制肝癌模型裸鼠腫瘤的生長 |
| 3.3 刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮對肝癌模型裸鼠血液及肝腎功能的影響 |
| 3.4 腫瘤組織形態(tài)學(xué)觀察 |
| 3.5 免疫組織化學(xué)法檢測 |
| 3.6 Western Blot法對腫瘤組織中凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的檢測 |
| 4 討論 |
| 第四部分 刺頭復(fù)葉耳蕨藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定 |
| 1 材料與儀器 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 儀器 |
| 2 方法與結(jié)果 |
| 2.1 性狀觀察 |
| 2.2 鑒別 |
| 2.3 檢查 |
| 2.4 含量測定 |
| 3 討論 |
| 全文小結(jié) |
| 參考文獻(xiàn) |
| 綜述 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 博士研究生期間獲得的成果 |
| 致謝 |
（10）山核桃蒲黃酮類化合物的提取、純化、抗氧化性及鑒別（論文提綱范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 目錄 |
| 1 文獻(xiàn)綜述 |
| 1.1 山核桃蒲的的概況和開發(fā)利用 |
| 1.1.1 山核桃蒲的化學(xué)成分 |
| 1.1.2 山核桃蒲的藥用價值 |
| 1.1.3 山核桃蒲在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用 |
| 1.1.4 山核桃蒲在食品添加劑、染料工業(yè)上的應(yīng)用 |
| 1.2 黃酮類化合物的研究概況 |
| 1.2.1 黃酮類化合物的性質(zhì) |
| 1.2.2 黃酮類化合物的結(jié)構(gòu) |
| 1.2.3 質(zhì)譜技術(shù)在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用 |
| 1.2.4 黃酮類化合物的分離提取工藝 |
| 2 引言 |
| 3 試驗材料與方法 |
| 3.1 材料試劑及儀器 |
| 3.1.1 植物樣品 |
| 3.1.2 主要儀器與試劑 |
| 3.2 技術(shù)路線 |
| 3.2.1 山核桃蒲中主要成分的技術(shù)路線 |
| 3.2.2 提取及純化的技術(shù)路線 |
| 3.2.3 抗氧化性的技術(shù)路線 |
| 3.2.4 黃酮鑒別的技術(shù)路線 |
| 3.3 試驗方法 |
| 3.3.1 主要成分含量的測定 |
| 3.3.2 黃酮的提取 |
| 3.3.3 黃酮的純化 |
| 3.3.4 黃酮的抗氧化性 |
| 3.3.5 黃酮的鑒別 |
| 4 結(jié)果與分析 |
| 4.1 山核桃蒲中主要成分含量的測定 |
| 4.2 黃酮的提取 |
| 4.2.1 黃酮含量測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線 |
| 4.2.2 單因素試驗 |
| 4.2.3 二次通用旋轉(zhuǎn)組合試驗 |
| 4.2.4 效應(yīng)分析 |
| 4.2.5 頻率分析 |
| 4.3 黃酮的純化 |
| 4.3.1 樹脂的篩選 |
| 4.3.2 吸附等溫線 |
| 4.3.3 上樣量的影響 |
| 4.3.4 乙醇濃度的影響 |
| 4.3.5 乙醇體積的影響 |
| 4.4 黃酮的抗氧化性 |
| 4.4.1 清除 DPPH 自由基能力的測定 |
| 4.4.2 還原力的測定 |
| 4.4.3 清除羥基自由基能力的測定 |
| 4.4.4 清除超氧陰離子能力的測定 |
| 4.5 黃酮的鑒別 |
| 4.5.1 黃酮類化合物的裂解 |
| 4.5.2 山核桃蒲總黃酮提取物的鑒別 |
| 5 討論與結(jié)論 |
| 5.1 討論 |
| 5.2 結(jié)論 |
| 參考文獻(xiàn) |
| 致謝 |
| 個人簡介 |
四、AB-8樹脂分離提取復(fù)葉耳蕨中總黃酮含量的測定（論文參考文獻(xiàn)）
- [1]采收期和遮蔭對有柄石韋藥材質(zhì)量的影響研究[D]. 吳飄. 廣西大學(xué), 2021
- [2]黑果枸杞總黃酮分離純化及其降脂、抗肝癌活性初步研究[D]. 艾克山·吾拉木. 新疆醫(yī)科大學(xué), 2020(07)
- [3]超聲波微波協(xié)同提取金柚幼果黃酮及其抗氧化機理[D]. 羅潔瑩. 仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院, 2019(07)
- [4]不同中藥總黃酮含量測定方法的選擇研究[J]. 張敏,李志英. 海南師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版), 2017(03)
- [5]植物黃酮類化合物的研究進展[J]. 劉一杰,薛永常. 中國生物工程雜志, 2016(09)
- [6]聚酰胺純化刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮的研究[J]. 李輝敏. 衛(wèi)生職業(yè)教育, 2015(09)
- [7]復(fù)葉耳蕨渣總黃酮轉(zhuǎn)化提取與DPPH自由基清除活性的研究[J]. 張義平,胡月萍,鄔亞華,孫維君,周許峰,曹俊,王麗麗,殷嫦嫦. 食品工業(yè)科技, 2015(11)
- [8]萊菔化學(xué)成分和牡丹花提取物制備工藝及質(zhì)量控制方法研究[D]. 余輝攀. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2014(04)
- [9]刺頭復(fù)葉耳蕨的藥學(xué)及其抗腫瘤作用機制研究[D]. 李輝敏. 華中科技大學(xué), 2014(07)
- [10]山核桃蒲黃酮類化合物的提取、純化、抗氧化性及鑒別[D]. 蔡晶. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué), 2012(07)